SKRIPSI

NENI HARTINAH DWITATI

PENGARUH DOSIS KOMBINASI EKSTRAK

ETANOL DAUN Annona squamosa Linn. dan

Persea americana Mill. TERHADAP KADAR

KOLESTEROL TOTAL

(Pada Tikus Rattus novergicus Hiperkolesterol yang

Diinduksi Pakan Aterogenik)

PROGRAM STUDI FARMASI

FAKULTAS ILMU KESEHATAN

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH MALANG

2016

ii

iii

iv

KATA PENGANTAR

Bismillahirrohmanirrohim

Assalamualaikum warohmatullahi wabaraokatuh

Puji syukur tercurahkan kepada Allah SWT, Tuhan semesta alam karena

berkat rahmat dan hidayahnya, penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul

“Pengaruh Dosis Kombinasi Ekstrak Etanol Daun Annona Squamosa linn.

dan Persea americana mill. Terhadap Profil Lipid (Pada Kadar Kolesterol

Total Tikus Rattus novergicus Hiperkolestremia)”.

Skripsi ini diajukan untuk memenuhi persyaratan dalam mencapai gelar

Sarjana Farmasi pada Program Studi Farmasi Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas

Muhammadiyah Malang. Dalam penyusunan skripsi ini penulis tidak terlepas dari

peranan pembimbing dan bantuan dari seluruh pihak. Oleh karena itu, dengan

segala kerendahan hati, penulis ingin mengucapkan banyak terima kasih kepada:

1. Allah SWT, Tuhan semesta alam yang memberikan rahmat, nikmat dan

hidayahnya kepada umatnya, Rasulullah SAW, yang sudah menuntun kita

menuju jalan yang lurus.

2. Ibu Siti Rofida, S.Si., M.Farm., Apt., selaku Dosen Pembimbing I, dan bapak

Ahmad Shobrun Jamil, S.Si., MP selaku Dosen Pembimbing II disela

kesibukan beliau masih bisa meluangkan waktu untuk membimbing

danmemberi pengarahan dan dorongan moril sampai terselesaikannya skripsi

ini.

3. Ibu Uswatun Chasanah., Apt.,M.Kes. dan Ibu Engrid Juni Apt., S.Farm selaku

Dosen Penguji yang telah banyak memberikan saran dan masukan serta

motivasi demi kesempurnaan skripsi ini.

4. Bapak Yoyok Bekti Prasetyo, S.Kep., M.Kep., Sp.Kom. selaku Dekan Fakultas

Ilmu Kesehatan Universitas Muhammadiyah Malang yang telah memberikan

kesempatan penulis belajar di Fakultas Ilmu Kesehatan Universitas

Muhammadiyah Malang.

5. Ibu Nailis Syifa’, S.Farm.,M.Sc.,Apt. selaku Ketua Program Studi Farmasi

Universitas Muhammadiyah Malang yang telah memberikan motivasi dan

v

kesempatan penulis belajar di Program Studi Farmasi Universitas

Muhammadiyah Malang.

6. Ibu Sovia Aprina Basuki, M.Si., Apt. selaku Kepala Laboratorium Program

Studi Farmasi Universitas Muhammadiyah Malang yang telah membantu,

mengarahkan dan memberikan kemudahan sarana dan prasarana sehingga

skripsi ini dapat terselesaikan dengan baik.

7. Mbak Bunga selaku laboran yang telah banyak membantu serta memberikan

sarana dan prasarana sehingga penelitian skripsi ini dapat terselesaikan dengan

baik.

8. Staff dan Laboran Laboratorium Klinik Rumah Sakit Pendidikan Universitas

Muhammadiyah Malang yang telah berkenan membantu penelitian sehingga

skripsi ini terselesaikan dengan baik.

9. UPT. Materia Medika Batu yang telah membantu kelancaran penelitian

sehingga skripsi ini dapat terselesaikan dengan baik.

10. Dian Ernawati., S.Farm., M.Farm., Apt. selaku dosen wali yang telah berkenan

membimbing, berdiskusi serta memberikan masukan sampai terselesaikannya

skripsi ini.

11. Untuk semua para bapak dan ibu dosen Program Studi Farmasi Universitas

Muhammadiyah Malang, yang telah memberikan waktunya untuk

mengajarkan ilmu-ilmu yang sangat bermanfaat. Terutama Ibu Sendi Lia

Yunita, S.Farm.,Apt. yang telah bersusah payah membantu jalannya ujian

skripsi sehingga kami dapat melaksanakan ujian skripsi dengan baik.

12. Staf Tata Usaha Program Studi Farmasi Universitas Muhammadiyah Malang

terima kasih karena telah banyak membantu dalam hal administrasi.

