PEMBAHASAN PEMERIKSAAN TPHA

(Treponema pallidum Haemaglutination Assay)Pemeriksaan TPHA (Treponema pallidum Hemagglutination Assay)Treponema pallidum Hemagglutination Assay (TPHA) merupakan suatu pemeriksaan serologi untuk sifilis. Untuk skirining penyakit sipilis biasanya menggunakan pemeriksaan VDRL atau RPR apabila hasil reaktif kemudian dilanjutkan dengan pemeriksaan TPHA sebagai konfirmasi.Selain itu TPHA merupakan tes yang sangat spesifik untuk melihat apakah adanya antibodi terhadap treponema. Jika di dalam tubuh terdapat bakteri ini, maka hasil tes positif. Tes ini akan menjadi negatif setelah 6 - 24 bulan setelah pengobatan. Bakteri-bakteri yang lain selain keluarga treponema tidak dapat membuat hasil tes ini menjadi positif.Manfaat Pemeriksaan TPHA ini adalah sebagai pemeriksaan konfirmasi untuk penyakit sipilis dan mendeteksi respon serologis spesifik untuk Treponema pallidum pada tahap lanjut/akhir sipilis. (Prodia,tt)Pada praktikum ini, dilakukan pemeriksaan TPHA pada serum dengan kode (). Pemeriksaan dilakukan dengan dua tahap, yaitu pemeriksaan kualitatif dan semi-kuantitatif. Apabila pemeriksaan pada tahap kualitatif dinyatakan positif barulah selanjutnya dilaksanakan pemeriksaan semi-kuantitatif.Adapun prinsip dari pemeriksaan TPHA yang dilakukan ini yaitu: Reaksi Hemaglutinasi secara imunologis antara eritrosit avian yang dilapisi oleh antigen Treponema pallidum (Nichols strain) pada reagen dengan antibodi spesifik terhadap Treponema pallidum pada sampel serum/plasma pasien.

Berdasarkan pada hasil pengamatan yang diperoleh, didapatkan hasil pemeriksaan secara kualitatif pada serum pasien adalah negative, dan hasil ini dinyatakan valid dimana berdasarkan hasil pada sumur 2,4, dan 6 yang masing-masing berisi sampel serum, control positif, dan control negative, setelah penambahan reagen control cell diperoleh hasil yang negetif ditunjukkan dengan adanya pengendapan sel pada dasar sumur seperti titik. Sedangkan hasil negative dinyatakan dimana hasil yang diperoleh pada sumur 1 yang berisi sampel serum dan reagen test cell serupa dengan hasil yang diperoleh pada sumur 5 yaitu control negative ditunjukkan dengan adanya pengendapan sel pada dasar sumur seperti titik.Setelah diketahui hasil tersebut pemeriksaan tidak dilakukan secara semi-kuantitatif, namun pada praktikum ini tetap dilakukan pemeriksaan ini untuk memastikan hasil sampel yang diperiksa. Namun tetap menunjukkan Reaksi negatif ditunjukkan dengan adanya pengendapan sel pada dasar sumur seperti titik. Sehingga dapat dipastikan sampel serum yang diperiksa memang benar negative atau tidak mengandung antibodi spesifik terhadap Treponema pallidum .Pada pemeriksaan TPHA ini, adapun kelebihan dan kelemahannya, diantaranya: Kelemahan pemeriksaan TPHA :

1. Kurang sensitif bila digunakan sebagai skrining (tahap awal/primer) sipilis.2. Pada saat pengerjaan diperlukan ketrampilan dan ketelitian yang tinggi.

3. Tidak dapat dipakai untuk menilai hasil terapi, karena tetap reaktif dalam waktu yang lama. Kelebihan pemeriksaan TPHA :

1. Teknis dan pembacaan hasilnya mudah2. Memiliki spesifisitas tinggi untuk mendeteksi adanya antibodi treponemal dan sensitivitas yang tinggi dimana kadar minimum antibodi treponemal yang dapat dideteksi adalah 0,05 IU/ml.

3. Hasil reaktif/positif dapat diperoleh lebih dini.

Hal-hal yang perlu diperhatikan

1. Semua komponen harus disuhu ruangkan terlebih dahulu sebelum digunakan.

2. Selalu perhatikan e.d reagen.

3. Suhu penyimpanan reagen adalah 2-80C dan tidak boleh dibekukan.

4. Sampel yang digunakan adalah sampel serum/plasma yang bebas dari sel darah, kontaminasi mikroba, tidak hemolisis dan tidak lipemik/ikterik.

5. Selalu menyertakan control positif dan control negative.

6. Proses penghomogenan harus dilakukan dengan tepat.

7. Ketepatan volume pemipetan sampel dan reagen perlu diperhatikan untuk memperoleh pengenceran yang sesuai.

8. Control cell harus selalu menunjukkan hasil negative pada proses pemeriksaan baik kualitatif maupun semi kuantitatif.

9. Waktu inkubasi tidak boleh lebih dari 60 menit dan bebas dari getaran.