enzim dan pencernaan
DESCRIPTION
amali kimiaTRANSCRIPT
PRAKTIKAL 5 :
Enzim Dan Pencernaan
OBJEKTIF :
(a) Untuk menunjukkan tindakan amiles ke atas kanji.
(b) Untuk menunjukkan kesan suhu ke atas tindakan enzim.
ALAT RADAS :
Bikar, Silinder penyukat, Termometer, Tabung uji, Jubin putih, Penitis, Jam
randik.
BAHAN :
Larutan kanji 1%, Asid hidroklorik asid, Natrium hidroksida cair, Larutan
Benedict, Larutan iodine, Telur, Pepsin, Rennin, Susu, Minyak kelapa, Hempedu
daripada pundi hempedu tikus belanda, Kertas litmus biru dan merah.
PROSEDUR :
(a) Untuk menunjukkan tindakan amiles ke atas kanji.
Langkah-langkahnya adalah :
1. Mulut telah dikumur dengan air.
2. Perbuatan mengunyah telah dilakukan dan air liur telah dikumpul ke dalam
tabung uji.
3. Air liur telah diuji dengan menggunakan kertas litmus untuk memastikan sama
ada berasid atau beralkali.
4. Air liur telah dicairkan dengan menggunakan air suling yang sama banyak.
5. Campuran air liur telah dibahagikan kepada tiga bahagian yang sama banyak ke
dalam tabung uji yang telah berlabel A, B, C dan D. Setiap tabung uji telah diisi
seperti:
A – 3 cm3 air suling (eksperimen kawalan)
B – 3 cm3 air liur campuran
1
C – 3 cm3 air liur campuran dan 3 cm3 asid hidroklorik cair
D – 3 cm3 air liur campuran dan 3 cm3 natrium hidroksida cair
6. 5 cm3 larutan kanji telah dimasukkan ke dalam tabung uji dan telah dikacau.
7. Selepas 30 minit, setengah daripada kandungan setiap tabung uji telah diuji
dengan larutan iodin dan setengah lagi telah dipanaskan dengan larutan
Benedict yang sama banyak.
8. Keputusan telah dicatatkan seperti dalam jadual di bawah.
KEPUTUSAN :
Tabung
uji
Bahan Ujian Iodin Ujian Benedict Inferens
A Kanji + air
suling
Warna larutan
berubah
kepada biru
gelap.
Warna larutan
tidak berubah
dan kekal
berwarna biru
muda.
Ujian Iodin:
Warna larutan Iodin berubah
kepada biru gelap. Ujian iodin
positif menunjukkan kehadiran
kanji.
Ujian Benedict:
Warna larutan Benedict tidak
berlaku sebarang perubahan
kerana tiada kehadiran gula
penurun dalam larutan.
B Kanji + air
liur
Warna larutan
tidak berubah
dan masih
kekal
berwarna
coklat
kekuningan.
Warna larutan
berubah
daripada warna
biru muda
kepada warna
hijau dan
kemudiannya
Ujian Iodin:
Warna larutan tidak berubah.
Ujian iodin negatif kerana
ketidakhadiran kanji.
Ujian Benedict:
Ujian Benedict positif kerana
2
warna kuning.
Terdapat
mendakan
merah bata.
kehadiran gula penurun.
Mendakan merah bata
terbentuk apabila bahan dan
larutan Benedict dipanaskan.
Air liur yang mengandungi
enzim amiles menukarkan
kanji kepada glukosa.
C Kanji + air
liur + asid
hidroklorik
cair
Warna larutan
berubah
daripada
warna coklat
kekuningan
kepada warna
biru gelap.
Warna larutan
tidak berubah,
masih kekal
berwarna biru
muda.
Ujian Iodin:
Warna larutan berubah kepada
biru gelap. Ujian iodin positif
menunjukkan kehadiran kanji.
Ujian Benedict:
Ujian Benedict negatif kerana
ketidakhadiran gula penurun.
Kanji tidak berubah menjadi
maltosa. Ini kerana
penambahan hidroklorik asid
telah menyebabkan larutan
menjadi terlalu berasid. Enzim
amiles tidak dapat bertindak
dengan aktif.
