laporan praktikkum pewarnaan kapsula bakteri

7/30/2019 Laporan Praktikkum Pewarnaan Kapsula Bakteri

1/14

LAPORAN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI

PEWARNAAN KAPSULA BAKTERI

Disusun untuk memenuhi tugas mata kuliah Mikrobiologi

Yang Dibimbing Oleh: Prof. Dr. Dra. Utami Sri Hastuti, M.Pd

Oleh :

Kelompok 1 / Offering: A

Hikmah Maulidyah 100341400688

Lailatul Qodriah 100341400698

Mitha Yudistira 100341400697

Rulyana Salma Roshada 100341400687

Rizki Armando Putra 100341400695

The Learning University

UNIVERSITAS NEGERI MALANG

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

JURUSAN BIOLOGI

PROGRAM STUDI PENDIDIKAN BIOLOGI

September, 2012


2/14

LAPORAN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI

GERAK BAKTERI

Disusun untuk memenuhi tugas mata kuliah Mikrobiologi

Yang Dibimbing Oleh: Prof. Dr. Dra. Utami Sri Hastuti, M.Pd

Oleh :

Kelompok 1 / Offering: A

Hikmah Maulidyah 100341400688

Lailatul Qodriah 100341400698

Mitha Yudistira 100341400697

Rulyana Salma Roshada 100341400687

Rizki Armando Putra 100341400695


UNIVERSITAS NEGERI MALANG

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

JURUSAN BIOLOGI

PROGRAM STUDI PENDIDIKAN BIOLOGI

September, 2012


3/14

A. TOPIK

Pewarnaan Kapsula Bakteri

B. HARI/ TANGGAL PRAKTIKUM

Rabu, 19 September 2012 di Lab. Mikrobiologi BIO 305 FMIPA UM

C. DASAR TEORI

Bakteri merupakan golongan prokariot yang paling penting dan banyak

dibicarakan karena berbagai macam alasan, misalnya mudah dipelajari,

mudah tumbuh dan memerlukan media yang sederhana, hasilnya mudah dan

cepat diketahui. Bakteri dapat merugikan dan juga dapat menguntungkan

pada beberapa makhluk hidup. Salah satu karakteristik utama bakteri adalah

morfologi dan struktur bakteri yang umumnya terdiri atas: Sitoplasma dan

bahan inti sel, dinding luar terdiri dari 3 lapis dari luar ke dalam berturut-turut

yaitu: lapisan lendir, dinding sel dan membran sitoplasma (Dwidjoseputro,

1978).

Kebanyakan bakteri mengeluarkan lendir pada permukaan selnya,

melapisi dinding sel. Jika lapisan lendir ini cukup tebal dan kompak, maka

disebut dengan kapsula. Pada beberapa jenis bakteri, adanya kapsula

menunjukkan sifat virulen. Kapsula bakteri tidak berwarna, sehingga perlu

dilakukan pewarnaan khusus agar dapat diamati di bawah mikroskop cahaya

dengan jelas (Utami, 2012).

Menurut Hadioetomo (1993), kapsul atau lapisan lendir bagi bakterimerupakan pelindung, cadangan makanan, dan pada bakteri-bakteri penyebab

penyakit menambah kemampuan bakteri trsebut untuk menginfeksi. Bila

bakteri kehilangan kapsulnya maka bakteri tersebut dapat kehilangan

virulensinya. Ukuran kapsul sangat dipengaruhi oleh medium tempat

ditumbuhkannya bakteri.

Menurut Darkuni (2001) kapsul bukan organ yang penting untuk

kehidupan sel, dan sel yang tidak mampu untuk membentuk kapsul masih


4/14

dapat tumbuh secara normal dalam medium. Akan tetapi kapsul berperan

dalam penyesuaian terhadap lingkungan hidupnya. Misalnya kapsul berperan

dalam mencegah terhadap kekeringan, menghambat terjadinya pencantelan

baketriofag, bersifat antifagosit sehingga kapsul memberikan sifat virulen

bagi bakteri, atau kapsul dapat juga berfungsi untuk alat mencantelkan diri

pada permukaaan seperti yang di lakukan oleh Streptococcus mutans.

