uji efektifitas ekstrak buah makasar baru - copy

8/19/2019 Uji Efektifitas Ekstrak Buah Makasar Baru - Copy

1/35

1

I. PENDAHULUANI.1.Latar Belakang

Penggunaan ramuan tumbuh-tumbuhan sebagai pengobatan tradisional saat

ini mulai banyak peminatnya. Hal ini dikarenakan pengobatan dengan ramuan

tradisonal lebih murah dan mudah didapatkan. Ramuan tumbuh-tumbuhan

dapat digunakan sebagai sumber bahan kimia alami yang potensial untuk

dikembangkan menjadi zat warna, kosmetik, bahan baku industri dan bahan

aktif pestisida. Kandungan senyawa kimia dari tumbuhan yang memiliki

bioaktivitas umumnya terdapat sebagai metabolit sekunder seperti alkaloid,

riterpen dan !teroid, saponin, tanin dan lain-lain."Rustaman # et al, $%&%'

(alam hal ini salah satu tumbuhan yang dapat digunakan sebagai bahan obat

tradisional adalah buah makassar. )uah makassar yang dikenal dengan nama

latin Brucea javanica (L) Merr , termasuk jenis tumbuhan semak. Kandungan

senyawa kimia dari buah ini adalah alkaloid bru*amarine, yatanine, glikosida,

bru*ealin, yatanoside + dan ), kosamine, fenol bru*enol, bru*eoli* a*id.

(aging buahnya mengandung minyak lemak, asam oleat, asam linoleat, asam

stearat dan palmitoleat. )uah dan daunnya mengandung saponin dan tannin

"+gromedia, $%%'. !enyawa saponin dan tannin mempunyai potensi sebagai

antibakteri. "Rustaman et al, $%&%'


2/35

2

Pemberian ekstrak etanol Brucea Javanica pada men*it dapat meredakan

inflamasi akibat minyak puring dan granuloma yang dapat menginduksi

inflamasi pada model telinga tikus. Brucea javanica juga digunakan untuk

men*egah peradangan rektum akut dan peradangan mukosa orofaringeal yang

disebabkan oleh radiasi. Hal ini menunjukkan bahwa ekstrak etanol Brucea

javanica bersifat anti-inflamasi. "hen et al., $%&$'

)erdasarkan dari sifat anti bakteri dan anti-inflamasi pada Brucea javanica

peneliti menduga bahwa ekstrak etanol Brucea javanica memiliki efektifitas

pada akne vulgaris. +kne vulgaris merupakan penyakit kulit yang terjadi

akibat peradangan menahun folikel pilosebasea pada tempat predileksinya

seperti wajah, leher,dada dan punggung. Hampir setiap orang pernah

menderita penyakit ini. mumnya insidens terjadi pada sekitar umur &/-&0

tahun pada wanita, &1-&2 tahun pada pria dan pada masa itu lesi yang

predominan adalah komedo "(juanda, $%&&'. !ylvia 3usita "$%&%'

menyatakan dalam penelitiannya bahwa bakteri terbanyak yang ditemukan

pada lesi akne adalah Propionibacterium acnes sebesar 0,4, dan

!taphylo*o**us epidermidis 15,54.

Propionibacterium acnes merupakan bakteri 6ram posistif yang termasuk

bagian dari flora normal kulit. Pada perwarnaan 6ram, spesies ini sangat

pleimorfik yang memiliki sifat aerotoleran dan aerob. )akteri ini berperan

dalam pembentukan akne, dengan menghasilkan lipase yang meme*ahkan


3/35

3

asam lemak bebas dari lipid kulit sehingga menimbulkan peradangan jaringan

dan berperan dalam timbulnya akne. (engan pengaruhnya yang besar

terhadap akne, maka peneliti tertarik menggunakan Propionibacterium acnes

dalam penelitian ini. "7awets et al, $%%'

)erdasarkan hal diatas peneliti tertarik melakukan penelitian untuk

mengetahui efektivitas ekstrak etanol buah makasar " Brucea Javanica "3.'

8err.' terhadap pertumbuhan bakteri Propionibacterium acnes yang

merupakan flora normal di kulit manusia dan dapat berpotensi sebagai

patogen. Penelitian ini meliputi uji efektifitas ekstrak etanol buah makasar

" Brucea Javanica "3.' 8err.' dalam berbagai konsentrasi terhadap

pertumbuhan bakteri Propionibacterium acnes dengan metode disc diffusion.

1.2 . Rumusan Masalah

)erdasarkan kajian latar belakang diatas, maka peneliti dapat merumuskan

masalah sebagai berikut9 :)agaimana efektivitas ekstrak etanol buah makasar

" Brucea Javanica "3.' 8err.' terhadap pertumbuhan bakteri

Propionibacterium acnes se*ara in-vitro;


4/35

4

I.2.Tujuan Penelitian

1..1. Tujuan Umum

ntuk mengetahui efektivitas ekstrak etanol buah makasar

" Brucea Javanica "3.' 8err.' terhadap pertumbuhan bakteri

Propionibacterium acnes se*ara in-vitro

1..2. Tujuan !husus

ntuk mengetahui konsentrasi daya hambat ekstrak etanol buah

makasar " Brucea Javanica "3.' 8err.' terhadap Propionibacterium

acnes

1.". Man#aat $enelitian

1.".1. Man#aat te%ritis

Penelitian ini diharapkan dapat berkontribusi bagi ilmu kesehatan

khususnya mengenai efektifitas ekstrak buah makasar ")ru*ea

javani*a "3.' 8err.' terhadap bakteri Propionibacterium acnes

1.".2. Man#aat $raktis

Hasil penelitian ini diharapkan dapat digunakan masyarakat dalam

pengobatan tradisional khususnya mengenai ekstrak buah makasar

")ru*ea javani*a "3'. 8err' terhadap bakteri Propionibacterium

acnes


5/35

5

II. TIN&AUAN PU'TA!A

2.1. Buah Makasar ( Brucea javanica (L) Merr.)

2.1.1. Deskri$si Buah Makasar ( Brucea javanica (L) Merr.)

)uah makasar memiliki habitat tumbuh liar di hutan, terkadang

ditanam sebagai tanaman pagar.anaman ini tumbuh dari

permukaan laut hingga =%% meter di atas permukaan laut.

"(alimartha, $%%%'

*am+ar 1. anaman )uah 8akasar " Brucea Javanica >3.? 8err'.

