penggunaan metode kromatografi gas untuk …repository.unair.ac.id/10336/12/fulltext-2.pdf ·...

S K R I P S I

NANIEK N O V IJA N TI

PENGGUNAAN METODE KROMATOGRAFI GAS UNTUK ANALISIS KUANTITATIF NIPAGIN

DAN NIPASOL DALAM CAMPURAN

F A K U LTA S FA R M A S1 U N TV EK SITA S A IR LA N G G A

1987

1 6 JUN 1992

ADLN Perpustakaan Universitas Airlangga

Skripsi PENGGUNAAN METODE KROMATOGRAFI... NANIEK NOVIJANTI

PENGGUNAAN METODE KROMATOGRAFI GAS UNTUK ANAUSIS KUANTITATIF

NIPAGIN DAN NIPASOL DALAM CAMPURAN

SKRIPSI

DIBUAT UNTUK MEMENUHI SYARAT MENCAPAI GELAR SAHJANA FARMASI PADA FAKULTAS FARMASI

UHIVERSITAS AIRIANGGA 1 9 8 7

F F

H o U

oleh : f*

NANIEK NOVIJANTI 053110Z+09 JfV I I I B

rERPUSTAKAA*” WZTBRS1TAS A1RLANOM

S U R A B A Y A

1 6 JUM B92



KATA PENGANT/iR

Dengan rasa syukur kepada Tuhan Yang Kaha Esa, yang

telah melimpahkan berkatNya dan iremperkenankan ksmi untuk

dapat menyelesaikan tugas skripsi guna merr.enuhi syarat-

syarat dalair. mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas

Farmasi Universitas Airlangga.

Pada kesempatan in i perkenankan kami menyampaikan

rasa terima kssih yc-ng sebessr-besarnya kepada :

1. Bapak DR.r'iuhamad Zainuadin dan Ibu lira.Andjar Sar-

djimah selaku dosen peir.bimbing yang telah sudi rcelu-

angkan waktunya untuk niembimbing, meniberikan petun-

;juk dan pengarahan serta dorongan selarna penelit ian

berlangsung dan selama pen.yusunan skripsi in i .

?. Bapak Drs.Hcndro Sutanto, Wakil Direktur P.T.Vita-

Viva Cosmetics, Surabaya atas i j i n yang dibrrikan

dalam menggunakan peralatan kromatografi gas untuk

keperluan penelitian in i .

3. Ibu Dra.Lil ik Widajati dan Ibu Inggraini yang telah

banyak membsntu kami dalair- segi penggunean a lat kro-

natografi gas.

4. Seluruh karyawan jurusan Kin:ia Farmasi Fakultas Far-

masi Universitas Airlangga atas semua bantuan yang

telah diberikan aelame kami melakukan penelit ian un

tuk skripsi in i .

Sebagai akhir k/--ta, kami ingjn nw.persembaKken skrip

s i in i kepada mu Alttamater Fakultas F? rir-asi Universitas

i i



Airlprigga, dengan harapan skripsi in i uapat t.e rrr.anfeat

bagi ilrnu penpetahu^n.

Semoga Tuhf-n Yang ^ha n.tlimpahkan rahrr.at atas

segala krbaikan clan bantuan yanp telah diberikan.

Surabaya, Desember 1987

Penyusun

iii



daftar i s i

Ha la man

KATA PENGANTAR..............................................., , ................i iDAFTAR TABEL............................................ ..................... ...v i iDAFTAR GAMBAR.........................................., ...................... ...ixDAFTAR LAMPIRAN..................................................................x iBAB I . PENDAHULUAN..................................................... ...1

1. Permasalahan......... ............................, 12. Tujuan penelit ian.............................. ........63. Hipotesis penelit ian.................................7

BAB I I . TINJAUAN PUSTAKA........................................... ...81. Tinjauan tentang nipagin ...82* Tinjauan tentang n ip a s o l . . . , ...93* Tinjauan tentang kromatografi g a s . . . . 9

3.1. Tinjauan umum................. . ...93.2* Analisis k u a l i ta t i f dan kuantitat i f

dengan kromatografi g a s , . ................... ...12BAB I I I . AUT, BAH AN DAN METODE PERCOBAAN.................17

1. A la t - a la t . ..................................................172. Bahan-bahan.. . ........................................ ...17

3. Metode p e r c o b a a n . 183.1. Penetapan kadar dengan teknik stan

dar eksternal ...183.1.1. Pembuatan kurva kalibrasi nipagin 18

3.1.2. Pembuatan kurva kalibrasi nipasol..19 3.1-3. Penetapan kadar nipagin dan nipa

s o l dari sampel murni..................... ..203 . 1 . Penetapan kadar sampel dalam se

diaan kosmetik adstringent ..213.2. Penetapan kadar dengan teknik stan

dar internal e u g e n o l . . . . . ..223.2,1. Pembuatan kurva kalibrasi nipagin

dengan standar internal eugenol.* 22

iv



3*2.2. Pembuatan kurva kalibrasi nipasoldengan standar internal eugenol., 3

3.2.3. Penetapan kadar nipagin dan nipas o l dari sampel murni dengan standar internal eugenol....................... 24

3*2*4. Penet.upan kadar sampel dalam sediaan koemetik adstringent dengan standar internal eugenol.* . . . . ♦ , .

3.3...Penetapan kadar dengan teknik standar internal - napthol................... 2?

3*4. Penetapan kadar dengan teknik standar internal bu t i l paraben..........

4* Metode analisa hasi l percobaan........4*1* Ketepatan dan k e te l i t ia n ............... 294*2. Perbandingan metode.......................... , 30

BAB IV.HASIL PERCOBAAN............................................. 321* Penetapan kadar dengan teknik stan

dar eksternal.......................................... 321 * 1 . Kurva kalibrasi n i p a g i n , . . . . . , . . , . , 3**1*2. Kurva kalibrasi n ip a s o l . . * . . 3 .'11,3* Penetapan kadar nipagin dan nipasol

dari sampel murni............................... 341,4* Penetapan kadar sampel dalam sedia

an kosmetik adstringent.................... 342- Penetapan kadar den^n teknik stan

dar internal - napthol....................... 362,1* Kurva kalibrasi nipagin dengan stan

dar internal - napthol................... 3&2,2* Kurva ka librasi nipasol dentin stan

dar internal napthol. , . * . . . * * * * 39 2.3* Penetapan kadar nipagin dan nipasol

dari sampel murni dengan standarinternal (& - napthol...........................

^ ,4 , Penetapan kadar sampel dalam sediaan kosmetik adstringent dengan

Ha la man

v



Ha la man

standar internal napthol.............3* Penetapan kadar dengan teknik stan

dar internal eugenol............... . ...........3-1. Kurva ka librasi nipagin dengan

standar internal eugenol........3.2. Kurva kalibrasi nipasol dengan

standar internal e u g e n o l , , . . . ........3.3* Penetapan kadar nipagin dan nipa

so l dari sampel murni dengan standar internal eugenol..................... .

3*4, Penetapan kadar sampel dalam sediaan kosmetik adstringent dengan standar internal eugenol. . .............

4. Penetapan kadar dengan teknik standar internal but i l paraben,..............

4.1. Kurva ka librasi nipagin dengan standar internal but i l paraben....

2. Kurva ka librasi nipasol dengan standar internal bu t i l paraben,...

4.3. Penetapan kadar nipagin dan n ipasol dari sampel murni dengan standar internal but i l paraben....

4*4. Penetapan kadar sampel dalam sediaan kosmetik adstringent dengan standar internal but i l paraben....

5. Hasil analisa data................................5.1. Ketepatan dan k e t e l i t i a n . ..........5.2. Perbandingan metode...........................

BAB V.PEMBAHASAN......................

BAB VI.KESIM PU LAN DAW SARAN

RINGKASAN........................

BAB V II.D A F T A R PUSTAKA............LAMPIRAN-LAMPIRAN...

42

44

44

46

48

50

50

51

52

545656596366

687190



DAFTAR TABEL

I . Konsentrasi dan luas puncak kromatogramnipagin........, ................................................

IX. Konsentrasi dan luas puncak kromatogramnipaso l . ................................................. . . •.

I I I . Hasil penetapan kadar nipagin dan nipaso l dalam sampel murni dengan metodestandar eksternal........................................

IV. Hasil penetapan kadar-nipagin dan nipaso l dalam sediaan kosmetik dengan metode standar ek s te rn a l . . . .........................

V, Konsentrasi, luas puncak kromatogram dan perbandingan luas puncak kromatogram dar i nipagin dan f - napthol.......................

VI. Konsentrasi, luas puncak kromatogram dan perbandingan luas puncak kronatogram dar i nipasol dan £ - napthol.........................

V II. Hasil penetapan kadar nipagin dan nipaso l dalam sampel murni dengan metodestandar internal napthol............

V I I I . Hasil penetapan kadar nipagin dan nipaso l dalam sediaan kosmetik dengan metode standar internal napthol........... ..

IX. Konsentrasi, luas puncak kromatogram dan perbandingan luas puncak kromatogram dar i nipagin dan eugenol................. ............

X. Konsentrasi, luas puncak kronatogram dan perbandingan luas puncak kromatogram dar i nipasol dan eugenol................. .

XI. Hasil penetapan kadar nipagin dan nipaso l dalam sampel murni dengan metode standar internal e u g e n o l . . . . . . ...............

Tabel

v i i

32

33

35

37

3t

3*

41

43

44

45

47

Ha la man



Ha la man

XXI. Hasil penetapan kadar nipagin dan nipaso l dalam sediaan kosmetik dengan metodestandar internal e u g e n o l * . , . . . , , .............. ^9

X I I I . Konsentrasi, luas puncak kromatogram dan perbandingan luas puncak kromatogram dar i nipagin dan bu t i l paraben,............* cet 50

XIV. Konsentrasi, luas puncak kromatogram dan perbandingan luas puncak kromatogram dar i nipasol dan bu t i l paraben,., , .............. 51

XV, Hasil penetapan kadar nipagin dan nipaso l dalam sampel murni dengan metodestandar internal bu t i l paraben,*.* , ........ fvj

XVI, Hasil penetapan kadar nipagin dan nipas o l dalam sediaan kosmetik dengan metode standar internal but i l para ben, * , , , , , , , « 53

XVII, Ketepatan dan ke te l i t ian hasi l penetapan kadar nipagin dan nipasol dalam sam-pel m u r n i , , . , , . , , .......................................... 57

XVIII . Ketepatan dan ke te l i t ian hasi l penetapan kadar nipagin dan nipasol dalam sediaan kosmetik a d s t r in g e n t * . . . . . . . . ........

XIX. Tabel Anava basil penetapan kadar nipagin dalam sampel murni............... , ' . . * » • * * y:1

XX, Tabel Anava hasi l penetapan kadar nipaso l dalam sampel murni,* . . . . • * , ............... $0

XXI. Tabel Anava hasil penetapan kadar nipagin dalam sediaan kosmetik adstringent.* 61

XXIX. Tabel Anava hasi l penetapan kader nipas o l dalam sediaan kosmetik adstringent,* 6r:

v i i i



DAFTAK GAMBAR

1. Kromatogram nipagin dengan standar eksternal dengan berbagai konsentrasi............... '?k

2. Kromatograra nipasol dengan standar eke- ternal dengan berbagai konsentrasi. . ............

3. Kromatogram nipagin dan nipasol dalamsampel dengan raetode standar eksterna l.•• . . 76

4. Kromatogram nipagin dan nipasol dalam sediaan kosmetik dengan raetode standar eksterna l. ........................................ . ................... 77

5* Kromatogram nipagin dengan standar in ternal £ - napthol dengan berbagai konsentrasi................................................. .. 73

6. Kromatogram nipasol dengan standar in ternal - napthol dengan berbagai k o n s e n t r a s i . 79

7, Kromatogram nipagin dan nipasol dalam sampel murni dengan metode standar in ternal - napthol, , ........................................ *0

8. Kromatogram nipagin dan nipasol dalam sediaan kosmetik dengan metode standar internal £ - napthol.......................................... ;'-*-

9, Kromatogram nipagin dengan standar in ternal eugenol dengan berbagai konsent r a s i ......................................................................

10. Kromatogram nipasol dengan standar in ternal eugenol dengan berbagai konsent r a s i ...................................................................... ^

11. Kromatogram nipagin dan nipasol dalam sampel murni dengan metode standar internal eugenol.................................* ................

Gambar Ealaman

ix



Gambar Halaman

12. Kromatogram nipagin dan nipasol dalam sediaan kosmetik den^n metode standarinternal eugenol............................ 85

13# Kromatogram nipagin dengan standar in ternal bu t i l paraben den^n berbagai

konsentras i. . . ............................................. belif. Kromatogram nipasol dengan standar in

ternal bu t i l paraben dengan berbagaikonsentrasi.......................... ................ 87

15* Kromatogram nipagin dan nipasol dalam sampel murni dengan metode standar in ternal bu t i l paraben*...................................88

16* Kromatogram nipagin dan nipasol dalam sediaan kosmetik dengan metode standar internal bu t i l paraben.................................. 89

x



DAFTAR LAMPIHAH

I- Uji korelasi ( r ) antara konsentrasi dan luas puncak kromatogram nipagindengan metode standar eksternpl.......... 90

I I . Uji korelasi ( r ) antara konsentrasi dan luas puncak kromatogram nipasol dengan metode standar ek s te rn a l . . , . , . 92

I I I . Uji korelasi ( r ) antara konsentrasi dan luas puncak kromatogram nipagin dengan metode standar internal -napthol............... ...................................... 94

IV. U ji korelasi ( r ) antara konsentrasi dan luas puncak kromatogram nipasol dengan metode standar internal ^ -napthol....................................................... 96

V, U j i korelasi ( r ) antara konsentrasi dan luas puncak kromatogram nipagin dengan metode standar internal eugenol............................................................. 98

VI, Uji korelasi ( r ) antara konsentrasi dan luas puncak kromatogram nipasol dengan metode standar internal eugenol................................ * ............................ 100

V II . U ji korelasi ( r ) antara konsentrasi dan luas puncak kromatogram nipagin dengan metode standar internal t>u-fcil paraben........................................... 102

V I I I . Uji korelasi ( r ) antara konsentrasi dan luas puncak kromatogram nipasol dengan metode standar internal but i l paraben............................................... 1^4

Lampiran Halaman

x i



IX.

Lampiran

X.

XI.

X II .

X I I I .

XIV.

XV.

XVI.

XVII.

Uji t dari kadar rata-rata nipagin yang diperoleh kembali dengan kadar yang d i anggap benar dalam sampel murni denganmetode standar eksternal........* ............ 106Uji t dari kadeir rata-rata nipagin yang diperoleh kembali dengan kadar yang d i anggap benar dalam sampel murni dengan metode standar internal ^ - napthol. , . . 10? U ji t dari kadar rata-rata nipagin yang diperoleh kembali dengan kadar yang d i anggap benar dalam sampel murni denganmetode standar internal eugenol.............. 106Uji t dari kadar rata-rata nipagin yang diperoleh kembali dengan kadar yang d i- anggap benar dalam sampel murni dengan metode standar internal bu t i l paraben*. 109 Uji t dari kadar rata-rata nipasol yang diperoleh kembali dengan kadar yang d i anggap benar dalam sampel murni denganmetode standar eksterna l . . ....................... 110Uji t dari kadar rata-rata nipasol yang diperoleh kembali dengan kadar yang d i - . anggap benar dalam sampel murni dengan metode standar internal napthol. . . . I l l U ji t dari kadar rata-rata nipasol yang diperoleh kembali dengan kadar yang d i anggap benar dajam sampel murni dengan metode standar internal e u g e n o l , • 112 Uji t dari kadar rata-rata nipasol yang diperoleh kembali dengan kadar yang d i anggap benar dalam sampel murni dengan metode standar internal bu t i l paraben.. 113 Uji t dari kadar rata-rata nipagin yang diperoleh kembali dengan kadar yang d i anggap benar dalam sediaan kosmetik

Ha la man

x i i



Lampiran

XVIII.

XIX,

XX.

XXI.

XXII.

XXIII.

XXIV.

adstringent dengan metode standareksternal.......................................................U ji t dari kadar rata-rata nipagin yang diperoleh kembali dengan kadar yang d i anggap benar dalam sediaan kosmetik adstringent dengan metode standar in ternal p - napthol.................................. 115U j i t dari kadar rata-rata nipagin yang diperoleh kembali dengan kadar yang d i anggap benar dalam sediaan kosmetik adstringent dengan metode standar internal eugenol........................................... 116U j i t dari kadar rata-rata nipagin yang diperoleh kembali dengan kadar yang d i anggap benar dalam sediaan kosmetik adstringent dengan metode standar in ternal bu t i l paraben.................................. 1 1 7Uji t dari kadar rata-rata nipasol yang diperoleh kembali dengan kadar yang d i- anggap benar dalam sediaan kosmetik adstringent dengan metode standar eksternal. 116 U ji t dari kadar rata-rata nipasol yang diperoleh kembeli dengan kadar yang d i anggap benar dalam sediaan kosmetik adstringent dengan metode standar in ternal napthol..................................... 119Uji t dari kadar rata-rata nipasol yang diperoleh kembali dengan kadar yang d i anggap benar dalam sediaan kosmetik adstringent dengan metode standar in ternal eugenol............................................. 120Uji t dari kadar rata-rata nipasol yang diperoleh kembali dengan kadar yang d i -

Hala man

xi.ii



anggap benar dalam sediaan kosmetik adstringent dengan metode standar in ternal bu t i l paraben................................ 121

Lampiran Halaman

XXV. Uji F dari kadar nipagin yang diperoleh kembali dalam sampel murni............ 122

XXVI. U ji F dari kadar nipasol yang diperoleh kembali dalam sampel murni............ 124

XXVII * U ji F dari kadar nipagin yang diperoleh kembali dalam sediaan kosmetik a d s t r i n g e n t , 126

XXVIII, U ji F dari kadar nipasol yang diperoleh kembali dalam sediaan kosmetikadstringent............... ................................. 128

XXIX. Tabel koefis ien korelasi ( r ) ................. 130XXX. Tabel untuk t ............................................. 131

XXXI. Tabel untuk F.............................................. 132

x iv



Mil***

, W lTBRSiTAS A l W J ____I | \ J R A ® i i 5 -----

M 1 LM \

bab. i

PENDAHULUAN

1*1# Permasalahan

Dewasa in i , pengawet memegang peranan penting

dalam berbagai proses produksi untuk menghasilkan

produk-produk dengan kualitas yang baik, baik pro

duksi makanan-minuman, kosmetik, maupun preparat-

preparat farmasi, sepert i larutan in jeks i , obat-

obat te tes , obat minum dan la in sebagainya.

Pengawet yang digunakan harus raemenuhi per-

syaratan tertentu khususnya dalam hal kadarnya. Se

bagai contoh dalam produk makanan-minuman kadar

yang diperbolehkan maksimum 0,1 %, untuk sediaan

kosmetik kadar maksimum 0,1 % 9 dan untuk preparat-

preparat farmasi kadar maksimum 0,2 %♦ ( 1, 2,3» k )

Jika melebihi batas-batas tersebut kemungkinan akan

membahayakan tubuh manusia. Sebaliknya jika penga

wet tersebut digunakan dengan kadar yang kurang dari

yang seharusnya, maka akan menyebabkan pengawet t e r

sebut tidak e f e k t i f lag i terhadap suatu sediaan,

misalnya sediaan akan lebih raudah ditumbuhi oleh

mikro organisme. Pada umumnya sediaan yang telah d i

tumbuhi oleh mikro organisme, maka akan menyebabkan

terjadinya cemaran pada 6ediaan tersebut, sehingga



sediaan akan bers i fa t toksis dan berbahaya terhadap

kesehatan manusia. Dengan demikian masalah kadar

pengawet itu adalah sesuatu hal yang amat penting.

