laporan biokim uji gula

8/12/2019 Laporan Biokim Uji Gula

1/12


2/12

PRAKTIKUM I

DETEKSI GULA PEREDUKSI

I. TujuanPraktikum kali ini bertujuan agar mahasiswa mampu memahami

prinsip deteksi gula pereduksi secara umum yang merupakan keterampilan

dasar dalam bidang keahlian biokimia klinik.

II. PrinsipMelakukan uji coba kadar glukosa dalam sampe dengan mengamati

perubahan yang terjadi pada larutan glukosa setelah ditambahkan reagen

Benedict dan reagen Fehling A dan Fehling B, serta dilakukan pemanasan.

III. Dasar TeoriKarbohidrat, yang lazim dikenal sebagai gula berdasarkan

ukurannya terbagi menjadi menjadi empat kelas yang berbeda:

monosakarida, disakarida, oligosakarida dan polisakarida. Monosakarida,

misalnya glukosa, galaktosa, dan dan fruktosa, adalah gula-gula paling

kecil. Mereka dapat disatukan bersama-sama oleh ikatan glikosidat untuk

membentuk kelas karbohidrat yang lain. Disakarida misalnya sukrosa,

maltosa, dan laktosa, masing-masing terdiri dari 2 monosakarida disatukan

oleh sebuah ikatan glikosidat. Oligosakarida, misalnya komponen

karbohidrat glikoprotein dan glikolipid, mengandung 3 sampai sekitar 12

unit monosakarida.Polisakarida, misalnya kanji dan glikogen, mengandung

puluhan ribu unit monosakarida.

Karbohidrat merupakan senyawa karbon, hydrogen dan oksigen

yang terdapat dalam alam. Banyak karbohidrat mempunyai rumus empiris

CH2O. Karbohidrat sebenarnya adalah polisakarida aldehida dan keton atau

turunan mereka. Monosakarida adalah satuan karbohidrat yang

tersederhana, yang tidak dapat dihidrolisis menjadi molekul karbohidrat

yang lebih kecil. Monosakarida dapat diikat bersama-sama membentuk


3/12

dimer, trimer dan sebagainya dan akhirnya polimer. Sedangkan

monosakarida yang mengandung gugus aldehid disebut aldosa. Glukosa,

galaktosa, ribose, dan deoksiribosa semuanya adalah aldosa. Monosakarida

seperti fruktosa dengan gugus keton disebut ketosa (Fessenden, 1990).

Karbohidrat yang tidak bisa dihrolisis ke susunan yang lebih simpel

dinamakan monosakarida, karbohidrat yang dapat dihidrolisis menjadi dua

molekul monosakarida dinamakan disakarida. Sedangkan karbohidrat yang

dapat dihidrolisis menjadi banyak molekul monosakarida dinamakan

polisakarida. Monosakarida bisa diklasifikasikan lebih jauh, jika

mengandung grup aldehid maka disebut aldosa, jika mengandung grup

keton maka disebut ketosa. Glukosa punya struktur molekul C6H12O6,

tersusun atas enam karbon, rantai lurus, dan pentahidroksil aldehid maka

glukosa adalah aldosa. Contoh ketosa yang penting adalah fruktosa, yang

banyak ditemui pada buah dan berkombinasi dengan glukosa pada sukrosa

disakarida (Morrison,1983).

Gula pereduksi adalah semua gula yang memiliki kemampuan

untuk mereduksi dikarenakan adanya gugus aldehid atau keton

bebas.Aldehid dapat teroksidasi langsung melalui reaksi redoks.Namun,

gugus keton tidak dapat teroksidasi secara langsung, gugus keton, tetapi

harus diubah menjadi aldehid dengan perpindahan tautomerik yang

memindahkan gugus karbonil ke bagian akhir rantai. Monosakarida yang

termasuk gula reduksi antara lain glukosa, fruktosa, gliseraldehida, dan

galaktosa. Untuk disakarida, contohnya adalah laktosa dan

maltosa.Sedangkan yang termasuk gula non-reduksi adalah sukrosa. Gula

non-reduksi dicirikan dengan tidak adanya struktur rantai terbuka, sehinggatidak rentan terhadap proses oksidasi reduksi. Pada polimer glukosa seperti

amilum dan turunan amilum (maltodextrin dan dextrin), makromolekulnya

dimulai dengan gula reduksi.Umumnya gula pereduksi yang dihasilkan

berhubungan erat dengan aktifitas enzim, dimana semakin tinggi aktifitas

enzim maka semakin tinggi pula gula pereduksi yang dihasilkan.Persentase

gula reduksi di dalam turunan amilum/pati disebut dengan dextrose

equivalent (DE).


