laporan mikrobiologi pewarnaan, katalase, motilitas bakteri

Upload: okta-prisma-dyanti

Post on 06-Jul-2018

240 views

Category:

Documents


0 download

TRANSCRIPT

  • 8/17/2019 Laporan Mikrobiologi Pewarnaan, Katalase, Motilitas Bakteri

    1/24

  • 8/17/2019 Laporan Mikrobiologi Pewarnaan, Katalase, Motilitas Bakteri

    2/24

    warna merah muda dan ungu pada sel yang diamati. 6da beberapa bakteri yang

    tingkat sensitiitasnya menurun ketika terjadi pembelahan sel, memberikan hasil

    5ram positif meskipun dalam keadaan normal adalah 5ram negatif !Smith ( 7ussey,

    #$$&'. Karakterisasi memberikan informasi bagaimana proses identifikasi secara

    akurat, mengingat karkaterisasi menggunakan beberapa uji. Dari uji yang sederhana

    hingga kompleks, dengan prosedur dan bahan yang berbeda-beda !Song ( 8eff,

    #$$&'.

    Dari karakterisasi pula, dapat diketahui bahwa beberapa jenis bakteri sangat

    sensitif terhadap nutrisi yang diinginkan ! picky eater '. 4akteri yang menyebabkan

    lepra misalnya, hanya dapat tumbuh pada media yang telah diinjak atau diberi bau

    kaki, atau bahkan beberapa bakteri yang harus diberi suatu pengayaan nutrisi seperti

    agar darah !4ere9ow, #$%&',

    B. Rumusan Masalah

    4erdasarkan latar belakang yang dibuat, maka rumusan masalah adalah :

    %. 4agaimana prosedur pewarnaan sederhana, pewarnaan negatif, dan pewarnaan

    gram;

    #. 4agaimana prosedur uji katalase;

    +. 4agaimana cara membedakan bakteri katalase positif dan katalase negatif;

    *. 4agaimana prosedur uji motilitas bakteri;

    &. 4agaimana motilitas bakteri diamati oleh keempat praktikan;

    C. Tujuan

    4erdasakan rumusan masalah yang diperoleh, maka tujuannya adalah :

    %. Memahami prosedur pewarnaan sederhana, pewarnaan negatif dan pewarnaan

    gram.

    #. Memahami prosedur uji katalase bakteri.

    +. Membedakan bakteri katalase positif dan katalase negatif.

    *. Memahami prosedur uji motilitas bakteri

    &. Mengamati motilitas bakteri

    D. Manfaat

    4erdasarkan tujuan di atas, maka manfaat yang dapat diperoleh yaitu :

    %. Mahasiswa mampu melakukan teknik pewarnaan sederhana dan mengetahui

     bentuk sel bakteri.

    #. Mahasiswa mampu melakukan teknik pewarnaan 5ram dan mengetahui dasar 

    kimiawi pewarnaan 5ram.

  • 8/17/2019 Laporan Mikrobiologi Pewarnaan, Katalase, Motilitas Bakteri

    3/24

    +. Mahasiswa mampu membedakan # kelompok bakteri 5ram positif dan 5ram

    negatif.

    *. Mahasiswa mampu melakukan uji katalase.

    &. Mahasiswa mampu melakukan uji motilitas dan mengetahui motilitas mikroba.

  • 8/17/2019 Laporan Mikrobiologi Pewarnaan, Katalase, Motilitas Bakteri

    4/24

    BAB II

    TINJAUAN PUTA!A

    ".# Pe$arnaan Bakter%

    4akteri yang ada di alam memiliki berbagai bentuk, basil !tongkat' meliputi basil

    tunggal, diplobasil, dan triplobasil< coccus meliputi monococcus, diplococcus,

     stafilococcus, dan  streptococcus< dan  spirilum terbagi menjadi dua yaitu setengah

    melengkung dan melengkung !Dwidjoseputro, %002'. Menurut 7adiutomo %00$, salah

    satu cara untuk mengamati bentuk sel bakteri sehingga mudah untuk diidentifikasi ialah

    dengan metode pengecatan atau pewarnaan yang bertujuan untuk mempermudah

     pengamatan bentuk sel bakteri, memperluas ukuran ja9ad, mengamati struktur dalam

    dan luar sel bakteri, dan melihat reaksi ja9ad terhadap pewarna yang diberikan sehingga

    sifat fisik atau kimia ja9ad dapat diketahui.