Diantara berbagai macam pengawet, yang umum

digunakan adalah nipagin, nipasol atau campuran

nipagin dengan nipasol, yang raerupakan ester-ester

dari asam benzoat yang umumnya dikenal sebagai pa

raben. ( 1, 2 )

Metode penetapan kadar nipagin dan nipasol da

lam campuran yang pernah dilakukan adalah dengan

metode spektrofotometri. Dengan metode in i terdapat

beberapa kelemahan antara la in : metode spektrofoto

metri tidak dapat digunakan untuk penetapan kadar

pengawet dengan kadar yang sangat k ec i l , yaitu lebih

k ec i l dari kadar 0,1 Disamping itu sediaan ha-

rus diekstraksi ter lebih dulu atau dipisahkan dari

bahan-bahan lainnya dengan menggunakan kromatografi

adsorbsi, dan selanjutnya baru ditetapkan kadarnya

dengan spektrofotometri. Pada proses ekstraksi in i

tentu masih ada yang ter t ingga l , maka hasilnya tidak

raencerminkan kadar yang sebenarnya. ( 5 »6 )

Oleh karena itu ,perlu dikembangkan metode la in

yang tidak memerlukan proses pemisahan dam mempunyai

kepekaan yang lebih baik, Dalam hal in i telah dila-*

porkan analis is k u a l i ta t i f dan kuantitat i f dari n i

pagin dan nipasol dalam campuran dengan metode High

Performance Liquid Chromatography ( RPLC ) . ( 7 )



3

Metode in i memerlukan pelarut-pelarut yang harganya

r e l a t i f mahal.

Metode kromatografi la in untuk penetapan ka

dar nipagin dan nipasol dalam campuran adalah raeto-

de kromatografi gas. Keuntungan dari pada kromato

g ra f i gas in i adalah : pelaksanaannya cepat dan aku-

r a t , mempunyai kepekaan dengan rentang konsentrasi

yang cukup besar, dapat digunakan untuk penetapan

kadar za t-za t tertentu dengan kadar yang sangat ke

c i l , dan tidak memerlukan eluen yang mahal. ( 5, 6,

7,6,9 )Didalam l i te ra tu r telah dilaporkan bahwa untuk

penetapan kadar nipagin dan nipasol dalam campuran

secara kromatografi gas, dilakukan melalui proses

metilasi atau proses s i l i l a s i ter leb ih dahulu untuk

mendapatkan bentuk ester metilnya atau bentuk t r i

methyl s i l y l ether nya yang lebih mudah menguap.

( 5 , 6, 7» 8j 9 )• Tetapi berdasarkan kenyataan bahwa

nipagin dan nipasol sudah dalam bentuk ester sehing-

ga t i t ik didihnya cukup rendah ( 7 ) , maka keniung-

kinan nipagin dan nipasol dalam campuran dapat d i-

analis is secara k u a l i ta t i f dan kuantitat i f dengan

kromatografi gas tanpa harus d imeti lasi atau d is i -

l i l a s i ter leb ih dulu,

Analisis kuantita t i f dengan kromatografi gas

dapat dilakukan dengan 2 metode , yaitu dengan meng-

gunakan metode standar eksternal dan metode standar



4

internal.

Metode standar eksternal berdasarkan prinsip

sebagai berikut : mula-mula dibuat kurva ka librasi

dari zat standar. Kurva kalibrasi tersebut menyatakan

hubungan antara luas puncak kromatogram terhadap kon-

sentrasi zat standar. Untuk penetapan kadar sampel

dapat ditentukan dengan menentukan luas puncak kroma

togram sampel kemudian dilakukan substitusi kedalam

persamaan regresi kurva kalibrasi atau dapat pula d i

tentukan dengan car^ perbandingan lu«*s puncak kroma

togram sampel terhadap luas puncak kromatogram stan

dar.

Pada metode standar eksternal terdapat kelemah-

an antara la in karena adanya proses ekstraksi dan va-

r ia s i volume pengin jeksian. Didalam l i te ra tu r disebut-

kan balwa kesalahan karena var ias i volume pengin jeks i

an dapat mencapai 5 ~ 10 # C 10 ) . Untuk men^tasi

kelemahan tersebut dikembangkan metode standar in ter

nal. Metode standar internal pada prinsipnya adalah

sebagai berikut : pada sampel maupun zat standar di~

tambahkan suatu standar internal yang telah diketahui

konsentrasinya, Kurva ka l ibrasi yang dibuat d is in i

adalah hubungan antara perbandingan luas puncak stan

dar terhadap luas puncak standar internal terhadap

konsentrasi zat standar. Untuk penetapan kadar sampel

dapat ditentukan den^n menentukan luas puncak kro-

matogram sampel, kemudian dilakukan substitusi keda-



5

lara persamaan regresi kurva kalibrasi atau dapat pula

ditentukan dengan cara perbandingan luas puncak kro

matogram sampel terhadap luas puncak kromatogram stan

dar internal terhadap perbandingan luas puncak kro

matogram zat standar terhadap luas puncak kromatogram

standar internal*

Telah dilaporkan dalam l i te ra tu r , standar in te r

nal yang telah digunakan untuk penetapan kadar nipagin

dan nipasol dalam campuran adalah : £> - napthol, ben

z y l benzoat dan phenanthrene. ( 5,6,7,8,9 ) . Pada da-

sarnya standar internal itu adalah zat lain yang mem-

punyai s i f a t f isika-kimia yang mirip dengan zat yang

akan d iana l is is , sehingga bila dilakukan ekstraksi da

pat terekstraksi dengan baik dan detektor masih merabe-

rikan respon yang sebanding dengan zat yang dianalisa,

Dalam hal in i kemungkinan senyawa homolog paraben, mi-

salnya bu t i l paraben atau senyawa fenolis la in , misal-

nya eugenol dapat digunakan sebagai standar internal.

Berdasarkan uraian diatas, maka dapat dirumus-

kan permasalahan : seberapa besar ketepatan dan kete-

l i t i a n penetapan kadar nipagin dan nipasol dalam cam-

puran dengan rnetode kromatografi gas melalui teknik

standar eksternal dan standar internal tanpa proses

der iva t isas i .

Dalam penelitian in i k r i t e r ia hasi l penetapan

kadar adalah ketepatan dan ke te l i t ian . Sebagai ukuran

dari ketepatan adalah % kadar yang diperoleh kembali



I

C % Recovery ) . Hasil penetapan kadar disebut

mempunyai ketepatan yang baik, jika tidak ada

perbedaan yang bermakna ( pada harga oC terten-

tu ) antara harga yang dianggap benar dengan

kadar yang diperoleh kembali. Adapun sebagai

ukuran dari k e te l i t ian digunakan koef is ien va

r ia s i , Metode penetapan kadar dianggap mempunyai

k e te l i t ian yang baik jika KV lebih kec i l dari

3 %. ( 10 )

1.2. Tu.iuan -penelitian

Untuk menjawab permasalahan tersebut perlu

dilakukan penelitian dengan tujuan untuk :

1. Menentukan ketepatan dan ke te l i t ian hasi l pe

netapan kadar nipagin dan nipasol dalam cam-

puran dengan metode kromatografi gas melalui

teknik standar eksternal dan standar in te r

nal.

2. Membandingkan ketepatan dan ke te l i t ian hasi l

penetapan kadar antara metode standar ekster

nal dan standar internal - napthol, euge-

nol dan bu t i l paraben,

Kara pan dari penelitian in i adalah : de

ngan diperolehnya ketepatan dan ke te l i t ian yang

6



7

baik, maka metode kromatografi gas dapat digu

nakan untuk analis is kuantitat i f senyawa-senyawa

yang lain.

1.3. Hi-potesis rene l i t ian

Dari uraian diatas, diduga bahwa analisis

nipagin dan nipasol dalam campuran dengan meto

de kromatografi gas akan mempunyai ketepatan

dan ke te l i t ian yang baik,

Sebagai variabel bebas dalam penelitian in i ada

lah metode kromatografi gas dengin beberapa ma-

cam standar internal, sedangkan variabel te r -

gantungnya adalah ketepatan dan ke te l i t ian hasi l

ana l is is . Adapun ketepatan dan ke te l i t ian adalah

sebagai berikut : ketepatan metode dikatakan ba

ik jika tidak ada perbedaan yang bermakna antara

harga yang dianggap benar dengan kadar yang d i

peroleh kembali, sedangkan ke te l i t ian metode d i

katakan t e l i t i jika KV ( koefis ien var ias i ) l e

bih k ec i l dari 3



8

BAB I I

T1NJAUAN HJSTAKA

1- jeptanp; Kipaflin ( I,2,3,^,ll,-12,i3,ll|.,15>l6,l? -)Nipngin adalah nama umuni dari irietil paraben atau

metil p - hidroksi benzoat.

Rumus molekulnya adalah : CgKgC dan rumus bangun-

nya adalah sebagai berikut : OH

COOCH*

Nipagin berupa serbuk hsblur halus, putih, hampir tidak

berbau, tldak mempunyai rssa, kemudian agak membakar

d i ikut i rasa tebal, Nipagin mempunyai t i t i k lebur 131 0

dan t i t i k ciidih 270 0 - 280 . Kelarutan nipagin dalam

a i r adalah ( 1:500 ), dalam a i r mendidih ( 1:20 ), da

lam etanol ( 95# ) P ( 1:3*5 )» dalam aseton P ( 1:3 ),

dalam g l ipc ro l P panas ( 1:60 ), mudah le.rut dalam

eter P, dan dalam lrrutan a lka l i hidroksida. Kegunaan

nipagin yang paling urnum aaalah sebagai zat pengawet

untuk mfkanan-minuman, kosmetik dan preparat-preparat

farmasi. Kadar penjf.kaien nipagin sebagai pengawet ada

lah : untuk rri? kanan-minurii&n adalah 0,05 - 0,1 %, untuk

kosmetik. adalah 0 ,0 5 - 0,1 % dan untuk preparat farmasi

adalah 0,01 - 0,2 %.



9

Nipasol adalah nama umum dari propil paraben

atau propil p - hidroksi benzoat.

Rumus molekulnya adalah ; dan rumus ba-

ngunnya adalah sebagai berikut :OH

2» S.i” ja.Uan,..t^t.apg NjmsoJ. ( 1,2,3,4,11,12,13,1^,15,16,17)

cooc h7

Nipasol berupa serbuk hablur putih, tidak berbau dan

tidak berasa. Nipasol mempunyai t i t i k lebur 96 - 97°

Kelarutan nipasol dalam a i r adalah ( 1:2000 ) , dalam

etanol ( 95& ) P ( 1:3,5 ) , dalam aseton P ( 1;3 ) ,

dalam g l i s e ro l P ( 1:1^0 ) , mudah larut dalam larutan

a lk a l i hidroksida, dan dalam eter . Kegunaan nipasol

yang paling umum adalah sebagai zat pengawet untuk ma-

kanan-minuman, kogmetik dan preparat-preparat farmasi.

Kadar pemakaian nipasol sebagai pengawet adalah : un

tuk makanan-minuman adalah 0 ,0 5 - 0,1 %, untuk kosme

t ik adalah 0 ,0 5 - 0,1 % dan untuk preparat farmasi

adalah 0,01 - 0,2 %.

3, Tinjauan tentang kromatografi gas ( 18,19,20,21,22 )

3.1. Tin.iauan umum

Kromatografi gas adalah salah satu teknik kro-



10

matografi dimana yang bertindak sebagai fase gerak

adalah gas dan sebagai fase diara dapat berupa fase pa-

dat maupun fase cair , Jika dilakukan kromatografi gas

terhadap campuran 2 at an lebih zat ( solut ) , maka

zat-zat tersebut akan didistribusikan pada kedua fase

tersebut, yaitu fase gerak dan fase diam, dimana dis-

tribusinya tergantung pada kelarutan za t-za t tersebut

pada fase gerak dan fase diamnya, Sebagai ukuran be-

sarnya d is tr ibus i dari masing-masing solut dalam fase

gerak dan fase diam adalah harga koefis ien d is tr ibus i

( K ) , dimana :

Crr S

Cg ; konsentrasi solut dalam fase diam

( stasioner )

Cm : konsentrasi solut dalam fase gerak

( mobil )

Dari persamaan d ia tas , dapat d i l iha t bahwa b i la kon

sentrasi solut dalam fase diam r e l a t i f besar, maka

harga K nya juga akan lebih besar, dan sebaliknya.

Pada umuranya harga K dari berbagai zat ( solut ) da

lam suatu sistem fase gerak dan fase diam tertentu

adalah berbeda satu sama lain, oleh karena harga K

merupakan salah satu karakteristik dari suatu zat

( solut ) . Harga K ternyata mempunyai hubungan dengan



11

waktu retensi ( t r ) . Waktu retensi ( t ) adalah wak-

tu yang dibutuhkan oleh solut untuk menempuh jarak se-

panjang kolom, dimana :

* r = ^ ( 1 + K Vs/Vm >

dengan keterangan :

t ; waktu retensi solut

t : waktu retensi fase gerak

K : koe f is ien distr ibusi

V : volume fase diam

: volurae fase gerak

Dari persamaan diatas, te r l ih a t bahwa t r tergantung

pada besarnya t ffl , K dan V6/Vm. Harga t m dan Vg/Vm

adalah konstan untuk suatu sistem kromatografi gas

tertentu, karena : panjang kolom, kecepatan fase ge

rak, volume fase gerak dan fase diam adalah tertentu.

Dengan demikian t hanya dipengaruhi oleh harga K.

Dari persamaan diatas, jelaslah b i la beberapa

solut yang mempunyai harga K yang berbeda berada da

lam campuran dan dilakukan kromatografi gas dengan

fase gerak dan fase diam tertentu akan mempunyai har-

6a t yang berbeda pula. Makin besar harga K makin

besar t nya. Dengan demikian harga t r adalah karak-

t e r i s t ik suatu zat tetapi tidak spes i f ik untuk zat

tersebut.



TJntuk raengetahui derajat keterpisahan campuran

zat dengan metode kromatografi gas dapat ditentukan

dengan derajat keterpisahan atau dinyatakan dengan

harga resolusi ( R ) , dimana :

12

t r : waktu retensi kromatogram 1

t : waktu retensi kromatogram 22: lebar puncak kromatogram 1

wP : lebar puncak kromatogram 2

2.2. Analisis k u a l i ta t i f dan kuantitat i f dengan_kroma-

t_ogra.fi _gas



13

Seperti dikemukakan diatas, bahwa kromatografi

gas dapat digunakan untuk analis is k u a l i ta t i f dan ku-

a n t i t a t i f . Sebagai besaran yang dapat dipakai untuk

k r i t e r ia dalam analis is k u a l i ta t i f ada beberapa macam,

antara lain : waktu retensi ( t ) dan waktu retensi

r e l a t i f ( X ) , Untuk analis is secara k u a l i ta t i f de

ngan memakai besaran t , maka dilakukan dengan cara

sebagai berikut : larutan standar diinjeksikan kemu-

dian ditentukan waktu retensinya ( t „ . ) , Sete-r s ulah i tu diinjeksikan larutan sampel dan ditentukan

waktu retensinya ( t ) . Apabila t_ ^. sama denganr 8p rt r Sp , maka kemungkinan sampel tersebut sama dengan

zat standar. Disini ada kelemahannya, yaitu t ka-

dang-kadang dipengaruhi oleh konsentrasi zat yang d i

injeksikan dan waktu pengin jeksian. Sshingga walaupun

zatnya sama, tetapi t r nya dapat tidak sama. Untuk me-

ngatasi kelemahan i tu maka digunakan besaran waktu

retensi r e l a t i f ( ) .

Untuk pengukuran dapat ditentukan dengan cara

sebagai berikut : injeksikan larutan standar yang te-

lah ditambah dengan standar internal, kemudian tentu-

kan waktu retensi dari larutan etandar ( t^ ) dan

waktu retensi standar internal ( t r ) . Setelah itu

dihitung waktu retensi r e l a t i f standar ( X ) ,

dimana :

r i s t



Denman cara yang sama dilakukan pula terhadap sampel,

kemudian dihitung waktu retensi r e l a t i f sampel (<Csp )

*Csp = tr gP ^r i s t

Apabila hasi l sama dengan ©C . , nwka kemunfs-bp Stkinan sampel tersebut eama dengan standar.

Sedangkan untuk analis is kuantitat i f dapat d i -

gunakan beearan luas puncak atau t ingg i puncak kroma-

togram. Luas puncak dapat ditentukan dengan cara :

ditirabang, dengan integrator atau dentin dihitung.

Untuk analis is kuantitat i f dari zat-zat dalam campur-

an dapat ditetapkan dengan metode standar eksternal

dan standar internal. Adapun cara untuk perhitungan

dengan metode standar eksternal adalah sebagai ber i-

kut :

dimana :

C : konsentrasi sampelX

C : konsentrasi standar sA : luas puncak kromatogram sampelAA : luas puncak kromatogram standar s

Persamaan diatas dapat berlaku apabila ada hubungan

l in i e r antara konsentrasi standar dengan luas puncak

standar* Kelemahan dari metode standar eksternal in i

adalah adanya faktor var ias i volume pengin jekeian dan

proses ekstraksi sampel yang tidak serapurn;i, sehingga

untuk mengurangi kesalahan tersebut digunakan raetode

standar internal, dimana pada metode in i ditambahkan

suatu zat la in pada sampel yang konsentrasinya telah

diketahui, sehingga pada penetapan kadar dengan meto

de standar internal zat standar internal maupun sampel

sama-sama mengslami proses ekstraksi , dengan demiki

an sampel dan zat standar internal pada proses eks

traksi tersebut akan te r jad i pengurangan kadar,

Selain proses ekstraksi yang berpengaruh pada

penetapan kadar dapat juga disebabkan karena pengin-

jeksian setiap saat tidak selalu sama ( bervariasi )

Dengan standar internal maka pengurangan kadar dapat

d ia tas i . Sebagai contoh , 6uatu sampel diinjeksikan

sebanyak 5 jul» untuk pengin Jeksian selanjutnya tidak

selalu tepat 5/ul, dengan penambahan standar internal

yang konsentrasinya telah diketahui maka sampel dan

standar internal akan mengalami penginjeksian dengan

volume yang bervariasi pula, Sedangkan cara untuk per-

hitungan dengan standar internal adalah :



16

dimana :Cx : konsentrasi sampel

Cst : konsentrasi standar

\ / Ai s t perbandingan luas puncak kromato

gram sampel terhadap luas puncak

kromatogram standar internal

A6t^Ai s t : Perbandingan luas puncak kromato

gram standar terhadap luas puncak

kromatogram standar internal

Persamaan diatas dapat berlaku apabila ada hubungan

l in i e r antara perbandingan luas puncak kromatogram

standar dan standar internal terhadap konsentrasi

standar, Dari persamaan-persamaan diatas dapat digam-

barkan kurva kalibrasi sebagai berikut :

Metode standar eksternal Metode standar internal



1?

BAB I I I

ALAT, bAHAK DAN N.ETOIfl*: PVRCOBAAN

1 . A lat-a iat

- Kromatografi Gas model Varian 3700, dilengkapi de -

ngan ;

- Kolom : 0V-101; psnjang : 3 m; diameter:

0,3 cm.

- Letektor : Flame Ionization Detector (FIi>)

- Gas pembawa :

- Alat suntik : Hamilton Syringe F .icroliter 701

dengan volume 10 u l .

- Perekam data : Hewlett Packard

model 3390 A

2. Bahan-bahan

Semua bahan yang digunakan adalah pro analisa, ke-

cuali disebutkan lain

- Nipagin

- Nip?.sol

- Eugenol

- - na phthol

- Butil Paraben



16

- Etanol

- Eter

3«. Metode Percobaan

3.1. Penetapan kadar dengan teknik standar eksternal

3.1.1. Pembuatan kurva kalibrasi nipagin

Ditimbang saksama 100 mg nipagin, dilarutkan

dalam etanol sampai diperoleh volume tep^t 100,0

ml. Larutan in i mempunyai kadar 1000 ppm. Dari l a

rutan in i dibuat pengenceran sehingga diperoleh

kadar nip;;gin : 750 ppm, 500 ppm, 250 ppm dan 100

ppm. Dari masing-masing larutan in i diinjeksikan

sebanyak 4 pi kedalam a lat kromatografi gas, kemu-

dian diamati dan dihitung luas puncak kromatogram-

nya. Harga waktu retensi dan luas puncak kromato -

gram dapat dibaca dalam perekam data.

Kemudian dihitung koefis ien korelasi dan persamaan

regresi kurva kalibrasi yang menyatakan hubungan

antara luas puncak kromatogram terhadap konsentra-

s i nipagin.

Penginjeksian dilakukan setelah alat kromato

g ra f i gas mencapai keadaan stab il dengan kondisi

sebagai berikut :

- Suhu :

kolom : 200°C; in jektor : 210°C;



detektor : 230°C.

- Attenuator :

a lat kromatografi gas : 10-

perekam data : 2

Untuk seterusnya dalam parcobaan in i yang di -

maksud dengan diinjeksikan kedalam a la t kromatogra

f i gas adalah penginjeksian setelah a la t mencapai

keadaan stab il dengan kondisi sama dengan seperti

d ia tas .

