[kultur jaringan] - laporan penyimpanan semen ayam.doc

7/22/2019 [KULTUR JARINGAN] - Laporan Penyimpanan Semen Ayam.doc

1/27

LAPORAN BIOTEKNOLOGI

TEKNOLOGI PENYIMPANAN SPERMATOZOA

Oleh

1. Dita Aryanti (103244013)

2. Sulistyowati (103244024)

3. Rendi Pranata (103244025)

4. Dewi Ratna S. (103244026)

5. Bondan Surya Anggara (10324403)

6. !o"a#ad !usli" $i%ri (103244203)

UNIVERSITAS NEGERI SURABAYA

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

JURUSAN BIOLOGI

2013


2/27

BAB I

PENDAHULUAN

A. L!" Bel#$%

&e'utu"an angan ada daging #auun telur sangatla" tinggi. &e'utu"an

aan daging aya# #auun telur teta di usa"aan ole" 'er'agai i"a. *sa"a

yang dilauan untu #eningatan rodusi daging teruta#a aya# daat

dilauan dengan #enggunaan tenologi +nse#inasi Buatan (+B). ,eni ini

#e#er#uda" -ertilisasi yang 'erda#a ada tingginya rodutiitas aya#

#eng"asilan telur #auun daging aya#. &e'er"asilan dala# #elasanaan

+nse#inasi Buatan sangat ditentuan ole" ualitas dan uantitas ser#ato/oa yang

digunaan se"ingga dierluan uaya untu #e#erta"anan #otilitas dan

#e#eranang daya ta"an "idu ser#ato/oa serta daat digunaan dala#

watu yang relati- la#a (,oeli"ere 15a).

+nse#inasi Buatan #eli'atan 'e'eraa roses yang diantaranya

ena#ungan se#en enilaian engeneran sa#ai enilaian "asil inse#inasi

'uatan (Ridwan 200). Se#en yang suda" dita#ung erlu di eneran dengan

sala" satu 'a"an engener. !enurut ardianto d (2010) engeneran

ser#ato/oa #e#ilii tuuan agar olu#e se#en #eningat dan daat disi#an

le'i" la#a ole" arena itu 'a"an engener yang 'ai "arus #e#erli"atan

e#a#uan dala# #e#ereil tingat enurunan #otilitas dan #e#eranang

la#a watu enyi#anan asa engeneran. Pada saat ini 'anya 'ere#'ang

tenologi enyi#anan ser#ato/oa dan engeneran.


3/27

Penyi#anan ser#ato/oa ini daat dilauan ada te#eratur di atas titi

'eu (se#en air) disi#an dengan su"u 45o7 didala#Refrigerator. &ele'i"an

enyi#anan dala# 'entu se#en air yaitu tida #e#erluan nitrogen air dan

endistri'usiannya dengan ara di#asuan di dala# ota atau t"er#os 'erisi es

dan ditutu untu #e#erta"anan su"u dingin sa#ai ti'a di te#at tuuan

(,oeli"ere 15').

Se#en air se'elu# di si#an erlu dieneran engeneran ser#ato/oa

dia#ur dengan larutan engener yang #ena#in e'utu"an -isi dan

i#iawinya. Pada saat ini 'elu# ada 'a"an egener yang daat #enyediaan

se#ua unsurunsur yang daat #e#enu"i -ungsi dan syaratsyarat yang tela" di

tetaan seara se#urna. Pratis se#ua engener #engandung air susu atau

uning telur segar atau o#'inasi eduanya se'agai 'a"an dasar yang daat

#e#enu"i se'agian 'esar -ungsi dan ersyaratan terse'ut (,oeli"ere 15').

Salis'ury 8 9anDe#ar (15) 'a"an engener yang e-eti- untu

ser#ato/oa "arus #engandung /at/at #aanan ionion daya enggera dan

iatan i#ia yang dierluan untu #e#erta"anan roses ertuaran /at yang

sei#'ang dala# selsel yang sesuai dan teanan os#oti yang oti#u#.

:luosa atau -rutosa #eruaan o#onen yang "arus ada dala# suatu 'a"an

engener yang #e#'erian energi ada ser#ato/oa untu "idu dan ati-

'ergera. Aan tetai gluosa dan -rutosa 'elu# dieta"ui da#anya eada

ser#ato/oa se"ingga erlu diteliti.

Dala# enelitian ini digunaan engener dengan #edia dasar tris yang

dengan sule#entasi uning telur se"ingga daat diadian #edia enyi#anan


4/27

ser#ato/oa. !edia 'erua engener tris uning telur yang dita#'a"an dengan

-rutosa dan gluosa. !edia terse'ut e#udian disi#an ada Refrigeratordan

dia#ati ia'ilitas #ortalitas serta osentrasi setia "ari.

B. R&'&($ M(lh

Berdasaran ru#usan #asala" daat diru#usaan suatu ru#usan #asala"

se'agai 'eriut ;

1. Bagai#anaa" ualitas enyi#anan ser#ato/oa aya# yang disi#an ada

engener dengan e#'erian gluosa dan -rutosaes"ei# d 1) . +st"#us (anang 10 #)

'er-ungsi untu #e#'entu selaut #e#'ran telur 'agian dala# dan luar serta

#ena#'a"an seu#la" air e dala# uti" telur (Sturie 16). d. *terus atau

s"ell gland yang #e#unyai anang # se'agai te#at di'entunya ulit telur

(era'ang). e.9agina #eruaan eng"u'ung uterus dengan loaa dan tida

'ereran dala# roses e#'entuan telur #e#ilii anang 12 #. Sturie

(16) #elaoran 'a"wa antara uterus dan agina diisa"an ole" s"inter

yang dina#aan *tero 9aginal @untion (*9@) yang 'er-ungsi se'agai te#at

enyi#anan ser#ato/oa se#entara (Sturie16). +nse#inasi Buatan(+B)

dengan #etode deosisi se#en intra *terine ser#a dideositan ada daera"

*9@.

