STRUKTUR TULANG BELAKANG FETUS MENCIT

( Mus musculus L. ) SETELAH PEMBERIAN EKSTRAK DAUN

JERUJU ( Acanthus ilicifolius L. ) PADA INDUKNYA

(Skripsi)

Oleh

Tunggul Van Roy

-

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

UNIVERSITAS LAMPUNG

BANDAR LAMPUNG

2018

ABSTRAK

STRUKTUR TULANG BELAKANG FETUS MENCIT (Mus musculus L.)

SETELAH PEMBERIAN EKSTRAK DAUN JERUJU

(Acanthus ilicifolius L.) PADA INDUKNYA

Oleh

Tunggul Van Roy

Jeruju merupakan tumbuhan obat. Kandungan Kimia yang dimiliki tanaman jeruju

di antara lain feniletanoid, glikosida, ilisifoliosida A dan ilisifoliosida B7,

alkaloid, akantisifolin, steroid, stigmasterol, flavonoid. Kandungan senyawa kimia

pada tanaman jeruju berkhasiat sebagai neurelgia, analgesik, antiinflamasi,

antioksidan, antifertilitas, hepatoprotektif, antitumor, antileukimia, antikanker,

antikmikroba, antivirus dan antijamur. Dengan adanya berbagai zat kimia tersebut

maka dilakukan penelitian mengenai uji teratogenik ekstrak daun jeruju untuk

mengetahui kelainan struktur tulang belakang pada fetus mencit (Mus musculus

L.). Penelitian dilaksanakan pada Desember 2017- Januari 2018 bertempat di

Laboratorium Zoologi dan Laboratorim Kimia Organik FMIPA Universitas

Lampung. Penelitian ini menggunakan metode Rancangan Acak Lengkap ( RAL )

dengan 20 ekor mencit betina yang bunting dibagi dalam 4 kelompok yaitu 1

kelompok sebagai kontrol dan 3 kelompok diberi perlakuan dosis 3,75

mg/30grBB, 7,5 mg/30grBB, 15 mg/grBB, masing-masing dengan ekstrak daun

jeruju terdiri dari 5 kali ulangan. Hasil penelitian menunjukkan bahwa dosis 7,5

mg/30grBB dan 15 mg/grBB secara anatomi pemberian ekstrak daun jeruju tidak

menyebabkan kelainan pada struktur tulang belakang fetus mencit. Hal ini

disebabkan oleh fetus yang sedang tumbuh mengambil prioritas dari banyaknya

jenis nutrisi dalam cairan induk sehingga tulang fetus dapat terus tumbuh dan

berkembang.

Kata Kunci : Daun Jeruju, Mencit, Struktur Tulang Belakang, Alizarin Red

STRUKTUR TULANG BELAKANG FETUS MENCIT

( Mus musculus L. ) SETALAH PEMBERIAN EKSTRAK DAUN

JERUJU ( Acanthus ilicifolius L.) PADA INDUKNYA

Oleh

Tunggul Van Roy

Skripsi

Sebagai salah satu syarat untuk mencapai gelar

SARJANA SAINS

pada

Jurusan Biologi

Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

UNIVERSITAS LAMPUNG

BANDAR LAMPUNG

2018

xiv

RIWAYAT HIDUP

Penulis bernama Tunggul Van Roy, dilahirkan di Jakarta pada

Tanggal 18 Mei 1996 sebagai anak pertama dari 3 bersaudara

Dari Bapak Wilfer Hutagaol dan Farida Simbolon.

Penulis mengawali pendidikan Taman Kanak-kanak di TK Dewi

Sartika Tanggerang pada Tahun 2001, dilanjutkan Sekolah Dasar SDN Suka

Asih Tanggerang pada Tahun 2002, kemudian Sekolah Menengah Pertama SMP

di SMPN 1 Pasar Kemis pada Tahun 2008 dan Sekolah Menengah Atas SMA

di SMAN 13 Tanggerang pada Tahun 2011. Penulis terdaftar sebagai

mahasiswa Jurusan Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam,

Universitas Lampung pada Tahun 2014 melalui jalur Mandiri.

Selama menjadi mahasiswa penulis pernah menjadi asisten praktikum mata

kuliah Embriolgi Hewan.

Penulis melakukan Kuliah Kerja Nyata pada bulan Januari-Maret 2018 di Desa

Cahyo Randu, Kabupaten Tulang Bawang Barat. Pada bulan Juli-September

2017 penulis melaksanakan Kerja Praktek (KP) di Balai Karantina Soekarno

Hatta dengan judul ” Identifikasi Cendawan Pada Benih Cabai Asal

Thailand ”

xiv

PERSEMBAHAN

Tuhan adalah Bapaku , Yesus Kristus sahabatku yang senantiasamenemani setiap saat

Bapak dan Mamakku serta Adek-adekku, yang sangat mencintaidan menyayangi aku dalam segala cita- cita dan mimpiku.

Tanpamu Siapakah Aku

Para pendidiku, atas bimbingan dan ajrannya, serta limpahan ilmu-ilmu yang bermanfaat.

Sahabat-sahabat yang selalu memeberikan semangat dan menemaniselama menjalani pendidiakan.

Alammater tercinta Universitas Lampung

xiv

MOTTO

” Segala perakara ku tanggung di dalam dia yang memeberikekuatan kepadaku “

( Filipi 4:13 )

” Diberikatilah orang yang mengandalkan tuhan, yang menaruhharapan pada tuhan “

( Yeremia 17:7 )

“ Bersukacitalah senantiasa dalam Tuhan! Sekali lagi kukatakanbersukacita”

( Filipi 4:4 )

xiii

SANWACANA

Puji syukur penulis panjatkan kepada Tuhan Yesus Kristus atas segala berkat dan

karunia yang telah diberikan sehingga skripsi ini dapat diselesaikan dengan baik.

Skripsi dengan judul “Struktur Tulang Belakang Fetus Mencit (Mus

musculus L.) Setelah Pemberian Ekstrak Daun Jeruju (Acanthus ilicifolius

L.) Pada Induk nya.” merupakan syarat untuk mencapai gelar Sarjana Sains

pada Jurusan Biologi, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam,

Universitas Lampung.

Penulis menyadari bahwa penyelesaian skripsi ini tidak terlepas dari bimbingan,

arahan, serta bantuan dari berbagai pihak, untuk itu penulis menghanturkan terima

kasih kepada:

1. Orang tua saya yang sangat saya cinta dan sayangi. Wilfer Hutagaol dan

Farida simbolon, terimakasih karena telah membesarkan Roy dan selalu

memberikan doa, semangat serta nasehat dalam menghadapi segala

masalah ataupun rintangan terutama dalam menyusun skripsi ini. Motivasi

kalian selalu memberikan semangat Roy dalam melangkah kemanapun.

2. Ibu Dr. Nuning Nurcahyani, M.Sc selaku Pembimbing Utama yang telah

membimbing penulis dengan sabar,memberikan banyak ilmu pengetahuan,

xiv

saran, arahan, dan motivasi sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi

ini.

3. Bapak Dr. Hendri Busman, M.Biomed selaku Pembimbing Kedua yang

telah membimbing,memberikan petunjuk, saran, serta nasehat dalam

menyelesaikan skripsi ini.

4. Bapak Prof. Sutyarso, M. Biomed selaku Pembahas yang telah banyak

memberikan banyak arahan, kritik dan saran demi terselesaikannya skripsi

ini.

5. Ibu Dra. Yulianty, M.Si selaku Pembimbing Akademik yang telahmemberi

motivasi dan dukungannya.

6. Bapak Prof. Dr. Ir. Hasriadi Mat Akin, M.P selaku Rektor Universitas

Lampung.

7. Bapak Prof. Dr. Warsito, S.SI., D.E.A. selaku Dekan Fakultas Matematika

dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Lampung.

8. Bapak Drs. M. Kanedi, M.Si selaku Ketua Jurusan Biologi Universitas

Lampung.

9. Seluruh Dosen dan Staf karyawan di jurusan Biologi FMIPA Universitas

Lampung.

10. Adik saya tercinta Andre Zevry Hottugu Hutagaol dan Wilda Novita

Sarmadalitua Hutagaol . Terimakasih atas doa dan dukungan kalian,

xv

tetaplah menjadi adik saya yang selalu bisa membanggakan mama dan

papa.

11. Keluarga Op. Jaliter Hutagaol/ Op. Sungguria, Keluarga Op. Tonggi

Magdalena Simbolon/ Op. Sungguria Boru, Keluarga Op. Martuaraja

Simbolon/ Op. Bornok (Patrick) dan Keluarga Op. Parange Aritonang atas

dukungan, doa dan motivasi nya.

