laporan 3 kultur jaringan

8/17/2019 Laporan 3 Kultur Jaringan

1/16


2/16

PENDAHULUAN

1.1 Latar B !a"a#$

-engertian kultur a%laah bu%i%a.a %an pengertian kata /aringan a%alah

sekelompok sel .ang memiliki ungsi .ang sama a%i kultur /aringan

merupakan suatu meto%e untuk mengisolasi bagian tanaman 3ontohn.a

protoplasma sel /aringan %an organ agian tanaman .ang %iisolasi tersebut

harus %itumbuhkan %alam me%ia %engan kon%isi aseptik .ang ka.a nutrisi%an $at pengatur tumbuh %alam 5a%ah tertutup %an tembus 3aha.a sehingga

bagian tanaman tersebut %apat %iperban.ak %an tumbuh men/a%i tanaman

utuh .ang memiliki si at .ang sama %engan in%ukn.a ,ultur /aringan

merupakan salah satu 3ara untuk memperban.ak tanaman se3ara egetati

("amee% et al 2006)

Menurut 7urto5inoto (1 1) pelaksanaan kultur /aringan ini %ia5ali

%ari penemuan teori sel .ang %itemukan oleh 73hei%en %an 73h5ann .angmen.atakan bah5a sel memiliki kemampuan autonon bahkan totipotensi

7etelah itu pa%a 1 02 *ottlieb "aberlan%t men3oba untuk mengisolasi %an

mengkulturkan sel palisa%e tunggal %ari %aun %alam larutan garam ,nop

.ang %iperka.a %engan sukrosa namun sel sel ti%ak mengalami pembelahan

-a%a tahun tahun selan/utn.a su%ah ban.ak per3obaan untuk mengkultur

/aringan namun ti%ak ban.ak .ang berhasil -a%a 1 44 kultur in itro pertama

berhasil %ilakukan pa%a tanaman tembakau %an pa%a 1 48 7koog %an Tsui

berhasil %alam pembentukan tunas %an akar a% enti %ari tanaman tembakau

7koog %an Tsui /uga berhasil menemukan bah5a pembentukan akar %an tunas

bergantung pa%a perban%ingan auksin %an sitokinin paa 1 '8 9alu mulailah

penemuan .ang sangat pesat mulai %ari usi protoplas hibri%isasi somati3

%an /uga perkembangan reka.asa genetik

Menurut An%erson (2000) meto%e kultur /aringan %ikembangkan untuk

memperban.ak tanaman khususn.a untuk tanaman .ang sulit


3/16

%ikembangbiakkan se3ara egetati ibit .ang %ihasilkan %ari meto%e kultur

/aringan memiliki beberapa keuntungan antara lain a%alah memiliki si at .ang

i%entik %engan in%ukn.a %apat %iperban.ak %alam /umlah .ang besar %alam

5aktu .ang singkat ti%ak membutuhkan tempat .ang luas %an kesehatan

bibit lebih mu%ah untuk %iperhatikan

1.2 T%&%a#

1 Menentukan konsentrasi !AA %an A- terha%ap kultur kisan pa%a

me%ium M7

2 Menentukan pengaruh sumber eksplan terha%ap kultur krisan pa%a

me%ium M7& Menentukan konsentrasi hormon %an sumber eksplan .ang optimal untuk

pertumbuhan kultur krisan

1.' H *t + +

1 Dengan perban%ingan konsentrasi !AA .ang lebih besar %iban%ingkan

A- eksplan akan tumbuh membentuk akar 7e%angkan %engan

perban%ingan !AA .ang lebih ke3il %iban%ingkan A- eksplan akan

tumbuh membentuk pu3uk2 7umber eksplan .ang bebas %ari hama %an pen.akit serta memiliki sel

ter%i erensiasi .ang se%itki& ,onsentrasi hormon .ang %ibutuhkan untuk pertumbuhan .ang optimal

a%alah hormon .ang memiliki 3ampuran !AA %an A- %engan seimbang


4/16

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Ta#a,a# S%, r E"+ !a# ( Chrysanthemum + .)

Chrysanthemum sp atau .ang umum %ikenal sebagai bunga krisan

memiliki klasi ikasi sebagai berikut (tabel 2 1):

Tabel 2 1 ,lasi ikasi Tanaman ,risan

,risan

,ing%om -lantae

Di isi Magnolioph.ta

,elas Magnoliopsi%ar%o Asterales

Famili Astera3eae

*enus Chrysanthemum

7pesies Chrysanthemum sp

7umber: The #nternational -lant !ames #n%e; (200')