I$(e'$( B&!$ IB4 De$%$ Me!/e De-/(( Se'e$ I$!"

U!e"$e

Pada dasarnya dala# #eneraan teni +B dengan #etode deosisi

se#en intra uterine tida terlalu sulit aa'ila ingin tera#il dan 'er"asil untu

#enadi seorang inse#inator #aa yang dierluan adala" eteunan disilin

teliti dan selalu 'erlati". Ba"an dan alat yang dierluan untu #elauan "arus

#uda" didaat ratis se"ingga egiatan +B daat dilauan di#ana saa.

Th-$ #e%!$ IB

A. Pe'lh$ B5!

Me'lh $ &$! 55!

+ndu yang 'ai "arus #e#ilii syarat se'agai 'eriut ;

1. Se"at dan tida aat.

2. Berrodusi tinggi.

3. !ini#al suda" #engala#i eriode eneluran erta#a u#ur E 'ulan.

4. +ndu sedang 'ertelur.


9/27

5. Pe#eli"araan indu se'ainya dala# andang 'aterei indiidu.

Me'lh -e*$!$ &$! 55!6

Pe*$!$ ,$% 5# h"&( 'e'l# (,"! (e5% 5e"#&!

1. Se"at tida aat lina" dan #e#ilii na-su awin yang tinggi.

2. *#ur 13 ta"un 'ertai dengan anang 050 E 150 #.

3. !e#ilii #utu geneti yang tinggi.

4. !e#unyai "u'ungan yang au" dengan indu yang aan di inse#inasi.

5. &andang e#eli"araan eantan "arus terisa" dengan indu.

B. Pe"(-$ $ $ -e*$!$

1. Paan untu eantan "arus yang 'ai #utunya dengan adar rotein #ini#al

1? dan dengan ta#'a"an e#'erian 1 'utir telur -ertil yang suda" #asu

#esin C 5 "ari. ,elur dioo "ingga rata e#udian di'erian eada 3 eor

eantan.

2. Pe#'erian anti stress uga daat di'erian eada indu dan eantan.

3.*ntu #erangsang 'anyanya telur daat uga digunaan raangan daun

#enguduFae yang dia#uran ada aan ( 10 gra#Feor).

4. *ntu #e#uda"an dala# #elasanaan +B 'ulu di seitar loaa "arus

digunting.

E. Te#$# Pe$%'5l$ Se'e$

Aya# eantan yang aan dia#'il se#ennya di'eri aan yang

#engandung rotein tinggi agar ualitas se#ennya 'enar'enar 'ai . Se'elu#

se#en dita#ung aya# antan diuasaan urang le'i" 10 a# . al ini 'ertuuan

agar se#en yang dia#'il tida tere#ar -ees . Pena#ungan se#en dilauan

dengan #etode engurutan atau #assage di#ana sangat di'utu"an ea"lian dan

etera#ilan seorang inse#inator dala# #elauan erangsangan . Dala#

#elauan ena#ungan seorang inse#inator #endaat 'antuan untu

#e#egang aya# eantan . *sa"aan suaya aya# antan dala# eadaan tenang

dengan ara #engendoran edua 'ela" a"anya . Pena#ungan se#en dilauan

dengan ara #engurut 'agian unggung #engara" e'elaang dengan tangan iri


10/27

dan ada eala dengan tangan anan . +ra#a engurutan dilauan dengan

teratur dan tida asar seara 'erulangulang .

Dengan engurutan yang teratur daat #erangsang eantan untu eresi

di#ana ditandai dengan adanya tonolan yang eluar #elalui loaa. Aa'ila

eantan suda" terangsang #aa ari telunu dan e#ol langsung #enean

loaa (seitar tulang u'is) se"ingga teradi eaulasi . Selanutnya se#en yang

eluar dita#ung dengan alat yang suda" diersiaan dan dilauan enguuran

olu#e se#en untu #e#er#uda" ena#'a"an 'a"an engener .

F. Pe$%e$e"$ Se'e$

Pengeneran se#en dierluan untu #e#er'anya olu#e se#en yang

aan diaai +B . 'a"an engener yang daat diaai adala" larutan >a7=

$isiologis 00? . Pena#'a"an 'a"an engener adala" 1 ;5 artinya ia olu#e

se#en "asil ena#ungan 06 #l #aa 'a"an engener yang daat dita#'a"an

adala" 3 #l se"ingga olu#e 'erta#'a" #enadi 36 #l . @ia dosis +B 01 #l

se#en "asil engeneran 'erarti satu ali ena#ungan daat diaai untu

#eng+B se'anya 36 eor aya# 'etina ('a'on) . Pelasanaan +B ada aya#

'etina Setela" se#en dieneran #aa se#en daat dideositan e saluran

rerodusi aya# 'etina . Dengan tu'erullin syringe uuran 1 #l ita sedot dulu

udara sa#ai anga 0 e#udian sedot se#en yang 'arn dieneran se'anya

01 #l. *ntu #e#uda"an elasaan +B se'ainya dilauan ole" dua orang .