12. Keluarga Togap Siahaan/ Asli Simangungsong atas dukungan dan

motivasi nya.

13. Teman seperjuangan kerja praktik Triana Gusmaryana, Sesti Edina

Merisca, Syahnaz Y .

14. Teman seperjuangan kerja praktik dari Universitas Tirtayasa dan Institut

Pertanian Bogor.

15. Teman seperjuangan saya Alfin Edo Lubis,Deborah Jovita, Anita Sagala,

Desy Angeline.

16. Sahabat saya Billquis Kamil Arasyi, M. Andhika Fahlevi, Reza Yanuar

Fahlevi, Nengah Budi H, Aditya alias botak.

17. Teman-Teman seperjuangan di Elvindo Exe. Suite Derick Huliselan,

Lukas Posma, Kornelius Siahaan, Torffel Teytoo

xvi

18. Abang-abang terbaik yang selalu memberi semangat Daniel Sitanggang

S.H, Bram MS, S.H, Nico Silaban, S.H, Daniel Simbolon, S.H, Dimas

Pamor, S.H

19. Teman-teman selaku adik Evelyn H, Risty Artha, Sarah trinita, Relita

shinta, Dewi Siahaan, Duta Fernando

20. Teman-teman anggota dari UKM Kristen, Gerakan Mahasiswa Kristen

Indonesia (GMKI) dan Anemon Diving Club yang telah mengajarakan

banyak hal selama di masa perkuliahan.

21. Teman-teman angkatan dari Jabodetabek Jonathan Manalu, Daniel Jordy,

Fuad Abdullah, Ibnu Alwan, M. Syarifulhadi, Melky Nababan, Nadiya

Damara, Biaton Simarmata, Erland, Nandus Imannuel.

22. Sahabat saya Nur Jannah Cortesa S. Si, Maulidina Agustin S.Si, Mentari

Primaresti S.Si, Oksa Trinanda S.Si dan Khairul Annam S.Si

Penulis berharap semoga Tuhan membelas kebaikan mereka dan semogaskripsi

bermanfaat.

Bandar Lampung, 12 November 2018

Penulis

Tunggul Van Roy

DAFTAR ISI

Halaman

SAMPUL DEPAN

ABSTRAK ............................................................................................. i

HALAMAN JUDUL DALAM ............................................................ ii

HALAMA PERSETUJUAN ................................................................ iii

HALAMAN PENGESAHAN ............................................................... iv

RIWAYAT HIDUP ............................................................................... v

HALAMAN PERSEMBAHAN ........................................................... vi

MOTTO ................................................................................................. vii

SANWACANA ...................................................................................... viii

PERNYATAAN KEASLIAN SKRIPSI .............................................. xii

DAFTAR ISI…………………………………………………………... xiii

DAFTAR TABEL …………………………………………………….. xv

DAFTAR GAMBAR………………………………………………….. xvi

I. PENDAHULUAN ............................................................................. 1

A. Latar Belakang ............................................................................... 1 B. Tujuan Penelitian ........................................................................... 2 C. Manfaat Penelitian ......................................................................... 2 D. Kerangka Pemikiran ...................................................................... 3 E. Hipotesis ........................................................................................ 4

II. TINJAUAN PUSTAKA…………………………………………… 5

A. Jeruju (Acanthus ilicifolius L.) …………………………………. 5 1. Biologi Jeruju............................................................................ 5

2. Kandungan Senyawa kimia tanaman Jeruju... .......................... 6 3. Morfologi Jeruju……………………………………….... ....... 7 4. Habitat Tanaman Jeruju ........................................................... 9

B. Mencit (Mus musculus L.) ………………………………………. 12 1. Biologi Mencit……………………………………….... .. …… 12 2. Perkembangan Fetus Mencit… ……………………………… 14 3. Siklus Hidup Mencit ...........…………………………………. 16

4. Tulang Belakang Fetus.............................................................. 17

III. METODE PENELITIAN……………………………………...… 24

A. Waktu dan Tempat Penelitian ..................................................... 24 B. Alat dan Bahan ............................................................................ 24

1. Alat ......................................................................................... 24 2. Bahan ...................................................................................... 25

C. Persiapan Kandang dan Hewan Uji ............................................. 25

D. Persiapan dan Pembuatan Ekstrak Jeruju .................................... 26

E. Proses Kopulasi Mencit ............................................................... 26

F. Pembuktian Mencit Bunting ........................................................ 27

G. Pemberian Perlakuan ................................................................... 27

H. Pengamatan ................................................................................. 29

I. Rancangan Percobaan .................................................................. 30

J. Analisis Data ............................................................................... 31

K. Diagram Alir Penelitian .............................................................. 31

IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ...................................................... 32

A. Hasil Pengamatan ....................................................................... 32

Struktur Tulang Belakang Fetus ................................................. 32

B. Pembahasan ................................................................................ 34

Struktur Tulang Belakang Fetus ................................................. 34

V. KESIMPULAN DAN SARAN ....................................................... 43

A. Kesimpulan ................................................................................ 43

B. Saran .......................................................................................... . 43

DAFTAR PUSTAKA ............................................................................ 44

LAMPIRAN ........................................................................................... 49

xiv

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

Tabel 1. Tahap Perkembangan Fetus Pada Rodentia ........................................... 16

Tabel 2. Rancangan Percobaan……………………………………………………30

Tabel 3. Kelainan Struktur Tulang Belakang ....................................................... 32

Tabel 4. Rata-rata Berat Badan Fetus Mencit (Mus musculus L.) ....................... 50

Tabel 5. Rata-rata panjang fetus mencit (Mus musculus L.) ............................... 50

xiv

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

Gambar 1. Jeruju (Acanthus ilicifolius L.) ..................................................... 9

Gambar 2. Mencit (Mus musculus L.) ............................................................ 14

Gambar 3. Morfologi Fetus Mencit ............................................................... 15

Gambar 4. Kerangka Mencit (Mus musculus L.) ........................................... 20

Gambar 5. Diagram Alir ............................................................................... 31

Gambar 6. Strukur Tulang Belakang Fetus ................................................... 33

Gambar 7. Larutan alizarin red dan Larutan KOH 1%……………………… 51

1

I. PENDAHULUAN

A. Latar Belakang

Masyarakat Indonesia sudah menggunakan sumber bahan obat dari alam

sebagai obat tradisional turun-temurun. Hingga saat ini pemakaian obat

tradisional berkembang dengan baik sebagai salah satu alternatif untuk

menanggulangi masalah kesehatan. Tanaman obat akan memberikan hasil

optimal bila dikonsumsi secukupnya untuk tujuan pengobatan (Agusta,

2011).

Juruju merupakan tumbuhan akuatik yang biasa dimanfaatkan masyarakat

di daerah pantai sebagai obat tradisional. Untuk saat ini tumbuhan akuatik

sangat digemari masyarakat sebagai tanaman hias taman, karena

keindahan bentuk dan warna, baik pada daun maupun bunga (Hidayat, et

al., 2004).

Tanaman ini dimanfaatkan di banyak negara sebagai obat tradisional

karena memiliki khasiat sebagai anti radang dan juga dapat digunakan

sebagai obat kanker, obat penyakit hepatitis, obat bisul dan juga obat

2

penyakit cacingan. Kandungan senyawa kimia dalam Acanthus ilicifolius

berfungsi sebagai neuralgia, analgesik, antiinflamasi, antioksidan,

antifertilitass, hepatoprotektif, antitumor, antileukimia, antukanker,

antimikroba, antivirus dan antijamur, serta dapat digunakan sebagai

insektisida alami. Kandungan senyawa kimia lain yang dimiliki tanaman

jeruju antara lain feniletanoid glikosida : ilisifoliosida A dan ilisifoliosida

B7; alkaloid: akantisifolin: steroid: stigmasterol, flavonoid. Mengingat

banyak nya manfaat jeruju dan banyak nya kandungan kimia yang terdapat

pada tanaman jeruju sedangkan tingkat keamanan pemakaiannya belum

diketahui dengan jelas, maka perlu dilakukan penelitian tentang jeruju,

khususnya pada ibu hamil yang mengkonsumsi jeruju sebagai obat. Pada

penelitian ini yang diamati adalah tentang efek samping ekstrak daun

jeruju terhadap struktur tulang belakang pada fetus mencit.

B. Tujuan Penelitian

Tujuan dari penelitian ini adalah untuk mengetahui kelainan pada struktur

tulang belakang fetus mencit (Mus musculus L.setelah pemberian ekstrak

daun jeruju (Acanthus ilicifolius L.) pada induknya.

