pembahasan hitungan cawan
TRANSCRIPT
-
8/19/2019 Pembahasan hitungan cawan
1/11
DATA HASIL PENGAMATAN
1. Tuliskan data pengamatan yang diperoleh dari praktikum hitungan cawan
Sampel
Bahan
Pangan
Media
Jumlah koloni pada media *)
POUR SPREAD POUR SPREAD
PengenceranJumlah
koloniPengenceran
Jumlah
koloniPengenceran
Jumlah
koloniPengenceran
Jumlah
koloni
10! 10" 10# 10! 10" 10# 10$ 10! 10" 10$ 10! 10"
DagingAtau
Ikan
NA 393 232 35 2!3"1#
$%&'gr 3() 3)) #3!5"1#
5
$%&'gr
**A 1# # T+&D1!#"1#(
$%&'gr 1 # #
1!#"1#3
$%&'gr
,u-is
Atau
*awi
NA ) 2)!#"1#2
$%&'gr 1# 5
1!#"1#3
$%&'gr
/0*A ) 9 )!#"1#(
$%&'gr 9 52
5!2"1#5
$%&'gr
so'nugget'
sosis
$A T+&D T+&D 1291!3"1#
$%&'gr T+&D 2#( 9
2!#"1#
$%&'gr
0+A T+&D T+&D 1911!9"1#
$%&'gr T+&D 235 1)(
2!("1#
$%&'gr 4 Tuliskan umlah mikro-a yang terdapat pada petridish
-
8/19/2019 Pembahasan hitungan cawan
2/11
2. Tuliskan tahapan dan cara perhitungan anda untuk mendapatkan umlah koloni pada masing6
masing sampel 7
$%1 Anali&a pro&edur
a% Sampel ku'i&(&aur
ada perco-aan menggunakan sampel ku-is! pertama menyiapkan alat dan
-ahan antara lain cawan petri yang sudah terisi media NA dan /0*A! ( ta-ung
reaksi yang masing6masing sudah -erisi pepton 9 ml! mikrotip ukuran 1 ml dan
#!1 ml! mikro pipet! spreader! -unsen! korek api! ku-is! gunting! semua alat
telah disterilisasi. *e-elum melakukan perco-aan hendaknya melakukan aseptis
diri! lingkungan dan alat6alat yang digunakan! untuk mencegah masuknya
kontaminan pada sampel dan dapat menye-a-kan kegagalan pada hasil akhir.
*elanutnya ku-is dipotong dengan ukuran 2 8 2.5 cm. alu dimasukkan
kedalam pepton steril 25 ml yang -erada didalam gelas erlenmeyer dan
digoyangkan se-anyak 25 kali hingga seluruh -agian ku-is tercelup sempurna!
sehingga mikro-a yang ada pada ku-is dapat terse-ar dalam pepton.*elanutnya diencerkan hingga pengenceran 1#6( kemudian di :orte8! dan tiga
pengenceran terakhir diinokulasi pada media NA dan /0*A yang -erada
didalam cawan petri dengan metode spread plate dan pour plate! setiap akan
diinokulasi! harus di :orteks terle-ih dahulu supaya mikro-a dapat terse-ar
merata. Dalam sampel ini menggunakan media NA dan /0*A karena media
NA digunakan untuk pertum-uhan mayoritas dari mikroorganisme yang tidak
selekti;! dalam artian mikroorganisme heterotro;. *edangkan media /0*A
digunakan dapat menum-uhkan dan mengisolasi enis acto-acillus dari
seluruh enis -ahan dan -ersi;at di;erensial dalam artian suatu enis mikro-adapat tum-uh dengan pesat! sementara enis mikro-a yang lain terham-at.
*elanutnya diinku-asi selama 2( am dengan suhu 3#$. ,emudian dihitung
umlah koloni per ml atau *$ dengan menggunakan rumus yang sudah
ditentukan.
'% Sampel ikan
ada perco-aan menggunakan sampel ikan ini adalah pertama menyiapkan
alat dan -ahan. *etelah alat dan -ahan sudah siap maka langkah selanutnya
terle-ih dahulu melakukan aseptis diri! lingkungan dan alat yang akan dilakukan
selama praktikum! untuk mengcegah adanya kontaminasi selama praktikum.
,emudian swa- yang telah direndam dengan pengencer dioleskan pada tiga
-agian yang -er-eda pada sampel ikan. *elanutnya dimasukkan kedalam pepton
tadi dan diputar6putar serta diperas6peras pada dinding ta-ung! supaya -akteri
yang menempel pada swa- atuh pada larutan pepton terse-ut. *elanutnya swa-
di-uang dan ta-ung yang -erisi pepton tadi di :orte8s. *elanutnya diencerkan
hingga pengenceran 1#65. *elanutnya pada tiga pengenceran terakhir diinokulasi
pada media NA dan **A! se-elum menginokulasi mikro-a terse-ut dilakukan
:orteks terle-ih dahulu supaya -akteri tercampur merata. ada perco-aan sampel
ini digunakan media NA karena media ini cocok untuk enis sampel yang
mengandung protein dan -ersi;at umum. *edangkan media **A -ersi;at selekti; dalam artian suatu enis mikro-a tum-uh dengan pesat! sementara enis mikro-a
-
8/19/2019 Pembahasan hitungan cawan
3/11
yang lain terham-at dan dapat mengidenti;ikasi -akteri *almonella dan *higella.
