uji serologi dalam virologi

8/16/2019 Uji Serologi Dalam Virologi

1/15

UJI SEROLOGI DALAM VIROLOGI

PENDAHULUAN

Antibodi dihasilkan oleh sistem imun sebagai respon terhadap berbagai ancaman

bagi tubuh, seperti infeksi, dan serologi merupakan ilmu pengukuran antibodi-

antibodi tersebut di dalam serum. Secara konvensional, istilah ‘serologi’ juga

meliputi studi mengenai serum untuk antigen dan, melalui pengembangandefinisi, suatu tes yang melibatkan sebuah reaksi antigen – antibodi yang

didefinisikan sebagai uji atau tes serologi. ji serologi menyadari fakta bah!a

sebagian besar infeksi virus dan banyak infeksi bakteri, jamur dan parasit

menimbulkan respon antibodi yang baik. ji-uji tersebut telah digunakan untuk

diagnosa penyakit yang disebabkan oleh virus atau penyakit lainnya dimana

organisme tidak mudah untuk diisolasi, seperti Toksoplasma dan sipilis. "ada

infeksi yang disebabkan oleh virus, seperti hepatitis #, dimana terjadi fase

perpanjangan viraemic $endemik yang disebabkan oleh virus%, teknik-teknik

serupa dapat digunakan untuk mendeteksi antigen virus. #ab ini, !alaupun

sebagian besar bersinggungan dengan serologi virus, juga akan

mempertimbangkan uji-uji serologi lainnya yang baru-baru ini digunakan di

dalam laboratorium-laboratorium serologi untuk diagnose penyakit menular dan

akan mengulas mengenai prinsip, teknik, interpretasi dan masa depan dari uji-uji

tersebut.

PRINSIP

&elas antibodi yang dihasilkan atau diproduksi dan properti-properti

fungsionalnya dapat dieksploitasi guna mengukur respon imun setelah infeksi.

&elas-kelas antibodi yang sangat bermanfaat dalam mengukur respon imun adalah

'g( dan 'g). "engukuran sekresi dan serum antibodi 'gA juga sangat bermanfaat

namun secara teknis lebih sulit sehingga tidak digunakan secara rutin di dalam

laboratorium diagnosa. Antibodi pertama yang dihasilkan setelah infeksi primer

1


2/15

adalah kelas 'g( dan secara umum menjadi dapat terdeteksi * – + hari setelah

munculnya gejala, namun tetap dapat terdeteksi selama – *+ minggu. Antibodi

'g) tertentu mulai muncul pada * – + minggu dan tetap dapat terdeteksi selama

beberapa tahun, jika tidak seumur hidup, setelah infeksi terjadi. leh karena itu,

virus antibodi 'g) tertentu itu sendiri dihubungkan dengan infeksi masa lalu dan

pada sebagian besar kasus menandakan imunitas dengan infeksi di masa

mendatang. i sisi lain, karena virus antibodi 'g( tertentu secara umum dapat

terdeteksi setelah / bulan, keberadaannya mengindikasikan infeksi yang terjadi

saat ini. )ambar +0.* menunjukkan sebuah representasi grafis dari respon 'g(

dan 'g) setelah infeksi primer. leh karena itu, pengukuran antibodi 'g) dan 'g(

tertentu di dalam sebuah sampel serum tunggal, dapat membantu diagnose dan

membedakan infeksi virus di masa lalu dengan infeksi virus yang terjadi saat ini.

#anyak teknik, seperti 12'SA atau 1'A $enzyme-linked immunoassay%, '3A

$immunofluorescent assay% dan 4'A $radioimmunoassay% telah dikembangkan

untuk mengukur 'g( dan 'g) tertentu. Assay $uji kadar logam% tersebut biasanya

digunakan untuk mendapatkan hasil akhir yang ‘kualitatif’, yakni, hasil akhir tes

yang positif atau negatif, dan bukan k!antitatif. (ereka memiliki prinsip-prinsip

yang sama, dimana reaksi antibodi dengan antigen dideteksi melalui penambahan

antibodi kedua yang diberikan kepada immunoglobulin manusia. Anti-

imunoglobulin dilabeli dengan fluorescein $'3A%, en5im $12'SA% atau radioisotop

$4'A%. 6eknik-teknik tersebut juga dapat digunakan untuk mendeteksi antigen.