4/12

IV. Alat dan Bahana) Alat yang digunakan dalam praktikum ini :

1. Beaker gelas2. Pipet tetes3. Gelas ukur4. Tabung reaksi5. Bunsen

b) Bahan yang digunakan dalam praktikum ini :1. Larutan glukosa2. Aquadest3. Reagen Benedict4. Reagen Fehling A dan Fehling B5. NaOH

V. Cara Kerja1. Dengan pereaksi Benedict

Larutan glukosa

Ditambahkan

Reagen Benedict 1 ml pada setiap tabung

reaksi

Aquadest 1 mL pada tabung reaaksi 2, danaquadest 2 mL pada tabung reaksi 3

Perubahan warna yang terjadi

Ditambahkan

Diamati

Dipanaskan

ke dalam 3 tabung reaksi masing-masing 20

tetes

Dimasukkan


5/12

2. Dengan pereaksi Fehling A dan B

VI. Hasil Pengamatan- Warna benedict : biru - Warna Fehling A : Putih- Warna larutan glukosa : putih - Warna Fehling B : Biru- Warna aquadest : biru

Di atas Bunsen selama 20 detik

NaOH 1 tetes

Perubahan warna larutan dan catat waktu

perubahan serta tentukan kadar glukosa pada

setiap larutan

Ditambahkan

Diamati

Ditambahkan

Masukkan larutan glukosa ke dalam 3 tabung

reaksi masing-masing 10 tetes

Reagen Fehling A 1 ml dan fehling B 1 ml

dan pada setiap tabung reaksi

Aquadest 1 mL pada tabung reaksi 2, dan

aquadest 2 mL pada tabung reaksi ke 3

Ditambahkan

Diamati

Diatas Bunsen hingga terjadi perubahanwarna yang konstan dan catat waktu

perubahan

Perubahan warna larutan dan catat waktu

setia ter adi erubahan warna

Di anaskan


6/12

1. Hasil dengan Menggunakan Reagen BenedictNo Percobaan

Hasil

Pengamatan

Waktu

(dtk)

Kadar

Glukosa

Gambar

1 Glukosa (20 tetes) +

Benedict (1 ml) dipanaskanselama 20 detik

+ NaOH (1 tetes)

Larutan berwarna kuning

Larutan berwarna oranye


pekat (kecoklatan)

9

14

22

(+++)

1,5-2,5 g/dl


Aquadest 1 ml + Benedict

(1 ml)dipanaskan selama 20 detik

+ NaOH (1 tetes)




pekat

10

17

49 (+++)

1,5-2,5 g/dl


Aquadest 2 ml + Benedict

(1 ml)dipanaskan selama 20 detik+

NaOH (1 tetes)



kehijauanLarutan berwarna oranye

homogen

1

17

24

(+++)

1,5-2,5 g/dl

2. Reagen Fehling A dan Fehling BNo Percobaan

Hasil

PengamatanGambar


Fehling A (1 ml) +

Fehling B (1 ml)

Saat Pemanasan

Pada detik ke-8: Larutan berubah warna

dari biru muda menjadi biru dongker.

Pada detik ke-21: Larutan berubah menjadi

warna hijau.Pada detik ke-35: Terbentuk 3 lapisan

warna (biru, kuning, cokelat).

Pada 1 menit 15 detik: Terbentuk 4 lapisan

warna (hijau, kuning, cokelat, bening).

Larutan berubah warna menjadi kecoklatan

pada detik ke-20.


Aquadest 1 ml +

Fehling A (1 ml) +Fehling B (1 ml)

Saat Pemanasan


dari biru muda menjadi biru dongker.

Pada detik ke-40: Larutan berubah menjadiwarna hijau.

Pada 1 menit 40 detik: Larutan berubah

menjadi warna hijau lumut.

Pada 3 menit 40 detik: Terbentuk 2 lapisan

warna (cokelat dan orange).

Larutan berubah warna menjadi kecoklatan

pada detik ke-23.


Aquadest


dari biru muda menjadi biru tua.


7/12

2 ml + Fehling A (1

ml) + Fehling B (1 ml)

Saat Pemanasan

Pada detik ke-43: Larutan berubah menjadi

warna hijau.

Larutan berubah warna menjadi merah

kecoklatan pada detik ke-34.

VII. PembahasanPada praktikum kali ini dilakukan percobaan tentang deteksi gula

pereduksi pada glukosa. Dalam hal ini, digunakan peraksi Benedict dan

Fehling (A dan B). Larutan Benedict dan Fehling (A dan B) yaitu indicator

atau reagen yang digunakan untuk menguji dan mengetahui kandungan

gula pereduksi yaitu glukosa pada sampel dalam berbagai konsentrasi.

Kadar glukosa yang dihasilkan dapat terlihat dari warna larutan sampel

yang dihasilkan. Urutan warna yang menunjukkan kadar glukosa tinggi

sampai yang paling rendah adalah merah (2,5-4,0 g/dl), orange (1,5-2,5

g/dl), kuning (1-1,5 g/dl), hijau dengan endapan kuning (0,5-1,0 g/dl) dan

biru hijau tak ada endapan (0,0-0,1 g/dl).

