laporan praktikum biokimia kh

8/10/2019 Laporan Praktikum Biokimia Kh

1/38

LAPORAN PRAKTIKUM BIOKIMIA

KARBOHIDRAT

Dosen Pembimbing : Siti Imroatul Maslikah, S.Si., M.Si,

Kelompok : 1

Offering: A

1. Endah Puspa Rini (130341603366)

2.

Endah Wahyuningtias (130341603381)

3. Muhammad Fahrurrizal A. (130341603373)

4. Nila Wahyuni (130341603392)

5.

Santy Faiqotul H (130341603399)

6.

Sovi Makhmudah (130341603393)

UNIVERSITAS NEGERI MALANGFAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

JURUSAN BIOLOGI

2013


2/38

KARBOHIDRAT

TUJUAN

Praktikum ini bertujuan untuk mengetahui sifat-sifat fisik dan kimia karbohidrat,

mengetahui jenis-jenis karbohidrat, reaksi-reaksi identifikasi dan sifat-sifat karbohidrat dan

membuktikan kandungan karbohidrat pada suatu zat berdasarkan reaksi-reaksi tertentu.

DASAR TEORI

Karbohidrat berfungsi sebagai penyedia energi yang utama. Protein dan lemak berperan

juga sebagai sumber energi bagi tubuh kita, tetapi karena sebagian besar makanan terdiri atas

karbohidrat, maka karbohidratlah yang terutama merupakan sumber energi utama bagi tubuh.

Amilum atau pati, selulosa, glikogen, gula atau sukrosa dan glukosa merupakan beberapa

senyawa karbohidrat yang penting dalam kehidupan manusia. Molekul karbohidrat terdiri atas

atom-atom karbon, hidrogen, dan oksigen. Jumlah atom hidrogen dan oksigen merupakan

perbandingan 2:1 seperti pada molekul air. Dahulu orang berkesimpulan adanya air dalam

karbohidrat. Karena hal ini maka dipakai kata karbohidrat, yang berasal dari kata karbon dan

hidrat atau air. Walaupun pada kenyataannya senyawa karbohidrat tidak mengandung molekul

air, kata karbohidrat tetap digunakan. Senyawa karbohidrat tidak hanya ditinjau dari rumus

empirisnya saja, tetapi yang penting ialah rumus strukturnya. (McGilvery&Goldstein, 1996)

Pada senyawa yang termasuk karbohidrat terdapat gugus fungsi yaitu gugus OH, gugus

aldehida atau gugus keton. Struktur karbohidrat selain mempunyai hubungan dengan sifat kimia

yang ditentukan dengan sifat fisika, dalam hal ini juga aktivitas optik. (McGilvery&Goldstein,

1996)

Jika kristal glukosa murni dilarutkan dalam air, maka larutannya akan memutar cahaya

terpolarisasi ke arah kanan. Namun bila larutan itu dibiarkan beberapa waktu dan diamati

putarannya, terlihat bahwa sudut putaran berubah menjadi semakin kecil, hingga lama-kelamaan


3/38

menjadi tetap. Peristiwa ini disebut mutarotasi, yang berarti perubahan rotasi atau perputaran.

(McGilvery & Goldstein, 1996)

Sir Walter Norman Haworth (1883-1950) seorang ahli kimia Inggris yang pada tahun 1937

memperoleh hadiah nobel untuk ilmu kimia, berpendapat bahwa pada molekul glukosa kelima

atom karbon yang pertama dengan atom oksigen dapat membentuk cincin segi enam. Oleh

karena itu, ia mengusulkan penulisan rumus struktur karbohidrat sebagai bentuk cincin furan

atau piran.

Monosakarida

Monosakarida adalah karbohidrat yang sederhana, dalam arti molekulnya hanya terdiri atas

beberapa atom karbon saja dan tidak dapat diuraikan dengan cara hidrolisis dalam kondisi lunak

menjado karbohidrat lain. Monosakarida yang paling sederhana adalah gliseraldehida dan

dihidroksiaseton. Gliseraldehida disebut aldotriosa karena terdiri atas tiga atom karbon dan

mempunyai gugus aldehida. Dihidroksiaseton dinamakan ketotriosa karena terdiri atas tiga atom

karbon dan mempunyai gugus keton. Monosakarida yang terdiri atas empat atom karbon disebut

tetrosa dengan rumus C4H8O4. Eritrosa adalah contoh aldotetrosa dan eritrulosa adalah suatu

ketotetrosa. Pentosa adalah monosakarida yang mempunyai lima atom karbon. Contoh pentosa

adalah ribosa dan ribulosa. Dari rumusnya kita dapat mengetahui bahwa suatu ketopentosa.

Pentosa dan heksosa (C6H12O6) merupakan monosakarida yang penting dalam kehidupan.

(McGilvery&Goldstein, 1996)

1.

Glukosa

Glukosa adalah suatu aldoheksosa dan sering disebut dekstrosa karena mempunyai sifat

dapat memutar cahaya terpolarisasi ke arah kanan. Di alam, glukosa terdapat dalam buah-

buahan dan madu lebah. Darah manusia normal mengandung glukosa dalam jumlah atau

konsentrasi yang tetap, yaitu antara 70-100 mg tiap 100 ml darah. Glukosa darah ini
http://www.othe.org/goto/http:/2.bp.blogspot.com/_9MTK5JQmGDA/SuBc8SL2VvI/AAAAAAAAASI/HZkBeAnPThc/s1600-h/cincin+piran+dan+furan.jpg


4/38

dapat bertambah setelah kita makan makanan sumber karbohidrat, namun kira-kira 2 jam

sesudah itu, jumlah glukosa darah akan kembali pada keadaan semula. Pada orang yang

menderita diabetes mellitus, jumlah glukosa darah lebih dari 130 mg per 100 ml darah

(McGilvery&Goldstein, 1996). D-glukosa memiliki sifat mereduksi reagen Benedict,

Haynes, Barfoed, gula pereduksi, memberi osazon dengan fenilhidrazina,

difermentasikan oleh ragi dan dengan HNO3 membentuk asan sakarat yang larut (Harper

et al, 1979).

2. Fruktosa

Madu lebah selain mengandung glukosa juga mengandung fruktosa. Fruktosa adalah

suatu ketoheksosa yang mempunyai sifat memutar cahaya terpolarisasi ke kiri dan

karenanya disebut juga levulosa. Pada umumnya monosakarida dan disakarida

mempunyai rasa manis. Fruktosa mempunyai rasa lebih manis daripada glukosa, juga

lebih manis daripada gula tebu atau sukrosa. Fruktosa dapat dibedakan dari glukosa

dengan pereaksi seliwanoff, yaitu larutan resorsinol (1,3 dihidroksi benzene) dalam asam

HCl. Dengan pereaksi ini, mula-mula fruktosa diubah menjadi hidroksimetilfurfural yang

selanjutnya bereaksi dengan resorsinol membentuk senyawa yang berwarna merah.

pereaksi Seliwanoff ini khas untuk menunjukkan adanya ketosa. Fruktosa berikatan

dengan glukosa membentuk sukrosa, yaitu gula yang biasa digunakan sehari-hari sebagai

pemanis, dan berasal dari tebu atau bit (McGilvery&Goldstein, 1996). D-fruktosa

mempunyai sifat mereduksi reagen Benedict, Haynes, Barfoed (gula pereduksi),

membentuk osazon dengan fenilhidrazina yang identik dengan osazon glukosa,

difermentasi oleh ragi dan berwarna merah ceri dengan reagen Seliwanoff resorsinol-HCl

(Harper et al, 1979).

3. Galaktosa

Monosakarida ini jarang terdapat bebas dalam alam. Umumnya berikatan dengan glukosa

dalam bentuk laktosa, yaitu gula yang terdapat dalam susu. Galaktosa mempunyai rasa

kurang manis daripada glukosa dan kurang larut dalam air. Galaktosa mempunyai sifat

memutar bidang cahaya terpolarisasi ke kanan. D-galaktosa mempunyai sifat mereduksi

reagen Benedict, Haynes dan Barfoed, membentuk osazon yang berbeda dengan dua

monosakarida sebelumnya (glukosa dan fruktosa), dengan reagen floroglusinol memberi

warna merah, dan dengan HNO3 membentuk asam musat (Harper et al, 1979).


5/38

Pada proses oksidasi oleh asam nitrat pekat dan dalam keadaan panas, galaktosa

menghasilkan asam musat yang kurang larut dalam air bila dibandingkan dengan asam

sakarat yang dihasilkan oleh oksidasi glukosa. Pembentukan asam musat ini dapat

dijadikan cara identifikasi galaktosa, karena kristal asam musat mudah dimurnikan dan

diketahui bentuk kristal maupun titik leburnya. (McGilvery&Goldstein, 1996)

4. Pentosa

Beberapa pentosa yang penting diantaranya adalah arabinosa, xilosa, ribosa dan 2-

deoksiribosa. Keempat pentosa ini adalah aldopentosa dan tidak terdapat dalam keadaan

bebas di alam. Arabinosa diperoleh dari gum arab dengan jalan hidrolisis, sedangkan

xilosa diperoleh dari proses hidrolisis terhadap jerami atau kayu. Xilosa terdapat pada

urine seseorang yang disebabkan oleh suatu kelainan pada metabolisme karbohidrat.

