pendahuluan enzim

8/10/2019 Pendahuluan enzim

1/24


2/24

Penataan tertentu pada rantai samping asam amino suatu enzim di sisi

aktifnya menentukan tipe molekul yang bisa terikat dan bereaksi di situ. Biasanya

ada sekitar lima rantai samping seperti itu dalam enzim apapun. Selain itu, banyak

enzim yang memiliki molekul-molekul nonprotein kecil yang terhubung dengan

sisi aktif atau di dekatnya, yang menentukan spesifisitas substrat. Molekul-

molekul ini disebut kofaktor jika terikat secara kovalen. Dalam beberapa enzim,

ion logam tertentu diperlukan untuk aktivitasnya.

B. Kompleks Enzim-Substrat

Telah dijelaskan bahwa suatu enzim mempunyai kekhasan yaitu hanya

bekerja pada satu reaksi saja. Untuk dapat bekerja terhadap suatu zat atau substrat

harus ada hubungan atau kontak antara enzim dengan substrat. Suatu enzim

mempunyai ukuran yang lebih besar daripada substrat. Oleh karena itu tidak

seluruh bagian enzim dapat berhubungan dengan substrat. Hubungan antara

substrat dengan enzim hanya terjadi bagian atau tempat tetentu saja. Tempat atau

bagian enzim yang mengadakan hubungan atau kontak dengan substrat diamati

bagian aktif (active site). Hubungan hanya mungkin terjadi apabila bagian aktif

mempunyai ruang yang tepat dapat menampung substrat. Apabila substrat

mempunyai bentuk atau konformasi lain, maka tidak dapat ditampung pada

bagian aktif suatu enzim. Dalam hal ini enzim itu tidak dapat berfungsi terhadap

substrat. Ini adalah penjelasan mengapa tiap enzim mempunyai kekhasan terhadap

substrat tertentu.

Hubungan atau kontak antara enzim dengan substrat menyebabkan

terjadinya kompleks enzim-substrat. Kompleks ini merupakan kompleks yang

aktif, yang bersifat sementara dan akan terurai lagi apabila reaksi yang diinginkan

telah terjadi. Secara sederhana sekali penguraian suatu senyawa atau substrat oleh

suatu enzim dapat digambarkan seperti berikut :


3/24

C.

Klasifikasi Enzim

Semua enzim diberi nama menurut sistem yang dirancang oleh komisi

Enzim (Enzym Commission, EC) dari International Union of Pure and applied

Chemystri (IUPAC), dan berdasarkan pada tipe reaksi yang dikatalis oleh enzim

tersebut. Setiap tipe enzim memiliki empat digit nomor EC yang spesifik, serta

nama yang kompleks namun jelas dan bisa menepis kebingungan tentang enzim-

enzim yang mengkatalis reaksi yang serupa tetapi tidak identik. Dalam

prakteknya, banyak reaksi yang dikenal dengan nama umum, yang biasanya

berasal dari nama reaktan utamanya yang spesifik, dengan ditambahkan akhiran

ase. Beberapa nama umum tidak memiliki akhiran ase, yang biasanya

merupakan enzim yang dipelajari dan diberi nama sebelum klasifikasi sistematik

enzim dibuat.

Contoh nama-nama enzim yang lazim yakni arginase, yang bekerja pada

arginin dan urease yang bekerja pada urea. Dua nama umum yang tidak lazim

yakni pepsin, suatu enzimproteolitik dalam jalur pencernaan (nomor EC 3.4.23.1)

dan rodanese (tiosulfat: sianida sulfurtransferase, EC 2.8.1.1), yang berada dalam

inti dan ginjal mamalia untuk mengkatalis penghilangan sianida dan tiosulfat dari

tubuh.

Digit pertama dalam nomor EC menunjukkan termasuk kelas mana enzim

tersebut, dari enam kelas utama yang ada.