Satu orang #eneit aya# 'etina di'awa" etia tangan anan sealigus

#e#egang edua ai aya# sedangan tangan iri #enari eor eatas se"ingga

loaa ta#a dengan elas . +nse#inator yang suda" sia dengan alat +B yang

'erisi se#en #enean 'agian yang =una di'awa" loaa dengan tangan iri

sa#ai agina ter'ua . Selanutnya syringe yang 'erisi se#en di#asuan

edala# agina yang letanya se'ela" iri sedala# 23 # se'elu# se#en

dise#rotan teanan ada lu'ang loaa diendoran agar se#en nantinya tida

eluar dari agina .

G.Te#$# Pe$,'-$$ Se'e$


11/27

,eni Penyi#anan Se#en atau yang dienal dengan teni

rioreserasi #eruaan suatu teni enyi#anan sel "ewan tu#'u"an

atauun #ateri genetia lain (ter#asu se#en) dala# eadaan 'eu #elalui

redusi atiitas #eta'olis#e tana #e#engaru"i organelorganel di dala# sel

se"ingga -ungsi -isiologis 'iologis dan #or-ologis teta ada. ,eni

rioreserasi #eruaan teni enyi#anan yang dilauan ada su"u yang

sangat renda" (16G7) dala# nitrogen air (Boediono 2003). ,eni

rioreserasi uga se'agai -ator enduung ta#'a"an yang sangat 'ai untu

onserasi in situ dan #ungin uga digunaan dala# rogra# selesi

(Dan"in'urge dan ie#stra 2003). Se#entara itu #enurut $ulton (2006).

rioreserasi las#a nut-a" aan #enadi alat yang sangat 'er"arga 'agi

industri unggas dan untu e'er"asilan elestarian su#'er daya geneti unggas

yang #asi" ada. Du#ala et al. (2006) #enyataan 'a"wa olu#e se#en aya#

sangat sediit se"ingga ena#'a"an olu#e ser#a se'elu# +B dan

enyi#anan atau e#'euan sangat dierluan dengan ara #ena#'a"an

engener se#en yang oo. Selain itu langa" enting dala# e'er"asilan

rioreserasi se#en unggas adala" dengan e#ili"an riorotetan yang teat

dan #etodefreezing-thawing (Suid/ina dan =uas/ewi/ 200).

Te#$# K"//-"e(e"( !& Te#$# P$,'-$$ Se'e$

,eni rioreserasi daat di'edaan atas teni rioreserasi

onensional (conventional slowfreezing) dan rioreserasi seara eat (rapid

freezing). ,eni rioreserasi onensional adala" teni rioreserasi yang

le'i" #eneanan ada roses e#'euan la#'at. Pada teni ini su"u

diturunan seara 'erta"a dengan #esin endingin yang daat dirogra#.

Dengan teni ini ristal es #asi" ter'entu 'ai estraseluler #auun

intraseluler se"ingga daat #enye'a'an teradinya erusaan sel. al ini

dise'a'an ole" eletrolit yang #enu#u aan #erusa dinding sel se"ingga

ada watu enairan e#'ali er#ea'ilitas #e#'rane las#a aan #enurun dan

sel aan #ati. Pe#'entuan ristal es e#unginan 'eraitan dengan eru'a"an

teanan os#oti dala# -rasi yang tida #engala#i e#'euan (atson 2000).


12/27

,eni ini selain #eli'atan roses e#aaran riorotetan 'ai ada

saat rae#'euan dan asathawing (enairan e#'ali) yang 'erta"a uga

roses e#'euan 'erta"a dengan #eneanan entingnya roses seeding.

Prosesseedingdi#asudan untu #enginisiasi e#'entuan &ristal es se'agai

inti es dengan #enurunan te#erature se'agian larutan agar de"idrasi teradi

dan #enean eleasan energi anas yang 'erle'i"an dari -usi &ristal es. +nisiasi

seara #endada ini dilauan ada te#eratur sediit di 'awa" titi 'eu

larutan se"ingga daat #enega" #e#'esarnya deraat supercooling atau

#e#erende selang supercooling. ,ana erlauan seeding inti es aan

ter'entu seara sontan ada te#eratur 10G7 sa#ai 15G7 (-eno#ena

supercooling) yang disertai dengan eleasan -usi anas se"ingga te#eratur

"a#ir #enaai titi 'eunya e#'ali. &ondisi ini aan #eni#'ulan suatu

-lutuasi te#eratur yang uu 'esar. ,eni rioreserasi onensional uga

dise'ut dengan teni e#'euan dua ta"a. ,eni e#'euan dua ta"a

#eliuti inu'asi sel dala# riorotetan dengan total onsentrasi 12 ! yang

#enye'a'an de"idrasi #oderat dan diiuti ole" e#'euan la#'at #isalnya

dengan eeatan 1G7F#enit "ingga su"u 35G7 lalu e#'euan dala# nitrogen

air dan thawing untu ealuasi. ,eni rioreserasi eat adala" roses

e#adatan onsentrasi riorotetan (estraseluler #auun intraseluler). Pada

teni ini se'agian 'esar air di dala# sel dieluaran se'elu# teradi e#'euan

intraseluler dan digantian dengan riorotetanse"ingga ada saat e#'euan

tida teradi ristal es(9alerdi et al. 200).

