PENGAMATAN DAYA ANTI MIKROBA ANTISEPTIK

TERHADAP BAKTERI

LAPORAN

UNTUK MEMENUHI TUGAS MATAKULIAH

Mikrobiologi

yang dibina oleh Ibu Sitoresmi Prabaningtyas, S.Si, M.Si

Oleh Kelompok 6 :

Laily Rahmawati 140342600476

Listia Ningrum 140342601711

Siti Hartina P. 140342603933

Achmad Fais 120342422457

UNIVERSITAS NEGERI MALANG

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

JURUSAN BIOLOGI

Maret 2016

A. TopikPengamatan Daya Anti Mikroba Antiseptik Terhadap Bakteri

B. TujuanUntuk mengetahui daya antimikroba dari beberapa macam antiseptikdan hand wash.

C. Hari, Tanggal PelaksanaanSenin, 28 Maret 2016

D. Dasar TeoriMikroorganisme adalah makhluk hidup yang memiliki aktivitas

yang berupa tumbuh dan berkembang. Kadang kala pertumbuhan dan perkembangan mikroorganisme ini terganggu. Hal ini dapat dipengaruhi baik dari mikroba itu sendiri ataupun dari luar. Salah satu pengaruh yang paling berkompoten adalah antimikroba (Gobel, 2008). Antimikroba adalah senyawa yang dapat menghambat atau membunuh mikroorganisme hidup. Senyawa yang dapat menghambat pertumbuhan bakteri disebut bakteriostatik dan yang dapat membunuh bakteri disebut bakterisida. Atau dengan kata lain disebut juga antibiotika yaitu bahan-bahan yang bersumber hayati yang pada kadar rendah sudah menghambat pertumbuhan mikroorganisme hidup (Gobel, 2008).

Antibiotik adalah bahan yang dihasilkan oleh mikroorganisme atau sintetis yang dalam jumlah kecil mampu menekan menghambat atau membunuh mikroorganisme lainnya. Antibiotik memiliki spektrum aktivitas antibiosis yang beragam. Antiseptik adalah zat yang biasa digunakan untuk menghambat pertumbuhan dan membunuh mikroorganisme berbahaya (patogenik) yang terdapat pada permukaan tubuh luar mahluk hidup seperti pada permukaan kulit dan membran mukosa. Secara umum, antiseptik berbeda dengan obat-

obatan maupun disinfektan. Misalnya obat-obatan seperti antibiotik dapat membunuh mikroorganisme secara internal, sedangkan disinfektan berfungsi sebagai zat untuk membunuh mikroorganisme yang terdapat pada benda yang tidak bernyawa (Ayumi,2011). Disinfektan yaitu suatu senyawa kimia yang dapat menekan pertumbuhan mikroorganisme pada permukaan benda mati seperti meja, lantai dan pisau bedah sedangkan antiseptik digunakan untuk menekan pertumbuhan mikroorganisme pada jaringan tubuh, misalnya kulit.

Kekuatan masing-masing zat antiseptik tersebut berbeda-beda. Ada yang memiliki kekuatan yang sangat tinggi, ada pula yang bereaksi dengan cepat ketika membunuh mikroorganisme dan sebaliknya. Sebagai contoh merkuri klorida, zat antiseptik yang sangat kuat, akan tetapi dapat menyebabkan iritasi bila digunakan pada bagian tubuh atau jaringan lembut. Perak nitrat memiliki kekuatan membunuh yang lebih rendah, tetapi aman digunakan pada jaringan yang lembut, seperti mata atau tenggorokan. Iodium dapat memusnahkan mikroorganisme dalam waktu kurang dari 30 detik. Antiseptik lain bekerja lebih lambat, tetapi memiliki efek yang cukup lama. Kekuatan suatu zat antiseptik biasanya dinyatakan sebagai perbandingan antara kekuatan zat antiseptik tertentu terhadap kekuatan antiseptik dari fenol (pada kondisi dan mikroorganisme yang sama), atau yang lebih dikenal sebagai koefisien fenol (coefficient of phenol). Fenol sendiri, pertama kali digunakan sebagai zat antiseptik oleh Joseph Lister pada proses pembedahan (Dwidjoseputro, 1994).

