A. Tujuan1.Memisahkan campuran dengan kromatogrfi kertas.

2.Menentukan Rf suatu senyawa.

3.Menentukan kandungan zat pewarna dalam minuman

B. Dasar TeoriKromatografi ditemui oleh Michael Tswett, seorang ahli botani di

Universiti Warsaw (Poland), pada tahun 1906. Perkataan kromatografi berasal

daripada perkataan Yunani "warna" dan "tulis"

Kromatografi terbentuk apabila terdapat satu fasa diam dan satu fasa

bergerak. Fasa diam biasanya ialah padatan atau cairan manakala fasa

bergerak biasanya ialah cecair atau gas. Setiap molekul yang berbeza akan

terjerap kepada fasa pegun dengan kekuatan yang berbeza. Pada masa yang

sama, dua molekul yang berlainan juga mempunyai keterlarutan yang berbeza

dalam fasa bergerak.

Katakan kita mempunyai campuran dua bahan A dan B. A akan terjerap

kepada fasa pegun dengan kuat manakala B tidak. A juga mempunyai

keterlarutan dalam fasa bergerak yang lebih rendah berbanding dengan B.

Jesteru, apabila campuran A dan B dibiarkan melalui satu lajur kromatografi,

B dapat bergerak dengan lebih cepat berbanding dengan A kerana A

mengalami rintangan yang kuat dalam perjalanannya

Kromatografi digunakan untuk memisahkan campuran dari

substansinya menjadi komponen-komponennya. Seluruh bentuk kromatografi

bekerja berdasarkan prinsip yang sama.

Seluruh bentuk kromatografi memiliki fase diam (berupa padatan atau

cairan yang didukung pada padatan) dan fase gerak (cairan atau gas). Fase

gerak mengalir melalui fase diam dan membawa komponen-komponen dari

campuran bersama-sama. Komponen-komponen yang berbeda akan bergerak

pada laju yang berbeda pula. Kita akan melihat alasannya pada halaman

selanjutnya.

Dalam kromatografi kertas, fase diam adalah kertas serap yang sangat

seragam. Fase gerak adalah pelarut atau campuran pelarut yang sesuai.

Kromatografi kertas merupakan bentuk kromatografi yang paling sederhana,

mudah dan murah. Jenis kromatografi ini banyak di gunakan untuk identifikasi

kualitatif maupun analisa kuantitatif.

Zat additive adalah bahan tambahan makanan yang berguna sebagai

pelengkap pada suatu bahan. Zat additive pada produk makanan dan minuman

berfungsi sebagai bahan yang dapat memperpanjang masa simpan produk

serta untuk memperoleh mutu sensoris (citarasa,warna,dan tekstur).

Zat aditif juga ditambahkan ke dalam makanan atau pun minuman

yang bertujuan memberikan rasa, warna yang menarik, dan supaya makanan

atau pun minuman tersebut dapat bertahan lama. Zat aditif ini sama sekali

tidak mengandung nilai gizi kepada yang mengkonsumsinya. Dalam jumlah

yang tidak terlalu berlebihan zat aditif ini tidak berbahaya, akan tetapi jikalau

telah melebihi dari standar yang normal maka sangat berbahaya bagi

kesehatan manusia. Misalnya dalam jangka panjang akan menyebabkan

kanker, gangguan fungsi ginjal, hati, menurunnya fungsi otak yang berakibat

makin melemahnya daya ingat seseorang, dan efek-efek negatif lain yang

dapat mengganggu kesehatan. Beberapa contoh zat aditif adalah MSG

( Monosodium Glutamate ) yang bertujuan untuk memberi rasa terhadap

makanan, Rodamin-B yang berfungsi untuk memberikan warna yang menarik

pada kecap, maupun minuman, Formalin yang diberikan agar makanan

menjadi tahan lama, dan masih banyak lagi zat-zat aditif lainnya. Khusus

Rodamin-B, zat pewarna ini biasanya untuk keperluan tekstil/ batik agar lebih

menarik warnanya namun pada kenyataanya beberapa produsen kecap dan

pembuat terasi juga memanfaatkan zat ini. Begitu pula dengan Formalin yang

biasanya dipergunakan untuk mengawetkan mayat, ternyata juga dipakai

untuk mengawetkan tahu, bakso, ikan basah dan kering, dan makanan lainnya

yang belum sempat diperiksa oleh Balai POM ( Pengawasan Obat dan

Makanan ) Depkes RI Rodamin-B dan Formalin sedikit pun tidak boleh ada

dalam makanan atau pun minuman.

Rhodamin b pertama kali ditemukan dalam kandungan makanan

dijakarta pada tahun 1978, pewarna makanan ini sebenarnya diproduksi untuk

mewarnai kertas, tekstil, kayu dan barang industri non pangan lainnya.

Beberapa senyawa dalam campuran bergerak sejauh dengan jarak yang

ditempuh pelarut; beberapa laiinya tetap lebih dekat pada garis dasar. Jarak

tempuh relative pada pelarut adalah konstan untuk senyawa tertentu sepanjang

anda menjaga segala sesuatunya tetap sama, misalnya jenis kertas dan

komposisi pelarut yang tepat..

Pada identifikasi noda atau penampakan noda, jika noda sudah

bewarna dapat langsung diperiksa dan ditentukan harga Rf. Rf merupakan nilai

dari Jarak relative pada pelarut. Harga Rf dihitung sebagai jarak yang

ditempuh oleh komponen dibagi dengan jarak tempuh oleh eluen ( fase gerak )

untuk setiap senyawa berlaku rumus sebagai berikut:

Rf= jarak yang ditempuh oleh senyawa

jarak yang ditempuh oleh pelarut

Rf juga menyatakan drajat retensi suatu komponen dalam fase diam.