Antibodi yang diproduksi sebagai respon terhadap sebuah infeksi bisa jadi

memiliki properti fungsional yang berbeda, yakni, properti fungsional yang bisa

jadi merupakan pelengkap fixing $memperbaiki secara lengkap%,

haemagglutinating $memadukan haemolisis% atau neutralizing $menetralkan%.

Antigen-antigen yang terdapat pada virus menentukan properti fungsional

antibodi yang dihasilkan sebagai respon, sehingga hanya virus-virus tersebut

$misal, rubella, campak atau influen5a% yang memiliki haemagglutin, yang akan

menghasilkan antibodi yang memadukan haemolisis. "engetahuan mengenai

struktur antigenik dari sebuah virus dapat digunakan untuk merancang uji serologi

yang sesuai, seperti uji complement fixation $73%, haemagglutination $8A% atau

2


3/15

haemagglutination inhibition $8'%. ji-uji tersebut mendeteksi kelas-kelas 'g)

dan 'g( antibodi pada saat bersamaan dan mampu untuk menghitung respon

serologi. #erbagai dilusi serum dapat dilakukan untuk menentukan titer dari

antibodi yang ada. Sampel-sampel serum yang dari masa akut dan sembuh

diperlukan guna membuat sebuah diagnosa mengenai infeksi saat ini, peningkatan

kadar antibodi sebanyak empat kali lipat atau lebih telah didiagnosa.

Teknik

6eknik-teknik serologi dapat dibagi berdasarkan pada kompleksitas dari suatu tes

atau pengujian. 6es yang paling sederhana adalah tes yang dimana keberadaan

antibodi ditunjukkan oleh sebuah interaksi sederhana dengan antigen $uji

presipitasi atau aglutinasi%. #erikutnya adalah tes atau pengujian yang melibatkan

beberapa system indicator untuk mendeteksi reaksi antigen – antibodi $netralisasi

atau fiksasi lengkap%. "engujian atau tes yang paling kompleks melibatkan

penggunaan sistem antibodi berlabel kedua, seperti 12'SA atau '3A.

Presipitasi

(etode difusi ganda $% milik uchterlony dapat digunakan untuk mendeteksi

antibodi maupun antigen. "ada kasus pertama, antigen yang diketahui, digunakan

dan pada kasus kedua, antibodi dengan spesifisitas yang diketahui, digunakan.

Antibodi dan antigen berdifusi satu sama lain di dalam gel agarose dan garis

presipitasi putih mengindikasikan sebuah reaksi positif. Secara spesifik, 7'1

$counter-immunoelectrophorescence% mengarahkan pergerakan antigen dan

antibodi ke satu sama lain di dalam sebuah cairan elektrik sehingga lebih cepat

dari . "ada a!alnya, 7'1 merupakan metode yang digunakan dalam

mendeteksi antigen permukaan hepatitis #. (etode-metode tersebut sebagian

besar telah diganti dengan teknik-teknik yang jauh lebih sensitif, kendatipun

beberapa laboratorium masih menggunakan mereka untuk tes atau pengujian

antibodi jamur.

3


4/15

Haemaglutinasi dan inhibisi haemaglutinasi [HA dan HAI]

8aemaglutinin dimiliki oleh virus-virus tertentu seperti virus-virus influen5a,

rubella dan campak yang memiliki properti yang dapat melakukan aglutinasi sel

darah merah $4#7% spesies tertentu. "engujian 8A banyak digunakan dengan

virus influen5a. 'nfluen5a A dan # memadukan 4#7 manusia kelompok ,

kelinci dan unggas pada suhu 9o7 dan +0o7, sedangkan influen5a 7 hanya

memadukan 4#7 unggas. leh karena itu, uji 8A sangat bermanfaat dalam

mendeteksi dan titrasi antigen virus. 8A' memanfaatkan keberadaan

haemaglutinin pada virus untuk mendeteksi antibodi. "engujian dilakukan

berdasarkan pada prinsip dimana antibodi tertentu berkombinasi dengan

haemaglutinin dan menghambat 8A. #erbagai dilusi serum pasien dibiarkan

untuk bereaksi dengan haemaglutinin dalam jumlah tertentu dan kemudian 4#7

indikator yang sesuai ditambahkan. :ika terdapat antibodi tertentu, ia akan

menghalangi haemaglutinin dan oleh karena itu, reaksi positif ditunjukkan oleh

ketiadaan haemaglutinin. Saat antibodi tertentu tidak ada, haemaglutinin viral

bebas untuk perpaduan 4#7 indikator $reaksi negatif%. i masa lalu, pengujian

atau tes 8A' banyak digunakan untuk menetapkan status imun dan mendiagnosa

infeksi virus rubella saat ini. Akan tetapi, 8A' diperumit oleh fakta bah!a serum