)uah makasar memiliki batang berkayu berbentuk bulat, terdapat

bintik-bintik, dengan warna putih kotor. (aun buah makasar berupa

daun majemuk lonjong, agak lanset, tepi bergerigi, ujung run*ing

dengan ukuran panjang 5,=-&& *m, lebar &,=-= *m dan berwarna

hijau. )unga buah makasar majemuk, berbentuk malai, tangkai

berbentuk silindris, dengan ukuran panjang l%-1% *m, berwarna


6/35

6

kehijauan. (aun kelopak bunga buah makasar berbentuk lonjong

dengan panjang kurang lebih & *m berwarna hijau kekuningan,

benang sari banyak, mahkota merah. buah batu, bulat, hitam. )iji

buah makasar berbentuk bulat dan berwarna putih. Pada akar

berjenis akar tunggang dengan warna putih kotor. )uah makasar

dapat diperbanyak dengan biji ")P@8,$%%'

2.1.2. Taks%n%mi Buah Makasar ( Brucea javanica (L) Merr.)

)erdasarkan data taksonomi ")P@8, $%%' didapatkan data

mengenai buah makasar " Brucea javanica "3' 8err.' yaitu sebagai

berikut 9'in%nim , Brucea sumatrana RoAb.;

Brucea amarissima 3our .

!lasi#ikasi

Kingdom 9 Plantae "umbuhan'

!ubkingdom 9 Tracheobionta "umbuhan )erpembuluh'

!uper (ivisi 9 Spermasthopta "8enghasilkan )iji'

(ivisi 9 Spermatophta!ub divisi 9 !n"iospermae

Kelas 9 #icotledoneae)angsa 9 Sapindales!uku 9 Simarubaceae8arga 9 Brucea7enis 9 Brucea javanica "3.' 8err.

Nama umum , )iji makasar, Kwalot


7/35

7

Nama -aerah , 8alur ")atak'B )erul "3ampung'B Calot

"!unda'B Kwalot "7awa'B ambara mari*a

"8akasar'B Dagas "+mbon'.

2.1.. !%m$%sisi !imia Buah Makasar ( Brucea javanica (L) Merr.)

8enurut "+gromedia, $%%' )uah makasar mengandung alkaloid

"bru*amarine, yatanine' glikosida "bru*ealin, yatanoside + dan ),

kosamine', fenol "bru*enol, bru*eoli* a*id'. )ijinya mengandung

brusatol dan bru*eine +,),,E,F,6,H. (aging buahnya

mengandung minyak lemak, asam oleat, asam linoleat, asam stearat

dan palmitoleat. )uah dan daunnya mengandung saponin dan

tannin

)erikut merupakan penjelasan mengenai senyawa fitokimia yang

terdapat pada buah 8akasar 9

Alkal%i-

+lkaloid adalah senyawa organik siklik yang mengadung nitrogen

dengan bilangan oksidasi negatif, yang penyebarannya terbatas

pada makhluk hidup. +lkaloid juga merupakan golongan zat

metabolit sekunder yang terbesar, yang pada saat ini telah diketahui

sekitar ==%% buah. +lkaloid pada umumnya mempunyai keaktifan

fisiolog yang menonjol, sehingga oleh manusia alkaloid sering

dimanfaatkan untuk pengobatan.


8/35

8

!truktur dari alkaloid beranekaragam, dari mulai alkaloid

berstruktur sederhana sampai yang rumit. !alah satu alkaloid yang

mempunyai struktur tersederhana adalah nikotina, tetapi nikotina

ini dampak fisiologinya *ukup besar. (alam dosis tinggi, nikotina

bersifat ra*un "toksik' dan pernah juga digunakan sebagai

insektisida, sedangkan dalam dosis rendah nikotina berfungsi

sebagai stimulan terhadap sistem syaraf otonom. 7ika dosis ini

dilanjutkan maka nikotina dapat menekan sistem syaraf sehingga

aktifitasnya dibawah normal.

Gsolasi pertama suatu alkaloid adalah morfina yaitu pada tahun

&%= yang berasal dari getah dan biji *andu, Papaver somniferum.

)anyak alkaloid bersifat terpenoid dan beberapa sebaiknya ditinjau

dari segi biosintesis sebagai terpenoid termidifikasi, misalnya

solanin, alkaloid-alkaloid kentang, Solanum tuberosum. )anyak

sekali alkaloid yang khas pada suatutumbuhan atau beberapa

tumbuhan sekerabat, sehingga nama alkaloid sering diturunkan dari

sumber tumbuhan penghasilnya. 8isalnya alkaloid +tropa atau

alkaloid tropana, dan sebagainya."Rustaman, $%%1'

'a$%nin

!aponin adalah glikosida triterpen dan sterol yang telah terdeteksi

dalam lebih dari 2% suku tumbuhan. !aponin merupakan senyawa


9/35

9

aktif permukaan dan bersifat seperti sabun, serta dapat dideteksi

berdasarkan kemampuannya membentuk busa dan menghemolisis

sel darah. Pen*arian saponin dalam tumbuhan telah dirangsang oleh

kebutuhan akan sumber sapogenin yang mudah diperoleh dan dapat

diubah di laboratorium menjadi sterol hewan yang kerkhasiat

penting "misalnya kortison, estrogen, kontraseptik dan lain-lain'

"Rustaman, $%%1'

Tanin

anin tersebar luas dalam tumbuhan berpembuluh, dalam

angiospermae terdapat khusus dalam jaringan kayu. (alam

industri, tanin adalah senyawa yang berasal dari tumbuhan, yang

mampu mengubah kulit hewan yang mentah menjadi kulit siap

pakai karena kemampuannya menyambung silang protein. (i

dalam tumbuhan, letak tanin terpisah dari protein dan enzim

sitoplasma, tetapi bila jaringan rusak, misalnya bila hewan

memakannya, maka reaksi penyamakan dapat terjadi. Reaksi ini

menyebabkan protein lebih sukar di*apai oleh *airan pe*ernaan

hewan. !ebagian besar tumbuhan yang banyak bertanin dihindari

oleh hewan pemakan tumbuhan karena rasanya yang sepat.

"Rustaman, $%%1'

en%l


10/35

10

Fenol adalah senyawa yang berasal dari tumbuhan yang

mengandung *in*in aromatik dengan satu atau $ gugus hidroksil.