D Kanji + air
liur +
natrium
hidroksida
cair
Warna larutan
tidak berubah
dan masih
kekal
berwarna
coklat
kekuningan.
Warna larutan
berubah
daripada warna
biru muda
kepada warna
hijau dan
kemudiannya
warna kuning.
Ujian iodin:
Warna larutan iodine kekal.
Ujian iodin negatif kerana
ketidakhadiran kanji.
Ujian Benedict:
Ujian Benedict positif kerana
kehadiran gula penurun.
3
Terdapat
mendakan
merah bata.
Kanji ditukar kepada maltosa
oleh enzim amiles dalam air
liur. Penambahan natrium
hidroksida cair menyebabkan
larutan menjadi alkali.
KESIMPULAN :
Amiles dapat dihidrolasi dalam keadaan beralkali. Ia menukarkan kanji kepada glukosa.
4
(b) Untuk menunjukkan kesan suhu ke atas tindakan enzim.
Langkah-langkahnya adalah :
1. Larutan air liur telah disediakan seperti dalam eksperimen (a).
2. 5 cm3 larutan air liur itu telah dimasukkan ke dalam setiap tabung uji dan 5 cm3
larutan kanji 1% telah dimasukkan ke dalam satu tabung uji yang lain.
3. Kedua-dua tabung uji telah dibiarkan pada suhu bilik.
4. Sesiri titisan larutan iodin telah dititiskan ke atas jubin putih.
5. Kedua-dua larutan telah dicampurkan ke dalam tabung uji dan masa campuran
dibuat telah dicatatkan.
6. Melalui rod kaca yang bersih, campuran telah dikacau dan diuji dengan satu
titisan larutan iodin di atas jubin. Warna biru telah kelihatan.
7. Langkah (6) telah diulang pada selang masa 1 minit, rod kaca telah dibersihkan
dengan air suling pada setiap ujian sehingga campuran tidak menunjukkan
warna biru dengan iodin.
8. Masa yang telah diambil untuk campuran air liur dan larutan kanji pada akhir
ujian telah dicatat. Masa untuk kesemua kanji bertukar kepada maltosa oleh
amilase pada suhu bilik.
9. Eksperimen ini telah diulang pada suhu yang berbeza iaitu 5oC, 15oC, 25oC,
35oC, 45oC, 55oC, 65oC dan 75oC.
10.Keputusan telah dicatatkan dalam rajah.
KEPUTUSAN :
Suhu Masa dalam minit (t) Aktiviti (1/t)
Suhu bilik (29 oC) Tidak selesai selepas 10 minit 0
5oC 5 0.20
15oC 3 0.25
25oC 2 0.5
5
35oC 1 1.00
45oC 3 0.33
55oC Tidak selesai selepas 10 minit 0
65oC Tidak selesai selepas 10 minit 0
PERBINCANGAN :
6
1. Larutan air liur dan kanji untuk setiap eksperimen hendaklah dipanaskan atau
disejukkan merujuk kepada suhu yang diperlukan sebelum kedua-dua larutan ini
dicampurkan. Untuk suhu yang tinggi daripada suhu bilik, air suam perlu
digunakan manakala untuk suhu yang lebih rendah daripada suhu bilik, kiub ais
perlu digunakan untuk menurunkan suhu.
2. Untuk eksperimen di atas, kerja berkumpulan adalah digalakkan kerana setiap
kumpulan akan menjalankan suhu yang tertentu.
3. Oleh kerana masa yang sedikit untuk enzim lebh aktif, aktiviti (kadar tindakbalas)
ditandakan sebagai 1/t (salingan masa yang diambil).
KESIMPULAN :
Kadar tindakbalas enzim meningkat sehingga 35oC dan menurun selepas 35oC.
SOALAN :
1. Plot graf 1/t terhadap suhu. Apakah suhu optimum?
35 o C
2. Terangkan bagaimana suhu memberi kesan kepada enzim yang dimangkinkan
oleh tindakbalas biokimia?