3.1.2. Pembuatan kurva kalibrasi nipasol

Ditimbang saksama 100 mg nipasol, dilarutkan

dalam etanol sampai diperoleh volume tepat 100,0 ml

Larutan in i mempunyai kadar 1000 ppm. Dari larutan

in i dibuat pengenceran sehingga diperoleh kadar n i

pasol : 750 ppm, 500 ppm, 250 ppm dan 100 ppm. Dari

masing-masing larutan in i diinjeksikan sebanyak 4

jxl kedalam alat kromatografi gas, kemudian diamati

dan dihitung luas puncak kromatogramnya. Harga wak

tu retensi dan luas puncak kromatogram dapat dibaca

dalam perekam data.

Kemudian dihitung koefis ien korelasi dan persamaan

regres i kurva kalibrasi yang menyatakan hubungan

antara luas puncak kromatogram terhadap konsentrasi

n ipaso l.

19



20

3.1.3. Penetapan kadar nipagin dan nipasol dari sampel

murni

Ditimbang saksaina 100 mg nipagin dan 100 mg

nipasol, masing-masing dilarutkan dalam etanol

sampai diperoleh volume tepat 100,0 ml. larutan

in i masing-masing mempunysi kadar 1000 ppm.

Dibuat larutan campuran nipagin dan nipasol

dengan perbandlngan masing-masing 10 5 . Larutan

tersebut diinjeksikan sebanyak 4 ;ul keaalam alat

kromatografi gas, kemudian diaiT.ati dan dihitung

luas puncak kromatogram nipagin dan nipasol. Harga

waktu retensi dan luas puncak kromatogram dapat

dibaca dalam perekam data.

Dengan cara yang sama dilakukan juga terhadap

larutan campuran nipagin dan nipasol dengan per-

bandingan masing-masing : 5 *• 10, 10 : 1, 1 : 10

dan 10 : 10. Sebagai larutan standar digunakan

larutan dengan perbandingan 10 : 10. Semua pene

tapan diatas masing-masing dilakukan sebanyak dua

ka l i . Berdasarkan luas puncak kromatogram nipagin

dan nipasol, dapat dihitung kadar nipagin dan n i

pasol dalam campuran dengan persamaan sebagai be-

rikut :

dimana



21

Cx : konsentrasi nipagin atau nipasol

Cst : konsffntrss i standar nipagin atau nipasol

Ax : luas puncak kromatogram nipagin atau nipa -

sol

^st ' ^uas Puncak kromatogram standar nipagin a -

tau nipasol

3.1.4. Penetapan kadar sampel dalam sediaan kosmetik ads-

tringent

Ekstraksi nipagin dan nipasol dslam sediaan d i laku-

kan dengan metode sebagai berikut ( ?»9 ) *•

Dipipet 20,0 ml sampel, dimasukkan kedalam

corong pisah. Diekstraksi dengan 25 ml eter.

Ekstraksi diulangi sebanyak aua ka l i masing-masing

dengan 25 ml eter. Fase eter dikumpulkan kemudian

dicuci dengan 10 ml a i r . Fase eter diuapkan sampai

kering. Sisa penguapan ditambah etanol sampai v o lu

me 10,0 ml. Terhadap larutan in i dilakukan penetap

an kadar nipagin dan nipasol dengan cara sebagai

berikut : diinjeksikan sebanyak 4 }xl kedalam alat.

kromatografi gas, kemudian diamati dan dihitung

luas puncak kromatogramnya. Harga waktu retensi

d^n luas puncak kromatogram dapat dibaca dalam pe

rekam data. Pada kondisi yang same diinjeksikan

juga larutan standar nipagin dan nipasol dengan

kadar masing-masing 1000 ppm atau 2000 ppm.



Banyaknya sampel yang ditetapkan kadarnya sdalsh

5 sampel, dengan urutan penyuntikan berseling

sebagai berikut : standar, sampel, standar, sam

pel dan seterusnya. Semua penetapan diatas ma -

sing-masing dilakukan sebanyak dua ka l i . Berda-

sarkan luas puncak kromatogram nipagin dan nipa

sol, dapat dihitung kadar nipagin dan nipasol

dalam sampel seperti cera tersebut diatas pada

butir 3.1.3.

3.2. Penetapan kadar dengan teknik standar in te rn a l :

eugenol

3.2.1. Pembuatan kurva kalibrasi nipagin dengan stan -

dar internal eugenol

Ditimbang saksama 100 mg nipagin dan 200

mg- eugenol, masing-masing dilarutkan dalam eta-

nol sampai diperoleh volume tepat 100,0 ml. La

rutan in i mempunyai kadar masing-masing 1000

ppm dan 2000 ppm.

Dibuat larutan campuran nipagin dan euge -

nol dengan perbandingan masing-masing sebagai

berikut : 1000 ppm : 2000 ppm, 750 ppm : 2000

ppm, 500 ppm : 2000 ppm, 250 ppm : 2000 ppm dan

100 ppm ; 2000 ppm. Dari masing-masing larutan

in i diinjeksikan sebanyak A pi kedalam s la t

kromatografi gas, kemudian diamati dan dihitung

22



23

luas puncak kromatogram nipagin dan eugenol, Harga

waktu retensi dan luas puncak kromatogram nipagin

dan eugenol dapat dibaca dalam perekam data. Kemu

dian dihitung koef is ien korelasi dan persamaan re-

gresi kurvs kalibrasi yang menyatakan hubungan an

tara perbandingan luas puncak ("Peak Area Ratio " )

kromatogram nipagin dengan eugenol terhadap kon

sentrasi nipagin.

3.2.2. Pembuatan kurva kalibrasi nipasol dengan standar

internal eugenol

Ditimbang saksama 100 mg nipasol dgn 200 mg

eugenol, masing-masing dilarut^an dalam etanol sam

pai diperoleh volume tepat 100,0 ml. Larutan in i

mempunyai kadar masing-masing 1000 ppm dan 2000

ppm.

Dibuat larutan campuran nipasol dan eugenol

dengan perbandingan masing-masing sebagai berikut:

1000 ppm : 2000 ppm, 750 ppm : 2000 ppm, 500 ppm :

2000 ppm, 250 ppm : 2000 ppm dan 100 ppm : 2000

ppm. Dari masing-masing larutan in i diinjeksikan

sebanyak 4 ^1 kedalam alat kromatografi gas, kemu

dian diamati dan dihitung luas puncak kromatogram

nipasol dan eugenol. ferga waktu retensi dan luas

puncak kromatogram nipasol dan eugenol dapat diba-

cs dalam perekam data. Kemudian dihitung koef is ien



2k

korelasi dsn persamsan regresi kurva kalibrasi

yang menyatakan hubungan antara perbandingan luas

puncak ( "Peak Area Ratio" ) kromatogram nipasol

dengan eugenol terhadap konsentrasi nipasol.


mumi dengan standar internal eugenol

Ditimbang saksama 100 mg nipagin dan 100 mg

nipasol, masing-masing dilarutkan dalam etanol

sampai diperoleh volume tepat 100,0 ml. Laruten i~

ni masing-masing mempunyai kadar 1000 ppm.

Dibuat larutan campuran nipagin dan nipasol

dengan perbandingan masing-masing 10 : 5. Kedalam

larutan in i ditambahkan larutan standar internal

eugenol dengan kadar 2000 ppm, Larutan tersebut

diinjeksikan sebanyak 4 ul kedalam alat kromato -

g ra f i gas, kemudian diamati dan dihitung luas pun

cak kromatogram nipagin, nipasol dan standar in -

ternal eugenol. Harga waktu retensi. dan luas pun

cak kromatogram dapat dibaca dalam perekam data.

Dengan cara yang sama dilakukan juga terhadap

larutan campuran nipagin dan nipasol dengan per -

bandingan masing-masing : 5 : 10, 10 : 1, 1 ; 10

dan 10 : 10. Sebagai larutan standar digunakan

larutan dengan perbandingan 10 : 10.



25

Semua penetapan diatas masing-masing dilakukan

sebanyak dua ka l i . Berdasarkan luas puncak kroma

togram nipagin, nipasol dan standar internal euge

nol, dapat dihitung kadar nipagin dan nipasol da

lam campuran dengan persamaan sebsgai berikut i

C - ^ i s t^ * cBt

St/Axst

dimana ;

C : konsentrasi nipagin atau nipasolA

Cg1. : konsentrasi standar nipagin atau nipa

sol

A /. : perbandingan luas puncak kromatogramX/Ais t

nipagin atau nipasol terhaclap luas pun

cak kromatogram eugenol

A ,/. : perbandingan luas puncak kromatogram ' is t

standar nipagin atau nipasol terhadap

luas puncak kromatogram standar euge

nol

3.2.4. Penetapan kadar sampel dalam sediaan kosmetik ads-

tringent dengan standar internal eugenol

Ekstraksi nipagin dan nipasol dalam sediaan dengan

standar internal eugenol dilakukan dengan metode



26

sebagai berikut ( 7,9 ) :

25,0 ml sampel, dimasukkan kedalam la -

bu ukur 50 ml, ditambahkan larutan standar inter -

nal eugenol dengan kadar 4000 ppm sebanyak 5,0 ml,

kemudian tambahkan larutan sampel sampai volumenya

tepat 50 ,0 ml. Dipipet larutan in i sebanyak 20,0

ml dimasukkan kedalam corong pisah. Diekstraksi

dengan 25 ml eter. Ekstraksi diulangi sebanyak dua

kali masing-masing dengan ?5 ml e ter . Fase eter di-

kumpulkan kemudian dicuci dengan 10 ml a ir , Fase

eter diuapkan sampai kering. Sisa penguapan ditam-

bah etanol sampai volume 10,0 ml* Terhadap larutan

in i dilakukan penetapan kaaar nipagin dan nipasol

dengan cara sebagai berikut : diinjeksikan seba -

nyak 4 /il kedalam alat kromatografi gas, kemudian

diamati dan dihitung luas puncak kromatogramnya.

Harga waktu retensi dan luas puncak kromatogram

dapat dibaca dalam perekam data. Pada kondisi yang

sama diinjeksikan juga larutan standar nipagin,ni

pasol dan eugenol dengan kadar masing-masing 1000

ppm : 1000 ppm : 2400 ppm atau 2000 ppm : 2000 ppm

: 2400 ppm.

Banyaknya sampel yang ditetapkan kadarnya a -

dalah 5 sampel, dengan urutan penyuntikan berse

l ing sebagai berikut : standar, sampel, standar,

sampel dan seterusnya. Semua penetapan diatas ma -



sing-masing dilakukan sebanyak dua ka l i . Berdasar-

kan luas puncak kromatogram nipagin, nipasol dan

standar internal eugenol, dapat dihitung kadar n i

pagin dan nipasol dalam sampel srpert i cara terse

but diatas pada butir 3.?.3.

Penetapan kadar dengan teknik standar internal :

g?- naphthol

Pembuatan kurva kalibrasi nipagin dengan standar

internal naphthol

Pembuatan kurva kalibrasi dilakukan dengan

cara seperti diatas paaa butir 3.2,1.

Pembuatan kurva kalibrasi nipasol dengan standar

internal naphthol

Pembuatan kurva kalibrasi dilakukan dengan

cara seperti diatas pada butir 3.2.2.

Penetapan kadar nipagin dan nipasol dari sampel

murni dengan standar internal naphthol

Penetapan kadar nipagin dan nipasol dilakukan

aengan cara seperti diatas pada butir 3.2.3.

Penetapan kadar sampel dalam sediaan kosmetik ads

tringent dengan standar internal naphthol

Penetapan kadar sampel dilakukan dengan cara



28

seperti diatas pada butir 3*2.4-.

3*4. Penetapan kadar dengan teknik standar internal :

buti l paraben

3.4.1. Pembuatan kurva kalibrasi nipagin dengan standar

internal buti l paraben

Pembuatan kurva kalibrasi dilakukan dengan ca

ra seperti diatas pada butir 3.2.1.

3.4.2. Pembuatan kurva kalibrasi nipasol dengan standar

internal buti l paraben

Pembuatan kurva kalibrasi dilakukan dengan ca

ra seperti diatas pada butir 3.2,2.


murni dengan standar internal buti l paraben

Penetapan kadar nipagin dan nipasol dilakukan

dengan cara seperti diatas pada butir 3.2.3.

3.4.4. Penetapan kadar sampel dalam sediaan kosmetik ads

tringent dengan standar internal but i l paraben

Penetapan kadar sampel dilakukan dengan cara

seperti diatas pada butir 3.2.4.

4. Metode analisa hasil percobaan



29

4.1. Ketepatan dan ke te l i t ian

Dari hasil penelitian kadar nipagin dan nipa -

60l yeng diperoleh, dapat ditentukan ketepatan dan

kete l i t iannya.

Metode penetapan kadar disebut mempunyai kete

patan yang baik jika tidak ada perbedaan yang ber -

makna ( pada harga «£ tertentu ) antara harga yang

dianggap benar dengan hasil yang diperoleh. Untuk

mengetahui perbedaan tersebut digunakan u j i t satu

sampel ( 23 ) , dengan rumus :

t = ( * - JU. ) T-n-'s

dimana :

x : harga rata-rata yang diperoleh

u : hdxga yang dianggap benar

n : jumlah replikasi

s : simpangan baku

Apabila harga t pada perhitungan lebih kec i l dari t

tabel, maka Ho diterima, artinya tidak ada perbeda-

an yang bermakna, dengan kata la in metode penetapan

kadar mempunyai ketetapan yang baik.

Metode penetapan kadar dikatakan mempunyai ke

t e l i t i a n yang baik jika besarnya penyimpangan antar

rep likas i, yang dinyatakan dengan koef is ien var ias i

tidak lebih uari Harga koefis ien varias i dapat

dihitung dengan rumus sebagai berikut :



30

Kv = - f ~ x 100%

dimana :

s : simpangan baku

x : hsrga rota-ratt yang diperoleh

Dalam hal in i semakin keci l harga koef is ien var ias i

, make metode tersebut dikatakan semakin t e l i t i .

4.2. Perbandingan metode

Untuk menyimpulkan apakah ads perbedaan % r e

covery antar metode, digunakan u j i P ( Angva ) de

ngan rancangan " Completely Randomized Design ",

Untuk menghitung harga F aigunakan rumus-rumus :

c? = ( I T.1 )2N

ssT - I ( Xij )2 - CP

ssp = c )--- c?t- no

SSE = ssT - ssp

Kemudian disusun tabel Anava untuk ” Completely

Randomized Design " sebagai berikut :



31

! Sumber var ias i ! DF ! SS ! NjS ! F hitung !

! Antar metode ! K-1 ! SSp , SSP■ K-1

MS„ t EL i• mse

! Dalam metode ! N-K ! S S Es s £

! N-K 1 1

! Total ! N-1 ! SSTs s T

! n^T 1 I

Apabila harga F pada perhitungan lebih kec i l da

r i F tabel pada harga -Ctertentu, berarti tidak ada

perbedaan yang bermakna antar metode. Metode yang d i-

bandingkan adalah antara metoae stanaar eksternal,

standar internal nepthol, stanaar internal eugenol

dan stanQar internal buti l paraben.



32

iJjli) IV

i l A i . J I I * I V v J a O O U : !\J-I

1. Penetaoan. kadar dengan teknik standar eksternal,

1.1. Kurva ka l ibrasi nippftin,

Ilsr^s luas puncak kromntogram dan konsentrasi

nipagin adalah sebagai berikut ( tabel I ) .

:2Ajj£L I

Konsentrasi dan luas puncak kromatogram nipagin.

ho. Konsentrasi ( ppm ) ! Luas puncak kromatogram

1 . 101,0 ! 0,009

2. ?5?,5 ! 0,029

3. 505,0 0,063

4. 757,5 • 0,113

5.

oor'

C

0,161

Perhitungan koefisien korelasi Uan persamaan

regresi kurva kalibrasi antara konsentrasi dengan lu

as puncak kromatogram nipagin dapat d i l ih a t dalam

lampiran I . Harga koefisien korelasi yang didapat

adalah r = 0,996. Harga r hitung tersebut lebih besar

dari r tabel ( 0,878 ) pada harga 0,05 dan derajat

bebas = 3. Hal in i membuktikan bahwa ada korelasi



l i n i e r anta.ro konsentrasi clan luas puncak kromato1 -

gram nipagin. Persamaan regres i kurva ka l ibrasi ni

pagin adalah : y = 1,679 , 10"4" x - 0,013.

Kromatogram nipagin pada pembuatan kurva ka l i

brasi dapat d i l iha t pada gambar 1.

^*2. Kurva ka l ibras i n ipaso l.

Harga luas kromatogram dan konsentrasi nips-

sol adalaii sebagai berikut' ( tabel I I ).

TABEL I I

33

Konsentrasi dan luas puncak kromatogram nipasol

Mo. Konsentrasi (ppm ) ! Luas puncak kromatogram

1. 105,4 1 0,008

?. 263,5 ! 0,024

3. 527 ! 0,057

4. 790,5 ! 0,094

5. 1054 ! 0,133

Perhitungan koe f is ien korelasi dan persamaan

reg res i kurva ka l ib ras i antara konsentrasi dengan

luas puncak kromatogram nipasol dapat d i l ih a t dalam

lampiran I I . Harga koef is ien korelasi yang didapat

adalah : r = 0,998. Harga r hitung tersebut leb ih

beser dari r tabel ( 0,873 ) pada harga <>C * 0,05

dan dera.jat bebas 3 3 . Hal in i membuktikan bahwa ada

korelasi l i n i e r antara konsentrasi dan luas puncak

kromatogram nipasol, Persamaan regres i kurva kalibra_

s i nipasol adalah y = 1 ,3 2 6 , 1 0 " 4 x - 9 ,6 7 5 , 10~3.

Kromatogram nipasol pods pembuatan kurva :caM-

brasi dapat d i l iha t pada gambar 2 .

"1*3. Penetanan kadar nipagin dan nipasol dari sampel mur-

n i .

Hasil penetapan kadar nipagin dan nipasol da

r i sampel rnurni dapat d i l ih a t pada tabel berikut in i

( tabel I I I ).

Contoh perhitungan kadar nipagin dsn nipasol dalam

sampel murni adalah sebagai berikut :

34

Kadar nipagin = ^ ^ x 5?0,0 = 534,6 ppm0,536

% Recovery nioagin s 524.1.5 x 100 % = 102,8 %520,0

Kadar ninasol = ■ x 520,0 - 242,9 ppm0,578

% recovery ninasol = ^-4? 1 2.... x 100 % = 93*4 %260,0

Contoh Kromatogram berikut data waktu retensi

dan luas puncak dapat d i l iha t pada gambar 3.

1.4. Penetapan kadar sampel dalam sediaan kosmetik adstri_

ngent.

llss.il penetapan kador nipagin dan nipasol da

lam sediaan kosmetik oaoat d i l iha t pada tabel beri_



Ha

sll

p

en

eta

pa

n

ka

da

r n

ipa

gin

da

n n

ipa

so

l d

ala

in

sa

mp

el

mu

rni

de

ng

an

m

eto

de

s

tan

da

r e

ks

te

rn

al.

E.a>»uo>oo(I)cc

t*.<0T3C<0

&<0oc3Q.

CD(03

0)aEaraaoc3acoa

EQ.a

ka-acCO

co

Eaa+>cc3

■yH'O

toco>>

uaT3©

aEaco

*—s«■ * *•3- m in in

A • * *r\ r - CM CD

r“lO

U\ O vO O Om 'w ' •s_* •w' V_/(0 ON r- VOp. •» «, ■ •> •••H CM r- in CM a-

■«- m r\ VOOJ in in in

-s -VX

co o CO in COG *» «*•H CM r- VO c -bOa

O c\ oT“

t - ©P. s_ <w>•H vo CVJ CM CO•» «, A

CM in c\ otn

inCM in

r \ vOin

' *“ “ ~ -

r“iO CO co CO co CO03 c - r - r - r - r*-(D in m in in inA> a» *.

td o o o o ©

- - ► - - -

•H vO VO vO vO vOCO m m c\ r\ rn03 in in in in ina • m. a *»■H O o O O O

- - - - - -

Ho o r - <7\ CM f -(» r - m o \ CMC3 CM in O m VOP. * .. * *.»H o o o o o

-

C•H r— o CM ?— CD&J in vO VO •"3* r -03 in OJ in o inP- •* A•rt O O o o o

- - . . _

rHo o o o © oca «• «. •« tlCO o o o o oP. cm CM CM CM CM•H■r

in in in in in

c- - - - -

•H o O o © oSO *> •» •> * *a o o © o oP. cm CM CM CM CMT-( m in in in in

- - - ► -

»—to O O O o OCO *» v.(0 o o CM O oP. vO CM in CM CM•H CM in in in

- * - - - -

•H © o O © ©C6 •>cc o CM ©p. CVJ VO CM in CM•H in CM IT. in

- - - - - -

, , . , ,O CM ■c in

r -

mCTN35

CDr*»O'

>>ha>>ooaM

COCM

>

36

k u t i n i ( t a b e l I V ) #

P e r h i t u n g a n k a d a r n i p a g i n dan n i p a s o l d a la m s e d i a a n

k o s m e tik : d i l a k ^ k a n s e o e r t i p?3da so m o e l m u r n i d i t i t a s

( b u t i r 1 . 3 . ) .

