daftar isi - sinta.unud.ac.id file3.2.2 bahan kimia ... 3.7 analisis data ..... 25 bab 4 hasil dan...

12
DAFTAR ISI Halaman LEMBAR PENGESAHAN .......................................................................... ii TIM PENGUJI SIDANG SKRIPSI ............................................................. iii ABSTRAK .................................................................................................. iv ABSTRACT ................................................................................................ v KATA PENGANTAR ................................................................................. vi DAFTAR ISI ................................................................................................ viii DAFTAR TABEL ........................................................................................ xi DAFTAR GAMBAR .................................................................................... xii BAB 1 PENDAHULUAN ....................................................................... 1 1.1 Latar Belakang ...................................................................... 1 1.2 Rumusan Masalah ................................................................. 4 1.3 Tujuan Penelitian .................................................................. 4 1.4 Manfaat Penelitian ................................................................. 4 BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA .............................................................. 6 2.1 Tinospora sinensis ................................................................. 6 2.2 Inflamasi ................................................................................ 8 2.3 Pengobatan Inflamasi ............................................................. 10 2.3.1 Anti-Inflamasi Non-Steroid (AINS) ............................. 10 2.3.2 Kortikosteroid .............................................................. 10 2.4 Metode Pengujian Aktivitas Antiinflamasi ............................ 11

Upload: doanmien

Post on 28-Jun-2019

230 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

DAFTAR ISI

Halaman

LEMBAR PENGESAHAN .......................................................................... ii

TIM PENGUJI SIDANG SKRIPSI ............................................................. iii

ABSTRAK .................................................................................................. iv

ABSTRACT ................................................................................................ v

KATA PENGANTAR ................................................................................. vi

DAFTAR ISI ................................................................................................ viii

DAFTAR TABEL ........................................................................................ xi

DAFTAR GAMBAR .................................................................................... xii

BAB 1 PENDAHULUAN ....................................................................... 1

1.1 Latar Belakang ...................................................................... 1

1.2 Rumusan Masalah ................................................................. 4

1.3 Tujuan Penelitian .................................................................. 4

1.4 Manfaat Penelitian ................................................................. 4

BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA .............................................................. 6

2.1 Tinospora sinensis ................................................................. 6

2.2 Inflamasi ................................................................................ 8

2.3 Pengobatan Inflamasi ............................................................. 10

2.3.1 Anti-Inflamasi Non-Steroid (AINS) ............................. 10

2.3.2 Kortikosteroid .............................................................. 10

2.4 Metode Pengujian Aktivitas Antiinflamasi ............................ 11

ii

2.4.1 Model inflamasi akut .................................................... 11

2.5 Hewan Uji ............................................................................ 13

2.6 Karagenan ............................................................................. 13

2.7 Gas Chromatography-Mass Spectrometry (GC-MS) ............. 15

BAB 3 METODE PENELITIAN............................................................. 18

3.1 Rancangan Penelitian ............................................................. 18

3.2 Bahan Penelitian .................................................................... 18

3.2.1 Bahan uji ...................................................................... 18

3.2.2 Bahan kimia ................................................................. 19

3.3 Alat Penelitian ...................................................................... 19

3.3 Tempat Penelitian ................................................................. 19

3.5 Prosedur Penelitian ................................................................ 20

3.5.1 Penyiapan bahan ….…………………………………… 20

3.5.2 Ekstraksi batang ............................................................ 20

3.5.3 Uji fitokimia.................................................................. 20

3.5.4 Analisis dengan GC-MS ............................................... 22

3.5.5 Uji aktivitas antiinflamasi.............................................. 22

3.6 Perhitungan Persen Inflamasi ................................................. 24

3.7 Analisis Data ......................................................................... 25

BAB 4 HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Penyiapan Sampel .................................................................. 26

4.2 Ekstraksi Batang Antawali (Tinospora sinensis L.) ................ 26

iii

4.3 Persiapan Hewan Uji ............................................................. 26

4.4 Optimasi Lambda Karagenan 1% (b/v) .................................. 27

4.5 Hasil Uji Aktivitas Antiinflamasi ...........................................

4.6 Hasil Identifikasi Ekstrak Etanol Batang Antawali

(Tinospora sinensis L.) secara Fitokimia ................................ 35

4.7 Hasil Identifikasi Ekstrak Etanol Batang Antawali

(Tinospora sinensis L.) dengan GC-MS.................................. 36

BAB 5 SIMPULAN DAN SARAN

5.1 Simpulan ............................................................................... 41

5.2 Saran ..................................................................................... 41

DAFTAR PUSTAKA .................................................................................. 43

LAMPIRAN ................................................................................................ 49

iv

DAFTAR TABEL

Halaman

Tabel 4.1 Volume udema rata-rata telapak kaki tikus (mL) setelah

diinduksi dengan lambda karagenan 1% (b/v) ......................... 27

Tabel 4.2 Persentase inflamasi rata-rata telapak kaki tikus (%) setelah

diinduksi dengan lambda karagenan 1% (b/v) ......................... 28

Tabel 4.3 Hasil identifikasi ekstrak etanol batang antawali secara

fitokimia ................................................................................ 35