Kapsula bakteri tidak berwarna dan semua kapsula bakteri tampaknya

larut dalam air. Kapsula ini tidak mudah menerima zat warna. Hanya dengan

pewarnaan khusus kapsula ini dapat di lihat, karena itu jarang ditemukan pada

olesan yang diwarnai secara rutin. Namun kapsula dapat di lihat pada preparat

basah (suspensi pada cairan) organisme itu. Menurut Hastuti (2008) ada 2

jenis pewarnaan bakteri yaitu :

1. Pewarnaan langsung adalah pewarnaan yang dilakukan dengan

memfiksasi bakteri yang diamati. Pada pewarnaan ini ada dua zat

warna yang digunakan yaitu kristal violet yang berfungsi untuk

mewarnai sel vegetatif bakteri dan CuSO4 5H2O berfungsi untuk

mendeteksi adanya kapsula. Apabila disekeliling sel bakteri berwarna

biru atau ungu terdapat bayangan biru muda berarti sel bakteri tersebut

mempunyai kapsula.

2. Pewarnaan tak langsung adalah pewarnaan yang dilakukan dengan

tidak memfiksasi terlebih dahulu terhadap koloni bakteri yang

diamati. Pada pewarnaan ini digunakan zat warna yaitu tinta cina.

Apabila mikroorganisme kelihatan transparan (tembus pandang) dan

nampak jelas diantara medan yang gelap berarti sel bakteri tersebuttidak mengandung kapsula.

Prinsip dasar dari pewarnaan ini adalah adanya ikatan ion antara

komponen selular dari bakteri dengan senyawa aktif dari pewarna yang

disebut kromogen. Terjadi ikatan ion karena adanya muatan listrik baik pada

komponen seluler maupun pada pewarna. Berdasarkan adanya muatan ini

maka dapat dibedakan pewarna asam dan pewarna basa. Pewarna asam dapat

tejadi karena bila senyawa pewarna bermuatan negatif. Dalam kondisi pH


5/14

mendekati netral dinding sel bakteri cenderung bermuatan negatif, sehingga

pewarna asam yang bermuatan negatif akan ditolak oleh dinding sel, maka sel

tidak berwarna. Pewarna asam ini disebut pewarna negatif. Contoh pewarna

asam misalnya : tinta cina, larutan Nigrosin, asam pikrat, eosin dan lain-lain.

Pewarnaan basa bisa terjadi bila senyawa pewarna bersifat positif, sehingga

akan diikat oleh dinding sel bakteri dan sel bakteri jadi terwarna dan terlihat.

Contoh dari pewarna basa misalnya metilin biru, kristal violet, safranin dan

lain-lain (Rizki, 2008).

.

D. ALAT DAN BAHAN

Alat

Adapun beberapa alat yang digunakan dalam praktikum pewarnaan

secara gram pada sel bakteri adalah sebagai berikut:

- Mikroskop

- Kaca Benda

- Mangkuk Pewarna

- Kawat Penyangga

- Korek api

- Pinset

- Lampu spiritus

- Jarum inokulasi berkolong

Bahan

Adapun beberapa bahan yang digunakan dalam praktikum pewarnaan

kapsula pada sel bakteri adalah sebagai berikut:


6/14

- Biakan campuran/ murni bakteri

- Tinta cina merk Pelikan

- Aquades steril

- Larutan Kristal Violet 0,5 %

- Larutan CuSO4, 5H2O 20%

- Kertas penghisap

- Korek api

- Alcohol

- Lisol

- Sabun cuci

E. PROSEDUR KERJA

Adapun prosedur/ langkah-langah kerja yang dilakukan dalam praktikum

pewarnaan kapsula pada sel bakteri adalah sebagai berikut:

Pewarnaan Kapsula Baktersi secara Langsung/ Positif


7/14

F. DATA PENGAMATAN

Berdasarkan hasil praktikum pewarnaan kapsula yang telah dilakukan

pada sediaan (sel bakteri) diperoleh data pengamatan sebagai berikut:

Pewarnaan Kapsula Bakteri

No. Koloni Jenis Pewarnaan Warna Sel Vegetatif Warna kapsula

1 Langsung Ungu Biru muda

2 Langsung Ungu Biru mudaTabel. Data Pengamatan Pewarnaan Kapsula Bakteri pada Koloni 1 dan 2


8/14

G. ANALISA DATA

Pada praktikum ini kami meggunakan metode pewarnaan langsung atau

pewarnaan positifmenggunakan reagen larutan kristal ungu violet 0,5 % dan

larutan CuSO4,5H2O 0,20 %. Setelah melakukan peraktikum didapatkan data

yaitu pada koloni bakteri pertama setelah dilakukan pengamatan ternyata

memiliki warana sel vegetatif ungu tua dan memiliki kapsula dengan

Gambar :Koloni bakteri ( 2 )

Gambar :Koloni bakteri ( 1 )


9/14

tampakan berwarna biru muda. Pada koloni bakteri kedua didapatkan bahwa

setelah diamati koloni bakteri ini memiliki warna sel vegetatif ungu tua dan

juga memiliki kapsula dengan tampakan biru muda yang tampak lebih jelas

daripada koloni pertama.

Tampakan sel vegetatif ungu tua dan kapsula yang berwarna biru muda

ini merupakan pengaruh dari pewarnaan menggunakan larutan kristal ungu

violet. Hasil pewarnaan kapsula pada koloni bakteri pertama berwarna lebih

biru muda cerah atau samar dari pada koloni bakteru kedua dimungkinkan

pada saat pewarnaan pemberian reagen kristal ungu violet kurang meresap ke

dalam sel bakteri karena memang kapsula pada bakteri sulit diwarnai karena

adaya afinitas( daya serap) terhadap cat atau reagen sangat kecil hal lain yang

dapat juga menjadi penyebabnya adalah pada saat membilas dengan larutan

CuSO4,5H2O 0,20 % kurang bersih atau bahan yang sudah terlalu lama

sehingga kurang optimal dalam hasil peraktikum

H. PEMBAHASAN

Pada kegiatan praktikum, dilakukan pewarnaan secara langsung dengan

menggunakan kristal violet dan CuSO4.5H2O. Hasil positif dari pengamatan,

sel bakteri akan memunculkan warna ungu. Apabila di sekeliling sel yang

berwarna biru tua tersebut ada bayangan berwarna biru muda, maka sel

bakteri tersebut mempunyai kapsul Hastuti. 2012). Pewarnaan ini

menggunakan kristal violet merupakan larutan yang yang mempunyai

kromophore atau butir pembawa warna yang bermuatan positif (memiliki

kation) sedangkan muatan yang berada di sekeliling bakteri bermuatan negatif

(memiliki anion), sehingga terjadi adanya tarik menarik antara kedua ion

tersebut. Hal inilah yang menyebabkan bakteri berwarna ungu. Dan

terbentuknya warna biru muda pada kapsula disebabkan karena kapsula

menyerap CuSO4.5H2O.

Berdasarkan data pengamatan dan analisis data diketahui bahwa setelah

dilakukan pewarnaan secara langsung pada koloni bakteri 1 terlihat bahwa sel

vegetatif bakteri bakteri tersebut berwarna ungu yang di sekelilingnya

terdapat bayangan berwarban biru muda yang tidak lain bayangan berwarna


10/14

biru muda tersebut merupakan kapsula. Demikian pula pada koloni bakteri 2,

setelah dilakukan pewarnaan secara langsung dan diamati di bawah

mikroskop, terlihat bahwa sel vegetatif bakteri tersebut berwarna ungu yang

di sekelilingnya terdapat bayangan berwarban biru muda yang tak lain

bayangan berwarna biru muda tersebut merupakan kapsula.