Pada suhu 0 o C, enzim tidak aktif. Oleh itu, enzim air liur tidak dapat
dihidrolasikan kepada kanji. Apabila suhu meningkat, kadar tindakbalas enzim
meningkat sehingga mencapai suhu optimum 37 o C. Apabila melebihi suhu
optimum, kadar tindakbalas enzim menurun dan terhenti sama sekali pada suhu
60 o C. Pada suhu 60 o C tidak berlaku aktiviti pengeziman kerana enzim telah
denatured disebabkan oleh suhu yang tinggi.
(c) Untuk menunjukkan tindakan pepsin ke atas putih telur (protein).
7
Langkah-langkahnya adalah :
1. Satu suspensi putih telur telah disediakan dengan memukul sedikit putih telur
dengan air mendidih di dalam bikar dan telah dibiarkan sejuk.
2. Beberapa cm3 suspensi putih telur telah dimasukkan ke dalam 3 tabung uji yang
telah dilabel A, B dan C.
3. Ketiga- tiga tabung uji diletak ke dalam water bath pada suhu badan (37oC).
Setiap tabung uji telah diisikan seperti berikut:
A- 5cm3 asid hidroklorik 0.2%
B- B- 5cm3 jus gastrik buatan
C- 5cm3 jus gastrik buatan dan 1cm3 natrium hidroksida cair
4. Mulut tabung uji telah disumbat dengan kapas yang dicampur thymol untuk
mengelakkan kerosakan.
5. Tabung uji telah dibiarkan selama 1jam dan telah digoncang dan semasa ke
semasa.
6. Ujian Biuret telah dilakukan ke atas kandungan setiap tabung uji di akhir 1 jam.
7. Keputusan telah dicatatkan dalam jadual.
KEPUTUSAN :
Tabung
uji
Kandungan Pemerhatian Ujian Biuret Inferens
A
Putih telur +
HCI cair
Campuran
bertukar
kuning, telus
dan perlahan-
lahan
melarut.
Warna larutan
berubah kepada
ungu.
Putih telur telah bertukar
daripada protein kepada
asid amino.
B
Putih telur + jus
gastrik buatan
Warna
campuran
menjadi
warna
kuning, telus
Warna larutan
berubah menjadi
warna ungu.
Putih telur telah bertukar
daripada protein kepada
asid amino.
8
dan perlahan-
lahan
melarut.
C
Putih telur + jus
gastrik buatan
+ natrium
hidroksida cair
Campuran
tidak
berubah.
Tiada perubahan
warna yang
berlaku pada
larutan.
Asid dan alkali apabila
dicampur bersama akan
menjadi neutral. Pepsin
tidak berfungsi dalam
keadaan neutral.
PERBINCANGAN :
1. Tabung uji perlu direndam dalam water bath untuk mengekalkan suhu 37oC
kerana pepsin akan bertindakbalas pada suhu yang optimum.
2. Pepsin menghidrolis albumin kepada polypeptides dalam larutan berasid.
Larutan bertukar menjadi cerah/jelas kerana polypeptides larut dalam air.
3. Keadaan PH dalam tabung uji A dan B (PH3) adalam optimum untuk pepsin
bertindakbalas. Ini kerana kandungan tabung uji A dan B menjadi telus pada
penghujung eksperimen. Ini menunjukkan albumin telah dihidrolis sepenuhnya
oleh pepsin.
4. Kandungan tabung uji C tidak mengalami perubahan pada penghujung
eksperimen. Ini menunjukkan tabung uji neutral tidak sesuai untuk aktiviti pepsin.
KESIMPULAN :
Tindakbalas pepsin dipengaruhi oleh PH larutan. Pepsin akan bertindak balas dengan
aktif pada larutan berasid iaitu pada pH 3.
(d) Untuk menunjukkan pembekuan susu.
9
Langkah-langkah adalah :
1. 5cm3 susu, sedikit larutan rennin telah diambil.
2. Larutan telah diletakkan pada water bath suam (37oC).
3. Selepas 1 jam, perbandingan telah dilakukan dengan rennin kawalan yang
belum ditambah.
PERBINCANGAN :
1. Beberapa faktor yang mempengaruhi aktiviti rennin yang memyebabkan
pembekuan adalah suhu untuk tindakbalas rennin dan pemanasan susu sebelum
ditambah rennin.