Prosesnya #eliuti (a)de"idrasi yaitu roses ergantian airan sitolas#a

dengan larutan riorotetan #elalui roses di-usi e dala# selH (') e#'euan

ta"aan ada saat sel atau organ dan larutan 'erada dala# nitrogen air (16G7)

#e#'entu adatan solid glassH () warming yaitu ta"a teradinya eru'a"an

e#'ali 'entu adatan #enadi airH serta (d) re"idrasi yaitu roses #asunya

e#'ali air e dala# sel untu #enggantian# eduduan riorotetan. Setia

teni rioreserasi #e#unyai ele'i"an dan eurangan. &ele'i"an dari

rioreserasi seara u#u# adala" (1) 'a"an atau #ateri daat disi#an dala#

watu tida ter'atasH (2) daat diolesi setia saatH (3) daat digunaan aan


13/27

saa 'ila di'utu"anH (4) #elestarian las#a nut-a" yang #endeati euna"anH

(5) tida erlu #engi#or atau #e#eli"ara eantan eantan unggulH (6) tida

#e#'utu"an ruangan yang 'esar arena ta'ung nitrogen air uu #e#adai

untu #enyi#an 'a"an dala# raga# dan u#la" yang 'anyaH dan () tida

#enye'a'an eru'a"an #aterial geneti yang disi#an. Se#entara itu

eurangannya adala" (1) 'iaya elasanaan uu #a"alH (2) #e#erluan

tenaga yang tera#il dan 'erengala#anH (3) nitrogen air erlu tersedia seara

ontinyuH dan (4) "anya se#en yang 'erualitas 'ai yang daat dan laya

di'euan (,oeli"ere 15).

F#!/" ,$% Me'-e$%"&h Ke5e"h(l$ #"/-"e(e"(

Seu#la" -ator yang #e#engaru"i e'er"asilan teni rioreserasi

onensional adala" (1) eeatan e#'euanH (2) enis dan onsentrasi

riorotetanH (3) su"u a"ir e#'euanH dan (4) tie dan eadaan -isiologis

'a"an yang aan disi#an. @ia dari sel untu #enaai esei#'angan otensial

i#iawi air intraseluler dan estraseluler serta teradi de"idrasi untu #eng"indari

e#'euan intraseluler. Aa'ila #edia engener didinginan di 'awa" tingat

endinginan #aa ristal es #enggu#al dan air aan #engala#i engristalan

eluar se'agai es (atson2000). @ia e#'euan terlalu eat #aa

esei#'angan otensial air aan terganggu dan air intraseluler aan #e#'eu.

Pada deraat enurunan su"u yang sangat eat aan ter'entu ristal es yang

"alus di dala# sel yang #e#unyai energi er#uaan yang 'esar dan tida sta'il

serta enderung #e#'entu ristal es yang 'esar. &ondisi ini aan

#engai'atan erusaan dan e#atian sel (Pars dan :ra"a#12).

Pena#'a"an riorotetan 'ertuuan untu #e#eli"ara eutu"an

#e#'ran dan #eningatan otensial os#oti #edia se"ingga airan di dala# sel

#engalir eluar dan teradi de"idrasi. &e#a#uan rotesi riorotetan

ter"ada #e#'ran sel #eruaan indiasi dari interasi yang 'eralan 'ai antara

riorotetan dan #e#'ran sel. +nterasi ini daat #engurangi erusaan

#e#'ran sel ada saat teradi eru'a"an eadaan dari relati- air e strutur


14/27

relati- adat dan uga ada saat e#'ali e strutur yang relati- air sela#a roses

enairan.

&riorotetan iala" /at i#ia noneletrolit yang 'ereran dala#

#engurangi engaru" #e#atian sela#a e#'euan 'ai 'erua engaru"

larutan #auun adanya e#'entuan ristal es se"ingga ia'ilitas sel daat

dierta"anan. Berdasaran ara eranya riorotetan dielo#oan #eadi

penetrating ('eera di dala# dan di luar sel) seerti etilen gliol dan roilen

gliol (7"en et al., 2005 =u/ et al., 200) dan non-penetrating ("anya di luar sel)

seerti surosa gluosa atau -rutosa (Die/ et al., 2001 Barelo$i#'es dan

Seidel 200).

Se#entara itu 'erdasaran 'a"an yang terandung di dala#nya

riorotetan dielo#oan #enadi dua golongan yaitu elo#o alo"ol

(etilen gliol gliserol dan lainlain) dan elo#o a#ida (di#etil-or#a#id

aseta#id #etil-or#a#id dan lainlain) (Alarenga et al. S%uires2005). Dasar

e#ili"an enis riorotetan untu e#'euan se#en #enurut S%uires et al.

(2004) dan Alarenga et al. (2005) selain #engandung 'a"an yang 'eera

#elindungi sel ada saat e#'euan uga "arus #e#unyai 'o'ot #oleul yang

eil agar le'i" #uda" dan eat enetrasi e dala# sel se"ingga #engurangi

tosisitas ai'at os#olaritas yang tinggiH dan #uda" larut dala# air. Pengaru"

riorotetan dala# #elindungi ser#ato/oa ada saat rioreserasi selain dari

ara eranya uga diengaru"i ole" enis dan onsentrasinya. &riorotean yang

u#u# digunaan ada e#'euan se#en unggas adala" dimethylsulfoxide

(D!S) dimethylformamide (D!$) dimethylacematide (D!A) dan gliserol

(,selutin et al. 1).

D!S adala" a#uran organosul-ur dengan ru#us i#ia (73)2S dan

#e#unyai 'erat #oleul se'esar 13. D!S adala" suatu 'a"an elarut olar

aroti yang enting. D!S uga dienal se'agai riorotetan onensional

yang dita#'a"an e#edia sel untu #enega" e#atian sel seanangroses

e#'euan. ,iti 'eu D!S tinggi ada su"ua#ar #eruaan suatu adatan

yang daat #e#'atasiegunaannya dala# 'e'eraa roses i#ia (seerti

ristalisasi ada watu cooling). Dosis D!S dala#engener se#en 'erariasi


15/27

di antara enis terna.Dosis oti#u# D!S dala# engener se#en itise'esar

10? (A> et al. 2005) aya# White LeghornOvambo, dan otchefstroom

!oe"oe" se'esar 5? (!a"alo-a" et al. 200).