Fenol *enderung mudah larut dalam air karena berikatan dengan

gula sebagai glikosida atau terdapat dalam vakuola sel . !enyawa

fenol biasanya terdapat dalam berbagai jenis sayuran, buah-buahan

dan tanaman. !enyawa fenol diproduksi oleh tanaman melalui jalur

sikimat dan metabolisme fenil propanoid "+pak et al.$ $%%0'.

)eberapa senyawa fenol telah diketahui fungsinya. 8isalnya lignin

sebagai pembentuk dinding sel dan antosianin sebagai pigmen.

Damun beberapa lainnya hanya sebatas dugaan sementara.

!enyawa fenol diduga mempunyai aktivitas antioksidan, antitumor,

antiviral, dan antibiotik. !emua senyawa fenol merupakan senyawa

aromatik sehingga semua menunjukkan serapan kuat terhadap

spektrum . Fenol dapat dibagi menjadi $ kelompok, yaitu fenol

sederhana dan polifenol. ontoh fenol sederhana 9 orsinol, /-

metilresolsinol, $- metilresolsinol, resolsinol, katekol, hidrokuinon,

pirogalol dan floroglusinol. ontoh polifenol adalah lignin,

melanin dan tanin "+pak et al.$ $%%0'.

la/%n%i-

Flavonoid merupakan golongan fenol terbesar yang senyawa yang

terdiri dari 1-5-1 dan sering ditemukan diberbagai ma*am

tumbuhan dalam bentuk glikosida atau gugusan gula bersenyawa

pada satu atau lebih grup hidroksil fenolik "!irait, $%%0B )hat et al.,


11/35

11

$%%2'. Flavonoid merupakan golongan metabolit sekunder yang

disintesis dari asam piruvat melalui metabolisme asam amino ")hat

et al., $%%2'. Flavonoid adalah senyawa fenol, sehingga warnanya

berubah bila ditambah basa atau amoniak. erdapat sekitar &% jenis

flavonoid yaitu antosianin, proantosianidin, flavonol, flavon,

glikoflavon, biflavonil, khalkon, auron, flavanon, dan isoflavon

Penamaan flavonoid berasal dari bahasa latin yang menga*u pada

warna kuning dan sebagian besar flavonoid adalah berwarna

kuning. Flavonoid sering ditemukan dalam bentuk pigmen dan *o-

pigmen. Flavonoid adalah golongan pigmen organik yang tidak

mengandung molekul nitrogen. Kombinasi dari berbagai ma*am

pigmen ini membentuk pigmentasi pada daun, bunga, buah dan biji

tanaman. Pigmen ini merupakan antraktan bagi serangga dan

merupakan agen polinasi. Pigmen juga bermanfaat bagi manusia

dan salah satu manfaat yang penting adalah sebagai antioksidan

")hat et al., $%%2'. )agi manusia, flavon dalam dosis ke*il bekerja

sebagai stimulan pada jantung dan pembuluh darah kapiler, sebagai

diureti* dan antioksidan pada lemak "!irait, $%%0'.

2.1.". Man#aat -an 0ara Pemakaian Buah Makasar ( Bruea

ja/ania (L.) Merr.)

8enurut "(alimartha,$%%%' bagian buah makasar yang digunakan

adalah buah. !etelah buah dikumpulkan bagian yang keras dibuang


12/35

12

untuk diambil isinya. !elain buah, daun dan akar juga berkhasiat

sebagai obat. (alam pemanfaatnya sebagai pengobatan, buah

makasar digunakan pada pengobatan malaria, disentri amuba, diare

kronis akibat terinfeksi Trichomonas sp., keputihan, wasir

"hemoroid', *a*ingan "nematode, taenia'. Papilloma di pangkal

tenggorokan, pita suara, liang telinga luar, dan gusi, dan kanker

pada tenggorokan, lambung, rektum, paru-paru, leher rahim

"serviks', dan kulit. +kar buah makasar digunakan pada pengobatan

malaria, demam dan kera*unan makanan. Pada daunnya digunakan

untuk mengatasi sakit pinggang.

)erikut *ara pengolahan buah makasar yang telah diteliti oleh para

peneliti yaitu sebagai berikut9

&. (isentri amuba6iling &%-&= buah makasar sampai halus, lalu masukkan ke

dalam kapsul. 8inum ramuan ini sekaligus setelah makan.

3akukan sehari 5 kali, selama 0-&% hari$. (isentri, air kemih dan tinja berdarah karena panas

6iling $= buah makasar "maksimal =% buah' sampai halus,

lalu masukkan ke dalam kapsul. 8inum ramuan ini

sekaligus dengan larutan air gula batu5. 8alaria

+mbil isi buah makasar, kira-kira &% buah, lalu giling

sampai halus. 8asukkan ke dalam kapsul, lalu minum

sekaligus. 3akukan 5 kali sehari selama 5 hari. !elanjutnya

dosis dikurangi setengahnya "= buah' dan minum selama =

hari


13/35

13

u*i &=-$% g akar buah makasar, lalu potong-potong

seperlunya. Rebus dalam tiga gelas air bersih sampai tersisa

satu gelas. !etelah dingin, saring dan air saringannya siap

untuk diminum. 3akukan sehari dua kali, masing masing I

gelas./. Casir

6iling 0 buah makasar sampai halus. 8asukkan ke dalam

kapsul lalu minum sekaligus=. Keputihan karena Trichomonas va"inalis

ambahkan $% buah makasar ke dalam periuk tanah atau

pani* email. ambahkan /%% ** air bersih, lalu rebus sampai

tersisa &%% **. !etelah dingin, ramuan ini dapat digunakan

untuk men*u*i liang sanggama "vagina'. aranya,

semprokan air rebusan tadi menggunakan alat penyemprot

"sprayer'. Ramuan yang dipakai untuk setiap kali

pemakaian sebanyak $%-/% **. 7ika keputihannya ringan,

penyemprotan *ukup dilakukan sekali saja. Damun, jika

keputihannya berat, perlu diulang selama $-5 hari berturut-

turut.