13. Orang tua tercinta, Bapak Tamsi, S.Pd dan Ibu Sri Murwati S.Pd , yang tiada

hentinya memotivasi dalam segala hal, dengan sabar mendoakan untuk

kesuksesan putrinya. Terima kasih banyak atas didikan, kerja keras, dan kasih

sayangnya untuk membuat anak-anaknya bahagia serta mendapatkan ilmu

yang bermanfaat.

14. Saudara dan keluarga besar yang selalu menjadi alasan utama untuk terus

semangat mengerjakan skripsi ini.

vi

15. Buat sahabat kelompok skripsi, Ratna Yulia, Kartika Puspa, dan Alfy Afifa

sebagai partner kerjasama yang mau saling membantu dan selalu kompak

menyelesaikan tiap tahapan penelitian ini.

16. Teman-teman angkatan 2012 yang tiada hentinya memberikan motivasi, dan

pecutan semangat untuk terus berjuang.

17. Teman-teman farmasi F yang selalu jadi penyemangat ketika penulis

mengalami kejenuhan mengerjakan skripsi, terimakasih atas kebaikan kalian.

18. Seluruh warga kantin dan jajanannya yang selalu dijadikan tempat favorit

penulis untuk mengerjakan skripsi.

19. Untuk semua pihak yang belum disebutkan namanya, penulis mohon maaf dan

terima kasih yang sebesar-besarnya. Semua keberhasilam ini tak luput dari

bantuan, doa yang telah kalian semua berikan

Jasa dari semua pihak yang telah membantu dalam penelitian ini, penulis tidak

mampu membalas dengan apapun. Semoga amal baik semua pihak mendapat

imbalan dari Allah SWT. Semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi pembaca dan

menambah ilmu pengetahuan. Penulis menyadari bahwa skripsi ini jauh dari

kesempurnaan, oleh karena itu penulis mengharapkan kritik dan sarannya demi

kesempurnaan skrispsi dan dapat digunakan untuk penelitian selanjutnya.

Malang, 01 Juni 2016

Peneliti,

Neni Hartinah Dwitati

vii

RINGKASAN

Dislipidemia merupakan penyebab penyakit jantung koroner dan stroke

iskemik utama dimana terjadi peningkatan kadar kolesterol total >200 mg/dL,

pengingkatan low-density lipoprotein (LDL) >100 mg/dL dan penurunan high-

density lipoprotein (HDL) ≤60 mg/dL. American Association of Clinical

Endocrinologist (AACE) mengusulkan resiko penyakit jantung dapat turun apabila

kadar kolesterol total dibawah 200 mg/dL.

Upaya penurunan kadar kolesterol salah satunya yaitu dengan terapi

farmakologis menggunakan obat antihiperlipidemia. Simvastatin merupakan drug

of choice obat antihiperlipidemia golongan statin yang paling sering di gunakan

karena paling poten dalam menurunkan LDL.

Penggunaan bahan tanaman sebagai penurun kolesterol pun sudah lama di

lakukan oleh masyarakat sejak dulu. Saat ini, produk-produk bahan alam dalam

bentuk multi compound lebih dipilih karena efektifitasnya dapat meningkat apabila

bekerja secara potensiasi dalam bentuk kombinasi dibandingkan dengan pemberian

ekstrak tunggal. Ekstrak etanol daun P. americana yang mengandung beberapa

fitokonstituen diantaranya luteolin, rutin, kuersetin dan apigenin yang merupakan

golongan senyawa flavonoid dapat bekerja sebagai antioksidan yang berperan

dalam pencegahan atherogenesis dengan menghambat pembentukan ox-LDL,

sedangkan ekstrak etanol A. squamosa yang mengandung acetogenin dapat

berperan dalam menghabat uptake kolesterol di intestin dan mencegah interaksi

antara reseptor CD36 dengan ox-LDL yang dapat mencetuskan sinyal pro-

atherogenik. Ekstrak etanol daun P. americana dan A. squamosa dengan berbagai

fitokonstituennya dapat bekerja sinergis sehingga efektifitas penurunan kadar

kolesterol total dapat meningkat.

Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui pengaruh pemberian dosis

kombinasi ekstrak etnol daun P. americana dan A. squamosa terhadap penurunan

kadar kolesterol total tikus putih jantan Rattus norvegicus hiperkolestremia serta

memperoleh dosis optimum kombinasi ekstrak yang dapat menurunkan kadar

kolesterol total pada R. Norvegicus hiperkolestremia.