    emberian warna bakteri sangat ditentukan oleh umur biakan, umur biakan yang

     baik adalah #* jam. Sebelum dilakukan pewarnaan dibuat goresan bakteri di atas kaca

    objek dan difiksasi. umlah bakteri yang terdapat pada goresan haruslah cukup banyak 

    sehingga dapat terlihat bentuk dan koloni sewaktu diamati. Sutedjo %00% berpendapat

     bahwa kesalahan yang sering kali dibuat adalah menggunakan suspensi bakteri yang

    terlalu padat terutama bila suspensi tersebut berasal adari bukan media padat.

    Sebaliknya pada suatu suspensi bakteri bila terlalu encer, maka akan diperoleh kesulitan

    sewaktu mencari bakteri pada preparatnya.

    =iksasi dapat dilakukan dengan cara melewatkan preparat diatas api atau

    merendamnya dengan methanol . =iksasi bertujuan untuk:

    %. Mengamati bakteri oleh karena sel bakteri lebih jelas terlihat setelah diwarnai

    #. Melekatkan bakteri pada glass objek,

    +. Mematikan bakteri

    ada pewarnaan sederhana hanya digunakan satu macam 9at warna untuk 

    meningkatkan kontras antara mikroorganisme dan sekelilingnya. 8a9imnya, prosedur 

     pewarnaan ini menggunakan 9at warna basa seperti seperti crystal violet, methylene

    blue, carbol fuchsin basa, safranin atau hijau malakit. Kadang kala digunakan 9at warna

    negatif untuk pewarnaan sederhana !8ay, %00*'. 8ay %00* juga berpendapat bahwa

     penggunaan teknik pewarnaan sederhana ini lebih mudah dan cepat, karena sel-sel

     biakan tersebut akan terwarnai secara merata dan dapat dilihat secara langsung

    morfologi bakterinya. 6kan tetapi pada beberapa organisme, terutama bilamana 9at

     pewarna itu biru metilen, beberapa granula di dalam sel tampak terwarnai lebih gelap

    ketimbang bagian-bagian sel yang lain.

  • 8/17/2019 Laporan Mikrobiologi Pewarnaan, Katalase, Motilitas Bakteri

    5/24

    Salah satu metode pewarnaan yang dapat membedakan jenis bakteri berdasarkan

    gram adalah pewarnaan gram. ewarnaan gram merupakan pewarnaan diferensial yang

    sangat berguna dan paling banyak digunakan dalam laboratorium mikrobiologi

    terutama dalam hal pencirian dan identifikasi bakteri !8ay, %00*'. Dengan metode ini,

     bakteri dapat dikelompokkan menjadi dua yaitu bakteri gram positif dan bakteri gram

    negatif berdasarkan dari reaksi atau sifat bakteri terhadap cat tersebut. >eaksi atau sifat

     bakteri tersebut ditentukan oleh komposisi dinding selnya. Metode ini memberikan

    hasil yang baik jika digunakan biakan yang berumur #*-*2 jam. 4ila digunakan biakan

    tua, terdapat kemungkinan penyimpanan hasil pewarnaan gram. ada biakan tua,

     banyak sel mengalami kerusakan pada dinding-dinding selnya. Kerusakan pada dinding

    sel ini menyebabkan 9at warna dapat keluar sewaktu dicuci dengan larutan alkohol. ?ni

     berarti bahwa bakteri gram positif dengan dinding sel yang rusak tidak lagi dapat

    mempertahankan crystal violet   sehingga terlihat sebagai bakteri gram negatif !8ay,

    %00*'.

    roses pewarnaan diferensial !pewarnaan gram' memerlukan * jenis reagen.

    >eagen pertama disebut warna dasar, berupa pewarna basa, jadi pewarna ini akan

    mewarnai sediaan yang telah dibuat dengan jelas. >eagen kedua disebut bahan pencuci

    warna !decolorizing agent '. @ercuci tidaknya warna dasar tergantung pada komposisidinding sel, bila komponen dinding sel kuat mengikat warna, maka warna tidak akan

    tercuci sedangkan bila komponen dinding sel tidak kuat menelan warna dasar, maka

    warna akan tercuci. >eagen terakhir adalah warna pembanding, bila warna tidak tercuci

    maka warna pembanding akan terlihat, yang terlihat pada hasil akhir tetap warna dasar.