Tabel Kelas-Kelas Utama Enzim :

Digit

Pertama

EC

Kelas Enzim Tipe Reaksi yang Dikatalis

1Oksidoreduktase Oksidasi-reduksi. Pendonor hydrogen atau

electron adalah salah satu substratnya

2Transferase Transfer gugus kimia dari bentuk umum A

X +


4/24

B A + B X

3Transferase Pemotongan hidrolitik pada C N, C O,

dan ikatan lainnya

4

Liase Pemotongan (bukan hidrolitik) pada C C,

C N, C O, dan ikatan lainnya,

meninggalkan ikatan rangkap; atau

alternatifnya yakni penambahan gugus pada

suatu ikatan rangkap

5Isomerase Perubahan penataan geometris (spasial) suatu

molekul

6

Ligase Ligasi (menghubungkan) dua molekul

dengan mengikutsertakan hidrolisis senyawa

yang memiliki G besar untuk hidrolisis

Digit kedua dalam nomor enzim EC menandakan sub-kelas; sedangkan

untuk hidrolase, digit kedua ini menandakan tipe ikatan target kerja enzim.

Tabel Subklasifikasi Hidrolase


5/24


6/24

D.

Faktor Perbedaan Kecepatan Reaksi

Kecepatan reaksi yang dikatalisis enzim dipengaruhi oleh berbagai faktor :

1. Suhu

Sementara peningkatan suhu akan meningkatkan kecepatan reaksi yang akan

dikatalisis enzim, kenyataan ini hanya berlaku pada kisaran suhu yang sangat

terbatas. Kecepatan reaksi mula-mula meningkat seiring meningkatnya suhu

akibat peningkatan energi kinetik pada molekul-molekul yang bereaksi. Akan

tetapi, pada akhirnya, energi kinetik enzim akan melampaui rintangan energi

untuk memutuskan ikatan hidrogen dan hidrofobik yang lemah, yang

mempertahankan struktur sekunder-tersiernya. Pada suhu ini, terutama terjadi

denaturasi, disertai hilangnya ektivitas katalitik secara cepat. Kisaran suhu

suatu enzim akan mempertahankan konformasi yang stabil serta memiliki

kemampuan katalisis umumnya akan bergantung pada suhu sel tempat enzim

itu terdapat dan sedikit melebihi suhu sel tersebut. Enzim dari manusia, yang

mempertahankan suhu tubuh pada 37C, umumnya memperlihatkan stabilitas

hingga suhu setinggi 45-55C. Enzim dari mikroorganisme yang hidup di

dalam mata air panas alam atau pada tempat-tempat ventilasi hipertermal di

dasar samudera dapat tetap stabil pada suhu 100C atau lebih.

2. pH

Ketika aktivitas enzim diukur pada berbagai nilai pH, aktivitas optimal secara

khas terlihat di antara nilai-nilai pH 5 dan 9. Meskipu demikian, beberapa

enzim, misal pepsin, bekerja aktif pada nilai pH yang berada di luar kisaran

ini.

Bentuk kurva aktivitas pH ditentukan oleh :

1) Denaturasi enzim pada pH yang tinggi atau rendah

2) Perubahan pada status muatan enzim dan/atau substrat

Untuk enzim, pH dapat mempengaruhi aktivitas dengan mengubah struktur

atau dengan mengubah muatan residu fungsional pada peningkatan substrat


7/24

atau katalis. Untuk memberi gambaran, bayangkan sebuah enzim bermuatan

negatif (Enz -) yang bereaksi dengan substrat bermuatan positif (SH+) :

Enz- + SH+ EnzSH

Pada pH yang rendah, Enz- mengalami protonasi dan kehilangan muatan

negatifnya :

Enz- + H+ EnzH

Pada pH yang tinggi, SH+ mengalami ionisasi dan kehilangan muatan

positifnya :

SH+ S + H+

Karena, berdasarkan definisi untuk contoh ini, satu-satunya bentuk yang akan

berinteraksi adalah SH+ dan Enz-, nilai pH yang ekstrem akan menurunkan

konsentrasi efektif Enz- dan SH+, dan dengan demikian menurunkan

kecepatan reaksi.