Dalam penelitian ini digunakan metode posttest only control group design,

dimana tiap kelompok perlakuan mendapatkan dosis P. americana : A. squamosa

masing-masing 125 mg/KgBB : 125 mg/KgBB (P1) ; 125 mg/KgBB : 250

mg/KgBB (P2) ; 250mg/KgBB : 125 mg/KgBB (P3) selama 21 hari ; sedangkan

kelompok kontrol positif mendapatkan simvastatin 0,018 mg/200gBB selama 21

hari ; kelompok kontrol negatif mendapatkan larutan pembawa CMC-Na 0,5%

selama 21 hari ; kelompok hewan sehat diberi minum dan pakan standar ad libitum

selama masa penelitian.

Hasil analisis statistik menggunakan one way anova menunjukkan adanya

penurunan kadar kolesterol total pada tikus putih R. Norvegicus, namun tidak

signifikan secara statistik. P=0,062 (P>0,05). Sedangkan hasil skrining fitokimia

pada ekstrak etanol daun P. americana dan A. squamosa menunjukkan adanya

senyawa golongan flavonoid, saponin triterpenoid, antrakuinon dan alkaloid.

Pada penelitian ini peneliti menyarankan perlunya tambahan waktu induksi

pakan aterogenik dan menambah waktu masa terapi kombinasi ekstrak, serta

perlunya mengantisipasi kemungkinan kematian hewan coba selama masa

penelitian berlangsung dengan cara melebihkan jumlah hewan coba.

viii

DAFTAR ISI

Halaman

KATA PENGANTAR ........................................................................... iv

RINGKASAN ........................................................................................ vii

ABSTRAK .............................................................................................. viii

ABSTRACT ............................................................................................ ix

DAFTAR ISI .......................................................................................... x

DAFTAR TABEL .................................................................................. xiii

DAFTAR GAMBAR ............................................................................. xiv

DAFTAR LAMPIRAN ........................................................................... xv

DAFTAR SINGKATAN ........................................................................ xvi

DAFTAR PUSTAKA ............................................................................. 67

BAB I PENDAHULUAN ...................................................................... 1

DAFTAR ISI

BAB I PENDAHULUAN ....................................................................... 1

1.1 Latar Belakang Masalah ................................................................... 1

1.2 Rumusan Masalah .............................................................................. 3

1.3 Tujuan Penelitian ............................................................................... 4

1.3.1 Tujuan Umum ........................................................................... 4

1.3.2 Tujuan Khusus .......................................................................... 4

1.4 Manfaat ............................................................................................. 4

1.4.1 Manfaat akademik ................................................................... 4

1.4.2 Manfaat praktis ........................................................................ 4

1.4.3 Manfaat masyarakat ................................................................. 4

1.4.4 Manfaat jangka panjang .......................................................... 4

BAB II TINJAUAN PUSTAKA ............................................................. 5

2.1. Tinjauan Tentang Tanaman .............................................................. 5

2.1.1 Tinjauan tentang Persea americana ......................................... 5

2.1.2 Tinjauan Tentang Annona squamosa ....................................... 9

2.2 Tinjauan Tentang Ekstraksi ............................................................... 13

2.2.1 Maserasi ................................................................................... 15

ix

2.2.2 Perkolasi .................................................................................. 16

2.2.3 Soxhletasi ................................................................................ 16

2.3. Tinjauan Tentang Lipid .................................................................... 16

2.4. Tinjauan tentang Biosintesis Kolesterol ............................................ 17

2.5. Tinjauan Tentang Lipoprotein ........................................................... 19

2.6. Tinjauan Tentang Jalur Metabolisme Lipoprotein ............................. 22

2.7. Tinjauan Tentang Hiperkolestremia .................................................. 23

2.8. Tinjauan Tentang Metode Pengukuran Kadar Kolesterol ................. 24

2.9. Tinjauan Tentang Hewan Coba Rattus norvegicus ............................ 26

2.10 Aklimatisasi Hewan Coba................................................................. 27

BAB III KERANGKA KONSEPTUAL .................................................. 29

3.1 Kerangka Konsep ............................................................................... 29

3.2 Uraian Kerangka Konsep ................................................................... 30

BAB IV METODOLOGI PENELITIAN ................................................. 33

4.1 Jenis Penelitian .................................................................................. 33

4.2 Tempat dan Waktu Penelitian ............................................................ 33

4.2.1 Ekstraksi Tanaman ................................................................... 33

4.2.2 Pengujian aktivitas .................................................................. 33

4.3 Populasi Sampel ................................................................................. 33

4.3.1 Populasi ................................................................................... 33

4.3.2 Sampel dan Besar Sampel ........................................................ 33

4.4 Alat dan Bahan .................................................................................. 34

4.4.1 Alat .......................................................................................... 34

4.4.2 Bahan ........................................................................................ 34

4.5 Pengumpulan Data ............................................................................. 35

4.5.1 Ekstraksi .................................................................................. 35

1. Ekstraksi daun A. squamosa ................................................... 35

2. Ekstraksi daun P. americana ................................................. 36

4.5.2 Persiapan Hewan Coba ............................................................ 37

4.5.3 Persiapan Bahan Uji ................................................................ 38

4.5.4 Penetapan Dosis Simvastatatin ................................................. 38

4.5.5 Penetapan Dosis Kombinasi Ekstrak P. americana dan

x

A. squamosa ....................................................................................... 38

4.6.Prosedur kerja ..................................................................................... 40

