evaluasi in vitro efektifitas antimikroba gel metronidazol berbasis
TRANSCRIPT
EVALUASI IN VITRO EFEKTIFITAS ANTIMIKROBA
GEL METRONIDAZOL BERBASIS ALGINAT TERHADAP
BEBERAPA BAKTERI PATOGEN PERIODONTAL
TESIS
MARTINA AMALIA
117160018
PROGRAM PENDIDIKAN DOKTER GIGI SPESIALIS PERIODONSIA
FAKULTAS KEDOKTERAN GIGI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2015
Universitas Sumatera Utara
EVALUASI IN VITRO EFEKTIFITAS ANTIMIKROBA
GEL METRONIDAZOL BERBASIS ALGINAT TERHADAP
BEBERAPA BAKTERI PATOGEN PERIODONTAL
TESIS
Diajukan Sebagai Salah Satu Syarat
Untuk Memperoleh Gelar Spesialis Periodonsia
Pada Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Sumatera Utara
MARTINA AMALIA
117160018
PROGRAM PENDIDIKAN DOKTER GIGI SPESIALIS PERIODONSIA
FAKULTAS KEDOKTERAN GIGI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2015
Universitas Sumatera Utara
Judul Tesis: EVALUASI IN VITRO EFEKTIFITAS ANTIMIKROBA GEL
METRONIDAZOL BERBASIS ALGINAT TERHADAP BEBERAPA
BAKTERI PATOGEN PERIODONTAL
Nama Mahasiswa : Martina Amalia
NIM : 117160018
Program Studi : Pendidikan Dokter Gigi Spesialis Periodonsia
Disetujui Oleh
Pembimbing:
Pembimbing Utama, Pembimbing Anggota,
Irma Ervina, drg.,Sp.Perio (K) Prof. Hakim Bangun, Ph.D., Apt
NIP. 197107021996012001 NIP. 195201171980031002
Diketahui Oleh:
Ketua Program Studi, Dekan,
Irma Ervina, drg.,Sp.Perio (K) Prof. H. Nazruddin, drg., C.Ort.,Ph.D.,Sp. Ort
NIP. 197107021996012001 NIP. 195206221980031001
Universitas Sumatera Utara
Tanggal Lulus : 27 April 2015
Telah diuji
Pada Tanggal : 27 April 2015
PANITIA PENGUJI TESIS
Ketua : Irma Ervina, drg., Sp.Perio (K)
Anggota : 1. Prof.Hakim Bangun, Ph.D.,Apt
2. Irmansyah Rangkuti, drg.,Ph.D
3. Aini Hariyani Nasution, drg.,Sp.Perio
Universitas Sumatera Utara
EVALUASI IN VITRO EFEKTIFITAS ANTIMIKROBA
GEL METRONIDAZOL BERBASIS ALGINAT TERHADAP
BEBERAPA BAKTERI PATOGEN PERIODONTAL
TESIS
Dengan ini saya menyatakan bahwa dalam tesis ini tidak terdapat karya yang pernah
diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu perguruan tinggi, dan sepanjang
pengetahuan saya juga tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah ditulis atau
diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis diacu dalam naskah ini dan
disebutkan dalam daftar pustaka.
Medan,
Martina Amalia
Universitas Sumatera Utara
LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI
KARYA ILMIAH UNTUK KEPENTINGAN AKADEMIS
Sebagai sivitas akademik Universitas Sumatera Utara, saya yang bertanda tangan di bawah
ini:
Nama Mahasiswa : Martina Amalia
NIM : 117160018
Program Studi : Pendidikan Dokter Gigi Spesialis Periodonsia
Departemen : Periodonsia
Fakultas : Kedokteran Gigi
Jenis karya : Tesis
demi pengembangan ilmu pengetahuan, menyetujui dan memberikan kepada Universitas
Sumatera Utara Hak Bebas Royalti Non-Eksklusif (Non-Exclusive Royalti Fee Right)
atas karya ilmiah saya yang berjudul:
Evaluasi in vitro Efektifitas Antimikroba Gel Metronidazol
Berbasis Alginat Terhadap Beberapa Bakteri Patogen Periodontal
beserta perangkat yang ada (bila diperlukan). Dengan Hak Bebas Royalti Non Eksklusif ini
Universitas Sumatera Utara berhak menyimpan, mengalih media/formatkan, mengelolanya
dalam bentuk pangkalan data (database), mendistribusikannya dan menampilkan/
mempublikasikannya di internet atau media lain untuk kepentingan akademis tanpa perlu
meminta iijn dari saya selama mencantumkan nama saya sebagai penulis/pencipta dan
sebagai pemilik Hak Cipta. Segala bentuk tuntutan hukum yang timbul atas pelangaran Hak
Cipta dalam karya ilmiah ini menjadi tanggung jawab saya pribadi.