'/O’ lt o jj k r n n t n r r f r ’ ner.i to it d a t a v.'aktu r e t e v . : i

dan I ’j a s n u 'ic n k d a ^ o t d i l i h a t o&da gsmrwar 4 .



II

c«s

•HT3©W

B f—(

T3

OOCDC .

•Hn

cc

'D

c '•H65OCL

ac©

4*co©

ufflT3Cc

©

U cC V

TJ Z.CD ft)

^ TJ

c ^O -f!G . 4J© c

-o g Q>c(D Q .

03®

S

KO

Jtf

EC ,a

o>oo®cs

BTJCa

.X©oc

a

i—iOO .

c03

UCDT3Co+ »to

c ,a

a3X3TJ

«C> j

uffl■cs

tfi. OS 6® ’Cs°r“ CO VO vO ON

r— l * •.O v£> o LA VO 'S ’CJ O'. ON CD ON ONCO w \.A s /a o crs (V c—

i +• 00" v£> CT\ ON vDcvj CVJ r - Ocr> f - c- c~-T"» T— r”— ... _ — •

‘e ft i r t>0tsv.

o n o n CO o fNc ■ _•H Js_ ON VO oto a> CD CD © CDCO N_S.a in VO CNJ T~ rN

•H * * «,CO o \ r * r^,i n T— VOc^* t - o vO c\1— r "

M* to. .HO r - i n vX) VO COn CO cn O r -S3 m r-\ cc COcu ** •. w,

•ri o O o O o

c•HtoCOCl

•H2:

rHOQEC -

rHO03fflCL

3?kDON

r -inLPi

VCC

ONmon

ooin

ooin

oooCv)

oooC\J

C"- vO ON00 vO c-~

»*N CD c*— P -«ko o o o

ON in vOm —in vO CO•» r,O c o

in o r\ vOco VO r— e*-\•«s- cc in O•k© o O

O o o o» »o o o oo o o oin o o oT—— — — —o o o o•» «,c o c oc o o oin o o oT~ r—

O CO VO#sO o CNJ ino TT rr VOCO CD aDT— r—

o o VC o•* * •.

O o r-\ oo o r^i oCD CNJ CO VO

CV' r> in

CMCT\

o nin

(A03

s- •W’ > »u<l>>oou ► b M

ffi*5

38

2* Penetooon kadar daru*on teknik standor internal : -

naptho},

2*1• Kurva kalibrasi nipa^in dengan standar internal p -

naothol.

Berdasarkan lues puncak kromotogram dan konsen

t ras i nipagin .yang didapat sebagai berikut (tfcbel V)

TABEL V

Konsentrasi, lues puncak kromotogram dan perbanding-

an luaa puncak kromatogram dari nipagin dan^-napthol

No. Konsentraai ! Luas puncak kromatogram !Perbanding8n

Mipagin(ppm)\ Hipagin - napthol \Lues puncak

1. 51,5 ! 0,027 ! 1,240 ! 0,022

2. 128,3 ! 0,063 ! 1,036 ! 0,066

3. 257,5 J 0,167 ! 1,103 I 0,151

4. 306,2 ! 0,259 ! 1,167 ! 0,222

5. 515,0 ! 0,371 ! 1,177 I 0,315

Perhitungan koefisien korelasi dan persamaan

regresi kurva kalibrasi nipagin dengan naphthol

dapat d i l iha t dalam lampiran I I I . Harga koefis ien

korelasi yang didapat adalah r * 0,993* Harga r h i-

tung tersebut lebih besar dari r tabel ( 0,878 ) pa-

da harga <£ = 0,05 dan derajat bebas = J>. Hal in i mem-

j W I H B Il nmPUSTAKAAW J-KWIYERSITAS AlRLANCHU"I I U R A B A V A

39

buktikan bahwa ada korelasi l in i e r antara konsentra

si dan luas puncak kromatogram nipagin dengan f -

naphthol. Persamaan regresi kurva kalibrasi nipagin

dengan nap.thol adalah : y = 6,273.10~4 x - 0 ,0 1 3 .

Kromatogram nipagin dengan ^ - napthol pada pern

buatan kurva kalibrasi dapat d i l ih a t pada gambar 5.

2.2, Kurva kalibraoi nipa3ol dengan standar in terna l -

noothol.

Besorn.ya luas puncak kromatogram dan konsen -

trns i nioorjol yan^ didyput sebtr-.oi borikut ( tabel VI)

TABEL VI

Konsentrasi, luas nuncak kromfltogrom dan perbandingan luas

puncak kromato^rnm dari nipasol dan ft - napthol.

IIo. ! Konsentrasi !

! Itfipasol(ppm)!

Luas puncak

ftipasol !

kroimitogram

nopthol

!Perbandingan

JLuas puncak.

1. ! 51,2 ! 0,043 ! 1,230 ! 0,035

?. ! 128,0 ! 0,075 ! 1 ,042 ! 0,072

3. ! 2V-o,0 ! 0,158 ! 1 ,146 ! 0,138

4 . ! 3*4,0 ! 0,317 ! 1 ,303 ! 0,243

5. ! 5 1 2 , 0 ! 0,391 ! 1 ,178 ! 0,332



k0

Perhitungan koefis ien korelasi dan persamaan

regresi kurva kalibrasi nipasol dengan ^ - napthol

dapat d i l iha t dalam lampiran IV. Harga koefis ien ko- '

r e la s i yang didapat adalah r = Ot994. Harga r hitung

tersebut lebih besar dari r tabel ( 0,878 ) pada har

ga ^ = 0,05 dan derajat bebas = 3. Hal in i membukti-

kan bpnwa ada korelasi l i n i e r antara konsentrasi dan

luas puncak kromatogram nipasol dengan napthol.

Persamaan regresi kurva kalibrasi nipasol dengan ( ~

napthol adalah : y = 6,535.10"*^ x - 9,962.10” ^

Kromatogram nipasol dengan napthol pada

pembuatan kurva kalibrasi dapat d i l iha t pada gambar

6.

2.3. Penetapan kadar nipagin clan nipasol dari sampel mur-

ni dengan standar internal ft - napthol.

Hasil penetapan ka<iar nipagin dan nipasol da

lam sampel murni dapat d i l iha t pada tabel berikut

in i ( tabel VII ).

Contoh perhitungan kadar nipagin dan nipasol dalam


Cx

Kadar nipagin x 346,7 - 343,1 ppm0,292

% Recovery nipagin = x 100 % = 99*0 %346,7

H

£

a<5SH

r—fotn

w 30 .

e THP< sz

a aHO >> -

,3-P 0A > 303 o •Ha o toi 0 3

< £ ^ry P*

•H

rHacfn “ r-t0 M O

4-» o — rH3 o ^ o

■H C Q. 033 a <S

u a , « P*3 i •rW

-■d 03 *»>-n 3 e .CO 3 a

+> <-H T30) 3

C £<u a ^

T3 U0 0 f lo G *» •H

+» •H to0 ■a b 3E c a A

53 T3 ■MC ^ c s<0 H 3to <y +»a Ph C/50

T3 i i rHc j o

•H O .3 rHs B -p Or4 3 — ca3 a 3 3£ r* A

m T rH,-H 3 *°"'0 3 Cua rH 3s <3 --3 3 <303 3 ~

W M ffc G O •H5 •H +» OD

rH • 3 3a 3 rH A-

T3 (0 0 •H-O Q. 35

i—< * so 0 a0] Oh cno — _a

•H rHc ''“ S O

£ 01a a 33 Q. a

73 jrH

a<0 ■m.

CjO X)3 3 ao« 3 •rH

-P CsO.-« CO 3£X

coT3CO — _ wu rH*» o3 3 9J3 3 3a -O Cuca •iH •iH

+» ■3 ss03 to _a) 3 =a a 5 .

1 >» c . £2rH •pH•H Jh toCO 3 3Q T3 a,X 3 •rH<>

_rH0a .E O3 2

CO

SS.cns-m

cnm3

Oos<T\

cnr j-f*'V

<nc n

co

cninmVO»■»*3-Oo>CM

mmo

*ftvo r\ in

cooo

CO C- CM <3-

m

e'er!e'

enc -

c- c-<n cm m

c n<n

cnc n

CO(T\

<n

oo

<X\

m

in<n

CM CM CM OJ CM +>(T\ a \ CT\ (T» ON 3CM CM OJ CM CM Um * » 1O o o o o 3

vD c - CM VOin CM CM«— cn O r>

•« •h «%o o o O o

cn in <T t \ 'S’co ■53" co CMCM v— CM o CMm m mO o o o o

c>- f -«• A

m3 M3 •J3 M3 vOTT ^ r ■ r TTc n <n cn cn

- - - - -

f - r - £*-

M3 M3 v£J >sO vO■^r *3- ^ }-

<n m «n m <n

- - - - .

m f - c-" C "«• ««<n vO •5- VO vOc~- ^ r cn *«* ^ r

m m cn

r - cn■■ » m A

vO m vO VO*J-cn

t - •<3*<n

cn ■*rcn

- - - - -

« # .•— CM cn T in

U

cn

inCTv

vOinco

incn

CD’•O

cn

CD>Oo0)cc

3CC

Kadar nipasol = x 346,7 = 163,4 ppm0,331

% Recovery nipasol = -1 * -. x 100 % = 94,3 %173,3

Contoh kromatogram berikut data waktu retensi

dan luas puncak dapat d i l iha t pada g.ambar 7 .

2.4. Penetapan kadar sampel dalam sediaan kosmetik ads tr i

ngent dengan standar internal - napthol,


lam sediaan kosmetik dapat d i l iha t pada tabel ber i

kut in i ( tabel V I I I ).

Perhitungan kadar nipagin dan nipasol dalam sediaan

kosmetik dilakukan seperti pada sampel murni diatas

( butir 2 . 3 ) .


dan luas puncak dapat d i l iha t pada gambar 8 .

if2



H>

0)CO

• r t

X )<u7)

TJ

OC2©a .•ria

60■5SCL

•H

MajT3<a

x .

c

a,03+■»®c«a

r*<O

+*a.ac

©CH47+»

aaflc<Q-O

m

no

3*

O .a

>>

>oo®

cs

~ iH O i-

Jrf £ O Cu O 3 G C 3 I a.ui aj a . 3 ar-» TJ

S3C<0 Mco oT3 ChG 3ffl XJ,3 CH 3 0} a j

Ch

"** r-l0zs

o «S ^ a 2

1

a ^ s .

rH 3 'O

G 33toc

•HTD

to O,0 Qh S© «fl* v-3

Isa04wu(D*CGfflCQ—+»<03•riTJ —ssoG “3 a>, au w<aT3a>/■

. .

rHO'Tiflja

•IH

r-»o53

C2.•W

i?v3£A

H0mcOa

•H

r-(O03<0a.

•r

•p4aOaja .

•H

inO

CD

CTNCO

-T\

LAo

o<7\CM

VOVOOJ

■5VVO

u>CD

in

VO

y£>

voCO

CD CMcn <m co vo

VOCMcn

ITSom

CVr

<T

cncn

c -oe'

en

cocoCn

oC“—OJ

o

oo<n

ON

incn

<x»t n

oco

OOvO

OJmvO

C—»3*VO

•3-

CMCO

<3-vOCD

C -

CMC0

cn

43

ovOVO

•tO

COCMvO

o

vO «-n <n vO vO«T Jw ■nVO vO un CO

A »c C ,— o

~ -* — - -

ITV o o m CMcn CO CMLT\ ir\ CO a~\ t—

«« 9% 0,t“ o o O r**

— — — — —

cn cn <n P- r -«» •»<n <n cn vO vO<n cn <n vO vO

cn tn VO vO

— — — — —

cn <n cn C - c~•* «» m<n m <n vO vOr n cn <n VO vOm m <n VO vO

— — — “ -

o o CO CM o0,o o VO CO cr>o OJ ir» LP» ^rCD r — VO CT“ T“

— - — — —

o o o C>J o* * m ao o O o oo OJ co inCD o- c e—r - ' r“ r -

—

COVO

CMcn

inCM

cnco

>>u<0>ooCD >

aj+>aU

aas

kk

3. Penetapan kadar dengan teknik standar internal eugenol

3 . 1 , Kurva kalibrasi, nlnagln dengnn standar internal euge

n o l ,

Besarnye luas puncak kro'-wtogram dan konsentra

si nipagin yang didapat sebagai berikut ( tabel IX )

TABEL IX

Konsentrnni > luas puncak kromatogram don perbandingan lu

as puncak kromatogram dari nipagin dan eugenol.

No. ! Konsentrasi ILuas puncak ! Nipagin(ppm) ! Nipagin

kromatogram t Eugenol

! Perbandingan ILuas puncak

1 . '■ 51,5 ! 0 , 0 3 6 \ 1,808 ! 0 , 0 2 0

2 . ! 128,8 ! 0 , 1 1 6 ! 1,834 ! 0,063

3. ! 257,5 ! 0,293 ! 1,824 ! 0,161

4. ! 386, 2 ! 0,435 ! 1,033 ! 0,237

5. ! 515,0 ! 0,587 ! 1,812 ! 0,324

Perhitungan koefis ien korelasi dan persamaan

regres i kurva ka l ibrasi nipagin dengan eugenol da~

pa1> d i l ih a t Ualam lampiran V. Harga koefis ien korelasi

adalah : r * 1,003. Karga r hitung tersebut lebih

besar dari r tabel ( 0,878 ) pada harga X = 0,05 dan

derajat nebos = 3 .

Hal ind inem’nuUtilcan bshwa nds korelasi l i n i e r antara



konsentrasi dsn luas puncak kromatogram nipagin de

ngan eugenol. Persamaan regres i kurva ka l ibrasi nipa

gin dengan eugenol adalah : y = 6,609 x - 0 ,0 1 6 .

Kromatogram nipagin dengan eugenol pada pembu-

atan kurva ka l ibrasi dapat d i l ih a t pada gambar 9.

3*2. Kurva kalibrnsi nipasol dengan standar internal euge

nol,

Besarnya luas puncak kromatogram dan konsentr^

s i ninasol yang didanat sebagai berikut ( tabel X ).

TABEL X

Konsentrasi^luas puncak kromatogram dan perbandingan luas

puncak kromatogram dari nipasol dan eugenol.

Wo.K onsen tras i

i l ip a so l (ppm)

Luas puncak kromatogram ! Perbandingan

! Luas puncakI i i p e s o l ! TDugenol

1 . 0,033 ! 1,103 ! 0,030

?. i? r i ,o 0,096 ! 1,1 '34 ! 0,083

3. 2 56,0 0,174 ! 1,156 ! 0 , 1 rp1

4. 384,0 0,295 ! 1,147 ! 0,257

5. 512,0 0,396 ! 1,096 ! 0,361

Perhitung8n koefis ien dan persamaan regres i kur

va ka l ib ras i nioesol dengan eugenol dapat d i l ih a t da



Harga koe f is ien korelasi yang didapat adalah : r =

0,999. Harga r hitung tersebut lebih besar dari r

tabel ( 0,878 ) pads harga £ » 0,05 dan derajat be-

bas = 3# Hal in i membuktikan bahwa ada korelasi l i

n ier antara konsentrasi dan luas puncak kromatogram

nipasol dengan eugenol. Persamaan regrern. ky^a kali^

brasi nipasol dengan eugenol adalah y « 7 , 1 2 2 . 10~^x

- 0,014.

Kromatogram nipasol dengan eugenol pada pembu

atan kurva kalibrasi dapat d i l iha t pada gambar 1 0 ,

Penetapan kadar nipagin dan nipasol dari sampel mur

ni dengan standar in terna l eugenol.

Hasil penetapan kadar nipagin dan nipasol dari

sampel murni dapat d i l iha t pada tabel berikut in i

( tabel XI ) .

Contoh perhitungan kadar nipagin dan nipasol dalam


c = AX/Al3t x COx 7 - ^ — X °st

at is t

Kadar nipagin s S.t,2.?Q. x 3^6,7 = 3 41,4 ppm0,325

% Recovery nipagin = x 100 % = 98,5 %346,7

Kadar nipasol = .Q.aJ..4P. x 346,7 * 147,1 ppm0,330

% Recovery nipasol = H-7-1,.1 x 100 % - 84,9 %173,3

lam lampiran VI.



a

<£■*

Oc(Uco3(U

010<u■ps

03

”25

+»OJ

<u'ao•p<Ue

s<860BOJ13

•HBfn

rH<Ua£S333

S3rHaT5r*4OCJaa .

• r t

fiC(0TJa•Htoaia

tcmT3a

Baja03

-Pil)c<uOh

a .a>>uooa>cs

03S33

rH

(3

C•iHT3C23

-awa)Ch

cotoc

c<3

X3

<0eu

Eo .a

a j

33■PCO

aan5T>> Q. •iH

«s0■w 03

<0 O -•H

©«

S

rH0)P . •£ O53

71

o7iCDa

•HS

B•H60caA

i—< o<n03ft

fic-50aa.

■H

O3333O.

•<H

« )<no .

-■—V •""■s

t t t tON \ n CM

•* «* Ar t - ON CM inCO CN < r CO o

f*•w' '~»- -w " wf— M3 cn c r\»• * «»{*- to . \ o oT •w ON in*“ <n CM cn- _-—‘v »~s _—^t t t t **in CJ in co O J

*» *,03 ■q- (D <nc n CT\ ON r— O

r ~**—>* '— ' V -. V. ,<3- CJ v£> o- * -* •s «« Ar*- rn r * in r—

mD CM in<n T— m- — — •

o o o o ocn m c n cn cncn tn c n <n cn

•» * ato o o o o

B in in in in m•iH CM OJ CM CM CMto cn <n cn cn cnOJ * •> _Q.-J o o O o o

- - - " - -

o o\ ■r CJ!-« T CM T— CO cno cn o CM mw «« #« A M3 o o o O o

oCMcn

c nLTN OCMcn

CJo

vO•a-m

\D<Tc n

o \o■Vin cn

vO*3-cn

c—>sDcc n

vO<Tcn

tn

vO•>5P<n

c - c-»

m\ o ‘

cn

vO

cn

cnc—

OJ

vO• r<n

t j-c n

onCMc n

TTcn

■•crt*cn

M3

c n

VJDc n

* r 7

CMCO

CM

mON

>iuo>oo<0

03•P03

I03

■P03K

tt

>i*2

11,9

6 *

28,7

9

Contoh kronato^ram berikut d8ta waktu retens i dan lu

as puncak dapat d i l ih a t pada gambar 1 1 .

3,4. Penetaosn kadar sampel dalam sediaan kosmetik adstri

ngent dengan standar internal eugenol.


lam sediaan kosmetik dapat d i l iha t pada tabel b e r i ' -

kut in i ( tabel X II ).

Perhitungan kadar nipagin dan nipasol dalam , sediaan

kosmetik dilakukan seperti pada sampel murni - diatas

( but ir 3 .3 )•


dan luas puncak dapat d i l iha t pada gambar 1 2 .

48



•J<c

CCDa'tj<031

33r-toCQ03

cis■o

too

a'Oa

c<sCU<0-Mac©a

fH•Hm0}

OC04

/H03CH®-M

Ph<orgc03

©T3o+»<0ec0)S?a>'O

+»oEino.M

0]o

53■z3rH

J4S3O

S<

acu>»u©>oo©

03

iHOc©30)Q.aT3aj

3 fHao ©c -P •HT3 tfC 03CD T3X) qH COO +>3h V3

3©a<s'O©

©

i—I © a E03

P-> CO

aa

a-ac<o

+»<03J3•H-a60ca>>U©

T30]is:

©Cl

E3

CO

' . iO''- t t t t<0 ■«r r~ r — vO

A •k * * •KM3 r“* ir \ c n

rH O ON O a \ coOU1

r*w 1 •*~s . 3 w ___

03 O m vO o vOa •» •> o •» ••

•H cn CO in CO vo3 ! <M in (Tv vo o -

CT\ vO C - in CDt- r “ . ./*™S ,—..