Kondisi seseorang sedemikian itu disebut pentosuria. Ribosa dan deoksiribosa merupakan

komponen dari asam nukleat dan dapat diperoleh dengan cara hidrolisis. Dari rumusnya

tampak bahwa deoksiribosa kekurangan satu atom oksigen dibanding dengan ribosa.


Oligosakarida

Senyawa yang termasukoligosakarida mempunyai molekul yang terdiri atas beberapa

molekul monosakarida. Dua molekul monosakarida yang berikatan satu dengan yang lain,

membentuk satu molekul disakarida. Oligosakarida yang lain adalah trisakarida yaitu yang terdiri

atas tiga molekul monosakarida dan tetrasakarida yang terbentuk dari empat molekul

monosakarida. Oligosakarida yang paling banyak terdapat di alam adalah disakarida.


1.Sukrosa

Sukrosa adalah gula yang kita kenal sehari-hari, baik yang berasal dari tebu meupun dari bit.

Selain dari tebu dan bit, sukrosa terdapat pada tumbuhan lain, misalnya dalam buah nanas dan

dalamwortel. Dengan hidrolisis sukrosa akan terpecah dan menghasilkan glukosa dan fruktosa.



6/38

Pada molekul sukrosa terdapat ikatan antara molekul glukosa dan fruktosa, yaitu antara atom

karbon nomor 1 pada glukosa dengan atom karbon nomor 2 pada fruktosa melalui atom oksigen.

Kedua atom karbon tersebut adalah atom karbon yang mempunyai gugus OH glikosidik atau

atom karbon yang merupakan gugus aldehida pada glukosa dan gugus keton pada fruktosa. .

Oleh karena itu molekul sukrosa tidak mempunyai sifat dapat mereduksi ion-ion Cu 2+ atau Ag+

dan juga tidak membentuk osazon. (McGilvery&Goldstein, 1996)

Sukrosa mempunyai sifat memutar cahaya terpolarisasi ke kanan. Hasil yang diperoleh dari

reaksi hidrolisis adalah glukosa dan fruktosa dalam jumlah yang ekuimolekuler. Glukosa

memutar cahaya terpolarisasi ke kanan, sedangkan fruktosa ke kira. Oleh karena fruktosa

memiliki rotasi spesifik lebih besar dari glukosa, maka campuran glukosa dan fruktosa sebagai

hasil hidrolisis itu memutar ke kiri. Proses ini disebut inverse. hasil hidrolisis sukrosa yaitucampuran glukosa dan fruktosa disebut gula invert. Madu lebah sebagian besar terdiri atas gula

invert dan dengan demikian madu mempunyai rasa lebih manis daripada gula. Apabila kita

makan makanan yang mengandung gula, maka dalam usus halus, sukrosa akan diubaha menjadi

glukosa dan fruktosa oleh enzim sukrase atau invertase. (McGilvery&Goldstein, 1996)

2.Laktosa

Dengan menghidrolisis laktosa akan menghasilkan D-galaktosa dan D-gluokosa, karena itu

laktosa adalah suatu disakarida. Ikatan galaktosa dan glukosa terjadi antara atom karbon nomor 1

pada galaktosa dan atom karbon nomor 4 pada glukosa. Oleh karenanya molekul laktosa

mempunyai sifat mereduksi gugus OH glikosidik. Dengan demikian laktosa memiliki sifat

mereduksi dan mutarotasi. Biasanya laktosa mengkristal dalam bentuk . Dalam susu terdapat

laktosa yang sering disebut gula susu. Pada wanita yang seadng dalam masa laktasi atau masa

menyusui, laktosa kadang-kadang terdapat dalam urine dengan konsentrasi yang sangat rendah.

Dibandingkan dengan glukosa, laktosa memiliki rasa yang kurang manis. Apabila laktosa

dihidrolisis kemudian dipanaskan dengan asam nitrat akan terbetuk asam musat.(McGilvery&Goldstein, 1996)

3.Maltosa

Maltosa adalah suatu disakarida yang terbentuk dari dua molekul glukosa. ikatan yang terjadi

ialah antara atom karbon nomor 1 dan atom karbon nomor 4, oleh karenanya maltosa masih


7/38

mempunyai gugus OH glikosidik dan dengan demikian masih mempunyai sifat mereduksi.

Maltosa merupakan hasil antara dalam proses hidrolisis amilum dengan asam maupun dengan

enzim. (McGilvery&Goldstein, 1996)

Telah diketahui bahwa hidrolisis amilum akan memberikan hasil akhir glukosa. Dalam tubuh

kita amilum mengalami hidrolisis menjadi maltosa oleh enzim amylase. maltosa ini kemudian

diuraikan oleh enzim maltase menjadi glukosa yang digunakan oleh tubuh. Maltosa mudah larut

dalam air dan mempunyai rasa yang lebih manis daripada laktosa, tetapi kurang manis daripada

sukrosa. (McGilvery&Goldstein, 1996)

Urutan tingkat rasa manis pada beberapa mono dan disakarida

Polisakarida

Pada umumnya polisakarida mempunyai molekul besar dan lebih kompleks daripada mono dan

oligosakarida, Molekul polisakarida terdiri atas banyak molekul monosakarida. Polisakarida

yang terdiri atas satu macam monosakarida saja disebut homopolisakarida, sedangkan yang

menagdung senyawa lain disebut heteropolisakarida. Umumnya polisakarida berupa senyawa

berwarna putih dan tidak berbentuk kristal, tidak memiliki rasa manis dan tidak memiliki sifat

mereduksi. Berat molekut polisakarida bervariasi dari beberapa ribu hingga lebih dari satu juta.

Polisakarida yang dapat larut dalam air akan membentuk larutan koloid. beberapa polisakarida

yang penting diantaranya adalah amilim, glikogen, dekstrin dan selulosa.

http://www.othe.org/goto/http:/3.bp.blogspot.com/_9MTK5JQmGDA/SuBdV9Bl2QI/AAAAAAAAASY/NBsxSRO98aY/s1600-h/Urutan+tingkat+rasa+manis+pada+beberapa+mono+dan+disakarida.jpg


8/38

1.Amilum

Polisakarida ini terdapat banyak di alam, yaitu pada sebagian besar tumbuhan. Amilum atau

dalam bahasa sehari-hari disebut pati terdapat pada umbi, daun, batang dan biji-bijian.


Amilum terdiri atas dua macam polisakarida yang kedua-duanya adalah polimer dari glukosa,

yaitu amilosa (kira-kira 20-28%) dan sisanya amilopektin. Amilosa terdiri atas 250-300 unit D-

glukosa yang terikat dengan ikatan 1,4-glikosidik, jadi molekulnya merupakan rantai terbuka.

Amilopektin juga terdiri atas molekul D-glukosa yang sebagian besar mempunyai ikatan 1,4-

glikosidik dan sebagian lagi ikatan 1,6-glikosidik. Adanya ikatan 1,6-glikosidik ini menyebabkan

terjadinya cabang, sehingga molekul amilopektin berbentuk rantai terbuka dan bercabang.

Molekul amilopektin lebih besar daripada molekul amilosa karena terdiri atas lebih dari 1.000unit glukosa. Butir-butir pati tidak larut dalam air dingin tetapi apabila suspensi dalam air

dipanaskan, akan terbentuk suatu larutan koloid yang kental. larutan koloid ini apabila diberi

larutan iodium akan berwarna biru. Warna biru tersebut disebabkan oleh molekul amilosa yang

membentuk senyawa. Amilopektin dengan iodium akan memberikan warna ungu atau merah

lembayung. (McGilvery&Goldstein, 1996)

Amilum dapat dihidrolisis sempurna dengan menggunakan asam sehingga menghasilkan

glukosa. hidrolisis juga dapat dilakukan dengan bantuan enzim amylase. Dalam ludah dan dalam

cairan yang dikeluarkan oleh pankreas terdapat amylase yang bekerja terhadap amilum yang

terdapat dalam makanan kita. Oleh enzim amylase, amilum diubah menjadi maltosa dalam

bentuk maltosa. (McGilvery&Goldstein, 1996)

2.Glikogen

Seperti amilum, glikogen juga menghasilkan D-glukosa pada proses hidrolisis. Pada tubuh kita

glikogen terdapat dalam hati dan otot. hati berfungsi sebagai tempat pembentukan glikogen dari

glukosa. Apabila kadar glukosa dalam darah bertambah, sebagian diubah menjadi glikogen

sehingga kadar glukosa dalam darah normal kembali. Sebaliknya apabila kadar glukosa dalam

darah menurun, glikogen dalam hati diuraikan menjadi glukosa kembalu, sehingga kadar glukosa

darah normal kembali. Glikogen yang ada di dalam otot digunakan sebagai sumber energi untuk