C. Manfaat Penelitian

Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi kepada masyarakat

tentang tingkat keamanan tanaman jeruju (Acanthus ilicifolius L.) terutama

daunnya yang dapat dimanfaatkan sebagai obat.

3

D. Kerangka Pemikiran

Indonesia merupakan negara yang memiliki keanekaragaman hayati yang

tinggi dengan hutan tropisnya terdapat 30.000 spesies tumbuhan. Dari

jumlah tersebut sekitar 9.600 spesies diketahui berkhasiat obat, dan kurang

lebih 300 spesies telah dimanfaatkan sebagai bahan baku pada industri

obat tradisional. Tumbuhan yang memiliki potensi sehingga dapat

dikembangkan menjadi bahan baku obat-obatan adalah tumbuhan yang

dapat menghasilkan metabolit sekunder dan aktivitas biologis tertentu dan

salah satunya adalah tanaman jeruju. Tanaman ini dimanfaatkan di banyak

negara sebagai obat tradisional karena memiliki khasiat sebagai anti

radang dan juga dapat digunakan sebagai obat kanker, obat penyakit

hepatitis, obat bisul dan juga obat penyakit cacingan. Kandungan senyawa

kimia dalam Acanthus ilicifolius berfungsi sebagai neuralgia, analgesik,

antiinflamasi, antioksidan, antifertilitass, hepatoprotektif, antitumor,

antileukimia, antikanker, antimikroba, antivirus dan antijamur, serta dapat

digunakan sebagai insektisida alami. Kandungan kimia lain yang dimiliki

tanaman jaruju antara lain feniletanoid glikosida : ilisifoliosida A dan

ilisifoliosida B7; alkaloid: akantisifolin: steroid: stigmasterol, flavonoid.

Pada penelitian ini dilakukan pengamatan terhadap kelainan pada struktur

tulang belakang fetus mencit. Penelitian ini menggunakan daun jeruju

sebagai obat tetapi banyak yang belum mengetahui efek samping teratogen

yang dapat menyebabkan kerusakan pada embrio sehingga pembentukan

4

organ-organ berlangsung tidak sempurna (terjadi cacat lahir) khususnya

terhadap perkembangan tulang belakang pada fetus mencit.

E. Hipotesis

Hipotesis dari penelitian ini adalah pemberian ekstrak daun tanaman jeruju

(Acanthus ilifolius) terhadap induk mencit (Mus musculus L.) yang sedang

hamil menyebabkan terjadinya kelainan pada struktur tulang belakang

fetus.

5

II. TINJAUAN PUSTAKA

A. Jeruju (Acanthus ilicifolius)

1. Biologi Jeruju

Klasifikasi tanaman jeruju adalah sebagai berikut (Plantamor, 2016)

Regnum : Plantae

Sub kingdom : Tracheobionta

Super divisi : Spermatophyta

Divisi : Magnoliophyta

Kelas : Magnoliopsida

Subkelas : Asteridae

Ordo : Scrophulariales

Famili : Acanthaceae

Genus : Acanthus

Spesies : Acanthus ilicifolius L.

Tumbuhan air dapat didefinisikan sebagai tumbuhan yang hidup di air

atau dekat air hidup bergantung pada lingkungan berai atau sebagian besar

siklus hidup berada di lingkungan berair. Menurut Giesen (1991),

6

setidaknya sekitar 623 jenis dari 105 famili tumbuhan air yang ada di

Indonesia, termasuk jenis introduksi, dan 39 diantaranya merupakan

endemik. Kebun Raya Bogor sebagai lembaga konservasi ex situ

tumbuhan tropika, memiliki 154 nomor koleksi dari sejumlah 52 jenis

tumbuhan air. Beberapa diantaranya telah diketahui memiliki potensi

untuk dikembangkan menjadi bahan obat-obatan seperti jeruju, daruju,

seroja dan teratai. Tumbuhan berhabitus terna yang kuat, tidak lunak,

batang bulat, tampak jelas buku-buku batang, tumbuh tegak atau kadang-

kadang merayap. Helaian daun tunggal, letak daun bersilang berhadapan,

bentuk memanjang sampai lanset, selalu dilengkapi duri di bagian ujung

helaian daun bahkan pada semua bagian tepi daun, ukuran helaian daun 9-

30 x 4-12 cm, pertulangan daun menyirip, warna hijau tua, panjang

tangkai daun 3-15 mm. Perbungaan berupa bunga majemuk bulir, terletak

di ujung batang, setiap bagian bunga dilindungi oleh 2 buah daun

pelindung (brakteola) tepat di bawah kelopak bunga. Tanaman ini tumbuh

baik di dekat komunitas mangrove (Giesen, 1991).

2. Kandungan Senyawa Kimia Tanaman Jeruju

Tumbuhan Acanthus ilicifolius dapat sebagai tumbuhan hias karena

keindahan bunganya, juga diketahui sebagai tumbuhan obat. Beberapa

penelitian mengenai senyawa bioaktif dari tumbuhan ini memiliki

kemampuan untuk memerangi penyakit. Kandungan senyawa kimia dalam

Acanthus ilicifolius berfungsi sebagai: neuralgia, analgesik, antiinflamasi,

antioksidan, antifertilitas, hepatoprotektif, antitumor, antileukemia,

7

antikanker, antimikroba, antivirus dan antijamur juga dapat sebagai

insektisida alami (Irawanto 2014b)

Selain sebagai tumbuhan ornamental dan obat, Acanthus ilicifolius juga

dapat sebagai bioindikator pencemaran. Jeruju termasuk jenis terpilih dari

lima jenis vegetasi mangrove yang mengalami tekanan lingkungan karena

peningkatan pencemaran limbah domestik, industri, runoff pertanian, dan

limbah toksik lainnya. Salah satu limbah toksik adalah logam berat dimana

nilai BCF (Bioconcentration Factor) untuk Pb pada tumbuhan mangrove

(2,40+0,75) lebih tinggi dari tumbuhan darat (1,42+0,15). Sehingga logam

berat yang toksik lebih cepat terakumulasi pada tumbuhan mangrove

(Agoramoorthy et al. 2009).

Steroid merupakan komponen aktif dalam tumbuhan yang telah digunakan

untuk penyakit diabetes, gangguan menstruasi, antibakteri dan antivirus

(Robinson, 1995). Oleh karena itu, tumbuhan jeruju dapat dipakai dalam

penelitian yang berhubungan dengan abnormalitas (DiPiro et al., 2005).

3. Morfologi Tanaman Jeruju

Tumbuhan berhabitus terna yang kuat, tidak lunak, batang bulat, tampak

jelas buku-buku batang, tumbuh tegak atau kadang-kadang merayap,

seringkali dilengkapi dengan akar nafas, berduri pada kedua sisi batang

sampai setiap duri terdapat pada helaian daun, tinggi tanaman dapat

mencapai 3 m. Helaian daun tunggal, letak daun bersilang berhadapan,

8

bentuk memanjang sampai lanset, selalu dilengkapi duri di bagian ujung

helaian daun bahkan pada semua bagian tepi daun, ukuran helaian daun 9-

30 x 4-12 cm, pertulangan daun menyirip, warna hijau tua, panjang

tangkai daun 3-15 mm. Perbungaan berupa bunga majemuk bulir, terletak

di ujung batang, setiap bagian bunga dilindungi oleh 2 buah daun

pelindung (brakteola) tepat di bawah kelopak bunga. Kelopak bunga

berjumlah 5, berlekatan, berukuran 1-1,5 cm, berwarna hijau keputihan.

Mahkota bunga berjumlah 5, berlekatan membentuk tabung mahkota

bunga, panjang tabung mahkota 0,5-1 cm, di bagian ujung tabung terdapat

rambut-rambut halus yang mengelilingi leher tabung mahkota, ukuran

mahkota bunga 3-4,5 cm (termasuk tabung mahkota bunga), warna helaian

mahkota bunga biasanya ungu dengan garis kuning di bagian tengah,

jarang berwarna putih, ukuran helaian mahkota bunga 2-3,5 cm. Tangkai

sari panjangnya 13-16 mm. Tangkai putik panjangnya 2-2,5 cm. Buah

merupakan tipe buah kapsul, terbuka sepanjang alur kampuh jika sudah

masak, ukuran buah 2,5-3 cm, biji berbentuk ginjal. Tanaman ini tumbuh

baik di dekat komunitas mangrove (Giesen dan Van Balen, 1991)

9

Gambar 1. Tanaman Jeruju (Biodiversitaswarrior, 2015)

Akar jeruju yang rasanya pahit, sifatnya dingin dan berkhasiat sebagai anti

radang (antiflogistik) dan peluruh dahak (ekspektorans). Biji berkhasiat

sebagai pembersih darah, kandungan kimia dari akar jeruju yaitu flavones

dan asam amino. Akar jeruju digunakan untuk pengobatan radang hati

(hepatitis) akut dan kronis, pembesaran hati dan limpa

(hepatosplenomegali), pembesaran kelenjar limfe (limfadenopali) termasuk

pembesaran kelenjar limfe pada tuberculosis (TBC) kulit (skrofuloderma),

gondokan (parotitis), sesak napas (asma bronkial), cacingan, nyeri lambung,

sakit perut, dan kanker, terutama kanker hati (Dalimartha, 2006).