    Sel bakteri gram negatif akan tampak merah jika waktu dekolorisasi terlalu lama,

    sedangkan bakteri gram positif akan tampak ungu bila waktu dekolorisasi terlalu

     pendek !=itria, #$$0'. erbedaan relatif sifat bakteri gram positif maupun gram negatif 

    dapat dilihat pada tabel berikut.

    Ta&el #. erbedaan >elatif Sifat 4akteri 5ram ositif dan 5ram Aegatif 

  • 8/17/2019 Laporan Mikrobiologi Pewarnaan, Katalase, Motilitas Bakteri

    6/24

    %fat Bakter% gram '() Bakter% gram negat%f'*)

    Komposisi dinding selKandungan lipid rendah

    !%-*3'Kandungan lipid tinggi

    Ketahanan terhadap penisilin 8ebih sensitif 8ebih tahan

    enghambatan oleh pewarna

     basa !BK'8ebih dihambat Kurang dihambat

    Kebutuhan nutrisiKebanyakan spesies relatif 

    kompleks>elatif sederhana

    Ketahanaa terhadap

     perlakuan fisik 8ebih tahan Kurang tahan

    Sumber: =itria !#$$0'

    BAB III

    MET+DE PENELITIAN

  • 8/17/2019 Laporan Mikrobiologi Pewarnaan, Katalase, Motilitas Bakteri

    7/24

    ,.# PE-ARNAAN EDERHANA

    A. Alat an Bahan

    %. 8ampu spirtus

    #. arum inokulasi !ose'

    +. Staining tray ( nampan untuk pewarnaan'

    *. Mikroskop&. ipet

    1. Kaca benda

    C. 4iakan bakteri umur #* jam dalam medium agar miring.

    2.  Methylene blue

    0. Crystal violet 

    %$. Carbol fuchsin

    B. Cara !erja

    %. 6mbillah kaca benda dan bersihkan dengan alkohol sampai bersih dan tidak 

    ada lemak yang melekat pada kaca benda tersebut.

    #. @etesi kaca benda tersebut dengan setetes auades steril.

    +. 8alu dengan teknik aseptis !bekerja di dekat lampu spirtus' ambillah satu

     biakan bakteri umur #* jam dan suspensikan dalam auades steril pada gelas

     benda.

    *. Kering anginkan dan setelah kering lakukan fiksasi !melewatkan bagian

     bawah kaca benda di atas api lampu spirtus'. 8angkah %-* biasa disebut

    dengan pembuatan sediaan mikroskopik, langkah ini biasa dilakukan pada saat

    melakukan pewarnaan.

    &. Setelah dingin, tuangi preparat dengan methylen blue % atau # tetes !larutan

    9at warna harus menutupi seluruh permukaan sediaan'. 4iarkan selama %-#

    menit.1. Euci dengan air mengalir menggunakan pipet, air dialirkan tidak boleh terkena

     preparat langsung.

    C. reparat dikeringanginkan.

    2. 6mati preparat di bawah mikroskop perbesaran kuat. 5ambar dan tuliskan

    hasil pengamatan

    ,." PE-ARNAAN NE/ATI0

    A. Alat an Bahan

    %. Mikroskop

    #. Kaca benda+. 8ampu spirtus

    *. ipet

    &. arum inokulasi !ose'

    1. 4iakan bakteri

    C. 8arutan %$ gram nigrosindalam %$$ m8 auades

    2. 6lkohol

    0.

    B.

    C. Cara !erja

    %. 6mbillah dua buah kaca benda, bersihkan dengan alkohol hingga bersih dan

     bebas lemak.

    #. 6mbillah biakan bakteri dengan ose secara aseptik dan letakkan di atas kaca

     benda dekat ujung kanan kaca benda.

  • 8/17/2019 Laporan Mikrobiologi Pewarnaan, Katalase, Motilitas Bakteri

    8/24

    +. @eteskan satu tetes nigrosin/ tinta bak di atas biakan bakteri, kemudian

    suspensikan.