T— cn CT\ vo

G CTN o ' OJ ON <£•H O o O co CO

0y* r “

S -' '■ f'Q. ’ S’ o r— OJ

•H •• •• •• >23 r~ CM t— OJ o

VO OJ 1— — CDCT> c— T— vO i\J

- - - - -r -

/- IO03 r - >n m to03 CU VO OJ r - r“a <n cn c -

•M •k A 01o o o o o ’

•H m o OJ OJ:>o e— o ON OJ m03 OJ OJ vo vOa . •* m •l

•rt o O o o o

“ - - - -

iH CM T—O <f\ r— Tj-Cl co C “ CD ON<n * * «k «.Q, o o t— o

■H

c•HQO <jn OJ f - r*~ OJCD o in vO OJ inO. VO VO ON vo CVJ•H •»2S r " o o o

HO cn cn c~- f -0J *> «•03 <n m cn vo voa . <n cn VC VO•H <n cn c n vo vO

c•H m cn cn c^ c*~00 •* -<D <n cn <n vO vCa m m cn vO VO

•H <n <n cn VO vo

“ — — — —

rHO o o oo OJ oCO »• ««CD o o vO CD ONCU o OJ in in

•H CO t - c - VO oT— »—

•H o o O OJ oW) • M 0>03 o c c o oQ. c OJ cc in

'H CO c - o r- rr

-

r “

—

. . ._o OJ cn •<3' in

Ra

ta-r

ata

re

cove

ry

(%)

I 98

,2

l 9

6,3

Kv (%

) I

8,90

!

10

,06

4. Penetapan kadar donrrar; teknik stonriar internal Butil -

paraben,

4 . 1 , Kurva ka l ibrasi ninarin den;;.fr :;t c rdar internal bu-

t i l paraben.

3eaarnys luns puncak kromatogram dan konsentra

s i nipagin yang didapat sebagai berikut (tabe l X I I I )

?A3iJL X II I

50

Konsentrasi,lua3 puncak kromatogram dan perbandihgan luas

puncak kromatogram dari nipagin dan bu t i l paraben.

No.IKonsentrasi IL’jgd puncak kromatogram !Perbandingan

!Ninngin(ppm) ! . 'ipagin! Butil naroben ! uuas puncak

1 . ! 51,5 ! 0,049 ! 1 , 2 1 0 ! 0,040

2 . ! 128,8 \ 0,131 ! 1,215 ! 0,108

3. ! 257,5 ! 0,278 ! 1 ,214 ! 0,229

4. ! 3 ^ , 2 ! 0,434 ! 1,333 ! 0,326

5. ! 51 SO ! 0 ,583 ! 1,207 ! 0,483

Perhitungan koef is ien korelasi dan persamaan re

g res i kurva ka librasi nipagin dengan bu t i l paraben da

pat d i l ih a t dalam lampiran V I I . linrga koef is ien kore

I a s i yang didepot adalah r = 0,993. Harga r hitung

tersebut lebih besar dari r tabel.



51

( 0,878 ) pada harga 0,05 dan derajat bebas * 3.

Hal in i membulctikan bshwa a&a Korelasi l i n i e r enters

konsentrasi dan luas puncak kromatogram nipagin de-

ng*n hutj.l paraben.

Persamaan regres i kurva ka l ibrasi nipagin dengan bu

t i l paraben adalah y = 9i337.10 x. - 0,013*

Kromatogram nipagin dengan bu t i l paraben pada

pembuatan kurva ka l ibras i dapat d i l ih a t pada gambar

13-

4.2. Kurve ka l ibrasi nipasol dengan standar in terna l bu

t i l paraben.

Besarn.ya luas puncak kromatogram dan konsentrai

s i nipasol yang didapat sebagai berikut :

TABEL XIV

Konsentrasi,luas puncak kromatogram dan perbandingan luas

puncak kromatogram dari nipasol dan but i l paraben.

!Konsentrasi !Luas puncak kromatogram ! PerbandinganNo.

!Nipasol(ppm) ! i'lipasoll Butil paraben! Luas puncak

1 ■ 50,8 ! 0,055 ! 1,261 ! 0,044

2. ! 127,1 ! 0,133 I 1,169 ! 0,114

3. ! 254,2 ! 0,272 ! 1 , 1 3 2 ! 0,240

4. ! 381,4 ! 0,435 ! 1 , 1 7 6 ! 0,370

5. ! 508,5 ! 0, 622 f . 1,264 ! 0,492



52

Perhitungan koe l is ien korelasi dan persamaan -

reg res i kurve ka l ibras i nipssol dengan buti l paraben

dapat d i l ih a t dalam lampisan V I I I . Harga koef is ien -

kore las i vang flidapet adalah : r = 0,999. Harga r

hitung tersebut leb ih besar dari r tabel ( 0,878 )

pada hsrgo £• - 0,05 dan derajat bebas - 3. Hal in i

membuktilcan bahwa ada korelasi l i n i e r antara konsen

t r s s i dan luas puncak kromatogram nipasol dengan bu

t i l paraben. Persamaan regres i kurva ka l ibras i nipa

sol dcngrm bu t i l paraben odsloh ; y = 9,857.10” ^z -

8,619.1 0“-'Kromatogram nipasol dengan b u t i l paraben pada

pembuatan kurva kalibrasi dapat d i l ih a t pada gambar-

14.

4.3* Penetapan kadar ninagin dan nipasol dari sampel rnur-

ni dengan standar i nternal bu t i l paraben.

Hasil penetanan kadar nipagin dan nipasol dari

sampel murni dapat d i l ih a t pada tabel berikut in i -

( tabel XV ).

Contoh perhitungan kadar nipagin. dan nipasol delam -


c = y rx A J /A. . ''Ct rat' i s t

Kadar nipagin = x 3 4 6 , 7 = 356,4 ppm0,430

% Recovery nipagin = i S i iA x 100 % = 10?,8 &346,7



aaS-4

c4)-3Xu3Q.

3A

Ua"Oc«na>

T3O4-»O6Ca63C0)*a

<ya

0)■o

OOT03a.

c43TJ

60aa

ft3T3<0idsoa37

a>a,

aaa>»bv>oo<yas

3>>u<a*o0]

®aEffl

CO

aa.

c,<3T3atV

I*aT3

X.<0oc3a0]a]

c<0to

c53Siu<v

a aa £. oC r-» 3 —a -ja i a3 C.i-H

■cC Ca jcto «c a"3c a£30) a,

a,a

ua"Oc3

4JCO

a3.O

2> Ca a>E X>a sco *

a

o9)aa

c•H<0a•H

r-<O0J«a

a)31a

o3aSb•H

toaja•H

onaa.iH

w3a.

o<naa

!*)03a

^ V*. ^tp co r-04O '

oj

COc\7o

vOmO*'

OJO!A

Ojr>OJ

vOVr>

vo

cn

OO ^ .© r*' «- r*\

COCO

OJoin

wCOrr

>43ttm

vOrc\

OvO O' vO C' vfi ON

O '

OJ*r~\

A ytO ' o o

p-Os

OJ

OJc-

<r \o in «n r-v o j

CMoin

OJo-.n

mO

■OT<n

vDn*\

vorrn"\

r' vQ rp >• r"\«- c\

r- m e-O r~\ <o*«r c— rpc^\ r"\

vOTpc l

t-O'

05

O 'c*'r"V

>»CO

AO'O'

O'

0Jotn

O O O O of\ r*\ rA *r 3- tp ^

0< r -cc <r-■sr —

CVJ f - c— » - (T\•a- O' f'' oj■*3- »- -3- O -<y

vO soTP Tp

c-vOTp

'OTT

in p—o

53oO' f-

■ ~

C-\f*

*OJO ' *-

>»0>>oy4>£

>

(9■P

IO■P<0Ci

%

Kadar nipasol = 2aiL22. x 346,7 - 160,2 ppm0,502

% Recovery nipasol « «■--->■?■ x 100 % = 92,4 %173,3

Contoh kromatogram "berikut data vvaktu . retef is i 'dan

luas puncak dapat d i l ih a t pada gambar 15.

4.4. Penetapan kadar sampel dalam sediaan kosmetik adstr i

naent dengan standar internal bu t i l paraben.

! ias i l penetapan kadar nipagin dan nipasol da

lam sediaan kosmetik dapat d i l ih a t pada tabel beri -

kut in i ( tabel XVI ) .

Perhitungan kadar nipagin dan nipasol dalam sediaan

kosmetik dilakukan seperti pada sampel murni ( butir

4.3 ).

Contoh kromatogram berikut data vvaktu retensi

dan luas puncak dapat d i l iha t pada gambar 1 6 .



Juaa<

c©<s•rt■a©51

e©a

-o

*o

toa

(h<0

<0

c©a©■w©C®a

cVJ2©H

a .

•rt

3J3iH©c

©■oo+->oE

360

91OJtf

Eaa

>»u©>oo©25

©a

3 +»a 3J301a Qu 3 <S i—4 T3

©3 £5 HSO ©

c•H6003a

cn

<T»COo -

CD

CO

p -ovo

*

CMcnvo

c*»

COCO

vO

ocr> o> CM©

(7\ cn

COo

<ninvo

TTonCO

cn

vor*»vO

CO CO «-COCTiCVJ

VOcn

vo m on C— P - CO p -*7- « r »3- ON

ON

aCON

ONr -

o

COino

cnCM(A

mCOcn

z1-1 *rt c - •s\ T— p - CM“0 (h <50 co <J\ o p~ « •c © • © f \ cn p - CO3 -a c a . « « »

.2 c © -H o O o CM oM © .D? ©

'f l 5*

JX 3—■ *" •— —• — — —

~ Q.

i—13 •H o in c - in CT\ inCl XI 31 <Ts ON CD

3 3 CM co cr> inJ1 .c a •>m OJ o o CM3 a 25l—1 ©

TJ3 © _O a603 © C

+» •H •«r in vo CO T ?13 60 CO r - in CJC r~ i « © < j\ e - o CO ONa © c a m

a . u •rt r - o T— o r—u E £3© © ©

2-1 75—• —• —■ « w.

i—('--- o <n <n cn P -<? 012. © fA <n cn VO vOCu a . r-> <n <n vo vO

' •*-ts

cn cn vO vO» _ _ .

a: c-o •M cn <n P -3 10 > - •3 © <n <n vO vO4J a . «n «n cn vO vO73 ■H cn m cn vo vO*** •— —• —• v . .J->

H Q o CM o-« O o •K «— 0J » o VO CO a*>• « © o CM in in tj-^3 a o c - vO o•w coto 23 E; a __ »•5-» a c

•rl o o O CM c»s © o o o O o•’3 a . o Cvi CD vn ■«■

<E P - O p^z

— _ ..,-H©C. . , . ,C o CM <n ms s

55

75

Ra

ta-r

ata

re

co

ve

ry

(%)

I 9

4,5

I

93

,4

• Hasil analisa data

1. Ketemtan dan ke te l i t ian

Keseluruhan hasil penentuan ketepatan dan

ke te l i t ian penetapan kadar sampel murni dapat d i

l iha t dalam tabel berikut in i ( tabel XVII ) , se~

dangkan untuk penetapan kjdnr sediaan kosmetik

adstringent dapat d i l ih a t pada tabel XVIII.

Dalam penelit ian in i sebagai ukuran dari ke

tepatan adalah % kadar yang diperoleh kembali

( % Recovery ) dan analisa data yang digunakan

adalah u j i t satu sampel, Sedangkan sebagai ukur

an dari k e te l i t ian digunakan koefis ien var ias i

( KV ) dan analisa data yang digunakan adalah :



ucc*d03

G co ft •CO •Hp G4/'G 3<bCU

srH

rH Ch-i ■H ftV—t CO E> CU COX ,G (0

i-1 C h0> cn A3•r-l ,--4tv P CDe-i •H rO

CL> rH+-» Oflj CO

aa

G •H(9■o

Cc

G codP

TJCO ca •H ro

g u p fn M Jhco 3 3 3 p

•H ,Mi X S i-P•H g G G G G G G GrH CO co CO a. re CO CO COa; •H •H ■H •H •H •H •H •H■p p P P P •P P -P P

•H •H •H •rH •H •<-l •H ■HrH rH rH rH rH i—1 rH

Q> 0) a; CU a; 1) OJ■P P P -p P p P •P

a; <D CU 1/ GJ 4J (DS*J fed « «

cR «J>J <0 to O VD ON r -CO f Ln r - o

» •• * «. *.(X CJN *— kn uj cc f<N

> T— T— t— r- CM ■r-

gCO M X X X■p •H •rH •H •H •rH •H •H •rHCO 00 CO OS CO CO CO CC COp. ,n ,a 10 P p p p p p p ■PCO C a; a> c A/ Q, o C

« bti bd X Nd

,— N

at

>> CO O VJ r-- O fo inU •> « « •> » « »>a> e' LT\ to CM LT\ LA t\J o> er* O'' cr> 0^ ON CO cnoo<D«

c l_P U"\ ON U \ lp. ir> lTv UN

rH••

rH••

c& rH CO rHG co G G CO G

G <H c U G rH <L>a> fH O JO <L O £3p 4J JC CO P € £CO P P u CO P -P

ll J* G CO * G CO•a <L) •*-t ft rH ft <L> •H ft rH fto CO o Cl o•p U M G G rH U c G rH0) CD CO V •H CO CO <LJ •H

XJ -a 1 bo P •cJ '■0 1 WJ Pc g 3 G GCO CO <f-V u ,Q CO <0 D ,Q-p •p p •PCO CO 1 i 1 CO CO 1 ( 1

c rH•H o■p hC CO(0 CO CO

ft p.•H

K S5

57

pcoSi.c•Hu-p

TO to■d T3roA

CD

c •Hcc -Pft 0) TO d)

£ CQ

'H G E(Q ro

f i •rH rHCO P ro

iH •HrH

•a

0> rH+» O(D COJ* ro

aa •Hro

•dC

cg roCOp

T3

Cl gft •Ho b£)p roV ft* •H

C

be bC bO bO bu bU bO bu« c G G C c C Cro cr ro ro ro ro ro ro

Jh U u£ 3 3 p 3 p p 3ro

•H,* id A A A A

•P G G C c c c C C•H ro ro ro ro CB ro ro rorH •H •H ■H •H •<H •H •H •rHa; ■P ■P P p P P P P

■p •rH •<H •H •H •rH •fH •H •Hu rH rH rH rH ~H rH rH rH

w (U a; QJ P4) 0) a, 0) <Lr (L> c; <D'sd « * W

—

CT in o X CC vo T—Lf» C\i cn o O'* VO o o

•> » *■ •b »<- t— CO 0^ •sj- cn o * c—> T~ r "

w

g 1ro X A

■p ro r* ^ • ro Mro •d •H •H •H •H TJ •H ■H •H •Hf t •iH ro rc ro ro •H ro ro ro COl)+>

P X> f i x> f i P x» rOi g c c c G c c GiT ro ro ro ro ro ro roP p -p p p p -p •prH ro ro ro ro ro ro ro•H f t f t P. f t Q- ft f t f tW V a; u tD t; u CJro •p p •p p p p -p p

3h d) i> o «j t ' t> cW « X «

>> vO K \ C\l U"\ CO in• * a» at

0) tn CO CN/ C\J V-0 K>> CO CO O ' 0-> cn cn cn cnooa

«

g in LA tn in LTN LT\ lt\

.. ..rH rH(1 rH ro rHc ro rH C C ro rH G(4 g O o G o 1>4> S-- .G X) XI X34. P QJ P ro p 0) -p roT3 W P X3 U CO P x ;O i i G f t ro G f t roP a; •*H ro rH f t •<H ro rH ftt>

hG O

g rH hC O

c rHro ro •H ro ro «; •H'd XJ 1 b£ -P T3 -d 1 bO -Pc c 3 3 C 3 3cc (U O ' 4J X) ro ro 4j x»

p p p -pCO cn 1 1 ;o CO i 1 1

g rH•H o*0 CO

-P ro roro ft f tCO •H •H85

;>3

59

5.2. Perbandingan metode

Hasil u j i F untuk membandingkan % recovery

antsr metode dapat d i l iha t pada tabel Anava diba

wah in i.

Tabel XXX

Tabel Anava hasil penetapan kadar nipagin dalam

sampel murni.

Sumber varias i DF SS MS Fhitung Ftabel

Antar metode 3 I

03 |

30, 6 0,24 3,24

Dalair. metode 16 2075,8 129,7

Total 19 2167,6

Fhitung lebih kecil dari Ftabel.

Jadi tidak adp perbedaan yang bermakna antar

metode.



60

Tabel Anava hasil penetapan kadar nipasol dalam

sampel murni.

Tabel XX

Sumber var ias i DF SS MS Fhitung Ftabel

Antar metode

Dalam metode

3

16

515,1

4156.4

171,7

259,3

0,661 3, ?4

Total 19 4673,5

Fhitung lebih kec i l dari Ftabel.

Jadi tidak sda perbedaan yang bermakna antar

metode.



61

Tabel Anava hasil penetapan kadar nipagin dalam

sediaan kosmetik adstringent.

Tabel XXI

Sumber varias i uF s s MS Fhitung Ftabel

Antar metode

Dalam metode

3

16

465,3

1062,5

1 54,4

66,4

2,32 3,24

Total 19 1525,8

Fhitung lebih kec i l dari Ftabel.

Jadi tidak adg perbedaan yang bermakns antsrmetode.



Tabel Anava hasil penetapan kadar nipasol dalam

sediaan kosmetik adstringent.

62

Tabel XXII

bumber var ias i .OF SS NS Fhitung Ftabel

Antar metode

Dalam metode

3

16

45,8

954,2

15,3

59,6

0,26 3,24

Total 19 1000,0

Fhitung lebih keci l dari Ftabel.

Jadi tidak ada perbedaan yang bermakna antar

metode.



BAB V

PEMBAHASAN

Untuk analis is kuantitat i f dengan menggunakan

kromatografi gas diperlukan adanya zat standar sebagai

pembanding. Dalam percobaan in i , telah dilakukan u j i

k u a l i ta t i f terhadap nipagin dan nipasol standar dengan

menggunakan pereaksi-pereaksi kimia yang spes i f ik , pe-

nentuan t i t i k lebur dan pengamatan waktu retensi, Dari

hasi l yang diperoleh menunjukkan bahwa nipagin dan n i

pasol standar yang digunakan memenuhi syarat sesuai

dengan yang tertera dalam l i te ra tu r dan e e r t i f ik a t ana

l i s i s .

Dalam penelitian in i k r i te r ia hasil analis is ku

a n t i t a t i f adalah ketepatan dan ke te l i t ian , Sebagai ukur-

an dari ketepatan adalah % kadar yang diperoleh kembali

( % Recovery ) , Hasil penetapan kadar disebut mempunyai

ketepatan yang baik, jika tidak ada perbedaan yang ber

makna pada harga <£ tertentu antara harga yang dianggap

benar dengan kadar yang diperoleh kembali. Adapun seba-

^ i ukuran dari ke te l i t ian digunakan koefis ien var ias i

( KV ) # Metode penetapan kadar dianggap mempunyai ke

t e l i t i a n yang baik jika KV lebih k ec i l dari 3 %. ( 10 )

Untuk penetapan kadar nipagin dan nipasol dalam

sampel murni ternyata untuk penetapan kadar nipagin dan

nipasol dengan teknik standar eksternal menunjukkan

ketepatan yang baik, karena setelah melalui u j i t satu

sampel ternyata tidak ada perbedaan yang bermakna pada

= 0 , 0 5 antara harga yang dianggap benar ( 100 % )

dengan kadar yang diperoleh kembali, Adapun k e te l i t ia n

nya adalah kurang baik. dimana harga KV lebih besar

dari 3 %• ( l ihat tabel XVII )

Pada penetapan kadar nipagin dan nipasol dalam

sampel murni dengan standar internal - napthol, euge

nol dan b u t i l paraben hasilnya adalah sebagai berikut :

kadar nipagin dan nipasol dalam campuran dengan ketiga

macam standar internal tersebut ternyata menunjukkan

ketepatan yang baik, karena tidak ada perbedaan yang

bermakna pada X = 0 , 0 5 antara harga yang dianggap benar

( 100 % ) dan kadar yang diperoleh kembali, dan k e t e l i

t ian untuk penetapan kadar nipagin dan nipasol dengan

ketiga macam standar internal tersebut kurang baik ,

karena diperoleh harga KV yang lebih besar dari 3 %•

( l ihat tabel XVII ).