4.7 Pengukuran kadar kolesterol Total .................................................... 40

4.8 Analisis Data ....................................................................................... 41

4.9 Alur Penelitian .................................................................................... 42

BAB V HASIL PENELITIAN ................................................................. 44

5.1 Pembuatan Simplisia Kering Daun P. americana dan A. squamosa .. 44

5.2 Hasil Pembuatan Ekstrak ................................................................... 44

5.2.1 Hasil Pembuatan Ekstrak Etanol daun P. americana ............ 44

5.2.2 Hasil Pembuatan Ekstrak Etanol Daun A. squamosa .............. 45

5.3 Penetapan Komposisi Eluen .............................................................. 46

5.4 Hasil Skrining Fitokonstituen Ekstrak Etanol Daun P. americana

dan A. squamosa ................................................................................

....................................................................................................... 47

5.4.1 Identifikasi Senyawa Golongan Flavonoid ............................. 48

5.4.2 Indentifikasi Senyawa Golongan Triterpenoid ......................... 49

5.4.3 Indentifikasi Senyawa Golongan Antrakuinon ........................ 50

5.4.4 Indentifikasi Senyawa Golongan Alkaloid ............................... 51

5.5 Hasil Penimbangan Sisa Pakan Atherogenik Pada Hewan Coba ...... 52

5.6 Pengambilan Sampel Darah ............................................................... 54

5.7 Pengaruh Pemberian Dosis Kombinasi Ekstrak Terhadap

Penurunan Kadar Kolesterol Total ................................................... 54

5.8 Hasil Analisis Statistik ...................................................................... 56

BAB VI PEMBAHASAN ........................................................................ 57

BAB VII KESIMPULAN DAN SARAN ................................................ 66

DAFTAR PUSTAKA ............................................................................... 67

xi

DAFTAR TABEL

Tabel

Halaman

II.1 Jumlah komponen fitokimia yang terkandung dalam ogan daun,

buah dan biji P. americana .............................................................. 8

II.2 Fitokonstituen daun srikaya ............................................................. 12

II.3 Indeks polaritas pelarut untuk ekstraksi .......................................... 14

II.4 Tipe lipoprotein pada plasma normal .............................................. 19

II.5 Klasifikasi kadar kolesterol pada orang dewasa menurut

American Heart Association (AHA) ............................................... 24

II.6 Parameter normal tikus dewasa ....................................................... 26

IV.1 Alat .................................................................................................. 34

IV.2 Bahan ............................................................................................... 34

