laporan biokim 1 pengendapan garam

8/18/2019 Laporan Biokim 1 Pengendapan Garam

1/11

LAPORAN TETAP PRAKTIKUM BIOKIMIA

I. Nomor Percobaan : VI (ENAM)II. Tanggal Percobaaan : Kamis !"#$%#!%$&

III. 'l Percobaan : PEN*EN+APAN +EN*AN *ARAM

IV. T,an Percobaan :# Untuk menguji kandungan yang terdapat di

dalam protein dengan pengendapan dengan garam.

V. +asar Teori

Protein adalah instrumen ysang mengekspresikan informasi genetik. Seperti juga

terdapat ribuan gen di dalam inti sel, masing-masing mencirikan satu sifat nyata dari

organisme, di dalam sel terdapat ribuan jenis protein yang berbeda, masing-masing

membawa fungsi spesifik yang ditentukan oleh gen yang sesuai. Protein, karenanya,

bukan hanya merupakan makromolekul yang paling berlimpah, teta[i juga amat

bervariasi fungsinya. Sangat luar biasa pula bahwa semua protein di dalam semua

mahluk, tanpa memandang fungsi dan aktivitas biologinya, dibangun oleh susunan

dasar yang sama, yaitu ! asam amino baku, yang molekulnya sendiri tidak mempunyai

aktivitas biologi. "#ehninger, $%&'

Proses pengendapan protein dapat dilakukan dengan menggunkan

amoniumsulfat berkonsentrasi tinggi atau larutan jenuh. (eberapa protein berbeda

kelarutannya dalam konsentrasi garam yang berbeda. )ara ini digunakan terutama bila

diinginkan satu macam protein saja, sedangkan protein lain tidak diperlukan. Selain

dengan garam, proses pengendapan protein dapat dilakukan dengan menyesuaikan p*

titik isolistrik protein yang diinginkan. Pada titik isolistrik kelarutan protein berkurang

hingga minimum dan protein ynag diinginkan akan mengendap, sedangkan protein lain

ynag tidak diinginkan tetap dalam larutan. Penggunaan pelarut organik untuk

mengendapkan protein juga dapat dilakukan, namun untuk menghindari terjadinya

denaturasi proses pengendapan dengan cara ini harus dilakukan pada suhu yang rendah.

"+nna Poedjiadi, !!%'.

iskositas adalah tahanan yang timbil oleh adanya gesekan antara molekul-

molekul di dalam at cair yang mengalir. Suatu larutan protein dalam air mempunyai

viskositas atau kekentalan yang relatif besar daripada air sebagai pelarut. Pada


2/11

umumnya viskositas suatu larutan tidak ditentukan atau diukur secara absolut, tetapi

ditentukan viskositas relatif, yaitu dibandingkan terhadap viskositas at cair tertentu.

iskositas larutan protein tergantung pada jenis protein, bentuk molekul, konsentrasi

serta suhu larutan. iskositas berbanding

lurus dengan konsentrasi dan berbanding terbalik dengan suhu "Poedjiadi, !!%'.

olekul protein mempunyai gugus amino "-/*' dan gugus karboksilat "-)00*'

pada ujung-ujung rantainya. *al ini menyebabkan protein mempunyai banyak muatan

"polielektrolit' dan bersifat amfoter, yaitu dapat bereaksi dengan asam maupun basa.

1engan larutan asam atau p* rendah, gugus amino pada protein akan bereaksi dengan

ion *2, sehingga protein bermuatan positif. Sebaliknya, dalam larutan basa gugus

karboksilat bereaksi dengan ion 0*-, sehingga protein bermuatan negatif. +dapun

muatan pada molekul menyebabkan protein bergerak di bawah pengaruh medan listrik

"Sirajuddin, !$'.

(anyak protein yang telah dapat diperoleh dalam bentuk kristal. eskipun

demikian proses kristalisasi untuk berbagai jenis protein tidak selalu sama, artinya ada

yang dengan mudah dapat terkristalisasi, tetapi ada pula yang sukar. (eberapa enim

antara lain pepsin, tripsin, katalase dan urease telah dapat diperoleh dalam bentuk

kristal. +lbumin pada serum atau telur sukar dikristalkan. Proses kristalisasi protein

sering dilakukan dengan jalan penambahan garam amoniumsulfat atau /a)l pada

larutan dengan pengaturan p* pada titik isolistriknya. 3adang dilakukan penambahan

aseton atau alkohol dalam jumlah tertentu "Poedjiadi, !$'.