2. Pembekuan optimum oleh anak lembu rennin adalah kira-kira 40oC hingga 42oC.
3. Suhu pembekuan kurang pesat dan tiada pembekuan berlaku pada suhu 10oC
hingga 15oC.
4. Tiada pembekuan berlaku pada 60oC hingga 65oC.
5. Pembekuan menjadi perlahan pada suhu rendah dan sukar dan berserabut pada
suhu tinggi.
6. Suhu optimum untuk pembekuan adalah pesat bagi kepekatan tertentu daripada
rennin dan susu.
SOALAN :
Apakah perubahan yang berlaku? Apakah nilai reaksi pada mamalia?
Apabila larutan rennin ditempatkan pada water bath suam, ia membeku. Rennin
adalah enzim proteolitik yang disintesis oleh sel utama dalam perut. Ia berfungsi
dalam penghadaman untuk membekukan susu di dalam perut, proses ini penting
bagi binatang yang muda. Jika susu tidak dibekukan, ia akan mengalir laju melalui
perut dan terlepas peluang untuk pencernaan protein awal.
KESIMPULAN :
10
Keasidan rennin dipengarhi oleh suhu. Pembekuan optimum oleh rennin adalah
37oC.
(e) Untuk menunjukkan pengemulsian lemak.
Langkah-langkah adalah :
1. Sedikit minyak kelapa telah digoncang bersungguh-sungguh dengan air dalam
tabung uji.
Soalan: Apa yang boleh diperhatikan selepas larutan telah dibiarkan seketika?
2. Sedikit hempedu telah diperolehi daripada pundi hempedu tikus belanda dan
telah dimasukkan ke dalam campuran (1).
3. Ia kemudian telah digoncang bersungguh-sungguh; campuran telah dibiarkan
seketika.
PERBINCANGAN :
1. Hempedu, bahan dihasilkan oleh hati dan disimpan dalam pundi hempedu.
2. Hempedu terdiri daripada molekul yang mempunyai dua sifat.
3. Setengah daripada molekul adalah lemak.
4. Molekul hempedu boleh berada antara lemak dan air.
5. Dalam cara ini, titisan lemak kekal terapung didalam air dan tidak bergabung
bersama.
6. Proses ini dipanggil pengemulsian.
7. Pengemulsian penting kerana meningkatkan luas permukaan lemak,
menyebabkan ia boleh dihadamkan oleh lipes, yang mana tidak boleh
mengakses dalam titisan lipid.
SOALAN :
11
Apakah perbezaan sebelum dan selepas ditambah hempedu?
Sebelum menambah hempedu dalam tabung uji, minyak kelapa tidak boleh larut dalam
air walaupun digoncang bersungguh-sungguh. Apabila hempedu ditambah ke dalam
tabung uji, minyak pecah kepada titisan kecil.
KESIMPULAN :
Hempedu adalah bahan yang dihasilakan oleh hati dan boleh mengemulsi lemak dan
memecahkan lemak kepada titisan kecil.
RUJUKAN :
Gan, Wan Yeat. (2006). Exploring Biology Form 4. Selangor: Penerbit Fajar Bakti Sdn
Bhd.
Abdullah, H. D. (2009). College Matriculation Biology Semester I & II. Shah Alam:
IPTA Publications.
Wai, M. C. (2007). TOTAL PRO SPM Biology Form 4&5. Petaling Jaya: Sasbadi Sdn.
Bhd.
Blurt. (2009). What Is The Effect Of Temperature On Enzyme Activity? Diambil
daripada Blurt It!: http://www.blurtit.com/q923677.html
College, B. (2009). Effect of temperature on enzyme activity. Diambil daripada Biology
4:http://academic.brooklyn.cuny.edu/biology/bio4fv/page/enz_act.htm
Steane, R. (2009). The Action of Amylase on Starch. Diambil daripada
BioTopic.co.uk:http://www.biotopics.co.uk/nutrition/amylex.html
Wikipedia. (2008). Biuret Test. Diambil daripada
Wikipedia.com:http://en.wikipedia.org/wiki/Biuret_test
12