membutuhkan pemeriksaan terlebih dahulu untuk menghilangkan inhibitor-

inhibitor non spesifik dan oleh karena itu, teknik ini telah diganti dengan teknik-

teknik yang lebih sensitif dan spesifik untuk diagnosa rubella. #agaimanapun,

8A' masih digunakan oleh laboratorium referensi untuk identifikasi dan

penentuan tipe virus influen5a. 6eknik-teknik 8A juga dapat digunakan untuk

virus-virus yang tidak memiliki haemagglutinin. 8al ini dilakukan dengan

memasangkan antigen virus pada permukaan 4#7 dengan sebuah agen pengikat

seperti asam tanik. Saat dicampurkan dengan serum yang mengandung antibodi

tertentu, 4#7 di-aglutinasi karena antigen virus terikat pada permukaan mereka

$8A pasif atau tidak langsung%. 8A tidak langsung telah digunakan untuk

mendeteksi antibodi bagi toksoplasma. Akan tetapi, karena instabilitas 4#7,

4


5/15

partikel-partikel pemba!a seperti lateks, gelatin dan partikel karbon kini

digunakan.

Pengujian aglutinasi partikel

Ada banyak tes atau pengujian yang dilakukan berdasarkan pada aglutinasi

partikel. 6es-tes tersebut dilakukan pada sebuah kaca atau karton. #erikut adalah

contoh dari beberapa tes paling umum yang dilakukan saat ini.

Aglutinasi lateks [LA]

"artikel-partikel mikro lateks polistiren adalah partikel yang sangat sensitif ataudilapisi dengan antigen virus yang mengalami aglutinasi saat dicampurkan dengan

serum pasien yang mengandung antibodi tertentu. "artikel-partikel lateks yang

dilapisi antigen dicampurkan dengan serum pasien pada sebuah kaca atau

mikrotiter. "ola aglutinasi akan tampak jika terdapat antibodi tertentu. 6es-tes

tersebut banyak digunakan dalam laboratorium-laboratorium virus karena

kecepatan, kesederhanaan dan kemudahan penggunaannya. Saat ini, terdapat

pengujian atau tes 2A yang baik untuk rubella, toksoplasma dan sitomegalovirus.

6es atau pengujian 2A digunakan untuk memeriksa sampel serum tunggal guna

menentukan imunitas dan dipasangkan sera untuk mendiagnosa infeksi saat ini.

Tes aglutinasi partikel gelatin [GPAT]

"artikel-partikel gelatin dilapisi dengan antigen dan berbagai dilusi serum pasien

diuji di dalam mikrotiter. 6iter antibodi ditentukan oleh dilusi serum tertinggi

yang meng-aglutinasi partikel-partikel yang dilapisi oleh antigen. Aglutinasi non

spesifik bisa saja terjadi, oleh karena itu partikel-partikel gelatin selalu disertakan

sebagai kontrol $)ambar +0.+%

VDRL

;42 merupakan uji serologi untuk pemeriksaan infeksi sipilis. (odifikasi dari

tes ini menggunakan antigen yang mengandung karbon mikropartikulat untuk

memeriksa antibodi reagin. "enggunaan partikel-partikel karbon meningkatkan

5


6/15

pembacaan visual hasil akhir tes pada kertas atau bahan dengan latar belakang

putih.

Perbaikan lengkap [CF]

Serum pasien, setelah inaktivasi pada suhu


7/15

LI!A [n"#me$linked immun%abs%rbent assa#s]

'ni merupakan uji serologi yang populer saat ini. Ada banyak variasi di dalam

metodologi ini, namun semuanya melibatkan penambahan antigen ke fase solid

yang umumnya adalah plat maupun butir polistiren atau polivinil. Serum pasien

ditambahkan dan, setelah kurun !aktu yang sesuai guna membiarkan antibodi

terikat pada antigen dalam fase solid, material ikatan non spesifik dan serum yang

berlebih dihilangkan dengan mencucinya. 'mmunoglobulin anti-manusia dilabeli

melalui konjugasi dengan sebuah en5im $konjugat% kemudian ditambahkan.

