PEMBUTAN ZAT WARNA AZO

LAPORAN PRAKTIKUM

KIMIA ORGANIK III

Oleh:

Abi Rafdi Wilhan0621 12 072PROGRAM STUDI KIMIAFAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

UNIVERSITAS PAKUAN

BOGOR

2015

KATA PENGANTARPuji dan syukur penyusun panjatkan kepada Allah Subhanahuwataala yang telah melimpahkan rahmat-Nya, sehingga Laporan Praktikum Kimia Organik III selesai tepat waktu. Penyusun mengucapkan terima kasih kepada seluruh pihak yang telah membantu dalam proses penyusunan laporan ini.

Praktikum Biokimia merupakan materi praktikum yang wajib diikuti oleh mahasiswa Universitas Pakuan Bogor Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam program studi kimia semester V (lima). Laporan praktikum Biokimia disusun sebagai bukti telah melaksanakan praktikum Biokimia.

Penyusun menyadari bahwa dalam penyusunan laporan ini masih jauh dari sempurna. Saran dan kritik yang membangun untuk penyusunan laporan di masa datang sangat penyusun harapkan. Demikian dan penyusun berharap semoga laporan ini dapat bermanfaat.

Bogor, Januari 2015

Penyusun

PERCOBAAN 2

ZAT WARNA INDIKATOR PHENOL PHTALEINI. Tujuan PercobaanMempelajari pembuatan senyawa-senyawa turunan fenol dan prinsip-prinsip reaksi kondensasi.II. Dasar TeoriJika phenol (2 molekul) dipanaskan dengan anhidrida phtalat (1 molekul) akan terjadi reaksi kondensasi menghasilkan phenol phtalein). Reaksi kondensasi ini dikatalis dengan asam dan konjugat dari anhidran dan kedudukan para dan fenol.

Prinsip reaksinya sebagai berikut :

Pembentukan Phenol phtalein

Phenol phtalein adalah bukan zat warna dan merupakan padatan tidak berwarna (colourless solid) yang mempunyai titik lebur 261o C.

III. Alat dan BahanAlat- alat yang digunakan:

1. Labu alas bulat 250 ml.2. Refluks .3. Gelas piala 2 Liter.4. Corong buchner.5. Gelas ukur.6. Pemanas oli.7. Termometer 200o C.Bahan-bahan yang digunakan:

1. Fenol murni.2. Asam sulfat pekat.3. Asam sulfat encer4. Norit5. Phtalat murni .6. NaOH 10%.7. HCl pekat.8. Ethanol.IV. Cara Kerja1. Dimasukkan ke dalam labu bulat 250 ml yaitu 35 g fenol, 25 g anhidrat asam ftalat, dan 11 ml H2SO4 serta beberapa butir batu didih.2. Dipanaskan di atas penangas minyak/oli bekas selama 4 jam (suhu 115-120o C) 3. Dalam keadaan panas, campuran dituangkan ke dalam gelas piala 2 liter yang berisi air panas 1 liter. Didihkan hingga bau fenol hilang4. Ditambahkan air untuk mengganti air yang hilang/menguap kemudian didinginkan endapan yang terbentuk.5. Disaring dengan penyaring buchner dan dicuci dengan air6. Padatan dilarutkan dalam NaOH 10% kemudian disaring terhadap bahan-bahan yang tidak larut.7. Filtratnya diasamkan dengan asam asetat ditambah 5 tetes HCl pekat sampai netral (cek dengan kertas ph)8. Didiamkan semalam, akan terbentuk kristal phenol phtalein, disaring, dikeringkan, ditimbang hasilnya, dan ditentukan titik leburnya.9. Bila kristal berwarna kuning, maka lakukan pemurnian dengan cara rekristalisasi sebagai berikut :Gunakan pelarut etanol sebanyak 6 kali kristal. Campuran dipanaskan di atas penangas air dan tambahkan norit. Dalam keadaan panas disaring dengan corong buchner dan residu dicuci dengan etanol panas, filtratnya diencerkan dengan air sebanyak 8 kali volum filtrat. Campuran diaduk dengan baik dan didiamkan beberapa saat. Bla tampak ada minyak, disaring, kemudian dipanaskan menggunakan kondensor hingga semua alkohol menguap. Didinginkan maka akan terbentuk kristal putih. Ditimbang hasil yang diperoleh dan ditentukan titik leburnya. Disimpan hasilnya dalam wadah botol atau wadah plastik yang bersih dan tertutup rapat.

V. Hasil PercobaanBobot Fenol

= 17,51 gram

Bobot anhydrat asam phtalat

= 12,50 gramBerat kertas saring + PP

= 9,11 gram

Berat kertas saring

= 2,77 gram

-

Berat sampel (Phenol phtalein)

= 6,34 gramWarna Phenol phtalein = putih beningTitik lebur= 261 oCRendemen = Hasil praktek (g) x 100%

Hasil perhitungan teoritis (g)

Rendemen = 6,34 gram x 100%= 1,99%

318,32 gram

VI. PembahasanFenoftalein atau 3,3-bis(4-hydroxyphenyl)isobenzofuran-1(3H)-one memiliki rumus molekul C20H14O4. Fenolftalein berupa serbuk putih-kuning yang tidak berbau. Titik leleh fenolftalein berkisar antara 258oC sampai 262oC. Fenolftalein hampir tidak larut dalam air, sedikit larut dalam kloroform, dan larut dalam alkohol, dietil eter, larutan alkali encer, dan larutan panas alkali karbonat (Report On Carcinogens, 2002).

Fenolftalein termasuk indikator asam-basa golongan ftalein. Fenolftalein merupakan senyawa yang memiliki gugus fenol, sehingga bersifat sebagai asam lemah (Sukarta, 1999). Fenolftalein dapat dibuat melalui reaksi kondensasi, menggunakan fenol dan ftalat anhidrida. Reaksi pembuatan fenolftalein adalah sebagai berikut.

Gambar 1.Reaksi Pembuatan Fenolftalein (Petruevski dan Risteska, 2007).Fenolftalein sebagai indikator titrasi asam-basa sangat sering digunakan, umumnya digunakan dalam titrasi asam kuat dengan basa kuat. Dalam larutan dengan pH dibawah 8,3, fenolftalein tidak berwarna dan dalam larutan dengan pH 10, fenolftalein berwarna kemerahan. Di bawah pH 8,3, fenolftalein dinyatakan sebagai lakton fenol (Gambar 2.). Struktur fenolftalein berubah dan memberikan warna merah pada pH 10 (Gambar 3.).

Gambar 2. Struktur Fenolftalein di bawah pH 8,3

Gambar 3. Struktur Fenolftalein pada pH 10

Pada pH 8 ke bawah, struktur fenolftalein dapat disingkat H2P. Dalam rentangan pH 8 10, proton-proton asam akan diambil oleh ion OH- dari NaOH, sehingga memberikan ion P2- yang berwarna merah muda (Hughes, 2008).

Perubahan struktur dan mekanisme reaksi dari indikator fenolftaein adalah sebagai berikut.

Gambar 4. Perubahan Struktur Fenolftalein Dalam Suasana Basa

Gambar 5. Mekanisme Perubahan Struktur Fenolftalein Dalam Suasana Basa

Fenolftalein adalah senyawa kimia dengan rumus C20H14O4dan sering ditulis sebagai "HIn" atau "phph" dalam penulisan notasi yang lebih pendek. Fenolftalein sering digunakan dalam titrasi, yang menghasilkan larutan yang tidak berwarna dalam larutan asam dan menghasilkan warna merah muda dalam larutan basa. Bahkan dapat berubah menjadi warna ungu jika yang diuji merupakan larutan basa kuat.