Dalam Dwidjoseputro (1978) dijelakan bahwa kapsula merupakan

lapiasan lendir yang cukup tebal yang menyelubungi dinding sel seluruhnya.

Lendir ini tidak mudah menghisap zat warna. Hanya dengan pewarnaan yang

khusus, lapisan lendir itu dapat diperlihatkan. Kapsula lendir ini tidak

berwarna, sehingga perlu dilakukan pewarnaan khusus agar dapat diamati di

bawah mikroskop (Hastuti. 2012).

Lapisan lendir (kapsula) tersebut terdiri atas karbohidrat. Pada beberapa

spesies tertentu, lendir itu juga mengandung unsur N atau P. Lendir ini bukan

merupakan bagian yang integral dari sel melainkan hasil dari pertukaran zat.

Lendir memberikan perlindungan terhadap kekeringan, seakan- akan

merupakan suatu benteng untuk bertahan.bolehlah dipastikan bahwa

kebanyakan bakteri memiliki kapsula ini termasuk golongan bakteri yang

ganas (virulent) (Dwidjoseputro, 1978).

Berdasarkan pembahasan diatas, dapat dikatakan bahwa koloni bakteri 1

dan 2 ini merupakan bakteri yag bersifat virulen karena salah satu fungsi

kapsula adalah sebagai antifagosit sehingga kapsul memberikan sifat virulen.

Menurut Volk dan Wheeler (1988), kapsula melindungi bakteri dari fagosit

oleh sel-sel yang berperan dalam imunitas (seperti leukosit, limfosit dan sel

mast). Apabila bakteri ini tidak bisa difagosit oleh sel-sel tersebut, maka

bakteri akan bersifat virulen dan mempunyai kemampuan meyebabkan

penyakit.

I. KESIMPULAN

Berdasarkan data pengamatan yang diperoleh dalam praktikum pewarnaan

kapsula bakteri, dan berdasarkan uraian pembahasan yang telah dijelaskan

maka dapat dibuat beberapa kesimpulan sebagai berikut:


11/14

1. Setelah dilakukan praktikum pewarnaan secara langsung untuk

mengetahui ada atau tidaknya kapsula, koloni 1 dan koloni 2

keduanya meemiliki kapsula. Hal tersebut ditunjukkan dengan

adanya bayangan warna biru muda yang mengelilingi sel bakteri dari

kedua koloni tersebut.

2. Selanjutnya, adanya kapsula pada kedua koloni ini mengindikasikan

bahwa kedua koloni bakteri ini merupakan bakteri yang bersifat

virulent dan memiliki kemampuan menyebabkan penyakit.

J. DISKUSI

1. Apapkah fungsi kapsula bagi bakteri ?

Jawaban: Fungsi dari kapsula bakteri adalah :

Melindungi bakteri dari kekeringan. Hal ini dikarenakan bakteri

membutuhkan air untuk fungsi fungsi metabolik dan pertumbuhannya.

Pada umumnya bakteri memerlukan kelembaban relatif(relative humidity,

RH) yang cukup tinggi, kira-kira 85%. Kelembaban relatif dapat

didefinisikan sebagai kandungan air yang terdapat di udara. Pengurangan

kadar air dariprotoplasma menyebabkan kegiatanmetabolisme terhenti,

misalnya pada proses pembekuan dan pengeringan. Sebagai contoh,

bakteriEscherichia coli akan mengalami penurunan daya tahan dan

elastisitas dinding selnya saat RH lingkungan kurang dari 84%. Bakteri

gram positif cenderung hidup pada kelembaban udara yang lebih tinggi

dibandingkan dengan bakteri gram negatif terkait dengan perubahan

struktur membran selnya yang mengandung lipid bilayer.

Sebagai cadangan makanan bagi bakteri. Pada saat bakteri dalam

lingkungan yang kekurangan nutrisi maka kapsula dapat diubah oleh

bakteri menjadi makanan yang dapat dimanfaatkan oleh nya.

Melindungi sel bakteri dari lingkungan yang kurang menguntungkan.