3. Konsetrasi substrat

Dalam percobaan, pengaruh konsentrasi substrat pada laju reaksi enzim

dipelajari dengen mencatat kemajuan reaksi katalis enzim, dengan

menggunakan konsentrasi enzim yang tetap dan serangkaian konsentrasi

substrat yang berbeda-beda. Kecepatan awal (V0) diukur sebagai kemiringan

tangen dalam kurva kemajuan pada waktu t=0. Kecepatan awal ini digunakan,

karena bisa saja terjadi degradasi enzim selama reaksi atau inhibisi oleh

produk reaksi, sehingga menimbulkan hasil yang mungkin sulit untuk

ditafsirkan.

Katika [S] >> konsentrasi enzim, v biasanya berbanding lurus dengan

konsentrasi enzim dalam campuran reaksi. Untuk kebanyakan enzim, v

adalah fungsi hiperbola dari [S]. Jika terdapat substrat-substrat lain (ko-

substrat), maka konsentrasinya biasanya dijaga tetap konstan selama

rangkaian percobaan dengan [S]yang bervariasi.


8/24

4. Konsentrasi Enzim

Seperti pada katalis lain, kecepatan suatu reaksi yang menggunakan enzim

tergantung pada konsentrasi enzim tersebut. Pada suatu konsentrasi substrat

tertentu, kecepatan reaksi bertambah dengan bertambahnya konsentrasi

enzim. Gambar berikut ini menunjukankan pengaruh konsentrasi enzim

terhadap kecepatan reaksi (V) atau aktivitas enzim. Data ini diperoleh dengan

menentukan jumlah miligram gula yang terbentuk pada waktu yang

ditentukan, dengan menggunakan enzim amilase pada berbagai konsentrasi

dan konsentrasi substrat yang sama pada pH optimum. Dalam hal ini substrat

yang digunakan dalam jumlah yang berlebih.

E. Inhibisi Enzim

Seringkali laju reaksi enzimatik dipengaruhi oleh zat-zat yang bukan merupakan

reaktan. Jika terdapat pengurangan laju yang disebabkan oleh suata senyawa,

maka senyawa tersebut dinamakan sebagai inhibitor. Penigkatan laju reaksi yang

disebabkan oleh suatu aktivator adalah kebalikan dari efek inhibitor. Dalam kaitandengan inhibitor, penting untuk membedakan antara efek yang diamati dalam

percobaan dengan mekanisme (atau model) untuk menjelaskan efek tersebut.

Terdapat tiga tipe dasar inhibisi, yang didefinisikan dalam istilah derajat inhibisi,

yakni :

Dengan Vo adalah laju reaksi awal tanpa inhibisi, dan Vi adalah laju reaksi awal

dengan adanya inhibisi.

1.

Inhibisi nonkompetitif murni dikatakan terjadi bila i tidak terpengaruh

oleh konsentrasi substrat

2. Inhibisi kompetitif terjadi bila i menurun pada saat konsentrasi substrat

meningkat


9/24

3.

Inhibisi antikompetitif atau unkompetitif terjadi bila i meningkat pada saat

konsentrasi substrat meningkat.

Selain tipe-tipe inhibisi di atas, terdapat juga inhibisi campuran, yang terjadi bila i

meningkat atau menurun pada saat konsentrasi substrat meningkat, tetapi besarnya

tidak sama seperti pada inhibisi kompetitif murni maupun antikompetitif.

Nyatanya, bisa ditunjukkan bahwa secara mekanis, inhibisi nonkompetitif adalah

suatu kasus khusus dari inhibisi campuran. Namun secara operasional, inhibisi

campuran adalah kombinasi dua tipe dasar dari tiga tipe di atas.

F. Amilase

Amilase merupakan enzim yang berfungsi memecah pati atau glikogen.