Serbuk PhenolftaleinPhenolftalein memiliki massa molar318.32 g mol1dan kerapatan1.277 g/cm3. Fenolftalein tidak larut dalam air dan biasanya dilarutkan dalam alkohol atau eter untuk digunakan dalam percobaan.Fenolftaleinadalah asam lemah, yang dapat kehilangan ionH+dalam larutan. Molekul fenolftaleintidak berwarna,namun, ion fenolftalein adalah pink. Ketika basa ditambahkan ke fenolftalein, keseimbangan ion bergeser ke kanan, mengarah ke lebih ionisasi sebagai ionH+akan dihapus. Hal ini dapat dijelaskan dengan menggunakan prinsip Le Chatelier.Fenolftalein disintesis dari kondensasiphthalic anhydridedengan dua ekivalen fenol dalam kondisi asam. Proses ini ditemukan pada tahun 1871 oleh Adolf von Baeyer.Salah satu cara yang dapat digunakan untuk membuat larutan phenolftalein adalah sebagai berikut:1. Timbang 1 gram serbuk phenolftalein. Masukkan ke dalam alkohol (etanol) 95% 50 mL. Aduk sampai rata.2. Kemudian encerkan dengan air sampai 100 mL.Penggunaan phenolftalein sebagai pencahar dikhawatirkan dapat menyebabkan kanker ovarium.Aplikasi LarutanPhenoftalein diantaranya sebagai berikut :1. Sebagai pencahar.2. Mengidentifikasi kandungan hemoglobin dalam suatu sampel.3. Digunakan sebagai komponen mainan,misalnya sebagai komponen menghilang tinta, atau menghilang pewarna pada rambut boneka Barbie.4. Sebagai indikator asam dan basa suatu sampel.

VII. KesimpulanBerdasarkan praktikum yang telah dilakukan didapat hasil rendemen sebesar 1,99 %, dengan hasil hablur 6,34 gram dengan titik lebur 261 o C.PERCOBAAN 3

PEMBUATAN SENYAWA XANTHENE

(FLUORESCEIN DAN EOSIN)

I. Tujuan Percobaan

Mempelajari pembuatan zat warna xanthene dan prinsip-prinsip reaksi kondensasi

II. Dasar Teori

Tetrabromofluorecein adalah pewarna dalam lipstik yang sulit dihapus, cat kuku, wol, sutra dan kertas. Bersifat fotosensitifitas; menyebabkan peradangan bibir; pernafasan dan gejala gastrointestinal. Berbahaya bila terjadi kontak kulit (iritan), kontak mata (iritan), tertelan, terhirup. Substansi yang beracun untuk membran mukosa. Penggunaan jangka panjang dapat menyebabkan kerusakan organ.Zat warna ini dibuat dari reaksi kondensasi resorsinol dengan anhidrida ftalat dengan adanya katalisator ZnCl2, H2SO4, atau asam oksalat anhidrat. Yang termasuk senyawa xanthene adalah fluorescein, eosin, dan rhodamin-B (fluorescein tidak termasuk zat warna).III. Alat dan BahanAlat- alat yang digunakan:

1. Labu alas bulat 300 ml.2. Refluks .3. Gelas ukur.4. Corong.5. Penangas minyak.6. Neraca.Bahan-bahan yang digunakan:

1. Anhidrat ftalat.2. Minyak oli.3. Resorsinol .4. ZnCl2.5. HCl pekat.6. Aquadest.7. Ethanol .8. Air brom.IV. Cara Kerja

A. Pembuatan Fluorescein

1. Dimasukkan 7,4 g anhidrat ftalat, 11 g resorsinol `vke dalam labu bulat 300 ml.

2. Dipanaskan diatas penangas minyak dengan suhu 180oC

3. Disiapkan 5-7 g ZnCl2 anhidrat dalam bentuk serbuk (jangan dibirkan terlalu lama di udara).

4. Dimasukkan ZnCl2 ke dalam campuran ftalat, jaga suhu agar tetap stabil dan cam puran daduk setiap beberapa menit. Reaksi sempurna bila larutan menjadi pekat dan tidak perlu dilakukan pengadukan lebih lanjut.5. Turunkan temperatur minyak sampai 100o C dan ditambahkan 100 ml air yang mengandung 5 ml HCl pekat.

6. Dinaikkan temperatur minyak sampai mendidih. Campursn diaduk setiap melewati suhu 110o C. Pendidihan dilanjutkan sampai campuran reaks sempurna dan garam Zn telah larut.

7. Dikumpulkan dan disaring dengan corong buchner, dicuci dengan akuades, dikeringkan, dan ditimbang.

B. Pembuatan Eosin

1. Dimasukkan ke dalam labu 10 g fluoresein dan 40 ml etanol.2. Dipanaskan di atas penangas minyak dengan api kecil, kemudian ditmbahkan 8 ml air brom setets demi setetes.

3. Setiap penambahan campuran , dikeluarka dari penangas, dikocok, baru diletakkan lagi di atas penangas. Biasanya dibutuhkan waktu 15 menit untuk penambahan air brom. Mula-muka terbentuk bromofluorescein yang larut dan akhirnya terbentuk tetrabromo (eosin). Eosin hanya sedikit larut dalam alkohol dan akan tekristalisasi.

4. Dibiarkan campuran reaksi selama 2 jam dalam suhu kamar.

5. Disaring, dicuci dengan alkohol, dikeringkan di udara terbuka, dan ditimbang hasilnya.

V. Hasil PengamatanFluorescein : Data pengamatan

Rendemen = Hasil praktek (g) x 100%

Hasil perhitungan teoritis (g)

Berat anhidrat Pthalat

= 7,49 gramBerat Resolsinol

= 11,07 gramBerat Seng diklorida = 7,12 gram

Berat kertas saring + endapan fluorescein = 18,24 gramBerat kertas saring

= 1,33 gram

-

Berat endapan

= 16,91 gramWarna = endapan berwarna cokelat kemerahan.Warna larutan sebelum disaring = larutan berwarna hijau kekuningan. Perhitungan

Rendemen = 16,91 gr x 100%

= 5,089 %332,31 grEosin

: Data pengamatan

Berat fluorescein= 10,02 gramEthanol

= 40 mlAir brom = 8 ml

Berat kertas saring + endapan eosin = 13,72 gram

Berat kertas saring

= 1,43 gram

-

Berat endapan

= 12,29 gramWarna = larutan berwarna merah bataPerhitungan

Rendemen = 12,29 gr x 100%

= 1,969%624,0572 grVI. PembahasanPewarna Xanthene dapat diidentifikasi dengan fitur struktural umum di bawah ini. Zat warna xanthene dapat diperoleh dengan kondensasi fenol dengan anhidrida ftalat dengan adanya seng klorida, asam sulfat atau asam oksalat anhidrat. Hal ini disiapkan oleh pemanasan anhydridge resorsinol (2 molekul) dan ftalat (1 molekul) dengan klorida seng pada 190oC. Berikut adalah macam macam zat warna xanthene :

a. Fluorescein

Fluorescein merupakan pewarna berupa bubuk merah yang tidak larut dalam air.