Demikian pernataan ini saya buat dengan sebenarnya.
Medan, April 2015
Yang membuat pernyataan,
(Martina Amalia)
Universitas Sumatera Utara
ABSTRAK
EVALUASI IN VITRO EFEKTIFITAS ANTIMIKROBA GEL METRONIDAZOL
BERBASIS ALGINAT TERHADAP BEBERAPA BAKTERI PATOGEN
PERIODONTAL
Latar Belakang: Patogen periodontal sangat kompleks dan heterogen, sedikitnya 500
spesies kultur bakteri yang di dapat dari poket periodontal. Umumnya kebanyakan bakteri
yang diidentifikasi adalah anaerob Gram negatif seperti Porphyromonas gingivalis,
Provotela intermedia, Fusobacterium nucleatum. Metronidazol telah berhasil digunakan
sebagai antimikroba penunjang pada perawatan penyakit periodontal.
Tujuan : Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui dan menganalisis efektifitas
gel metronidazol berbasis alginat dalam menghambat pertumbuhan beberapa bakteri
patogen periodontal secara in vitro.
Metode : Gel yang digunakan berbasis alginat mengandung metronidazol 15% dan 25%,
serta menggunakan gel metronidazol 25% berbasis non alginat sebagai pembanding.
Bakteri yang digunakan adalah biakan murni Aggregatibacter actinomycetemcomitans
(ATCC 29522), Porphyromonas gingivalis (ATCC 33277) dan Fusobacterium nucleatum
(ATCC 25586) dan dibiakkan dengan media Tryptic (Trypticase) Soy Agar (TSA).
Hasil : Rerata diameter zona hambat gel metronidazol 15% berbasis alginat terhadap
bakteri A.actinomycetemcomitans, P.gingivalis dan F.nucleatum masing – masing 15,33
mm, 35,67 mm dan 19,33 mm. Rerata diameter zona hambat gel metronidazol 25%
berbasis alginat terhadap bakteri A.actinomycetemcomitans, P.gingivalis dan F.nucleatum
yaitu masing-masing 16,67 mm, 51,67 mm dan 18,00 mm. Rerata diameter zona hambat
gel metronidazol 25% berbasis non alginat terhadap bakteri A.actinomycetemcomitans,
P.gingivalis dan F.nucleatum yaitu masing - masing 15,33 mm, 0 mm dan 24,67 mm.
Kesimpulan: Gel metronidazol 15% dan 25% berbasis alginat memiliki efektifitas yang
kuat dalam menghambat pertumbuhan bakteri A.actinomycetemcomitans, P.gingivalis dan
F.nucleatum.
Keywords: gel metronidazol, alginat, patogen periodontal.
Universitas Sumatera Utara
ABSTRACT
IN VITRO EVALUATION OF ANTIMICROBIAL EFFECTIVENESS ALGINATE
BASED METRONIDAZOLE GEL ON SOME PATHOGENIC PERIODONTAL
BACTERIA
Background: Periodontal pathogens are complex and heterogeneous, at least 500 species
of bacterial culture are obtained from the periodontal pocket. Generally, most of the
identified bacteria are anaerobic negative-gram as Porphyromonas gingivalis, Provotela
intermedia, Fusobacterium nucleatum. Metronidazole has been successfully used as an
antimicrobial supporting the treatment of periodontal disease.
Objective: The objective of this study was to analyze the effect of alginate based
metronidazole gel in inhibiting periodontal pathogenic bacteria growth with in vitro
evaluation.
Methods: alginate-based gel used in this study contain metronidazole 15% and 25%, and
25% metronidazole non alginate-based gel as comparison. The bacteria used were pure
culture of Aggregatibacter actinomycetemcomitans (ATCC 29 522), Porphyromonas
gingivalis (ATCC 33 277) and Fusobacterium nucleatum (ATCC 25 586) and cultured in
Tryptic (Trypticase) Soy Agar (TSA) media.
Results: The average diameter of inhibition zone of 15% metronidazole alginate based gel
towards A.actinomycetemcomitans, P.gingivalis and F.nucleatum bacteria were 15,33 mm,
35,67 mm and 19,33 mm, respectively. The average diameter of inhibition zone of common
25% metronidazole alginate based gel towards A.actinomycetemcomitans, P.gingivalis and
F.nucleatum bacteria were 16,67 mm, 51,67 mm and 18,00 mm, respectively. The average
diameter of inhibition zone of 25% metronidazole non alginate based gel against
A.actinomycetemcomitans, P.gingivalis and F.nucleatum bacteria were 15,33 mm, 0 mm
and 24,67 mm, respectively.