Misalnya pada lingkungan yang kurang air, suhu terlalu panas atau dingin,
http://id.wikipedia.org/wiki/Kelembaban_relatifhttp://id.wikipedia.org/wiki/Protoplasmahttp://id.wikipedia.org/wiki/Metabolismehttp://id.wikipedia.org/wiki/Escherichia_colihttp://id.wikipedia.org/wiki/Lipidhttp://id.wikipedia.org/wiki/Kelembaban_relatifhttp://id.wikipedia.org/wiki/Protoplasmahttp://id.wikipedia.org/wiki/Metabolismehttp://id.wikipedia.org/wiki/Escherichia_colihttp://id.wikipedia.org/wiki/Lipid


12/14

Keadaan medium memburuk , dan zat-zat yang timbul sebagai hasil

pertukaran zat bertimbun-timbun.

Melindungi sel bakteri agar dari penelanan oleh sel fagosit inang. Hal inibiasa terjadi pada bakteri yang bersifat parasit misalnya pada bakteri

Streptococcus pneumonia, bakteri yang dapat menyebabkan penyakit

pneumonia.

2. Adakah hubungan antara kapsula dengan virulensi bakteri ? jelaskan!

Jawaban:

Ada, terdapatnya kapsula pada tubuh bakteri dapat melindungi bakteri

dari penelanan oleh sel-sel fagosit inang sehingga dapat terbentuk sifat

virulensi pada bakteri tersebut. Terbentuknya sifat virulensi mengakibatkan

bakteri ini dapat berinteraksi dengan reseptor jaringan dan bertahan dari

sistem pertahanan inang dan berkembangbiak dalam tubuh inang. Banyak

bakteri yang tahan terhadap antibiotik dikarenakan memiliki kapsula,

komponen utama kapsul adalah air, bahan organik yang berupa homo-

polisakarida (misalnya selulosa, dekstran) atau heteropolisakarida (misalnyaalginat), kandungan zat kimia yang ada tergantung dari spesies, biasanya

kapsul tersusun dari polisakarida atau polipeptida. Kapsula pada sel bakteri

cenderung tidak mudah untuk menyerap zat warna sehingga dapat

melindungi bakteri dari zat-zat yang beracun pula. Banyak bakteri yang

kehilangan sifat virulennya karena kapsula pada sel bakteri tersebut rusak

atau terhidrolisis.

K. DAFTAR PUSTAKA

Dwijoseputro, D. 1978.Dasar-DasarMikrobiologi. Jakarta: PT. Djambatan.

Darkuni, Noviar. 2001.Mikrobiologi. Malang: Universitas Negeri Malang.

Hadioetomo, Ratna Siri. 1993. Mikrobiologi Dasar Dalan Praktek. Jakarta:

PT.Gramedia

Hastuti, Sri Utami. 2008.Petunjuk Praktikum Mikrobiologi. Malang : UM


13/14

Hastuti, Sri Utami. 2012.Petunjuk Praktikum Mikrobiologi. Malang: UMM Press

Rizki. 2008. Pewarnaan, (Online), (http://materikuliahpewarnaan.html, diakses

tanggal 24 September 2012).

Volk & Wheeler. 1988.Mikrobiologi Dasar Edisi 5 Jilid 1. Jakarta: Erlangga

BANGKITLAH INDONESIAKU, BANGKITLAH JIWAKU (JIWA INDONESIA)

CERITA PENDEK (CERPEN)

Disusun untuk memenuhi tugas sekolah

Dalam rangka menyambut tahun baru 1434 Hijriah

Dengan pilhan tema Cinta Tanah Air

Oleh:

Intan Ulla Al-Karimah (No. Absen: 05)

Kelas XI- Program IPA-1

http://materikuliahpewarnaan.htm/http://materikuliahpewarnaan.htm/


14/14

SEKOLAH MENENGAH ATAS AL-FALAH

JURUSAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

JALAN KETINTANG MADYA 81

KETINTANG-SURABAYA

November, 2012

laporan praktikkum pewarnaan kapsula bakteri

Documents