Fluorescein

Sebuah larutan encer fluorescein dalam natrium hidroksida memberi fluoresensi kuning-hijau apabila terkena cahaya kuat. Hal ini digunakan untuk melacak pasokan air limbah yang terkontaminasi, karena jika jumlah yang kecil dimasukkan ke dalam pada sumber dicurigai , warna akan terdeteksi pada beberapa jarak dari sumber, bahkan setelah pengenceran yang luas. Selama Perang Dunia II, fluoresein digunakan sebagai penanda untuk pilot kelautan yang harus diselamatkan dari pesawat terbang di atas air. Hal ini juga membantu dalam menempatkan pencarian mereka. Fluorescein juga digunakan sebagai pencahar ringan. Garam natrium fluorescein disebut Uranine. Zat warna digunakan untuk pewarna wol dan sutra. Berikut adalah gambaran sintesis fluorescein.

Sintesis dari fluorescein

b. Eosin

Eosin merupakan garam natrium dari tetrabromofluorescein yang berwarna merah dan larut dalam air. Eosin diperoleh dari bromonasi fluorescein dalam asam asetat glasial untuk memberikan tetrabromofluorescein. Zat warna ini ditambah dengan natrium hidroksida dapat menghasilkan pewarna.

Larutan eosin basa menunjukkan fluoresensi kuning-hijau. Eosin digunakan untuk pencelupan wol, sutra, dan kertas, untuk membuat tinta merah dan sebagai pewarna dalam lipstik dan poles kuku. Eosin dapat digunakan untuk mewarnai sitoplasma, kolagen dan serat otot untuk pengujian di bawah mikroskop. Struktur yang mudah diwarnai dengan eosin disebut eosinofil. Secara etimologi nama eosin berasal dari Eos, kata Junani kuno untuk fajar dan nama Dewi Junani Kuno fajar.Eosin-BVII. KESIMPULANDari hasil praktikum yang didapat adalah rendeme fluorescein sekitar 5,089 % dan rendemen eosin adalah 1,969 %.

PERCOBAAN 4ISOLASI TRIMIRISTIN DARI BUAH PALA

I. Tujuan Percobaan

Mahasiswa diharapkan dapat menunjukkan kemahiran dalam hal teknik-teknik laboratorium yang pokok dalam pemisahan senyawa bahan alam.

II. Dasar TeoriPada percobaan ini dilakukan isolasi trimiristin sebagai bahan aktif yang terdapat dalam buah pala. Trimiristin adalah senyawa organic yang termasuk dalam golongan lemak yaitu:

Sifat-sifatnya adalah senyawa non polar, larut baik dalam pelarut non polar antara lain eter (titik didih 35oC), mempunyai titik leleh 56oC. Proses isolasinya bias digambarkan menurut diagram berikut:

Proses pemisahan yang terjadi disini, mula-mula senyawa-senyawa / komponen-komponen non polar akan terekstraksi ke dalam eter yang dengan cara dekantasi atau penyaringan bisa dipisahkan dari pala residu. Sedangkan pelarut dikeluarkan dengan destilasi (mengkisatkan), kemudian ditambahkan methanol (pelarut polar) yang karena perbedaan kepolarannya maka kelarutan trimiristin dalam campuran akan berkurang, sehingga trimiristin akan menggendap atau mengkristal.III. Alat dan BahanAlat- alat yang digunakan:

8. Erlenmeyer .9. Pipet ukur.10. Gelas ukur.11. Corong.12. Corong buchner.13. Neraca.Bahan-bahan yang digunakan:

9. Biji pala.10. Eter.11. Methanol .IV. Cara Kerja1. Ditimbang 15 gram buah pala yang sudah dipotong-potong kecil-kecil (berupa serbuk) dalam Erlenmeyer 250 ml yang dilengkapi dengan tutup gelas atau gabus.

2. Ditambahkan dengan hati-hati ke dalamnya 30 ml eter. Dengan hati-hati campuran dikocok dengan menggoyang-goyangkan labu dan tiap waktu tertentu tutup labu dibuka (sebab tekanan uap eter sangat tinggi) dengan hati-hati.

3. Dilakukan pengadukan selama 15 menit sampai tercampur dengan baik. Setelah itu dibiarkan sebentar hingga residu pala terpisah dengan baik kemudian dekantasi dan saring dengan menggunakan corong biasa.

4. Proses ektraksi tersebut diulangi lagi sekali dengan cara dan kondisi yang sama, lalu filtrate disatukan. Larutan dikisatkan dengan destilasi sampai 35 ml. (hati-hati eter sangat mudah terbakar dan beracun), digunakan penangas air hangat tanpa air di sekitarnya.

5. Dimasukkan sedikit demi sedikit sambil diaduk-aduk 70 ml methanol ke dalam larutan di atas. Endapan akan mulai terbentuk selama penambahan methanol. Kumpulkan endapan tersebut dengan disaring menggunakan corong Buchner. Cuci sekali lagi dengan sedikit campuran eter-metanol ( 1 : 1), lalu dibiarkan kristal trimiristin dari pala (bahan) yang diisolasi. Tentukan titik leleh trimiristin yang diperoleh.

V. Hasil PercobaanBobot Pala

= 15,0022 gramBerat kertas saring + trimiristin= 2,2111 gram

Berat kertas saring

= 0,314 gram

-

Berat trismistin

= 1,8971 gram Hasil yang didapatkan berupa Kristal kuning muda.Titik leleh Trimiristin = 62oCPerhitunganRendemen = Hasil praktek (g) x 100%

Berat biji pala (g)

Rendemen = 1,8971 gr x 100% = 12,64 % 15,0022 grVI. PembahasanTrimiristin adalah zat aktif yang terdapat dalam buah pala. Pada saat percobaan buah pala yang digunakan dipotong kecil-kecil (berupa serbuk) yang bertujuan untuk mempercepat dan mempermudah proses ekstraksi, sehingga ekstraksi berlangsung optimal. Pereaksi yang digunakan untuk melakukan ekstraksi adalah eter. Setelah penambahan methanol endapan akan terbentuk, endapan tersebut adalah trimiristin. Pencucian dilakukan dengan menggunakan eter-methanol (1:1). Kristal trimiristin yang terbentuk berwarna kuning muda.

Ekstraksi merupakan proses pemisahan bahan dari campurannya dengan menggunakan pelarut. Ekstrak adalah suatu produk hasil pengambilan zat aktif dari tanaman menggunakan pelarut, tetapi pelarutnya diuapkan kembali sehingga zat aktif ekstrak menjadi pekat. Bnetuknya dapat kental atau kering tergantung apakah sebagian aja pelarut yang diuapkan atau seluruhnya.Ekstrak dapat dibedakan berdasarkan konsistesi, komposisi dan senyawa aktif yang terdapat di dalamnya.Berdasarkan konsistensinya ekstrak dibagi menjadi 3, yaitu :1. Ekstrak cair : Ekstrak cair, tingtur, maserat minyak (Extracta Fluida Liquida)2. Semi solid : Ekstrak kental (Extracta spissa)3. Kering : Ekstrak kering (Extracta sicca)

Ekstrak punya 3 bentuk fisik, yaitu cairan, setengah padat/ kental dan serbuk kering. Untuk ekstrak cair bisa dibuat dengan menyari simplisia dengan pelarut tanpa pelarutnya diaupkan, atau menambahkan sjumlah pelarut ke dalam ekstrak kental sehingga ekstrak tersebut jadi cair. Yang pertama biasanya dinamakan tingtur, yang kedua disebut ekstrak cair.

