laporan praktikum asam nukleat.doc
DESCRIPTION
Asam nukleat adalah senyawa kimia yang terdapat di dalam inti sel (Nukleus). Asam nukleat merupakan suatu polimer nukleotida yg berperanan dlm penyimpanan serta pemindahan informasi genetik yang berhubungan dengan pewarisan sifat turunan. Fungsi asam nukleat adalah sebagai pembawa informasi genetik yang mengatur pemunculan sifat suatu makhluk hidup. - See more at: http://www.kamusq.com/2013/05/asam-nukleat-adalah-pengertian-dan.html#sthash.G76vsX8Z.dpufTRANSCRIPT
-
5/19/2018 Laporan Praktikum asam nukleat.doc
1/14
Laporan Praktikum Hari/Tanggal : Jumat/ 29 November 2013
Struktur an !ung"i #iomolekul $aktu : 0%&00'11&00 $(#
PJP : (na Set)a*ati+ S&TP+ ,&Si
-"i"ten : Syahrul Mustofa
-nie"ti .*i !auia
Salmi
ASAM NUKLEAT
Penentuan Konsentrasi RNA dan DNA dalam Homogenat
Hati Tikus
elompok #
Lulu Atul !itriyah "#$%%&&''
ma Lina*ati 4%110010
.*i Nugraa !& 4%110056
-mellia 4%1100%7
DEPARTEMEN ()*K)M)A
!AKULTAS MATEMAT)KA DAN )LMU PEN"ETAHUAN ALAM
)NST)TUT PERTAN)AN (*"*R
(*"*R
+&%'
-
5/19/2018 Laporan Praktikum asam nukleat.doc
2/14
Pendahuluan
-"am nukleat aala makromolekul biokimia )ang komplek"+ berbobot
molekul tinggi+ an ter"u"un ata" rantai nukleotia )ang menganung in8orma"i
genetik& -"am nukleat )ang paling umum aala a"am eok"iribonukleat .N-
an a"am ribonukleat;N-& -"am nukleat itemukan paa "emua "eliup an
viru"& -"am nukleat beraa i alam inti nukleu" "elNgili 2009& -"am nukleat
merupakanbiopolimerengan monomerpen)u"unn)a aala nukleotia& Setiap
nukleotia teriri ata" tiga komponen )aitu "ebua ba"a nitrogen+ gulapento"a+
an gugu"8o"8at& #a"a nitrogen bera"al ari kolompok purin an pirimiin& Purin
utama a"am nukleat aala aenin an guanin+ "eangkan pirimiinn)a aala
"ito"in+ timin+ an ura"il& Nukleotia merupakan nukleo"ia )ang gugu" gula paa
po"i"i 5'n)a mengikat gugu" 8o"8at engan ikatan e"ter& Nukleo"ia teriri ata"
pento"a eok"iribo"a atau ribo"a )ang mengikat "uatu ba"a erivat purin atau
pirimiin melalui ikatan gliko"ia& Nukleo"ia merupakan nukleotia )ang tiak
ter8o"8orila"i tiak berikatan engan 8o"8at Ngili 2009&
-"am nukleat alam "el aa ua
-
5/19/2018 Laporan Praktikum asam nukleat.doc
3/14
t;N-& ,a"ing'ma"ing teriri ata" "atu untai ribonukleotia an mempun)ai
molekul urutan nukleotia "erta 8ung"i biologi" )ang ka" Poe
-
5/19/2018 Laporan Praktikum asam nukleat.doc
4/14
praktikum )aitu paa ari Jumat+ tanggal 22 an 29 November 2013 pukul 0%&00'
11&00 $(#&
#eberapa alat an baan igunakan alam praktikum ini& -lat'alat )ang
igunakan alam praktikum aala bak e"+ gela" piala+ tabung "entri8u"+
"entri8ugator+ pipet ,or+ bulb+ penanga" air+stopwatch+ lemari peningin+ pipet
tete"+ vorteA+ tabung mikro8u"+ mikro8ugator an "pektro8otometer+ "eangkan
baan'baan )ang igunakan alam praktikum meliputi omogenat ati+ e" batu+
larutan H?l@0&7 ,+ larutan @H 0&3 ,+ larutan H?l@ 1&2 ,+ akuae"+ larutan
H?l@ 0&2 ,+ pereak"i or"inol+ larutan "tanar ;N- 125 Bg/mL alam T?- 10C+
pereak"i i8enilamin+ larutan T?- 10C+ an larutan "tanar 500 Bg/mL&
Penentuan konsentrasi RNA dalam homogenat hati,Seban)ak 2&5 mL
omogenat ati "api ipipet an ima"ukkan ke alam tabung "entri8u" )ang tela
iinginkan+ kemuian itambakan 2&5 mL larutan H?l@0&7 , ingin& Setela
iko=ok "ampai rata+ i"impan i alam bak beri"i e" batu "elama 10 menit lalu
i"entri8u" paa ke=epatan 5000 rpm "elama 10 menit& Supernatan )ang terbentuk
ibuang+ lalu pelet )ang terbentuk i"u"pen"ikan engan mL @H 0&3 ,
kemuian ima"ukkan ke alam penanga" air paa "uu 0 o? "elama 0 menit&
Selan
-
5/19/2018 Laporan Praktikum asam nukleat.doc
5/14
larutan "tanar ;N-+ 3 mL pereak"i or"inol+ lalu ipana"kan paa "uu 100 o?