2.2. Bakteri Propionibakterium acnes

Klasifikasi bakteri Propionibacterium acnes yaitu9

@rder 9 !ctinomcetales

Family 9 Propionibacteriaceae

6enus 9 Propionibacterium


14/35

14

!pesies 9 Propionibacterium acnes

*am+ar 2. Propionibacterium acnes

Propionibacterium acnes merupakan salah satu bakteri 6ram positif

berbentuk basil dan bersifat anaerob obligat. P. acnes adalah mikrobiota kulit

yang biasanya sering ditemukan pada kulit yang kaya akan kelenjar sebasea

seperti di kulit kepala dan muka. 7umlah P. acnes pada kulit terkait dengan

aktivitas kelenjar sebasea meningkat setelah adanya pematangan fungsi

kelenjar sebasea yaitu seiring masa pubertas

P. acnes ialah agen utama etiologi inflamasi jerawat. Ga merangsang

pelepasan interleukin-& "G3-&', G3-, dan tumor necrosis factor%a "DF-a'

dan mengaktifkan sistem komplemen. 8ikroorganisme ini juga menghasilkanasam lemak bebas melalui hidrolisis trigliserida kelenjar sebasea oleh

lipasenya. +sam lemak ini dapat mengakibatkan inflamasi jaringan ketika

berhubungan dengan sistem imun dan mendukung terjadinya jerawat.

)erbagai kelas antibioti* efektif melawan jerawat karena P. acnes$ seperti

klindamisin, eritromisin, kuinolon, dan tetrasiklin. +kan tetap dalam dekade


15/35

15

terakhir ini, resistensi antibiotik terhadap P. acnes semakin meningkat.

"!yaikhul,$%&%'

2.. Uji Akti/itas Anti+akteri

Penentuan aktivitas antimikroba dapat dilakukan dengan dua metode, yaitu

metode difusi dan metodi dilusi. Pada metode difusi termasuk didalamnya

metode dis& diffusion "tes Kirby # )aur', E-test , ditch%plate techni'ue.

!edangkan pada metode dilusi termasuk didalamnya metode dilusi *air dan

dilusi padat "Pratiwi, $%%'.

a. 8etode difusi1) 8etode dis& diffusion "tes Kirby # )aur' meggunakan piringan yang

berisi agen antimikroba, kemudian diletakan pada media agar yang

sebelumnya telah ditanami mikrorganisme sehingga agen antimikroba

dapat berdifusi pada media agar tersebut. +rea jernih mengindikasikan

adanya hambatan pertumbuhan mikroorganisme oleh agen

antimikroba pada permukaan media agar 2) 8etode E-test digunakan untuk mengestimasi Kadar Hambat

8inimum "KH8', yaitu konsentrasi minimal suatu agen antimikroba

untuk dapat menghambat pertumbuhan mikrooraganisme. Pada

metode ini digunakan strip plastik yang mengandung agen

antimikroba dari kadar terendah sampai tertinggi dan diletakkan pada

permukaan media agar yang telah ditanami mikroorganisme

sebelumnya


16/35

16

) #itch%plate techni'ue. Pada metode ini sampel uji berupa agen

antimikroba yang diletakkan pada parit yang dibuat dengan *ara

memotong media agar dalam *awan petri pada bagian tengan se*ara

membujur dan mikroba uji "maksimum 1 ma*am' digoreskan kearah

parit yang berisi agen antimikroba tersebut") up% plate te*hniJue. 8etode ini serupa dengan dis& diffusion dimana

dibuat sumur pada media agar yang telah ditanami dengan

mikrooraganisme dan pada sumur tersebut diberi agen antimikroba

yang akan diuji

+. 8etode dilusi&' 8etode dilusi *air. 8etode ini digunakan untuk mengukur

Konsentrasi Hambat 8inimum "KH8' dan Kadar )unuh 8inimum

"K)8'. ara yang dilakukan adalah dengan membuat seri

pengen*eran agen antimikroba pada medium *air yang ditambahkan

dengan mikroba uji. 3arutan uji agen antimikroba pada kadar terke*il

yang terlihat jernih tanpa adanya pertumbuhan mikroba uji ditetapkan

sebagai KH8. 3arutan yang ditetapkan sebagai KH8 tersebut

selanjutnya dikultur ulang pada media *air tanpa penambahan

mikroba uji ataupun agen antimikroba, dan diinkubasi selama &-$/

jam. 8edia *air yang tetap terlihat jernih setelah diinkubasi ditetapkan

sebagai K)8$' 8etode dilusi padat. 8etode ini serupa dengan metode dilusi *air

namun menggunakan media padat. Keuntungan metode ini adalah satu

konsentrasi agen antimikroba yang diuji dapat digunakan untuk

menguji beberapa mikroba uji.


17/35

17

Penentuan aktivitas daya hamba antimikroba menga*u pada tabel kategori

kekuatan aktivitas antibakteri "abel &' "Cidyaningtias, ustiantara, #

Paramita, $%&&' menunjukkan bahwa konsentrasi tertinggi yang diujikan "$%

mgLm3' menunjukkan aktivitas antibakteri yang kuat.

abel &. Kategori Kekuatan +ktivitas +ntibakteri "sum+er,

Cidyaningtias, ustiantara, # Paramita, $%&&'

Kode (iameter Mona Hambat "mm'

"-'"N'

"NN'"NNN'

O&%&&-&=&1-$%$%

Keterangan9 "-' tidak beraktivitas, "N' aktivitas lemah, "NN' aktivitassedang, "NNN' aktivitas kuat.

2.". 'im$lisia

2.".1. De#inisi 'im$lisia "(epkes RG, $%%%'

!implisia adalah bahan alami yang digunakan untuk obat dan belum

mengalami perubahan proses apapun, dan ke*uali dinyatakan lain

umumnya berupa bahan yang telah dikeringkan. !implisia tumbuhan

obat merupakan bahan baku proses pembuatan ekstrak, baik sebagai

bahan obat atau produk.

2.".2. Peng%lahan 'im$lisia "(epkes RG, $%%%'


18/35

18

Proses awal pembuatan ekstrak adalah tahapan pembuatan serbuk

simplisia kering. (ari simplisia dibuat serbuk simplisia dengan

perakatan tertentu sampai deraja kehalusan tertentu. Proses ini dapat

mempengaruhi mutu ekstrak dengan dasar beberapa hal yaitu makin

halus serbuk simplisia proses ekstraksi makin efektif, efisien namun

makin halus serbuk maka makin rumit se*ara teknologi peralatan

untuk tahap filtrasi.

ntuk menghasilkan simplisia yang bermutu dan terhindar dari

*emaran industri obat tradisional dalam mengelola simplisia sebagai

bahan baku pada umumnya melakukan tahapan kegiatan berikut

yaitu 9

a. !ortasi )asah(ilakukan untuk memisahkan kotoran-kotoran atau bahan

asing lainnya dari bahan simplisia b. Pen*u*ian

Pen*u*ian dilakukan untuk menghilangkan tanah dan

pengotor lainnya yang melekat pada bahan simplisia.