Tabel 4.4 Dugaan senyawa-senyawa penyusun ekstrak etanol batang

antawali berdasarkan pendekatan database ............................. 37

v

DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 2.1 Tinospora sinensis .................................................................. 6

Gambar 2.2 Kappa, Iota, dan Lambda Karagenan ...................................... 14

Gambar 2.3 Skema GC-MS ....................................................................... 16

Gambar 3.1 Skema rancangan penelitian ................................................... 18

Gambar 4.1 Persentase inflamasi rata-rata pada optimasi

lambda karagenan .................................................................. 29

Gambar 4.2 Persentase inflamasi rata-rata pada pengujian

aktivitas antiinflamasi ............................................................ 30

Gambar 4.3 Persentase hambatan inflamasi rata-rata pada pengujian

aktivitas antiinflamasi ............................................................ 31

Gambar 4.4 Kromatogram ekstrak etanol batang antawali

(Tinospora sinensis L.) ........................................................... 36

vi

ABSTRAK

Penelitian ini bertujuan untuk menguji aktivitas antiinfamasi dari ekstrak

etanol batang antawali (Tinospora sinensis) dan mengidentifikasi kandungan

kimianya. Uji aktivitas antiinflamasi dilakukan secara in vivo dengan metode

induksi karagenan, sedangkan identifikasi kandungan kimia dilakukan dengan

GC-MS. Pada penelitian ini menggunakan 25 ekor tikus putih jantan galur Wistar

yang dibagi menjadi 5 kelompok yaitu kontrol negatif (P0), kontrol positif (P1)

yang diberi natrium diklorofenak 5 mg/kg BB, kelompok ekstrak uji (P2, P3, dan

P4) dengan dosis 125 mg/kg BB, 250 mg/kg BB, dan 500 mg/kg BB. Hasil uji

aktivitas antiinflamasi menunjukkan bahwa semakin rendah dosis yang diberikan,

maka akan menghasilkan persentase hambatan inflamasi yang semakin besar.

Pemberian dosis 125 mg/kg BB mampu menghasilkan persentase hambatan

tertinggi, diikuti dengan dosis 250 mg/kg BB, serta 500 mg/kg BB yaitu masing-

masing sebesar 64,71%; 52,94%; dan 29,41% pada menit ke-360. Secara statistik

dengan uji One Way ANOVA menunjukkan nilai p<0,05 yang berarti terdapat

perbedaan yang bermakna pada persentase hambatan inflamasi kelompok kontrol

negatif (P0) dengan kelompok perlakuan (P1, P2, P3, dan P4). Pada ekstrak etanol

batang antawali terdapat 8 senyawa yang teridentifikasi dengan GC-MS

berdasarkan database. Senyawa-senyawa tersebut antara lain asam

heksadekanoat, asam oktadekanoat, heksazinon, β-sitosterol, 5,15,24-Trihidroksi

Bistetrahidrofuran Asetogenin, asam 7-ketodeoksiholat, Tetrahidroksagamavunon-5,

dan Bis-(2-ethylhexyl) heksandioat yang berperan dalam penghambatan inflamasi baik

secara bersama-sama maupun individu. Ektrak etanol batang antawali aktif sebagai

antiinflamasi dengan ED50 yaitu sebesar 51,521 mg/kgBB.