9/38

melakukan aktivitas sehari-hari. Dari alam glikogen terdapat pada kerang dan pada alga rumput

laut. (McGilvery&Goldstein, 1996)

Glikogen yang terlarut dalam air dapat diendapkan dengan jalan menambahkan etanol. Endapan

yang terbentuk apabila dikeringkan berbentuk serbuk putih. Dengan iodium, glikogen

menghasilkan warna merah. Struktur glikogen serupa dengan struktur amilopektin yaitu

merupakan rantai glukosa yang mempunyai cabang. (McGilvery&Goldstein, 1996)

3.Dekstrin

Pada reaksi hidrolisis parsial, amilum terpecah menjadi molekul-molekul yang lebih kecil yang

dikenal dengan nama dekstrin. jadi dekstrin adalah hasil antara proses hidrolisis amilum sebelum

terbentuk maltosa. tahap-tahap dalam proses hidrolisis amilum serta warna yang terjadi pada

reaksi dengan iodium adalah sebagai berikut :

4.Selulosa

Selulosa terdapat dalam tumbuhan sebagai bahan penbentuk dinding sel. Serat kapas boleh

dikatakan seluruhnya adalah selulosa. Dalam tubuh kita selulosa tidak dapat dicernakan karena

kita tidak mempunyai enzin yang dapat menguraikan selulosa. Dengan asam encer tidak dapat

terhidrolisis, tetapi oleh asam dengan konsentrasi tinggi dapat terhidrolisis menjadi selobiosa dan

D-glukosa. Selobiosa adalah suatu disakarida yang terdiri atas dua molekul glukosa yang

berikatan glikosidik antara atom karbon 1 dengan atom karbon 4. (McGilvery&Goldstein, 1996)
http://www.othe.org/goto/http:/4.bp.blogspot.com/_9MTK5JQmGDA/SuBdgA1poxI/AAAAAAAAASg/rnwIIIPlG8s/s1600-h/tahap+hidrolisis+amilum.jpg


10/38

Beberapa sifat kimia

Berbeda dengan sifat fisika yang telah diuraikan, yaitu aktivitas optik, sifat kimia karbohidrat

berhubungan erat dengan gugus fingsi yang terdapat pada molekulnya, yaitu gugus OH

aldehida dan gugus keton. (McGilvery&Goldstein, 1996)

a. Sifat mereduksi

Monosakarida dan beberapa disakarida mempunyai sifat dapat mereduksi terutama dalam

suasana basa. Sifat sebagai reduktor ini dapat digunakan untuk keperluan identifikasi karbohidrat

maupun analisis kuantitatif. Sifat mereduksi ini disebabkan oleh adanya gugus aldehida atau

keton bebas dalam molekul karbohidrat. Sifat ini tampak pada reaksi reduksi ion-ion logam

misalnya ion Cu 2+ dan ion Ag+ yang terdapat pada pereaksi-pereaksi tertentu. Beberapa contoh

diberikan sebagai berikut:

Pereaksi Benedict

Pereaksi benedict berupa larutan yang mengandung kuprisulfat, natrium karbonat dan

natrium sitrat. Glukosa dapat mereduksi ion Cu2+ dari kuprisulfat menjadi ion Cu+ yang

kemudian mengendap sebagai Cu2O. Adanya natrium karbonat dan natrium sitrat

membuat peraksi benedict bersifat basa lemah. Endapat yang terbentuk dapat berwarna

hijau, kuning atau merah bata. Warna endapan ini tergantung pada konsentrasi

karbohidrat yang diperiksa. Pereaksi Benedict lebih banyak digunakan pada pemeriksaan

glukosa dalam urine daripada pereaksi Fehling karena beberapa alasan. Apabila dalam

urine terdapat asam urat atau kreatinin, kedua senyaea ini dapat mereduksi pereaksi

Fehling, tetapi tidak dapat mereduksi pereaksi Benedict. Di samping itu pereaksi

Benedict lebih peka daripada pereaksi Fehling. Penggunaan pereaksi Benedict juga lebih

mudah karena hanya terdiri atas satu macam larutan, sedangkan pereaksi Fehling terdiri

atas dua macam larutan. (McGilvery&Goldstein, 1996)


11/38

Uji molisch

Uji molisch merupakan uji kualitatif untuk menentukan adanya kabohidrat dalam suatu

sampel. Untuk melakukan Uji molisch digunakan reagen kimia yang berupa larutan

naftol dalam alkohol. Apabila suatu sampel tersebut mengandung kabohidrat maka

larutan tersebut akan berubah menjadi warna merah unggu. Prinsip dari uji adalah asam

sulfat (H2SO4) pekat akan mengdehidrasi senyawa yang ada dalam karbohidrat

menghasilkan furfural dan derivat karbohidrat. Kondensasi dari hidroksi metal furfural

(heksosa) atau furfural (pentosa) yang telah terbentuk akan bereaksi dengan alfa-naftol

membentuk suatu cincin berwarna ungu. Reaksi positif ditandai dengan munculnya

cincin ungu di purmukaan antara lapisan asam dan lapisan sampel. Alfa-naftol berfungsi

sebagai indikator warna, sedangkan HSO berfungsi untuk menghidrolisis glukosa

(heksosa) menjadi hidroksimetil fufural atau arabinosa (pentosa). Reaksi Molisch ini

positif untuk semua karbohidrat ( Kusnawidjaya, 1983).

a. Pada pentosa

H O

CH2OHHCOHHCOHHCOHC=O + H2SO4 CH +

OH(Pentosa) ( Furfural ) (-naftol)


12/38

b. Pada heksosa

H

CH2OHHCOHHCOHHCOHHCOHC=O + H2SO4

Heksosa

O

H2C CH +

OH OH

5-hidroksimetil furfural -naftol

Rumus dari cincin ungu yang terbentuk adalah sebagai berikut:

O

__SO3H

H2C C OH

(Cincin ungu senyawa kompleks)

Untuk uji negatif pada uji molisch adalah tidak terbentuk cincin berwarna ungu karena

tidak terjadi dehidrasi pada larutan uji oleh HSOyang tidak menghasilkan furfural dan

derivat karbohidrat. Oleh karena tidak adanya furfural dan derivat karbohidrat yang

terbentuk maka larutan alfa-naftol pun tidak akan memberikan reaksi terbentuknya cincin


13/38

ungu. Uji molisch ini hanya uji secara umum untuk menguji ada tidaknya suatu bahan

mengandung karbohidrat.

b.

Pembentukan furfural

Dalam larutan asam yang encer, walaupun dipanaskan, monosakarida umumnya stabil.

Tetapi apabila dipanaskan dengan kuat yang pekat, monosakarida menghasilkan furfural

atau derivatnya. Reaksi pembentukan furfural ini adalah reaksi dehidrasi atau pelepasan

molekul air dari seatu senyawa. (McGilvery&Goldstein, 1996)

Pentosa-pentosa hampir secara kuantitatif semua terdrhidrasi menjadi furfural. Dengan

dehidrasi heksosa-heksosa menghasilkan hidroksimetilfurfural. Oleh karena furfural dan

derivatnya dapat membentuk senyawa yang berwarna apabila direaksikan dengan

naftol atau timol, reaksi ini dapat digunakan sebagai reaksi pengenal karbohidrat.

Pereaksi Molisch terdiri atas larutan naftol dalam alkohol. Apabila pereaksi ini

ditambahkan pada larutan glukosa misalnya, kemudian secara hati-hati ditambahkan

asam sulfat pekat, akan terbentuk dua lapisan zat cair. Pada batas antara kedua lapisan itu

akan terjadi warna ungu karena terjadi reaksi kondensasi antara furfural dengan naftol.

Walaupun reaksi ini tidak spesifik untuk karbohidrat, namun dapat digunakan sebagai

reaksi pendahuluan dalam analisis kualitatif karbohidrat. Hasil negatif merupakan suatu

bukti bahwa tidak ada karbohidrat. (McGilvery&Goldstein, 1996). Tes ini berguna untuk

mengetahui pengaruh asam terhadap sakarida. Satu cincin merah-ungu menunjukkan

adanya karbohidrat (Harper et al, 1979).

c. Pembentukan Osazon

Semua karbohidrat yang mempunyai gugus aldehid atau keton bebas akan membentuk

osazon bila dipanaskan bersama fenilhidrazina berlebih. Osazon yang terjadi mempunyai

bentuk kristal dan titik lebur yang khas bagi masing-masing karbohidrat. Pada reaksi

antara flukosa dengan fenilhirazina, mula-mula terbentuk D-glukosafenilhidrazon,


14/38

kemudian reaksi berlanjut hingga terbentuk D-glukosazon. Glukosa, fruktosa dan

amanosa dengan fenilhidrazon menghasilkan osazon yang sama. Dari struktur ketiga

monosakarida tersebut tampak bahwa posisi gugus OH dan atom H pada atom karbon

nomor 3,4, dan 5 sama. Dengan demikian osazon yang terbentuk memiliki struktur yang

sama. (McGilvery&Goldstein, 1996).