Dalam percobaan ini, warna larutan glukosa yang bercampur

dengan air tetap berwarna putih, dan warna reagen benedict berwarna biru.

Saat larutan glukosa dan larutan Benedict dicampur, akan membentuk 2

lapisan yang tidak saling bercampur, namun lama kelamaan akan saling

bercampur, seperti terlihat pada gambar di bawah ini.

3 sampel glukosa dengan berbagai

konsentrasi (tanpa air, dengan 1 ml, dan

2 ml, air)

Glukosa murni + Pereaksi

Benedict


8/12

Larutan glukosa dengan adanya penambahan reagen benedict akan

saling bereaksi. Pereaksi Benedict mengandung atom Cu yang terikat sebagai

kompleks. Glukosa mengandung gugus aldehid yang dapat dioksidasi asam

karboksil sehinggaakan mereduksi ion kupri pada larutan Benedict. Dalam

reaksi ini glukosa diubah menjadi asam onat, yang membentuk garam karena

adanya basa. Pemanasan dalam hal ini berperan untuk mempercepat reaksi

antara larutan glukosa dengan reagen benedict. Selanjutnya dengan adanya

penambahan NaOH adalah untuk menciptakan suasana basa karena reduksi

terjadi dalam basa yang akan mempercepat terjadinya endapan Cu2O. Pada

gambar di bawah ini terlihat adanya reaksi antara benedict dan larutan glukosa

penambahan air 2 mL), serta perubahan saat larutan ditetesi NaOH 1 tetes.

Pemanasan Glukosa + Benedict Penambahan NaOH

Perubahan warna dari biru menjadi hijau setelah penambahan NaOH


9/12

Dalam waktu kurang lebih 34 detik, warna larutan akan segera menjadi

kuning, selanjutnya oranye, dan menjadi oranye yang sangat pekat. Hal ini

dapat dilihat pada gambar di bawah ini.

Pada uji Benedict semua sampel glukosa menunjukkan perubahan warna dari

biru menjadi orange yang menunjukkan bahwa sampel mengandung glukosa

sebanyak 1,5-2,0 g/dl. Hal ini dapat dilihat pada gambar di bawah ini.

Ketiga sampel ini berbeda tergantung pada adanya pengenceran dengan air

atau tidak. Pada sampel 1 yang merupakan larutan glukosa murni menunjukkan

waktu perubahan yang lebih cepat dibandingkan pada sampel lain yang

ditambahkan air.

Pada uji Fehling, dilakukan penambahan Fehling A dan B dengan volume

yang sama. Jika terdapat gula pereduksi pada sampel maka warna biru dari

pereduksi Fehling akan hilang dan endapan merah atau kuning dari Cu2O akan

terbentuk. Seperti halnya pereaksi fehling, glukosa akan diubah menjadi asam onat

(fehling mengoksidasi aldosa menjadi aldonat), sedangkan pereaksi benedict

(sebagai Cu++) akan tereduksi menjadi kupro oksida. Jadi dalam uji ini akan


10/12

terjadi proses oksidasi dan reduksi. Dalam pereaksi ini ion Cu2+direduksi menjadi

ion Cu+ yang dalam suasana basaakan diendapkan sebagai Cu2O (kupro oksida).

Sama halnya dengan uji benedict bahwa konsentrasi glukosa yang encer bereaksi

lebih lama dibandingan konsentrasi yang lebih pekat.

Perubahan setelah ditetesi Fehling A dan B

Saat pemanasan Hasilnya


11/12

VIII. KesimpulanDari percobaan yang telah dilakukan dapat disimpulkan bahwa:

1. Sampel glukosa menunjukkan reaksi positif dengan pereaksi benedictditunjukkan dengan warna orange dengan kadar glukosa 1,5-2,5 g/dl.

2. Sampel glukosa menunjukkan reaksi positif dengan pereaksi fehling (Adan B) ditunjukkan dengan warna kecoklatan.

3. Gradasi warna saat pemberian pereaksi fehling disebabkan olehtingkatan bereaksinya glukosa dengan fehling, jika semakin pekat maka

glukosa sudah mereduksi fehling secara sempurna.

4. Glukosa mereduksi ion Cu2+ pada pereaksi benedict dan fehlingmenjadi ion Cu+ yang dalam suasana basa diendapkan sebagai Cu2O

(kupro oksida).

5. NaOH digunakan untuk menciptakan suasana basa agar mempercepatterbentuknya endapan Cu2O (kupro oksida).


12/12

Daftar Pustaka

Clark, John M. 1964.Experimental Biochemistry. San Franciso : WH Freeman andCompany.

Eaton, David C. 1980. The World of Organic Chemistry. New york: Mc-Graw-Hill

Book Company.

Fessenden, Ralp J. 1990. Kimia Organik Edisi Ketiga. Jakarta: Erlangga.

Morrison, Robert Thornton. 1983. Organic Chemistry Fourth Edit. New York:

New York University.

laporan biokim uji gula

Documents