Kata Kunci : antawali, karagenan, GC-MS, uji aktivitas antiinflamasi

vii

ABSTRACT

This study aimed to evaluate the antiinflammatory activity of ethanolic

extract of antawali stem (Tinospora sinensis) and to identify its phytochemical

constituents. In vivo antiinflammatory activity test was performed on Wistar rat

oedem induced by carrageenan, while chemical content identification was done

with GC-MS. In this study, 25 male Wistar strains were divided into 5 groups :

negative control (P0), positive control (P1), test extract group (P2, P3, and P4) with

doses of 125 mg/kg BW, 250 mg/kg BW, and 500 mg/kg BW. Antiinflammatory

activity test results showed that the lower the dose given, it will show a greater

percentage of inflammatory inhibition. The dose of 125 mg/kg BW was able to

produce the highest percentage of inhibition, followed by doses of 250 mg/kg

BW, and 500 mg/kg BW at 64.71%; 52.94%; and 29.41% in the 360th minute. The

extract of ethanol stem antawali active as antiinflamasi with ED50 that is equal to

51,521 mg/kg BB. Statistically with One Way ANOVA test showed p value

<0,05. In the extract of ethanol stem antawali there were 8 compounds identified

with GC-MS, such as hexadecanoic acid, octadecanoic acid, hexazinone, β-

sitosterol, 5,15,24-trihydroxy bistetrahidrofuran acetogenin, 7-ketodeoxyholic

acid, tetrahidroksagamavunon-5, and bis- (2-ethylhexyl) hexandioate.

Keywords : Tinospora sinensis, carrageenan, GC-MS, antiinflammatory activity test

BAB I

PENDAHULUAN

1.1. Latar Belakang

Inflamasi merupakan respon biologis kompleks dari jaringan pembuluh

darah yang mengaktivasi sel darah putih, pelepasan sistem imun kimia seperti

sitokin, serta pelepasan mediator inflamasi seperti prostaglandin (Cotran et al.,

2001) karena adanya cedera, infeksi, pengaruh lingkungan, perubahan sel, atau

meningkatnya ROS (Reactive Oxygen Species). Inflamasi juga merupakan upaya

protektif tubuh untuk menghilangkan stimulus yang berbahaya dan memulai

proses penyembuhan terhadap jaringan (Denko, 1992).

Lima tanda utama (cardinal signs) yang umumnya muncul sebagai respon

inflamasi, yaitu nyeri (dolor), panas (calor), kemerahan (rubor), bengkak (tumor),

dan hilangnya fungsi (functio laesa). Berbagai respon inflamasi tersebut dapat

disebabkan oleh meningkatnya aliran darah (panas dan kemerahan), akumulasi

cairan (bengkak), pelepasan berbagai senyawa yang merangsang syaraf nyeri

(nyeri), dan kombinasi dari beberapa respon inflamasi lainnya (Mayer et al.,

2006).

Untuk mengurangi dampak inflamasi, salah satunya dapat digunakan obat

modern maupun obat tradisional. Obat modern yang biasa digunakan sebagai

antiinflamasi adalah obat golongan AINS (Antiinflamasi Non Steroid), namun

demikian obat ini memiliki efek samping pada tukak lambung. Untuk mengurangi

efek samping rasa nyeri pada tukak lambung tersebut, obat tradisional yang

berasal dari tumbuhan merupakan alternatif yang dapat dimanfaatkan. Umumnya

secara empiris pemanfaatan obat tradisional oleh masyarakat telah terbukti

2

khasiatnya dan relatif aman terhadap efek samping, namun masih perlu dikaji dan

dikembangkan sehingga dapat bermanfaat secara optimal untuk peningkatan

kesehatan masyarakat (Tjokronegoro dan Baziad, 1992; Handayani, 2006).

Salah satu tumbuhan obat tradisional yang memiliki aktivitas antiinflamasi

adalah brotowali (Tinospora crispa). Secara tradisional, brotowali yang memiliki

rasa pahit sering dimanfaatkan untuk mengobati rematik, asam urat, memar,

demam, serta sebagai penambah nafsu makan (Dalimartha, 2008). Rasa pahit pada

brotowali memungkinkan adanya sifat analgetik dan umumnya obat analgetik

juga memiliki khasiat antipiretik atau antiinflamasi (Goodman dan Gilmand,

1985).

Aktivitas antiinflamasi dari tumbuhan brotowali diduga karena adanya

kandungan kimia golongan alkaloid, saponin, glikosida, tanin, polifenol,

flavonoid, dan senyawa pikroretin, berberin, tinokrisposida, serta kolumbin

(Heyne, 1950; Sudarsono et al., 2006). Ekstrak etanol batang brotowali memiliki

kandungan total flavonoid setara dengan senyawa rutin sebesar 3,71±0,05%

(Harwoko, 2016). Ekstrak metanol batang brotowali memberikan efek antipiretik

terhadap tikus putih jantan pada dosis 5,00 dan 7,50 µg/kg BB, dan dosis

10,00µg/kg BB memberikan efek antipiretik yang setara dengan parasetamol

(asetaminofen) 200 µg/kg BB (Chairul, 1998). Ekstrak air batang brotowali

memberikan efek antiinflamasi terhadap tikus putih pada dosis 50, 100, dan dosis

150 mg/kg BB. Akan tetapi, dosis 150 mg/kg BB dapat memberikan efek

antiinflamasi yang hampir setara dengan ibuprofen 10 mg/kg BB yaitu adanya

hambatan inflamasi sebesar 84% (Hipol, 2012).