Conclusion: The result suggested that 15% and 25% alginate based metronidazole gel has
strong influence on A.actinomycetemcomitans, P.gingivalis and F.nucleatum bacteria.
Keywords: metronidazole gel, alginate, periodontal pathogen
Universitas Sumatera Utara
KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis panjatkan ke hadirat Allah SWT yang telah melimpahkan
rahmat dan ridhoNya sehingga penulis dapat menyelesaikan penulisan tesis di Program
Pendidikan Dokter Gigi Spesialis Periodonsia sebagai salah satu syarat untuk memperoleh
gelar Spesialis Periodonsia di Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Sumatera Utara.
Rasa terima kasih yang tak terhingga penulis sampaikan kepada orang-orang
tercinta, Suami penulis Husnul Isa Harahap, S.Sos., M.Si, Anak penulis Barack Hunafa
Harahap serta kedua orang tua tercinta Ayahanda Marsimun S.Pd dan Ibunda Amnizar
S.Pd yang senantiasa menyayangi, mendoakan dan mendukung penulis sehingga penulis
dapat mengecap masa pendidikan hingga selesai.
Dalam penulisan tesis ini, penulis juga telah banyak mendapat bimbingan, bantuan,
motivasi, saran-saran serta doa dari berbagai pihak. Oleh karena itu, dengan
kerendahan hati serta penghargaan yang tulus penulis mengucapkan terima kasih kepada :
1. Prof. Nazaruddin, drg., C.Ort., PhD., Sp.Ort selaku Dekan Fakultas Kedokteran
Gigi Universitas Sumatera Utara.
2. Irmansyah R, drg., PhD selaku Ketua Departemen Periodonsia Fakultas
Kedokteran Gigi Universitas Sumatera Utara dan dosen penguji yang turut
menyempurnakan tesis ini.
3. Irma Ervina, drg., Sp.Perio(K) selaku dosen Ketua Program Pendidikan Dokter
Gigi Spesialis Periodonsia Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Sumatera Utara dan
dosen pembimbing sekaligus tim penguji yang telah menyediakan waktu, pikiran dan
tenaga untuk membimbing dan mengarahkan penulis dalam menyelesaikan tesis ini.
4. Prof. Hakim Bangun, Ph.D., Apt. selaku Kepala Departemen Teknologi
Farmasi, Fakultas Farmasi USU dan dosen pembimbing sekaligus tim penguji yang telah
menyediakan waktu, pikiran dan tenaga untuk membimbing dan mengarahkan penulis
dalam menyelesaikan tesis ini.
5. Aini Hariyani Nasution, drg.,Sp.Perio selaku dosen penguji yang turut
menyempurnakan tesis ini.
Universitas Sumatera Utara
6. Wahyu Hidayahtiningsih, S.Si., M.Kes selaku kepala Laboratorium Rumah
Sakit Penyakit Tropik Infeksi UNAIR Surabaya yang membantu dalam kegiatan di
laboratorium.
7. Dr.Drs.Surya Utama,MS selaku Dekan Fakultas Kesehatan Masyarakat USU
yang membantu dalam menganalisis statitistik hasil penelitian saya.
8. Dra. Anayanti Arianto, M.Si.,Apt selaku kepala Laboratorium Teknologi
Sediaan Farmasi III, Fakultas Farmasi USU yang telah memberikan ijin dan membantu
penulis dalam melaksanakan penelitian hingga selesai.
9. Seluruh staf pengajar di Departemen Periodonsia FKG USU yang telah banyak
memberikan saran dalam penyelesaian tesis ini, Krisna Murthy Pasaribu, drg.,Sp.Perio,
Zulkarnain, drg.,M.Kes., Rini Octavia Nasution, drg.,SH.,Sp.Perio., M.Kes, Pitu
Wulandari, drg.,S.Psi.,Sp.Perio dan Armia Syahputra, drg.
10. Terima kasih penulis sampaikan kepada teman-teman satu angkatan Ma Jupeter,
Jelita Rindly Fachrina dan Ira Asnita Sembiring serta seluruh teman-teman PPDGS
Periodonsia FKG USU.