4. Habitat tanaman jeruju

Acanthus ilicifolius tumbuh berkelompok dan sangat umum ditemukan di

sepanjang tepi muara dan laguna, di tanah berawa, dan hutan mangrove

dekat dengan pantai (Valkenberg dan Bunyapraphatsara 2002).

10

Tumbuhan semak bawah (undershrub) di mangrove (Jayaweera dan

Senaratna 2006). Jenis ini ditemukan dari zona menengah ke hulu muara

di pertengahan hingga daerah intertidal (Kovendan dan Murugan 2011).

Acanthus ilicifolius lebih memilih daerah dengan masukan air tawar yang

tinggi, dan jarang terendam air pasang, tersebar luas dan umum.

Ditemukan pada semua jenis tanah, terutama daerah berlumpur sepanjang

tepi sungai (Kovendan dan Murugan 2011). Tumbuh pada substrat

berlumpur dan berpasir di tepi daratan hutan bakau (Ardli et al. 2011).

Pertumbuhan ternaungi, hingga sepenuhnya terbuka (Yudhoyono dan

Sukarya 2013), toleran terhadap naungan (Kovendan dan Murugan 2011).

Jeruju dapat dijumpai dari India Selatan, Sri Lanka sampai Indo-China,

Indonesia, Filipina dan Australia Utara, jarang ditemukan di Malaysia. Di

Asia tropis dan Afrika Barat tropis (Jayaweera dan Senaratna 2006),

melalui Malaya sampai Polinesia . India, Semenanjung India, Ceylon, Sri

Lanka, Bangladesh, Pakistan, Burma, Malaya, Kepulauan Filipina,

Indonesia dan Australia (Jayaweera dan Senaratna 2006; Yudhoyono dan

Sukarya 2013)

Pengetahuan manfaat obat tumbuhan mangrove umumnya diperoleh

masyarakat setempat dari masyarakat luaryang mencari tumbuhan

tersebut, bukan sebagai pengetahuan tradisional warisan nenek

moyangnya. Dalam pengobatan tradisional masyarakat Segara Anakan,

11

yang merupakan keturunan prajurit Kerajaan Mataram, digunakan

tumbuhan darat sebagaimana masyarakat Jawa pada umumnya. Meskipun

demikian di Bogowonto dan Segara Anakan masyarakat mengetahui

potensi obat beberapa tumbuhan mangrove, seperti buah (biji) Acanthus

ilicifolius yang berpotensi untuk pengobatan hepatitis. Tumbuhan ini

berperan sebagai afrodisiak, asma, pembersih darah (buah), diabetes,

diuretik, dispepsia, hepatitis, lepra (buah, daun,akar), neuralgia, paralisis,

cacingan, rematik, penyakit kulit, gigitan ular, dan sakit perut (kulit kayu,

buah, daun) (Bandaranayake, 1998)

Keistimewaan A. ilicifolius dibandingkan dengan spesies yang lain bila

digunakan untuk obat antidiabetes yaitu A. ilicifolius memiliki kandungan

metabolit skunder lain yang juga baik untuk kesehatan diantaranya

antibakteri, antioksidan, antivirus, dapat membersihkan darah,

mempercepat penyembuhan luka dan lain-lain (Krisdaphong et al., 2013;

Bandaranayake, 1998). Ketersediaan di alam juga lebih melimpah

dibandingkan dengan spesies mangrove yang laian karena sifatnya yang

mudah berkembangbiak. A. ilicifolius memiliki kemampuan untuk

menyebar secara vegetatif karena perakarannya yang berasal dari batang

horizontal, sehingga membentuk bagian yang besar dan kukuh. Juga dapat

berkembangbiak secara generatif, dengan kemungkinan bunga diserbuki

oleh burung dan serangga, sehingga biji tertiup angin dan menyebar (Noor

et al., 2006). Selama ini A. ilicifolius dianggap sebagai tumbuhan perdu

yang tidak memiliki fungsi ekologis maupun tumbuhan pangan. Oleh

12

karena itu, penelitian pengembangan mengenai pemanfaatan A. ilicifolius

sebagai obat perlu selalu dilakukan untuk meningkatkan eksistensinya dan

memberikan manfaat yang lebih untuk manusia (Noor et al., 2006).

B. Biologi Mencit (Mus musculus)

Arrington (1972) menyatakan taksonomi mencit diklasifikasikan sebagai

berikut:

Kingdom : Animalia

Filum : Chordata

Kelas : Mamalia

Ordo : Rodentia

Famili : Muridae

Genus : Mus

Spesies : Mus musculus L.

Mus musculus liar atau Mus musculus L. rumah adalah hewan satu spesies

dengan Mus musculus laboratorium. Semua galur Mus musculus L.

Laboratorium sekarang ini merupakan keturunan dari Mus musculus L. liar

sesudah melalui peternakan selektif (Smith & Mangkoewidjojo, 1988).

Mencit termasuk dalam genus mus, sub famili murinae, famili muridae,

order rodentia. Mencit yang sudah dipelihara di laboratorium sebenarnya

masih satu famili dengan mencit liar. Sedangkan mencit yang sering

dipakai untuk penelitian biomedis adalah Mus musculus L. Berbeda

dengan hewan-hewan lainnya, mencit tidak memiliki kelenjar keringat.

Pada umur empat minggu berat badannya mencapai 18-20 gram. Jantung

13

terdiri dari empat ruang dengan dinding atrium yang tipis dan dinding

ventrikel yang lebih tebal. Hewan ini memiliki karakter yang lebih aktif

pada malam hari dari pada siang hari. Diantara spesies-spesies hewan

lainnya, mencit yang paling banyak digunakan untuk tujuan penelitian

medis (60-80%) karena murah dan mudah berkembang biak (Kusumawati,

2004).

Mencit (Mus musculus L.) merupakan hewan pengerat yang memiliki

rambut berwarna keabu-abuan atau putih, mata berwarna merah atau

hitam, kulit berpigmen dan perut sedikit pucat. Mencit dewasa pada umur

35 hari dan memiliki waktu kehamilan 19-21 hari. Mencit dapat

melahirkan 6-15 ekor. Mencit jantan dan betina siap melakukan kopulasi

pada umur 8 minggu. Siklus estrus atau masa birahi 4-5 hari dengan lama

estrus 12-14 jam. Fase estrus dimulai antara pukul 16.00-22.00 WIB.

Proses persetubuhan mencit jantan dan betina untuk tujuan fertilisasi atau

disebut dengan kopulasi terjadi pada saat estrus, dengan fertilisasi 2 jam

setelah kopulasi. Ciri-ciri terjadinya kopulasi adalah ditemukannya sumbat

vagina, yaitu cairan mani jantan yang menggumpal (Smith dan S.

Mangkoewidjojo. 1988).

Mencit merupakan hewan percobaan yang efisien karena mudah

dipelihara, tidak memerlukan tempat yang luas, waktu kehamilan yang

singkat, dan banyak memiliki anak perkelahiran. Mencit dan tikus putih

14

memiliki banyak data toksikologi, sehingga mempermudah

membandingkan toksisitas zat-zat kimia (Lu, 1995).

Gambar 2. Mencit (Mus musculus L) (Tetebano, 2011)

1. Perkembangan Fetus Mencit

Menurut Roberts (1971) dan Lu (1995) masa kehamilan mencit terdiri dari

3 tahap, yaitu :

A. Tahap blastula

Tahap ini dimulai setelah ovulasi dan dilanjutkan dengan perkembangan

membran zigot primitif di uterus. Pada tahap ini, fetus tidak rentan

terhadap senyawa teratogen, tetapi senyawa teratogen akan menyebabkan

kematian fetus akibat matinya sebagian sel fetus.