Setiap jenis protein dalam larutan mempunyai p* tertentu yang disebut titik

isoelektrik "45'. Pada p* isoelektrik "p5', molekul protein mempunyai muatan positif

dan negatif yang sama, sehingga saling menetralkan atau bermuatan nol. +kibatnya,

protein tidak bergerak di bawah pengaruh medan listrik. Pada titik isoelektrik, proteinakan mengalami pengendapan "koagulasi' paling cepat dan prinsip dapat digunakan

untuk pemisahan atau pemurnian suatu protein "Sirajuddin, !$'.

6aram anorganik 7ang digunakan dalam percobaan ini adalah

ammonium sulfat. *al ini terjadi karena ammonium sulfat memiliki tingkat lrutan yang

lebih tinggi dai pada protein sehingga pada saat penambahan ammonium sulfat,

ammonium sulfat akan melarut dalam air atau pelarutnya dan mendapatkan protein

keluar, kembali dalam bentuk solidnya, sehingga terbentuklah protein yang


3/11

terendapkan. #arutan dalam air dapat diendapkan dengan penambahan amoniumsulfat

""/*8'S08' hingga jenuh "Poedjiadi, $%%8'. Setelah larutan dijenuhkan dengan

"/*8'S08, uji kelarutan endapan yang terjadi dengan air menunjukkan hasil positif

"endapan larut membentuk butiran'. 3emudian butiran direaksikan dengan pereaksi

milon, dan bereaksi positif dengan ditandai endapan berwarna kemerahan. Uji filtrat

denganpereaksi biuret juga menunjukkan hasil poisitif yang ditandai larutan berwarna

ungu violet. "Poedjiadi, $%%8'.

VI. Ala- an Baan

+lat

$. 4abung reaksi

. *ot plate

9. (atang Pengaduk

8. 6elas ukur

:. Pipet tetes

;. (eaker glass


4/11

Perlakuan Hasil pengamatan

1. Susu

5 ml larutan susu 5% + garam

(amonium) hingga larutan jenuh

terbentuk

5 ml larutan susu 5% (putih) + garam

amonium (Kristal putih) endapan

+ fltrate

• ndapan + air larutan putih

• ndapan + reagen millon

larutan putih dan endapan merah

bata

• !iltrate + biuret larutan

ber"arna biru

#. $lbumin

5 ml larutan albumin 1% + garam

(amonium) hingga jenuh

terbentuk

5 ml larutan albumin 1% (putih) +

garam ammonium (Kristal putih)

endapan + fltrate

• ndapan + air larutan putih

• ndapan + reagen millon

larutan putih dan endapan merah

bata• !iltra + biuret larutan

ber"arna biru

I2. Persamaan Rea3si

a Pengena/an +engan *aram


5/11

"Poedjiadi, $%%8'

- =eaksi yang terjadi pada uji illon

- 4es (iuret


6/11

2. Analisa +a-a

Rms /emba-an lar-an /ro-ein (sam/el 0ang i,i) ari lar-an

in3n0a

A. Pemba-an lar-an 3ning -elr engan 3onsen-rasi $4 # &4

#arutan 5nduk

olume kuning telur murni A ! ml olume aBuadest A $!! ml

Perbandingan kuning telur murni ? aBuadest A $ ? : "dicampur dan disaring'

1engan menggunakan rumus diatas, 1idapatkan larutan kuning telur yang dibutuhkan

#arutan $ "$C kuning telur' A ,: ml "dimasukkan kedalam labu ukur :! ml 2

aBuadest'

#arutan "C kuning telur' A : ml "dimasukkan kedalam labu ukur :! ml 2

aBuadest'

#arutan 9 "9C kuning telur' A


7/11

#arutan $ "$C putih telur' A ,: ml "dimasukkan kedalam labu ukur :! ml 2

aBuadest'

