Dosen : Zaenab, SKM.,M.Kes

Mata Kuliah : PMM-A

LAPORAN

“PEMERIKSAAN VIBRIO CHOLERAE PADA MAKANAN

DAN MINUMAN”

DISUSUN OLEH :

KELOMPOK 2ASRIYANI PO.71.3.221.14.1.011

NIRWANA ROSA MUSLIM PO.71.3.221.14.1.026

ARIS PO.71.3.221.14.1.009

RESA PAHLEWI SYAM PO.71.3.221.14.1.035

KURNIA AHMAD PO.71.3.221.14.1.0.18

KELAS II.A

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA

POLITEKNIK KEMENTERIAN KESEHATAN MAKASSAR

JURUSAN KESEHATAN LINGKUNGAN

PRODI DIII

2015

PEMERIKSAAN VIBRIO CHOLERAE PADA MAKANAN DAN MINUMAN

A. Dasar TeoriVibrio cholerae termasuk bakteri Gram negatif, berbentuk

batang bengkok seperti koma dengan ukuran panjang 2 – 4 µm.

Pada isolasi, Koch menamakannya “kommabacillus”, tetapi bila

biakan diperpanjang, kuman ini bisa menjadi batang yang lurus.

Kuman ini dapat bergerak sangat aktif karena mempunyai 1 buah

flagella polar yang halus ( monotrikh ). Kuman ini tidak membentuk

spora. Pada kultur dijumpai koloni yang cembung ( convex ), halus

dan bulat yang keruh ( opaque ) dan bergranul bila disinari. Vibrio

cholerae dan sebagian vibrio lainnya tumbuh dengan baik pada

suhu 370 C pada berbagai perbenihan. Vibrio cholerae tumbuh

dengan baik pada agar tiosulfat –sitrat – empedu – sukrosa ( TCBS

). Selain itu, organisme ini juga mempunyai ciri khas yaitu tumbuh

pada pH yang sangat tinggi ( 8,5 – 9,5 ) dan dengan cepat dibunuh

oleh asam.

Bersifat aerob anaerob fakultatif. Suhu optimum untuk

pertunbuhan pada suhu 18-37o C. Dapat tumbuh pada berbagai

jenis media, termasuk media tertentu yang mengandung mineral

dan asparagin sebagai korbon dan nitrogen V. cholerae tumbuh

baik agar Thiosulfate-citrate-bile-sucrose (TCBS), yang

menghasilkan koloni bewarna kuning dan pada media (Tuliite-

Tourocholate-gelatin-agar).

Salah satu ciri khas dari vibrio cholerae ini adalah tumbuh

pada pH yang sangat tinggi ( 8,5-9,5) dan sangat cepat mati oleh

asam. Pertumbuhan sangat baik pada pH 7,0. Karenanya

penbiakan pada media yang mengandung karbohidrat yang dapat

difermentasi, akan cepat mati. V. cholerae meragi sukrosa dan

manosa tanpa menghasilkan gas tetapi tidak meragi sukrosa dan

manosa tanpa menghasilkan gas tetapi tidak meragi nitrit. Ciri khas

lain yang membedakan dari bakteri enteric gram negative lain yang

tunbuh pada agar darah adalah pada tes oksidasi hasilnya positif

Biakan V. cholerae pada air peptone akali, setelah 6 jam

pada suhu ruangan akan tampak pertumbuhan kuman pada

perbatasan udara dan cairan. Medium ini berfungsi sebagai

medium transport yang penting untuk feses atau usapan dubur dari

tersangka kasus kolera. Pada medium peptone ini (banyak

mengandung triptofan dan nitrat) akan membentuk indol, yang

dengan asam sulfat akan membentuk warna merah (tes nitroso

indol positif).

Spesies Vibrio cholerae sensitive terhadap campuran 0/129

(2,4-diamino-6, diisopropylpteriden phosphate), yang membedakan

mereka dengan spesies Aeromonas, yang resisten terhadap

0/129.vibrio juga dapat tumbuh pada media yang mengandung 6%

Nacl sedangkan Aeromonas tidak, sebagian besar spesies vibrio

adalah halotoleran dan Nacl sering menstimulasi pertumbuhannya.