15/38

ALAT DAN BAHAN

ALAT

1 Tabung Reaksi

2 Kaki Tiga

3 Spiritus

4 Penjepit tabung reaksi

5 rak tabung reaksi

6 Pipet tetes

7 Kertas saring

8 gelas ukur

BAHAN

1 Amilum

2 HCl

3 Asam sulfat pekat (H2SO4pekat)

4 Serbuk Selulosa

5 Kertas Filter

6 Larutan naftol

7 glukosa

8 Larutan Iod

9 NaOH

10 Reagen Benedict


16/38

CARA KERJA

1. Uji Kelarutan dan Percobaan Molisch

a Amilum

b Selulosa

c Monosakarida

Ambil Larutan amilumBubuhi dengan

beberapa tetes larutan

naftol dalam alkohol

Tuang lahan-lahan asam

sulfat pekat melalui

Hingga terjadi batasan

cincin

HASIL

Sobek kertas filter atau

serbuk selulosaMasukkan ke dalam 2cc

air

Teteskan larutan naftol

Dan dengan asam sulfat

pekat di batasi cincin

HASIL

Ambil Larutan glukosa

1ml

Tambah 2 tetes 10% naftol yang baru

Campur aliran 1 ml

H2SO4pekat

Hingga membentuklapisan di cawan

HASIL


17/38

2 Percobaan Iod

3 Percobaan Benedict

4 Hidrolisis Selulosa

Ambil Larutan amilum

dalam 1-2ml

Tambah 1 tetes larutan

iod

Bandingkan perubahan

warna yang terjadi bila di

panaskan, dinginkan dan ditambah NaOH

HASIL

Ambil Reagen benedict2ml

Tambah 2 tetes larutan

yang di periksa Panaskan dalam api

selama 2-3 menit

Amati perubahan warna

yang terjadi

HASIL

Potong kertas saring

secukupnyaBasahi dengan air Tambah asam sulfat

pekat perlahan-lahan

Di aduk dan di panaskan

setelah itu tunggu sampai

1 jam

Ambil beberapa tetes

larutan dan tes

dengan Benedict

HASIL


18/38

5 Hidrolisis Amilum

6 Uji Osazon

Ambil suspensi amilum10ml

Tambah 2,5 ml 1N HCl Panaskan pada apilangsung

Setiap tiga menit tes

larutan dengan tes iodium

Tetap panaskan

hingga terjadi

perubahan warna

HASIL

Tabung reaksi diisi 0,5 ml

larutan fenilhidrazin, Na-

asetat kering dan

ditambahkan 2 ml bahan uji

Dikocok hingga

homogen

Dipanaskan dalam

penangas air

mendidih selama 30

menit

Apabila sudah dinginkelihatan warna

kuning dan diperiksa

dibawah mikroskop

HASIL


19/38

HASIL PENGAMATAN

Uji molisch

NO Bahan Uji Hasil Akhir Pengamatan

1. Amilum (polisakarida) Terbentuk cincin ungu kehitaman (+)

2. Selulosa (polisakarida) Terbentuk warna ungu kehitaman (+)

3. Maltosa (disakarida) Terbentuk cincin ungu (+)

4. Sukrosa (disakarida) Terbentuk warna ungu kehitaman (+)

5. Fruktosa (monosakarida) Terbentuk cincin ungu (+)

6. Glukosa (monosakarida) Terbentuk warna ungu lebih pekat dari sukrosa (+)7. Arabinosa (monosakarida) Terbentuk cincin ungu bening (+)

8. Galaktosa (monosakarida) Terbentuk warna ungu lebih pekat dari arabinosa(+)

9. Glikogen (polisakarida) Terbentuk cincin ungu (+)

10. Laktosa (disakarida) Terbentuk warna ungu lebih pekat dari glikogen (+)

Uji Iod

No Bahan Pengamatan Polisakarida (+/-)

1 Amilum Terbentuk endapan berwarna biru

kehitaman+

Setelah dipanaskan berwarna bening sedikit

kekuningan-

Setelah didinginkan berwarna biru

keunguan+

Setelah ditetesi NaOH menjadi tidak

berwarna-

2 Maltosa Berwarna kekuningan tidak terbentuk endapan -

3 Fruktosa Berwarna kekuningan tidak terbentuk endapan -

4 Glukosa Berwarna kekuningan tidak terbentuk endapan -


20/38

5 Arabinosa Berwarna kekuningan tidak terbentuk endapan -

6 Galaktosa Berwarna kekuningan tidak terbentuk endapan -

7 Glikogen Terdapat endapan berwarna coklat kemerahan +

8 Laktosa Berwarna kekuningan tidak tebentuk endapan -

Uji benedict

No Larutan Uji Sebelum dipanaskan Sesudah dipanaskan Keterangan

1 Amilum 1 % Biru Tetap biru (-)

2 Selulosa 1% Biru Tetap biru (-)

3 Maltosa 1% Biru Merah (+)

4 Sukrosa 1% Biru Hijau dan jingga (+)

5 Fruktosa 1% Biru Merah (+)

6 Glukosa 1% Biru Merah (+)

7 Arabinosa 1% Biru Merah (+)

8 Galaktosa 1% Biru Merah (+)

9 Glikogen 1% Biru Tetap biru (-)

10 Laktosa 1% Biru Merah (+)

Keterangan :

(+) : mengandung gula pereduksi

(-) : tidak mengandung gula pereduksi

Hidrolisis selulosa

NO Langkah- Langkah Perubahan pada kertas saring

1. Setelah ditambah H2SO4 Terbentuk cicncin berwarna hitam2. Setelah diaduk Larutan berwarna kuning kecoklatan

3. Setelah dipanaskan Warna berubah kehitaman

4. Setelah diuji dengan reagenBenedict

Berwarna biru muda

Keterangan Hasil uji negatif (-)


21/38

Hidrolisis amilum

A. Reagen Iodin

Waktu Hasil pengamatan

1. 3 menit Kuning kehitaman

2. 6 menit Kuning kecokelatan

3. 9 menit Kuning

B. Reagen benedict

Waktu Hasil pengamatan

1. 3 menit Hijau muda

2. 6 menit Hijau (+)

3. 9 menit Hijau (++)

4. 12 menit Hijau (+++)

Keterangan : amilum + HCl sebelum dipanaskan keruh

Amilum + HCl setelah dipanaskan bening

Uji osazon

No. Nama Bahan Hail Pengamatan Gambar Keterangan

1.Glukosa

Setelah dipanaskan kedalam penangas

air selasma 30 menit dan didinginkanterbentuk endapan berwarna kuning

dan setelah diamati dengan mikroskopterbentuk adanya kristal.

(+)

2. FruktosaTerbentuk endapan berwarna kuningkeemasan dan ketika diamati dengan

mikroskop terbentuk adanya kristal.

(+)


22/38

3. Galaktosa

Terbentuk endapan berwarna kuning

keemasan dan ketika diamati dengan

mikroskop terbentuk adanya kristal

(+)

4. Laktosa

Terbentuk endapan berwarna kuningkeemasan dan ketika diamati dengan

mikroskop tidak terbentuk adanya

kristal.

(-)

5. MaltosaTerbentuk endapan berwarna kuningdan ketika diamati dengan mikroskop

terbentuk adanya kristal.

(+)

6. SukrosaTerbentuk endapan berwarna kuningkeemasan dan ketika diamati dengan

mikroskop tidak terbentuk adanyakristal.

(-)

7. Arabinosa

Terbentuk endapan berwarna kuning

keemasan dan ketika diamati dengan

mikroskop terbentuk adanya kristal.

(+)

Keterangan :

(+) = positif mengandung karbohidrat.

(-) = tidak mengandung karbohidrat.

Uji Osazon = Digunakan untuk mengetahui bentuk gugus glukosa.


23/38

ANALISIS DATA

Uji molisch

Pada percobaan uji molisch yang kami lakukan yang pertama adalah pada amilum.

Dimana percobaan dilakukan dengan larutan amilum dimasukkan beberapa tetes pada tabung

reaksi. Kemudian ditambahkan beberapa tetes larutan -naftol. Setelah itu dialirkan asam sulfat

pekat sebanyak 1 ml melalui dinding tabung reaksi secara perlahan. Dan didapatkan hasil

percobaan larutan amilum membentuk cincin ungu kehitaman, menandakan uji positif (+)

adanya karbohidrat pada amilum.

Pada percobaan uji molisch yang kami lakukan yang kedua adalah pada selulosa. Dimana

percobaan dilakukan dengan kertas selulosa disobek-sobek dan dimasukkan pada tabung reaksi.

Kemudian ditambahkan 2 cc air dan beberapa tetes larutan -naftol. Setelah itu dialirkan asamsulfat pekat sebanyak 1 ml melalui dinding tabung reaksi secara perlahan. Dan didapatkan hasil

percobaan sobekan kertas selulosa membentuk warna ungu kehitaman, menandakan uji positif

(+) adanya karbohidrat pada kertas selulosa

Pada percobaan uji molisch yang kami lakukan yang ketiga adalah pada larutan maltosa.