IV.3 Perhitungan dosis kombinasi ekstrak P. americana dan

A. Squamosa .................................................................................... 39

V.1 Hasil pembuatan ekstrak etanol daun P. americana dan A. squamosa 45

V.2 Hasil skrining fitokimia ekstrak daun P. americana dan A. squamosa 48

V.3 Profil rata-rata dan SD berat badan hewan coba sebelum dan

Sesudah induksi pakan aterogenik dan perlakuan ........................... 53

V.4 Kadar kolesterol total pada tikus jantan Rattus norvegicus ............ 55

xii

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

2.1 Daun Persea americana Mill. ........................................................ 5

2.2 Daun Annona squamosa ................................................................. 10

2.3 Garis besar jalur biosintesis kolesterol .......................................... 18

2.4 Mekanisme yang mendasari pengaruh penyakit kardiovaskuler ..... 21

2.5 Jalur eksogen dan endogen metabolisme lipid ................................ 22

2.6 Mekanisme reaksi metode pengukuran kadar kolesterol ................ 25

3.1 Kerangka konseptual ....................................................................... 29

4.1 Bagan ekstraksi daun Annona squamosa......................................... 36

4.2 Bagan ekstraksi daun Persea americana ......................................... 37

4.3 Persamaan persen rendemen ekstrak .............................................. 37

4.4 Persamaan perhitungan dosis simvastatin ....................................... 38

4.5 Bagan alur penelitian ....................................................................... 42

5.1 Ekstrak kental daun P. americana ................................................... 46

5.2 Ekstrak kental daun A. squamosa .................................................... 46

5.3 Pola pemisahan noda ekstkrak daun A. squamosa .......................... 47

5.4 Pola pemisahan noda ekstkrak daun P. americana ......................... 47

5.5 Noda pada uji senyawa golongan flavonoid daun P. americana ... 48

5.6 Noda pada uji senyawa golongan flavonoid daun A. squamosa...... 49

5.7 Noda pada uji senyawa golongan triterpenoid daun P. americana . 49

5.8 Noda pada uji senyawa golongan triterpenoid daun A. squamosa .. 50

5.9 Noda pada uji senyawa golongan antrakuinon daun P. americana . 51

5.10 Noda pada uji senyawa golongan antrakuinon daun A. squamosa .. 51

5.11 Hasil reaksi pengendapan ekstrak P. americana ............................. 52

5.12 Hasil reaksi pengendapan ekstrak A. squamosa .............................. 52

5.13 Grafik berat badan hewan coba ................................................................. 53

5.14 Proses pengambilan sampel darah ................................................... 54

5.15 Kadar kolesterol total pada tikus jantan Rattus norvegicus ............. 55

xiii

LAMPIRAN

Lampiran Halaman

1. Daftar riwayat hidup ........................................................................ 71

2. Surat pernyataan ............................................................................. 72

3. Lampiran surat determinasi tanaman Alpukat ................................. 73

4. Lampiran surat determinasi tanaman Srikaya .................................. 74

5. Perhitungan dosis ............................................................................. 75

6. Data sisa pakan atherogenik ........................................................... 78

7. Data berat badan hewan coba .......................................................... 79

8. Hasil pengukuran kadar kolesterol total .......................................... 80

9. Hasil pengolahan data SPSS 18.0 uji One Way Anova ................... 81

10. Dokumentasi penelitian ................................................................... 82

xiv

DAFTAR SINGKATAN

AACE : Americam Association of Clinical Endocrinologist

AAP : 4-aminoantipyrin

ABTS : 2,2-azinobia-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulphate)

ACAT : acyl-CoA cholesterol acyltransferase

AHA : American Heart Association

ALB : Asam Lemak Bebas

APO : Apolipoprotein

AS : Annona squamosa

BPOM : Balai Pengawasan Obat dan Makanan

CE : Cholesteryl ester

Ch : Cholesterol

CHOD : Cholesterol oxidation

CPPSEA : Control and Supervision of Experiments on Animal

DPPH : diphenyl, 2-picryl hydrazil

EC : Endothelial Cell

FAT/CD36 : Fatty acid translocase

HDL : High-Density Lipoprotein

HMG-CoA : 3-hydroxy-3-methylglutaryl CoA

HS : Kontrol hewan sehat

IDL : Intermediete-Density Lipoprotein

K+ : Kontrol positif

K- : Kontrol negatif

LCAT : Lecitin Cholesteryl Acyltransferase

LDL : Low- Density Lipoprotein

LPL : Lipoprotein Lipase

LRP : Receptor-Related Protein

NHANES : National Health and Nutrition Examination Survey

OxLDL : oxidized LDL

P1 : Kelompok perlakuan 1

P2 : Kelompok perlakuan 2

xv

P3 : Kelompok perlakuan 3

PA : Persea americana

PJK : Penyakit Jantung Koroner

Pl : Phospolipid

Pr : Protein

POD : Peroxidase

SMC : Smooth Muscle Cell

SPSS : Statistic Program for Social Science

STZ : Streptozotosin

TG : Triglyceride

TGF : Transforming Growth Factor

VLDL : Very Low-Density Lipoprotein

WHF : World Heart Federation

WHO : World Health Organisation

xvi

DAFTAR PUSTAKA

Adnan, J.M., Zearah, S.A., 2013. Total Antioxidant Capacity And

Antihyperlipidemic Activity Of Alkaloid Extract From Aerial Part Of

Anethum graveolens L. Plant. European Scientific Journal., Vo. 9, No.33,

pp. 413-23.

Anggiawan, R., 2014. Efektifitas Ekstrak Etanol Daun Srikaya (Annona squamosa

L.) Terhadap Penurunan Kadar Kolesterol Total Tikus Putih (Rattus

norvegicus L.) Hiperlipidemia. Malang : Skripsi Program Sarjana.

Anonim, 2013. Penyajian Pokok-Pokok Hasil Riset Kesehatan Dasar 2013,

Badan Penelitian dan Pengembangan Kesehatan Kementerian Kesehatan RI

Arukwe, U., Amadi, B.A., Duru, M. K.C., Agomuo,E.N., Adindu, E. A., Odika,

P.C., Lele, K.C., Egejuru, L., and Anudike, J., 2012. Chemical Compotition

of Persea Americana Leaf, Fruit and Seed. IJRRAS., Vol. 11 No.02, pp. 1-4.