Senyawa ini banyak terdapat dalam hasil tanaman dan hewan. Amilase dapat

dikelompokkan menjadi 3 golongan enzim, yaitu :

a. -amilase, yang memecah pati secara acak dari tengah atau dari bagian

dalam molekul, karenanya disebut endoamilase.

b. -amilase, yang menghidrolisis unit-unit gula dari ujung molekul pati,

karenanya disebut eksoamilase.

c. Glukoamilase, yang dapat memisahkan glukosa dari terminal gula non-

pereduksi substrat pati.

a. -Amilase

Enzim -amilase (-1,4 glukan-4-glukanhidrolase, EC 3.2.1.1.) terdapat

pada tanaman, jaringan mamalia, dan mikroba. -Amilase murni dapat

diperoleh dari berbagai sumber, misalnua dari malt (barley), ludah manusia,


10/24

dan pankreas. Dapat juga diisolasi dari aspergillus oryzae dan Bacillus

subtilis. Isolasi dan porcine (pemurnian enzim) dilakukan berdasar fraksi

dengan garam, juga dengan penggunaan panas selektif (biasanya 700,

15menit). Kemudian dilakukan pencampuran glikogen sehingga terjadi

kompleks enzim-glikogen.

Cara kerja -amilase terjadi melalui 2 tahap: pertama, degradasi amilosa

menjadi malyosa dan maltotriosa yang terjadi secara acak. Degradasi

initerjadi sangat cepat dan diikuti dengan menurunnya viskositas dengan

cepat pula. yang kedua, relatif yang sangat lambat yaitu pembentukan glukosa

dan maltosa sebagai hasil akhir,dan caranya tidak acak. keduanya merupakan

kerja enzim -amilase pada amilosa saja.

Kerja -amilase pada molekul amilopektin akan menghasilkan glukos,

maltosa, dan berbagai jenis -limit dextrin, yaitu oligosakarida yang terdiri

dari 4 atau lebih residu gula yang semuanya mengandung ikatan -1,6. Berat

molekul -amilase sekitar 50.000, setiap molekul mengandung 1 ion Ca++.

dengan filtrasi gel (Sephadex) dapat dipisahkan dua jenis -amilase, yaitu

yang cepat bergerak dengan BM 50.000 dan yang lambat dengan BM

100.000.

Enzim dengan BM 50.000 merupakan monomer enzim -amilase, enzim

dimer terjadi apabila ada ion zink tersebut. Aktivitas -amilase ditentukan

dengan mengukur hasil degradasi pati, biasanya dari penurunan kadar pati

yang larut atau dari kadar dekstrimnya dengan menggunakan substrat jenuh.

Hilangnya substrat dapat diukur dengan pengurangan derajat pewarnaan

iodium terhadap substrat. Seperti telah diketahui, pati yang mengandung

amilosa bereaksi dengan iodium akan berwarna coklat. disamping itu,

keaktifan -amilase dapat juga dinyatakan dalam berbagai cara, misalnya

dengan pengukuran viskositas dan jumlah pereduksi yang berbentuk.

Kinetika reaksi -amilase memang agak sulit , sebab sifat hidrolisisnya

beraneka-ragam terhadap berbagai substrat; apalagi bila hasil hidrolisis

pertama ternyata menjadi substrat baru bagi enzim yang sama sampai

menghasilkan maltosa dan triosa. Laju hidrolisis akan meningkat bila tingkat


11/24

polimerisasi menurun, dan laju hidrolisis akan lebih cepat pada rantai lurus.

hidrolisis amilosa akan lebih cepat daripada hidrolisis rantai yang bercabang

seperti amilopektin atau glikogen.

b. -Amilase

-Amilase (-1,4 glukan maltohidrolase, EC 3.2.1.2.) terdapat pada berbagai

hasil tanaman , tetapi tidak terdapat pada manusia dan mikroba. secara murni

telah dapat diisolasi dari kecambah barely, ubi jalar dan kacang kedelai.

Meskipun namanya -amilase, bukan berarti bahwa enzim tersebut memecah

ikatan glukosida -1,4. Enzim -amilase memecahkan ikatan glukosida -1,4

pada pati dan glikogen dengan membalikkan konfigurasi karbon anomeri

(C1) glukosa dari menjadi .