-ersebaran %ari tumbuhan ini bermula %ari 5ila.ah Asia %an timur

laut %ari


5/16

sebagai tumbuhan .ang sering %i/a%ikan ornamen %an perhiasan 7elain itu

ekstrak krisan /uga sering %iman aatkan sebagai minuman herbal atau sebagai

pengusir n.amuk Tumbuhan krisan /uga %iper3a.a %apat men.aring polusi

u%ara pa%a suatu ruangan (>ol erton 1 84) 7ebagai tumbuhan .ang ka.a

%engan man aat krisan merupakan tumbuhan .ang baik untuk

%ibu%i%a.akan 7alah satu 3ara .ang e isien untuk memperban.ak tumbuhan

krisan tersebut a%alah %engan menggunakan meto%e kultur /aringan

2.2 K%!t%r Jar #$a#

,ultur /aringan %alam bahasa asing %isebut sebagai tissue 3ulture

5ee sel 3ultus atau ge5ebe kultur ,ultur a%alah bu%i%a.a %an /aringan

a%alah sekelompok sel .ang mempun.ai bentuk sama %an ungsi .ang sama

Maka kultur /aringan berarti membu%i%a.akan suat /aringan tanaman men/a%i

tanaman ke3il .ang memiliki si at seperti in%ukn.a ("en%ar.ono 2004)

Dengan kata lain ,ultur /aringan tanaman merupakan suatu meto%e atau

teknik mengisolasi bagian tanaman (protoplasma sel /aringan %an organ)

%an menumbuhkann.a pa%a me%ia buatan %alam kon%isi aseptik %i %alam

ruang .ang terkontrol sehingga bagian bagian tanaman tersebut %apat tumbuh

%an berkembang men/a%i tanaman lengkap

-enggunaan teknik kultur /aringan pa%a a5aln.a han.a untuk

membuktikan teori ?totipotensi@ (?total geneti3 potential@) %ikemukakan oleh

73hlei%en %an 73h5ann .ang men.atakan bah5a sel tanaman sebagai unit

terke3il %apat tumbuh %an berkembang apabila %ipelihara %alam kon%isi .ang

sesuai (,usuma 200 ) Teori totipotensi a%alah kemampuan setiap sel %ari

mana sa/a sel tersembut %iambil apabila %iletakkan %alam lingkungan .ang

sesuai akan %apat tumbuh men/a%i tanaman .ang sempurna ("en%ar.ono

2004)

Menurut *una5an (1 ') a%a beberapa ma3am teknik kultur /aringan

.ang telah %ikenal antara lain :

a Maristem kultur .aitu teknik kultur /aringan %engan menggunakan

eksplan (bagian tanaman) %ari /aringan mu%a atau maristem


6/16

b -ollen atau anther kultur .aitu teknik kultur /aringan %engan

menggunakan eksplan %ari serbuk sari atau benang sari

3 -rotoplast kultur .aitu teknik kultur /aringan %engan menggunakan

eksplan protoplast (sel hi%up .ang telah %ihilangkan %in%ing seln.a)

% =loroplast kultur .aitu teknik kultur /aringan %engan menggunakan

eksplan 3loroplast untuk keperluan memperbaiki si at tanaman %engan

membuat arietas baru

e 7omati3 3ross atau silangan protoplasma .aitu pen.ilangan %ua ma3am

protoplasma men/a%i satu kemu%ian %ibu%i%a.akan sehingga men/a%i

tanaman ke3il .ang mempun.ai si at baru

Me%ium .ang umum %igunakan pa%a meto%e kultur /aringan ini

a%alah me%ium Murashige %an 7koog Me%ium M7 ini mengan%ung garam

%an nitrat %engan konsentrasi .ang lebih tinggi %iban%ing me%ia lain %an

berhasil %igunakan pa%a berbagai ma3am tanaman %ikotil ( uliarti 200B)

,omposisi me%ium M7 a%alah sebagai berikut:

Tabel 2 2 ,omposisi Me%ium Murashige %an 7koog (M7)

Ba a# K , a K*#+ #tra+ Da!a, M / a (,$ L)Ma"r*#%tr #

!" 4 ! &

,! &

=a=l 2 "2

Mg7 4 B"2

16'0 000

1 00 000

440 000

&B0 000," 2- 4 10 000

Ir*# !a 2


7/16

=u7 4 '" 2

=o 2=l 6" 2

0 02'

0 02'

ta, #*l.3ine

!i3otine A3i%

-.ro%o;in "=l

Th.amine "=l

2 000

0 '00

0 '00

0 100M *- #*+ t*! 1003000S%"r*+a '0.0003000A$ar .0003000

H 536

7elain makronutrien mikronutrien %an nutrisi lainn.a %alam kultur

/aringan /uga %ibutuhkan kombinasi at -engatur Tumbuh ( -T) .ang

optimal -T %alam /aringan tanaman ber ungsi untuk mengatur proses

isiologis seperti pembelahan %an peman/angan sel serta mengatur

pertumbuhan akar batang %aun bunga %an buah (7aptarini 1 88)

er%asarkan pern.ataan *una5an (1 ') se3ara umum $at pengatur

tumbuh .ang %igunakan %alam kultur /aringan a%a tiga kelompok besar .aitu

auksin sitokinin %an giberelin auksin %igunakan se3ara luas %alam kultur

/aringan untuk merangsang pertumbuhan kalus akar suspensi sel %an organ

2.' H*r,*# T%, % (NAA /a# BAP)