Dimana percobaan dilakukan dengan larutan maltosa dimasukkan beberapa tetes pada tabung



percobaan larutan maltosa membentuk cincin ungu, menandakan uji positif (+) adanya

karbohidrat pada larutan maltosa.

Pada percobaan uji molisch yang kami lakukan yang keempat adalah pada larutan

sukrosa. Dimana percobaan dilakukan dengan larutan sukrosa dimasukkan beberapa tetes pada

tabung reaksi. Kemudian ditambahkan beberapa tetes larutan -naftol. Setelah itu dialirkan asamsulfat pekat sebanyak 1 ml melalui dinding tabung reaksi secara perlahan. Dan didapatkan hasil

percobaan larutan sukrosa membentuk warna ungu kehitaman, menandakan uji positif (+)

adanya karbohidrat pada larutan sukrosa.


24/38

Pada percobaan uji molisch yang kami lakukan yang kelima adalah pada larutan fruktosa.

Dimana percobaan dilakukan dengan larutan fruktosa dimasukkan beberapa tetes pada tabung



percobaan larutan fruktosa membentuk cincin ungu, menandakan uji positif (+) adanya

karbohidrat pada larutan fruktosa.

Pada percobaan uji molisch yang kami lakukan yang keenam adalah pada larutan

glukosa. Dimana percobaan dilakukan dengan larutan glukosa dimasukkan beberapa tetes pada

tabung reaksi. Kemudian ditambahkan beberapa tetes larutan -naftol. Setelah itu dialirkan asam

sulfat pekat sebanyak 1 ml melalui dinding tabung reaksi secara perlahan. Dan didapatkan hasil

percobaan larutan glukosa membentuk warna ungu lebih pekat dari sukrosa, menandakan uji

positif (+) adanya karbohidrat pada larutan glukosa .

Pada percobaan uji molisch yang kami lakukan yang ketujuh adalah pada larutan

arabinosa. Dimana percobaan dilakukan dengan larutan arabinosa dimasukkan beberapa tetes

pada tabung reaksi. Kemudian ditambahkan beberapa tetes larutan -naftol. Setelah itu dialirkan

asam sulfat pekat sebanyak 1 ml melalui dinding tabung reaksi secara perlahan. Dan didapatkan

hasil percobaan larutan arabinosa memrbentuk cincin ungu bening, menandakan uji positif (+)

adanya karbohidrat pada larutan arabinosa.

Pada percobaan uji molisch yang kami lakukan yang kedelapan adalah pada larutan

Galaktosa . Dimana percobaan dilakukan dengan larutan Galaktosa dimasukkan beberapa tetes



hasil percobaan larutan Galaktosa membentuk warna ungu lebih pekat dari arabinosa,

menandakan uji positif (+) adanya karbohidrat pada larutan Galaktosa.

Pada percobaan uji molisch yang kami lakukan yang kesembilan adalah pada larutan

Glikogen . Dimana percobaan dilakukan dengan larutan Glikogen dimasukkan beberapa tetes




25/38

hasil percobaan larutan Glikogen membentuk cincin ungu, menandakan uji positif (+) adanya

karbohidrat pada larutan Glikogen.

Pada percobaan uji molisch yang kami lakukan yang kesepuluh adalah pada larutan

Laktosa. Dimana percobaan dilakukan dengan larutan Laktosa dimasukkan beberapa tetes pada

tabung reaksi. Kemudian ditambahkan beberapa tetes larutan -naftol. Setelah itu dialirkan asam

sulfat pekat sebanyak 1 ml melalui dinding tabung reaksi secara perlahan. Dan didapatkan hasil

percobaan larutan Laktosa membentuk warna ungu lebih pekat dari glikogen, menandakan uji

positif (+) adanya karbohidrat pada larutan Laktosa.

Uji Iod

Pada percobaan ini sampel yang akan di uji diteteskan peda pelat tetes lalu di tetesi

reagen iod yaitu larutan IKI yang didapatkan hasil yaitu maltose, fruktosa, glukosa, arabinosa,

galaktosa dan laktosa berwarna kekuningan. Hal ini menunjukkan reaksi negative uji iod pada

sampel. Sedangkan pada amilum dan glikogen menunjukkan reaksi positif uji iod yang

menghasilkan perubahan warna biru kehitaman peda amilum dan berwarna merah kecoklatan

pada glikogen.

Pada percobaan dengan sampel amilum dilakukan beberapa perlakuan selain dengan

meneteskan reagen iod pada sampel, juga dilakukan pemanasan yang menghasilkan perubahan

warna dari biru kehitaman menjadi bening kekuningan hal ini menunjukkan reaksi negative uji

iod. Setelah itu sampel pada tabung reaksi di dinginkan yang menghasilkan perubahan warna

dari bening kekuningan menjadi biru keunguan, hal ini menujukkan adanya reaksi positif uji iod

pada sampel. Setelah dingin sampel dalam tabung reaksi di tetesi NaOH yang menyebabkan

perubahan warna dari biru keunguan menjadi tidak berwarna (bening), hal ini menunjukkan

reaksi neatif uji iod pada sampel amilum.

Uji benedict

Pada percobaan benedict digunakan bahan uji yaitu amilum,selulosa,maltosa,sukrosa,

fruktosa, glukosa,arabinosa,galaktosa,glikogen dan laktosa. Sedangkan reagen yang digunakan

yaitu larutan fehling A dan larutan fehling B. Pada percobaan benedict langkah pertama yaitu

diambil 10 ml larutan fehling A dan10 ml larutan fehling B ke dalam tabung reaksi lalu kedua


26/38

larutan dikocok sehingga menghasilkan warna biru. Setelah itu ditambahkan 8 tetes larutan yang

akan diuji. Kemudian tabung reaksi dipanaskan dalam api secara langsung selama 2-3 menit.

Adanya perubahan warna hijau, kuning, jingga atau merah menunjukkan reaksi yang positif.

Prinsipnya larutan-larutan tembaga yang alkalis bila direduksi oleh karbohidrat yang mempunyai

gugus keton bebas akan membentuk Cupro Oksida (Cu2O) yang berwarna kuning sampai merah.

Tujuan dari percobaan benedict ini adalah untuk mengetahui ada tidaknya gula pereduksi pada

bahan uji.

Pada tabung pertama yang berisi larutan fehling A dan fehling B yang berwarna biru

setelah itu ditambahkan larutan amilum sebanyak 8 tetes lalu dipanaskan selama 2-3 menit.

Setelah dipanaskan, larutan benedict dan amilum tidak menghasilkan perubahan warna atau

campuran tetap berwarna biru. Hal ini menunjukkan bahwa amilum tidak mengandung gula

pereduksi. Pada tabung reaksi kedua yang berisi larutan fehling A dan fehling B yang berwarna

biru setelah itu ditambahkan larutan selulosa sebanyak 8 tetes lalu dipanaskan selama 2-3 menit.

Setelah dipanaskan, larutan benedict dan selulosa tidak menghasilkan perubahan warna atau

campuran tetap berwarna biru. Hal ini menunjukkan bahwa selulosa tidak mengandung gula

pereduksi.

Pada tabung reaksi ketiga yang berisi larutan fehling A dan fehling B yang berwarna biru

setelah itu ditambahkan larutan maltosa sebanyak 8 tetes lalu dipanaskan selama 2-3 menit.

Setelah dipanaskan, larutan benedict dan selulosa menghasilkan perubahan warna menjadi

merah. Hal ini menunjukkan bahwa maltosa mengandung gula pereduksi. Pada tabung keempat

yang berisi larutan fehling A dan fehling B yang berwarna biru setelah itu ditambahkan larutan

sukrosa sebanyak 8 tetes lalu dipanaskan selama 2-3 menit. Setelah dipanaskan, larutan benedict

dan sukrosa menghasilkan perubahan warna menjadi hijau dan jingga. Hal ini menunjukkan

bahwa sukrosa mengandung gula pereduksi.

Pada tabung kelima yang berisi larutan fehling A dan fehling B yang berwarna birusetelah itu ditambahkan larutan frukrosa sebanyak 8 tetes lalu dipanaskan selama 2-3 menit.

Setelah dipanaskan, larutan benedict dan frukrosa menghasilkan perubahan warna menjadi

merah. Hal ini menunjukkan bahwa frukrosa mengandung gula pereduksi. Pada tabung keenam

yang berisi larutan fehling A dan fehling B yang berwarna biru setelah itu ditambahkan larutan

glukosa sebanyak 8 tetes lalu dipanaskan selama 2-3 menit. Setelah dipanaskan, larutan benedict


27/38

dan glukosa menghasilkan perubahan warna menjadi merah. Hal ini menunjukkan bahwa

glukosa mengandung gula pereduksi.