Untuk penetapan kadar nipagin dan nipasol dalam

sediaan kosmetik dengan teknik standar eksternal dipe

roleh hasi l sebagai berikut ; > Recovery nipagin dan

nipasol mempunyai ketepatan dan ke te l i t ian yang kurang

baik, karena terdapat perbedaan yang bermakna pada JL =

0 , 0 5 antara harga yang dianggap benar ( 100 % ) dan

kadar yang diperoleh kembali. Harga KV yang diperoleh

lebih besar dari 3 %• ( l iha t tabel XVII )



65

Pada teknik standar internal dengan ketiga macam

standar internal yang digunakan tersebut memberikan ke

tepatan yang baik, tetapi untuk ketelitiannya kurang

baik, karena harga KV lebih besar dari 3 ( l ihat

tabel XVIII )

Dari hasil percobaan yang diperoleh, ternyata

untuk penetapan kadar nipagin dan nipasol, baik dalam

sampel murni maupun sediaan kosmetik a&stringent dengan

teknik standar eksternal dan standar internal nap

thol, eugenol dan but i l paraben mempunyai ke te l i t ian

yang kurang baik. Hal in i kemungkinan disebabkan karena

var ias i volume penginjeksian. Dalam l i te ra tu r disebut-

kan bahwa kesalahan karena ver ias i volume pengin jeksian

dapat mencapai 5 - 1 0 %, ( 10 )

Dari hasil percobaan dan analisa data ternyata

bahwa metode standar eksternal dan metode standar in te r

nal tidak ada perbedaan % Recovery.



66

BAB VI

KESIMPULAiJ DAN SARAN

Berdasarkan hasil percobaan dan analisa data dari

hasi l penelit ian yang telah dilakukan in i dapat disim-

pulkan hal-hal sebagai berikut :

1* Metode penetapan kadar nipagin dan nipasol dalam sam

pel murni dengan metode kromatografi gas melalui tek

nik standar eksternal dan standar internal - nap

thol, eugenol dan but i l paraben ternyata mempunyai

ketepatan yang baik, tetapi ketelitiannya kurang ba

ik.

2. Pada penetapan kadar nipagin dan nipasol dalam sedia

an kosmetik adstringent dengan metode kromatografi

& s melalui teknik standar eksternal mempunyai kete

patan dan ke te l i t ian yang kurang baik; sedangkan de

ngan teknik standar internal (j> - napthol, eugenol

dan bu t i l paraben mempunyai ketepatan yang baik ,

tetapi ketelitiannya kurang baik.



Berdasarkan hasi l-has i l penelit ian in i disaran-

kan untuk dilakukan penelit ian lebih lanjut untuk pene

tapan kadar dengan menggunakan standar internal yang

lain* Juga disarankan untuk digunakan pada sediaan kos

metik yang la in , makanan-minuman dan sediaan-sediaan

farmasi.



63

RINGKASAN

Telah dilakukan penelitian " Penggunaan metode

kromatografi untuk analisis kuantitat i f nipagin dan

nipasol dalam campuran ".

Dalam penelit ian digunakan kromatografi gas yang

dilengkapi dengan kolom OV - 101 dan integrator Hewlett

Packard model 3390 A.

Dari hasi percobaan dan analisa data ternyata

bahwa : metode penetapan kadar nipagin dan nipasol da

lam sampel murni dengan metode kromatografi gas melalui

teknik standar eksternal dan standar internal - nap

thol, eugenol dan bu t i l paraben ternyata mempunyai ke

tepatan yang baik, tetapi ketelitiannya kurang baik ;

sedangkan pada penetapan kadar nipagin dan nipasol da

lam sediaan kosmetik adstringent dengan metode kromato

g ra f i gas melalui teknik standar eksternal mempunyai

ketepatan dan ke te l i t ian yang kurang baik, sedangkan

dengan teknik standar internal £>- napthol, eugenol dan

bu t i l paraben mempunyai ketepatan yang baik, ttrtapi ke

telit iannya kurang baik.

Adapun data yang diperoleh adalah sebagai berikut :

untuk penetapan kadar nipagin dan nipasol dalam sampel

murni dengan teknik standar eksternal menunjukkan ke

tepatan yang baik, tetap i ketelitiannya kurang baik

( recovery untuk nipagin 97*8 %, dan untuk nipasol 95>0 %



69

sedangkan koefis ien var ias i untuk nipagin 12,81 % dan

untuk nipasol 17,17 % ).

Pada penetapan kadar nipagin dan nipasol d .Iam

sampel raurni dengan teknik standar internal p - napthol

manunjukkan ketepatan yang baik, tetapi ketelitiannya

kurang baik ( recovery untuk nipagin 95,0 % dan untuk

nipasol 9 5 , 3 % f sedangkan koefis ien var ias i untuk nipa

gin 9,68 % dan untuk nipasol & , % % ) . Untuk teknik

standar internal eugenol memmjukkan ketepatan yang baik

tetapi ketelitiannya kurang baik ( recovery untuk nipa

gin 93,2 % dan untuk nipasol 82,7 sedangkan k o e f i s i

en var ias i untuk nipagin 11,96 % dan untuk nipasol

28,79 % ) . Untuk teknik standar internal bu t i l paraben

menunjukkan ketepatan yang baik, tetapi ketelitiannya

kurang baik ( recovery untuk nipagin 92,1 % dan untuk

nipasol 9 0 , 5 %% sedangkan koefie ien var ias i untuk nipa

gin 1 3 ,4 5 % dan untuk nipasol 1 3 *0? % )•


sediaan kosmetik adstringent dengan teknik standar eks-

ternal niempunyai ketepatan dan ke te l i t ian yang kurang

baik ( recovery untuk nipagin 85»6 % dan untuk nipasol

92,8 #, sedangkan koefie ien var ias i untuk nipagin 4,59 %

dan untuk nipasol 4*98 % ) .


sediaan kosmetik adstringent deng*n teknik standar in

ternal - napthol menunjukkan ketepatan yang baik, t e

tapi ketelitiannya kurang baik ( recovery untuk nipagin



8 9 ,3 % dan u n t u k n i p a s o l 9 2 ,5 %, se d a n g k a n k o e f i s i e n

v a r i a s i u n t u k n ip a g in 1 1 , 2 5 % dan u n t u k n i p a s o l 9 ,6 8 % )

U n tu k t e k n ik s t a n d a r i n t e r n a l e u g e n o l m e n u n ju k k a n k e -

t e p a t a n y a n g b a i k , t e t a p i k e t e l i t i a n n y a k u ra n g b a ik

( r e c o v e r y u n t u k n ip a g in 98*2 % d a n u n t u k n i p a s o l 9 6 ,3 %

se d a n g k a n k o e f i s i e n v a r i a s i u n t u k n ip a g in 8 ,9 0 % d a n u n

t u k n i p a s o l 1 0 ,0 6 % ) . U n tu k t e k n ik s t a n d a r i n t e r n a l

b u t i l p a ra b e n m e n u n ju k k a n k e t e p a t a n y a n g b a i k , t e t a p i

k e t e l i t i a n n y a k u ra n g b a ik ( r e c o v e r y u n t u k n ip a g in

9 4 ,5 % d a n u n t u k n i p a s o l 9 3 , ^ % t s e d a n g k a n k o e f i s i e n

v a r i a s i u n t u k n ip a g in 9 , 0 4 % dan u n t u k n i p a s o l 7 , 0 1 % ) .



71

BAB. VII

DAFTAR PUSlAKA

1. Aalto, T#R* , e t .a l . ; August. 1953 > p- hydroxy benzoic

acid esters as preservative; J.of The American Phar

maceutical Association: vol. X I I : p. 449 - 456.

2. Lawrence, Car l .A . , Block, Seymor.S. ; 1968; Desinfec-

t&TU S te r i l i za t ion and Preservat ive ; Lea and Febiger;

Philadelphia; p. 421-422, 559-560, 569-570, 637-638.

3. Anonym; 1973; British Pharmaceutical Codex: The Phar

maceutical Press; London; p. 305* 413*

4. Martindale. The Extra Pharmacopoeia; 28 th .edit ion;

The Pharmaceutical Press; London; 1982; p. 5-287,

1290.5. Donato, Sam Joseph; June 1965> Separation and Estima

tion o f Methyl and propil esters o f p- hydroxy benzo

i c acid by Gas Chromatography; J. Pharm.Sci: vol. bk:

p. 917 - 918.

6 . Batchelder, Martin, e t . a l . ; Feb. 1972; Chromatographic

Separation and Determination of Methyl p- hydroxy

benzoate; J.Pharm.Sci: vol . £1; p. 252 - 253*

7. Lach, J.L. and Sawardeker, J .S.; March 1965; Rapid

Method for The Determination o f Mixtures o f p- hydro

xy benzoate esters by Gas Chromatography; i

vol. 5k; p. 424 - 426.



72

8 . Anonym; 1975; The_„Unite_d States Pharmacopeia; 19 th;

Mack Publishing Company; Easton; p. 621-622, 561, 568*

9. Hopp, Eva; Assay o f Parabens in Aqueous Solution by

Gas Liquid Chromatography; 1978; Medd.Norsk.Farq.

Selsk; vol. p. 153 - 157.

10. Skoog, Douglas*A. and West, Donald.M.; i960; P r inc i

ples o f Instrumental Analysis: second edition; Saun

ders College Philadelphia; Holt Saunders Japan Tokyo;

p. 683, 727.

11. Departemen Kesehatan Republik Indonesia; 1979; Farmn-

kope Indonesia: ed is i I I I ; Jakarta; p. 378, 535* 784 -

786.

12* Departemen Kesehatan Republik Indonesia; 1979; Kodaks

Makanan Indonesia tentang Bahan Tambah .n Makanan; Ja

karta; p. 284 - 409.

13. The Merck Index: 9 th ,edit ion; Merck and Co., Inc;

U.S.A.; 1976; p. 5972, 7655.

14. M.Jay, James; 1978; Modern Food Microbiology: second

edition; D.Van Nostrand Comp.; New York; p, 163 - 165.

15. Frazier, W.C.; 1958; Food Microbiology: Mc.Graw H i l l

Publishing Comp., Ltd.; New York; p. 137.

16. Jacob, Moris.B. Ph.D.; 1962; The Chemical Analysis o f

Foods and Food Products; third edition; D.Van Nostrand

Comp., In c . ; Princenton, New Yersey; p. 168 - 169.

17. Pearson, David; 1970; The Chemical Analysis o f Foods;

sixth edition; Chemical Publishing Comp., Inc; New-

York; p* 36 - 37.



73

18, Clark, E.G.C,(Ed); 1971; Iso lat ion and Iden t i f ica t ion

o f Drugs in Pharmaceuticals, body f luids and -post

mortem materia l: The Pharmaceutical Press; London;

P. 59 - 83.

19, Pecsok, e t . a l . : Modern Method of Chemical Analysis;

second edition; John Willey and Sons; New York; p.

85 - 106.

20, Willard, Hobart, e t . a l . : Instrumental Method o f Ana

lys is : s ixth edition; The Mac Millan Comp,; London;

p, 1078'1095.

21, I .K .K o l t o o f f , et._al. ; Quantitative _ChemleaI Analys is :

fourth edition; The Mac Millan Comp,; Coller Mac

Millan Limited London; p. 1076 - 1079.

22, Heftman, Erich; Chromatographic A Laboratc> ryHandbook

o f Chromatographic and Electrophoretic Method: third

edition; Van Nostrand Peinhold Comp.; New York; p.

189 - 226,

25. Daniel, Wayne.Vi.; 1978; B iostat is t ics A Foundation

for Analysis in The Health Sciences: second edition;

John Wiley and Sons; New York, Chichester, Brisbane,

Toronto; p. 170.



7k

Gambar 1 : Kromatogram nipagin dengan standar eketer-

nal dengan berbagai konsentrasi.



75

Gambar 2 ; Kromatogram nipasol dengan etandar e x t e r

nal dengan berbagai konsentrasi.



sta

nd

ar

76

X r -a? .5u* <.£.' *1 .y.

V, .V *7* — «,1 r \ i / j r \ u , ~ & ojO' .s. .5.

C o. ■»- .»

f- Y- 1 "*1 ^ ft/ 01. u j * ~ &•z 1I1 ~SSQSi8

«V ►— vg f*v <.j «Z Ctf • • . m a* — ctj < r.rs s ce* —:

' —4 <’4

uj X > i l&:Ss?e&

« fXJ •* I» V'l'X' ~a 6j

Gambar 3 : Kromatogram nipagin dan nipasol cialam sampel

murni dengan metode standar eksternal.

sta

nd

ar

sta

nd

ar

77

Gambar k : Kroraatogram nipagin dan nipasol dalam

sediaan kosmetik dengan metode standar

eksternal



75

inUi v l rt ' C*

%?bf

s £ * $*% •? V<J

*■ .*t.. r t~> i s* •£ . *+> ■* • '

6. ft OCa > *• ♦

5 ft:*: 5.•J- » .« T "t ' - 'i3 f> — r-- — •t>w

.*r t- f< J- «“■*1 *ry j •» -* 'ySi

co

CSJ

f •£ i > v.>r. a

>■ it iV L. ( - c« .*- t-S ■- ■

r »■? fjrN e2 ESS? 5 '*• —

s X — — \ T r t

£§££2S58* * A. f>- W2K

jv1 CK S

Gambar 5 : Kromatogram nipapin dengan stanaar internal

napthol denppn berbapai konsentrasi.

79

Gambar 6 : Kromatogram nipasol dengan standar internala- napthol aengan berbagai konsentrasi.



sta

nd

ar

80

n

Gambar 7

r c.; fta »:<■ a*

r o*'. *. .p *x i* *

a . X ’■£ V •

ix S. f**> *5* «•IJJ ,*•» —

s ^ x»

ul X > •*-a . 4aj vj :«• >:- <.■> :■«• '•* ►-

5i||g -5&sl

«*> — ^*•*

«a: tv? ■fUJ -S' - • • *

,v a . — r> cu i l c* t* r*» «r *•■» <5*a •:*? -a* -* X

S •?. *• — *■■* ■ * r » •■- * j

x s* »*. S'

• 2 r s i s. l-J .r* '7> LlaJ + X' C >•" - > ■ J >V

y ; •=■

Kromatogram nipagin u^n nipasol dalam sampel

murni Ueng.an metode stanaar internal nap

th o l*

sta

nd

ar

sta

nd

ar

81

a r>. *• » 'X‘ uj « . to *r in cc + — * if.11 UJ W ;.Cis f-i S' *

V

. V c , a> r*. vj <x c? o j 10 <.j w v r\ ▼ r-v

CL CO >- CO »- —

S- Cm . Ci!( > I

h - I

<£ 11/ CO ‘>£i*3 fO <0

v . I Oi •— . *

; - i,-, « . (ij«x a ■ • » rv <••■ iu co r - i'V *■

T. fv x •£• ® ®<1 .S ' • » = ' 'S '

LU j£l CO l‘* •& . CXl t f l «5 CO5 - trt !~

U J * V i * r '• >^ -f .5% f f i —■

« V r != ^ S 5

— « •?. r -.|— oJ C*' “ O'‘X CE • _•

• *r »£. •» ('j i K j i - m ujviaiW' a: ■ ■ i- r - .5> « ' ■*■

ix r- -I- oc- •*.U1 «• 'X. >■> .£ i -r .2. W ifc " I ILJ — Cl U‘

'■2> (■:■ —i m— K j i--. OJ

Gambar 8 : Kromatogram nipagin dan nipasol dalam


internal f - napthol.

32

Gambar 9

CM

•V • *<z I T K» ~Lu •£> C*? *-• Ox

~ *

U J 31 > J*i . c l 0 5 C«* *- (,*<*- i-

r- is r. o: 5;M i v . p.

•z f-s co

• I C;

£

• t'i w

CO

x «• <\j o,CCi L u<r r — c*

u iC O > U Cu o. co ;>■

 — o —

•X. CO

» I-'.■>• r— I—. -V<1 U •£

A ' ^ CO *<>c v i I ' nUv —* 0? X»

r - ■* i/> ^s : c :« <rs » -Si ~

iu 7 Ja w Cl. c* ;►K - H

C£ r\ <!• f>V ^ <x m\ :*••CjC •* f**/ —« u j

<j5'•’i »

f'V

.V-X d ' < . '

: Kromatogram nipagin dengan standar internal

eugenol dengan berbagai konsentrasi.

83

. V tt* ’-0 'C <t 0 ^ 1 v? U< IT, © I'

<r r- ■*■ 5.-' ui .x. ••; a. ■&«-</) •*' <C •?■> IQ<?!$&!

» *• L*-.v t~ ?u *r •?.< l i Zu j a - — o j

. i l I'd Cu l »ft. a. i . 5 m f— l-

<x rs «■ it.U J is . \ f i .J, Cl.' + IT> i n r t lu ’■•> 9 ,

iN w «• in l<5 —

« ^ C.J ■ I— ftj ■«- C*i

« ed • •

CO

CM Vs.

<X U-< K"' '71 i n r-s - < * '

1 <0 —■ ©

u l X t t ^ n. a . co l\.> • v"j i - ►—

: lu r% <oF5 « v

-~4- JS

S.V&F.' ® C >'J

t Sf W *' - O'. ^ C<>s £ ,< 5 , _O t ■ ■<X .*> .I> S>

U J U i i * 05SrfeJS3-

* m f s . C. W ' r-s ut

« . r s u"> fs‘ r- >\J f ffi« Crt • - •IU i£i •” OJ

Gambsr 10 : Kromatogram nipasol dengan standar internal

eugenol dengan berbcgai konsentrasi.

sta

nd

ar

84

Gambar 11 : Krom atogram n ip a g in dan n i p a s o l dalam sam

p e l m u rn i dengan metode s t a n d a r i n t e r n a l

e u g e n o l.



sta

nd

ar

sta

nd

ar

35

P

.'<• — eg *x OJ — OJ •> Lu — IT1 V ' to

I/O TO f> '.i'T. f ' rs £i cm \ .» ® &■ —I S' S' «■ <s>

ui a: a. ;»■ a. a. a. oi cv > ov i— * • i—

ir> » « * m•V I— O J — U> 0 .• so : - •uj * — —

« fN '7 . CO IT,uj (•-! o . « rs.at ■ . • .I f S ' S © <*•

•V

s ,1 'S ' 'S ' S '

UJ * Q . CL >

<X rs <s> * iv uj * in * '® ic t v t S

»•> CN lil fO — — —.

f*V rs •?-. — <£ — C i ftl uj — ir- r . ir>

:£'s"

r - 'i a- ^2: f ' e* O', oj s * o * “Cm.X .* •* .S'

u j x :*-:■• fc- o. co cc. :»• i- >■ <Si >-•>-»-

a. a. m o. o.>- tft r- ►- v-

<r rs «r. ® «•U i X i ( o « n« t Hnt’■**58

ir> rv ifi v ;•«• f - oj — m ff-i <itt

Gambar 12 : Kromatogram nipagin dan nipasol dalam


internal eugenol.

86

O J

!Z. 3 • » ( « • ! • UJ —•IT' S' fi-' C t • • •<r <:■:> ■£' «■ —

f~ '5' U*J —

<? .S' ; Cu y.i> l. i-1 Cii :►%- <s> >- >- » - 4 -

sr ,-s «• .-j y u j ■ ' — r< &: + t i o

• CO IT;

V

.-■r 'X' — c j <r in f-v •-UJ "ai — »M

C **■ ■* fiS W ^ f N•«. • » 03 —

t u c e a aO . 63 M CLy-uj -s. n Cik * %* *s*<Z uj ir , >s)

fS Ij-> —

f , — O j >- >'u V <•.! u ! ~ u» ® — f'>

.V * n c . ■ ? , « . c w v e *- o j fx * 3 , oj

a: « • «■ c> —c .

t ?•. <vi -S’ .u t . t-v ?-5 Cl ct * j i«. J . S u; •*)

S ', (V J-.C'.'