at -engatur Tumbuh ( -T) merupakan sen.a5a organik bukan hara

.ang %alam /umlah se%ikit %apat men%ukung menghambat %an %apat

mengubah proses isiologi tumbuhan Fungsi -T tersebut a%alah untuk

merangsang pertumbuhan mor ogenesis %alam kultur sel /aringan %an organ

at pengatur tumbuh .ang sering %igunakan pa%a kultur /aringan a%alah

auksin %an sitokinin (A.abe an% 7umi 1 8) Auksin merupakan $at pengatur

tumbuh .ang ber ungsi untuk menginisiasi peman/angan %an pembesaran sel


8/16

7alah satu golongan auksin .ang paling ban.ak %igunakan pa%a teknik kultur

in vitro a%alah !aphthalene A3eti3 A3i% (!AA) !AA merupakan $at

pengatur tumbuh sintetik .ang mempun.ai si at lebih stabil %an ti%ak mu%ah

terurai oleh en$im .ang %ikeluarkan sel atau pemanasan pa%a proses

sterilisasi %iban%ingkan golongan auksin lainn.a ("en%ar.ono 1 4)

at pengatur tumbuh lain .ang %igunakan a%alah sitokinin 7itokinin

ber ungsi untuk meregulasi pembelahan sel mema3u mor ogenesis

perkembangan kloroplas mengin%uksi embriogenesis %an organogenesis

("en%ar.ono 1 4) *olongan sitokinin .ang biasa %igunakan %alam kultur

in itro a%alah kinetin A $eatin %an A- -enggunaan A- sering

%igunakan karena bersi at tahan terha%ap %egra%asi %an hargan.a lebih

murah at pengatur tumbuh auksin %an sitokinin ti%ak beker/a sen%iri

sen%iri tetapi ke%ua -T tersebut beker/a se3ara berinteraksi %alam

mengarahkan pertumbuhan %an perkembangan eksplan 7itokinin merangsang

pembelahan sel tanaman %an berinteraksi %engan auksin %alam menentukan

arah %i erensiasi sel Apabila perban%ingan konsentrasi sitokinin lebih besar

%ari auksin maka pertumbuhan tunas %an %aun akan terstimulasi 7ebalikn.a

apabila sitokinin lebih ren%ah %ari auksin maka pertumbuhan akar .ang akan

terstimulasi Apabila perban%ingan sitokinin %an auksin berimbang maka

pertumbuhan tunas %aun %an akar akan berimbang (>areingC-hillips

1 B0)

2.4. K*, *+ + M / %, MS

Menurut 7toor (1 84) me%ium Murashige 7koog .ang biasa

%igunakan sebagai me%ium untuk kultur /aringan memiliki komposisi sebagai

berikut:

Tabel 1 ,omposisi Me%ium Murashige 7koog,omponen ,onsentrasi

Akhir (mg %m&)

Makronutrien !" 4 ! & 16'0 0


9/16

#norganik ,! &=a=l 2 B"2Mg7 4 B"2," 2- 4

1 00 0440 0

&B0 01B0 0

esi


10/16

'.1 A!at /a# Ba a#

Alat %an bahan .ang %igunakan %alam per3obaan kali ini %isa/ikan pa%a

tabel & 1 %i ba5ah ini:

Tabel & 1 Alat %an ahan

Alat ahan


11/16

-a%a praktikum kali ini ob/ek .ang %igunakan a%alah tanaman

krisan Tanaman krisan %ipetik %aun mu%a ke%ua sampai %aun mu%a

kelima %an /uga batang mu%a krisan Daun %an batang krisan %i3u3i

%engan menggunakan air mengalir lalu %iletakkan %iatas 3a5an petri

.ang su%ah %ilapisi %engan kertas saring ,emu%ian %aun %an batang

krisan %iren%am %engan menggunakan !a=l 1 BE %alam tabung


12/16

M Kelompok 2Ket: Tumbuh Kalus

N IKet : Tumbuh kalus

O

I

Kode

Foto Kode

Foto

R Kelompok 125 Maret 2014Ket : Belum terlihatpertumbuhan an! si!ni"ikan

#


13/16

$ kelompok 4

Kamis% & Maret 2014Ket:Kontaminasi 'amur

( Kelompok )

Kamis% & Maret 2014Ket: Tumbuh Kalus

T Kelompok 145 Maret 2014Ket : Belum terlihatpertumbuhan an! si!ni"ikan

* Kelompok 1+Rabu 5 Maret 2014Ket : belum terlihatpertumbuhan an! si!ni"ikan


14/16

Tabel 4 2 "asil -engamatan atang

Kode Foto

M Ket: Terkontaminasi 'amur

N Kelompok 11T!l 5 maret 2014

Ket: ,da 2 daun baru

O Kelompok 125 Maret 2014

Ket: Tumbuh kalus dan daun


15/16


16/16

DA7TAR PUSTAKA

An%erson 2000 Effect of Level and Duration Suplementary Light on Development of Chrysantemum hort. 61( 2) : 148 1''

A.abe M 7umi 7 1 8 Establishment of a Novel Tissue Culture Metthod,Stem disc Culture and !ts "ractical #pplication to Micropropagation of $arlic %#llium sativum L&. -lant 3ell Gep 1B:BB& BB

*eorge

laporan 3 kultur jaringan

Documents