"elama 20 menit an itambakan akuae" "eban)ak 3&5 mL& emuian
iinginkan i alam e" "ebentar+ lalu iukur ab"orban"in)a engan menggunakan
"pektro8otometer paa pan
-
5/19/2018 Laporan Praktikum asam nukleat.doc
6/14
nukleatn)a+ 2memi"akan a"am nukleat ari komponen "el )ang lain+ an
3pemurnian a"am nukleat& ("ola"i 8ragmen .N- atau ;N- "pe"i8ik ari genom
"uatu organi"me apat igunakan untuk menentukan "ekuen" ba"a an mengetaui
8ung"in)a& Taapan pertama )ang aru" ilakukan untuk mengi"ola"i .N- aala
engan meru"ak "el terlebi aulu& Peru"akan "el ter"ebut apat ilakukan
engan =ara mekanik )aitu iblener atau menggunakan baan kimia untuk
menegraa"i an melarutkan komponen ining "el& .N- akan terpi"a menE #intang 2010&
Homogenat ati igunakan alam per=obaan a"am nukleat ini karena "el
ati menganung berbagai ma=am organel+ terutama inti "el& (inti "el ban)ak
menganung a"am nukleat )ang akan igunakan alm per=obaan "eingga akan
lebi mua untuk menapatkan i"olatn)a& Selain itu+ ati mempun)ai 8ung"i
penting alam pro"e" metaboli"me tubu )aitu ati memiliki peranan alam
men"inte"i" protein& Paa organ ati+ "inte"i" proteinn)a tinggi "eingga tingkat
;N-n)a
-
5/19/2018 Laporan Praktikum asam nukleat.doc
7/14
ber8ung"i untuk pengenapan a"am nukleat )ang merupakan makromolekul alam
per=obaan&
Per=obaan penentuan kon"entra"i ;N- illakukan pula penambaan
reagen or"inol )ang bertu
-
5/19/2018 Laporan Praktikum asam nukleat.doc
8/14
4ambar 1 urva "tanar kon"entra"i ;N-
Tabel 2 on"entra"i ;N- ati a)am
Eolume "ampelmL
- terukur - terkorek"i
G;N- Bg/mL
Penggunaan kurva"tanar
Penggunaan "tanartunggal
0&2 0&1%6 0&1%5 &0070 76&02%00&3 0&276 0&275 &036 97&015
?onto peritungan paa "ampel 0&2 mL:
a& on"entra"i ;N- engan penggunaan kurva "tanar
) I a bA
- terkorek"iI a bA
0&1%5 I ' 10&751 5&111 A
A I 0&2003
!P I I 20
G;N- I A &!P
G;N- I 0&2003&20 I &0070 Bg/mL
G;N- rata'rata I Bg/mLI &020 Bg/mL
b& on"entra"i ;N- engan penggunaan "tanar tunggal
I
-
5/19/2018 Laporan Praktikum asam nukleat.doc
9/14
I
G"ampelI I 3&351 Bg/mL
G;N- I on"entra"i "ampel A !P
I 3&351 A 20
I 76&02%0 Bg/mL
G;N- rata'rata I Bg/mLI %1&5213 Bg/mL
#era"arkan per=obaan+ kaar ;N- iitung engan per"amaan kurva
"tanar ) I 5&111A ' 10&751 engan nilai ;K "ebe"ar 0&%5% "eingga iperole
kaar ;N- ati paa "ampel 2 an "ampel 3 berturut'turut )aitu &0070 Bg/mL
an &036 Bg/mL "erta G;N-rata'ratan)a aala &020 Bg/mL "eangkan
a"il peritungan engan "tanar tunggal "ebe"ar 76&02%0 Bg/mL an 97&015
Bg/mL engan G;N-rata'ratan)a "ebe"ar %1&5213 Bg/mL& Ha"il kurva "tanar
menun
-
5/19/2018 Laporan Praktikum asam nukleat.doc
10/14
0&% 0&129 0&12% 100&00
1&0 0&167 0&165 125&00
?onto peritungan:E1 A ,1 I E2A ,2
0&2 mL A 250 Bg/mL I mL A ,2
,2 I
,2 I 12&50 Bg/mL
Tabel on"entra"i .N- ati a)am
Eolume "ampel
mL