Berdasarkan komposisi ekstrak dibagi menjadi 3, yaitu :1. Ekstrak alami, ekstrak murni, sediaan obat herbal alami (Native Herbal Drugs Preparation)kering (sicca), berminyak (oleoresin). Tidak mengandung solvent (air, etanol), eksipien (maltodekstrin, laktosa, sakarosa)2. Ekstrak non alami, sediaan ekstrak herbal, sediaan ekstrak (Non native Herbal Drugs Preparation). Ekstrak non alami dapat berbentuk extracta spissa (campuran gliserin, propilenglikol); extracta sicca (maltodekstrin, laktosa); extracta fluida, tingtur (tinctura), (air, etanol); sediaan cair non alkohol (gliserin, air) ; dan maserat berminyak.

Ekstrak juga berdasarkan komposisi yang ada di dalamnya dibagi menjadi ekstrak murni dan sediaan ekstrak. Disebut ekstrak murni apabila ekstraknya tidak mengandung pelarut maupun bahan tambahan lainnya. Ekstrak seperti ini biasanya merupakan produk antara, bersifat higroskopis dan memerlukan proses selanjutnya untuk menjadi sediaan ekstrak.Ekstrak non alami atau sediaan ekstrak herbal merupakan pengolahan lebih lanjut dari ekstrak murni, untuk dibuat sediaan ekstrak, baik kental maupun serbuk kering untuk selanjutnya dibuat sediaan obat seperti kapsul, tablet, cairan dan lain-lainnya.

Berdasarkan pengetahuan tentang senyawa aktif yang terdapat di dalamnya, ekstrak dapat dibedakan menjadi 3, di antaranya adalah:1. Standardised extractsmerupakan ekstrak yang diperoleh dengan mengatur kadar senyawa aktif (menambahkan dalam batas toleransi) yang aktifitas terapeutiknya diketahui dengan tujuan untuk mencapai komposisi yang dipersyaratkan.Standardised extract diperoleh dengan menambahkan bahan pembantu atau mencampur ekstrak hasil bets produksi antara ekstrak yang kandungan senyawa aktifnya tinggi dengan ekstrak yang kandungan senyawa aktifnya rendah yang sering terjadi pada pembuatan sediaan ekstrak alami (native herbal drug preparation), sehingga kandungan senyawa aktifnya memenuhi baku yang ditetapkan.Contoh:Ekstrak daun digitalis, ekstrak kering daun Senna (mengandung hidroksi antrasen 5,5 8,0% dihitung sebagai sennoside B), ekstrak kering daun Belladona (mengandung alkaloid hyoscyamin 0,95 1,05%).2. Quantified extract merupakan ekstrak yang diperoleh dengan mengatur kadar senyawa yang diketahui berperan dalam menimbulkan khasiat farmakologi/klinis dengan tujuan agar khasiatnya sama.Quantified extract memiliki kandungan senyawa dengan aktifitas yang diketahui, tetapi senyawa yang bertanggung jawab terhadap aktivitas tidak diketahui. Pengaturan kadar senyawa tersebut hanya dapat diperoleh dengan cara mencampur ekstrak pada satu bets tertentu dengan ekstrak bets lain yang memiliki spesifikasi sama dan dalam jumlah native herbal extract yang konstan.Contoh: Ekstrak daun Ginkgo biloba, ekstrak herba Hypericum perforatum

3. Other extractmerupakan ekstrak yang diperoleh dengan mengatur proses produksi (keadaan simplisia, pelarut, kondisi/cara ekstraksi) serta spesifikasinya.Pada other extract kandungan senyawa yang bertanggung jawab terhadap aktifitas tidak diketahui (belum diketahui senyawa yang bertanggung jawab menimbulkan efek farmakologi)Contoh : Cratageus Herba dan Passiflora incarnate.

Menurut Farmakope Eropa, ada tiga tipe ekstrak yaitu ekstrak tipe A (Standardized extracts), tipe B (Quantified extracts), dan tipe C (Other extracts).

1. Type A (Standardized extracts): Ekstrak yang distandardisasi berdasarkan senyawa aktif atau golongan senyawa yang diketahui.2. Type B (Quantified exracts) : Ekstrak yang distandardisasi berdasarkan kandungan senyawa dengan aktifitas yang diketahui, sedangkan senyawa aktif yang bertanggung jawab terhadap aktifitas belum diketahui.3. Type C (Other extracts) : Ekstrak yang distandardisasi berdasarkan senyawa dalam ekstrak namun tidak diketahui hubungan farmakologinya, dibuat agar selalu memiliki mutu yang sama dengan mengatur proses produksi (keadaan simplisia, pelarut, kondisi/cara ekstraksi) serta spesifikasinya.Hal-hal yang harus di perhatikan dalam pembuatan ekstrak, antara lain:1. Jumlah simplisia yang akan di ekstrak.

2. Derajat kehalusan simplisia.3. Jenis pelarut yang akan digunakan. 4. Temperatur/suhu penyari akan menentukan jumlah dan kecepatan penyaringan.5. Lama waktu penyarian.6. Proses ekstraksi.(Teknologi Bahan Alam, 21)Proses Pembuatan Ekstrak

a. Pembuatan serbuk simplisia dan klasifikasinyaProses awal pembuatan ekstrak adalah tahapan pembuatan serbuk simplisia kering (penyerbukan). Dari simplisia dibuat serbuk simplisia dengan peralatan tertentu sampai derajat kehalusan tertentu. b. Cairan pelarutCairan pelarut dalam proses pembuatan ekstrak adalah pelarut yang baik (optimal) untuk senyawa kandungan yang berkhasiat atau yang aktif, dengan demikian senyawa tersebut dapat terpisahkan dari bahan dan dari senyawa kandungan lainnya, serta ekstrak hanya mengandung sebagian besar senyawa kandungan yang diinginkan.Faktor utama untuk penimbangan pada pemilihan cairan penyari adalah sebagai berikut:1. Selektivitas 2. Kemudahan bekerja dan proses dengan cairan tersebut3. Ekonomis4. Ramah lingkungan 5. Keamanan.