    *. 8etakkan kaca benda yang satunya dengan sudut *&F terhadap kaca yang ada

    suspensi 9at warna dan biakan sehingga cairan menyebar pada ujung kaca

     benda tersebut. Doronglah kaca benda kedua menuju ke ujung kiri kaca benda

    yang satunya sehingga diperoleh lapisan yang tipis sekali.

    &. reparat dikeringanginkan.

    1. 6mati preparat di bawah mikroskop perbesaran kuat. 5ambar dan tuliskan

    hasil pengamatan.

    D.

    ,., PE-ARNAAN /RAM

    A. Alat an Bahan

    %. 8ampu spirtus

    #. Gse

    +. 4otol untuk 9at warna*. Kaca benda

    &. Mikroskop

    1. 4iakan bakteri umur #* jam

     pada medium agar miring.

    C. Crystal violet 

    2. Grams iodine

    0.  !thyl alcohol "#$%$. Safranin

    %%.

  • 8/17/2019 Laporan Mikrobiologi Pewarnaan, Katalase, Motilitas Bakteri

    9/24

    B. Cara !erja

    %. 6mbillah kaca benda dan bersihkan denganalkohol sampai bersih dan tidak 

    ada lemak yang melekat pada kaca benda tersebut.

    #. Dengan menggunakan teknik aseptik, buatlah preparat mikroskopis dari

     bakteri tersebut dengan cara meneteskan % tetes auades di atas kaca benda

    dan suspensikan biakan bakteri dengan ose pada tetesan auades tersebut.

    Eampur dan ratakan dengan gerakan memutar menggunakan ose.

    +. 8akukan fiksasi !melewatkan bagian bawah kaca benda di atas api lampu

    spirtus'

    *. Kemudian tetesi preparat mikroskopis tersebut dengan larutan crystal violet 

    dan biarkan selama % menit.

    &. Euci dengan air mengalir.

    1. @etesi preparat tersebut dengan Grams iodine Mordant dan biarkan selama %

    menit.

    C. Euci dengan air mengalir.

    2. Dekolorisasi dengan ethyl alcohol 0&3. erhatian : jangan didekolorisasi

    secara berlebihan. @ambahkan reagen setetes demi setetes sampai crystal 

    violet  tercuci dari preparat.

    0. Euci dengan air mengalir.

    %$. @etesi dengan pewarna penutup biarkan selama % menit.

    %%. Euci dengan air mengalir.

    %#. Keringanginkan.

    %+. 6mati preparat di bawah mikroskop kemudian gambar dan tuliskan hasil

     pengamatan.

    E.

    ,.1 UJI !ATALAEA. Alat an Bahan

    %. Kaca benda

    #. 8ampu spirtus

    +. ipet tetes

    *. Mikroskop

    &. 7#G# +3

    1. 4iakan bakteri dalam agar miring

    B. Cara !erja

    %. 6mbillah kaca benda dan bersihkan dengan alkohol sampai bersih dan tidak 

    ada lemak yang melekat pada kaca benda tersebut.

    #. 6mbil biakan dari agar miring dan letakkan di tengahkca benda kemudian

    tetesi dengan 7#G#  +3. 6matilah dengan mikroskop perbesaran lemah,

     pehatikan terbentuknya gelembung G#.

    +. @erbentuknya gelembung gas G# menunjukkna bahwa bakteri tersebut mampu

    menghasilkan en9im katalase !katalase H' dan sebaliknya.

    D.

    ,.2 UJI M+TILITA

    A. Alat an Bahan

    %. Mikroskop

    #. Kaca benda !cekung'+. Kaca penutup

  • 8/17/2019 Laporan Mikrobiologi Pewarnaan, Katalase, Motilitas Bakteri

    10/24

    *. ipet steril !dropping pipete%

    &. 4iakan bakteri

    1. 6uades steril

    B. Cara !erja

    %. 6mbillah kaca benda cekung dan kaca penutup, bersihkan dengan alkohol

    sampai bersih dan tidak ada lemak yang melekat pada kaca benda tersebut.#. 4uatlah preparat basah tetes gantung dengan cara meneteskan setetes air pada

    gelas penutup !sangat sedikit' dan tambahkan bakteri yang akan diamati pada

    tetesan tersebut dengan needle !juga sangat sedikit' dan usahakan tetesan

    masih sangat kecil !tidak melebar'.