&onjugat mengikat diri pada antibodi di dalam kompleks antigen – antibodi.&onjugat yang berlebihan kemudian dicuci dan keberadaan ikatan

immunoglobulin anti-manusia berlabel dideteksi dengan penambahan substrat

yang sesuai untuk pemberian label en5im. :ika reaksi yang sesuai telah terjadi,

maka substrat dikonversi menjadi sebuah produk yang menyerap cahaya dan

ber!arna. engan ketiadaan antibodi, tidak ada !arna yang dihasilkan $)ambar

+0./%. 'ntensitas !arna berhubungan secara langsung dengan jumlah antibodi

yang terikat dengan antigen. "erubahan !arna dapat dilihat dengan mata telanjang

atau dibaca melalui sebuah spektrofotometer guna menghasilkan kekuatan reaksi

yang tepat. Sistem substrat – en5im yang umum digunakan adalah 84"

$horseradish peroxidase%, " $O-phenylene diamine%, dan alkalin fosfatase serta

p-nitrofenil fosfatase. ntuk mengadaptasi pengujian bagi deteksi antigen, fase

solid dilapisi dengan antibodi yang spesifik agar antigen dapat dideteksi. Antibodi

berlabel kedua kemudian ditambahkan untuk mendeteksi kompleks antigen –

antibodi pada permukaan fase solid. engan bergantung pada urutan reaksi, 12SA

dibagi menjadi assay langsung, tidak langsung, penangkapan atau kompetitif.

Assay atau pengujian kadar logam tersebut spesifik untuk 'g( atau 'g), dengan

bergantung apakah immunoglobulin 'g( atau 'g) anti-manusia digunakan

sebagai antibodi kedua atau tidak. ntuk tinjauan ulang yang lengkap, lihatlah

#ooth, *>?/ $lihat aftar "ustaka%

12'SA merupakan sebuah teknik yang sangat sensitif karena k!antitas

en5im yang sangat kecil dapat mengolah atau memproses substrat dalam jumlah

besar. 8asil akhir 'g( yang salah negatif bisa saja terjadi dengan keberadaan

7


8/15

kadar 'g) tertentu yang tinggi, yang berebut antigen pada fase solid. 8al ini dapat

dihindari dengan memindahkan atau membuang 'g) sebelum menguji sampel.

4eaksi non spesifik di dalam assay 'g( juga dapat terjadi karena keberadaan

faktor rheumatoid $43%. 3aktor 43 kelas 'g( mengikatkan diri pada antigen-

antigen baru yang terekspos terkait dengan perubahan konfigurasi pada region 3c

dari molekul 'g) tertentu saat mengikatkan diri ke antigen pada fase solid. 43

'g( tidak dapat dibedakan dari 'g( virus tertentu, namun 43 dapat dihilangkan

melalui absorpsi dengan 'g) yang terkumpul sebelum menguji 'g(. Assay

penangkapan untuk 'g( lebih disukai, karena mereka tidak dipengaruhi oleh 43

atau 'g) spesifik di dalam serum pasien. 12'SA memiliki keunggulan dengan

sifatnya yang objektif, dapat diotomatisasi dengan mudah dan tidak memerlukan

banyak keahlian teknis. (ereka merupakan tes atau uji yang cepat dan sebagian

besar assay dapat diselesaikan dalam kurun !aktu + – / jam. Sebagian besar, jika

tidak semua, laboratorium mikrobiologi memiliki peralatan yang dapat digunakan

untuk melakukan 12'SA, yang banyak digunakan untuk memeriksa dan

mendiagnosa serologi 8';, hepatitis viral, rubella, sitomegalovirus, virus 1pstein-

#arr, virus varicella zoster , campak, gondok, toksoplasma, Chlamydia

trachomatis, dll.

Immun%&lu%res'en'e [IF]

"ada '3 tidak langsung untuk mendeteksi antibodi, sel-sel yang terinfeksi oleh

virus atau antigen bakterial terfiksasi pada bagian tengah kaca berlapis 6eflon,

serum pasien ditambahkan dan reaksi antigen – antibodi terdeteksi oleh

penambahan immunoglobulin anti-manusia yang dilabeli dengan fluorescein dye

$ flourescein isothionate%. 4eaksi dibaca dengan menggunakan sebuah mikroskop

sinar pijar, reaksi positif diindikasikan oleh sinar ber!arna hijau apel. ji '3 tidak

langsung untuk mendeteksi antibodi 'g( dan 'g) bagi sitomegalovirus, virus-

virus 1pstein-#arr dan varicella zoster telah digunakan selama beberapa tahun.