Karena perubahan konfigurasi dari ke itulah, amilase tersebut disebut -

amilase. Enzim -amilase tidak berdaya memecahkan ikatan -1,6 yang

terdapat pada amilopektin. Karenanya degradasi amilopektin dengan -

amilase tidak pernah sempurna, biasanya hanya dapat menghasilkan 50-60%

maltosa, sedang pada glikogen yang lebih banyak cabangnya dihasilkan

hanya 40-50 % maltosa.

Bagian yang tidak tercerna oleh amilase disebut limit dextrin. Secara teoretik,

polimer linier seperti halnya amilosa dapat didegradasi sempurna. Tetapi

kenyataannya tidak demikian, karena biasanya hanya tercapai degradasi 70-

90 %. Hal ini disebabkan selama pembuatan pati terjadi modifikasi terhadap

amilosa, misalnya terjadi oksidasi.

Cara hidrolisis ikatan -1,4 oleh -amilase terjadi secara bertahap, dari arah

luar atau ujung rantai gula yang bukan pereduksi. karena pemotongannya dari

arah luar, maka enzim tersebut disebut eksoamilase. Hidrolisis terjadi dengan

memotong 2 unit glukosa.

Enzim -amilase aktif pada pH 5,0-6,0. -amilase yang berasal dari barley

lebih tahan panas daripada -amilase. Molekul -amilase lebih berat dari BM

-amilase, tidak memerlukan ko-enzim baik dalam bentuk ko-faktor


12/24

inorganik maupun organik dan inaktivitasnya dengan pereduksi sulfhidril (p-

kloro merkuri benzoat) atau oleh oksidasi.

c. Glukoamilase

Glukoamilase memecah pati dari luar dengan mengeluarkan unit-unit glukosa

dari ujung bukan pereduksi polimer pati. Hasil reaksinya hanya glukosa,

sehingga dapat dibedakan dengan - dan -amilase. Secara komersial

diproduksi dariAspergillus danRhizopus, dapat memecah ikatan -1,3, -1,4.

Dengan pengaruh enzim glukoamilase posisi glukosa dapat diubah menjadi

, pH optimal 4-5 dan suhu optimal 50-60 C.


13/24

BAB II

TUJUAN PERCOBAAN

1. Pengaruh temperatur terhadap aktivitas enzim amilase

Tujuan :

Membuktikan bahwa kecepatan reaksi enzimatik sampai suhu tertentu

sebanding dengan kenaikan suhu. Reaksi enzimatik mempunyai suhu

maksimum.

2. Pengaruh kadar enzim terhadap aktivitas enzim

Tujuan :

Membuktikan bahwa kecepatan reaksi enzimatik berbanding lurus dengan

konsentrasi enzim


14/24

BAB III

METODE PERCOBAAN

1. Pengaruh temperatur terhadap aktivitas enzim amilase

Reagen dan Bahan :

Liur, sumber amilase

Larutan pati 0,4 % mg/mL

Larutan iodium

Prosedur :

Tampung 2 mL air liur dalam tabung reaksi yang bersih dan kering

Encerkan 10x dengan air suling

Siapkan 6 pasang tabung reaksi yang bersih dan kering. Tiap pasangan

tabung diberi tanda B untuk blanko dan U untuk uji.

Pipetkan ke dalam tiap-tiap tabung :

Larutan Tabung B Tabung U

Larutan pati 0,4 ml 0,4 ml

Diamkan 5 menit pada suhu masing-masing

Liur - 0,2 mL

Campur baik-baik, diamkan 1 menit

Larutan iodium (untuk suhu 60 dan 100

C dilakukan di luar penangas)

0,4 mL 0,4 mL

Ait suling 9,2 mL 9 mL

Segera baca serapan (A) pada panjang gelombang 680 nm. Hitung

selisih serapan (A) antara tabung B (A pada t = 0 menit ) dengan

tabung U dari tiap suhu.


15/24

Keterangan :

-

pasangan pertama, ditempatkan dalam bejana berisi es (0 C).

- pasangan kedua ditempatkan dalam bejana berisi air yang suhunya

dipertahankan 25 C.

-

pasangan ketiga ditempatkan di rak tabung reaksi, pada suhu ruang.