    +. 8etakkan gelas penutup tersebut di atas gelas benda cekung dengan posisi

    cairan ada di bawah !hati- hati cairan harus dalam keadaan menggantung'.

    *. ergerakkan mikroba dapat diamati di bawah mikroskop, bedakan dengan

    aliran air.

    E. BAB I30. HAIL DAN PEMBAHAAN

    /.

    A. Has%l

    7. 4erdasarkan hasil pengamatan, diperoleh hasil sebagai berikut:

    I. HINTA D-I MARTI!A

    . 5ambar K. Keterangan

    8.

    M. Mikroorganisme : 4akteri

     A. 4entuk sel : Eoccus

    G. Susunan sel : Stafilococcus

    . Iarna sel : 4iru

    J.

    >. Mikroorganisme : 4akteri

    S. 4entuk sel : Eoccus

    @. >angkaian sel : Stafilococcus

    . Iarna sel : @ransparan

  • 8/17/2019 Laporan Mikrobiologi Pewarnaan, Katalase, Motilitas Bakteri

    11/24

    B.

    I. Mikroorganisme : 4akteri

    ). 4entuk sel : Eoccus

    L. >angkaian sel : Stafilococcus

    . Iarna sel : Merah Muda

    66. 5ram !H'/!-' : Aegatif !-'

    64. 6E. Mikroorganisme : 4akteri

    6D. ji katalase : Katalase ositif

    !H'

    6". 6=.Mikroorganisme : 4akteri

    65. ji motilitas : Aon Motil

    67.

    AI. INDAH NUR 0AU4IAH

    6. 5ambar 6K. Keterangan

  • 8/17/2019 Laporan Mikrobiologi Pewarnaan, Katalase, Motilitas Bakteri

    12/24

    68. 6M. Mikroorganisme : 4akteri

    6A. 4entuk sel : Eoccus

    6G. Susunan sel : Stafilococcus

    6.Iarna sel : 4iru

    6J. 6>. Mikroorganisme : 4akteri

    6S. 4entuk sel : Eoccus

    6@.>angkaian sel : Stafilococcus

    6. Iarna sel : @ransparan

    6B.

    6I. Mikroorganisme : 4akteri

    6). 4entuk sel : Eoccus

    6L.>angkaian sel : Stafilococcus

    6. Iarna sel : Merah

    46. 5ram !H'/!-' : Aegatif !-'

  • 8/17/2019 Laporan Mikrobiologi Pewarnaan, Katalase, Motilitas Bakteri

    13/24

    44. 4E. Mikroorganisme : 4akteri

    4D. ji katalase : Katalase ositif

    !H'

    4". 4=.Mikroorganisme : 4akteri45. ji motilitas : Motil

    47.

    BI. +!TA PRIMA D5ANTI

    4. 5ambar 4K. Keterangan

    48. 4M. Mikroorganisme : 4akteri

    4A. 4entuk sel : Eoccus

    4G. Susunan sel : Stafilococcus

    4.Iarna sel : 4iru

    4J. 4>. Mikroorganisme : 4akteri

  • 8/17/2019 Laporan Mikrobiologi Pewarnaan, Katalase, Motilitas Bakteri

    14/24

    4S.4entuk sel : Eoccus

    4@.>angkaian sel : Stafilococcus

    4. Iarna sel : @ransparan

    4B. 4I. Mikroorganisme : 4akteri

    4). 4entuk sel : Eoccus

    4L. >angkaian sel : Stafilococcus

    4. Iarna sel : Merah

    E6. 5ram !H'/!-' : Aegatif !-'

    E4. EE. Mikroorganisme : 4akteri

    ED. ji katalase : Katalase ositif

    !H'

    E".

    E=.Mikroorganisme : 4akteri

    E5. ji motilitas : Aon Motil

    E7.

    CI.BELLA EPTIANA

    E. 5ambar EK. Keterangan

  • 8/17/2019 Laporan Mikrobiologi Pewarnaan, Katalase, Motilitas Bakteri

    15/24

    E8.

    EM. Mikroorganisme : 4akteri

    EA. 4entuk sel : Eoccus

    EG. Susunan sel : Monococcus

    E.Iarna sel : 4iru

    EJ. E>. Mikroorganisme : 4akteri

    ES.4entuk sel : Eoccus

    E@.>angkaian sel : Monococcus

    E. Iarna sel : @ransparan

    EB.

