PENAPISAN FITOKIMIAI. Tujuan Mampu menjelaskan tujuan penapisan fitokimia Mampu menjelaskan tahap-tahap proses penapisan fitokimia untuk suatu golongan senyawa Mampu menjelaskan reaksi yang terjadi pada proses penapisan fitokimia suatu golongan senyawaII. PendahuluanSalah satu pendekatan untuk penelitian tumbuhan obat adalah penapisan senyawa kimia yang terkandung dalam tanaman. Penapisan fitokimia atau skrining fitokimia dilakukan untuk mengetahui golongan senyawa yang terdapat dalam suatu sampel (simplisia, ekstrak, fraksi, subfraksi dan isolat), meliputi pemeriksaan golongan alkaloid, flavonoid, saponin, tannin, kuinon, steroid/triterpenoid, kumarin dan senyawa lainnya. Sebagai informasi awal dalam mengetahui senyawa kimia apa yang mempunyai aktivitas biologis dari suatu tanaman. Hasil penapisan fitokimia dapat dijadikan panduan untuk proses isolasi selanjutnya.III. PercobaanPenapisan meliputi pemeriksaan alkaloid, flavonoid, saponin, tannin, kuinon, steroid/triterpenoid, kumarin dan senyawa lainnya.3.1 Pemeriksaan alkaloida. Alat dan bahanAlat Bahan

Mortar dan stamper Tabung reaksi dan rak Corong pisah Gelas ukur Pipet tetes Kaca arloji Simplisia Amonia 25% Kloroform Pereaksi Dragendorff, Bouchardat Pereaksi asam silikowolframat Pereaksi Mayer, asam fosfomolibdat

b. Prosedur (CARA I)Amonia 25% ditambahkan ke dalam 2 g sampel, digerus dalam mortar. Setelah ditambah kloroform digerus lagi kuat-kuat dan disaring. Filtrat berupa larutan organic digunakan untuk percobaan selanjutnya. Sebagian larutan ini diteteskan pada kertas saring dan ditetesi pereaksi Dragendorff. Terbentuknya warna merah atau jingga pada kertas saring menunjukan adanya alkaloid. Sisa larutan organik diekstraksi dua kali dengan larutan asam klorida 10% v/v. ke dalam masing-masing 5 mL larutan dalam tabung reaksi ditambahkan beberapa tetess pereaksi Dragendorff dan perekasi Mayer. Terbentuknya endapan merah bata dengan pereaksi Dragendorff atau endapan putih dengan pereaksi Mayer menunjukan adanya alkaloid.3.2 Pemeriksaan flavonoida. Alat dan bahanAlat Bahan

Beaker glass Tabung reaksi dan rak Gelas ukur Pipet tetes Corong saring Simplisia Serbuk magnesium Asam klorida Etanol Amil alkohol

b. Prosedur (CARA I)1) Sebanyak 1 g sampel dalam 100 mL air panas didihkan selama 5 menit dan disaring sehingga diperoleh filtrat.2) Sebanyak 5 mL filtrat dalam tabung reaksi tambahkan sedikit serbuk magnesium dan 2 mL asam klorida-etanol (1:1), kemudian dikocok dengan 10 mL amil alkohol. Reaksi positif ditunjukan dengan terbentuknya warna jingga, kuning, atau merah pada lapisan amil alkohol.3.3 Pemeriksaan saponina. Alat dan bahanAlat Bahan

Beaker glass Tabung reaksi dan rak Gelas ukur Pipet tetes Corong saring Simplisia Asam klorida 2N

b. Prosedur (CARA I)1) Sebanyak 1 g sampel dalam 100 mL air panas dididihkan selama 5 menit dan disaring sehingga diperoleh filtrat.2) Sebanyak 10 mL filtrate dalam tabung reaksi dikocok secara vertical selama 10 detik, terbentuknya busa yang mantap selama tidak kurang dari 10 menit, setinggi 1 sampai 10 cm yang tidak hilang ketika ditambahkan 1 tetes asam klorida 2 N.3.4 Pemeriksaan tannina. Alat dan bahanAlat Bahan

Beaker glass Tabung reaksi dan rak Gelas ukur Pipet tetes Corong saring Simplisia Aquadest FeCl3 1% Gelatin 1% Pereaksi Steasny (formaldehid-asam klorida (1:2))

b. Prosedur1) Sebanyak 1 g sampel dalam 100 mL air panas dididihkan selama 5 menit dan disaring sehingga diperoleh filtrat.2) Filtrat sebanyak masing-masing 5 mL ke dalam 3 tabung reaksi, ke dalam bagian pertama ditambahkan besi (III) klorida. Timbulnya warna hijau violet atau hitam menunjukan adanya tanin. Ke dalam bagian kedua ditambahkan larutan gelatin, terbentuknya endapan putih menunjukan adanya tanin. Ke dalam bagian ketiga ditambahkan pereaksi Steasny, kemudian dipanaskan dalam penangas air. Terbentuknya endaoan disaring, filtrat dijenuhkan dengan natrium asetat dan ditambah beberapa tetes larutan besi (III) klorida. Terbentuknya warna biru tinta menunjukan adanya tanin galat.3.5 Pemeriksaan kuinona. Alat dan bahanAlat Bahan

Beaker glass Tabung reaksi dan rak Gelas ukur Pipet tetes Corong saring Simplisia Aquadest NaOH 1N

b. Prosedura. Sebanyak 1 g sampel dalam 100 mL air panas dididihkan selama 5 menit dan disaring sehingga diperoleh filtrat.b. Ke dalam 5 mL filtrat ditambahkan beberapa tetes larutan natrium hidroksida 1N, jika terbentuk warna merah menunjukan adanya kuinon.3.6 Pemeriksaan steroid/triterpenoida. Alat dan bahanAlat Bahan

Beaker glass Tabung reaksi dan rak Gelas ukur Pipet tetes Corong saring Cawan uap Simplisia Aquadest Pereaksi Lieberman-Buchard (2 tetes asam asetat anhidrat 1 tetes asam sulfat pekat)

b. Prosedur1) Sebanyak 1 g sampel dimaserasi 20 mL eter selama 2 jam, lalu disaring2) Filtrat sebanyak 5 mL diuapkan dalam cawan penguap ke dalam residu. Tambahkan pereaksi Lieberman-Buchard, terbentuknya warna merah yang berubah menjadi warna hijau, kemudian menjadi ungu dan akhirnya biru, menunjukan adanya steroid/triterpenoid.

IV. Pertanyaan dan DiskusiJawaban dicantumkan dalam jurnal praktikum setelah prosedur kerja1. Jelaskan isi pereaksi:a. Dragendorffb. Mayerc. Steasnyd. Lieberman Buchard2. a. Apa yang dimaksud dengan positif palsub. sebutkan senyawa-senyawa yang meberikan reaksi positif palsu dengan pereaksi Mayer. Jelaskan3. Jelaskan reaksi kimia yang terjadi pada penapisan fitokimia untuk golongan senyawa:a. Flavonoidb. Steroid/Triterpenoidc. Kuinond. Tanin