isolasi & pemindahan kultur

8/18/2019 Isolasi & Pemindahan Kultur

1/9

1. PENDAHULUAN

1.1 Tinjauan pustaka

Mikroorganisme yang berkembang pada media laboratorium disebut sebagai kultur.

Populasi mikroba yang umumnya berada di tubuh kita dan lingkungan sekitar kita

terdiri dari berbagai spesies yang berbeda-beda. Untuk mempelajari tiap spesies yang

berbeda-beda pertama harus membuat sebuah kultur yang hanya mengandung satu

spesies murni. Sedangkan kultur yang lebih dari satu spesies disebut kultur campuran

(Pelczar 1!"#$.

%euntungan yang diperoleh dari metoda ca&an gores adalah menghemat bahan dan

&aktu. 'kan tetapi untuk memperoleh hasil yang maksimal dibutuhkan ketrampilan dari

praktikan. alam metoda ca&an gores kesalahan dapat sering terjadi seperti tidak

meman)aatkan permukaan sebaik-baiknya sehingga pengenceran mikroorganisme

menjadi lebih lanjut. *nokulum yang terlalu banyak dapat menyulitkan pemisahan sel

(+adioetomo 1!!,$.

alam metoda ca&an tuang untuk memperoleh koloni murni dari campuran

mikroorganisme dengan mengencerkan spesimen dalam medium agar yang sudah

dicairkan dan didinginkan kamudian dituangkan ke dalam ca&an. Metoda ini sangat

memboroskan bahan dan &aktu karena konsentrasi sel mikroba dalam spesimen tidak

diketahui maka pengenceran harus dilakukan dengan bertahap (+adioetomo 1!!,$.

akteri yang ditumbuhkan dalam media padat akan menyebabkan terjadinya suatu

bentuk koloni. entuk koloni yang berbeda-beda merupakan ciri khas dari spesies

tertentu. esar kecilnya koloni mengkilat tidaknya halus kasarnya permukaan dan

&arna koloni merupakan si)at-si)at khas suatu bakteri. Umumnya bakteri ber&arna

keputihan kelabu kekuningan dan bening. arna tersebut dipengaruhi oleh

temperatur p+ dan oksigen bebas (&idjoseputro 1!!/$.

Pada saat memindahkan suatu biakan mikroba harus diperhatikan jangan sampai terjadi

kontaminasi oleh organisme yang tidak dikehendaki dalam biakan murni yang akan


2/9

dibuat. Mikroorganisme yang tidak dikehendaki dapat masuk melalui kontak langsung

dengan permukaan atau tangan yang kotor. 0leh karena itu sebelum melakukan

pemindahan kultur kita diharapkan untuk menciptakan lingkungan yang aseptis. 'pabila

mikroba yang tidak diharapkan masuk ke dalam kultur murni maka kultur murni

tersebut akan tercemar. *dentitas biakan mikrobiologi diartikan sebagai pemindahan

kultur ke biakan segar tanpa terjadi pencemaran oleh mikroorganisme yang tidak

diinginkan (ay 1!!/$.

*solasi merupakan metoda untuk memisahkan mikroorganisme dalam medium menjadi

sel yang indi2idu yang disiapkan untuk mendapatkan spesies tunggal. Tujuan isolasi

untuk memisahkan suatu mikroba dengan mikroba lainnya dengan tujuan untuk

mendapatkan spesies tunggal dengan si)at-si)at yang diinginkan. *solasi dapat dilakukan

dengan menggoreskan suspensi campuran sel pada suatu media padat dalam ca&an petri

dan kemudian menginkubasikan ('tlas 1!#/$.

Mikrobia dapat tumbuh secara baik apabila ditempatkan pada kondisi )isik dan kondisi

kimia&i yang sesuai. %ondisi )isik yang sesuai seperti suhu dan struktur bahan

sedangkan kondisi kimia&i yang sesuai seperti tersedianya komponen-komponen yang

dibutuhkan oleh mikrobia misalnya 3 air sumber karbon sumber energi sumber

nitrogen mineral )aktor pertumbuhan dan konsentrasi ion hidrogen atau disebut

dengan p+ (+adioetomo 1!!,$.

4amur merupakan mikroorganisme yang dapat tumbuh dengan baik pada media yang

banyak mengandung pektin di mana pektin banyak terdapat dalam pati yang merupakan

golongan polisakarida. 4amur sering dijumpai pada roti karena roti memiliki kandungan pektin yang banyak yang merupakan media yang sangat baik untuk pertumbuhan jamur

dan jamur yang sering dijumpai adalah dari golongan 'spergilus (deMan 1!#!$.

1.5 Tujuan praktikum

Praktikum ini bertujuan untuk mempelajari cara memindahkan kultur dan cara

mengisolasi bakteri.