    EI. Mikroorganisme : 4akteri

    E). 4entuk sel : Eoccus

    EL. >angkaian sel : Monococcus

    E. Iarna sel : Merah Muda

    D6. 5ram !H'/!-' : Aegatif !-'

    D4.

    DE. Mikroorganisme : 4akteri

    DD. ji katalase : Katalase ositif

    !H'

  • 8/17/2019 Laporan Mikrobiologi Pewarnaan, Katalase, Motilitas Bakteri

    16/24

    D".

    D=.Mikroorganisme : 4akteri

    D5. ji motilitas : Aon Motil

    D7.

    D?.

    D.

    DK.

    D8.

    DM.

    DA.

    B. Pem&ahasan

    DG. Dalam pewarnaan sederhana, bakteri di dalam agar miring yang diletakkan di

    kaca benda ditetesi dengan auades dan kemudian di fiksasi. Setelah dingin, preparat

    tersebut ditetesi dengan satu tetes methylen blue, kemudian dibiarkan selama %- # menit.

    reparat kemudian dicuci dengan air mengalir menggunakan pipet, dan setelah itu

    dikeringanginkan. Setelah kering, preparat diamati di bawah mikroskop dengan

     perbesaran kuat. 7asil yang didapatkan dalam pewarnaan sederhana adalah

    mikroorganisme yang berupa bakteri . 4erdasarkan hasil pengamatan keempat praktikan

    diperoleh bentuk sel coccus. Susunan sel yang diperoleh berdasarkan pewarnaan

    sederhana beragam. Shinta Dwi Martika, ?ndah Aur =au9iah, dan Gkta risma adalah

    stafilococcus, sedangkan susunan sel bakteri hasil pengamatan 4ella Septiana adalah

    Monococcus. erbedaan bentuk sel terjadi karena koloni diambil berasal dari biakan

    yang bermacam-macam, sehingga susunan sel bakteri juga beragam. Dalam pewarnaan

    sederhana didapatkan bakteri yang berwarna biru, hal itu disebabkan pewarna yang

    digunakan adalah methylen blue yang memiliki larutan berwarna biru.

    D. Dalam pewarnaan negatif, bakteri yang diletakkan di kaca benda dan ditetesi

    nigrosin ditipiskan menggunakan kaca benda yang lain. Setelah itu, preparat

    dikeringanginkan dan kemudian diamati di bawah mikroskop. 7asil yang didapatkan

    dalam pewarnaan negatif adalah latar belakang yang berwarna gelap dan objek 

     pengamatan yang berupa bakteri yang berwarna transparan. 7al itu dikarenakan

     pewarnaan negatif bertujuan untuk mewarnai latar belakang menggunakan nigrosin.

    Sedangkan bakteri tidak ikut terwarnai, melainkan tetap transparan. 4erdasarkan hasil pewarnaan sederhana dapat diketahui bahwa bentuk sel bakteri dari keempat praktikan

  • 8/17/2019 Laporan Mikrobiologi Pewarnaan, Katalase, Motilitas Bakteri

    17/24

    adalah coccus. Iarna dari bakteri tersebut adalah transparan karena bakteri tidak 

    terwarnai, yang terwarnai adalah latar belakang atau kaca bendanya. >angkaian sel yang

    dimiliki bakteri dari hasil pengamatan Shinta Dwi Martika, ?ndah Aur =au9iah, dan Gkta

    risma adalah stafilococcus, sedangkan 4ella Septiana adalah monococcus. >angkaian

    sel berbeda karena koloni yang diambil berasal dari biakan yang berbeda, sehingga

    rangkaian sel yang dominan juga berbeda.

    DJ. Dalam pewarnaan gram bakteri, hasil yang didapatkan adalah bakteri yang

    memiliki bentuk sel coccus dengan rangkaian sel stafilococcus dan monococcus. Iarna

    sel yang dimiliki bakteri setelah pewarnaan gram adalah merahmuda hingga merah. 7al

    tersebut menunjukkan bahwa bakteri tersebut termasuk bakteri gram negatif.

    4erdasarkan literatur, pewarnaan negatif bertujuan untuk mengetahui kelompok bakteri.