4eaksi positif salah terkait dengan ekspresi reseptor pada sel-sel yang terinfeksi,

dimana antibodi spesifik non virus dari kelas 'g( bisa jadi terikat, merupakan

sebuah masalah. ji '3 juga memerlukan peralatan khusus, seperti mikroskop

8


9/15

pijar, dan dapat menimbulkan kesalahan operator dalam membaca hasil. leh

karena itu, sebagian besar dari teknik ini telah digantikan dengan 12'SA untuk

deteksi antibodi. i sisi lain, ketersediaan monoklonal berkualitas baik bagi

berbagai antigen viral telah menjadikan metode '3 langsung sebagai pilihan untuk

mendeteksi antigen di berbagai jaringan dan sampel. (ateri yang terinfeksi

difiksasi pada sebuah kaca dengan bantuan aseton atau alkohol dan ditandai

dengan antibodi monoklonal berlabel fluorescein yang ditujukan bagi antigen

melalui tes. '3 langsung banyak digunakan untuk diagnosa virus-virus saluran

pernapasan dengan menguji sel-sel epitel dari saluran pernapasan nasofaring

untuk virus pernapasan, virus-virus influen5a A dan #, virus-virus parainfluen5a

*, + dan / dan adenovirus.

RIA [Radi%immun%assa#]

6eknik ini memiliki prinsip yang sama dengan 12'SA. ji 4'A menggunakan

sebuah label radioisotop sebagai ganti dari label en5im. &arena singkatnya masa

hidup radiolabel dan keharusan membakar radioaktivitas khusus, mereka telah

digantikan oleh 12'SA.

() [(estern )l%t] atau LIA [line immun%assa#]

6eknik ini menyediakan sebuah peralatan yang sangat spesifik dan sensitif untuk

deteksi dan karakterisasi antibodi bagi mikroorganisme melalui kebaikan ikatan

mereka ke antigen yang telah diafiksasi ke membran nitroselulosa. #agi @#,

protein-protein bakteri atau virus semi-purifikasi, dipisahkan oleh elektroforesis

pada sebuah gel poliakrilamid dan kemudian secara elektroforesis ditransfer ke

sebuah membran nitroselulosa. i 2'A antigen viral, yang diproduksi melalui

teknik-teknik molekul membran atau disintesis secara artifisial $peptida sintetis%,

dipasangkan secara langsung ke membran nitroselulosa. (embran nitroselulosa

diinkubasi dengan serum pasien guna memungkinkan antibodi untuk mengikatkan

diri ke antigen yang telah difiksasi pada membran. 'mmunoglobulin anti-manusia

berlabel en5im kemudian ditambahkan dengan prinsip yang sama dengan yang

ada pada 12'SA. 2angkah-langkah pencucian yang sesuai disertakan. "ada

9


10/15

penambahan substrat, band antigen, dimana antibodi tertentu terdapat, menjadi

dapat dilihat.

*+i a,iditas antib%di

6eknik-teknik untuk mengukur aviditas antibodi 'g) telah dikembangkan untuk

membantu dalam penentuan !aktu infeksi melalui serologi. Antibodi dengan

aviditas rendah pada a!alnya dihasilkan setelah infeksi primer, sedangkan

antibodi dengan aviditas tinggi diproduksi setelah reinfeksi. ji aviditas antibodi

dilakukan berdasarkan pada prinsip bah!a kompleks-kompleks antigen – antibodi

dengan aviditas tinggi memerlukan lebih banyak energi untuk disosiasi atau

pencegahan pembentukan kompleks. "ada saat tes, antibodi dengan aviditas

rendah dihilangkan baik melalui pencucian dengan ? ( urea $disosiasi% atau

mencegah terjadinya ikatan melalui penggunaan protein yang mengubah sifat

agen guanidine hidroklorid di dalam serum cairan diluen. 'nti kontrol dira!at

dengan pencucian normal dan cairan diluen. Antibodi-antibodi kompleks fase

solid kemudian dideteksi dalam tes dan saat kontrol. :ika sebuah antibodi

memiliki aviditas tinggi, maka tidak ada perbedaan yang signifikan antara

pembacaan tes dan saat kontrol, karena kompleks-kompleks tersebut tidak dapat

mengalami disosiasi dengan mudah atau dicegah untuk terbentuk. Assay aviditas

telah menjadi teknik yang sangat berarti dalam manajemen infeksi rubella dan

Toksoplasma pada kehamilan, dengan membantu menentukan penentuan !aktu

infeksi.