Mekanisme kerja antiseptik terhadap mikroorganisme berbeda-beda, misalnya saja dengan mendehidrasi (mengeringkan) bakteri, mengoksidasi sel bakteri, mengkoagulasi (menggumpalkan) cairan di sekitar bakteri, atau  meracuni sel bakteri. Beberapa contoh antiseptik diantaranya adalah yodium (povidene iodine 10%),

hydrogen peroksida, etakridin laktat (rivanol), dan alkohol (Ayumi,2011).

Aktivitas antibakteri diuji dengan metode difusi agar menggunakan cakram kertas dan dengan metode pengenceran agar. Metode difusi agar dilakukan dengan cara mencampur sebanyak 50 ml masing-masing suspense Bakteri ke dalam 15 ml media agar yang telah dicairkan dalam cawan petri dan kemudian dibiarkan menjadi padat. Cakram kertas dengan diameter 6 mm diletakkan pada permukaan media padat. Dibiarkan selama 3 menit pada suhu kamar sebelum dimasukkan ke incubator 370 C (Adryana, et al,,2009 dalam Putra, 2011).

Zat antimikroba adalah senyawa yang dapat membunuh atau menghambat pertumbuhan mikroorganisme. Zat antimikroba dapat bersifat membunuh mikroorganisme (microbicidal) atau menghambat pertumbuhan mikroorganisme (microbiostatic). Disinfektan yaitu suatu senyawa kimia yang dapat menekan pertumbuhan mikroorganisme pada permukaan benda mati seperti meja, lantai dan pisau bedah. Adapun antiseptik adalah senyawa kimia yang digunakan untuk menekan pertumbuhan mikroorganisme pada jaringan tubuh, misalnya kulit. Efisiensi dan efektivitas disinfektan dipengaruhi oleh beberapa faktor yaitu konsentrasi, waktu terpapar, jenis mikroba, kondisi lingkungan: temperatur, pH dan jenis tempat hidup.

E. Alat dan Bahan

Alat:1. Cawan petri2. Cotton bud3. Jarum inokulasi

berkolong 4. Pemanas bunsen

5. Paper disk6. Inkubator7. Laminar air flow8. Kompor gas 9. Beaker glass10. Tabung reaksi

11. Otoklaf 12. Rak tabung reaksi 13. Pengaduk kaca 14. Scaple 15. Pinset

Bahan :1. Biakan murni bakteri

dalam media nutrien cair

yang berumur 1 x 24 jam (E. coli dan S. Aureus)

2. Media lempeng nutrien agar (NA) steril

3. Berbagai zat anti septik : iodine, bettadine, dettol

F. Prosedur KerjaDisediakan dua media NA steril dan masing-masing diberi kode sesuai

dengan bakteri yang diuji

Diinokulasikan secara merata masing-masing biakan murni bakteri kepermukaan medium NA sesuai dengan kodenya. Dengan cara

aseptik dicelupkan ujung cotton bud ke dalam medium nutrien cair, kemudian nutrien cair, kemudian dioleskan pada permukaan lempeng

NA sampa merata

Dibuat modifikasi paper disk dan disiapkan sejumlah antiseptik yang diuji. Caranya dapat dibuat dari kertas hisap yang berbentuk bulat digunakan perforator. direndam paper disk di dalam zat antiseptik

selama 15 menitDisiapkan media lempeng NA steril sementara itu membagi 4 sektor

dibagian luar cawan dan berilah kode masing-masing sektor sesuai zat antiseptik.

Diletakkan paper disk yang sudah direndam dalam aseptik menggunakan pinset steril pada permukaan media NA yang sudah

diinokulasikan bakteri. Diatur jarak antara paper disk agar tidak terlalu rapat, sesuai dengan kode sektornya

Diinkubasi kedua sediaan yang sudah diperlakukan ini pada suhu 37ᴼC selama 1 x 24 jam

Diukur diameter zona hambatan dari pertumbuhan bakteri pada masing-masing perlakuan.