Pada tabung ketujuh yang berisi larutan fehling A dan fehling B yang berwarna biru

setelah itu ditambahkan larutan arabinosa sebanyak 8 tetes lalu dipanaskan selama 2-3 menit.

Setelah dipanaskan, larutan benedict dan arabinosa menghasilkan perubahan warna menjadi

merah. Hal ini menunjukkan bahwa arabinosa mengandung gula pereduksi. Pada tabung

kedelapan yang berisi larutan fehling A dan fehling B yang berwarna biru setelah itu

ditambahkan larutan galaktosa sebanyak 8 tetes lalu dipanaskan selama 2-3 menit. Setelah

dipanaskan, larutan benedict dan galaktosa menghasilkan perubahan warna menjadi merah. Hal

ini menunjukkan bahwa galaktosa mengandung gula pereduksi.

Pada tabung selanjutnya yang berisi larutan fehling A dan fehling B yang berwarna biru

setelah itu ditambahkan larutan glikogen sebanyak 8 tetes lalu dipanaskan selama 2-3 menit.

Setelah dipanaskan, larutan benedict dan glikogen tidak menghasilkan perubahan warna atau

campuran tetap berwarna biru. Hal ini menunjukkan bahwa glikogen tidak mengandung gula

pereduksi. Pada tabung reaksi terakhir yang berisi larutan fehling A dan fehling B yang berwarna

biru setelah itu ditambahkan larutan laktosa sebanyak 8 tetes lalu dipanaskan selama 2-3 menit.

Setelah dipanaskan, larutan benedict dan laktosa menghasilkan perubahan warna menjadi

merah. Hal ini menunjukkan bahwa laktosa mengandung gula pereduksi.

Uji osazon

Pada percobaan ini yang pertama dilakukan adalah menyiapkan tabung reaksi sebanyak 7

buah. Kemudian siapkan bahan uji antara lain glukosa, fruktosa, galaktosa, laktosa, maltosa,

sukrosa, dan arabinosa. Disetiap tabung ditambahkan fenilhidrazin sebanyak 0,5 ml dan juga

seujung natrium asetat kering. Kemudian pada masing masing tabung diisi dengan bahan uji

sebanyak 2ml. Setelah itu dipanaskan dalam penangas air selama 30 menit dan didinginkan.

Selanjutnya setelah terbentuk endapan diamatii dengan mikroskop untuk membuktikan adannya

kristal-kristal yang terbentuk.

Pada tabung yang berisi bahan uji glukosa dan maltosa terbentuk endapan berwarna

kuning, dan ketika diamati dengan mikroskop terlihat adanya kristal. Untuk bahan uji fruktosa,

galaktosa,dan arabinosa terbentuk endapan berwarna kuning keemasan dan menunjukkan adanya


28/38

kristal setelah diamati dengan mikroskop. Namun pada tabung yang berisi laktosa dan sukrosa

terbentuk endapan berwarna kuning keemasan tetapi setelah diamati dengan mikroskop tidak

menunjukkan adanya kristal. Uji osazon ini menunjukkan positiif mengandung karbohidrat

apabila setelah pengamatan dengan mikroskop menunjukkan adanya kristal kristal.

Hidrolisis selulosa

Pada percobaan hidrolisis selulosa digunakan bahan uji yaitu potong-potongan kertas

saring sedangkan reagen yang digunakan yaitu H2SO4pekat, air dan larutan benedict. Langkah

pertama yaitu potong-potongan kertas saring yang dibasahi dengan air kemudian secara

perlahan-lahan ditambahkan asam sulfat pekat dan terbentuk cincin berwarna hitam, lalu

potongan kertas diaduk dan larutan berwarna kuning kecoklatan. Setelah itu potongan kertas

saring dipanaskan dan terjadi perubahan warna menjadi kehitaman. Kemudian potongan kertas

saring di uji dengan benedict terjadi perubahan warna menjadi biru muda. Hal ini menandakan

bahwa terdapatnya kandungan karbohidrat (selulosa) pada kertas tersebut.

Hidrolisis amilum

Pada percobaan hidrolisis amilum yang pertama dilakukan adalah mengambil larutan

amilum sebanyak 10 ml dan dimasukkan ke dalam tabung reaksi. Selanjutnya, ditambahkan HCl

pekat sebanyak 2,5 ml. Kedua campuran ini kemudian dipanaskan selama 3 menit. Setelah

pemanasan selama 3 menit dan diuji dengan reagen iodine dihasilkan perubahan warna menjadi

kuning kehitaman. Setelah itu dipanaskan kembali, pada pemanasan menit ke 6 terjadi perubahan

warna kuning kecokelatan dan setelah pemanasan 9 menit menghasilkan perubahan warna

menjadi kuning ketika diuji dengan reagen iodine.

Setelah menunjukkan hasil negative terhadap uji iodine, larutan dipanaskan kembali.

Setelah pemanasan selama 3 menit dan diuji dengan reagen benedict menghasilkan perubahan

warna menjadi hijau muda, setelah pemanasan selama 6 menit menghasilkan perubahan warnamenjadi hijau (+), setelah pemanasan 9 menit menghasilkan perubahan warna menjadi hijau (++)

lebih tua dari sebelumnya, dan setelah pemanasan 12 menit akan menghasilkan perubahan warna

menjadi hijau (+++) yang lebih tua lagi dari sebelumnya. Dari hasil pengamatan ini dapat

disimpulkan sementara bahwa lamanya pemanasan mempengaruhi proses hidrolisis.


29/38

PEMBAHASAN

Uji molisch

Pada percobaan uji molisch yang kami lakukan menunujukkan semua larutan uji yaitu

Fruktosa, Glukosa, Arabinosa, Galaktosa, Laktosa, sukrosa, maltosa , amilum, selulosa, maupun

glikogen positif mengandung karbohidrat. Hasil uji yang positif ini berdasar prinsip kerja dalam

uji molisch yaitu apabila suatu bahan mengandung karbohidrat bahan tersebut akan membentuk

cincin ungu karena ikatan sakaridayang ada pada karbohidrat akan mengalami dehidrasi oleh

H2SO4pekat yang akan menghasilkan furfural dan derivat (turunan) dari karbohidrat. Furfural

inilah yang bereaksi dengan larutan -naftol yang kemudian akan membentuk cincing berwarna

ungu. Oleh karena itulah uji molisch akan menunjukkan uji positif jika larutan yang diuji

membentuk cicin berwarna ungu. Uji negatif terjadi jika tidak terbentuk cincin berwarna ungu

pada larutan uji karena tidak terjadi dehidrasi pada larutan uji oleh HSO sehingga tidak

menghasilkan furfural dan derivat karbohidrat. Oleh karena tidak adanya furfural dan derivat

karbohidrat yang terbentuk maka larutan alfa-naftol pun tidak akan memberikan reaksi

terbentuknya cincin ungu.

Uji Iod

Pada percoban ini diperoleh hasil maltose, fruktosa, glukosa, arabinosa, galaktosa dan

laktosa mengalami reaksi negative ujiiod karena pada prinsipnya uji iod dilakukan untuk

mendeteksi adanya polisakarida pada sampel, sedangkan sampel tersebut bukan termasuk

polisakarida. Maltose dan laktosa adalah disakarida. Sedngkan fruktosa, glukosa, arabinosa dan

galaktosa adalah monosakarida.

Pada percobaan menggunakan glikogen dan amilum didapatkan hasil reaksi positif uji iod

yang menghasilkan perubahan warna biru kehitaman pada amilm dan merah kecoklatan pada

glikogen. Polisakarida dengan penambahan iodium akan membentuk kompleks adsorbsiberwarna yang spesifik. Sehingga membuktikan adanya polisakarida pada amilum dan glikogen.

Pada amilum yang ditetesi reagen iod kemudian dipanaskan. Pemanasn pada polisakarida

menyebabkan kumparan kumparan pada polisakarida rusak sehingga tidak dapat bereaksi dengan

reagen iod. Warna kekuningan yang terbentuk pada saat dipenaskan adalah warna dari reagen iod


30/38

itu sendiri. Setelah dingin meka kumparan kumparan polisakarida akan menyatu kembali

sehingga dapat bereaksi kembali dengan iod yang menghasilkan perubahan warna menjadi biru

keunguan. Setelah ditambahkan dengan NaOH berubah menjadi bening kembali karena Na+

bereaksi dengan iod, hal ini menyebabkan iod tidak dapat beraksi dengan amilum yang hasilnya

sampel amilum menjadi tidak berwarna.