V

• V •*• CO i > « r < t 05 r N o . — U i O J « ' O.' & £ • • • • T CC * • <£' —

£«'■?. A ' • .s. * 1 ) ~ ( * : ■ ■ ■ ■ a •» x> s> -x.

t*J CO * • O j I a. &. (ft > i > . 351--

u •*> iUL f f >£> a .■ x < * *•-• -J>fj n C-i

T i

■s«, r->

Gambar 13 : Kromatogram nipagin dengan standar internalbutil paraben dengan berbagai konsentrasi-

87

OJ

♦V W"> C*J V<z ~ c • Ou wU.

a : c o — r < **; * ™! • ’c: -S' s. *

lU X' Cu > (u £t. - - tti f - Ii- > O v- K- •—

«X r \ v> *s» *S' ..j •*■ r*-> .7-. •:••

*r c\ r's —■* tu — i.o *•

<:w tr. Oi

»S> — »V r»>

X CO — # f v s. ,r. *- -« i t « . . . x *i X' *x*

v

ui ;a <s> i i <L'. iXt C/i iii I:- o'j *—

<1 IN Cy «• *. uj ix< * :-. ft i i 5' i- irt « w ■» 'tf C.'

f'-, 1 0 u*< t 'f .'-• f - O J '"jj f V C ii <X .V • • ■ •u j « • — o j f->

2* &,v- *><x oa is> :■> rsL-j f"*. il* n —<r « .* •=.' —

C —' « r\ ■* §! f'J '"l :i"' sc . . . .

* •» -S' ‘ff.

uj x a. :■-i. C£» as iX !■- jiT !£? *“ “n. fs c> © <s, ui ® i7. r-, ct -r — oj r» '5 it r*> r \ in

«

"7 Vii v . |

u : — »r r f !•■>

. '• l/V O J f<J•r ff. .r. rx f>Ul l/l * f-J — tc . . . .•X CO ’S ' S ' ~

P5 «• c . v T. — 'T W

uj re. i . ft. ic>w . CL. M Cu Cl.

^ s - *• . V -

ix rs ’j? ® -S'afsls:

r^ i'. f*> rr» .v h* co*X CtCu* - -.fo

Gam'bsr 14 : Kromatogram nipasol dengan standar internalbutil paraben denggn berbagai konsentrasi.

sta

nd

ar

9 , >\J ■} ,<1 1.0 a . —■_K If. (-• — CO

r— <0 *• X <•*> 'T, * Si

j J £0 <j- > -■X. il, CO L . >■ .3 s . >- i-

* ?! '.o or,-.J — »«1

Gambar 15 : Kromstogrsm nipagin uan nipasol dalam sam

pel rnurni aengan metode atandar internal

butil paraben.

sta

nd

ar

sta

nd

ar

89

•v «t\ in in —<2 Tv *7*. —uj k ,

r \ o-. x n rs, ro *1 s. * «x» — C'J

<r rv *< r* a-*6 * I n u j i • •& • » i i^i r*\

*v k- •X tv «

.S’ — ♦ •S' V« i r\ o j ui w •» oj v

tr ’S ' r > ■?» 7 . v <■'. OJ MJ \ is. c& », —C«i • - - -- I «3» 'X' .j.

U l t t L O . a. co co CD ci. > Oi >- >- s-

«■: •*• od ~t i>S l W p M ‘5. r*> TO V 171

<t a.-s

Cl<-J -• '.■• I IJ5

* f> •„ _• '.frid S. ro ; c ■••.; t- r , .;• -v r . J -r v>

' i f U T - {•-, :

• r*'.- .■ •:•;> mj - i

L-sS&KgjS> . V 'O '? < — r ij

*X 1. -t- *. i.

.» r . *••cit -iS C — T'<v - r -V <•- X' V

Gambar 16 : Kroma togram nipagin dan nipasol dalam


internal b u ti l paraben.

90

LAJtfPIRAN I

Uji korelasi (r) antsra konaentrasi dan lua3 puncak kroma

gram nipagin dengan metode standar eksternal.

I K o n s e n t r a s i ! L u s s p u n c a k ! 1 I

No. ! ( x ) ! K ro m ato g ram ! (x - 5 )2 ! (y - y ) 2! (x-- x ) ( y - y )i ; ( y ) \ 1 J

1 . ' 101,0 ! 0,009 ! 179945,6414,356.10“ 3 27,997

2. ! 2f;2,5 ! 0,029 ! .74365,2 9 ’ 2 , 116.10-3 12,544

! 505,0 ! 0,063 !

1OV,nT'3*OO

0,242

4 . ! 757,5 ! 0,113 ! 53963,29! 1,444.10“ ? 8,027

5 . ! 1010,0 ! 0,161 ! 235031,04! 7,396.10“ 3 41,693

! I = 2626 ! L = 0,375 ! 543713,3 10,015456 ! 91,303

! x = 525,2 ! y = 0,075 ' t 1

T t ( x - x ) ( .v - y ) 91,303. _ ^ ,996T = ______

I (x - x ) ^ . l { y -31,6'71

y ) '" .

b = Z (X -i ( x - x ) ?

. 2 1 a 1 Q 2 * 1 , 6 7 9 . 1 0 " 4 543713,3

y - y = ^ ( X - X )

V = 1 , 6 7 9 . 10‘ 4 X - 0,013

Ilorga r tabel pada = 0,05 dan d,£ = 5 ~ 2 adalah.

0,R78. Kerf,a r hitu.n^ adalah 0,996 berart i r hitung l e -



91

bih besar dari r tabol. Jadi dapat disinpulkan ada kore

l a s i l i n i e r antara koncontraoi dan luns puncak krona to -

gram.



92

LAj.J>IRA1? II

Uji korelnsi (r) nnt^rn konacn1;mai dan luas puncak krona

fcocr«m ni oorjol dcnvon netodo ottind*r o internal.

Konsentrani! i,unn ouncok!

lio. ( x )i

Kro *ot o^rcm

( y )

, (x - x ) 2 ! (y - y ) 2 ,

! ! !

(x -x ) ( y - y )

1 . 105,4 ! 0,008 195965,582!3,025.10~^ 24,347

2 . 263,5 ! 0,024 80905,776! 1 ,5?1. 10"-3 11,099

3. 527,0 ! 0,057 444,36613.6.10~5 ! 0,126

4. 790,5 ! 0,094 58767,456 r9,61.10- 4 ! 7,515

5. 1054,0 ! 0,133 255955,046!4,9.10~3 ! 35,414

1 = 2740,4 !

x = 548,08!

L =

y -

0 , 3 1 6

0 , 0, 06 3

59? 11 a ,326! 0,01 0443 ’•

! ! !

78,501

r a £ (x — x) (v - .y)

1 (x - x ) 2. £ (;/ - y ) 2

= 78,501 78,^35

0,998

D =£ (x - x ) (y - y ) _ 73,501_____

£ C * - 5c )2 “ 5921 1 3 ,2 2 6

=. 1 ,326.10-4

y - y * b(x - x)

y B 1,326 .10“ 4 x - 9,675 .10“ 3

ifnr^a r tobel nndo .£ = 0,05 don d . f = 5 - 2 adalah

0,870.



93

Harga r hitung adalah 0,993 berart i r hitung leb ih besar

dari r tabel, Jadi dapat disimpullcon ada kore las i l i n i e r

antara konsentrasi dan luas puncak kromatogram.



9k

LAMPIRA1J III

Uji korelasi ( r ) antaro konsentrasi don luas puncak kroma

togram nipe3ol dengan rnetode standar internal £ - napthol

!Kon9entrooi!Perbandingnn ! ! 1

No • ! ( x ) t

!Luns(

puncak

y )

, (x - x ) 2 , (y - y ) 2 ,

! \ \

( x - x ) ( y - y )

1.! 51,5 j 0,022 !467 85,6910,018 ! 28,768

2. ! 128,8 ; 0, 066 ! 19321,0 ! 7,9? 1. 10~? 12,371

3.! 257,5 1 0,151 ! 106,09!1 , 6 . 10-5 ! 0,041

4.! 386,2 t 0,222 ! 14018,5614,489.10"? 7,933

5.'- 515,0 1 0,315 ! 61107,8410,036 ! 39,552

! 1 =1339

!x =267,8

! £ =

! y *

0,776

0,155

! 141339, 18!0,O'j,<,426 !

! ! !

88,665

r = 1 (x._-

i (-/. - X)2 . £ (,v - .y) 2

£ (x - x)2 141339,18

88_, 663. = 0,99389,304

= 6,273 . 10-4

y - y = b (x - x )

ty = 6,273 . 10“ AX- 0,013

Horr.n r tobol podn 0,05 dan d . f 3 5 “ 2 adalah

0,378. llnr.^o r i.i.bunr. odflloh 0,993 bnrorti r hitung i e-

95

b ih b e s a r d a r i r t a b e l . Jadi d e p a t d ia im p u lk a n a d a k o r e l a

s i l i n i e r a n t a r a k o n s e n t r Q 3 i d a n l u a s p u n c a k k ro m a to g ra m .



96

LAMPIRAN IV

Uji korelasi (r) nntara konsentrasj. dan luas puncak kroma

toaram nioasol denron. roetode s bandar internal - napthol

IKonsentrasi Perbandingsn! j t

Ho. ! ( x ) i

Lues(

puncak !y )

( x - x ) 2 ! (y - y ) 2 !5 i

( x - x ) ( y - y )

1. '• 51,2 0,035 ! 46225,0 10,017 ! 27,735

2. 0,072 ! 19099,24 !B,A.'/l , 10- 3 ! 12,714

3- ! 256,0 0,130 ! 104,04 '■(>, 76. 10-4 ! 0,265

A . ! 384,0 0,243 ! 13876,8416,241.10- 3 ! 9,306

5. I 512,0 0,332 ! 60417,64 10,028 ! 41,294

! I =1331,2 I = 0,82 ! 139722,76'.0,060381 ! 91,314

( x = 266,2 y = 0,164 ! 1 1

r * j ,(x - x ) (.v - y )

>. (x -■ x ) 2 . 1 (y - y ) 2

= o,99491,851

b ** * ( x - x ) ( y - y )

£ ( x - x ) 2

- s 6,535 - 10"4139722,76

y - y * b ( x - x )

y * 6 , 5 3 ? . io * 4 x - 9 ,9 6 ? . 1 0 ~ 3

Hor^s r tabel psda ^ = 0,05 dan d . f * 5 - 2 a d a ls h

0,878.



97

Harga r hitunc adalah 0,994 berart i r hitung lebih besar

dari r tabel. Jadi dapat disirvtpulkan ada kore las i l i n i e r

antara konsentrasi dan luas puncak kromatogram.



98

LAMPIRAN V

Uji korelasi (r) antara konsentrasi dan luas puncak kroma-

top.ram nipafcin dengan rnetode standar internal eugenol*

!Konsentrasi Verbandingan r i t

I\To. ! ( x ) !Luas ■ ! C

puncak

y )

! (x - x ) 2 i

! (y - y ) 2 !J I

( x - x ) ( y - y )

1. ! 51,5 ! 0,020 ! 46785,69 !0,020 ! 30,498

?• ! 128,8 ! 0,063 ! 19321,0 !9,604.10~3 ! 13,622

3. ! 257,5 ! 0,161 ! • 106,09 ! 0 ! 0

4 . ! 336,2 ! 0,237 !14018,56 ! 5,776.TO- 3 ! 8,998

5. ! 515,0 ’ 0,324 !61107,84 !0,026 ! 40,294

!£*1339 ! z = 0,805 141339,18 !0 ,06138 ! 93,412

!x= 267,8 ! v = 0,161 t I 1

1 (x - x ) (y - .V) . 93,412 .. ,r = 1" ..... ..... “ '

\f I (x - x)^ . £ (y - y) ■142

, £ (x - x ) (y - y) 93,412 - = 6.609 . 10~4t l x - x ) 2 141339,18

y ~ y = b ( x - x )

y * 6,609 . 10~4 x - 0,016

Harga r tabel pads •£ = 0,05 dan d . f * 5 - 2 adalah

0,878. Har^a r hitung adalah 1,003 berart i r hitung lebih



99

besar dari r tabel. Jadi dapat diaimpulkan ada kore las i

l i n i e r antara konccntrani dan luaa puncak kromatogram.



100

LAUVIRA1I VI

Uji korelo3i (r) antarn koncentraai dan luas puncak krona

tor.roin ni.oasol deriran 'netode 'Uandar internal eugenol.

!Konsentraai ! Porbendin&on! < 1

No. ! ( x ) 1

! I.ivaa ! (

puncak !

y ) *(x - x ) 2 ! (y - y ) 2 i ( x - x ) ( y - y )

I T

1 . J 51,2 j 0,030 ! 46225,0- !0,021 ! 31,39

2. ! 128,0 ; 0,083 ! 19099,2418,649.10- 3 ! 12,853

3. ! . 256,0 1 0,131 ! 104,0416,25.10 '4 ! 0,255

4. ! 384,0 1 0,257 ! 13076,04!6,561.10- 3 ! 9,542

5. ! 512,0 1 0, 3 6 1 ! 60417,64!0,034 ! 49,473

! I =1331 ,2 i Z = 0,88? ! 139722,7610,071 ! 99,513

! x= 266,2 ! y * 0,176 ! J 1

r s I (x - x) (:/_ _-_vJ__________ _ 9J2,ag.J3 s 0 ( 9997 7 ” 99,601

£ (x - x) . £ (;/ - y )

b = s i * . . 11 = = 7 ,1 2 2 . 1 0 "4I ( x - x ) 2 139722,76

y - y = b ( x - x )

y = 7,12? . 10"4 x - 0,014

Jla rg a r t o b n l pnda *C a 0,05 dan d . f = 5 - 2 adalah

0,878. Har&o r h i t u ^ n rta la h 0,999 b e r a r t i r hitung lebih

101

besar dari r tabe l . Jadi dapat disinpulkan ada kore las i

l i n i e r antara Iconaentroai dan luas puncak kromatogram.



102

Uji k o r e l a s i ( r ) a n t a r a k o n s e n t r a s i dan l u a s puncak kroma

to g ra m nipagin d e n g a n n e t o d e s t a n d a r i n t e r n a l bu t i l para-

ben.

LACTIRAU VII

'K o n s e n t r a s i ’ P e r b a n d in g a n T

No. t ( x ) 'L u a s p u n c a k ( x - x ) 2 ' ( y - y ) 2 ( x - x ) ( y - y )» t ( y ) i

1. t 51,5 t 0,040 46785,69’ 0,039 42,611

2. < 123,8 i 0,108 19321,0 '0,017 17,931

3. 1 257,5 i 0,229 106,09 '6 ,4 .10- "’ 0,082

4. < 386,2 t 0,326 14018,56 '7 ,921.10"3 10,538

5. 1 515,0 i 0,4-83 61107,34'0,06l 60,811

♦ Z = 1339 * £ = 1,186 141339,18 '0 ,124985 131,973

f X = 267,8 *y = 0,237 t

£ (x x). C

£ ( x - x ) 2 . £ ( y - y ) 2

= V J ,.i 2.7.2 = 0 , 9 9 3132,911

b = S (x - x ) (y - y.) = 1.31 973 = 9 ; 337.io“ 4

£ ( x ~ i ) 2 U1339.18

y — y = b ( x - x )

y = 9.337.10"4 * - 0,013

H a rg a r t a b e l pad a <L = 0,05 dan d . f = 5 - 2 adalah

103

0,878. Harga r hitung adalah 0,993 berart i r liitung l e -

bih besar dari r tabel, Jadi dapat clisimpulkan ada kore-

la s i l i n i e r antara konsentrasi clan luas puncak kromato -

gram.



10*4

LAMPIRA17 VIII

U ji kore las i ( r ) antara konsentrasi dan luas puncak kroma

togram nipasol dengan metode standar in terna l butil para -

ben.

Konsentrasi Perbandingan »

Ho, ( x ) LuasC

puncak

y )(x - x ) 2? (y - y ) 2 ' ( x - x ) ( y - y )

f

1. 50,8 0,044 45624,96 T 0,043 * 44,429

2. 127,1 0,114 18851,29' 0,019 1 18,947

3. 254,2 0,240 104,04f -p* • o1

0,122

4. 381,4 0,370 13689,0 * 0,014 1 13,306

5. 508,5 0,492 59584,81 0,058 1 t

58,584

£ =1322 £ = 1,26 137654,1 f 0,134144 1 135,888

x = 264,4 y = 0,252 i

r = z U - . . 1 ) _______________________ = 1 3 5 , 1 8 8 = 0 > g g g

— — 135,986U ( x - x ) 2. £ (y - y)

b. = £ fr -■ X . )■ j y . I = .1 3.5 > 8 8 S _ = 9 i 8 5 7 # 1 0 - 4

l ( x - i r 137854,1

y - y = b ( x - x )

y = 9,857 . 10“ 4 x - 8,619 . 10-3

Harga r tabel pada = 0,05 dan d . f = 5 - 2 adalah



105

0,878. Harga r hitunc adalah 0,999 berar t i r hitung le -

bih besar dari r tabel. Jadi dapat disimpulkan ada kore

la s i l i n i e r antara konsentrasi dan luas puncak kromato -

gram.



106

LAIJPIfUK IX

Uji t dari kadar rata - rata nipagin yang diperoleh kemba

li dengan kadar yang dianggap benar dalam sampel raurni de

ngan rnetode standar ekcternal.

Sampelf Ilipagin da lain fo 1 C x - 5 ) 2

1. ' 102,8 25,0

2. ' 97,0 0,64

3. 104,8 « 49

4. 1 76,5 453,69

107,8 r 100,0

» x = 400,9 1 = 628,33T x = 97,0 i

S = [ S.-* .- .* j .2. = (— P-2.Qj.3.3_ a 12,53\ n - 1 \ 4

t „ .( x = 0 , 3 9 33 12,53

t tabel pada <£ = 0,05 d . f = 5 - 1 adalah 2,776

t hitung leb ih Icecil dari t tabel 0,05 ( 4 ),

maka Ho diterima. Jadi tidak ada perbedaan

yang bermak no antara kadar rata - rata yang -

diperoleh dengan kadar yang dianggap benar.

107

LAJ'/lPIRAIT X

Uji t dari kadar rata - rata nipagin yan^ diperoleh kemba

li dengan kadar yang dianggap benar da lam sampel munii de

n^an rnetode standar internal ^ - napthol.

Sampel' Uipa^in dalam % ( X - x ) 2

1. ’ 99,0 1 6, 0

2. * 99,4 19,36

3. ’ 97,2 4,84

4. 1 78,7 265,69

5. 1 100,7 32,49

x ;= 475 =338,38

x - 95,0

t =

1 ( - X f ..n - 1

( X - M ) . 'J n

s

,3.3,8j_3 8 _ q ( 2 0

4

9 , 2 0

t tabel pada X = 0,05 dan a . f = 5 - 1 adalah

2 , 7 7 6 .

t hitung lobih k e c i l dari t tabel 0,05 (4 ) ,

maka Ho diterima. Jadi tidak ada perbedaan -

yang bormakna antara kadar rata - rata yang -




108

LAKPIRAIT XI

Uji t dari kadar rata - rata nipagin yang diperoleh kemba

li dengan kadar yang dianggap benar dalam sampel murni de

ngan metode standar internal eugenol.

Sampel 1 ITipngin dalam % 1 ( x - x

1. ' 98,5 ' 28,09

2. * 94,2 1,0

3. ’ 93,5 ' 28,09

4. ' 73,8 376,36

5. ’ 101,2 64,0

t x =466,2 T * 497,54

» X = 93,2 »

S - S.2L-JZ. j . -L . ~ ..4.97.|.5,4 „ -j 1 # -j 5 \ n - 1 ■/ 4

t = ( X - ,u ) .vn _ ( 9h 2 .-JOO_.ld5 =1>366 3 11,15

t tabel pada d = 0,05 dan d , f = 5 - 1 adalah

2,776.

t hitung lebih kec i l dari t tabel 0,05 ( 4 ),

maha Iio diterima. Jadi tidak ada perbedaan -

yang bermakna antara kadar rata - rata yang




109

LAf.IPIRAl-J X I I

Uji t dari kadar rata - rata nipagin yang diperoleh kera-

bali dengan kadar yang dianggap benar dalnm sampel murni

dengan rnetode standar internal butil poraben.

Sampel jfopsgin dalam % T ( x - x )2

1. 102,3 114,49

2. 88,9 ' 10,24

3. 97,0 9 24,01

4. 72,0 f 404,01

5. 99,8 59,29

x = 460,5 ' » 612,04

x = 92,1 t

3 = / IJLZ-JL-I2 == j = 12,37V n - 1 V 4

t * L x " ^ n = ( 92,1 - 100 ) . f l 1j43 S " 12,37

t tabel pada *£ = 0,05 dan d,f = 5 - 1 adalah 2,776

t hitung lebih k e c i l dari t tabel 0,05 ( 4 )• maka

Ho diterima. Jadi tidak ada perbedaan yang bermak-

na antara kadar rata - rata yang diperoleh dengan

kadar yang dianggap benar.