G. Data Hasil Pengamatan

Nama bakteri

Diameter zona hambat (mm) Pada Perlakuan dengan

Shampo Dove

Shampo

Sunslik

Shampo

Emeron

Shampo

Pentene

Shampo

Rejoice

Shampo

Clear

E.coli 2,4 2,2 1,7 1,5 1,6 2,6

S.aureus 2,8 2,5 1,8 2,2 2,4 2,8

H. Analisis DataUntuk mengetahui daya antimikroba dari beberapa macam

antiseptik berupa sahampo dengan merk yang berbeda terhadap bakteri, menggunakan paper disk yang dipotong sehingga berbentuk lingkaran, kemudian memasukkan potongan paper disk ke dalam antiseptik yang digunakan dalam percobaan ini (dove, pentene, rejoice, sunslik, clear, dan emeron), lalu membiarakannya terendam ± 15 menit. Disisi lain menyediakan 2 medium lempeng NA steril dan diberi kode yang berbeda, kemudian menginokulasikan secara merata

masing-masing jenis biakan murni bakteri yaitu dengan menggunakan bakteri S. aureus dan E. coli ke medium NA yang berbeda dengan cara mencelupkan ujung cotton bud dalam medium nutrien cair, kemudian mengoleskan pada permukaan medium lempeng NA sampai rata secara aseptik. Kemudian meletakkan guntingan kertas penghisap tersebut pada permukaan medium yang sudah diinokulasi bakteri di atas secara aseptik, kemudian menginkubasikan kedua perlakuan bakteri pada suhu 370C selama 1x24 jam.

Setelah diinkubasi, biakan bakteri yang diberi paper disk yang sudah direndam dengan 6 jenis antibiotik. Ada daerah bening disekitar paper disk yang tidak di tumbuhi bakteri. Masing masing antiseptik memiliki ukuran zona hambat yang berbeda, clear memiliki diameter zona hambat paling besar dari pada antibiotik yang lain untuk kedua bakteri yang digunakan (E. coli dan S. aureus) yaitu pada bakteri E. coli sebesar 2,6 cm. Pada bakteri S. aureus diameternya sebesar 2,8 cm. Untuk antiseptik betadine pada bakteri E. coli diameter pada ulangan 1 sebesar 1,9 cm, ulangan 2 sebesar 2 cm dan ulangan ke 3 sebesar 2,5 cm dengan rata-rata 2,13 cm. Pada bakteri S. aureus diameternya ulangan 1 sebesar 1,6 cm, ulangan 2 sebesar 1,5 cm dan ulangan 3 sebesar 1,7 cm dengan rata-rata 1,6 cm. Dalam percobaan ini, data yang didapat merupakan data hasil kompilasi semua kelompok biologi offering H.

I. PembahasanPada pengamatan uji antimikroba beberapa jenis antiseptik,

antiseptik yang digunakan adalah dari 6 jenis merk yang berbeda, yaitu dove, pentene, rejoice, sunslik, clear, dan emeron. Digunakannya 6 jenis merk berbeda tersebut dimaksudkan untuk mengetahui merk antiseptik manakah yang paling bagus antimikrobanya terhadap 2 jenis bakteri, yaitu Staphylococcos aureus dan Escherichia coli. Bahan aktif dari shampoo clear adalah Chloroxyfenol 4,8%. Digunakannya 2

jenis bakteri tersebut dikarenakan keduanya merupakan bakteri patogen. Menurut sumber Jawetz (2005), Staphylococcus merupakan bakteri gram positif berbentuk bola dengan diameter 1μm yang tersusun dalam bentuk kluster seperti anggur, bersifat patogen, non motil, dan memproduksi katalase. Sedangkan E.coli merupakan bakteri gram negatif yang berbentuk batang pendek dengan ukuran 0,4-0,7 μm x 1.4 μm, beberapa strainnya mempunyai kapsula, dan mampu memfermentasikan laktosa (Levinson, 2004).

Metode yang digunakan pada praktikum ini adalah menggunakan paper-disk yang direndam dalam larutan antibiotik selama 15 menit. Metode paper-disk ini biasa digunakan untuk menguji aktivitas antimikroba suatu antibiotik terhadap mikroorgansme patogen. Kepekaan dari mikroorganisme patogen terhadap antibiotik dilihat dari ukuran zona bening yang terbentuk di sekitar paperdisk (Cappuccino, 2001). Antimikroba yang berbeda akan memiliki laju difusi yang berbeda-beda pula, sehingga keampuhan dari tiap antimikroba satu sama lain tidak sama (Wilson, 1982). Widjayanti (1996) juga menyatakan bahwa bahan antimkroba berfungsi untuk mematikan, merusak, dan menghambat pertumbuhan dari mikroba. Antimikroba akan bekerja dengan cara merusak dinding sel atau protein dari mikroba sehingga bakteri tersebut mati (Widjayanti, 1996).