-terukur -terkorek"i
G.N- Bg/mL
Penggunaan kurva"tanar
Penggunaan "tanartunggal
0&5 0&195 0&192 37%0 1030&0291&0 0&323 0&320 720 1617&63%2
?onto peritungan paa "ampel 0&5 mL:
a& on"entra"i .N- engan penggunaan kurva "tanar
) I a bA
- terkorek"i I 0&00% 0&001 A
0&192 I 0&00% 0&001 A
A I 1%
!P I I 20
G.N- I A &!P
G.N- I 1% &20 I 37%0 Bg/mL
-
5/19/2018 Laporan Praktikum asam nukleat.doc
11/14
G.N- rata'rata I Bg/mLI 970 Bg/mL
b& on"entra"i .N- engan penggunaan "tanar tunggal
I
I
on"entra"i "ampel I I 51&5021
G.N- I on"entra"i "ampel A !P
I 51&5021 Bg/mL A 20
I 1030&029 Bg/mL
G.N- rata'rata I Bg/mLI 1363&3907 Bg/mL
;atio ;N-/.N- kurva "tanarI ;ata'rata ;N-/rata'rata .N- A 100C
I &020/970 g/mL A 100C
I 0&0%11 C
;atio ;N-/.N- "tanar tunggalI ;ata'rata ;N-/rata'rata .N- A 100C
I %1&5213/1363&3907 g/mL A 100C
I 5&935% C
#era"arkan per=obaan+ per"amaan kurva "tanar .N- aala ) I 0&001A
0&00% engan nilai ;K "ebe"ar 0&950 "eingga iperole kaar .N- ati paa
"ampel 0&5 mL an "ampel 1&0 mL berturut'turut aala 37%0 Bg/mL an 720
Bg/mL sertaG.N-rata'ratan)a aala 970 Bg/mL "eangkan a"il peritungan
engan "tanar tunggal "ebe"ar 1030&029 Bg/mL an 1617&63%2 Bg/mL serta
G.N-rata'ratan)a aala 1363&3907 Bg/mL& aar .N- alam ati lebi be"ar
-
5/19/2018 Laporan Praktikum asam nukleat.doc
12/14
aripaa kaar ;N-& on"entra"i .N- lebi be"ar aripaa ;N- karena i
alam "el kuran pori
agaro"e "e"uai untuk pemi"aan polimer a"am nukleat )ang ter"u"un ari ratu"an
nukleotia& Selain itu+ apat engan menggunakan pereak"i #ra8or& Si8at reagen
ini lebi prakti" an "en"iti8+ "elain itu
-
5/19/2018 Laporan Praktikum asam nukleat.doc
13/14
"erta G;N-rata'ratan)a aala &020 Bg/mL "eangkan a"il peritungan
engan "tanar tunggal "ebe"ar 76&02%0 Bg/mL an 97&015 Bg/mL engan
G;N-rata'ratan)a "ebe"ar %1&5213 Bg/mL& aar .N- ati paa "ampel 0&5 mL
an "ampel 1&0 mL berturut'turut aala 37%0 Bg/mL an 720 Bg/mL "erta
G.N-rata'ratan)a aala 970 Bg/mL "eangkan a"il peritungan engan
"tanar tunggal "ebe"ar 1030&029 Bg/mL an 1617&63%2 Bg/mL "erta G.N-rata'
ratan)a aala 1363&3907 Bg/mL "eingga kaar .N- lebi be"ar aripaa kaar
;N-& #era"arkan peritungan+ iketaui pula ra"io ;N- engan .N- alam
ati "ebe"ar 0&0%11 C paa peritungan kurva "tanar an 5&935% C engan
"tanar tunggal&
Daftar Pustaka
#intang& 2010&Biokimia: Teknik Penelitian& Jakarta: rlangga&
#ra8or ,,& 1967& - ;api an Sen"itive ,eto 8or te Muanti8i=ation o8
,i=rogram Muantitie" o8 Protein >tiliing te Prin=iple o8 Protein')e
#ining&Journalof Analytical Biochemistry 62: 2%'25&
?ampbell N-+ ;ee=e',it=ell&2002& Biologi disi !elima"Jilid #& Penerbit:
rlangga
oolman J an ;oem H& 2005& Colour Atlas of Biochemistry $nd
d& Ne* Dork:Tieme&
Leninger -L& 200& %asar"%asar Biokimia Jilid #& ,agg) Tena*i
-
5/19/2018 Laporan Praktikum asam nukleat.doc
14/14