Akhirnya terima kasih kepada semua pihak yang telah membantu dan mohon maaf
apabila ada kesalahan selama melakukan penelitian dan penyusunan tesis ini, namun
penulis mengharapkan kiranya hasil karya sederhana ini dapat memberikan sumbangan
pikiran yang berguna bagi fakultas, pengembangan ilmu dan masyarakat.
Medan,
Penulis
Martina Amalia
1106710018
Universitas Sumatera Utara
RIWAYAT HIDUP
Keterangan Pribadi
Nama : Martina Amalia
Alamat Tempat Tinggal : Jln.Pasar 1 Gg.Dame
Komp. Villa Anyelir 8 No. F Medan
Jenis Kelamin : Perempuan
Agama : Islam
No. Kontak : +6281361695385
Nama Ayah : Marsimun, S.Pd
Nama Ibu : Amnizar, S.Pd
Suami : Husnul Isa Harahap, S.Sos.,M.Si
Anak : Barack Hunafa Harahap
Pekerjaan : Dosen FKG USU
Pendidikan Formal
Sekolah Dasar : SDN 013861 Kisaran
Sekolah Menengah : SMP Negeri 3 Kisaran
Sekolah Menengah Atas : SMA Negeri 1 Kisaran
Fakultas Kedokteran Gigi : Universitas Sumatera Utara
Pendidikan Spesialis : Spesialis Periodonsia
Universitas Sumatera Utara
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR ISI
Hal
HALAMAN JUDUL ........................................................................................
ABSTRAK …………………………………………………………………… i
ABSTRACT …………………………………………………………………. ii
KATA PENGANTAR………………………………………………………..
iii
DAFTAR RIWAYAT HIDUP ………………………………………………
v
DAFTAR ISI.....................................................................................................
viii
DAFTAR TABEL.............................................................................................
ix
DAFTAR GAMBAR........................................................................................
x
DAFTAR LAMPIRAN.....................................................................................
xi
BAB 1 PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang............................................................................... 1
1.2 Perumusan Masalah....................................................................... 3
1.3 Tujuan Penelitian........................................................................... 3
1.4 Hipotesis………............................................................................ 4
1.5 Manfaat Penelitian......................................................................... 4
BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Aggregatibacter actinomycetemcomitans .................................... 6
2.2 Porphyromonas gingivalis ........................................................... 8
2.3 Fusobacterium nucleatum ........................................................... 9
2.4 Antibiotik sebagai Perawatan Penunjang Penyakit Periodontal... 10
2.5 Metronidazol ................................................................................ 11
2.6 Alginat……….............................................................................. 13
2.7 Gel Metronidazol berbasis Alginat .............................................. 14
2.8 Uji Sensitivitas Bakteri…............................................................. 15
Universitas Sumatera Utara
2.9 Kerangka Teori ............................................................................ 18
2.10 Kerangka Konsep ........................................................................ 19
BAB 3 METODOLOGI PENELITIAN
3.1 Rancangan Penelitian .................................................................. 20
3.2 Tempat dan Waktu Penelitian ...................................................... 20
3.3 Sampel dan Besar Sampel ........................................................... 20
3.3.1 Sampel Penelitian .............................................................. 20
3.3.2 Besar Sampel Penelitian .................................................... 21
3.4 Variabel Penelitian ....................................................................... 21
3.5 Definisi Oprasional ....................................................................... 21
3.6 Alat dan Bahan Penelitian ............................................................ 22
3.6.1 Alat Penelitian .................................................................... 22
3.6.2 Bahan Penelitian ................................................................. 23
3.7 Prosedur Penelitian
3.7.1 Pembuatan gel Metronidazol 15% dan25% berbasis alginat 23
3.7.2 Uji sensitivitas bakteri……... ............................................... 25
3.8 Alur Penelitian ............................................................................ 28
3.9 Analisis Statistik ......................................................................... 29
BAB 4 HASIL
4.1 Zona hambat gel metronidazol terhadap Aggregatibacter
actinomycetemcomitans, Porphyromonas gingivalis, dan fusobacterium
nucleatum ……………………………………………………………….
30
4.2 Perbedaan zona hambat masing-masing gel metronidazol terhadap
Aggregatibacter actinomycetemcomitans, Porphyromonas gingivalis,
dan fusobacterium nucleatum…………………………………………………
35
BAB 5 PEMBAHASAN……………………………………………………... 38
BAB 6 KESIMPULAN DAN SARAN …………………………………….. 42
DAFTAR PUSTAKA 43
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR TABEL
Hal
Tabel 1 Spesies Bakteri yang Paling Banyak Ditemukan pada Penyakit
Periodontal………………………………………………………
6
Tabel 2 Definisi Operasional Variabel Penelitian………………………….. 22
Tabel 3 Diameter zona hambat uji aktivitas masing-masing gel
metronidazol terhadap bakteri A.actinomycetemcomitans…………
32
Tabel 4 Diameter zona hambat uji aktivitas masing-masing gel
metronidazol terhadap bakteri P.gingivalis……………….………..