Archbold, R.A., Timmis A.D., 1998. Cholesterol lowering and coronary artery

disease: mechanisms of risk reduction. Heart, Vol. 80, pp. 543–47.

Brai, B.I.C., Odetola, A.A., Agomo, P.U., 2007. Hypoglycemic and

Hypocholesterolemic Potential of Persea americanaLeaf Extracts. J Med

Food., Vol. 10 No. 02, pp. 356-59.

Dipiro, J.T., Talbert, L R., Yee, G.C., Matzke, G. R., Wells, B. G., Posey, L. M.,

2008. Pharmacotherapy A Pathophysiologic Approach, Ed. 7th, USA :

MC Graw Hill Medical., pp. 385-403.

Fox, J.G., Anderson L.C., Loew F.M,. Quimby F.D., 2002. Laboratory Animal

Medicine. Second Edition. USA: American College of Laboratory Animal

Medicine Series. Pp. 121-133.

Gani, N., Momuat, L., I., Pitoi, M., M., 2013. Profil Lipida Plasma Tikus Wistar

yang Hiperkolestremia Pada Pemberian Gedi Merah (Albelmoschus manihot

L.). Jurnal MIPA UNSRAT Online., Vol.02, No.1, pp. 44-49.

Gasserro, P., Proto, M.C., Gangemi, G., Malfitano, A.M., Pisanti, S., Santoro, A.,

Laezza, C., and Bifulco, M., 2012. Pharmacological Actions of Statins : A

Critical Appraisal in the Management of Cancer. Pharmacological Review.

Vol.64, No.1, pp.102-46.

Gokaraju et al., 2012. Extract, Fractions and Composition Comprising Acetogenins

and Their Application , United States : Patent Applications Publication.

Haeckel, B. A., Sonntag, O., Külpmann, W.R., and Feldmann, U., 1979.

Comparison of 9 Methods for the Determination of Cholesterol.

J.Clin.Chem.Clin.Bioohem. Vol.17, pp.553-563.

Handa, S.S., Khanuja, S.P.S., Longo, G., and Rakesh D. D., 2008. Extraction

Technology of Medical and Aromatic Plants, Ed. 1st, Trieste, Italy : ICS-

UNIDO (United Nations Industrial Development Organization and the

International Centre for Science and High Technology), pp. 22-31.

xvii

Himesh, S., Sarvesh, S., Sharan, P.S., Mishra, K., Singhai, A.K., 2011. Preliminary

Phytochemical Screening and HPLC Analysys of Flavonoid From

Methanolic Extract of Leaves of Annona Squamosa. IRJP ( International

Research Journal of Pharmacy), Vol. 2 No. 5, pp. 242-46

Istyana, R. D. N., 2014. Pengaruh Ekstrak Etanol Daun Alpukat (Persea americana

Mill.) Terhadap Kadar LDL Pada Tikus (Rattus novergicus). Malang :

Skripsi Program Sarjana.

Frostegård, J., 2013. Immunity, atherosclerosis and cardiovascular disease. BMC

Medicine, Vol. 11 N0. 117, pp. 1-13.

Kaminskas, A., Mažeikienė, A., 2012. Biochemistry Laboratory Manual.

Vilnius : Vilnius University, pp. 28-30.

Kolawole, O. T., Kolawole, S. O., Ayankunle, A. A., and Olaniran I. O., 2012.

Methanol Leaf Extract of Persea americana Protects Rats against Cholesterol-

Induced Hyperlipidemia. British Journal of Medicine & Medical

Research., Vol. 2 No. 2, pp. 235-242.

Kusumastuty, I. 2014. Sari Buah Markisa Ungu Mencegah Peningkatan MDA

Serum Tikus Dengan Diet Aterogenik. Indonesian Journal of Human

Nutrition. Vol. 1, No.1, pp. 50-56.

Kwan, B. C. H., Kronenberg, F., Beddhu, S. and Cheung, A.K., 2007. Lipoprotein

Metabolism and Lipid Management in Chronic Kidney Disease. J Am Soc

Nephrol., Vol. 18, pp. 1246-61.

Kwang, B., H., Kang, S., C., Sharma, A., Bajpai, V.,K., 2014. Antioxidant, Lipid

Peroxidation Inhibition and Free Radical Scavenging Efficacy of A

Diterpenoid Compound Sugiol Isolated From Metasequoia glyptostroboides.

Asian Pacific Journal of Tropical Medicine, Vol 9, No. 15.

Lakhanpal, P., and Rai., D. K., 2007. Quercetin : A Versatile Flavonoid. Internet

Journal of Medical Update., Vol 2, No.02, pp. 22-37.

Malaguarnera, M., Vacante, M., Russo, C., Malaguarnera, G., Antic, T.,

Malaguarnera, L., Bella, R., Pennisi, G., Galvano, F., and Frigiola, A., 2013.