c. Separasi dan pemurnianTujuan dari tahap ini adalah menghilangkan (memisahkan) senyawa yang tidak dikehendaki semaksimal mungkin tanpa berpengaruh pada senyawa kandungan yang di kehendaki, sehingga diperoleh ekstrak yang lebih murni.Proses-proses pada tahap ini adalah pengendapan, pemisahan dua cairan tak campur, sentrifugasi, dekantasi, fitrasi serta proses adsorbs dan penukaran ion.d. Pemekatan / Penguapan (vaporasi dan evaporasi)Pemekatan berarti peningkatan jumlah partial solute (senyawa terlarut) secara penguapan pelarut tanpa sampai menjadi kondisi kering, ekstrak hanya menjadi kental/pekat.e. Pengeringan EkstrakPengeringan berarti menghilangkan pelarut dari bahan sehingga menghasilkan serbuk, masa kering rapuh, tergantung proses dan peralatan yang digunakan. Ada beberapa proses pengeringan ekstrak, yaitu :1. Pengeringan Evaporasi2. Pengeringan Vaporasi 3. Pengeringan Sublimasi4. Pengeringan Konveksi5. Pengeringan Kontak6. Pengeringan Radiasi7. Pengeringan Dielektikf. RendemenRendemen adalah perbandingan antara ekstrak yang diperoleh dengan simplisia awal.Metode EkstraksiEkstraksi dengan menggunakan pelaruta. Cara dinginMaserasi Maserasi adalah proses pengekstraksi simplisia dengan menggunakan pelarut dengan beberapa kali pengocokan atau pengadukan pada temperature ruangan (kamar). Secara teknologi termasuk ekstraksi dengan prinsip metode pencapaian konsentrasi pada keseimbangan. Maserasi kinetik berarti dilakukan pengadukan dan kontinu (terus-menerus). Remaserasi berarti dilakukan pengurungan penambahan pelarut setelah dilakukan penyaringan maserat pertama, dan seterusnya.Perkolasi Perkolasi adalah ekstraksi dengan pelarut yang selalu baru sampai sempurna (exhaustive extaction) yang umumnya dilakukan pada temperature ruangan,. Proses terdiri dari tahap pengembangan bahan, tahap maserasi antara, tahap perkolasi sebenarnya (penetesan/penampungan ekstraksi), terus-menerus sampai diperoleh ekstraksi (perkolat) yang jumlahnya 1-5 kali bahan.b. Cara PanasRefluks Refluks adalah ekstraksi dengan pelarut pada temperature titik didihnya, selama waktu tertentu dan jumlah pelarut terbatas yang elatif konstan dengan adanya pendingin balik. Umumnya dilakukan penggulungan proses pada residu pertama sampai 3-5 kali sehingga dapat termasuk proses ekstraksi sempurna.SoxhletSoxhlet adalah ekstraksi menggunakan pelarut yang selalu baru yang umumnya dilakukan dengan alat khusus sehingga terjadi ekstraksi kontinu dengan jumlah pelarut relatif konstan dengan adanya pendingin balik.DigestiDigesti adalah maseri kinetic (dengan pengadukan kontinu) pada temperature yang lebih tinggi dari temperature ruangan (kamar), yaitu secara umum dilakukan pada temperature 40 50oC.Infuse Infuse adalah ekstraksi dengan pelarut air pada temperature penangas air (bejana infuse tercelup dalam penangas air mendidih, temperature terukur 96 98oC) selama waktu tertentu (15 20 menit).DekokDekok adalah infuse pada waktu yang lebih lama ( 30oC) dan temperature sampai titik didih air.Destilasi uapDestilasi uap adalah ekstraksi senyawa kandungan menguap (minyak atsiri) dari bahan (segar atau simplisia) dengan uap air berdasarkan peristiwa tekanan parsial senyawa kandungan menguap dengan fase uap air dari ketel secara kontinu sampai sempurna dan diakhiri dengan kondensasi fase uap campuran (senyawa kandungan menguap ikut terdestilasi) menjadi destilat air bersama senyawa kandungan yang memisah sempurna atau memisah sebagian.Destilasi uap, bahan (simplisia) benar-benar tidak tercelup ke air yang mendidih, namun dilewati uap air sehingga senyawa kandungan menguap ikut terdestilasi.(Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat, 9-12)VII. KesimpulanPada praktikum kali ini dapat ditarik kesimpulan bahwa di dalam buah pala positif terdapat trimiristin, hal ini ditunjukan setelah penambhan eter methanol 1: 1 terbentuk Kristal trimiristin yang terbentuk berwarna kuning. Berdasrkan praktikum yang telah dilakukan diperoleh trismiristin sebanyak 12,64% PERCOBAAN 5PENGUJIAN SENYAWA ALAM(Fitokimia)

I. Tujuan PercobaanMengidentifikasi beberapa jenis senyawa organic metabolit sekunder melalui analisis kualitatif.

II. Dasar TeoriFitokimia adalah cabang ilmu kimia organik yang berada diantara kimia organik bahan alam dan biokimia tumbuhan. Ilmu ini mempelajari keanekaragaman senyawa organik yang dihasilkan oleh tumbuhan, yaitu struktur kimianya, biosintesisnya (Habone. 1987). Pengetahuan tentang fitokimia suatu tumbuhan sangat diperlukan sebelum kita melakukan suatu proses pemisahan, pemurnian dan identifikasi suatu senyawa yang terdapat dalam tumbuhan tersebut. Untuk analisa fitokimia suatu jaringan tumbuhan, idealnya digunakan jaringan tumbuhan yang segar yang telah dicelup ke dalam etanol mendidih segera setelah dipetik, hal ini untuk mencegah terjadinya oksidasi ataupun hirolisis enzimatik. Selain itu dapat juga digunakan jaringan tumbuhan yang telah dikeringkan sehingga sampel tersebut masih tetap dalam keadaan yang baik untuk dianalisis. Senyawa alam yang akan dianalisis adalah terpenoid/steroid, flavonoid, alkaloid, saponin dan tannin.III. Alat dan BahanAlat- alat yang digunakan:

7. Tabung reaksi.8. Pipet ukur.9. Gelas ukur.10. Corong.11. Water bath.12. Neraca.Bahan-bahan yang digunakan:

9. Lempuyang gajah.10. Daun tapak dara.11. Kulit jeruk nipis.12. Serbuk Mg.13. HCl pekat.14. Amil alkohol.15. H2SO4 2M.16. Kloroform.17. Methanol.18. FeCl3.19. Dietil eter.20. Kertas saring.21. Ammonia.IV. Cara Kerja1. Uji Flavonoida. Sebanyak 0,1 gram ekstrak dilarutkan dalam 100 ml air panas .b. Dididihkan larutan selama 5 menit kemudian disaring.c. 5 ml Filtrat hasil penyaringan ditambahkan 0,10 mg serbuk Mg, 1ml HCl pekatan 1 ml Amil alkohol, kemudian dikocok kuat kuat.d. Jika terbentuk warna merah,kuning atau jingga pada lapisan amil alkohol.2. Uji Alkalis

e. Sebanyak 0,3 gram ekstrak dilrutkan dalam 10 ml kloroform-ammonia lalu disaring.f. Filtrat hasil penyaringan ditambahkan beberapa tetes H2SO4 2M, kemudian dikocok sehingga terbentuk dua lapisan. Lapisan asam (tidak berwarna) dipipet ke dalam tabung reaksi dan ditambahkan pereaksi Mayer, Dragendorf, dan Wagner. g. Jika terdapat endapan putih dengan pereaksi mayer, endapan merah dengan jingga dengan pereaksi Dragendorf dan endapan coklat dengan pereaksi Wagner, maka terdapt alkaloid ekstrak tersebut.

3. Uji Triterpenoid Steroid

a. Sebanyak 0,3 gram ekstrak ditambahkan 25 ml dietileter dan dikocok.

b. Lapisan dietil eter dipisahkan dan ditambahkan pereaksi Lieberman-Buchard.

c. Adanya triterpenoid-steroid ditunjukkan dengan terbentuknya warna hijau-biru.4. Uji Saponin

a. Residu yang tidak larut dalam dietil eter pada uji triterpenoid-steroid dilarutkan dalam 5 ml air dan dipanaskan selama 5 menit, lalu didinginkan dan dikocok kuat-kuat.b. Terbentuknya busa yang mantap selama 15 menit menunjukkan adanya saponin.5. Uji Tanin

a. Sebanyak 0,1 gram ekstrak dilarutkan dengan 1 ml methanol, lalu disaring.b. Filtratnya ditambahkan beberapa tetes FeCl3 1%.

c. Adanya tannin ditunjukkan dengan terbentuknya warna hijau, biru, atau ungu.V. Hasil Percobaan1. Uji FlavonoidDaun tapak dara dalam lapisan Amil alkohol: terbentuk warna kuning.Kulit jeruk dalam lapisan Amil alkohol: terbentuk warna kurning.Lempuyang gajah dalam lapisan Amil alkohol: terbentuk warna jingga.2. Uji Alkaloid

Data pengamatan daun tapak dara:a. Lapisan jernih + pereaksi Mayer ( terbentuk endapan putih.b. Lapisan jernih + peraksi Dragendorf ( terbentuk endapan merah jingga.c. Lapisan jernih + pereaksi Wagner ( terbentuk endapan coklat.