    6pabila setelah pewarnaan gram bakteri memiliki warna sel biru, hal itu menunjukkan

     bahwa bakteri tersebut termasuk bakteri gram positif. Sedangkan, apabila setelah

     pewarnaan gram bakteri memiliki warna sel merah muda, hal itu menunjukkan bahwa

     bakteri tersebut termasuk ke dalam bakteri gram negatif.

    D>. Dalam uji katalase, bakteri yang terdapat di dalam media agar miring

    diletakkan di kaca benda kemudian ditetesi dengan 7#G# +3. Setelah itu diamati di

     bawah mikroskop. 4erdasarkan hasil pengamatan di bawah mikroskop oleh keempat

     praktikan, terbentuk gelembung gas G# yang menunjukkan bahwa bakteri tersebut

    termasuk ke dalam bakteri yang mampu menghasilkan en9im katalase !katalase H'.

    4akteri katalase positif merupakan bakteri yang mampu menghasilkan en9im katalase

    yang berfungsi untuk memecah 7#G# !hidrogen peroksida' yang bersifat racun bagi

     bakteri tersebut. Dalam pemecahan hidrogen peroksida oleh bakteri menggunakan en9im

    katalase akan dihasilkan hidrogen dan oksigen.

    DS. Dalam uji motilitas, bakteri yang terdapat di dalam media agar miring

    diletakkan di kaca penutup kemudian ditetesi dengan setetes auades. Kaca benda

    tersebut kemudian diletakkan di atas gelas benda cekung dengan catatan posisi cairan

    harus dalam keadaan menggantung. reparat kemudian diamati di bawah mikroskop.

    4erdasarkan hasil pengamatan di bawah mikroskop oleh Shinta Dwi Martika, Gkta

    risma, dan 4ella Septiana tidak terlihat pergerakkan bakteri, hal tersebut menunjukkan

     bahwa bakteri yang diamati bersifat nonmotil. 7asil pengamatan ?ndah Aur =au9iah,

     bakteri yang diamati bersifat motil karena menunjukkan pergerakan aktif. erbedaan

    motilitas tersebut terjadi karena koloni yang diambil juga berasal dari biakan yang

     berbeda, sehingga karakteristik bakteri juga berbeda.D@.

  • 8/17/2019 Laporan Mikrobiologi Pewarnaan, Katalase, Motilitas Bakteri

    18/24

    D.

    DB.

    DI.

    D).

    DL.

    D."6.

    "4.

    "E.

    "D.

    EE. BAB 3

    E0. !EIMPULAN DAN ARAN

    E/.

    A. !es%m6ulan

    "7. 4erdasarkan hasil praktikum yang telah dilakukan, maka dapat

    disimpulkan sebagai berikut:

    %. rosedur pewarnaan sederhana yakni pembersihan ob&ect glass dengan alcohol

    C$3, ditambah auades dan biakan bakteri. roses fiksasi, pewarnaan dengan

    methylene blue  dibiarkan selama % menit, pencucian dengan auades dan

    dikeringanginkan lalu pengamatan karakteristik di bawah mikroskop. rosedur 

     pewarnaan negatif yaitu dengan cara meletakkan biakan bakteri pada ujung

    kanan dari kaca benda, kemudian meneteskan setetes tinta bak dan digoreskan

    dengan menggunakan kaca benda yang lain sampai didapatkan pewarna tinta

     bak yang tipis diamati dibawah . rosedur pewarnaan gram yang dilakukan

    yakni pembersihan ob&ect glass dengan alcohol C$3 ditetesi auades dicampur 

     biakan dengan cara memutar, proses fiksasi, pewarnaan dengan crystal violet 

    selama % menit, pencucian dengan auades dan dikeringanginkan, pewarnaan

    dengan lugol selama % menit, pencucian dengan auades dan dikeringanginkan,

     proses dekolorisasi dengan ethyl alkohol 0&3, dicuci dengan air dan

    dikeringanginkan diwarnai dengan safranin dicuci dan dikeringanginkan lalu pengamatan karakteristik di bawah mikroskop

    #. rosedur uji katalase yaitu mengambil biakan bakteri dengan menggunakan

     jarum ose secara aseptis ke kaca benda yang telah dibersihkan sebelumnya

    dengan alkohol C$3, kemudian meneteskan setetes larutan 7#G#  +3 pada

     bakteri dan diamati terbentuknya gelembung G# pada bakteri tersebut.