&riorotetan D!$ #e#unyai 'erat #oleul310 dengan 'erat enis

05 gF#3 dan sangat sta'il ada larutan yang 'e'as asa#'asa serta sangat

#uda"larut dala# air. Dosis oti#u# D!$ dala# engenerse#en iti se'esar

? (A> et al. 2005) dan aya# &a#ung se'esar 5 E ? (Soiyana et al.

200). &riorotetan D!A #eruaan senyawa dengan 'erat #oleul 12 dan

'erat enis 04 gF#3 #eruaan larutan yang #uda" larut dala# air alo"ol

et"er aseton 'en/ena dan larutan lain #e#unyai e#a#uan enetrasi yang

'ai ada selsel dengan andungan lipid #e#'ran yang 'anya. Dosis oti#u#

D!A dala# engener se#en iti se'esar 10? (A> et al. 2005) entog se'esar

? (&usu#aningru# et al. 2002) dan aya# Ara' se'esar ? (+sandar et al.

2006). :liserol #a#u #engiat air yang uu uat arena adanya tiga gugus

"idrosil yang di#iliinya. :liserol daat #enggantian se'agian air yang 'e'as

dan #endesa eluar eletroliteletrolit se"ingga #enurunan onsentrasi

eletrolit intraseluler dan #engurangi daya #erusanya ter"ada ser#ato/oa

dengan alan #e#odi-iasi ristal es yang ter'entu (,oeli"ere 15). Di dala#

#e#'ran las#a riorotetan ini aan #engiat gugus usat -os-oliid

se"ingga #engatasi etidasta'ilan #e#'ran serta 'erinterasi dengan #e#'ran

untu #engiat rotein dan gliorotein se"ingga #enye'a'an artielartiel

intra#e#'ran teru#ul (Par dan :ra"a# 12).

Dosis oti#u# gliserol dala# engener iti se'esar ? (an et al.

2005) dan aya# &a#ung se'esar 5 E ? (Soiyana et al. 200). Pada teni

rioreserasi eat -ator yang #enentuan e'er"asilan rioreserasi

tergantung ada teni yang diteraan. Prosedur rioreserasi eat

#e#'erian endeatan yang seder"ana eono#is dan e#an-aatan watu

ter"ada roses e#'euan di'andingan dengan rosedur rioreserasi

onensional (7se" et al. 1). !enurut 9alerdi et al. (200) 'a"wa teni

rioreserasi eat adala" teni yang e-isien untu rioreserasi dengan

#e#'eriansurvival rate yang tinggi.


16/27

Pe$%&*$ K&l!( Se'e$ U$%%( P( K"/-"e(e"(

&e'er"asilan e#'euan se#en seara in vitro daat dili"at dari u#la"

ser#ato/oa yang 'er"asil W#R$#%O# &ol. '( )o. * $h. '+((14 uli" dari

roses e#'euan yang dise'ut dengan recovery rate. Ber'agai teni tela"

die#'angan untu #eli"at ersentase ser#ato/oa #otil seara su'eti-

atauun #enggunaan 'antuan computerized assisted sperm analyzed (7ASA).

7ASA !ulai digunaan sea ta"un 10an. aluasi #engggunaan 7ASA

selain daat #engeta"ui ersentase total ser#ato/oa #otil dan rogresi- uga

#e#'erian in-or#asi arateristi ser#ato/oa #otil yang lenga seerti

dance average path velocity (DAP) dance curvilinear velocity (D7=) dance

straight line velocity (DS=) average path velocity (9AP) curvilinear velocity

(97=)straight line velocity (9S=)straightness (S,R) linearity (=+>)wobble

(B) amplitude lateral head displacement(A=) dan beat cross freuency

(B7$). Dari e13arateristi #otilitas ser#ato/oa terse'ut yangaling sering

dilaoran adala" total #otil rogresi-#otil dan 97=.

Selain dengan alat 'antu ealuasi ualitas se#en se'elu# dilauan

inse#inasi #eruaan uuran ualitas yang se'enarnya dan #e#'erian

ga#'aran tingat -ertilitas yang aan diaai. >a#un de#iian 'anya -ator

yang #e#engaru"i tingat -ertilitas ser#a 'euthawing di antaranya adala"

enis riorotetan (Donog"ue dan is"art 2000) tingat sensitiitas ter"ada

roses 'euthawing disa#ing -ungsi siste# transortasi dan enyi#anan

dala# saluran rerodusi 'etina (Bas et al. 14). asil enguian -ertilitas dari

'e'eraa se#en 'euunggas disaian ada ,a'el 2. Selain dili"at dari -ertilitas

ada rosedur lain yang digunaan untu #e#redisi e'er"asilan rioreserasi

dari se#en aya# yaitu dengan #eli"at eadaan #e#'rannya (Bles'ois et al.

200). Setia ser#ato/oa "arus #e#ilii #e#'ran las#a utu" arena tida

leas dari eranannya se'agai alat transortasi eluar #asunya /at/at #aanan

dan ionion yang dierluan untu roses #eta'olis#e. Ser#ato/oa yang

#e#ilii #e#'ran las#a utu" ditandai dengan eor #elingar atau

#engge#'ung arena roses transortasi air e dala# sel 'erlangsung 'ai.


17/27

Se'alinya 'ila #e#'ran las#a rusa aanditandai dengan eor ser#a teta

lurus 'ila diaaran dala# larutan "ioos#oti arena roses ,ransortasi air

e dala# sel suda" rusa.