B. Tahap organogenesis

Tahap organogenesis merupakan tahap pembentukan organ-organ dan

sistem tubuh serta perubahan bentuk tubuh yang terjadi pada hari ke 6

sampai ke 16 kehamilan. Pada periode ini sel secara intensif mengalami

15

diferensiasi, mobilisasi, dan organisasi sehingga fetus sangat rentan

terhadap senyawa teratogen.

C. Tahap pertumbuhan fetus

Tahap ini merupakan tahap terjadinya perkembangan dan pematangan

fungsi jaringan, organ dan sistem yang tumbuh. Sehingga selama tahap

ini,senyawa teratogen tidak akan menyebabkan cacat morfologi, tetapi

dapat mengakibatkan kelainan fungsi seperti gangguan Sistem Syaraf

Pusat (SSP) yang mungkin tidak dapat dideteksi segera setelah kelahiran.

Morfologi fetus normal mencit disajikan pada Gambar 3.

Gambar 3. Morfologi Fetus Normal Mencit (Heupel, 2008)

16

Menurut Hafez (1970) dan Schenker & Forkheim (1998), perkembangan

fetus pada Rodentia dapat ditunjukkan pada Tabel 1.

Tabel 1. Tahap Perkembangan Fetus Pada Rodentia

Waktu

(Hari)

Tingkatan yang terjadi

1 Stadium pembelahan sel di dalam oviduk

2 Terbentuk morula 16 sel

3 Fetus masuk ke dalam uterus dan membentuk blastula

4-6 Blastomer terimplantasi dan terjadi gastrulasi

6-11 Organogenesis

12-16 Pembentukan somit belakang, mata, dan osifikasi awal dariskeleton

16-20 Perkembangan fetus

20-21 Kelahiran

2. Siklus Hidup Mencit

Siklus reproduksi mencit bersifat poliestrus dimana siklus estrus (berahi)

berlangsung sampai lima hari dan lamanya estrus 12-14 jam. Mencit

jantan dewasa memiliki berat 2040 gram sedangkan mencit betina dewasa

18-35 gram. Hewan ini dapat hidup pada temperatur 30 C lama hidup

mencit satu sampai tiga tahun, dengan masa kebuntingan yang pendek (18-

21 hari) dan masa aktifitas reproduksi yang lama (2-14 bulan) sepanjang

hidupnya. Mencit mecapai dewasa pada umur 35 hari dan dikawinkan

pada umur delapan minggu (jantan dan betina) (Smith & Mangkoewidjojo,

1988).

17

Mencit dewasa pada umur 35 hari dan memiliki waktu kehamilan 19-21

hari dan umur sapih 21 hari. Berat dewasa mencit rata-rata 20-30 gram dan

berat lahir 0,5-1.0 gram. Menurut Somala (2006) suhu rektal mencit 35-

39oC,

pernapasan 140-180 kali/menit dan denyut jantung 600-650 kali. Mencit

juga salah satu golongan pengerat yang bersifat omnivorus, nokturnal,

takut cahaya, dan dapat hidup dengan baik di ruangan dengan temperatur

antara 20-25oC dengan kelembaban ruang 45-55% (Keane, 2011).

3. Tulang Belakang

Tulang adalah jaringan yang tersusun oleh sel dan didominasi oleh matriks

kolagen ekstraseluler (kolagen tipe I) yang disebut sebagai osteoid.

Osteoid ini termineralisasi oleh deposit kalsium hydroxyapatite, sehingga

tulang menjadi kaku dan kuat. Tulang merupakan jaringan penghubung

yang terdiri dari fase mineral dan organik yang secara khusus dirancang

untuk berperan sebagai struktur penahan beban tubuh. Untuk memenuhi

tugas ini, tulang dibentuk dari kombinasi tulang kompak yang padat dan

tulang kanselus. Fase mineral dari kerangka berkontribusi dalam dua per

tiga dari berat kerangka, dan sepertiganya adalah matriks organik, yang

terutama mengandung kolagen tipe I dan sejumlah kecil protein non-

kolagen (Junqueira, 2007).

Sebagai unsur pokok kerangka orang dewasa, jaringan tulang menyangga

struktur berdaging, melindungi organ vital seperti yang terdapat di dalam

18

tengkorak dan rongga dada, menampung sumsum tulang dan tempat sel

darah dibentuk. Tulang juga berfungsi sebagai cadangan kalsium, fosfat

dan ion lainyang dapat dilepaskan atau disimpan dengan cara terkendali

untuk mempertahankan konsentrasi ion-ion penting ini di dalam cairan

tubuh. Karena metabolit tidak dapat berdifusi melalui matriks tulang yang

telah mengapur, pertukaran zat antara osteosit dan kapiler darah

bergantung pada komunikasimelalui kanalikuli yang merupakan celah-

celah silindris halus, yang menerobos matriks. Permukaan bagian luar dan

dalam semua tulang dilapisi lapisan-lapisan jaringan yang mengandung

sel-sel osteogenik, endosteum pada permukaan dalam dan periosteum pada

permukaan luar (Junqueira, 2007).

Kerangka manusia dewasa secara keseluruhan terdiri dari 80% tulang

kortikal dan 20% tulang trabekular (Clarke, 2008; Bayliss et al., 2012).

Setiap tulang memiliki rasio tulang kortikal dan tulang trabekular yang

berbeda sesuai situs dan jenis tulang itu sendiri sebagai contohnya pada

tulang vertebra perbandingan rasio tulang kortikal dan tulang trabekular

adalah 25:75. Rasio pada kaput femur adalah 50:50 dan 95:5 pada diafisis

radius (Clarke, 2008).

Setiap tulang selalu mengalami perbaikan bentuk selama hidup untuk

membantu adaptasi terhadap perubahan kekuatan biomekanik, proses

19

penggantian tulang yang tua dan yang mengalami kerusakan mikro dengan

tulang yang baru serta membantu menjaga kekuatan tulang (Clarke, 2008).

Pertumbuhan tulang merupakan proses pertambahan dalam ukuran dan

mineralisasi pada masa kanak-kanak dan remaja. Massa tulang bertambah

dari sekitar 80 gram saat lahir hingga 3000 gram pada puncak tertinggi

massa tulang yaitu sekitar umur 25 tahun (Clarke, 2008).

Pada saat fetus, tulang mengalami pertumbuhan dan perkembangan yang

disebut dengan istilah osifikasi. Awal dari proses osifikasi ini adalah

terjadinya perubahan jaringan mesenkim pada fetus menjadi jaringan

tulang atau menjadi jaringan kartilago yang selanjutnya akan menjadi

jaringan tulang (Junqueira, Carneiro, dan Kelley, 1998). Menurut Rugh

(1968), osifikasi pada mencit dimulai pada hari ke 11 sampai 17

kehamilan.

20

Struktur anatomi rangka fetus mencit disajikan pada Gambar 4.

Gambar 4. Anatomi Rangka Mencit (Mus musculus L.) (Amsel, 2012)

Pada fetus normal (kontrol) terdapat 7 tulang servik, 13 tulang thorak, 6

tulang lumbalis, 6 tulang sakral, dan 2 atau 3 tulang kaudal (Sukandar,

Fidrianny, Garmana, 2008).

Menurut Setyawati (2011), pemberian senyawa teratogen pada masa

organogenesis dapat menyebabkan penghambatan pada pertumbuhan

tulang. Adanya senyawa teratogen yang masuk melalui plasenta akan

menghambat transfer nutrisi dari induk ke fetus dan menghambat

metabolisme nutrisi yang penting bagi pertumbuhan dan perkembangan

organ fetus termasuk mineral untuk proses kalsifikasi (pembentukan

tulang). Kelainan pada tulang belakang fetus dapat dilihat dari jumlah

tulang dan terdapat pemanjangan atau pemendekan dari tulang belakang

tersebut.

21

Kalfas (2001) menyatakan bahwa tulang yang sedang aktif tumbuh

terdapat empat jenis komponen sel, antara lain prekusor osteogenik atau

sel osteoprogenitor, sel osteoblas, sel osteosit dan sel osteoklas serta

elemen hematopoetik dari sumsum tulang. Sel osteoprogenitor terdapat

pada semua permukaan tulang dan membentuk lapisan periosteum dan

endosteum. Sel osteoprogenitor hanya sanggup berproliferasi dan

berkembang menjadi sel osteoblas dan paling aktif selama pertumbuhan

tulang namun diaktifkan kembali semasa dewasa pada pamulihan fraktur

tulang dan cedera lainnya.