Lipoprotein(a) in Cardiovascular Diseases. BioMed Research

International., Vol. 10 No. 11, pp. 1-9.

Mariod, A.A., Abdelwahab, S.I., Elkheir, S., Ahmed,Y.M., Fauzi, P.N.M., and

Chuen C.S., 2012. Antioxidant Activity of Different Parts from Annona

Squamosa, and Catunaregam Nilotica Methanolic Extract. Acta Sci. Pol.,

Technol. Aliment., Vol. 11 No.3, pp: 249-257.

Mazur, A.W., Pikul, S., Daggy, P. B., 1997. Cholesterol Lowering Compounds.

United States Patent., No. 5,591,836.

Mishra, S. K., Tiwari, S., Shrivastava, A., Shrivastava, S., Boudh, G.K., Chourasia,

S.K., Chaturvedi, U., Mir, S.S., and Saxena, A.K., 2013. Antidyslipidemic

Effect and Antioxidant Activity of Antrhaquinone Derivatives From Rheum

xviii

emodi Rhizomes In Dyslipidemic Rats. Journal of Natural Medicine, Vol.

68, pp. 363-71.

Mizoguchi, T., Edano, T., and Koshi, T., 2004. A method of direct measurement

for the enzymatic determination of cholesteryl esters. Journal of Lipid

Research, Vol. 45 , pp. 396-01.

Murray, K. R., Granner, D. K., Rodwell, V. W., 2006. Biokimia Harper (Harper’s

Illustrated Biochemistry), Ed. 27th, Toronto : Penerbit Buku Kedokteran.,

pp.225-249.

Mustafa, M.R., Leong, X.F., Ng, C.Y., and Jaarin, K. 2015. Effects of Repeated

Heating of Cooking Oils on Antioxidant Content and Endotheliat Function.

Austin J Pharmacol Ther. Vol.03, No.2, pp.1068.

Narwal, S. S., Sampietro, D.A., Catalan, C. A. N., Vattuone, M.A, 2009. Isolation,

Identification and Characterization of Allelochemicals/Natural

Products, Ed. 1st, Enfield, NH, USA : Science Publishers., pp. 31-34.

Nwodo, N.J., Nnadi, C.O., Ibezim, A., and Mbah C.J., 2014. Plants with

Hypolipidaemic Effects from Nigerian Flora, INTECH,

http://creativecommons.org/licenses/by/3.0. Diakses tanggal 23 September

2015

Orwa C., Mutua, A., Kindt, R., Jamnadass, R., and Anthony., 2009. Agroforestree

Database: a tree reference and selection guide version 4.0,

http://www.worldagroforestry.org/sites/treedbs/treedatabases.asp, Diakses

tanggal 14 Oktober 2015.

Oteiza, P. i., Erlejman, A. G., Verstraeten, S., V., Keen, C.,L., Fraga, C., G., 2005.

Flavonoid-Membrane Interactions : A Protective Role Of Flavonoids At the

Membrane Suerface?. Clinical & Developmental Immunology, Vol. 12,

No. 01, pp. 19-25.

Page, I. H., and Brown, H.B., 1952. Induced Hypercholesterolemia and

Atherogenesis. Circulation, Vol. 11, pp. 681-86.

Pal, D., Verma, P., 2013. Flavonoid : A Powerful and Abundant Source of

Antioxidants. Academic Science, Vol. 5 No. 3, pp. 95-98.

Pamela, C.C., Richard, A. H., 2009. Farmakologi Ulasan Bergambar. Edisi ke-

4, USA : Penerbit Buku Kedokteran EGC, hal 293-304.

Pandey, N., Barve, D., 2011. Phytochemical and Pharmacological Review on

Annona squamosa Linn. International Journal of Research in

Pharmaceutical and Biomedical Sciences, Vol. 2 No. 4, pp. 1404-10

Parameswaran, I., Murthi, V.K., 2014. Comparative study on Physico & Phyto-

Chemical analysis of Persea americana & Actinidia deliciosa. IJSRP., Vol. 4

No. 5, pp. 1-3.

Pietta, P.,G., 2000. Flavonoids As Antioxidants. Journal Of Natural Products,

Vol. 7 No.63, pp.1035-42

xix

Pusparini, 2006. Low density lipoproteinpadat kecil sebagai faktor risiko

aterosklerosis. Universa Medicina, Vol. 25 No. 1, pp. 22-32.

Qiao, L., Zou, C., Shao, P., Schaack, J., Johnson, P.F., and Shao, J., 2008.

Transcriptional Regulation of Fatty Acid Expression by CCAAT/Enhancher-

Binding Protein α. The Journal of Biological Chem., Vol. 283, No. 14,

pp.8788-95.