18/27

BAB III

METODE PENELITIAN

A. Je$( Pe$el!$

Penelitian ini #eruaan enelitian desriti- dengan #elauan

enyi#anan ser#a segar yang dierole" seara langsung e#udian di

si#an #enggunaan #edia tris dengan ena#'a"an gluosa dan -rutosa.

B. 7#!& $ Te'-! Pe$el!$

Penelitian dilauan di gedung 7 =a'oratoriu# &ultur @aringan @urusan

Biologi $!+PA *niersitas >egeri Sura'aya ada tanggal 11 24 !ei 2013.

). S("$ Pe$el!$

Sasaran dari enelitian ini adala" ser#ato/oa segar aya# yang dia#'il

seara langsung dan disi#an dala# serta ealuasi ser#ato/oa.

D. P"/(e&" Pe$el!$

1. Al! $ Bh$

a. Ba"an '. Alat

1. Se#en segar aya#

2. Alo"ol 0 ?

3. &aas

4. ,ris

5. Asa# sitrat

6. :luosa

. $rutosa

. Penisilinstreto#isin

. &uning telur segar

10. Deioni/e water

11. Pewarna eosin negrosin

1. :elas o'e dan enutu

2. ,a'ung sentri-use lasti

3. Alu#iniu# -oil

4. Piet steril

5. Sti gelas

6. !iroiet uuran dan #iroti

. e#osito#eter

. 7awan etri dan ra ta'ung reasi

. ater 'at" dan "and ounter

10. !iroso a"aya

11.Pe#'aar Bunsen dan ertas saring

12.:elas 'eer 50 100 250 #l

13.Syringe uuran 5 dan 10 #l


19/27

2. P"/(e&" -el#($$ -"#!#&'

1. Sterilisasi Peralatan

Bersi"an se#ua eralatan dari 'a"an'a"an yang #ene#el dengan

#enggunaan air #engalir

Renda#la" se#ua eralatan dengan sa'un tida 'er'au (teeol) se#ala#

:oso dan 'ilas dengan air #engalir se'anya 5I

Re'us dengan air anas se'anya 5 #enit

Bilas dengan DF a%uades steril se'anya 2I

&eringan

=auan sterilisasi ering untu eralatan dari gelas di dala# oen

=auaan sterilisasi 'asa" atau di *9 untu eralatan dari lasti

2. Pe#'uatan Pengener Dasar ,ris

,i#'ang ,ris 3025 g H asa# sitrat 1 g H gluosa 010 g H -rutosa 010

g H enisilin 01 g H streto#isin 01 g

7a#uran se#ua 'a"an i#ia e dala# gelas 'eaer ta#'"aan air D

se'anya n5 #l lalu goyanggoyangan gelas 'eaer untu #e#'antu

"o#ogenisasi.

@ia se#ua suda" larut ta#'"aan lagi air D sa#ai larutan

#enunuan olu#e 100 #l

Sterilisasi dengan #enggunaan #e#'rane #ilior di =A$

Si#an engener dasar tris dala# le#ari es

3. Sule#entasi &uning ,elur

&eluaran engener dasar tris dari le#ari es 'iaran dala# su"u ruang

suaya su"unya nai dan #uda" untu dia#ur dengan uning telur

A#'il telur yang #asi" 'aru 'ersi"an otoran yang #ene#el ada

angang dengan sa'un dan air #engalir

Sterilisasi telur dengan ara di se#rot dengan #enggunaan alo"ol 0

?

Pea"an telur ada 'agian tenga" dengan #enggunaan isau atau inset

A#'il 'agian uning telurnya saa usa"aan utu" tida ea" gulingan

ada ertas saring untu #eng"ilangan sisa uti" telur.


20/27

!asuan uning telur ada awan etri steril

A#'il uning telur dengan ara di sedot #enggunaan aru# sunti

A#'il engener dasar tris se'anya 0 #l dengann #enggunaan

syringe #asuan dala# ta'ung reasi lasti steril

,a#'a"an uning telur se'anya 20 #l "o#ogenan dengan ara di

oooo

Si#an dala# le#ari es sela#a 3 "ari a#'il 'agian suernatant untu

engener

4. Proses Pengeneran Se#en

Siaan ta'ung reasi steril yang suda" di'ungus dengan alu#iniu# -oil

a#'il se#en segar dengan #enye#rotan larutan PBSFengener tris e

saluran eididi#is e#udian eididi#id di enet untu #engeluaran

se#en si#an dala# ta'ung reasi lasti steril dala# eadaan "angat

(su"u 307)

"itung segera onsentrasi ser#ato/oa dengan #enggunaan

"e#osito#eter

lauan enga#atan #otilitas ser#ato/oa dari se#en segar

lauan roses engeneran dengan #enggunaan rinsi engeneran

91 I !1J92 I !2

dala# roses engeneran terle'i" da"ulu a#'il se#en segar dengan

#enggunaan #iroiet sesuai uuran "asil "itungan e#udian

ta#'a"an engener sesuai dengan "asil "itungan lauan engeneran

ada su"u "angat

tentuan onsentrasi ser#ato/oa se'esar 1 I 106 setela" dilauan

engeneran

5. Penga#atan !otilitas Ser#ato/oa

=auan enga#'ilan ser#ato/oa dengan #enggunaan sti gelas

dengan terle'i" da"ulu di aduadu agar ser#ato/oa daat ter'awa

,etesan se#en ada gelas o'ye

Panasan se'entar dengan ara di lewatlewatan di atas Bunsen

A#ati #otilitas ser#ato/oa di 'awa" #iroso


21/27

6. Penga#atan 9ia'ilitas Ser#ato/oa

=auan enga#'ilan se#en dengan #enggunaan sti gelas

,etesan ada gelas o'ye

A#'il ewarna eosinnegrosin tetesan ada gelas o'ye yang sa#a

dengan se#en

A#'il gelas o'ye lain

7a#uran se#en dengan ewarna eosinnegrosin dengan #enggunaan

sala" satu uung gelas o'ye

Buat "ausan antara se#en dan ewarna eosinnegrosin dengan

#enggunaan uung gelas o'ye

A#ati di 'awa" #oroso ia'ilitas ser#ato/oa yang ditandai dengan

ser#ato/oa yang #asi" "idu tida 'erwarna ser#ato/oa yang suda"