*elanutnya diinku-asi selama 2( am dengan suhu 3#$. *elanutnya dihitung
umlah koloni per ml atau *$ dengan menggunakan rumus yang sudah
ditentukan.
c% Sampel 'ak&oada perco-aan menggunakan sampel -akso ini langkah pertama adalah
menyiapkan alat dan -ahan. *etelah alat dan -ahan sudah siap maka langkah
selanutnya terle-ih dahulu melakukan aseptis diri! lingkungan dan alat yang
akan dilakukan selama praktikum! untuk mengcegah adanya kontaminasi selama
praktikum. ,emudian mengam-il sampel padat se-anyak 5 gram dengan pisau
atau alat yang memudahkan dan telah diaseptis. *elanutnya melarutkan sampel
pada (5 ml pepton 1# 81
10−2 8 1# > 1!# 8 1#(
CFU
g
ada media /0*A = diketahui umlah mikro-a 52 dengan pengenceran 1#6(
*$ > 52 81
10−4 8 1# > 5!2 8 1#5
CFU
g
!% POUR ,ikan)ada media NA = diketahui umlah mikro-a 232 dengan pengenceran 1#6(
-
8/19/2019 Pembahasan hitungan cawan
4/11
*$ > 232 81
10−4 > 2!32 8 1#
CFU
g
ada media **A = diketahui umlah mikro-a 1# dengan pengenceran 1#63
*$ > 1# 81
10−3 > 1!# 8 1#(
CFU
g
"% SPREAD ,ikan)
ada media NA = diketahui umlah mikro-a 3() dengan pengenceran 1#63
*$ > 3() 81
10−3 8 1# > 3!() 8 1#(
CFU
g
ada media **A = diketahui umlah mikro-a 1 dengan pengenceran 1#63
*$ > 1 81
10−3 8 1# > 1!# 8 1#(
CFU
g
#% POUR ,'ak&o)
ada media $A = diketahui umlah mikro-a 129 dengan pengenceran 1# 65
*$ > 129 81
10−5 > 1!3 8 1#
CFU
g
ada media 0+A = diketahui umlah mikro-a 191 dengan pengenceran 1#65
*$ > 191 8
1
10−5 > 1!9 8 1#CFU
g
-% SPREAD ,'ak&o)
ada media $A = diketahui umlah mikro-a 2#( dengan pengenceran 1# 6(
*$ > 2#( 81
10−4 8 1# > 2!# 8 1#
CFU
g
ada media 0+A = diketahui umlah mikro-a 235 dengan pengenceran 1#6(
*$ > 235 81
10−4 8 1# > 2!( 8 1#
CFU
g
2. +ahaslah hasil yang anda peroleh pada masing6masing media untuk satu enis sampel
-ahan pangan 7
a% Sampel ku'i&(&aur
Dari data hasil pengamatan didapatkan hasil -ahwa pada media NA dengan
metode pour plate dan telah melalui pengenceran 1# 62! 1#63! 1#6(! umlah koloni
-erturut6turut adalah )! ! 2. *etelah dihitung umlah koloni per ml nya adalah
)!#"1#2 $%&'gr. alu pada media NA dengan metode spread plate dan telah
melalui pengenceran 1#62! 1#63! 1#6(! umlah koloni -erturut6turut adalah 1#! ! 5.
*etelah dihitung umlah koloni per ml nya adalah 1!#"1#3 $%&'gr. ,emudian pada
-
8/19/2019 Pembahasan hitungan cawan
5/11
media /0*A dengan metode pour plate dan telah melalui pengenceran 1# 62! 1#63!
1#6(! umlah koloni -erturut6turut adalah )! 9! . *etelah dihitung umlah koloni per
ml nya adalah )!#"1#( $%&'gr. alu pada media /0*A dengan metode spread
plate dan telah melalui pengenceran 1#62! 1#63! 1#6(! umlah koloni -erturut6turut
adalah 9! 52. *etelah dihitung umlah koloni per ml nya adalah 5!2"1#5 $%&'gr.
Dalam literatur! semakin tinggi pengenceran maka semakin -anyak umlah
koloni -akteri
-
8/19/2019 Pembahasan hitungan cawan
6/11
1#65! umlah koloni -erturut6turut adalah T+&D! 235! 1)(. *etelah dihitung umlah
koloni per ml nya adalah 2!("1# $%&'gr.
+erdasarkan hasil terse-ut dan di-andingkan dengan literatur! hasilnya telah
sesuai dengan literatur yang menyatakan -ahwa pada metode ini yang dapat
tum-uh adalah -akteri anaero-! karena $A -ersi;at umum maka semua enis
-akteri anaero- yang ada pada sampel dapat hidup! seperti -akteri enis *almonella.