Uji benedict

Monosakarida memiliki sifat dapat mereduksi ion Cu2+

menjadi ion Cu+

yang ada pada larutan

Benedict sehingga menjadi Cu2O yang terbentuk endapan. Semakin meningkatnya konsentrasi

glukosa pada uji Benedict ini, endapan yang terjadi makin banyak. Hal ini menandakan bahwa

makin reduksi gula mereduksi larutan benedict. Pereaksi benedict berupa larutan yang

mengandung kuprisulfat, natrium karbonat dan natrium sitrat. Adanya natrium karbonat dan

natrium sitrat membuat peraksi benedit bersifat basa lemah. Larutan fehling A dan fehling B

adalah varian dari larutan yang secara esensial sama. Keduanya mengandung ion-ion tembaga

(II) yang dikompleks dalam sebuah larutan basa. Larutan Benedict mengandung ion-ion tembaga

(II) yang membentuk kompleks dengan ion-ion sitrat dalam larutan natrium karbonat. Berikut

reaksi yang berlangsung:

O O

RCH + Cu2+ 2OH- RCOH + Cu2O

Gula Pereduksi Endapan Merah Bata

Reaksi positif pada percobaan ini terdapat pada terbentuknya endapan merah bata

didalam sampel hal ini ditandai karena adanya gula pereduksi pada laktosa, glukosa dan fruktosa.

Gula pereduksi adalah golongan gula yang memiliki kemampuan untuk mereduksi suatu

oksidator karena gugus aldehida dan keton nya bebas berada dalam keadaan kesetimbangan pada

rantai terbuka.

Pada percobaan benedict digunakan bahan uji yaitu amilum, selulosa, maltosa, sukrosa,

fruktosa, glukosa, arabinosa, galaktosa, glikogen dan laktosa. Sedangkan reagen yang digunakan


31/38

yaitu larutan fehling A dan larutan fehling B. Pada percobaan ini kesepuluh tabung reaksi yang

telah diisi larutan fehling A dan fehling B lalu ditambahkan larutan karbohidrat kemudian

dipanaskan selama 2 sampai 3 menit. Setelah dipanaskan kesepuluh tabung reaksi ada yang

mengalami perubahan warna dan ada yang tidak mengalami perubahan warna. Pada tabung

reaksi pertama yang berisi larutan fehling A dan B yang ditambahkan larutan amilum setelah

dipanaskan tidak mengalami perubahan warna atau campuran tetap berwarna biru. Hal ini

menunjukkan bahwa amilum tidak mengandung gula pereduksi karena gula pereduksi hanya

terdapat pada monosakarida sedangkan amilum merupakan polisakarida. Amilum apabila di

hidrolisis akan menghasilkan banyak monosakarida. Pada amilum atau pati, sekalipun terdapat

glukosa rantai terbuka pada ujung rantai polimer, namun konsentrasinya sangatlah kecil,

sehingga warna hasil reaksi tidak tampak oleh penglihatan.

Pada tabung reaksi kedua yang berisi larutan fehling A dan fehling B yang ditambahkan

larutan selulosa setelah dipanaskan tidak mengalami perubahan warna seperti pada amilum. Hal

ini menunjukkan bahwa selulosa tidak mengandung gula pereduksi. Selulosa merupakan

polisakarida seperti halnya amilum, selulosa adalah salah satu komponen utama dari

lignoselulosa yang terdiri dari unit monomer D-glukosa yang terikat pada ikatan 1,4-glikosidik.

Selulosa cenderung membentuk mikrofibril melalui ikatan inter dan intra molekuler sehingga

memberikan struktur yang larut. Mikrofibril selulosa terdiri dari 2 tipe, yaitu kristalin dan amorf.

Pada tabung reaksi ketiga yang berisi larutan fehling A dan fehling B yang ditambahkan

larutan maltosa setelah dipanaskan menghasilkan perubahan warna dari biru menjadi merah. Hal

ini menunjukkan bahwa maltosa mengandung gula pereduksi. Warna merah bata yang terbentuk

disebabkan oleh maltosa memiliki gugus aldehid yang bebas sehingga dapat mereduksi ion-ion

tembaga (Cu) yang terdapat pada larutan benedict (larutan fehling A dan fehling B) menjadi

Cu2O yang berwarna merah bata.

Berikut reaksi yang berlangsung:

O O

RCH + Cu2+2OH- RCOH + Cu2O

Gula Pereduksi Endapan Merah Bata


32/38

Pada tabung reaksi keempat yang berisi larutan fehling A dan fehling B yang

ditambahkan larutan sukrosa setelah dipanaskan menghasilkan perubahan warna dari biru

menjadi 2 lapisan yaitu hijau dan jingga. Hal ini menunjukkan bahwa sukrosa mengandung gula

pereduksi. Seperti halnya maltosa, perubahan warna dari biru menjadi 2 lapisan yaitu hijau dan

jingga, hal ini disebabkan oleh maltosa yang memiliki gugus aldehid yang bebas sehingga dapat

mereduksi ion-ion tembaga (Cu) yang terdapat pada larutan benedict (larutan fehling A dan B)

menjadi Cu2O yang berwarna kuning sampai merah.

Pada tabung reaksi kelima sampai kedelapan yang berisi larutan fehling A dan fehling B

yang ditambahkan larutan fruktosa(tabung 5), glukosa(tabung 6), arabinosa (tabung 7) dan

galaktosa (tabung 8), setelah dipanaskan menghasilkan perubahan warna dari biru menjadi

merah. Hal ini menunjukkan bahwa fruktosa,glukosa,arabinosa,dan galaktosa positif

mengandung gula pereduksi. Seperti halnya pada maltosa dan sukrosa , perubahan warna dari

biru menjadi merah disebabkan oleh monosakarida yang memiliki gugus aldehid yang bebas

sehingga dapat mereduksi ion-ion tembaga (Cu) yang terdapat pada larutan benedict (larutan

fehling A dan B) menjadi Cu2O yang berwarna merah.

Pada tabung reaksi kesembilan yang berisi larutan fehling A dan fehling B yang

ditambahkan larutan glikogen setelah dipanaskan tidak mengalami perubahan warna seperti pada

amilum dan selulosa. Hal ini menunjukkan bahwa glikogen tidak mengandung gula pereduksi.

glikogen merupakan polisakarida seperti halnya amilum dan selulosa,

Pada tabung reaksi terakhir yang berisi larutan fehling A dan fehling B yang ditambahkan

larutan laktosa setelah dipanaskan menghasilkan perubahan warna dari biru menjadi merah. Hal

ini menunjukkan bahwa laktosa mengandung gula pereduksi. Warna merah bata yang terbentuk

disebabkan oleh laktosa memiliki gugus aldehid yang bebas sehingga dapat mereduksi ion-ion

tembaga (Cu) yang terdapat pada larutan benedict (larutan fehling A dan fehling B) menjadi

Cu2O yang berwarna merah bata. Dengan menghidrolisis laktosa akan menghasilkan D-galaktosadan D-glukosa, karena itu laktosa adalah suatu disakarida. Ikatan galaktosa dan glukosa terjadi

antara atom karbon nomor 1 pada galaktosa dan atom karbon nomor 4 pada glukosa. Oleh

karenanya molekul laktosa mempunyai sifat mereduksi gugusOH glikosidik.


33/38

Uji osazon

Pada pembahasan kali ini adalah membahas mengenai uji osazon. Pembentukan osazon

merupakan cara yang berguna untuk membentuk kristal-kristal derivat gula. Senyawa ini

mempunyai susunan kristal, titik leleh dan waktu presipitasi yang khas dan sangat bermanfaat

untuk identifikasi gula. Osazon diperoleh dengan menambahkan campuran fenilhidrazin

hidroklorida dan natrium astetat kedalam larutan gula dan dipanaskan dalam penangas air yang

mendidih. Tahap reaksi pembentukan aldosazon sedikit berbeda dengan tahap reaksi

pembentukan ketoazon. Tiap jenis karbohidrat mempunyai bentuk kristal osazon yang spesifik

dan juga titik cair yang kecepatan pembentukan yang berbeda. (Vaidya, 1994).

Reaksi ini hanya menyangkut karbon karbonil (yaitu gugus aldehid atau keton) dan karbon yang

berdekatan.

Reaksi pembentukan osazon yang terlihat pada glukosa dan fruktosa adalah sebagai berikut :

Aldosa + fenilhidrazin fenilhidrazon

Fenilhidrazon + 2 fenilhidrazin Osazon + aniline + NH3 + H2O

Dari dua bahan uji tersebut yaitu glukosa dan fruktosa menunjukkan bahwa adanya

endapan kristal. Masing-masing karbohidrat memiliki bentuk dan warna endapan yang berbeda-

beda. Pada glukosa endapan yang terbentiuk berwarna kuning, namun pada fruktosa warna

endapan yang terbentuk adalah kuning keemasan. Begitu juga pada galaktosa, maltosa dan juga

arabinosa. Endapan yang terbentuk pada galaktosa dan arabinosa adalah kuning keemasan dan

maltosa berwarna kuning. Setelah diamati dengan mikroskop menunjukan adanya kristal-kristal.

Kristal yang terlihat ada yang berbentuk garis-garis halus, ada yang seperti garis-garis putus yang

didepan garis putus itu ada benjolan dan ada juga garis-garis yang bertumpuk-tumpuk. Laktosa

dan sukrosa membentuk aldoazon karena memiliki gugus aldosa.