- pasangan keempat ditempatkan dalam bejana berisi air yang suhunya

dipertahankan 37 C.

- pasangan kelima ditempatkan dalam bejana berisi air yang suhunya

dipertahankan 60 C.

- pasangan keenam ditempatkan dalam bejana berisi air yang suhunya

dipertahankan 100 C.

-

Buatlah tabel berikut :

Suhu AB AU A/menit

0 C

25 C

Suhu ruang

37 C

60 C

100 C

-

Buatlah kurva yang menggambarkan hubungan kecepatan reaksi

enzimatik (v =A / menit) dengan suhu

2. Pengaruh Kadar Enzim terhadap Enzim terhadap Aktivitas Enzim

Reagen dan Bahan :

Liur sebagai sumber amilase.Tampung 2 ml liur dalam gelas kimia atau

tabung reaksi yang bersih dan kering.


16/24

Larutan pati 0,4 mg/dl

Larutan iodium

Prosedur :

Encerkan liur 100x, 200x,300x,400x,500x dengan air suling.Siapkan 5

pasang tabung reaksi yang bersih dan kering.Tiap pasangan tabung diberi

tanda B untuk blanko dan U untuk uji.Pipetkan ke dalam tabung sesuai tabel

berikut :

Larutan Tabung B Tabung U

Larutan pati 0,4 ml 0,4 ml

Inkubasi pada suhu 37 C selama 5 menit

Liur yang diencerkan - 3 ml

Campurkan baik-baik, inkubasi 1 menit

Larutan iodium 0,4 ml 0,4 ml

Air suling 9,2 ml 6,2 ml

Segera baca serapan pada panjang gelombang 680 nm. Hitung selisih serapan

antara tabung B (A pada t = 0 menit) dengan tabung U dari tiap pengenceran

enzim.

Buatlah tabel sebagai berikut :

Pengenceran enzim AB AU V = A/menit

500x

250x

300x

200x

100x


17/24

Buatlah kurva yang menggambarkan hubungan kecepatan reaksi enzimatik (v

=A / menit) dengan konsentrasi atau pengenceran enzim.

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

1. Pengaruh Temperatur terhadap Aktivitas Enzim Amilase

Larutan Tabung B Tabung ULarutan pati 0,4 ml 0,4 ml

Diamkan 5 menit pada suhu masing-masing

Liur - 0,2 ml

Campur baik-baik, diamkan 1 menit

Larutkan iodium (untuk

suhu 60 C dan 100 C

dilakukan di luar

penangas)

0,4 ml 0,4 ml

Air suling 9,2 ml 9 ml

Segera baca serapan (A) pada panjang gelombang 680 nm. Hitung selisih

serapan (A) antara tabung B (A pada t = 1 menit) dengan tabung U dari tiap

suhu

Tabel Pengaruh Temperatur terhadap Aktivitas Enzim Amilase

Suhu AB AU A/menit (V)

0 C 0,159 0,094 0,065

25 C 0,162 -0,012 0,174

Suhu Ruang 0,169 0,114 0,055

37 C 0,121 0,029 0,09260 C 0,161 0,003 0,158

100 C 0,173 0,172 0,001


18/24

Grafik Pengaruh Temperatur terhadap Aktivitas Enzim Amilase

Percobaan ini memiliki tujuan untuk mengamati faktor-faktor yang dapat

mempengaruhi kecepatan aktivitas enzim. Salah satunya diamati pengaruh suhu

terhadap aktivitas enzim. Seperti telah diketahui bahwa tiap-tiap enzim melakukanaktivitasnya pada suhu optimum. Apabila kerja enzim berada pada suhu dibawah

suhu optimumnya maka aktivitas enzim menjadi lambat bahkan enzim dapat

menjadi inaktif, sebaliknya bila enzim bekerja pada suhu diatas suhu optimumnya,

untuk sementara dapat meningkatkan aktivitas enzim tetapi hal tersebut dapat

berubah menjadi penurunan kecepatan aktivitas ketika enzim yang juga termasuk

protein mengalami denaturasi. Pada umumnya enzim akan terdenaturasi pada

suhu di atas 60C.