Karenan itu Rf juga disebut factor referensi.

C. Alat Yang Digunakan

Batang pengaduk 1 buah

Chamber 1 buah

Gelas kimia 100 ml dan 250 ml 1 buah

Gelas ukur 10 ml dan 25 ml 1 buah

Pipa kapiler 2 buah

Penangas air

D. Bahan Yang Digunakan

Sampel minuman

Asam asetat 6%

Amoniak encer 13%

Larutan standard rhodamin B

Kertas kromatografi

Benang wol bebas lemak

Larutan pengelusi campuran etanol : asam asetat glacial : air =4:2:2,4

E. Cara Kerja1. Ekstraksi Pewarna

Dimasukan dalam gelas piala 100 ml

Ditambahkan 5ml asam asetat glacial 6%

Masukan benang wol

Dipanaskan sampai volume sampel tinggal 10ml

Benang wol di ambil

Dimasukan dalam gelas piala 100ml

Ditambahkan 5ml amonika encer 13%

Dipanaskan sampai warna pada benang lakmus sampai volume + 1ml

30 ml sampel

Benang wol

Sampel

Sampel

2. Identifikasi Pewarna

Digunting ukuran 3x10 cmDibuat garis datar pada jarak 2 cm dari ujung bawah dan 1 cm dari ujung atas

Di totolkan pada garis bawah

Di totolkan pada garis bawah

Di isi dengan gas eluen campuran etanol : asam asetat glacial : air ( 4:2:2,4)

Dijenuhkan

Dimasukan dalam chamber yang telah jenuh

Ditunggu sampai eluen naik pada tanda batas

Dikeluarkan dari chamber

Diberi tanda noda-noda dari komponen pewarna

Kromatografi

Kertas kromatografi

Kertas saring

Chamber

Zat warna

Zat warna pembanding

Diukur perjalanan jarak noda dan eluen

F. Hasil Pengamatan

No Perlakuan Pengamatan1

2

Sampel + asam asetat glasial +

benang wol dan dipanaskan

Benang wol + amoniak encer

Larutan menguap

berkurang menjadi 10

ml

Benang wol menjadi

merah

G. Pembahasan Pada praktikum kali ini kami melakukan proses kromatografi kertas

untuk mengetahui kandungan zat pewarna pada minuman. Pertama-tama kami

mencampurkan sampel minuman dengan benang wol dan asam asetat glasial,

disina asam astat glasial akan menarik zat pewarna dan kemudian akann

diserap oleh benang wol yang telah dicampurkan. Benang wol yang memiliki

serat akan menangkap zat pewarna yang telah terpisah dari minuman tersebut

dengan bantuan dari asam asetat glasial. Pemisahan ini dibantu dengan

pemanasan yang mengakibatkan semakin cepatnya pelepasan ikatan senyawa

pewarna dengan senyawa minuman.

Benang wol yang telah mengandung zat pewarna itu kemudian

ditambahkan dengan amoniak encer, hal ini bertujuan agar amoniak

melarutkan zat pewarna yang telah berada dibenang wol. Zat pewarna telah

larut ditunjukan dengan berubahnya warna benang wol dari berwarna merah

menjadi putih. Dalam penarikan zat warna ini dilakukan pemanasan diatas

penangas hal ini bertujuan agar komponen zat warna tidak rusak akibat panas

yang berlebihan.

Didalam chamber yang telah disi eluen, yang merupakan campuran

antara etanol, asama asetat glasial dan air. Eluen tersebut terlebih dahulu

dijenuhkan, disini cember ditutup rapat dengan tujuan agar meyakinkan bahwa

astmosfer dalam gelas kimia terjenuhkan denga uap pelarut. Penjenuhan udara

dalam gelas kimia dengan uap menghentikan penguapan pelarut sama halnya

dengan pergerakan pelarut pada kertas. Karena pelarut bergerak lambat pada

kertas, komponen-komponen yang berbeda dari campuran zar warna akan

bergerak pada laju yang berbeda dan campuran dipisahkan berdasarkan pada

perbedaan bercak warna. Karena tidak adanya bercak warna seperti pada zar

pembanding rhodamin b maka dapat diartikan kalaw sampel yang kami pakai

tidak mengandung zat warna tersebut.

Pada saat terjadinya pergerakan kenaikan noda disini terjadi proses

kompleksitas atau terjandinya interaksi antara air di atmosper chember dengan

solulosa ( penyusun kertas saring ). Interaksi ini lah yang menjadi hal yang

sangat penting dalam pengerjaan kromatografi kertas.

H. Kesimpulan

Dalam sampel minuman top dringk tidak terdapat zar

pewarna rodamin b.

Jarak yang ditempuh pada rhodamin pembanding yaitu 6,3

cm, lebih besar dari sampel yaitu 1,3 cm.

Pemisahan komponen pada kromatogrfi kertas merupakan

efek dari migrasi diferensial.

Benang wol dapat menarik zat warna dengan bantuan asam

asetat glasial.

Rf dari rodamin adalah 0,9

Rf dari sampel adalah 0,18

I. Daftar PustakaMasriani. 2008. Diktat Penuntun Praktikum Dasar-Dasar Pemisahan.

Pontianak : FKIP UNTAN

http://www.karyanet.com.my/knet/ebook/preview/p_Kromatografi_Asas.pdf

http://mahardika014.tripod.com/

http://www.kalbe.co.id/files/cdk/files/13_RodaminBdanMetanilKuning.pdf/13_RodaminBdanMetanilKuning.html

http://www.wahdah.or.id/wahdah/index.php?option=com_content&task=view&id=377&Itemid=0