Data pengamatan Kulit Jeruk:

a. Lapisan jernih + pereaksi Mayer ( terbentuk endapan putih.b. Lapisan jernih + pereaksi Dragendorf ( terbentuk endapan merah jingga.c. Lapisan jernih + pereaksi Wagner ( terbentuk endapan coklat.Data pengamatan Lempuyang gajah:

d. Lapisan jernih + pereaksi Mayer ( terbentuk endapan putih.e. Lapisan jernih + pereaksi Dragendorf ( terbentuk endapan merah jingga.f. Lapisan jernih + pereaksi Wagner ( terbentuk endapan coklat.3. Uji Tanin

Pengatamatan daun tapak dara: terbentuk warna hijau samar.Pengatamatan kulit jeruk : terbentuk warna hijau samar.Pengatamatan lempuyang gajah: terbentuk warna hijau samar.4. Uji Triterpenoid Steroid

Pengatamatan daun tapak dara: terbentuk warna hijau-biru.

Pengatamatan kulit jeruk : terbentuk warna hijau-biru.Pengatamatan lempuyang gajah: terbentuk warna hijau-biru.5. Uji SaponinPengatamatan daun tapak dara: busa bertahan selama 15 menit.Pengatamatan kulit jeruk : busa bertahan selama < 15 menit.

Pengatamatan lempuyang gajah: busa bertahan selama < 15 menit.VI. PembahasanSenyawa flavonoid adalah suatu kelompok senyawa fenol yang terbesar yang ditemukan di alam. Senyawa-senyawa ini merupakan zat warna merah, ungu, biru, dan sebagai zat warna kuning yang ditemukan dalam tumbuhan. Flavonoid merupakan senyawa metabolit sekunder yang terdapat pada tanaman hijau, kecuali alga. Flavonoid yang lazim ditemukan pada tumbuhan tingkat tinggi (Angiospermae) adalah flavon dan flavonol dengan C- dan O-glikosida, isoflavon C- dan O-glikosida, flavanon C- dan O-glikosida, khalkon dengan C- dan O-glikosida, dan dihidrokhalkon, proantosianidin dan antosianin, auron O-glikosida, dan dihidroflavonol O-glikosida. Golongan flavon, flavonol, flavanon, isoflavon, dan khalkon juga sering ditemukan dalam bentuk aglikonnya Menurut Markham (1988).

Flavonoid tersusun dari dua cincin aromatis yang terdiri dari 15 atom karbon, dimana dua cincin benzene (C6) terikat pada suatu rantai propana (C3) sehingga membentuk suatu susunan C6-C3-C6 .

Kerangka flavonoid :

Susunan ini dapat menghasilkan tiga jenis struktur senyawa flavonoid yaitu:

1. Flavonoida atau 1,3-diarilpropana

2. Isoflavonoida atau 1,2-diarilpropana

3. Neoflavonoida atau 1,1-diarilpropana

Istilah flavonoida diberikan untuk senyawa-senyawa fenol yang berasal dari kata flavon, yaitu nama salah satu jenis flavonoida yang terbesar jumlahnya dalam tumbuhan. Senyawa-senyawa flavon ini mempunyai kerangka 2-fenilkroman, dimana posisi orto dari cincin A dan atom karbon yang terikat pada B dari cincin 1,3-diarilpropanan dihubungkan oleh jembatan oksigen sehingga membentuk cincin heterosiklik yang baru (cincin C). Kelas-kelas yang berlainan dalam golongan ini dibedakan berdasarkan cincin heterosiklik-oksigen tambahan dan gugus hidroksil yang tersebar menurut pola yang berlainan. Flavonoid sering terdapat sebagai glikosida. Golongan terbesar flavonoid berciri mempunyai piran yang menghubungkan rantai tiga-karbon dengan salah satu dari cincin benzene. Sistem penomoran untuk turunan flavonoid diberikan dibawah:

Di antara flavonoid khas yang mempunyai kerangka seperti diatas berbagai jenis dibedakan tahanan oksidasi dan keragaman pada rantai C3.Secara umumsintesis flavonoid terdiri dari dua jalur yaitu jalur poliketida, dan jalur fenil propanoid. Jalur poliketida ini merupakan serangkaian reaksi kondensasi dari tiga unit asetat atau malonat. Sedangkan jalur fenilpropanoid atau biasa disebut jalur shikimat1. Jalur poliketidaReaksi yang terjadi pada jalur ini diawali dengan adanya reaksi antara asetil CoA dengan CO yang akan menghasilan malonat CoA. Setelah itu malonat CoA akanbereaksi dengan asetil CoA menjadi asetoasetil CoA. Asetoaseil CoA yang terbentukakan bereaksi dengan malonat CoA dan reaksi ini akan berlanjut sehingga membentuk poliasetil. Poliasetil yang terbentuk akan berkondensasi dan berekasi dengan hasil dari jalur fenilpropanoid akan membentuk suatu flavonoid. Jenis flavonoid yang terbentuk dipengaruhi dari bahan fenilpropanoid2. Jalur Fenilpropanoid.Jalur ini merupakan bagian dari glikolisis tetapi tidak memperoleh suatu asam piruvat melainkan memperoleh asam shikimat. Reaksi ini melibatkan eritrosa dan fosfo enol piruvat. Asam shikimat yang terbentuk akan ditransformasikan menjadi suatu asam amino yaitu fenilalanin dan tirosin. Fenilalanin akan melepas NH3 dan membentuk asam sinamat sedangkan tirosin akan membentuk senyawa turunan asam sinamat karena adanya subtitusi pada gugus benzennya

Seperti hasil yang didapatkan pada percobaan, daun tapak dara mengandung Flavonoid. Hal ini ditunjukkan dengan terbentuknya warna kuning pada lapisan Amil alkohol, Begitupun kulit jeruk mengandung Flavonoid, karena terbentuk warna yang sama dengan daun tapak dara. Lempuyang gajah pun mengandung Flavonoid, karena terbentuk endapan yang sama dengan daun tapak dara.Alkaloid merupakan suatu golongan senyawa organik yang terbanyak ditemukan di alam. Hampir seluruh alkaloid berasal dari tumbuh-tumbuhan dan tersebar luas dalam berbagai jenis tumbuhan tingkat tinggi. Sebagian besar alkaloid terdapat pada tumbuhan dikotil sedangkan untuk tumbuhan monokotil dan pteridofita mengandung alkaloid dengan kadar yang sedikit.

Alkaloid merupakan senyawa yang bersifat basa yang mengandung satu atau lebih atom nitrogen dan biasanya berupa sistem siklis. Alkaloid mengandung atom karbon, hidrogen, nitrogen dan pada umumnya mengandung oksigen. Senyawa alkaloid banyak terkandung dalam akar, biji, kayu maupun daun dari tumbuhan dan juga dari hewan. Senyawa alkaloid merupakan hasil metabolisme dari tumbuhtumbuhan dan digunakan sebagai cadangan bagi sintesis protein. Kegunaan alkaloid bagi tumbuhan adalah sebagai pelindung dari serangan hama, penguat tumbuhan dan pengatur kerja hormon. Alkaloid mempunyai efek fisiologis.