*edangkan media **A digunakan dalam sampel ikan karena media ini cocok untuk
enis sampel protein! -ersi;at selekti; di;erensial sehingga hanya menum-uhkan
-akteri enis salmonella dan shigella yang ada protein
-
8/19/2019 Pembahasan hitungan cawan
7/11
PEMBAHASAN
1. *e-utkan kele-ihan dan kekurangan dari metode pour plate dan spread plate. ,apan kita dapat
menggunakan metode terse-ut@ elaskan alasan anda7
/etode spread plate digunakan digunakan ketika ingin menum-uhkan -akteriaero-!
karena media sudah ada terle-ih dahulu pada cawan kemudian dituangi kultur sehingga
menye-a-kan kondisi aero- oada cawan. ,eunggulan spread plate adalah memisahkan
mikro-a yang aero- dengan mikro-a yang lainnya dan mikro-a yang tum-uh dapat
terse-ar secara merata pada -agian permukaan media agar. *edangkan kekurangnya
adalah harus dilakukan dengan hati6hati dan hanya dapat menum-uhkan -akteri aero-
-
8/19/2019 Pembahasan hitungan cawan
8/11
5. +erikut ini data hasil plating dari sampel ke;ir de carrota pada media /0*A. Citung umlah
koloni -erdasarkan metode *$7
Sampel .eJumlah koloni Pada Pengenceran
10" 10# 10-
1 T+&D 3#5 )9
2 T+&D 2() )2
3 1)9 52 21
( T+&D T+&D 23
5 1) #
Citung -erapa umlah koloni per m nya -erdasarkan aturan *$. Tuliskan tahapan penghitungan
anda7
1. engenceran yang diam-il adalah pengenceran 1#6 karena pada pengenceran terse-ut
menghasilkan umlah koloni kisaran 3#63## )9 81
10−6 > )!9 8 1#/
CFU
g
2. ,arena pada dua pengenceran terse-ut diperoleh umlah koloni kisaran 3#63## maka
menggunakan rumus. Apa-ila hasilnya kurang dari 2 maka diam-il rata6rata. Apa-ila
hasilnya le-ih dari 2 maka diam-il pengenceran terendah
82× 1
10−6
248× 1
10
−5
> #!33 × 1# > 3!3CFU
g 2 maka
diam-il pengenceran terendah.
*$ >248×
1
10−5 > 2!5 8 1#-
CFU
g
3. ,arena pada dua pengenceran terse-ut diperoleh umlah koloni kisaran 3#63## maka
menggunakan rumus. Apa-ila hasilnya kurang dari 2 maka diam-il rata6rata. Apa-ila
hasilnya le-ih dari 2 maka diam-il pengenceran terendah
52× 1
10−5
189× 1
10−4
> #!2 × 1# > 2!CFU g
2 maka
diam-il pengenceran terendah.
*$ >189×
1
10−4 > 1!9 8 1#"
CFU
g
(. ,arena umlah koloni kurang dari kisaran 3# dan ada yang T+&D maka yang diam-il
adalah yang mendekati 3# 23× 1
10−6 > 2!3 8 1#-
CFU
g
-
8/19/2019 Pembahasan hitungan cawan
9/11
5. ,arena umlah koloni kurang dari kisaran 3# maka yang diam-il adalah yang
mendekati 3# 18×
1
10−4 > 1!) 8 1#"
CFU
g
. /engapa pada analisis hitungan cawan satuan yang digunakan $%&'ml -ukan sel per ml@
elaskan alasan anda7
,arena yang dihitung adalah dalam -entuk koloni -ukan sel. $%& sendiri adalah
kependekan dari $oloni %orming &nit yang artinya unit koloni yang ter-entuk. ada
metode hitungan cawan ini uga tidak mungkin untuk menghitung sel karena metode ini
dilakukan dengan mata telanang atau tanpa -antuan mikroskop sehingga yang tampak
adalah -erupa koloni. adi yang dihitung setiap 1 ml adalah umlah koloni mikro-a
-
8/19/2019 Pembahasan hitungan cawan
10/11
-
8/19/2019 Pembahasan hitungan cawan
11/11
12. /engapa suhu inku-asi yang digunakan pada kisaran suhu tertentu@ Apa aki-atnya ika
suhu inku-asi dinaikkan atau diturunkan dari suhu semula@
*uhu inku-asi yang digunakan pada kisaran suhu tertentu karena setiap mikro-a memiliki
karakteristik suhu yang -er-eda6-eda untuk tetap hidup dan -erkem-ang -iak. *uhu
inku-asi sendiri ditentukan dari suhu optimum pertum-uhan mikro-a supaya mikro-a
dapat tum-uh dengan -aik. *ehingga apa-ila suhu inku-asi dinaikkan atau diturunkan dari
suhu semula maka akan mengganggu pertum-uhan mikro-a -ahkan menye-a-kan
kematian pada mikro-a terse-ut karena lingkungan tidak lagi sesuai dengan
karakteristiknya