Sel osteoblas terdapat pada permukaan tulang, berasal dari prekusor sel

stroma di sumsum tulang. Sel osteobas menyekresikan sejumlah

besar`kolagen tipe I, protein, matriks tulang yang lain dan fosfatase alkali

dan akan berdiferensiasi menjadi sel osteosit (Ganong, 2002). Sel

osteoblas dapat menyintesis, menyekresi dan mengendapkan komponen

organik matriks tulang baru. Sel osteoblas berdiferensiasi secara in vivo

dan in vitro yang dapat di karakteristikkan dengan 3 tahap yaitu proliferasi

sel, maturasi matriks dan mineralisasi matriks (Eroschenko, 2010). Sel

osteoblas akan menghasilkan sel osteosit, matriks organik yang tidak

termineralisasi yang akan mengalami mineralisasi, memberikan kekuatan

tulang dan kekakuan tulang. Sel osteoblas juga berperan dalam aktivasi

resorpsi tulang oleh sel osteoklas (Kalfas, 2001).

22

Sel osteosit merupakan sel utama tulang dewasa yang terperangkap dalam

matriks tulang (Kalfas, 2001). Sel osteosit mempertahankan keseimbangan

kadar kalsium dan fosfat dalam tulang dan darah. Sel osteoklas adalah sel

multinukleus yang berperan dalam resorpsi, remodelling dan perbaikan

tulang (Eroschenko, 2010). Sel osteoklas melakukan pembaruan yang

mencakup menghilangkan matriks dalam tulang dan diikuti deposisi tulang

baru. Sel osteoklas menempati lekukan yang disebut lakuna Howshi,

terjadi akibat kerja erosif osteoklas tulang dibawahnya (Fawcett, 2002).

Pembentukan dan resorpsi tulang sel yang telibat adalah sel osteoblas dan

sel osteoklas yang berasal dari sumsum tulang (Ganong, 2002). Trombosit

kaya akan faktor pertumbuhan, oleh karena itu trombosit bertanggung

jawab untuk meregenerasi fraktur tulang karena trauma. Seumur hidup,

tulang tetap mengalami remodelling intern dan pembaruan yang mencakup

menghilangkan matriks tulang pada banyak tempat, diikuti

penggantiannya berupa deposisi tulang baru. Agen resorpsi tulang dalam

proses ini adalah sel osteoklas. Bentuk tulang dipertahankan selama

pertumbuhan oleh remodelling yang mencakup deposisi tulang pada

beberapa tempat di bawah periosteum dan absorpsi tulang pada daerah lain

(Fawcett, 2002).

23

Kerusakan tulang merupakan suatu kondisi patologik hilangnya struktur

tulang yang dapat disebabkan karena faktor sistemik maupun faktor

mekanis. Terjadinya remodelling tulang karena adanya tekanan yang terus

menerus dan aktivitas hormon yang selalu berubah. Proses remodeling

tulang melibatkan interaksi sel osteoblas dan sel osteoklas (Ganong,

2002).

24

III. METODE PENELITIAN

A. Waktu dan Tempat Penelitian

Penelitian ini dilaksanakan pada bulan November - Desember 2017, di

Laboratorium Kimia Organik, Jurusan Kimia FMIPA Universitas

Lampung untuk pembuatan ekstrak daun jeruju dan di Laboratorium

Zoologi, Jurusan Biologi FMIPA Universitas Lampung untuk tempat

pemberian perlakuan pada mencit dan pengamatan.

B. Alat dan Bahan

1. Alat-Alat

Alat yang akan digunakan dalam penelitian ini adalah kandang mencit

yang berukuran 50 x 30 cm beserta penutup yang terbuat dari kawat,

tempat makan dan minum mencit sebanyak 20 unit yang akan terbagi

dalam 4 kelompok, seperangkat alat bedah, sonde lambung, kertas label,

kertas milimeter blok, penggaris, jangka sorong, timbangan digital,

kamera, bak parafin, pena dan buku.

25

2. Bahan

Bahan yang digunakan adalah 20 ekor mencit betina dan 20 ekor jantan

berumur 3-4 bulan dengan berat sekitar 40 gram, sekam padi sebagai

alas kandang mencit, pelet sebagai pakan mencit, air minum mencit,

ekstrak Daun Jeruju, aquades, kloroform, kapas, alkohol 90%, larutan

KOH 1%, larutan Alizarin Red dan Alkohol 70%.

C. Persiapan Kandang dan Hewan Uji

Kandang mencit beserta penutupnya sebanyak 20 unit dibersihkan dengan

alkohol dan diberi alas berupa sekam padi. 20 ekor mencit jantan dan 20

ekor mencit betina disiapkan dalam kondisi yang fertil, berumur 10

minggu, dan berat sekitar 40 gram. Mencit kemudian diaklimatisasi

selama 1 minggu dengan diberi pakan berupa pelet dan air minum setiap

harinya. Aklimatisasi ini bertujuan agar mencit melakukan penyesuaian

kondisi dengan lingkungan sekitar.

Besarnya sampel ditentukan berdasarkan rumus Frederer (1977) yaitu t (n-

1) ≥15. Sehingga setiap perlakuan terdiri dari 5 ekor mencit betina yang

hamil, yaitu 5 ekor mencit betina hamil tanpa perlakuan (kontrol), 5 ekor

mencit betina hamil dengan perlakuan 3,75 mg/30 gram BB dalam 0,4 ml

aquades, 5 ekor mencit betina hamil dengan perlakuan 7,5 mg/30 gram BB

dalam 0,4 ml aquabides, dan 5 ekor mencit betina hamil dengan perlakuan

15 mg/30 gram BB dalam 0,4 ml aquades.

26

D. Persiapan dan Pembuatan Ekstrak Daun Jeruju

Pada penelitian ini untuk mendapatkan ekstrak daun Jeruju digunakan

metode evaporasi. Daun jeruju dibersihkan, dicuci, dan dijemur hingga

kering. Setelah kering, daun jeruju kemudian digiling hingga menjadi

serbuk. Kemudian dilakukan maserasi dengan cara merendam 500 gram

serbuk daun jeruju dalam 2 liter larutan etanol selama 24 jam. Kemudian

disaring menggunakan kertas saring. Cairan hasil saringan tersebut

kemudian dipekatkan dengan cara evaporasi menggunakan alat rotary

evaporator selama 4 jam dengan suhu 50oC dan tekanan 120 atm. Setelah

itu didapatkan ekstrak daun jeruju sebanyak ± 200ml.

E. Proses Kopulasi Mencit

Satu ekor mencit betina disatukan secara alami dengan satu ekor mencit

jantan ke dalam satu kandang dan diberi pakan berupa pelet dan air

minum. Proses persetubuhan mencit jantan dan betina untuk tujuan

fertilisasi atau disebut dengan kopulasi mencit ini terjadi pada sore

menjelang petang. Hal ini disebabkan proses kopulasi mencit terjadi pada

fase estrus, dimana fase estrus dimulai antara pukul 16.00-22.00 WIB

(Mangkoewidjojo, dan Smith, 1988).

27

F. Pembuktian Kopulasi Mencit

Pada keesokan pagi setelah mencit betina dan jantan disatukan, dilakukan

pengamatan di daerah vagina pada mencit betina. Sumbat vagina

(copulatory plug atau vagina plug) yaitu sumbat kekuningan pada vagina

yang merupakan campuran sekret betina dengan ejakulat jantan yang

mengeras. Apabila ditemukan sumbat vagina, maka mencit dinyatakan

telah melakukan kopulasi dan dihitung sebagai kehamilan hari ke-0

(Silvia, 2011). Selain dilihat dari adanya sumbat vagina, kehamilan

mencit juga dapat diketahui dengan cara mengangkat ekstrimitas depan

mencit dan dilihat apakah kelenjar mammae turun, apabila turun maka

mencit dinyatakan hamil. Selama kehamilan, kelenjar mammae

mengalami perkembangan dan perubahan morfologi untuk mempersiapkan

laktasi saat melahirkan (Leeson, 1986). Mencit betina yang dinyatakan

terbukti kopulasi, dipelihara dalam kandang tersendiri .