#arutan "C putih telur' A : ml "dimasukkan kedalam labu ukur :! ml 2

aBuadest' #arutan 9 "9C putih telur' A


8/11

#arutan 9 "9C ikan gabus' A


9/11

Pada percobaan pengendapan protein dengan garam ini, endapan yang

dihasilkan dibagi dua kemudian direaksikan masing-masing dengan air dan reagen

millon. 1an untuk filtratnya di reaksikan dengan uji biuret. 3etika endapan dilarutkan

dalam aBuades, endapan tersebut kembali terlarut. *al ini sesuai dengan sifat alamiah

endapan protein yang larut dalam air. Sedangkan ketika endapan diuji dengan reagen

millon, mula-mula tidak terjadi perubahan, tetapi setelah dipanaskan, endapan berubah

menjadi berwarna kemerahan. *al ini menunjukkan uji positif terhadap uji millon. 5ni

berarti endapan tersebut masih mengandung asam amino. +sam amino yang terkandung

adalah asam amino tirosin, karena terbentuknya endapan merah setelah ditambahkan

reagen millon dan dipanaskan.

Setelah dilakukan penyaringan, filtrat yang dihasilkan diuji dengan uji biuret.

Filtrat yang dihasilkan ditambahkan dengan larutan )uS08. Setelah ditambahkan

dengan larutan )uS08, filtrat menunjukkan positif terhadap uji biuret yang ditandai

dengan terbentuknya lauran biru muda setelah filtrat ditambahkan reagen biuret.

(erdasarkan teori yang ada, semakin besar berat molekul yang dimiliki oleh

suatu garam, maka endapan dan kecepatan reaktifitasnya akan semakin besar.

(anyaknya endapan yang diperoleh juga dapat disebabkan karena jumlah biloks yang

ada pada garam. enurut teori yang ada, protein akan mengendap bila terdapat garam-

garam anorganik dengan konsentrasi yang tinggi dalam larutan protein. 6aram-garam

anorganik mengendapkan protein karena kemampuan ion garam terhidrasi sehingga

berkompetisi dengan protein untuk mengikat air.

2II. Kesim/lan

$. Pada pengendapan dengan garam, endapan terbentuk disebabkan ion garam

lebih mudah untuk mengikat air "hidrasi' dibandingkan dengan molekul

protein. Sehingga molekul protein kalah bersaing dalam hal mengikat air,

akibatnya kelarutan protein dalam air berkurang dan protein membentuk

endapan.

. Gndapan yang bewarna merah pada uji pengendapan merupakan hasil dari

garam-garam organik dalam persentase tinggi yang dapat mempengaruhi

sifat kelarutan protein.

9. Pada uji pengendapan dengan garam terbentuk larutan berwarna merah bata

dan endapan merah bata pada uji millon


10/11

&. 'ji fltrate dengan biuret karena biuret merupakan pengujian

umum terhadap kandungan protein dengan melihat ada dan

tidakna ikatan peptida pada larutan tersebut.

5. *erkuri dalam pereaksi millon akan bereaksi dengan gugus

hidroksienil dari tirosin membentuk "arna merah bata.

2III. +a7-ar Ps-a3a

#ehninger, +. $%&&. 1asar-dasar (iokimia. 4erjemahan aggy 4henawidjaya.

Grlangga, >akarta

Poedjiadi, +nna. !!%. 1asar-dasar (iokimia. >akarta? U5 Press.

Frederica, 1ebrina . !$. Protein "online' http://bio-protein.blogspot.com/

diakses pada $8 /ovember !$:-$$-$;

2IV. Lam/iran

Lam/iran $

$. 4erangkan hasil-hasilnya @

• Pada percobaan ini hasil yang didapatkan adalah endapan dan filtrat yang

dimana endapannya diuji dengan milon dan dipanaskan menghasilkan warna

merah bata dan filtratnya diuji dengan biuret yang menghasilkan warna ungu.

Lam/iran !

6s &4 ena/an 8 reagen millon 3elar-an ena/an 8 air 7il-ra- 8 bire-

http://bio-protein.blogspot.com/http://bio-protein.blogspot.com/


11/11

albmin ena/an 8 reagen millon 3elar-an

ena/an 8 air 7il-ra- 8 bire-

laporan biokim 1 pengendapan garam

Documents