B. Tujuan1. Dapat mengetahui alat dan bahan yang digunakan dalam

pemeriksaan vibrio

2. Dapat mengetahui cara pemeriksaan vibrio

3. Dapat menentukan jenis vibrio pada sampel makanan yang

diperiksa

C. Alat dan Bahan1. Alat –alat

Tabung reaksi

Gelas ukur

Pipet ukur 10 ml

Petridish

Beaker glass

2. Bahan-bahan : Sampel es Teler

Media Pepton

alkalis

Media TCBS

Media gula-gula (uji

biokimia)

Tabung duham

Incubator

Autoclave

Lampu spritus

Balp

Ose

D. Cara kerjaI. Hari pertama

Sampel yang telah dihaluskan ditanam pada media

pepton alkalis menggunakan ose yang telah di

plambir

Kemudian media diinkubasi selama 1 x 24 jam

dengan suhu 37 ͦ C

II. Hari Kedua Amati media pepton alkalis pada tabung, apabila

warna biru berubah menjadi kuning maka lanjutkan

penanaman pada media TCBS

Ambil 1-2 mata ose yang telah diplambir kemudian

zig-zag pada lereng dari atas ke bawah lalu tusuk

hingga ke permukaan tabung.

Eramkan selama 1 x 24 jam dengan suhu 37 ͦ C

III. Hari Ketiga Amati media TCBS, apabila terjadi pertumbuhan

koloni berwarna kuning.

Ambil sedikit koloni pada media positif menggunakan

ose , lalu masukkan pada secara berurutan (mal,

man, sac, lac, glu)

Inkubasi selama 1 x 24 jam dengan suhu 37 ͦ C

IV. Hari Keempat

Lakukan pembacaan menggunakan tabel untuk

menentukan jenis salmonella.

E. HasilBerdasarkan praktikum yang telah dilaksanakan dengan

mengunakan sampel es teler, sampel tersebut diambil dari penjual es

teler di depan Balai Teknik Kesehatan Lingkungan Kelurahan Banta-

bantaeng. Maka diperoleh hasil data sebagai berikut :

Pengamatan Hari I Hari II Hari III Hari IV Ket.

Media Pepton

Alkalis

Pepton

Alkalis

TCBS Media

Gula-Gula

-

Hasil - Positif (+) Negatif (-) - Tidak

dilanjut

kan.

Ciri-ciri - Perubahan

warna biru ke

kuning keruh

Tidak terjadi

pertumbuhan

koloni pada

media.

- -

Ket : Hari pertama (I) penananman pada media pepton alkalis.

F. Analisa HasilBerdasarkan hasil yang didapatkan pada pemeriksaan vibrio

cholerae pada sampel es teler maka didapatkan hasil negatif(-) hal ini

ditandai dari media peptone alkalis (banyak mengandung triptofan dan

nitrat) akan membentuk indol, yang dengan asam sulfat akan

membentuk warna kuning-merah (tes nitroso indol positif) , sedangkan

pada media TCBS(Thiosulfate-citrate-bile-sucrose) cholerae tumbuh

baik namun pada media TCBS tidak mengalami pertumbuhan koloni

berwarna kuning sehingga tidak dilanjutkan pada media gula-gula (uji

biokimia)

Vibrio umumnya ditemukan pada makanan hasil laut seperti

udang, kepiting, ikan, kerang, dan sebagainya sedangkan sampel yang

kami periksa adalah es teler sehingga kemungkinan kecil terdapat

bakteri vibrio pada pemeriksaan. Berdasarkan Peraturan menteri

kesehatan republik lndonesia No. 1098/Menkes/per/VII/2003 tentang

persyaratan higiene sanitasi rumah makan dan restoran bahwa bakteri

patogen dalam makanan harus nol (0) / gram oleh karena itu vibrio

cholerae tidak boleh ada pada makanan karena dapat menimbulkan

masalah kesehatan seperti kejang perut, muntah, dan sakit perut.

G. KesimpulanBerdasarkan hasil analisa diatas maka dapat disimpulkan

bahwa esteler tersebut negatif(-) bakteri vibrio cholerae sehingga

makanan tersebut aman dikomsumsi. Hal ini karena sampel tersebut

bukan dari hasil laut melainkan buah-buahan sehingga kemungkinan

kecil terdapat vibrio pada sampel pemeriksaan tersebut.