Pen*u*ian dilakukan dengan air bersih. )ahan simplisia yang

mengandung zat yang mudah larut dalam air yang mengalir,

pen*u*ian hendaknya dilakukan dalam waktu yang sesingkat

mungkin*. Perajangan

)eberapa jenis bahan simplisia perlu mengalami perajangan

bahan simplisia dilakukan untuk memperoleh proses

pengeringan, pengepakan, dan penggilingan. !emakin tipis


19/35

19

bahan yang akan dikeringkan maka semakin *epat penguapan

air, sehingga memper*epat waktu pengeringan. +kan tetapi

irisan yang terlalu tipis juga dapat menyebabkan

berkurangnya atau hilangnya zat berkhasiat yang mudah

menguap, sehingga mempengaruhi komposisi, bau, dan rasa

yang diinginkand. Pengeringan

ujuannya yaitu untuk mendapatkan yang tidak mudah rusak,

sehingga dapat disimpan dalam waktu yang lebih lama.

(engan mengurangi kadar air dan menghentikan reaksi

enzimatik akan di*egah penurunan mutu simplisia. !uhu yang

terbaik pada pengeringan adalah tidak melebihi 1%o, tetapi

bahan aktif yang tidak tahan pemanasan atau mudah menguap

harus dikeringkan terlebih pada suhu srendah mungkine. !ortasi Kering

!ortasi setelah pengeringan sebenarnya merupakan tahap

akhir pembuatan simplisia. ujuan sortasi adalah untuk

memisahkan benda-benda asing seperti bagian-bagian

tanaman yang tidak diinginkan dan pengotoran-pengotoran

lainnya yang masih ada dan tertinggal pada simplisia kering.f. Penyimpanan

!etelah tahap pengeringan dan sortasi kering selesai maka

simplisia perlu ditempatkan dalam suatu wadah tersendiri agar

tidak saling ber*ampur antara simplisia satu dengan yang

lainnya. !elanjutnya, wadah-wadah yang berisi simplisia

disimpan dalam rak pada gudang penyimpanan. +dapun

faktor-faktor yang mempengaruhi pengepakan dan


20/35

20

penyimpanan simplisia adalah *ahaya, oksigen, atau sirkulasi

udara, reaksi kimia yang terjadi antara kandungan aktif

tanaman dengan wadah, penyerapan air, kemungkinan

terjadinya proses dehidrasi, pengotoran atau pen*emaran, baik

yang diakibatkan oleh serangga, kapang atau lainnya.

2.. Ekstrak -an Ekstraksi

2..1. Ekstrak

Estrak adalah sediaan kental yang diperoleh dengan mengekstraksi zat

aktif dari simplisia nabati atau simplisia hewani menggunakan pelarut

yang sesuai, kemudian semua atau pelarut diuapkan dan massa atau

serbuk yang terisi diperlakukan sedemikian sehingga memenuhi baku

yang telah ditetapkan "(epkes RG, $%%%'2..2. Ekstraksi

Ekstraksi adalah suatu *ara untuk memisahkan *ampuran beberapa zat

menjadi komponen yang terpisah. Pada proses ekstraksi pada dasarnya

dibedakan menjadi dua fase yaitu fase pen*u*ian dan fase ekstraksi

"Pratiwi,$%&%'.a. Fase Pen*u*ian "ashin" *ut '

Pada saat penggabungan pelarut dengan simplisia, maka sel-sel

yang rusak karena proses penge*ilan ukuran langsung kontak

dengan bahan pelarut. Komponen sel yang terdapat pada

simplisia tersebut dapat dengan mudah dilarutkan dan di*u*i

oleh pelarut. (engan adanya proses tersebut, maka dalam fase

pertama ini sebagian bahan aktif telah berpindah ke dalam

pelarut. !emakin halus ukuran simplisia, maka semakin optimal

jalannya proses pen*u*ian tersebut.

b. Fase Ekstraksi "(ifusi'


21/35

21

ntuk melarutkan komponen sel yang tidak rusak, maka pelarut

harus masuk ke dalam sel dan mendesak komponen sel tersebut

keluar dari sel. membrane sel simplisia yang mula-mula

mengering dan men*iut harus diubah terlebih dahulu agar

terdapat suatu perlintasan pelarut ke dalam sel. Hal ini dapat

terjadi melalui proses pembengkakkan, dimana membran

mengalami suatu pembesaran volume melalui pengambilan

molekul bahan pelarut. Kemampuan sel untuk mengikat pelarut

menyebabkan struktur dinding sel tersebut menjadi longgar,

sehingga terbentuk ruang antarmiselar, yang memungkinkan

bahan ekstraksi, men*apai ke dalam ruang dalam sel. Peristiwa

pembengkakkan ini sebagian besar disebabkan oleh air.

ampuran alkohol-air lebih disukai untuk mengekstraksi bahan

farmasetik karena terbukti lebih *epat.ahapan yang harus diperhatikan dalam mengekstraksi jaringan

tumbuhan adalah penyiapan bahan sebelum ekstraksi, pemilihan

pelarut dan kondisi proses ekstraksi, proses pengambilan pelarut,

pengawasan mutu dan pengujian yang dikenal pula sebagai

tahapan penyelesaian. Penggunaan pelarut bertitik didih tinggi

menyebabkan adanya kemungkinan kerusakan komponen-

komponen senyawa penyusun pada saat pemanasan. Pelarut

yang digunakan harus bersifat inert terhadap bahan baku, mudah

didapat dan harganya murah "Pratiwi,$%&%'.