Sebagai sumber enzim adalah saliva (air liur) dari manusia. Di salam

saliva manusia terdapat enzim -Amylase yang mempunyai fungsi sebagai

katalisator sistem pencernaan dan berperan dalam melakukan hidrolisis awal

makanan terutama yang mengandung pati. Larutan substrat yang digunakan

adalah pati, karena antara pati dan amilase memiliki hubungan dalam proses

pencernaan. Sedangkan larutan Iodium berperan sebagai indikator perubahan

0

0.02

0.04

0.06

0.08

0.1

0.12

0.14

0.16

0.18

0.2

0 25 Suhu

Ruang

37 60 100

Kecepatan

Suhu

Aktivitas Enzim


19/24

warna dari larutan uji yang spesifik untuk menguji adanya kandungan amilum dan

digunakan untuk membentuk larutan kompleks pada larutan pati.

Gambar. . Perubahan warna pada penambahan iodium

Larutan pati merupakan larutan yang tidak berwarna, sehingga untuk

melakukan pengukuran absorbansi menggunakan spektrofotometer larutan pati

harus dijadikan larutan kompleks agar menjadi berwarna dan dapat diukur

absorbansinya. Jika larutan pati tidak dikomplekskan maka tidak dapat diukur

absorbansinya menggunakan spektrofotometer, karena larutan pati tersebut tidak

menyerap warna komplementer dari sinar putih sehingga tidak ada warna yang

diteruskan.

Pada suhu 0C, absorbansi pada blanko adalah 0,159 ; absorbansi pada uji

0,094 dan selisih serapan (A) yang diperoleh adalah 0,065. Pada suhu ini enzim

bekerja jauh dibawah suhu optimumnya, hal ini menyebabkan banyak enzim

berada dalam keadaan tidak aktif dan tidak terjadi tumbukan antara enzim dan

substrat sehinga kecepatan aktivitas enzim kecil.

Pada suhu 25C, absorbansi pada blanko adalah 0,162; absorbansi pada uji

-0,012 dan selisih serapan (A)yang diperoleh adalah 0,174. Peningkatan suhu

tersebut menyebabkan gerakan antara enzim dan substrat mulai mengalami

peningkatan yang dapat memungkinkan terjadinya tumbukan antara enzim dan

substrat membentuk kompleks ES.

Selanjutnya percobaan dilakukan pada suhu ruang dan hasil absorbansi

pada blanko adalah 0,205; absorbansi pada uji 0,021 dan selisih serapan (A)

yang diperoleh adalah 0,184. Kecepatan aktivitas enzim meningkat seiring

dengan meningkatnya suhu.


20/24

Suhu terus dinaikan dan pada suhu 37C didapatkan kecepatan aktivitas

enzim yang paling tinggi dengan nilai absorbansi pada blanko adalah 0,121 ;

absorbansi pada uji 0,029 dan selisih serapan (A) 0,092. Suhu 37C merupakan

suhu optimum terhadap aktifitas enzim amilase. Pada suhu ini laju reaksi enzim

paling tinggi mengubah substrat dan merupakan hasil kesetimbangan antara laju

kenaikan aktivitas dan laju perusakan enzim.

Pada suhu 600C terjadi kenaikan absorbansi, sehingga mendapatkan kurva

yang tidak sesuai dengan teori, seharusnya terjadi penurunan Hal ini disebabkan

telalu lamanya tabung reaksi berada di luar penangas, sehingga diperkirakan suhu

dalam tabung berada di bawah 60 oC pada saat pencampuran sehingga tumbukan

antara enzim dan substrat mengalami penurun dan mendekati suhu optimum

sehingga menghasilkan laju reaksi yang meningkat.

Sedangkan pada suhu 1000C pada keadaan ini perbenturan antara enzim

dan substrat terus berlangsung namun keadaan ini tidak menambah laju reaksi

namun mengurangi laju reaksi ini disebabkan karena enzim mengalami denaturasi

sehingga pada kurva terjadi penurunan laju reaksi.