Riahi, S., Mohammadi, M.T., Sobhani, V., and Soleimany M., 2015. Chronic

Effects of Aerobic Excercise on Gene Expression of LOX-1 in the Heart of

Rats Fed With High Fat Diet. Iran J Basic Med Sci., Vol. 18, p. 805-12.

Saha, R., 2011. Pharmacognosy and pharmacology of Annona squamosa: A review.

International Journal of Pharmacy & Life Sciences, Vol. 2 No.10, pp.

1183-89.

Sahebkar, A., Simental-Mendia, L. E., Pedone, C., Ferretti, G., Nachtigal, P., Bo,

S., Derosa, G., Maffioli, P., and Watts, G.F. 2015. Statin Therapy and Plasma

Free Fatty Acid : A Systematic Review and Meta-analysis of Controlled

Clinical Trials. British Journal of Clinical Pharmacology., Vol. 81, No.5,

pp.807-18.

Sarker, S.D., 2006. Natural Products Isolation, Ed. 2nd, Totowa, New Jersey :

Humana Press Inc., pp. 323-346

Sasidharan, S., Chen, Y., Saravanan. D., Sundram, D.K., Yoga, L., 2011.

Extraction, Isolation and Characterization of Bioactive Compounds from

Plant’s Extracts. Afr J Tradit Complement Altern Med., Vol. 8 No. 1, pp.

1-10.

Saxena, M., Saxena, J., Nema, R., Singhand, D., and Gupta, A., 2013. Journal of

Pharmacognosy and Phytochemistry. Phytochemistry of Medicinal Plants.

Journal of Pharmacognosy and Phytochemistry, Vol. 1 No.6, pp. 174-75.

Sen, S., Raghavendra, H.G., Reddy, S.R., Sridhar, C., Chakraborty, R., Suchitra,

B., Nagaiah, B., Jyothi, B. A., Babu, K. A., Babu, P.M., Viswanadhan, T.,

Sujatha, D. 2012. Synergistic Activiti of Tribulus Terrestris and Annona

Squamosa Extracts Againts Alloxan Induced Diabetes and Hyperlipidemia in

Rats. An International Journal of Pharmaceutical Science. Vol. 2, No.2,

pp. 12-23.

Shastry, C. S., Ambalal, P. N., Himanshu, J., and Aswanthanarayana, B.J., 2011.

Evaluation of Effect of Reused Edible Oils on Vital Organs of Wistar Rats.

Nitte University Journal of Health Sciense., Vol.01, No.4, pp 10-15.

Silverstein, R. L., Lee, W., Park, Y.M., and Rahaman, S.O., 2010. Mechanisms of

Cell Signaling by the Scavenger Receptor CD36 : Implications in

Atherosclerosis and Thrombosis. Transactions of the American Clinical

and Climatological Association., Vol. 121, pp. 206-217.

Srisawasdi, P., Kroll, M.H., and Lolekha, P. H., 2007. Advantages and

Disadvantages of Serum Cholesterol Determination by the Kinetic vs the End

Point Method. Am J Clin Pathol., Vol. 127, pp. 906-918.

xx

Stapleton, P.A., Goodwill, A.G., James, M.E., Brock, R.W., Frisbee. J.C., 2010.

Hypercholesterolemia and microvascular dysfunction: interventional

strategies. Journal of Inflammation, Vol. 7 No. 54, pp. 3-10.

Sundari. N., 2014. Pengaruh Ekstrak Etanol Daun Alpukat (Persea americana

Mill.) Terhadap Kadar Kolesterol Total Pada Tikus (Rattus novergicus).

Malang : Skripsi Program Sarjana.

Tidarria, W. A., 2014. Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Daun Annona squamosa

Linn. Terhadap Peningkatan Kadar HDL Pada Tikus Rattus norvegicus

Malang : Skripsi Program Sarjana.

Tsalisavrina, I., Handayani, D., Wahono, D., 2006. Pengaruh Pemberian Diet

Tinggi Karbohidrat Dibandingkan Diet Tinggi Lemak Terhadap Kadar

Trigliserida dan HDL Darah Pada Rattus norvegicus Galur Wistar. Jurnal

Kedokteran Brawijaya., Vol. 22, No.02.

Usunobun U., Okolie N. P., Anyanwu O. G. and Adegbegi A.J., 2014.

Phytochemical Screening and Proximate Composition of Annona muricata

Leaves. European Journal of Botany Plant Science and Pathology, Vol.2

No.1, pp. 18-28

Vance, D.E., and Vance, J. E. Biochemistry of Lipids, Lipoproteins and

Membranes, Ed. 4th. USA: Elsevier Science B.V., pp. 1-23.