Pembuatan ekstrak melalui tahap-tahap sebagai berikut 9

a. Pembasahan "(epkes RG, $%%2'


22/35

22

Pembasahan serbuk dilakukan pada penyarian, dimaksudkan

memberikan kesempatan sebesar-sebesarnya kepada *airan

penyari memasuki pori-pori dalam simplisia sehingga

mempermudah penyarian selanjutnya b. Penyari atau Pelarut "(epkes RG, $%%2'

airan penyari yang digunakan dalam proses pembuatan ekstrak

adalah penyari yang baik untuk senyawa kandungan yang

berkhasiat atau aktif. Penyari tersebut dapat dipisahkan dari

bahan dan dari senyawa kandungan lainnya. Faktor utama yang

menjadi pertimbangan dalam pemilihan *airan penyari adalah

selektifitas, ekonomis, kemudahan bekerja, ramah lingkungan

dan aman*. Pemisahan dan Pemurniaan "(epkes RG, $%%%'

ujuannya adalah untuk menghilangkan senyawa yang tidak

dikehendaki semaksimal mungkin tanpa pengaruh pada senyawa

kandungan yang dikehendaki, semaksimal mungkin tanpa

pengaruh pada senyawa kandungan yang dikehendaki, sehingga

diperoleh ekstrak yang lebih murni. Proses-proses pada tahap ini

adalah pengendapan, pemisahan dua *airan tak ber*ampur,

sentrifugasi, dekantasi, filtrasi, serta absopsi dan penukar iond. Pemekatan atau Penguapan "(epkes RG, $%%%'

Pemekatan berarti peningkatan jumlah partikel solute "senyawa

terlarut' dengan *ara penguapan pelarut tanpa sampai menjadi

kering tetapi ekstrak hanya menjadi kental atau pekat

2.3. Maserasi

8aserasi adalah proses pengekstrakan simplisia dengan menggunakan pelarut

dengan beberapa kali pengo*okan atau pengadukan pada temperature


23/35

23

ruangan. 8aserasi bertujuan untuk menarik zat-zat berkhasiat yang tahan

pemanasan maupun yang tidak tahan pemanasan. !e*ara teknologi maserasi

termasuk ekstraksi dengan prinsip metode pen*apaian konsentrasi pada

keseimbangan. 8aserasi dilakukan dengan beberapa kali pengo*okan atau

pengadukan pada temperature ruangan atau kamar " (epkes RG, $%%%'.

8aserasi berasal dari bahasa latin Macerace berarti mengairi dan melunakan.

8aserasi merupakan *ara ekstraksi yang paling sederhana. (asar dari

maserasi adalah melarutnya bahan kandungan simplisia dari sel yang rusak,

yang terbentuk pada saat penghalusan, sektraksi "difusi' bahan kandungan

dari sel yang masih utuh. !etelah selesai waktu maserasi, artiny

keseimbangan antara bahan yang diekstraksi pada bagian dalam sel dengan

masuk kedalam *airan, telah ter*apai maka proses difusi segera berakhir.

!elama maserasi atau proses perendaman dilakukan pengo*okan berulang-

ulang. paya ini menjamin keseimbangan konsentrasi bahan ekstraksi yang

lebih *epat di dalam *airan. !edangkan keadaan diam selama maserasi

menyebabkan turunannya perpindahan bahan aktif. "(epkes RG, $%%%'.

Kerugiannya adalah pengerjaannya lama dan penyarian kurang sempurna.

!e*ara teknologi termasuk ekstraksi dengan prinsip metode pen*apaian

konsentrasi pada keseimbangan. 8aserasi kinetik berarti dilakukan

pengulangan penambahan pelarut setelah dilakukan penyaringan maserat

pertama dan seterusnya "(epkes RG, $%%%'


24/35

24

2.4. !erangka Te%ri

2.5. !erangka !%nse$

Kandungan 9

&. +lkhaloid$. 6likosida5. Fenol/. !apotin. anin

8anfaat 9

&. +ntikanker,$. antidiare,5. antimalaria, dll

Brucea Javanica "3.' 8err.

!implisia dan 8aserasiinfe&si

Propioniba&terium acnes

pato"enesis

*am+ar . Kerangka teori

)uah makasar "bru*ea javani*a

>3.? 8err.'

! implisia

maserasi

etrasikln&%%40=4=% 4$= 4%4

(osis Gkelompok GGG

(osis Gkelompok GG

(osis Gkelompok G

(osis Gkelompok


25/35

25

*am+ar ". Kerangka konsep

2.6. Hi$%tesis

Hipotesis pada penelitian ini adalah adanya efektivitas antimikroba ekstrak

etanol buah 8akasar " Brucea Javanica "3.' 8err.' terhadap pertumbuhan

bakteri Propionibacterium acnes se*ara in-vitro

. MET7DE PENELITIAN

.1. Desain Penelitian

Penelitian ini merupakan penelitian eksperimen laboratorik dengan metode

difusi +irb ba,er

.2. 8aktu -an Tem$at Penelitian

Pelaksanaan penelitian dilakukan pada bulan juli $%&= bertempatan di

3aboratorium Penelitian 8ikrobiologi Kedokteran niversitas 3ampung.

Kontrol negatif Kelompok G

Kontrol

positif kelompok G

Propionibacterium acnes

(iameter zona hambat


26/35

26

.. Bahan -an Alat Penelitian

..1. Bahan Uji

)ahan penelitian adalah ekstrak buah makasar yang didapatkan dari

laboratorium Fakultas 8atematika dan Glmu Pengetahuan +lam "8GP+'

Kimia @rganik niversitas 3ampung.

..2. Bakteri Uji

)akteri uji yang dipergunakan adalah bakteri 6ram positif

" Propionibacterium acnes' sebagai bakteri uji yang berasal dari

3aboratorium Kesehatan Provinsi 3ampung

... Me-ia !ultur

8edia yang digunakan pada peneltian ini adalah adalah -utrien !"ar

dan lempeng agar darah. )akteri gram positif akan tumbuh pada media

perbenihan lempeng agar darah. "@ktavia,$%&/'

..". Alat Alat Penelitian

+lat alat yang digunakan dalam penelitian ini yaitu 9 pipet hisap,

mikropipet, tabung reaksi, beaker glass, *awan petri, in*ubator,

autoklaf, rak, ose, nera*a ukur, stir plate, tabung Erlenmeyer, moisture

balance dan hot plate.