G. Pemberian Perlakuan

Pemberian ekstrak daun jeruju dilakukan dengan cara dicekok (secara oral)

menggunakan spuit yang ujungnya ditumpulkan dan diberi pipa karet

kecil. Untuk setiap perlakuan digunakan 4 ekor mencit dengan 5 kali

pengulangan. Perlakuan pencekokan ini dilakukan satu kali sehari selama

14 hari dengan pemberian dosis yang berbeda-beda untuk setiap kelompok

28

perlakuan. Menurut Christijanti ( 2009 ) dosis yang diberikan pada tikus

putih sebagai berikut:

1. Kelompok kontrol dengan diberi 0 ml/ 200 grBB aquabides (A)

2. Kelompok dosis 10 mg/200 grBB dalam 1 ml aquabides (B)

3. Kelompok dosis 20 mg/200 grBB dalam 1 ml aquabides (C)

4. Kelompok dosis 40 mg/200 grBB dalam 1 ml aquabides (D)

Dosis ini diberikan pada hewan uji tikus putih yang beratnya 5 kali mencit

(sekitar +200gr), dikonversi ke berat badan mencit sehingga dosis ekstrak

daun jeruju yang digunakan adalah sebagai berikut:

1. Kelompok kontrol, diperlakukan dengan diberi 0,3ml aquabides

2. Kelompok dosis 3,75 mg/30 grBBdalam 0,3 ml aquabides (P1)

3. Kelompok dosis 7,5 mg/30 grBBdalam 0,3 ml aquabides (P2)

4. Kelompok dosis 15 mg/30 grBBdalam 0,3 ml aquabides (P3)

Hewan uji yang digunakan dalam penelitian ini adalah mencit dengan

berat sekitar 30 gram, sehingga rumus perhitungan volume penggunaan

aquabidesnya yaitu :

Volume Pemberian = Berat x Persen Pemberian

= 30 gram x 1%

= 30 gram x (1 ml/100 gram)

= 0,3 ml

29

H. Pengamatan

Pembedahan terhadap mencit betina dilakukan dengan menggunakan

seperangkat alat bedah setelah kehamilan hari ke 18. Seluruh mencit baik

dari kelompok kontrol maupun perlakuan dibius menggunakan kloroform.

Mencit dibedah dan fetus dikeluarkan dari uterus, kemudian dibersihkan

dengan air mengalir dan dilakukan penimbangan berat badan dan

pengukuran panjang fetus. Selanjutnya dikeluarkan organ dalam fetus dan

dilakukan preparasi tulang belakang fetus dengan pewarna Alizarin Red.

Pembuatan larutan Alizarin Red dengan cara menambahkan 6 mg bubuk

Alizarin Red ke dalam 1 liter larutan KOH 1% (Manson, 1982).

Alizarin Red merupakan pewarna yang banyak digunakan untuk mewarnai

tulang pada fetus hewan uji. Ruas tulang yang terwarnai merupakan

tulang rawan yang telah mengalami penulangan sehingga akan berwarna

merah tua karena zat warna terikat oleh kalsium pada matriks tulang.

Larutan KOH 1% yang digunakan berfungsi agar otot pada fetus menjadi

transparan dan tulang belakang fetus dapat terlihat dengan jelas

(Setyawati, 2011). Pengamatan struktur tulang belakang fetus dilakukan

secara deskriptif untuk melihat ada atau tidaknya kelainan dibandingkan

dengan fetus normal (kontrol).

30

I. Rancangan Percobaan

Rancangan percobaan yang digunakan dalam penelitian ini adalah

Rancangan Acak Lengkap dengan 4 perlakuan dan masing-masing

perlakuan dilakukan pengulangan sebanyak 5 kali. Dalam penelitian ini

terdapat 20 ekor mencit yang dibagi menjadi 4 kelompok, yaitu 1

kelompok sebagai kontrol dan 3 kelompok sebagai perlakuan.

Berikut merupakan susunan rancangan percobaan:

AU1 BU1 CU1 DU1

DU2 AU2 BU2 CU2

AU3 CU5 DU3 BU3

BU4 DU4 CU3 AU4

CU4 BU5 AU5 DU5

Keterangan :

P = Perlakuan yang digunakan (B; C; D)

K = Kontrol (A)

U = Ulangan (U1,U2,U3,U4,U5).

31

J. Analisis data

Data hasil penelitian berupa anatomi tulang belakang fetus dianalisis

secara deskriptif.

K. Diagram Alir Penelitian

Hasil

Analisis data

Pengamatan berat dan panjang fetus serta kelainan pada strukturtulang belakang

Pemberian perlakuan berupa ekstrak daun jeruju

Pembuktian kopulasi mencit

Proses kopulasi mencit

Persiapan dan pembuatan ekstrak daun jeruju

Persiapan kandang dan hewan uji berupa mencit

Persiapan penelitian

V. KESIMPULAN DAN SARAN

A. KESIMPULAN

Berdasarkan hasil penelitian dapat diambil kesimpulan bahwa

pemberian ekstrak daun jeruju pada mencit hamil tidak menyebabkan

kelainan pada struktur tulang belakang fetus mencit (Mus musculus

L.).

B. SARAN

Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut mengenai:

1. Menaikkan jumlah dosis lebih dari 15 mg/ 30 gr BB untuk

mengetahui efek teratogenik

2. Efek teratogenik ekstrak daun jeruju terhadap fetus mencit dengan

pengamatan mengenai kelainan pada seluruh tulang dan organ

dalam untuk memaksimalkan kemungkinan kecacatan yang terjadi

pada fetus mencit.

3. Zat atau kandungan spesifik dalam ekstrak daun jeruju yang dapat

menyebabkan efek teratogen terhadap fetus mencit.

DAFTAR PUSTAKA

Agoramoorthy G, F.A Chen, V. Venkatesalu, P.C Shea. 2009. Bioconcentration ofheavy metals in selected medicinal plants of India.

Agusta, A. 2011. Perbandingan Komponen Kimia Rimpang Temu Hitam(Curcuma aeruginosa Roxb.) Dan Temu Putih (C. zedoaria) yangTumbuh di Indonesia dengan Gajatsu (C. zedoaria) Asal Jepang.Artikel Ilmiah. Laboratorium Fitokimia, Bidang Botani, PuslitBiologi-LIPI.

Amsel, S. 2012. Movie Worksheets, What Owls Eat -The Bones of A Mouse.(Internet).http://visual.Merriamwebster.com/images/animalkingdom/rodents-lagomorphs/ rodent/skeleton-rat.jpg. Diakses pada 05Oktober 2017 Pukul 17.30 wib.

Anonim, 2015. Acanthus ilicifolius L. http://www.biodiversitywarriors.org/isi-katalog.php?idk=3789&judul=Jeruju. Diakses pada tanggal 05Oktober 2017 Pukul 19.30 wib.

Anonim, 2015. Faktor yang mempengaruhi tulang.http://milatakum.wordpress.com/2015/12/03/faktor-yang-mempengaruhi- pertumbuhan-tulang-faktor-genetik-terhadap-ukuran-tubuh/. Diakses pada tanggal 06 Mei 2018

Ariens, E.J. 1986. Toksikologi Umun Pengantar, terjemahan Wattimena J.R.,Gajah Mada Univ. Press., Yogyakarta.

Arrington, L. R. 1972. Introductory Labolatory Animal. The Breeding, Care andManagement of Experimental Animal Science. The InterstatePrinters and Publishing Inc., New York

Ardli, E.R.E Yani, A. Widyastuti. 2011. Density and Spatial Distribution of Derristrifoliata and Acanthus ilicifolius as a Biomonitoring Agent ofMangrove Damages at the Segara Anakan lagoon (Cilacap,Indonesia). 2nd International Workshop for Conservation Geneticsof Mangroves

45

Bandaranayake, W.M. 1998. Traditional and medical uses of mangroves.Mangroves and Salt Marshes 2: 133-148

Clarke B., 2008, Normal Bone Anatomy and Physiology, Clin J Am Soc Nephrol3: 131-139.

Dawes, B. 1952. A Hundred Years of Biology. University of London Inc.London.

Dewoto, H.R. 2007. Farmakologi dan Terapi: Vitamin dan Mineral Edisi 5. BalaiPenerbit FK UI. Jakarta.

DiPiro, T., Joseph, Wells, G., Barbara, Hamilton, W., Cindy, Schwinghammer, l.,Terry. 2005. Pharmacotherapy Handbook, Sixth Edition, New York

Fawcett. 2002. Buku ajar histologi. Edisi 12. Terjemahan Jan Tambayong. Jakarta:EGC

Federer, W.T. 1977. Experimental Design Theory And Application, Third Edition.Oxford and IBH Publishing Co. New Delhi Bombay Calcuta.

Dalimartha S. 2006. Atlas Tumbuhan Obat Indonesia. Jakarta : Puspa Swara.

Ganong William F. 2002. Buku ajar fisiologi kedokteran. Edisi 20. TerjemahanBrahm U. Jakarta: EGC. hal. 408-412

Giesel, 1991. http://www.plantamor.com/database/database tumbuhan / daftartumbuhan _ i618?genuspage=all&g=Acanthus&s=ebracteatus. Diakses pada ta nggal 30 September 2017 Pukul 20.30 wib.