    +. erbedaan antara bakteri katalase postitf dan bakteri katalase negatif dapat

    dilihat dari terbentuk atau tidak terbentuknya gelembung gas G#.

    *. rosedur uji motilitas adalah dengan membuat preparat tetes bergantung, yaitu

    meneteskan sedikit auades pada kaca penutup dan sedikit biakan bakteri

  • 8/17/2019 Laporan Mikrobiologi Pewarnaan, Katalase, Motilitas Bakteri

    19/24

    dengan menggunakan jarum  spuid  dan meletakkan pada kaca benda cekung

    secara perlahan dan dibalik secara perlahan agar tidak bergeser. Diamati

     peregerakan bakteri.

    &. ji motilitas yang dihasilkan dari praktikan adalah  non-motil , kecuali pada

     biakan bakteri ?ndah Aur =au9iah yang merupakan bakteri motil'

    EI. DA0TAR PUTA!A

    EJ.

    "K. 4ere9ow, 6. 4. 6 >eolution in 4asic Microbiology;. eal Clear Science. Bol !1'.

    "8. Dwidjoseputro, D. %00*. )asar-dasar Mikrobiologi. akarta: Djambatan.

    "M. "ngelhaupt, "rika. LouNre Surrounded by 4acteria @hat 6re Iaiting =or Lou to Die.

     *ational Geographic. Bol !%#' %&

    "A. =itria, 4ayu. #$$0.  +earnaan Gram (Gram +ositif dan Gram *egatif%  !online'.

    Diakses melalui http://biobakteri.wordpress.com/#$$0/$1/$C/C-pewarnaan-gram-

    gram-positif-dan-gram-negatif  diakses pada #2 Maret #$%1

    "G. 7adioetomo, >atna Siri. %00$.  Mikrobiologi )asar dalam +raktek .eknik dan

     +rosedur )asar /aboratorium. akarta: 5ramedia

    ". abr, =erris. 5erm Iarriors. Scientific 0merican.

    "J. 8ay, 4. I. %00*. 0nalisis Mikrobiologi di /aboratorium. akarta: @. >ajawali

    ersada

    ">. Smith, 6., 7ussey, M. 6. 5ram Stain rotocol.  0merican Society 1or Microbiology.Bol !#': 2+C-2*&

    "S.Sutedjo, M. %00%. Mikrobiologi .anah. akarta: @. >ineka Eipta.

    ET.

    EU.

    E3.

    E-.

    E7.

    E5.

    E4.

    0A.0B.

    0C.

    0D.

    0E.

    00.

    0/.

    0H.

    0I.

    0J.

    0!. LAMPIRAN

    =8. 5ambar  

    http://biobakteri.wordpress.com/2009/06/07/7-pewarnaan-gram-gram-positif-dan-gram-negatifhttp://biobakteri.wordpress.com/2009/06/07/7-pewarnaan-gram-gram-positif-dan-gram-negatifhttp://biobakteri.wordpress.com/2009/06/07/7-pewarnaan-gram-gram-positif-dan-gram-negatifhttp://biobakteri.wordpress.com/2009/06/07/7-pewarnaan-gram-gram-positif-dan-gram-negatif

  • 8/17/2019 Laporan Mikrobiologi Pewarnaan, Katalase, Motilitas Bakteri

    20/24

    =M.

    =A.

    =G. 5ambar %. 7asil ewarnaan Sederhana

    =.

  • 8/17/2019 Laporan Mikrobiologi Pewarnaan, Katalase, Motilitas Bakteri

    21/24

    =J.

    =>.5ambar #. 7asil ewarnaan Aegatif 

    =S.

  • 8/17/2019 Laporan Mikrobiologi Pewarnaan, Katalase, Motilitas Bakteri

    22/24

    =@.

    =. 5ambar +. 7asil ewarnaan 5ram !5ram

     Aegatif'

    =B.

    =I.

  • 8/17/2019 Laporan Mikrobiologi Pewarnaan, Katalase, Motilitas Bakteri

    23/24

    =).

    =L. 5ambar *. 7asil ji Katalase

    =.

    56.

    54. 5ambar &. 7asil ji Motilitas

  • 8/17/2019 Laporan Mikrobiologi Pewarnaan, Katalase, Motilitas Bakteri

    24/24

    GC.