Selain brotowali, terdapat tumbuhan obat tradisional yang masih satu

3

genus dengan brotowali yaitu guduchi (Tinospora cardifolia), yang memiliki

aktivitas antiinflamasi. Secara tradisional, guduchi mampu mengobati penyakit

asma, diabetes, sakit kuning, demam, asam urat dan infeksi kulit (Saha et al.,

2012; Kavya et al., 2015; Kaur et al., 2012). Ekstrak air batang guduchi dengan

dosis 50 mg/kg BB mampu menghambat inflamasi sebesar 33,06% (Patgiri et al.,

2014). Selain ekstrak airnya, ekstrak etanol batang guduchi dengan dosis 250 dan

500 mg/kg BB mampu mengurangi efek inflamasi pada tikus wistar jantan yang

diinduksi indometasin 10 mg/kg BB (Bhagyasree et al., 2016).

Tumbuhan obat tradisional lainnya yang memiliki kekerabatan yang dekat

dengan brotowali (Tinospora crispa) dan guduchi (Tinospora cardifolia) adalah

Tinospora sinensis karena berada dalam genus yang sama yaitu Tinospora. Secara

tradisional, Tinospora sinensis dimanfaatkan untuk mengobati luka, demam,

sifilis, bronkitis, penyakit kulit maupun penyakit hati (Rakesh, 2008). Ekstrak air

dan ekstrak etanol Tinospora sinensis diketahui memiliki aktivitas farmakologis

sebagai antidiabetes, pengatur imun, serta pengatur aktivitas adaptogenik

(Manjrekar et al., 2000), sedangkan aktivitas antiinflamasinya masih belum

diketahui secara pasti sehingga perlu diteliti.

Berdasarkan pendekatan kemotaksonomi bahwa dalam genus yang sama

akan ditemukan senyawa dan keaktifan farmakologi yang hampir sama (Saifudin,

2014), maka dalam penelitian ini akan dikaji aktivitas batang tumbuhan Tinospora

sinensis sebagai antiinflamasi dengan nilai dosis efektif (ED50) sebagai

parameternya terhadap tikus wistar yang diinduksi karagenan.

4

1.2. Rumusan Masalah

Berdasarkan latar belakang di atas, maka dapat dirumuskan permasalahan

penelitian sebagai berikut :

1. Apakah Tinospora sinensis memiliki aktivitas antiinflamasi pada tikus

wistar terinduksi karagenan (persentase hambatan inflamasi) ?

2. Berapakah ED50 ekstrak etanol batang Tinospora sinensis sebagai

antiinflamasi ?

3. Senyawa apakah yang terkandung dalam ekstrak etanol batang Tinospora

sinensis yang aktif sebagai antiinflamasi ?

1.3. Tujuan Penelitian

Berdasarkan rumusan masalah di atas, maka tujuan yang hendak dicapai

dalam penelitian ini adalah :

1. Mengetahui Tinospora sinensis memiliki aktivitas antiinflamasi pada tikus

wistar terinduksi karagenan.

2. Menentukan ED50 ekstrak etanol batang Tinospora sinensis sebagai

antiinflamasi.

3. Mengetahui senyawa yang terkandung dalam ekstrak etanol batang

Tinospora sinensis yang aktif sebagai antiinflamasi.

1.4. Manfaat Penelitian

Manfaat yang diperoleh dari penelitian ini antara lain :

1. Data ilmiah mengenai efek antiinflamasi ekstrak etanol batang Tinospora

sinensis dengan menggunakan metode induksi karagenan pada kaki tikus.

5

2. Hasil penelitian yang diperoleh merupakan data awal bahwa Tinospora

sinensis memiliki aktivitas antiinflamasi terujicoba pada tikus putih jantan

galur wistar, sehingga kedepannya dapat dilakukan penelitian lebih lanjut

seperti isolasi terhadap senyawa aktif inflamasinya maupun pengujian

secara in vitro untuk menunjang penggunaan ekstrak etanol batang

Tinospora sinensis sebagai alternatif pengobatan inflamasi.