.". Pr%se-ur Penelitian


27/35

27

.".1. Ekstrak Buah Makasar

+dapun proses dalam pembuatan ekstrak buah makasar yaitu 9

a. Pembuatan !erbuk )uah 8akasar)uah 8akasar yang telah dideterminasi di*u*i bersih, ditiriskan kemudan

dipotong ke*il-ke*il dan dikeringkan. Potongan buah makasar diblender

disimpan pada wadah yang kering dan tertutup rapat. )ahan yang sudah

*ukuo kering tersebut dibuat serbuk dengan blender dan diayak dengan

ayakan no.&%%, kemudian dilakukan perhitungan prosentase bobot kering

terhadapat bobot basah. "Rahayu, Ciryosoendjoyo, # Prasetyo, $%%.'

b. Penetapan Kadar +ir !erbuk )uah 8akasar

Penetapan kadar air serbuk buah makasar dilakukan dengan menggunakan

alat moisture balance dengan *ara menimbang serbuk buah makasar Q $

g. Caktu yang diperlukan dalam pengukuran 5% menit, kemudian

ditunggu sampai kadar air konstan. "Rahayu, Ciryosoendjoyo, #

Prasetyo, $%%.'

*. Pembuatan Ekstrak !e*ara maserasi

!erbuk buah makasar sebanyak =% gram dimasukkan ke dalam botol

dengan ditambahkan etanol 0%4. Penggojokan dilakukan selama $ jam.

!elanjutnya *ampuran tersebut didiamkan selama = hari sambil sesekali

digojok. 8aserat yang didapatkan selama = hari disaring menggunakan

kain kassa. 8aserat dipekatkan dengan suhu /%-=% dalam rotar

evaporator. "Rahayu, Ciryosoendjoyo, # Prasetyo, $%%.'


28/35

28

Penggunaan pemanas dengan suhu /%-=% ditujukan untuk

menghilangkan atau menguapkan pelarut yang masih tersisa pada ekstrak

dan pada akhirnya akan diperoleh hasil berupa ekstrak buah 8akasar d

dengan konsentrasi &%%4. ntuk membuat berbagi konsentrasi yang

diperlukan dapat digunakan rumus 9

Keterangan 9& S olume larutan yang akan dien*erkan "ml'

8& S Konsentrasi ekstrak buah 8akasar yang tersedia "4'$ S olume larutan "air N ekstrak ' yang diinginkan "ml'8$ S konsentrasi ekstrak buah 8akasar yang akan dibuat "4'

.".2. 'terilisasi Alat

!eluruh alat yang digunakan pada penelitian ini di*u*i bersih, kemudian

disterilisssi di dalam autoclave selama &= menit pada suhu &$&o dengan

tekanan &,= atm. "Kirana, $%&%'

.".. Pem+uatan 't%k Bakteri

+mbil biakan murni bakteri Propioniba&terium acnes sebanyak & ose

kemudian dikultur ulang pada agar darah, selanjutnya masukkan ke dalam

inkubator dengan suhu 50o selama $/ jam "@ktavia, $%&/'

.".". Pem+uatan Me-ia Nutrient Agar (NA)

8edia dibuat dengan konsentrasi $4 !ebanyak $ gram -utrien !"ar

dilarutkan dalam air suling sebanyak &%% ml, kemudian diaduk disertai

pemanasan pada suhu 0%. 8edia ini disterilisasi menggunakan autoklaf

91M1 : 92M2


29/35

29

pada suhu &$& selama &= menit. !elanjutnya sebanyak 5 ml media ini,

dimasukkan ke dalam tabung reaksi, diletakkan pada sudut ke miringan

5%-/= dan dibiarkan memadat, kemudian disimpan dalam lemari

pendingin "!ilvikasari, $%&&B !ilaban, $%%2'.

.". Uji Akti/itas Antimikr%+a

rutan pengujian efek antimikroba yaitu sebagai berikut9

a. Pem+uatan sumuran

(ilakukan dengan meletakkan pipet steril pada *awan petri steril

dengan menggunakan pinset sebelum bakteri dan agar dimasukkan.

!etelah agar dan bakteri dimasukkan ditunggu sampai memadat.

!etelah agar memadat angkat pipet yang telah kita taruh pada masing-

masing label pada *awan.

+. Persia$an sus$ensi +akteri

Pembiakan bakteri diambil sebanyak &-$ ose dan disuspensikan

kedalam Dal %,24 sampai diperoleh kekeruhan yang sesuai dengan

standar %,= 8a* Farland atau sebanding dengan jumlah bakteri

&%"F'Lm3. !uspensi bakteri diteteskan sebanyak =% T3 kemudian

diratakan lalu dimasukkan agar yang sudah kita buat.


30/35

30

*. Pengisian 'umuran Dengan Ekstrak Buah Makasar

!umuran tersebut jika sudah mengeras diisi dengan ekstrak buah

8akasar sesuai dengan masing-masing konsentrasi yang telah

ditentukan dengan menggunakan mikro pipet sebanyak &%%T3. !etelah

itu, media dimasukkan kedalam inkubator pada suhu 50 dan diamati

setelah $/ jam kemudian diukur zona hambat dengan kaliper geser atau

penggaris.

.. Pengel%lahan -an Analisa Data

)erdasarkan data yang diperoleh dari hasil pengamatan diuji analisis

mengunakan soft,are statistik. Pada uji pertama yang dilakukan adalah uji

normalitas " shapiro%,il&). +pabila sebaran data normal atau varians data

tidak sama, dilakukan uji alternatif yaitu uji &rus&al%,allis. ji bertujuan

untuk mengetahui paling tidak terdapat perbedaan antara dua kelompok

perlakuan. +pabila uji tersebut didapatkan hasil yang signifikan "bermakna'

yaitu p%,%= maka dilakukan analisis post%hoc untuk mengetahui kelompok

perlakuan yang bermakna. ji post%hoc untuk +D@+ satu arah adalah

Bonferroni sedangkan untuk uji &rus&al%,allis adalah mann ,hitne.

.3. 9aria+el Penelitian


31/35

31

.3.1. 9aria+el Be+as

Ekstrak buah 8akasar dengan tiga pembagian yaitu kontrol negatif

dengan konsentrasi %4 , konsentrasi pada masing-masing buah yaitu

$=4, =%4, 0=4, &%%4 dan kontrol positif mengunakan etrasiklin

.3.2. 9aria+el Terikat

ariabel terikat untuk penelitian ini adalah diameter zona hambat ekstrak

buah 8akasar terhadap pertumbuhan bakteri gram negatif

" Propionibacterium acnes).

.4 De#enisi %$erasi%nal

ntuk memudahkan pelaksanaan dan agar penelitian tidak menjadi terlalu

luas maka dibuat defenisi operasional "tabel $'.