21/24

Pengaruh Kadar Enzim terhadap Aktivitas Enzim Amilase

Larutan Tabung B Tabung ULarutan Pati 0,4 ml 0,4 ml

Inkubasi pada suhu 37 C selama 5 menit

Liur diencerkan - 0,2 ml

Campurkan baik-baik, inkubasi 1 menit

Larutan iodium 0,4 ml 0,4 ml

Air suling 9,2 ml 9 ml

Tabel Pengaruh Kadar Enzim terhadap Aktivitas Enzim Amilase

Pengenceran Enzim AB AU V = A/menit

500X 0,093 0,093 0

400X 0,090 0,082 0,008

300X 0,086 0,040 0,045

200X 0,091 0,065 0,026

100X 0,086 0,036 0,05

Grafik Pengaruh Kadar Enzim terhadap Aktivitas Enzim Amilase

0

0.01

0.02

0.03

0.04

0.05

0.06

500x 400x 300x 200x 100x

Kecepatan

Konsentrasi Enzim

Aktivitas Enzim


22/24

Konsentrasi enzim mempengaruhi kecepatan reaksi enzimatik. Pengaruh

konsentrasi enzim ini yaitu pembentukan produk, dimana makin besar konsentrasi

enzim makin banyak pula produk yang dihasilkan sehingga dapat dinyatakan

bahwa laju reaksi berbanding lurus dengan konsentrasi enzim.

Pada percobaan pengaruh konsentrasi enzim ini, konsentrasi enzim

amylase dari air liur yang berbeda-beda didapatkan dari pengenceran larutan air

liur. Larutan air liur diencerkan menjadi 100x, 200x, 300x, 400x, 500x dan

konsentrasi yang di dapat yaitu 0 ; 0,008 ; 0,045; 0,026 dan 0,05. Dari konsentrasi

ini sebelum praktikum kita dapat memprediksikan jika laju reaksi akan mencapai

titik tertinggi pada konsentrasi 0,01 dan titik terendah pada konsentrasi 0,0017.

Dari hasil percobaan pengaruh konsentrasi enzim terlihat pada pergerakan

laju reaksi dari 0 , 0,008 dan 0,045 dimana laju reaksi semakin meningkat, namun

kondisi ini terus menurun pada konsentrasi 0,045 hingga konsentrasi 0,026.

Sehingga mendapatkan kurva yang tidak sesuai dengan teori yang seharusnya

kurva nya harus meningkat, beberapa factor yang mempengaruhi adalah

perbangdingan pengenceran volume yang tidak tetap, kesalahan penimbangan

kanji dalam pembuatan amilum, kesalahan perhitungan pada saat pengamatan,

kelebihan dan kekurangan dan kekurangan iodium sebagai indicator yang di

teteskan pada plat tetes, alat yang digunakan kurang streril.

Sedangkan pada pengenceran 100x dengan laju reaksi 0,05 terjadi

peningkatan lagi yang menurut kami sesuai dengan teori.


23/24

BAB V

KESIMPULAN

Dari hasil percobaan maka dapat kami simpulkan yaitu enzim dalam

aktivitasnya dipengaruhi oleh beberapa faktor. Faktor pertama yaitu suhu,

aktivitas enzim semakin meningkat seiring bertambahnya suhu terlihat dari laju

reaksi namun aktivitasnya menurun setelah melewati suhu optimum. Faktor kedua

yaitu konsentrasi enzim, dimana semakin tinggi konsentrasi enzim semakin

banyak produk yang dihasilkan.

Selain itu dapat kami simpulkan bahwa enzim amylase bekerja

menghidrolis secara parsial larutan pati yang merupakan karbohidrat. Enzim

amylase bekerja maksimum pada pH 7 dan pada suhu 37 0C. sehingga dapat

dikatakan pH 7 merupakan pH optimum dalam kerja enzim amylase. Sedangakan

suhu 37 0C merupakan suhu optimum bagi enzim amylase dalam melaksanakan

kerjanya.


24/24

pendahuluan enzim

Documents