!er%l%gi pada sampel$sampel n%n serum

12'SA penangkapan 'g) dan 'g( telah diadaptasi untuk pengujian sampel-

sampel urine dan ludah. &arena kedua sampel tersebut merupakan jenis sampel

non invasif, mereka lebih mudah untuk didapat dari anak-anak dan kelompok lain,

seperti para pengguna obat terlarang melalui jarum suntik, dimana sulit sekali

untuk mendapatkan sampel darah mereka. iagnosa serologi dengan menguji air

liur atau ludah kini banyak dilakukan untuk campak, gondok dan rubella.

10


11/15

"enga!asan dan pemeriksaan serologi infeksi 8'; berskala besar telah dilakukan

dengan menguji urine dan ludah.

Interpretasi an Penggunaan Uji Ser!l!gi

&emampuan untuk menjadikan 12'SA semi atau sepenuhnya terotomatisasi,

membuat tes atau uji tersebut banyak digunakan oleh sejumlah laboratorium. 6es-

tes terdahulu secara teknis lebih sulit dan hanya terbatas pada beberapa

laboratorium khusus. (unculnya teknologi 12'SA, berbarengan dengan

kesadaran akan pentingnya infeksi viral pada banyak kelompok pasien yang

rentan, telah membuat serologi menjadi hal yang utama dalam diagnosa virus.

Serologi kini telah ditetapkan untuk diagnosa infeksi, khususnya penyakit

viral atau yang disebabkan oleh virus. 6eknologi yang lebih baru berarti bah!a

ada banyak tes atau uji diagnosa rutin yang dapat dilakukan oleh laboratorium

mikrobiologi umum maupun laboratorium non spesialis lainnya.

Diagn%sa in&eksi akut

Studi-studi serologi berperan besar bagi diagnosa penyakit infeksi. #iasanya,

konfirmasi serologi memerlukan pemeriksaan sampel serum yang diambil segera

setelah serangan penyakit $akut% dan sampel kedua * – + minggu kemudian $mulai

membaik%. "eningkatan empat kali lipat dalam antibodi atai serokonversi dari

antibodi status negatif menjadi positif antara sampel-sampel akut dan sedikit

membaik mengindikasikan infeksi akut. Akan tetapi, teknologi-teknologi baru

untuk deteksi 'g( dan 'g) spesifik memungkinkan laboratorium untuk membuatsebuah diagnosa atau menetapkan sebuah infeksi yang dicurigai pada sebuah

sampel serum tunggal. &arena itulah, 12'SA banyak digunakan oleh

laboratorium-laboratorium mikrobiologi. :ika 'g) dan 'g( tidak terdeteksi, maka

pasien tidak terekspos ke suatu organism atau sampel diambil terlalu dini. &arena

antibodi 'g( bagi sebagian besar virus dapat terdeteksi dalam * minggu dari

serangan gejala, sampel diambil pada !aktu ini, jika negatif, untuk 'g( viral,

cukup untuk menetapkan infeksi saat ini. 'g( spesifik biasanya hanya dapat

11


12/15

terdeteksi selama / bulan, namun assay yang lebih sensitif dapat mendeteksi 'g(

hingga *+ bulan ke depan. &arena 'g) hanya akan muncul di kemudian hari,

reaksi 'g( positif, mengindikasikan infeksi saat ini. 'g) spesifik tetap positif

untuk hidup, oleh karena itu keberadaan 'g) itu sendiri, dengan 'g( negatif,

mengindikasikan infeksi masa lalu dan pada sebagian besar kasus, imunitas dari

infeksi selanjutnya bagi organisme spesifik tersebut. :elas sekali bah!a seleksi

atau pemilihan tes dan interpretasi hasil akhir bergantung pada kondisi klinis dan

tanggal serangan gejala terjadi, yang oleh karena itu, harus selalu

dikomunikasikan dengan laboratorium.

Deteksi antib%di untuk ,eri&ikasi imunitas

;erifikasi imunitas bagi infeksi diperlukan di banyak situasi klinis, seperti setelah

vaksinasi, sebelum pemeriksaan, kehamilan, sebelum transplantasi atau pada

pasien-pasien immunosupressed yang mungkin mengalami kontak dengan infeksi.

