pewarnaan gram kelompok 2 11 1

PEWARNAAN GRAM

Mikrobiologi 11-1

Kelompok 2 : Annisa Indah Pratiwi Billy Dimas Anggoro Della Nadya Ayu Aprillia Diah Meiliska Aziz Farlan Sembiring Firda Hidayati Insani Prambudi Cahyo Laksono Presetia

Mengapa Perlu Dilakukan Pewarnaan Bakteri ?

Mikroorganisme seperti bakteri umumnya sulit dilihat dengan mikroskop cahaya, karena tidak mengadsorbsi atupun membiaskan cahaya. Alasan inilah yang menyebabkan zat warna digunakan untuk mewarnai mikroorganisme karena zat warna mengadsorbsi dan membiaskan cahaya sehingga kontras mikroorganisme dengan lingkungannya ditingkatkan. Mikroorganisme dapat diwarnai melalui berbagai teknik pewarnaan. Salah satunya adalah pewarnaan gram.

Pewarnaan

Negatif Positif

Sederhana

Khusus

Diferensial

Kapsul Flagela Spora

Gram

Tahan Asam

Sejarah

Metode pewarnaan ’’Gram’’ diberi nama berdasarkan penemunya, ilmuwan Denmark Hans Christian Gram (1853–1938) yang mengembangkan teknik ini pada tahun 1884 untuk membedakan antara pneumokokus dan bakteri Klebsiella pneumonia.

Sejarah

PengertianBakteriGram Positif

BakteriGram NegatifPereaksi

yag dibutuhkan

PrinsipAlat & BahanBagan Kerja

Apa Itu Pewarnaan Gram ?

Pewarnaan Gram merupakan pewarnaan diferensial yang banyak digunakan dalam laboratorium mikrobiologi guna pencirian dan identifiknsi bakteri. Pewarnaan gram memilahkan bakteri menjadi kelompok Gram positif dan Gram negatif. Bakteri Gram positif berwarna ungu karena bakteri tersebut mengikat kompleks zat warna kristal ungu-iodium, sedangkan bakteri Gram negatif berwarna merah karena mengikat zat warna sekunder yang berwarna merah. Perbedaan hasil dalam pewarnaan ini disebabkan perbedaan struktur dinding sel bakteri dan perbedaan kandungan asam ribonukleat antara bakteri Gram positif dan Gram negatif.

Sejarah



yag dibutuhkan


Ciri Bakteri Gram Positif

Struktur dinding selnya tebal, sekitar 15-80 nm, berlapis tunggal atau monolayer.

Dinding selnya mengandung lipid yang lebih normal (1-4%), peptidoglikan ada yang sebagai lapisan tunggal. Komponen utama merupakan lebih dari 50% berat ringan. Mengandung asam tekoat.

Bersifat lebih rentan terhadap penisilin. Pertumbuhan dihambat secara nyata oleh zat-zat

warna seperti ungu kristal. Komposisi nutrisi yang dibutuhkan lebih rumit. Lebih resisten terhadap gangguan fisik. Resistensi terhadap alkali (1% KOH) larut Tidak peka terhadap streptomisin Toksin yang dibentuk Eksotoksin Endotoksin

Sejarah



yag dibutuhkan


Staphylococus : penyebab impetigo, keracunan makanan,

bronkitis

Streptococus : penyebab pneumonia, meningitis, karies gigi

Enterococus : penyebab enteritis

Listeria : penyebab listeriosis

Basillus : penyebab anthrax ( Basillus antharx)

Clostridium : penyebab tetanus ( Clostridium tetani),

botulisme

Mycobacterium : penyebab tuberkulosa, difteri

Mycoplasma : penyebab jerawat, peumonia

Contoh - Contoh Bakteri Gram Positif & Perannya Dalam Kehidupan Manusia

Ciri Bakteri Gram Negatif

Struktur dinding selnya tipis, sekitar 10 – 15 mm, berlapis tiga atau multilayer.

Dinding selnya mengandung lemak lebih banyak (11-22%), peptidoglikan terdapat didalam

lapisan kaku, sebelah dalam dengan jumlah sedikit ± 10% dari berat kering, tidak mengandung asam tekoat.

Kurang rentan terhadap senyawa penisilin. Pertumbuhannya tidak begitu dihambat oleh zat

warna dasar misalnya kristal violet. Komposisi nutrisi yang dibutuhkan relatif sederhana. Tidak resisten terhadap gangguan fisik. Resistensi terhadap alkali (1% KOH) lebih pekat Peka terhadap streptomisin Toksin yang dibentuk Endotoksin

Sejarah



yag dibutuhkan


Salmonella : penyebab thypus (Salmonella thyposa), salmonelosis

Escherichia : penyebab gastroenteritis / radang saluran cerna

( Escherichia coli)

Shigella : penyebab disentri

Pseudomonas : penyebab infeksi luka bakar

Hellicobacter : penyebab tukak lambung

Haemophilus : penyebab bronkhitis , pneumonia (Heumophilus

influenzae)

Bordetella : penyebab batuk rejan (Bordetella pertusis)

Chlamydia : penyebab pneumonia, uretritis, trakoma

Contoh - Contoh Bakteri Gram Negatif & Perannya Dalam Kehidupan Manusia

Pereaksi Apa Saja yang Dibutuhkan ?

Zat warna utama (kristal violet). Mordan (larutan Iodin), yaitu senyawa

yang digunakan untuk mengintensifkan warna utama.

Pencuci/ peluntur zat warna (alcohol / aseton), yaitu solven organik yang digunakan untuk melunturkan zat warna utama.

Zat warna kedua/ cat penutup (safranin atau karbol fuchsin) digunakan untuk mewarnai kembali sel-sel yang telah kehilangan cat utama setelah perlakuan dengan alkohol.

Sejarah



yag dibutuhkan


Pewarnaan Gram Menurut Preston & Morrel

Prinsip Dasar

Gram positif adalah segolongan akteri yang menahan persenyawaan iodine complex. Yang disebut iodine complex yang terbentuk dari KI dan I2 dengan warna Kristal Violet Ammonium Oksalat sewaktu dicuci (pewarnaan). Gram negatid adalah segolongan bakteri yang melepaskan persenyawaan dan zat warna tadi tetapi mengikat zat warna berikutnya yaitu Karbol Fukhsin encer.

Sejarah



yag dibutuhkan


Alat dan Bahan

Bahan :

1. Air suling

2. Label

3. Kapas

4. Kertas singkong

5. Kristal violet

6. Karbol Fuchsin

7. Lugol

8. Kertas saring

9. Aseton alkohol

Alat :1. Mikroskop2. Kaca alas datar3. Pensil glass4. Tabung reaksi5. Ose6. Baki7. Bak pewarnaan

Sejarah



yag dibutuhkan


Bagan Kerja

Kapas+alkohol 70%

Kaca alas datar

Dikeringkan Dibagi 3 bagian LF Suspe

si bakteri 24 jam

Membuat

ulasan

Proses fiksasiDiteteskan kristal violet 2-3 tetes, 30

detik

Diteteskan lugol 3 tetes,

30 detik

Dibilas dengan air

suling

Dicelupkan ke dalam aseton :

alkohol (1:3)

Dibilas lagi dengan air

suling

Diteteskan karbol

fuchsin 2 tetes, 30

detik

Dibilas sampai tetes

terakhir jernih

Dikeringkan dengan

kertas saringDiberi minyak imersi 1

tetes

Diamati pada mikroskop

(pembesaran 1000x)

Ada Pertanyaan ?

TERIMAKASIH

pewarnaan gram kelompok 2 11 1

Education