3/9

2. MATERI DAN METODA

5.1 M'T67*

5.1.1 'lat

'lat-alat yang digunakan dalam praktikum ini adalah 3 tabung reaksi rak tabung reaksi

ose bunsen inkubator.

5.1.5 ahan

ahan-bahan yang digunakan dalam praktikum ini adalah 3 media 8' media P'

media P9: Acetobacter aceti, Rhizopus oligosporus, Saccaromyses cerevisiae, roti

yang telah berjamur alkohol.

5.1 M6T0'

'. Pemindahan kultur

Untuk kelompok 1 dan 5 memindahkan kultur 'cetobacter aceti pada media 8' yang

telah disterilkan. Untuk kelompok , dan / memindahkan kultur Rhizopus oligosporus

pada media P' yang telah disterilkan. Untuk kelompok " dan ; memindahkan kultur

Saccaromyses cerevisiae pada media P9: yang telah disterilkan. Pada saat

memindahkan kultur dengan jarum ose usahakan jarum ose harus dalam keadaan steril

dan lingkungan harus aseptis. Setelah diambil kultur dioleskan pada masing-masing

media.

. *solasi

4amur pada roti diambil dengan jarum ose yang telah disterilkan kemudian dioleskan

pada media yang juga telah disterilkan. angkah-langkahnya sama seperti pemindahan

kultur.

3. HASIL PENGAMATAN

'. Pemindahan kultur

%elompok +ari

ke-

4enis M0 9ambar %eterangan


4/9

1 1

Acetobacter aceti

arna 3

1. kuning bening

(media 8'$

, 1. putih keruh

(mikroorganisme$

5. kuning bening

(media 8'$

5 1

Acetobacter aceti

1. tabung reaksi

5. media 8'

(kuning muda$

,. mikroorganisme

ber&arna putih keruh

, 1. tabung reaksi

5. media 8'

(kuning muda$

,. mikroorganisme

ber&arna putih keruh

, 1 Rhizopus oligosporus 1. media P'

(kuning$

, Rhizopus oligosporus 1. media P'

(kuning$

tidak tumbuh media

/ 1 Rhizopus oligosporus 1. tabung reaksi

5. media P'

, arna 3 putih keruh

Terdapat endapan


5/9

" 1

Saccaromyses cerevisiae

1. media P9:

(putih keruh$

terdapat endapan

, 1. media P9:

(putih keruh$

terdapat endapan

; 1

Saccaromyses cerevisiae

1. media P9:

(kuning$

5. bakteri Saccaromyses

, 1. putih keruh

terdapat endapan bentuk

permukaan )lokulen

sedikit berlendir

. *solasi

%elompok ahan gambar arna entuk koloni

1 4amur roti 1. putih keruh

5. kuning bening

eludru

a < mikroba

b < media

5 4amur roti Putih susu

Merah

kecoklatan

diujung

eludru

a < mikroba

b < media

, 4amur roti Putih keruh eludru

a < mikroba

b < media

/ 4amur roti iru kehitaman eludru

a < mikroba


6/9

b < media

" 4amur roti Putih keruh eludru

a < mikroba

b < media

; 4amur roti Putih eludru

berserabut

a < mikroba

b < media

4. PEMBAHASAN

Pemindahan kultur merupakan suatu cara untuk memindahkan kultur yang telah

dibiakan ke media lain. Perpindahan kultur ini bertujuan untuk mendapatkan biakan

murni. 'da terdapat dua jenis kultur yaitu 3 kultur murni yang terdiri dari satu macam

spesies sedangkan kultur campuran terdiri dari spesies yang campuran (Pelczar 1!"#$.

Pada praktikum mikroorganisme yang digunakan untuk perpindahan kultur adalah

Acetobacter aceti, Rhizopus oligosporus, dan Saccaromyses cerevisiae. Sedangkan

media yang kami guanakan adalah 8' untuk Acetobacter aceti P' untuk Rhizopus

oligosporus dan P9: untuk Saccaromyses cerevisiae. Pada saat memindahkan kultur

kami mensterilkan dahulu alat-alat yang akan kami pakai dan membuat suasana

lingkungan menjadi aseptis dengan menyemprotkan alkohol. Perlakuan tersebut

bertujuan untuk mencegah kontaminan dari mikroorganisme yang tidak dikehendaki

karena adanya mikroorganisme dapat mempengaruhi kultur yang akan dibiakkan. +al

ini sesuai dengan ay (1!!/$ yang mengatakan bah&a kontaminasi oleh

mikroorganisme yang tidak dikehendaki akan dapat merusak kultur yang akan

dibiakkan sehingga mempengaruhi hasil pengamatan oleh karena itu pada saat

melakukan pemindahan kultur dan hal-hal yang berhubungan dengan mikroorganisme

harus dilakukan dalam lingkungan yang aseptis.