6es untuk mendeteksi antibodi protektif harus sensitif dan memerlukan pengujian

'g) spesifik. 12'SA 'g) viral khusus, '3A atau tes antibodi total, seperti tes

aglutinasi lateks, digunakan.

Survei epidemiologi serologi pasca vaksinasi untuk menetapkan

serokonversi dan imunitas setelah vaksinasi untuk campak, gondok, rubella dan

hepatitis # telah menjadi bagian penting dalam evaluasi keefektifan program

vaksinasi. 12'SA sensitif yang dapat diotomatisasi telah menjadikan banyak

pemeriksaan pasca vaksinasi massal menjadi mungkin untuk dilakukan. Antibodi

bagi hepatitis # diekspresikan dalam unit-unit internasional dan kemampuan

untuk menghitung ini memungkinkan dokter untuk memutuskan penentuan !aktu

tindak lanjut.

'munitas terhadap rubella dan hepatitis # merupakan prasyarat kerja bagi

banyak pekerja layanan kesehatan. 'munitas terhadap infeksi-infeksi lain, seperti

virus varicella zoster , campak dan gondok, juga diharuskan, khususnya bagi

mereka yang bekerja dengan anak-anak atau pasien immunocompromised ,

keduanya untuk melindungi diri mereka sendiri dan mencegah penyebaran infeksi

pada pasien yang rentan. (ereka yang rentan terhadap infeksi varicella zoster dan

12


13/15

yang berhubungan atau dekat dengan penderita cacar air, harus dikeluarkan, guna

menghindari ekspos pasien-pasien yang rentan untuk mengalami infeksi.

Selama kehamilan, pemeriksaan untuk mendeteksi antibodi protektif

terhadap rubella diberikan kepada seluruh pasien, pasien yang rentan telah

divaksin setelah partum. 6elah direkomendasikan bah!a seluruh pasien harus

diperiksa untuk virus hepatitis #, dan imunisasi hepatitis # diberikan kepada bayi

dari ibu yang terinfeksi guna mencegah penyebaran infeksi yang vertikal.

"emeriksaan 8'; untuk para ibu yang beresiko memungkinkan pemberian obat-

obatan tertentu kepada ibu selama kehamilan dan persalinan guna mengurangi

resiko penyebaran vertikal 8';. "emeriksaan bagi antibodi untuk organisme lain,

seperti varicella zoster , toksoplasma dan sitomegalovirus, memungkinkan dokter

untuk memberikan nasehat kepada pasien yang rentan mengenai cara untuk

menghindari infeksi. Seluruh pemeriksaan tersebut memerlukan 12'SA 'g) yang

sederhana atau uji aglutinasi lateks. Akan tetapi, dalam kasus kontak terkini

dengan infeksi, assay 'g( harus dilakukan sebagai pelengkap guna memastikan

bah!a 'g) yang terdeteksi berasal dari infeksi di masa lalu dan bukan dari infeksi

saat ini.

Pasien transplantasi dan immun%suppressed

"asien-pasien tersebut rentan untuk mengembangkan infeksi sitomegalovirus

$7(;%. "asien-pasien antibodi negatif 7(; yang mendapatkan organ dari

seorang donor positif 7(;, memerlukan profilaksis guna mencegah

berkembangnya infeksi 7(; primer. Sebagai tambahan, infeksi toksoplasma

yang didapatkan donor merupakan masalah yang serius pada penerima

transplantasi jantung, jadi seluruh donor dan penerima diperiksa untuk antibodi

bagi toksoplasma, dan penerima jantung negatif dari donor antibodi positif

toksoplasma diberikan profilaksis. "asien-pasien immunosuppressed juga

diperiksa untuk infeksi-infeksi umum, seperti cacar air, herpes simplex, dan

campak, karena mereka bisa jadi menderita penyakit parah jika mereka terekspos

pada infeksi tersebut.