Garam alkaloid dan alkaloid bebas biasanya berupa senyawa padat dan berbentuk kristal tidak berwarna (berberina dan serpentina berwarna kuning). Ada juga alkaloid yang berbentuk cair, seperti konina, nikotina, dan higrina. Sebagian besar alkaloid mempunyai rasa yang pahit. Alkaloid juga mempunyai sifat farmakologi. Sebagai contoh, morfina sebagai pereda rasa sakit, reserfina sebagai obat penenang, atrofina berfungsi sebagai antispamodia, kokain sebagai anestetik lokal, dan strisina sebagai stimulan syaraf.

Semua alkaloid mengandung paling sedikit sebuah nitrogen yang biasanya bersifat basa dan sebagian besar atom nitrogen ini merupakan bagian dari cincin heterosiklik. Batasan mengenai alkaloid seperti dinyatakan di atas perlu dikaji dengan hati-hati. Karena banyak senyawa heterosiklik nitrogen lain yang ditemukan di alam bukan termasuk alkaloid. Misalnya pirimidin dan asam nukleat, yang kesemuanya itu tidak pernah dinyatakan sebagai alkaloid.

Alkaloid tidak mempunyai nama yang sistematik, sehingga nama dinyatakan dengan nama trivial misalnya kodein, morfin, heroin, kinin, kofein, nikotin. Sistem klasifikasi alkaloid yang banyak diterima adalah pembagian alkaloid menjadi 3 golongan yaitu alkaloid sesungguhnya, protoalkaloid dan pseudoalkaloid. Suatu cara mengklasifikasikan alkaloid adalah cara yang didasarkan jenis cincin heterosiklik nitrogen yang merupakan bagian dari struktur molekul. Jenisnya yaitu pirolidin, piperidin, kuinolin, isokuinolin, indol, piridin dan sebagainya.

Gambar II.1 Struktur jenisjenis alkaloid

Garam alkaloid berbeda sifatnya dengan alkaloid bebas. Alkaloid bebas biasanya tidak larut dalam air (beberapa dari golongan pseudo dan protoalkaloid larut), tetapi mudah larut dalam pelarut organik agak polar (seperti benzena, eter, kloroform). Dalam bentuk garamnya, alkaloid mudah larut dalam pelarut organik polar.Klasifikasi alkaloid, diantaranya yaitu berdasarkan lokasi atom nitrogen di dalam struktur alkaloid dan berdasarkan asal mula kejadiannya (biosintesis) dan hubungannya dengan asam amino. Berdasarkan asal mulanya (biogenesis) dan hubungannya dengan asam amino, alkaloid dibagi menjadi tiga kelas, yaitu: 1.True alkaloid

Alkaloid jenis ini memiliki ciri-ciri; toksik, perbedaan keaktifan fisiologis yang besar, basa, biasanya mengandung atom nitrogen di dalam cincin heterosiklis, turunan asam amino, distribusinya terbatas dan biasanya terbentuk di dalam tumbuhan sebagai garam dari asam organik. Tetapi ada beberapa alkaloid ini yang tidak bersifat basa, tidak mempunyai cincin heterosiklis dan termasuk alkaloid kuartener yang lebih condong bersifat asam. Contoh dari alkaloid ini adalah koridin dan serotonin.

2.Proto alkaloid

Alkaloid jenis ini memiliki ciri-ciri; mempunyai struktur amina yang sederhana, di mana atom nitrogen dari asam aminonya tidak berada di dalam cincin heterosiklis, biosintesis berasal dari asam amino dan basa, istilah biologycal amine sering digunakan untuk alkaloid ini. Contoh dari alkaloid ini adalah meskalina dan efedrina.

3.Pseudo alkaloid

Alkaloid jenis ini memiliki ciri-ciri; tidak diturunkan dari asam amino dan umumnya bersifat basa. Contohnya adalah kafeina.Salah satu contohnya terbukti pada uji alkaloid, daun tapak dara mengandung alkaloid. Hal ini ditunjukkan dengan terbentuknya warna putih dengan pereaksi Mayer, endapan merah jingga dengan pereaksi Dragendorf, dan endapan coklat dengan pereaksi Wagner. Begitupun kulit jeruk mengandung alkaloid, karena terbentuk endapan yang sama dengan daun tapak dara. Lempuyang gajah pun mengandung alkaloid, karena terbentuk endapan yang sama dengan daun tapak dara. Penambahan methanol menyebabkan tidak terbentuknya dua lapisan, sehingga tidak ada lapisan jernih yang bias digunakan untuk larutan uji.Tanin (atau tanin nabati, sebagai lawan tanin sintetik) adalah suatu senyawa polifenol yang berasal dari tumbuhan, berasa pahit dan kelat, yang bereaksi dengan dan menggumpalkan protein, atau berbagai senyawa organik lainnya termasuk asam amino dan alkaloid.

Tanin (dari bahasa Inggris tannin; dari bahasa Jerman Hulu Kuno tanna, yang berarti pohon ek atau pohon berangan) pada mulanya merujuk pada penggunaan bahan tanin nabati dari pohon ek untuk menyamak belulang (kulit mentah) hewan agar menjadi kulit masak yang awet dan lentur. Namun kini pengertian tanin meluas, mencakup aneka senyawa polifenol berukuran besar yang mengandung cukup banyak gugus hidroksil dan gugus lain yang sesuai (misalnya karboksil) untuk membentuk perikatan kompleks yang kuat dengan protein dan makromolekul yang lain. Berikut adalah gambar dari asam tanat, yaitu:

Senyawa-senyawa tanin ditemukan pada banyak jenis tumbuhan; pelbagai senyawa ini berperan penting untuk melindungi tumbuhan dari pemangsaan oleh herbivora dan hama, serta dalam pengaturan pertumbuhan. Tanin yang terkandung dalam buah muda menimbulkan rasa kelat (sepat), perubahan-perubahan yang terjadi pada senyawa tanin bersama berjalannya waktu berperan penting dalam proses pemasakan buah.

Kandungan tanin dari bahan organik (serasah, ranting dan kayu) yang terlarut dalam air hujan (bersama aneka subtansi humus), menjadikan air yang tergenang di rawa-rawa dan rawa gambut berwarna coklat kehitaman seperti air teh, yang dikenal sebagai air hitam (black water). Kandungan tanin pula yang membuat air semacam ini berasa kesat dan agak pahit.

Pada uji tanin, hasil ekstrak daun tapak dara dan kulit jeruk dilarutkan dengan methanol, kemudian ditambahkan FeCl3 1% terbentuk warna hijau samar. Hal tersebut menunjukkan adanya Tanin dalam daun tapak dara, kulit jeruk dan lempuyang gajah.Pada uji Triterpenoid Steroid, ekstrak daun tapak dara dan kulit jeruk ditambahkan eter dan dikocok, setelah dikocok lapisan eter dipisahkan dan ditambahkan pereaksi Lieberman-Buchard, terbentuk warna Hijau Biru . Hal ersebut menunjukkan adanya Triterpenoid/Steroid pada daun tapak dara, kulit jeruk dan lempuyang gajah.Pada uji saponin, akan terbentuk busa dengan waktu bertahan yang bervariasi. Hal ini menunjukkan bahwa dalam daun tapak dara, lempuyang gajah dan kulit jeruk mengandung saponin. VII. KesimpulanPada praktikum kali ini dapat di tarik kesimpulan bahwa kita dapat mengidentifikasi beberapa jenis senyawa organik metabolit sekunder melalui analisis kualitatif. Dan ketiga bahan yang berasal dari alam tersebut mengandung kelima jenis senyawa organik metabolit sekunder.PERCOBAAN 7

EKSTRAKSI SOKHLET LEMAK DARI KEMIRI

I. Tujuan PercobaanPada akhir percobaan ini mahasiswa diharapkan dapat memahami, mengenai:a. Penentukan kadar lemak kasar senyawa senyawa yang larut dalam pelarut lemak

b. Ekstraksi lemak dengan menggunakan sokhlet.