#ati 'erwarna 'iru


22/27

BAB IVHASIL DAN PEMBAHASAN

1. H(l

T5el 1. Penga#atan !otilitas ser#ato/oa

N/

T$%%l $ h"

-e$%'!$

M/!l!( 84 R!9

"!L-$% -$$%

1 2 3 : ;

1 Ra'u 22 !ei 2013 30 30 25 20 25 26 ?

2 &a#is 23 !ei 2013 3 @u#at 23 !ei 2013

T5el 2. Penga#atan 9ia'ilitas ser#ato/oa

N/

T$%%l $ h"

-e$%'!$

V5l!( (-e"'!/


23/27

&onsentrasi se#en segar setela" dilauan er"itungan dierole" nilai 21 I

105 e#udian dilauan engeneran #enggunaan ru#us 91.!1J92.!2

dengan olu#e engeneran yang diinginan 3 I 103#l dan onsentrasi sela#a

enyi#anan 10 I 105 se"ingga dierole" olu#e ser#ato/oa yang "arus di

a#'il dengan #iroiet yaitu 132 Ll dan olu#e engener 162 Ll.

Penga#atan "ari erta#a setela" dilauan enyi#anan dierole" ratarata

##otilitas se'esar 26 ? dengan sel yang "idu se'anya 131 dan yang #ati

se'anya 6. Pada "ari edua dan etiga etia dilauan enga#atan #otilitas

ser#ato/oa tida ta#a ser#ato/oa yang #asi" "idu se"ingga tida

dilauan enga#tan ia'ilitas.

2. Pe'5h($

"asil analisis data #enunuan 'a"awa ser#ato/oa #a#u 'erta"an dala# 1

"ari saa. al ini diarenaan eurangan ratian dala# #elauan teni

enyi#anan ser#ato/oa.

Pada enelitian ini dilauan ena#'a"an gluosa dan -rutosa e dala#

engener ,ris untu #e#reserasi ser#ato/oa di"araan aan

#e#ini#alan erusaan ser#ato/oa sela#a reserasi se"ingga daya ta"an

"idunya daat dieranang. >a#un "al terse'ut tida sesuai dengan "araan.

Pada "ari erta#a dierole" rerata #otilitas se'anya 26 ?. &ondisi

ser#ato/oa yang 'ergera rogresi- #au edean "anya sediit. Dala# "al ini

ena#'a"an -rutosa dan gluosa #a#u #e#erta"anan #otilitas

ser#ato/oa. !enurut Ri/al (200) gluosa dan -rutosa #eruaan golongan

#onosaarida yang daat di#eta'olisir ole" ser#ato/oa #elalui gliolisisdanFatau silus &re's untu #eng"asilan energi 'erua adenosin tri-os-at (A,P).

Adenosintri-os-at di#an-aatan ole" ser#ato/oa se'agai su#'er energi dala#

roses ergeraan se"ingga daat teta #otil dan sealigus untu

#e#erta"anan daya "idunya.sedangan sule#entasi uning telur 'er-ungsi

#enaga ualitas ser#a arena uning telur 'er-ungsi untu #engiat loga# 'erat

teruta#a alsiu# yang #enye'a'an le#a dari uning telur #enadi 'entu 'utiran

le#a yang le'i" "alus dan 'ersa#a uning telur #e#'entu 'a"an engener yang

isotonis ter"ada se#en. =esitin uning telur di"araan aan #elindungi #e#'ran


24/27

las#a sel ser#ato/oa dari erusaan sela#a roses engola"an se#en

teruta#a saat endinginan ($ati#a" 2012).

9ia'ilitas saat enga#atan "ari erta#a dierole" ser#ato/oa "idu se'anya 131

dan ser#ato/oa #ati se'anya 6. Ser#ato/oa "idu tida 'erwarna arena

ser#ato/oa tida #enyera ewarna eosinnegrosin. Sedangan ser#ato/oa yang #ati

#e#ilii warna 'iru eunguan (idayat d. 2013)

Pada enga#atan "ari e2 tida didaatan ser#ato/oa yang #asi" "idu.

&e#unginan dise'a'an ole" atiitas seluler yang "a#ir oti#u# se"ingga

su'strat energy di dala# las#a se#en aya# eat "a'is dan terdaat au#ulasi

asa# latat se'agai sisa #eta'olis#e dengan onsentrasi le'i" tinggi yang

'ersi-at tosi ada ser#ato/oa. &arena ada "ari e2 tida terdaat

ser#ato/oa yang 'ergera #aa "ari e3 tida dilauan enga#atan.

Penye'a' lain ser#ato/oa #ati yaitu arena urang a"linya ratian dala#

#elauan roses enga#atan dan enyi#anan. Di#ana terdaat teniteni

tertentu serti "alnya eeatan dan eteatan dala# #enentuan #otilitas

ser#ato/oa. Selain "al terse'ut su"u sela#a enyi#anan "arus teta sta'il dan

tida 'eru'a"u'a" 'ai saat enyi#anan #auun etia #elauan

enga#atan se"ingga ser#ato/oa tida #engala#i eutan dingin ai'at su"u

yang 'eru'a". Dala# "al ini enyi#anan dilauan dala# ulas yang 'erisi

'er#aa##aa# isoal 'ateri dan su"u uga sering #engala#i eru'a"an.