13


14/15

Pemeriksaan d%nasi darah- %rgan dan +aringan

#anyak organisme, khususnya virus-virus yang diba!a darah, dapat disebarkan

melalui darah dan produk-produk darah, organ dan transplantasi jaringan. Sangat

penting sekali bah!a darah dapat diperiksa untuk hal-hal tersebut sebelum

dilakukan transfusi. i 'nggris, seluruh darah diperiksa untuk 8';, hepatitis #,

hepatitis 7 dan sipilis. alam kasus virus 8'; dan hepatitis 7, keberadaan

antibodi menandakan infeksi terkini dan pemeriksaan untuk antigen viral tidak

diperlukan. arah yang diberikan kepada pasien immunosuppressed juga

diperiksa untuk 7(;. &arena pentingnya membuang darah yang terinfeksi, hanya pengujian yang paling sensitif yang digunakan. onasi yang terbukti positif

kemudian harus menjadi subjek bagi dilakukannya pemeriksaan konfirmasi oleh

laboratorium referensi khusus. alam hal volume pemeriksaan yang diperlukan,

Blood Transfussion aboratories atau 2aboratorium 6ransfusi arah telah meng-

otomatisasi sistem 12'SA untuk pemeriksaan mikrobiologi darah. onor organ

dan jaringan juga harus melakukan prosedur pemeriksaan serupa.

Diagn%sa in&eksi k%ngenital

&arena 'g) ibu melalui plasenta ke fetus atau janin, keberadaan 'g) viral spesifik

di dalam darah neonatal tidak selalu mengindikasikan infeksi. "ersistensi antibodi

'g) diluar usia bulan mengindikasikan infeksi kongenital, karena antibodi yang

diperoleh dari ibu biasanya menghilang setelah itu. &eberadaan 'g( spesifik pada

atau segera setelah kelahiran mengindikasikan infeksi kongenital atau vertikal,

karena kelas antibodi 'g( tidak melalui plasenta.

Masa epan ser!l!gi

@alaupun banyak infeksi dapat didiagnosa dengan cepat melalui deteksi 'g(

virus spesifik melalui teknik-teknik yang telah diuraikan dengan singkat di dalam

baba ini, bagi infeksi lain, seperti infeksi virus saluran pernapasan, hanya sebuah

diagnosa retrospektif yang dapat dibuat karena sampel yang harus diuji dengan

736. #anyak pasien immunosuppressed mungkin tidak memiliki respon antibodi

14


15/15

yang baik, oleh karena itu, ketiadaan respon 'g( virus tertentu tidak selalu

menentukan infeksi pada kelompok pasien ini.

"erkembangan teknik-teknik amplifikasi asam nukleat $AA6%,

khususnya pada reaksi rantai polimerase $"74% dengan menggunakan teknologi

otomatisasi, telah memungkinkan laboratorium untuk memberikan "74 bagi

diagnosa rutin infeksi viral. Assay berbasis "74 adalah suatu teknik yang cepatB

"74 dapat dilakukan dalam kurun !aktu + – / jam. #anyak laboratorium kini

memilih untuk melakukan assay "74 untuk mendiagnosa infeksi. (elalui

kebaikan deteksi 4A atau A virus, mereka dapat mengatasi infeksi lebih

cepat daripada respon antibodi $seperti yang diukur oleh assay serologi%. 'ni

merupakan salah satu kelebihan, khususnya pada pasien-pasien

immunosuppressed .

Akan tetapi, assay serologi 'g( akan terus digunakan untuk mendiagnosa

infeksi terkini pada pasien-pasien yang tidak memperlihatkannya dengan segera,

karena 'g( dapat dideteksi hingga / bulan setelah infeksi dan terkadang lebih

lama. Assay serologi juga memiliki peran penting dalam menentukan bukti

imunitas terhadap infeksi, baik sebagai sebuah hasil akhir dari infeksi masa lalu

maupun untuk tindak lanjut pasca vaksinasi. (ereka juga merupakan alat

epidemiologi yang penting dalam studi penga!asan serologi, yang menetapkan

prevalensi infeksi.

i masa mendatang, sekalipun AA6 yang cepat dan sensitif seperti "74

bisa jadi menggantikan serologi untuk mendiagnosa infeksi terkini dengan banyak

virus, serologi akan terus memainkan peran penting dalam mendukung "74 untuk

mendiagnosa infeksi terkini. Cang lebih penting, serologi akan tetap menjadi hal

yang utama dalam pengobatan preventatif melalui penetapan bukti imunitas pasca

vaksinasi, mengidentifikasi mereka yang rentan terhadap infeksi sehingga mereka

dapat dilindungi dan dalam mempelajari epidemiologi infeksi virus.

15

uji serologi dalam virologi

Documents