7/9

Pada percobaan perpindahan kultur didapatkan hasil yang ber2ariasi untuk setiap

mikroorganisme yang dibiakkan dalam media yang berbeda-beda. apat dipastikan

bah&a mikroorganisme telah tumbuh dalam media karena ditandakan adanya kekeruhan

dan timbul endapan pada media yang ditumbuhi. Tetapi terdapat kelompok yang tidak

ditumbuhi oleh mikroorganisme karena pada saat mensterilkan jarum ose yang masih

panas langsung dimasukkan sehingga mikroorganisme yang terambil oleh jarum ose

mati karena panas. +al ini sesuai dengan +adioetomo (1!!,$ yang mengatakan bah&a

sterilisasi panas yang terlalu lama dapat merusak alat dan bahan yang digunakan dalam

praktikum. =aktor-)aktor yang dapat mempengaruhi pertumbuhan mikroorganisme

adalah 3 air sumber karbon sumber energi sumber nitrogen mineral )aktor

pertumbuhan dan konsentrasi ion hidrogen atau disebut dengan p+ (+adioetomo

1!!,$.

*solasi merupakan suatu cara yang digunakan untuk memisahkan suatu mikroorganisme

ke dalam media untuk mendapatkan spesies tunggal. *solasi dapat dilakukan dengan

cara menggoreskan mikroba yang akan diisolai ke media lain ('tlas 1!#/$. +al ini

sesuai dengan cara pada saat kami melakukan isolasi pada jamur roti. 4amur pada roti

kami ambil dengan menggunakan jarum ose yang telah disterilkan dengan pemanasan

kemudian digoreskan pada media untuk dibiakkan. alam isolasi juga diperlukan proses

sterilisasi dan aseptis. %arena lingkungan kita yang banyak sekali mikroorganisme yang

tidak dapat dilihat dengan mata telanjang. 0leh karena itu sterilisasi dan aseptis sangat

dibutuhkan untuk mencegah kontaminan oleh mikroorganisme yang tidak dikehendaki

karena adanya kontaminan dapat mempengaruhi hasil akhir dan pengamatan (ay

1!!/$.

Mikroorganisme yang terdapat pada roti termasuk golongan 'spergilus. %arena

'spergilus merupakan mikroorganisme yang dapat dengan baik tumbuh pada media

yang banyak mengandung kandungan pektin di mana pektin banyak terdapat dalam pati

yang merupakan golongan polisakarida. i mana roti yang merupakan bahan praktikum

yang kami pakai merupakan media yang memiliki kandungan pektin. Sesuai dengan

deMan (1!#!$ yang mengatakan bah&a jamur sering dijumpai pada roti karena roti


8/9

memiliki kandungan pektin yang banyak yang merupakan media yang sangat baik untuk

pertumbuhan jamur dan jamur yang sering dijumpai adalah dari golongan 'spergilus.

5. KESIMPULAN

Memasukkan jarum ose yang masih panas dapat menyebabkan mikroba mati.

Sterilisasi dan aseptis merupakan cara untuk mencegah kontaminasi.

%eadaan aseptis dapat dilakukan dengan menyemprotkan alkohol.

Pemindahan kultur merupakan cara untuk memindahkan kultur ke media lain.

*solasi merupakan cara untuk memisahkan mikroorganisme untuk mendapatkan

spesies tunggal.

%ekeruhan dan endapan yang timbul merupakan tanda bah&a telah tumbuh

mikroorganisme pada media tersebut.

'spergilus tumbuh dengan baik pada media yang banyak mengandung pektin.

Pertumbuhan mikroorganisme dipengaruhi oleh 3 air sumber karbon sumber energi

sumber nitrogen mineral )aktor pertumbuhan dan konsentrasi ion hidrogen atau

disebut dengan p+.

6. DAFTAR PUSTAKA

'tlas 7. M. (1!#/$. Microbiology3 =undamentals and 'pplications. MacMillan

Publishing >ompany. 8e& :ork.

deMan 4. M. (1!#!$. %imia Makanan. *T. andung.

&idjoseputro . (1!!/$. asar-dasar Mikrobiologi. jambatan. 4akarta.

+adioetomo 7. S. (1!!,$. Mikobiologi asar dalam Praktek Teknik dan Prosedur

asar aboratorium. PT 9ramedia Pustaka Utama. 4akarta.

ay . . (1!!/$. 'nalisis Mikroba dalam aboratorium. PT 7aja 9ra)indo Persada.

4akarta.


9/9

Pelczar M. 4. ? 7. . 7eid. (1!"#$. Microbiology. The Mc 9ra& +ill ook >ompany

*nc. 8e& :ork.

7. LAMPIRAN

isolasi & pemindahan kultur

Documents