II. Dasar TeoriPada penentuan kadar lemak kasar senyawa senyawa yang larut dalam pelarut lemak seperti eter, heksan dan petroleum eter di ekstrak dari sample kering oven ( dapat dipakai sample hasil penentuan kadar air ) dengan menggunakan sokhlet.Ekstrak eter, heksan atau petroleum eter disebut lemak kasar. Ekstrak ini di samping mengandung lemak (trigliserida) juga terdapat senyawa senyawa lain seperti fosfolipid, sterol, minyak atrisi, pigmen pigmen yang larut dalam lemak. Senyawa senyawa yang larut dalam air tidak terekstrak karena sample telah dikeringkan sebeleum di ekstrak dengan eter, heksan atau petroleum eter. III. Reaksi

IV. Alat dan BahanAlat- alat yang digunakan:

13. Sokhlet.14. Labu lemak.15. Desikator.16. Oven.17. Water bath.18. Neraca.19. Gelas ukur 100 ml.20. Pemanas listrik.Bahan-bahan yang digunakan:

22. Kapas.23. Petroleum eter 400 ml24. Kertas saring.25. Batu didih.26. Kemiri.V. Cara Kerja1. Ditimbang dengan teliti sekitar 10 gram contoh kedalam thimble2. Pasang radas sokhlet lalu masukkan thimble dan pelarut organik ( 1 x isi tabung atas) labu lemak kosong harus di timbang terlebih dahulu (a)3. Lakukan ekstraksi selama 2 jam. Setelah ekstraksi selesai, pelarut diuapkan rotary dengan evaporator dengan suhu 400 450C

4. Labu lemak diangkat dan dikeringkan dalam oven dengan suhu 1050C.

5. Dinginkan dalam desikator, lalu timbang (b).penimbangan di ulangi sampai bobot tetap

6. Lakukan percobaan 1-5 pada sample kedua yaitu Kacang tanahVI. Hasil Percobaan

Sample

: KemiriBobot kemiri

= 9,99 gramBerat Labu lemak + lemak + batu didih= 168,20 gram

Berat labu lemak kosong + batu didih= 163,12 gram

-

Berat lemak

= 5,08 gram VII. PERHITUNGANKadar Lemak (%) = Bobot tetap (b-a)x 100%Bobot contoh (bobot kering)

Kadar Lemak (%)= 0,58 gram x 100%

= 50,85%

9,99 gramVIII. PembahasanEkstraksi Soxhlet digunakan untuk mengekstrak senyawa yang kelarutannya terbatas dalam suatu pelarut dan pengotor-pengotornya tidak larut dalam pelarut tersebut. Sampel yang digunakan dan yang dipisahkan dengan metode ini berbentuk padatan. Dalam percobaan ini kami menggunakan sample kemiri. Ekstraksi soxhlet ini juga dapat disebut dengan ekstraksi padat-cair. Padatan yang diekstrak ditumbuk terlebih dahulu kemudian dibungkus dengan kertas saring dan dimasukkan kedalam ekstraktor soxhlet, sedangkan pelarut organic dimasukkan kepadal labu alas bulat kemudian seperangkat ekstraktor soxhlet dirangkai dengan kondensor. Ekstraksi dilakukan dengan memanaskan pelarut sampai semua analit terekstrak (kira-kira 6 x siklus). Hasil ekstraksi dipindahkan kerotary evaporator vacuum untuk diekstrak kembali berdasarkan titik didihnya.

Metode ekstraksi soxhlet digunakan untuk mengekstrak senyawa yang kelaarutannya terbatas dalamsuatu pelarut dan pengotor-pengotor tidak larut dalam pelarut tersebut. Prisip kerja dak ekstraksisoxhlet adalah memisahkan senyawa tertentu dari sampel padat dengan menggunakan titik didihtertentu dan senyawa tertentu.Pelarut yang baik dalam ektraksi soxhlet adalah pelarut yang mempunyai titik didih rendah seperti n-heksana yang mempunyai titik didih 69oC agar cepat menguap sehingga tidak menyebabkan kerusakanpada alat dan juga tidak membutuhkan watu yang lama untuk melakukan satu sirkulasi ektraksi.Dalam praktikum ini, kita melakukan dua tahap yang pertama menggunakan alat ektraktor soxhlet yangberfungsi untuk mengekstraksi kemiri sehingga pada tahap pertama ini akan diperoleh ektrak kemiri dann-heksana. Kedua, menggunakan rotary evaporator unyuk memisahkan antara ektrak kemiri dengan n-heksana (pelarutnya) dengan menggunkan perbedaan titik didih.Ekstraksi padat-cair digunakan untuk memisahkan analit yang terdapat pada padatan menggunakan pelarut organic. Padatan yang akan diekstrak dilembutkan terlebih dahulu dengan cara ditumbuk ataujuga diiris-iris. Kemudian padatan yang telah halus dibungkus dengan kertas saring. Padatan yang terbungkus kertas saring dimasukkan kedalam alat ekstraksi soxhlet. Pelarut organik dimasukkan kedalam labu alas bulat. Kemudian alat ektraksi soxhlet dirangkai dengan kondensor . Ekstraksi dilakukan dengan memanaskan pelarut organic sampai semua analit terekstrak (Khamnidal.2009).Massa jenis (densitas) hasil ekstraksi dihitung dengan mennggunakan persamaan:D = M/VKet: D = densitas (gr/lt)M = Massa cairan (gr)V = Volume cairan (lt) Kemiri (ateuris moluena) adalah tumbuhan yang memiliki beberapa fungsi antara lain sebagai penyubur rambut. Untuk memperoleh ekstrak kemiri maka harus diekstraksi terlebih dahuliu. Biji kemiri dimasukkan dalam esktraktor soxhlet dan diekstraksi selama waktu tertentu. Dalam ekstrkasi dapat digunakan berbagai macam pelarut, misalnya n-heksan dengan volume tertentu. XI. KesimpulanPada praktikum kali ini dapat ditarik kesimpulan bahwa Pada hasil ekstraksi akan dihasilkan berupa minyak kemiri yang relative murni (Alfin.2008). komposisi lemak dalam kemiri sebesar 50,85%.DAFTAR PUSTAKAFessenden, Ralph J, dan Fessenden, Joan S. 1997. Dasar-dasar Kimia Organik. Bina Aksara. Jakarta.Vogel,Arthur I,Practical Organic chemistry.

Bahl,B.S and Bahl,Arun.Advanced organic Chemistry.S.Chand Company ltd,New Delhi.2004.https://iraeriska.wordpress.com/2012/06/13/ekstraksi/ diunduh tanggal 3 Januari 2015. 15.00.https://www.wikipedia.org/ diunduh tanggal 3 Januari 2015. 15.00.Eter

+ metanol

Komponen pala

Eter Metanol

Komponen Pala

Pala Residu

Destilasi

Terlarut dalam air

Komponen pala

Trimiristin

Kristalisasi

Pala + eter

Ekstraksi pelarut

_1322811053.unknown

_1322809059.unknown