&etia aan #enga#ati ada "ari e2 su"u ada ulas seitar 10 07 "al itula"

yang #enye'a'an ser#ato/oa yang disi#an #ati ai'at adanya eutan

dingin.


25/27

BAB V

PENUTUP

1. Ke('-&l$

Ser#ato/oa aya# yang disi#an #enggunaan engener tris

sule#entasi uning telur dan ena#'a"an gluosaK-rutosa #e#ilii

ualitas yang 'uru dengan #otilitas se'esar 26 ? dan "anya #a#u

#e#erta"anan #otilitas dan ia'ilitas ser#ato/oa sela#a satu "ari.

2. S"$

S"$ &$! -"#!#$ (el$*&!$, ,!& 6

1. Peralatan yang digunaan untu #elauan engeneran dan enyi#anan

se"arusnya #enggunaan eralatan yang sesuai untu enyi#anan

ser#ato/oa

2. Partian sea"rusnya suda" #enguasai teni ena#ungan se#en segar dan

uga teni ealuasi ser#ato/oa se"ingga dierole" "asil yang 'ai.

3. &etia #elauan ealuasi lauan dengan eat arena ser#ato/oa sangat

sensitie dengan eru'a"an su"u.


26/27

DAFTAR PUSTAKA

Ba"r@.! and !.R. Bast 1. Poultry in a-e/.S. Rerodution in -ar#Ani#al 5t" ed. =ea and $e'iger. P"iladel"ia . 335.

Diretorat @endral Peternaan . 12. Buu statisti eternaan . Diretorat Bina

Progra# . Ditenna @aarta.

$ati#a" siti. 2011. !otalitas dan resentase "idu ser#ato/oa sai $riesian

olstein ost t"awing dala# engener si# uning telur tris uning telur

dan andro#ed. Srisi MnlineN tersedia

"tt;FFwww.-".unair.a.idFartiel1F2011Fsiti?20-ati#a"..d- (,anggal 16

Dese#'er 2012)

ardianto Susilowati ernawati Sardito dan Surayogi. 2010. u"u #ar

/nseminasi uatan. Sura'aya ; Airlangga *niersity Press

&ingston. D.@ . 1. Peranan aya# 'ereliaran di +ndonesia. =aoran Se#inar

dan +ndustri Perunggasan ++ . Pusat Penelitian dan Penge#'angan ,erna

Bogor . ; 1320 .

=ae P.. and @.!.Stewart 1. Arti-iial +nse#ination in Poultry. !inistry o-

Agriulture $is"eris and $ood Bulletin. .!. Stationery o--ie =ondon. .

5 14

!ansyoer . S.S. 15. Pengaian si-atsi-at rodusi aya# a#ung serta

ersilangannya dengan aya# R"ode +sland Red. Desertasi Pasa Sarana

+PB . Bogor.

>eis"ei# !.7 R.. Austi and .7. =eislie 1. Poultry Prodution. 12 t" ed.

=ea and $e'iger. P"iladel"ia. . 16 E 5.

Rasya-!.13. Beterna Aya# &a#ung. Pener'it Swadaya @aarta.

Ridwan 200. Pengaru" Pengener Se#en ,er"ada A'nor#alitas dan Daya,a"an idu Ser#ato/oa &a#'ing =oal ada Penyi#anan Su"u 5 o7.

urnal agroland16 (2) ; 112

Ri/al !u"a##ad. 200. Daya idu Ser#ato/oa ididi#is Sai Bali yang

Direserasi ada Su"u 3E5o7 dala# Pengener ,ris dengan &onsentrasi

=atosa yang Ber'eda. @+,9 9ol. 14 >o. 2 ,". 200; 14214

Salis'ury :.. 8 9anDen#ar >.=. 14.0isiologi reprodu"si dan /nseminasi

uatan pada 1api. Ditere#a"an ole" Danuar R. 15. Oogyaarta ;

:ada" !ada *niersity Press
http://www.fkh.unair.ac.id/artikel1/2011/siti%20fatimah..pdfhttp://www.fkh.unair.ac.id/artikel1/2011/siti%20fatimah..pdf


27/27

Su#antri 16. ,enologi awin sunti ada terna iti . Bulletin ,eni

Pertanian olu#e + no . 2 ta"un 16. Badan =it'ang Pertanian .

Sastrodi"ardo . S. S . +sandar ,. >ur#ala dan Paggi . 14. Daya ta"an "idu

ser#ato/oa aya# 'uras dala# 'er'agai engener se#en dengan enguian

Su"u a#ar . Prosiding Se#inar >asional Pengola"an dan &o#uniasi

asil"as. Su'Balitna &leu . Se#arang .

Sastrodi"ardo S 16. +nse#inasi Buatan Pada Aya# Buras. =ea-let 7etaan

&edua Balitna Puslit'ang Peternaan Bogor.

SturieP.D. 16. Aian P"ysiology. 3 rd ed. Sange 9erlag. >ew Oor.

302 E 330.

,oeli"ere!.R. 15. +nse#inasi Buatan Pada ,ernaPener'it Angasa Bandung.

; 265 21

,oeli"ere !R. 15a. 0isiologi reprodu"si pada terna". Bandung ; Pener'it

Angasa Bandung.

,oeli"ere !R. 15'. /nseminasi buatan pada terna". Bandung ; Pener'it

Angasa Bandung.

[kultur jaringan] - laporan penyimpanan semen ayam.doc

Documents