Giesen, W. & B. van Balen. 1991. Several Short Surveys of Sumatran WetlandsNotes and Observations. Laporan Proyek PHPA/AWB SumatraWetlands.

Guyton, A.C. 1990. Fisiologi Kedokteran. Terjemahan Dharrna, A., dan P.,Lukmanto. EGC. Jakarta.

Hafez, E.S.E. 1970. Reproduction and Breeding Techniques for LaboratoryAnimals. Lea & Febinger. Philadelphia.

Heupel. 2008. Root Cause Analysis Handbook: A Guide to Efficient and EffectiveIncident Investigation. Connecticut Philip Jan Rothstein. FBCI.

Hidayat, S Yuzammi, S Hartini, IP Astuti. 2004. Tanaman Air Kebun Raya

46

Bogor. Vol. 1 No. 5. Kebun Raya Bogor. Bogor.

Hutahean, S. 2002. Prinsip-Prinsip Uji Toksikologi Perkembangan. FMIPAUniversitas Sumatera Utara. Sumatera Utara.

Irawanto R. 2014a. Kemampuan Tumbuhan Akuatik (Acanthus ilicifolius danCoix lacryma-jobi) Terhadap Logam Berat (Pb dan Cd).Prosiding Seminar Nasional Pascasajana XIV-ITS Surabaya.

Irawanto R. 2014b. Phytomedicine of Acanthus ilicifolius dan Coix lacryma-jobi.Prosiding 2nd International Biology Conference-ITS Surabaya.

Jayaweera, D.M.A, L.K Senaratna. 2006. Medicinal Plants (Indigenous andExotic)

Used in Ceylon. The National Science Foundation. Colombo

Junqueira L.C., J. Carneiro., R.O Kelley. 1998. Histologi dasar. Terjemahan JanTambayong. Edisi 8. Jakarta: Penerbit Buku Kedokteran EGC.Hlm 236-237.

Kalfas, I.H., 2001, Principle of bone healing, Neurosurg. Focus, 10 (4): 1–4.

Keane, T. 2011. Mouse Genomic Variation and Its Effect on Phenotipes and GeneRegulation. International Weekly Journal of Science: 477(289-294).

Kovendan K, K Murugan. 2011. Effect of Medicinal Plants on the MosquitoVectors from the Different Agroclimatic Regions of Tamil Nadu,India..

Kusumawati, D. ,2004. Bersahabat dengan Hewan Coba, Yogyakarta.

Lu, F.C. 1995. Toksikologi Dasar, Asas, Organ Sasaran dan Penilaian ResikoEdisi II. Penerbit UI. Jakarta. p 155-157.

Loomis, T.A. 1978. Toksikologi Dasar Edisi ke-2. Terjemahan Imono, A. IKIPSemarang Press. Semarang.

Maradjo, 1985. Flora Indonesia : Tanaman Rempah-Rempah, P.T Gita Karya danPT Citra Lamtoro Gung Persada

Mangkoewidjojo dan Smith. 1988. Pemeliharaan, Pembiakan, dan PenggunaanHewan Percobaan di Daerah Tropis. UI Press. Jakarta

Manson, J.M, H, Zenick and R.D. Costlow, Teratology Test Methods forLaboratory Animals, Ravent Press, New York, 1982

47

Muna, L., Astirin, O.P., dan Sugiyarto. 2011. Uji Teratogenik Ekstrak Pandanusconoideus Varietas Buah Kuning Terhadap Perkembangan EmbrioTikus Putih (Rattus norvegicus). Nusantara Bioscience. 2. pp 126-134.

Noor, Y.R., M. Khazali dan N.N. Suryadiputra. 2006. Panduan PengenalanMangrove di Indonesia. Wetlands International IndonesiaPrograme. Bogor.

Ritter, E.J. 1977. Altered Biosynthesis In: Wilson J.G., Fraster F.C. (eds).Handbook of Teratology. Plenum Press. New York.

Rasyaf. 1990. Bahan Makanan Unggas di Indonesia, Penerbit Kanisius,Yogyakarta.

Robinson. 1995. Kandungan Organik Tumbuhan Tinggi. diterjemahkan olehPadmawinata, K., Sudiro, I.. Penerbit ITB, Bandung hal 71-72

Roux, D. 2011. A High-Resolution Anatomical Atlas of the Transcriptome in theMouse Embryo. J PLOS Bio

Rugh, R. 1968. The Mouse its Reproduction and Development. Minneapolis:Burgess Publishing Company

Sadler, T.W. 2000. Embriologi Kedokteran Langman Ed. 7 : MalformasiKongenital. EGC. Jakarta.

Sadler, T.W. 2000.Embriologi Kedokteran Langman Ed. 7 : Masa Embriogenik.EGC. Jakarta.

Sagi, M. 1997. Embriologi Perbandingan Pada Vertebrata. Fakultas Biologi,Universitas Gadjah Mada. Yogyakarta.

Salomo Hutahean. 2002. Prinsip-prinsip Uji Toksikologi Perkembangan. USUDigital Library.

Schenker, E.B. and Forkheim, K.E. 1998. Early Development of MiceEmbryo In Microgravity Environment On Sts-80Space Flight. http: // www .asgsb . org / embryo / htm. Diakses pada: 05 Oktober2017 Pukul 21.00 wib.

Setiyohadi, B. 2009. Peran Kalsium dan Vitamin D Pada Metabolisme Tulang.Subbagian Reumatologi, Bagian Ilmu Penyakit DalamFKUI/RSCM. Jakarta.

48

Setyawati, I. 2011. Penampilan Reproduksi dan Perkembangan Skeleton FetusMencit Setelah Pemberian Ekstrak Buah Nanas Muda. JurnalVeteriner. 12 (3). pp 192-199.

Siburian, J. dan Marlinza, R. 2009. Efek Pemberian Ekstrak Akar Pasak Bumi(Eurycoma Longifolia Jack) Pada Tahap Prakopulasi TerhadapFertilitas Mencit (Mus Musculus L.) Betina. Biospesies. 2 (2). pp24-30.

Smith, B. J. dan S. Mangkoewidjojo. 1988. Pemeliharaan pembiakan danpenggunaan hewan percobaan di daerah tropis. UniversitasIndonesia Press, Jakarta

Somala, L., 2006, Sifat Reproduksi Mencit (Mus musculus) Betina yangMendapat Pakan Tambahan Kemangi (Ocimum basilicum) Kering,Skripsi, Fakultas Peternakan Insitut Pertanian Bogor.

Sukandar, E.Y., Fidrianny, I., dan Garmana, A.N. 2008. Pengaruh KombinasiEkstrak Umbi Lapis Bawang Putih Dan Ekstrak Rimpang KunyitTehadap Janin Mencit Swiss-Webster. JKM. 8(1). pp 36-44.

Suryawati, S. 1990. Pemakaian Obat Pada Kehamilan. LaboratoriumFarmakologi Klinik Fakultas Kedokteran Universitas GadjahMada. Yogyakarta.

Tetebano, R. 2011. Rancangan Percobaan Racun Sianida Pada Mencit.Diakses pada tanggal 05 Oktober 2017.

Van Valkenburg, J. L. C. H. & Bunyapraphatsara, N. (eds), 2001. Plant Resourcesof South-East Asia no. 12 (2). Medicinal and poisonous plants 2.Backhuys Publishers, Leiden, The Netherlands

Wiharto, K. 1986. Beternak Ayam Broiler. Penerbit Kanisius, Yogyakarta

Wilson, J.G. 1973. Environment and Birth Defects. Academic Press. New York.pp.6-8.

Wirasuta, I.M.A.G. dan K. Suadarmana. 2007. Analisis Toksikologi Klinik:Tantangan Baru Bagi Farmasi Indonesia. Acta ParmaceuticaIndonesia. 32 (2). pp 59-62.

Yorijuly. 2012. Perhitungan Dosis UntukHewan Percobaan. http:/yorijuly14.Wordpress.com/2012/06/02perhitungan-dosis-untuk-hewan-percobaan. Diakses pada tanggal 20/04/2018.

Yudhoyono A, D.G Sukarya. 2013. 3500 Plant Species of The BotanicGardensof Indonesia. PT. Sukarya dan Sukarya Pendetama. Jakarta

ABSTRAK (Skripsi).pdfBAB 1 (Skripsi).pdfBAB II (Skripsi).pdfBAB III (Skripsi).pdfBAB V (Skripsi).pdfDAFTAR PUSTAKA.pdf