33
Tabel 5 Diameter zona hambat uji aktivitas masing-masing gel
metronidazol terhadap bakteri F. nucleatum……………...………
34
Tabel 6 Perbedaan zona hambat masing-masing gel metronidazol terhadap
bakteri A. actinomycetemcomitans, P.gingivalis dan F. nucleatum.
36
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR GAMBAR
Hal
Gambar 1 Aggregatibacter actinomycetemcomitans (Aa)……………........... 8
Gambar 2 Porphyromonas gingivalis ……………......................................... 9
Gambar 3 Fusobacteria nucleatum ……………............................................ 10
Gambar 4 Rumus bangun metronidazol ……………..................................... 12
Gambar 5 Struktur M: - D asam mannuronat dan G: - L asam guluronat.. 13
Gambar 6 Struktur alginat …………….......................................................... 14
Gambar 7 Uji antibakteri formulasi gel metronidazol berbasis alginat
terhadap bakteri Staphylococcus aureus ……………....................
15
Gambar 8 Cara mengukur zona hambat pada agar.......................................... 17
Gambar 9 Pengembangan gel alginat dalam mortar di dalam lemri laminar
air flow…………………………………………………………..
24
Gambar 10 Gel alginat yang telah dikembangkan dalam mortar di dalam
lemari laminar air flow…………………………………………..
24
Gambar 11 Gel metronidazol berbasis alginat di dalam spuit steril…………. 24
Gambar 12 a. Bahan baku untuk membuat Trptic (Trypticase) Soy Agar ….. 25
b. Trptic (Trypticase) Soy Agar Plate ……………………………… 25
Gambar 13 Standar kekeruhan Mc Farland …………………………………. 26
Gambar 14 Pengambilan bakteri dari TSB ………………………………….. 26
Gambar 15 Cakram kertas yang digunakan…………………………………. 27
Gambar 16 Penempatan cakram kertas pada media ………………………… 27
Gambar 17 Media yang telah diberi caram kertas dimasukkan kedalam
inkubator anaerob……………………………………………......
27
Gambar 18 Diameter zona hambat gel metronidazol terhadap bakteri
A.actinomycetemcomitans ………………………………………
a) Gel metronidazol 15% berbasis alginat,
b) Gel metronidazol 25% berbasis alginat,
c) Gel metronidazol 25% yang ada dipasaran
31
Universitas Sumatera Utara
Gambar 19 Diameter zona hambat gel metronidazol terhadap bakteri
P. gingivalis ……………………………………………………
a) Gel metronidazol 15% berbasis alginat,
b) Gel metronidazol 25% berbasis alginat,
c) Gel metronidazol 25% yang ada dipasaran
31
Gambar 20 Diameter zona hambat gel metronidazol terhadap bakteri
F.nucleatum……………………………………………………
a) Gel metronidazol 15% berbasis alginat,
b) Gel metronidazol 25% berbasis alginat,
c) Gel metronidazol 25% yang ada dipasaran
31
Gambar 21 Diameter zona hambat uji aktivitas masing-masing gel
metronidazol terhadap bakteri A.actinomycetemcomitans selama
3 hari……………………………………………………………
33
Gambar 22 Diameter zona hambat uji aktivitas masing-masing gel
metronidazol terhadap bakteri P.gingivalis selama 3 hari………..
34
Gambar 23 Diameter zona hambat uji aktivitas masing-masing gel
metronidazol terhadap bakteri F.nucleatum selama 3 hari………
35
Gambar 24 Zona hambat uji aktivitas masing-masing gel metronidazol
terhadap bakteri A.actinomycetemcomitans, P.gingivalis dan
F.nucleatum ……………………..……………………………….
37
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1 Surat Izin Penelitian di Laboratorium Formulasi Fakultas
Farmasi USU
Lampiran 2 Surat Izin Penelitian di Laboratorium Teknologi Sediaan
Farmasi III Fakultas Farmasi USU
Lampiran 3 Surat Izin Penelitian dari Rumah Sakit Penyakit Tropis
UNAIR Surabaya
Lampiran 4 Sertifikat Hasil Uji dari Rumah Sakit Penyakit Tropis UNAIR
Surabaya
Lampiran 5 Hasil Analisis Statistik
Universitas Sumatera Utara