Berdasarkan hasil pengamatan yang telah dilakukan setelah bakteri diinkubasi selama 1x24 jam, terdapat perbedaan yang cukup signifikan antara shampoo satu dengan shampo yang lain. Shampo dengan merk clear menujukkan hasil yang paling baik antimikrobanya, dimana merk clear saat diukur zona bening yang terbentuk di sekitar paper-disk adalah yang paling luas diantara 5 jenis merk antiseptik lainnya. Untuk perhitungan dari diameter zona bening, digunakan 3 kali ulangan dan kemudian dirata-rata agar diperoleh hasil yang lebih akurat. Rata-rata diameter dari zona bening yang terbentuk dengan menggunakan clear adalah sebesar 2,8 cm untuk bakteri S.aureus dan

2,6 cm untuk banteri E.coli, yang menunjukkan bahwa bakteri S.aureus lebih resisten daripada bakteri E.coli karena zona hambatnya lebih kecil pada S.aureus walaupun hanya selisih 0,2.

Dari diameter tersebut dapat diketahui bahwa uji antimikroba yang terbesar dimiliki oleh antiseptik merk clear. Hal ini disebabkan karena adanya kandungan Poloxamer, Citric Acid, Sodium Polynap, Lysine HCL,

dan Dimethicone. Hal ini didukung pernyataan Agung (2009) bahwa bahan-bahan seperti Poloxamer, Lysine HCL, Citric Acid, Sodium Polynap,

dan Dimethicone dapat membunuh bakteri dengan mengganggu membran sel bakteri yang akan menurunkan kemampuan membran sel memproduksi ATP sebagai sumber energi.

J. KesimpulanDari praktikum yang telah dilakukan, diperoleh hasil bahwa

antiseptik yang paling baik membunuh kuman adalah Clear, karena adanya kandungan Poloxamer, Citric Acid, Sodium Polynap, Lysine HCL, dan

Dimethicone dapat membunuh bakteri dengan mengganggu membran sel bakteri yang akan menurunkan kemampuan membran sel memproduksi ATP sebagai sumber energi.

               

Daftar Rujukan

Agung, Sri. 2009. Pemeriksaan Bilangan Bakteri dan Pengaruh Beberapa Perlakuan

terhadap Penurunan Bilangan Bakteri pada Mouthpiece Alat Musik Tiup

Maching Band di Jatinago. Farmaka, Volume 7 Nomor 1 April 2009, (online).

http://farmasi.unpad.ac.id, diakses tanggal 25 Oktober 2014.

Cappuccino, J.G & Natalie, S. 2001. Microbiology a Laboratory Manual. Addison

Weasley Publishing Company: New York.

Dwijoseputro. 1994. Dasar-dasar Mikrobiologi. Jakarta : Djambatan.Gobel, Risco, B., dkk., 2008, Mikrobiologi Umum Dalam Praktek.

Makassar: Universitas Hasanuddin.Jawetz, E. Joseph M., and Edward A. 2005. Mikrobiologi Kedokteran. Penerbit EGC:

Jakarta.

Levinson, W. 2004. Review of Medical Microbiology and Immunology, 9th ed. Mc. Graw

Hill-Lange: New York.

Pratiwi, Sylvia T. 2008. Mikrobiologi Farmasi. Erlangga: Bandung.

Putra, 2011. Metode Cakram. (Online), (http://kesehatan.kompasiana.com/makanan/2011/06/03/metode

-cakram/, diakses 23 November 2011).Widjayanti, U. 1996. Obat-obatan. Kanisius: Yogyakarta.

Wilson, Gisvold. 1982. Kimia Farmasi dan Medisinal Organik. Semarang Press:

Semarang.

LAMPIRAN

Bakteri E.coli

Bakteri S. Aureus