32/35

32

Ta+el 2 (efenisi @perasional

Do ariabel (efenisi +lat kur Hasil kur !kala& Konsentras

i ekstrak

buah

8akasar

" Brucea

javanica

"3.'8err. '

Perasan buah

8akasar

"brucea

javanica >3.?

8err.' yang

dilarutkandengan etanol

0% 4

dinyatakandalam bentuk

persen "4'.

8ikropipiet (idapatkan

konsentrasi

ekstrak buah

8akasar $=4,

=%4, 0=4,

&%%4.

Dumerik

$ 3arutan

kontrol

negatif

3arutan

kontrol

negative yang

berisi aJuades

steril

8ikropipiet akram uji

berisi aJuades

steril

Kategorik

5 Kontrol

Positif

Kontrol positif

yang berupa

kertas *akramyang berisi

antibiotik

tetrasiklin

idak ada 7umlah *akram

& buah berisi

antibiotiktetrasiklin

Kategorik

/ MonaHambat

(aerah tidakditemukannya

pertumbuhan

Propionibacte

rium acnes

Penggaris (iameter zonahambat "mm'

Dumerik


33/35

33

DATAR PU'TA!A

+pak, R., K. 6UVlU, ). (emirata, 8. WzyUrek, !. E. Xelik, ). )ektaYoZlu, K. G.)erker and (. Wzyurt. $%%0. omparative /valuation of 0arious Total

!ntio1idant apacit !ssa !pplied to Phenolic ompounds ,ith The

2PP3! !ssa. 8ole*ules, &$ 9 &/21-&=/0.

+gromedia, R. "$%%'. Bu&u Pintar Tanaman *bat 4 567 Jenis Tanaman Pen""empur !ne&a Pena&it . "(. (amayanti, Ed.' "etakan &'. P+gromedia Pustaka

+ziz, !. "$%&%'. 7G +KGG+! +DG)+KERG EK!R+K E+D@3 (+D(+D 8)G )+KD6 PGH " rinum asiati*um 3 .'. 2niversitas 8slam

-e"eri Sarif 9idaatullah Ja&arta.

)adan Pengawas @bat dan 8akanan Republik Gndonesia "$%%'. Ta&sonomi

+ole&si Tanaman *bat +ebun Tanaman *bat iteurep. "R. Dapitupulu,Efrizal, 3. 8ooduto, . Herawaty, +. Dovianti, # !. Cahyu, Eds.'. )adan

Pengawas @bat dan 8akanan Republik Gndonesia (eputi )idang

Pengawasan @bat radisional, Kosmetik, (an Produk Komplemen

(irektorat @bat +sli Gndonesia.

)hat, !. ., ). +. Dagasampagi and !. 8eenakshi. $%%2. -atural Products 4hemistr and !pplication. Darosa Publishing House, Dew (elhi. Gndia.


34/35

34

hen, 8., hen, R., Cang, !., an, C., Hu, ., Peng, [., # Cang, . "$%&$'.

hemi*al *omponents, pharma*ologi*al properties, and nanoparti*ulate

delivery systems of )ru*ea javani*a. 8nternational Journal of -anomedicine,:, =\2$. http9LLdoi.orgL&%.$&/0LG7D.!5&151

(epartemen Kesehatan RG. $%%%. Parameter Standar 2mum /&stra& Tumbuhan*bat. 7akarta9 (iktorat 7endral P@8-(EPKE!

(epartemen Kesehatan RG. $%%%. !cuan Sediaan 9erbal. 7akarta9 (iktorat 7endral

P@8-(EPKE!

(epartemen Kesehatan RG. $%%2. arma&ope 9erbal 8ndonesia. 7akarta9 (iktorat7endral P@8-(EPKE!

(juanda, +dhi. $%&&. 8lmu Pena&it +ulit dan +elamin."Hamzah, 8o*htar, et al,Ed'." Edisi 1' "etakan $'.7akarta 9 Fakultas Kedokteran niversitasGndonesia.

7awetz, 8elni*k, +delberg."$%%'. Mi&robiolo"i +edo&teran. "!, Rina, Ed'"Edisi$5'"*etakan &'. 7akarta 9 Penerbit )uku Kedokteran E6.

Pratiwi, !.. "$%%'. Mi&robiolo"i armasi. Erlanga, 7akarta

Rustaman, # et al. "$%&%'. !krining Fitokimia umbuhan di Kawasan 6unung

Kuda Kabupaten )andung sebagai Penelaahan Keanekaragaman Hayati. Lemba"a Penelitian 2nivesitas Padjadjaran, "%&=&', &\/5.

!ilaban, 3. C. $%%2. !krining fitokimia dan uji aktivitas antibakteri dari kulit buah sentul (Sandoricum &oetjae (burm. f.) Merr) terhadap beberapa bakterise*ara in vitro. !kripsi. niversitas !umatera tara. 8edan

!ilvikasari. $%&&. +ktivitas antibakteri ekstrak kasar flavonoid daun gambir

"2ncaria "ambir 3o1b). !kripsi. GP). )ogor.


35/35

35

!irait, 8. $%%0. Penuntun ito&imia dalam armasi. Gnstitut eknologi )andung,)andung.

!lyvia, 3usita. $%&%. 9ubun"an !ntara Jenis Mi&roor"anisme an" #itemu&an pada !&ne Lesi den"an Bentu& Lesi !&ne. esis9 Fakultas Kedokteranniversitas +ndalas Padang.

Rahayu, 8. P., Ciryosoendjoyo, K., # Prasetyo, +. "$%%.'. 7G +KGG+!

+DG)+KERG EK!R+K !@[H3E+!G (+D 8+!ER+!G )+H

8+K+!+R " )ru*ea javani*a " 3 ' 8err .' ERH+(+P )+KERG !higella

dysentriae + 251& !E+R+ in vitro. a&ultas armasi 2niversitas

Setia Budi.

Cidyaningtias, D. 8. !. R., ustiantara, P. !., # Paramita, D. 3. P. . "$%&&'. ji

+ktivitas +ntibakteri Ekstrak erpurifikasi (aun !irih Hijau "Piper betle 3.'

erhadap )akteri Propioniba*terium a*nes. 2niversitas 2daana.

uji efektifitas ekstrak buah makasar baru - copy

Documents