Sukrosa sendiri merupakan molekul disakarida yang merupakan gabungan dari satu molekul

glukosa dan satu molekul fruktosa. Laktosa dan fruktosa setelah diamati dengan mikroskop

ternyata tidak menunjukkan adanya kristal-kristal.

Dari hasil percobaan dapat dinyatakan bahwa uji osazon digunakan untuk

mengidentifikasi monosakarida, disakarida, dan sebagian polisakarida. Karbohidrat ini


34/38

mempunyai penampang yang berbeda-beda, hal ini dikarenakan masing-masing bahan memiliki

rantai hidrokarbon yang berbeda beda pula, ada yang rantai hidrokarbonnya lurus dan ada pula

yamg bercabang.

Hidrolisis selulosa

Pada percobaan hidrolisis selulosa yang telah kami lakukan prinsipnya adalah selulosa

yang merupakan polisakarida akan dihidrolisis atau dipecah menjadi monosakarida. Pertama-

tama yaitu kertas saring yang dilarutkan dalam air bertujuan untuk membentuk selulosa yang

kemudian ditambah dengan H2SO4 menghasilkan cincin berwarna hitam, menunjukkan bahwa

selulosa mulai terhidrolisis oleh asam. H2SO4 akan mengdehidrasi senyawa yang ada dalam

karbohidrat menghasilkan furfural (monosakarida) dan derivat karbohidrat. Kemudian ketika

diaduk larutan uji akan berubah warna menjadi kuning kecoklatan, hal ini dikarenakan ikatan

antara H2SO4 dengan ikatan 1-4 glikosidik akan terlepas sehingga warnanya akan berubah

menjadi kuning kecoklatan. Setelah dipanaskan menghasilkan warna kehitaman pada laruran uji.

Hal ini menunjukkan bahwa ikatan dalam selulosa mulai terlepas akibat adanya proses

pemanasan yang akan mempercepat proses hidrolisis. Pengujian menggunakan regaen benedict

bertujuan untuk mengetahui bahwa hidrolisis atau pemecahan selulosa berhasil yaitu

menghasilkan senyawa monosakarida dengan berdasarkan reduksi Cu2+

menjadi Cu+oleh gugus

aldehid atau keton bebas dalam suasana alkalis, uji positif ditandai dengan terbentuknya larutan

hijau, merah, orange atau merahbata serta adanya endapan. Namun hasil percobaan yang kami

peroleh adalah negtif, kesalahan yang terjadi mungkin dikeranakan kurang lamanya proses

pemanasan yang kami lakukan sehingga proses hidrolisis selulosa kurang sempurna. Oleh karena

itu, ketika ditetesi dengan reagen benedict larutan uji tidak akan memberikan perubahan warna

yang tepat.

Hidrolisis amilum

Pada percobaan ini digunakan amilum sebagai bahan uji. Mula-mula amilum ditambah

dengan HCl. Kedua campuran ini berwarna putih keruh. Kemudian kedua campuran tersebut

dipanaskan selama 3 menit pertama, dan di uji dengan iodine menghasilkan perubahan warna

yang berbeda. Pengujian setelah pemanasan 3 menit menghasilkan perubahan warna menjadi

kuning kehitaman. Hal ini menujukkan bahwa pada pemanasan 3 menit amilum belum banyak
http://www.blogger.com/blogger.g?blogID=6115802929292284421http://www.blogger.com/blogger.g?blogID=6115802929292284421


35/38

terhidrolisis sehingga menghasilkan warna kuning kehitaman. Pada 3 menit berikutnya yakni

setelah pemanasan 6 menit menghasilkan warna kuning kecokelatan. Perubahan warna yang

terjadi ini menunjukkan amilum mulai terhidrolisis sehingga kandungan amilum mulai berkurang

dan menghasilkan uji negative terhadap reagen Iodin. Setelah pemanasan selama 9 menit

menghasilkan perubahan warna menjadi kuning. Hal ini menandakan bahwa amilum telah

terhidrolisis sempurna sehingga menghasilkan uji negative terhadap reagen iodine.

Setelah menghasilkan uji negative terhadap iodine, campuran amilum dengan HCl

tersebut dipanaskan kembali selama 3 menit dan diuji dengan reagen benedict. Pada perlakuan

tersebut diperoleh perubahan warna menjadi hijau muda. Sedangkan setelah pemanasan 6 menit

dihasilkan perubahan warna menjadi hijau (+) , setelah pemanasan 9 menit perubahan warna

yang terjadi menjadi hijau yg lebih tua dari sebelumnya (++), dan setelah pemanasan 12 menit

menghasilkan perubahan warna menjadi hijau yang lebih tua lagi (+++). Dapat dilihat perubahan

warna yang terjadi pada setiap waktu adalah berbeda. Semakin lama pemanasan, warna yang

dihasilkan semakin gelap. Hal ini menunjukkan semakin lama pemanasan, amilum yang

terhidrolisis menjadi monosakarida (glukosa) semakin banyak. Warna hijau yang dihasilkan

menunjukkan bahwa amilum telah terhidrolisis menjadi glukosa sehingga positif terhadap uji

benedict. Selain itu larutan amilum dan HCl yang awalnya putih keruh berubah menjadi jernih

setelah pemanasan, hal ini juga menunjukkan hidrolisis sempurna amilum menjadi monosakarida

(glukosa) telah terjadi.

Pada percobaan amilum ditambah HCl dan dipanaskan ini , terjadi proses hidrolisis

sebagai berikut :

Amilum amilodekstrin eritrodekstrin akroodekstrin maltose glukosa

(+iod) (+iod) (+iod) (+iod) (- iod) (- iod)

Keterangan : (+iod) positif iodine

(- iod) negatif iodine


36/38

Pada praktikum ini, HCl berfungsi sebagai asam yang akan menghidrolisis amilum.

Kemudian dipanaskan bertujuan untuk memecah molekul menjadi lebih kecil sehingga mudah

dihidrolisis. Pemecahan atau hidrolisis dari amilum akan menghasilkan disakarida dan akhirnya

menjadi menjadi molekul monosakarida selanjutnya oleh ragi glukosa dapat diubah menjadi

alcohol.


37/38

KESIMPULAN

Berdasarkan hasil percobaan yang telah dilakukan identifikasi karbohidrat dan

kandungannya dapat dilakukan dengan uji iodine, uji molisch, uji osazon, uji benedict, hidrolisis

selulosa, dan hidrolisis amilum.

Berdasarkan uji molisch yang telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa amilum,selulosa,

maltose,sukrosa,fruktosa,glukosa,arabinosa,galaktosa,glikogen dan laktosa positif terhadap uji

molish sehingga semua bahan uji tersebut merupakan karbohidrat.

Berdasarkan uji iodine yang telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa amilum dan

glikogen positif terhadap uji iodine sehingga kedua bahan uji tersebut merupakan polisakarida.

Berdasarkan uji osazon yang telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa

maltosa,fruktosa,glukosa,arabinosa, dan galaktosa positif terhadap uji osazon sehingga bahan uji

tersebut dapat membentuk kristal dengan karakteristik masing-masing.

Berdasarkan uji benedict yang telah dilakukan dilakukan dapat disimpulkan bahwa

maltose,sukrosa,fruktosa,glukosa,arabinosa,galaktosa, dan laktosa positif terhadap uji benedict

sehingga semua bahan uji tersebut merupakan gula pereduksi.

Berdasarkan uji hidrolisis selulosa yang telah dilakukan dilakukan dapat disimpulkan

bahwa selulosa dalam potong-potongan kertas saring dapat dihidrolisis menjadi monosakarida

(glukosa) sehingga seharusnya menghasilkan uji positif terhadap benedict.

Berdasarkan uji hidrolisis amilum yang telah dilakukan dilakukan dapat disimpulkan

bahwa amilum dapat di hidrolisis dengan asam pekat (HCl) menjadi monosakarida sehingga

menghasilkan uji positif terhadap benedict dan lamanya pemanasan juga mempengaruhi proses

hidrolisis.


38/38

DAFTAR PUSTAKA

Hala, Yusminah dan hartono. 2011. Penuntun Biokimia Umum. Makassar: Jurusan Biologi

FMIPA UNM.

Harper, et al. 1979. Biokimia Harper. Jakarta : EGC

Hart,Harold.1983.Kimia Organik. Jakarta : Erlangga.

Hermanto, S.2012.Petunjuk Praktikum Biokimia 1. Jakarta : UIN Syahid.

Kuchel, Philip. 2006.Biokimia. Jakarta: Erlangga

Lehninger.1982.Dasar-dasar Biokimia.Jakarta : Erlangga

McGilvery&Goldstein. 1996.Biokimia : Suatu Pendekatan Fungsional. Surabaya : Airlangga

University Press

Murray, Robert. 1999.Biokimia Harper. Jakarta: EGC

Poedjiadi, Anna. 1994.Dasar-dasar Biokimia. Jakarta: UI Press.

Yazid, Estien. 2006.Penuntun Praktikum Biokimia Yogyakarta: Andi Yogyakarta.

laporan praktikum biokimia kh

Documents