110

LAi.iPiiMir n i l

Uji t dari kadar rata - rata nipasol yang diperoleh kem-

bali dengan kadar yang dianggap benar dalam sampel m u m i

dengan metode standar eksternal.

Sampel ’ Uipa sol dalam ' ( X - X ) 2

1. 93,4 2,56

2. 105,3 68,89

3. 67,5 756,25

4. 102,4 54,76

5- 108,5 182,25

x = 475,1 ’ =1064,711 X = 95,0

s = X-T . i l l = 16,31

t = ( x ~ M ).'ln = ( 95,0 - 100 ,,), .,.{ 5 = 0i6f37 S 16, 31

t tabel pada = 0,05 dan d . f » 5 - 1 adalah 2f 776

t hitung lebih k e c i l dari t tabel 0,05 ( 4 ) , maka



kadar .yang dianr;f;ap benar.



I l l

LAj'.iPIItATT XIV

Uji t dari kadar rata - rata nipasol yang diperoleh kem-

bali dengan kadar yang dianggap benar dalam sampel murni

dengan rnetode standar internal <*> - napthol.

Sampel Nipasol dalam % * C x - x )2

1. 94,3 f 1,0

2. 101,8 42,25

3. 81,6 187,69

4. 100,3 25,0

5. 98,5 10,24

x = 476,5

x = 95,3

’ =266,18

*

s = = 8 ,16 \l 11 -1 \j 4

t - ( x — xx ) . -I n = ( 95,3 - 100 ). J 5 _ 1 (250 3 8 , 1 6

t tabel pada X = 0,05 dan d . f = 5 - 1 adalah 2,776

t hitung lebil: k ec i l dari t tabel 0,05 ( 4 ), maka

l i d

LAJTPIRAM X.V

Uji t dari kadar rata - rata nipasol yang diperoleh kemba

li dengan kadar yan," dianggap benar dalam sampel murni de

ngan metode standar internal eugenol.

Sampel Hipaool dalam % { x - x ) 2

1. 84,9 4,84

2. 99,7 285,0

3. 42,4 1624,0^

4. 85,5 7,84

5. 101,2 342,25

x =413,7

x = 82,7

=2268,02

S *. I , JL-Ll = 12268^02 _ 23,81\| n - 1 V 4

t * C j — _L—U1 s ,L„P? r. I , ."I—1 2,. J./-1.5* ~ 1,6283 23,81

t tabel pada = 0,0? dan d . f == r5 - 1 adalah 2,776

t hitung lebih k ec i l dari t tabel 0,05 ( 4 ) , maka



kadar yanr; dianggap benar.



113

LAMPIRAU XVI

Uji t dari kadar rata - rata nipasol yang diperoleh kemba

li dengan kadar yang dianggap benar dalam sampel murni de

ngan rnetode standar internal butil paraben.

Sam pol T J ip a s o l dengan % ( x - x ) 2

1. 92,4 3,61

2. 96,0 39,69

3. 69,7 432,64

4. 96,0 30,25

5. 97,8 53,29

*

x = 452,7

x = 90,5 •-

559,48

s = I ( x _ - . . x , j j = / 552 ,48 m 11t83\J n - 1 V 4

t - ( x - u ). •' n = ( 90»5 - 100 )» V' 5 u 1,799 5 11,83

t tabel padn = 0,05 dan d . f = 5 - 1 adalah 2,776

t hitung lebih k ec i l dari t tabel 0,05 ( 4 )» maka

Ho diterima. Jodi tidak ada perbedaan yang bermak-





114

LAMPIRAN XVII

U ji t dari kadar rata - rata nipagin yang diperoleh kemba

l i dengan kadar yang dianggap benar dalam sediaan kosme -

t ik adstringent dengan rnetode standar ekstem al.

Sampel 1 nipagin dalam % 1 ( x - x ) 2

1. 1 87,9 5,29

2. ' 89,9 18,49

3. 86,9 1144

4. 80,0 31,36

5. 83,3 5,29

x = 427,9 • = 61,87

x k 85i 6 1

s = if = ^£1*87 = 3j93

t = L * Z.,R ,85>6 = 8,208S 3,93

t tabel pada ■- = 0,05 dan &.f - 5 - 1 adalah 2,776

t hitung lebih beaar dari t tabel 0,05 ( 4 )> maka

Ho d ito lak. Jadi ada perbedaan yang bermakna anta*-

ra kadar rata ~ rata yang diperoleh dengan kadar

yang dianggap benar.



115

LAKPIRAK XVIII

Uai t dari kadar rata - rata nipagin ynng diperoleh kemba

li dengan kadar yan& dian££ap benar dalam sediaan kosme -

tik adstringent dorian metode standar internal ^-napthol

Sampel ITipasin dalan\ % ( x - x ) 2

1. 105,5 262,44

2. 06,5 7,84

3. 91,6 5,29

4. 30,1 841 64

5. 32,7 43,56

x = 446,4

x - 09,3

= 403,77

s = I ( ? ~ x -1- = IQIjII =, 10,05V n - 1 V 4

t 3 ( x - ju )_,Jn = ( 39,3 - _100 J~5 „ 2,385 S 10,05

t tabel pada .4. =* 0,05 dan d . f = 5 - 1 adalah 2,776

t hitunc lebih k ec i l dari t tabel 0,05 ( 4 ), maka



kadar yang dian^gap benar.



116

LAJ.TPIRAIT XIX

Uji t dari kadar rata - rata nipagin yang diperoleh kem-

bali dengan kadar yang dianggap benar dalam sediaan kos

metik adstringent dengan metode standar internal eugenol

Sampel Nipagin dalam f$ ( x - x ) 2

1 . 109,1 118,81

2 . 100,3 4,41

3. 102,9 22,09

4* 39,6 73,96

5. 38,9 86,49

x = 490,8 = 305,76

x = 9 8 , 2

s - I L - , i IQS.fJ-2 = q 74\ n - 1 V 4

t - .L a .£ - L.3QjJL.t , - 0, 461S G, 74

t tabel pada .v = 0,05 dan d . f - 5 - 1 adalah 2,776

t hitung lebih kecil dari t tabel 0,05 ( 4 ) , maka

Ho diterima. Jodi tidak ada perbedaan yang bermak-





117

U ji t dari kadar rata - rata nipagin yang diperoleh kem-

ba l i dengan kadar yang dianggap benar dalam sediaan kos-

metik adstringent dengan rnetode standar in terna l bu t i l -

paraben.

LAIIPIRAIT XX

Sampel Ilipagin dalam % ( X - x ) 2

1. 94,9 0 , 1 6

2. 90,8 13,69

3; 82,8 136,89

4. 98 r1 12,96

5. 105,8 127,69

x = 472,4

x = 94,5

= 291,39

s = \j L . X . - - X ..) 2 = yi £2± > J3. = 8 , 5 4

t = c S - » ) - n = ( 94,5 - 100 ) . 5 = 1>4438,54

t tabel pada A. = 0,05 dan d.f * 5 - 1 adalah 2,776

t hitung leb ih k ec i l dari t tabel 0,05 ( 4 ) , maka

Ko diterima. Jadi tidak ada perbedaan yang bermak

na antara kadar rata * rata yang diperoleh dengan




118

LAMEERAN ' X X I

U tji t dari kadar rata - rata nipasol yang diperoleh kern-

bali dengan kadar yang dianggap benar dalam sediaan kos-

net.ik adstringent dengan rnetode standar eksternal.

Sampel ITipasol dalam % ( x - x ) 2

1 . 96,1 10,89

2# 90,8 4,0

3. 85,6 51,84

4. •96,6 14,44

5. 94,9 4,41

x = 464,0

x = 92,8

* 85,58

s = I " .X -L2 ^ = 4,62N n - 1 V 4

t = ( a ( 92,8 - 100. y.fj = 3i491S 4 j 6 2

t tabel padn '.;-=0,05 dan d . f = 5 - 1 adalah 2,776

t hitung lobil i besar dari t tabel 0,05 ( 4 ),maka

Ho ditolak# Jadi ada perbedaan yang bermakna anta

ra kadar rata - rata yang diperoleh dengan kadar

yang dianggap benar.



119

U M P I R E XXII

Uji t dari lcadar rata - rata nipasol yang diperoleh kemba

li dengan kadar yang dianggap benar dalam sediaan kosme -

tik adstringent dengan netode standar internal ft- napthol

Sampel I'lipasol dalam ?. ' ( X - x ) 2

1 . 105,1 158,76

2. 85,6 ' 47,61

3. 93,4 ’ 0,81

4. 95,9 11,56

5. 82,4 1 102,01

x = 462,4 =* 320,75

x * 92,5

s = ,| , / 1 ^ 1 5 = 8 > 9 5N n - 1 V 4

t * ( * - ) * >l n ( 92,5 - 100 ) . 'i 5 a 1jS7?S 8,95

t tabel pada 0,05 dan d . f = 5 **1 adalah 2,776

t hitung lebih k e c i l dari t tabel 0,05 ( 4 ) , maka

Ho diterima, Jadi tidak ada perbedaan yang bermakna

antara kadar rata - rata yang diperoleh dengan ka

dar yang dianggap benar.



120

LAi.-mui'T r a n

Uji t dari kadar rate - rata nipasol yang diperoleh kemba

li dengan kadar yaiv; dianggap benar dalam sediaan kosmo -

tik adstringent dengan rnetode standar internal' eugenol.

Sampel Uipasol dalam % r ( x - x )2

1. 106,8 f 110,25

2. 91,4 ' 24,01

3. 105,1 77,44

4. 94,6 2,89

, / * 83,6 f 161,29

x * 481,5

5 = 96,3

= 375,88

t

s = g / 375,88 = 9j6g\ n - 1 V 4

t = ^ -n _ L 9j?.?_3., - ,.1PQ. , ) ,»,)/ _5 _ o ,8 5 5S 9,69

t tabel pada ^ = 0,05 dan d . f = 5 - 1 adalah 2,776

t hitung lebih k e c i l dari t tabel 0,05 ( 4 )> maka


nn nntnra kadar rata - rata yang diperoleh dengan




121

LAlvIPIKAH X O T

Uji t dari kadar rata - rata nipasol yang diperoleh. Cem

b a l i dengan kadar yang dianggap benar dalam sediaan kos-

metilc adstringent dengan metode standar in terna l bu t i l ■

paraben.

Sampel ITipasol dalam % ( X - 5 ) 2

1. 89,3 16,81

2. 87,8 31,36

3* 88,7 22,09

4. 101,1 59,29

5. 99,9 42,25

A = 466,8

93,4

= 171,8

£JL2. = J n i t § _ = 6,55 n - 1 V 4

t - ( x - ,u ) . J n K ( 93,4 - 100 ) . v 5 x 2,257 S ” 6,55

t tabel pada ^ = 0,05 dan d . f * 5 - 1 adalah. 2,776

t liitung lebih k ec i l dari t tabel 0,05 ( 4 ) , maka

Ho diterima. Jadi tidalc ada perbedaan yang bermak-

na antara kadar rata * rata yang diperoleh dengan




122

LAKPIRA1T XTV

U ji P dari nipagin yang diperoleh lcembali dalam sampel

murni.

Sampel1 Standar 1 Standar internal

» ■3ksternal f - napthol1 Eugenol' 3u t i l paraben

1. ' 102,8 * 99,0 98,5 1 102,8

2. * 97,0 99,4 94,2 ' 88,9

3. ' 104,5 97,2 98,5 ' 97,0

4. 1 76,5 ' 78,7 73,8 1 72,0

5. ' 107,8 100,7 1

c\J i

*o !

99,8

t 488,9 1 475,0 466,2 » On O VJtt 5 5 5 5t 97,8 95,0 93,2 • 92,1

CP _ ( I Ti ) 2 . C 1890,6 ) 2 = 178718,4II 20

SSfj = L( x )2 - GP

= 180886 - 178718,4 = 2167,6

s s p = i LSi , ) f „ CJ?11

= 178810,2 - 178718,4 = 91,8

SSg = SS(p. - oSp

= 2167,6 - 91,8 = 2075,8

- 1890,6

20

- 378,1



I ’hitunp = “ = ^ * ° ’ 24 m-cuios MS 129,7

Tabel Anava hasi l penentuan kadar nipagin dalam sampel

murni.

Sumber var ias i T DF! S S * MS 1 ]i? t hitung F tabel

Antar metode » V I \D CO 30,6’ 0,24 f 3,24

Dalam metode ' 16 ' 2075,8’ 129,7 ' i

Total t 19 t 2167,6T t t

p tabel ° ’ 05 * 3 ’ 16 = 3,24.

F ^ turif*’ 'ceci-l dari P tabel 0,05* 3, 16 ,

mako Ho diterima. Jadi tidak ada perbedaan yang

bermakna antar metode.



LA12PIRAJT X X V I

U ji F dari kadar nipasol yang diperoleh kembali dalam sam

pel murai,

Sampel1 Standar 1 Standar in ter nal

» Eksternal r ^-napthol 1 iilu^enol ' Butil paraben

1. * 93,4 t 94,3 ' 84,9 92,4

2. 1 103,3 1 101,8 ' 99,7 ' 96,8

i• 67,5 t 81 ,6 1 42,4 69,7

4. ' 102,4 » 100,3 ' 85,5 ' y6,0

5. 1 108,5 t 93,5 ' 101,2 » 97,8

t 475,1 1 476,5 1 413,7 452,7

5 1 5 5 5i 95,0 t 95,3 ' 82y7 ' 90,5

CP _ ( i TiTT

)2 ( 1818 20

= 165256, 2

- SST = 1 ( X )2 - CP

= 169929 , 7 - 165256, 2 = 4673,5

3Sp _ <r. X Ti )2

^ n— _ ^ ^

= 165771 ,3 - 16526,2 = 515,1 ,

ss^ = S3t - r» c* OUp

= 4673,5 - 515,1 = 4158,4

1818

20

363,5

I'ASp ATJ* r-r^hitun* = — = - ° ’ 661° MSe 259,9

Tabel Anava hasi l penetapan kadar nipasol dalam sampel

murni.

Sumber var ias i 1 DP * S3 * MS * p thitung

7?tabel

Antar rnetode 1 3 * 515,11 171,7* 0,661 » 3,24

Dalam rnetode 1 16 ’ 4150,4* 259,9' f

t » » t »

Total » 19 *4673,5*

* tabel ° - °5 ' .3 ,16 = 3,24

J* leb ih k e c i l dari P tabel 0,05 i 3 , 16,maka

Ho diterima. Jadi tidalc ada perbedaan yang bermakna

antar raetodfl.



126

LAMPIRA1J XXVII

UJi F dari kadar nipagin yang diperoleh kembali dalam se-

diaan kosmetik adstringent.

Sampel1 Standar ' Standar internal

» Eksternal f ^-napthol1 Eugenol ' Butil paraben

1. t 87,9 105,5 ' 109,1 ' 94,92. 89,9 86,5 * 100,3 T 90,8

3. » 86,8 1 91,6 ' 102,9 ' 82,8

4. 80,0 80,1 * 89,6 ' 98,1

5. » 83,3 82,7 ' ' 88,9 ’ 105,8

t 427,9 446,4 ’ 490,8 * 472,4t 5 5 5 5t 85,6 89,3 ' 98,2 ' 94,5

CP _ i } 2 ( 1837,5 )2N 20

— I DoocU , J

ssT - £( x ) 2 -

= 170346,1

CF

- 163820 ,3 = 1525,8

SSp _ c .(. « . ) 2 n

* 169283,6

- Cl?

- 168020 ,3 = 463,3SSE = SST - SSp

* 1525,8 - 463,3 ^ 1062, 5

- 1837

20

- 367

/



127

k - 1 = 4 - 1 = 3

n - 1 - 2 0 - 1 =19

DFt - DFp

19 - 3 * 16

SS,MS = — = -1 ^ 2 - = 154,4

DP,

MSE

c jr>Ok-»T? = I 062^ = b&>4 DF_ 16

*hitun£KSp

woE= l^ izA _ 2,32

66,4

Tabel Anava bas i l penetapan kadar nipagin dalam sediaan

kosmetik adstringent.

Sumber var ias i » DP ' 3S ' M3 »p 1 pAhitung tabel

Antar metode ’ 3 1 463,3' 154,4 1 2,32 « 3,24

Dalam metode * 16

»

11062,5f

» t66,4 i i

t i

Total t ig 11525,81 f »

F tabel ° ’ °5 > 3 , 1 6 = 3,24

P hitunc ■i'Gloi31 1:ecil dari F tabel 0,05 i 3 , l6,mako

Ho diterima. Jadi tidak ada perbedaan yang bermakna

antar metode.



128

LAr'TIHATT XXVIII

U ji P dari kadar nipasol yang diperoleh kembali dalam se

diaan kosmetik adstringent.

Sampel * Standar ’ 3tandar internal

» Uksternal 1 p-napthol ' Eugenol T Buti l paraben

1. 1 96,1 105,1 ' 106,8 T

CTvCO

2* ' 90,8 85,6 1 91,4 ' 87,8

3. ' 85,6 93,4 * 105,1 ' 88,7

4. 1 96,6 ’ 95,9 1 94,6 1 101,1

5* 1 94,9 82,4 83,6 * 99,9

464,0 ' 462,4 1 481,5 ' 466,8» r i 5 5 5i 92,8 92,5 96,3 ' 93,4

CP =. ( £ Ti ) 2 ( 1874,7 ) 211 20

— ■ = 1 ( j ( tdn yQ

EHCOCO = * ( x ) 2 - CP

= 176725,0 - 175725 ,0 a 1000,0

ssp = L 1 .'EiJ.2.n

*• CP

= 175770,8 - 175725,0 = 45,8

SSE = ssT - SSP

= 1000,0 - 45,8 - 954,2

- 1874,1

ZO

- 375,0



129

DPp = k - 1 = 4 - 1 = 3

dpt = n - 1 * 2 0 - 1 « 19

dfe - DP,,.i.

- ^Pp

= 19 -•3 =16

MSp =S3p

DPp_ 45,8

3= 15,3

Ti rq —SS~,xL 954,2 = 59,6otb

16

IViS-p * c *1■p — _-P = j- .j-3. p/:hitune hse " 59,6 “ ’

Tabel Anava hasi l penetapan kadar nipasol dalam sediaan

kosmetik adstringent.

Sumber var ias i ' DP t o o »OO ' MS r P Th it u n g ^ t a b e l

Antar metode f 3

COLT\ 15,3' 0,26 * 3,24

Dalam metode 1 16 '954,2 * 59,6 ’ i

i f » r »

Total 1 19 *1000,0» » »

* tabel u>°5 ’ 3 - 16 = 3>24

P ; . 4.,,v%rl lebih k ec i l dari P babel 0,05 j 3 ,l6,makaXlJ. 1/1.111/ jHo diterima. Jadi tidak ada perbedaan yang bermakna

antar metode.



130

Harga koef is ien korelasi pada dernjnd keper- cayaan 1 % dan 5 %.

LAMPIRAN XXIX

CURVE riTTING 315T:iIj!c 7-7.2 Values of r at the 5 Perccnt

l.rvch of Sif'nilitAiiCf:i ncl I i ri

0fC»ffS Of 5 1 orr.ms of 5 1rmouM (00 rCUClNl ructm fAUOOMIOM risciNI K»ClNf

i V*7 1.000 74 306 .496: 95C .990 n 301 .4873 a;c 95? It 374 4764 an .917 77 347 .470i 754 67* 7B 36) .4636 ;o; • 3f 79 Zii .4567 6d6 7v0 DO 349 4496 6J7 765 35 375 4189 .602 .735 40 304 .393

10 576 70S <0 ?e« 37711 5*,3 60 4 50 7/3 3541? 537 Ml CP .50 37513 * .514 64 1 70 737 30714 .47/ (553 60 717 76315 .48? 60« 90 705 76*U <66 v.o 100 »?S 754i; 414 57 5 t7i 1/4 77819 .444 .541 150 159 70d19 433 5<9 700 136 .1015v 473 .537 DOO 113 N9; i .413 .576 400 090 1767? 4<3< .515 500 000 .Ml; i jy6 .505 IOO«J 047 091

Dikutip dnri :R itschcll WA, Handbook o f Hauic Pharmacokinetics,

o t •»1“ Ed, Drup In te l l igence Publications.

LAMPIRAN XXX

Tabel "t"

i ’crccntilcs ol ilic I D is lribu liou

d. f. .*Q < . * n f .»9 f.MSi 3.078 6.3138 12.706 31.821 63.6572 1.886 2.9200 4.3027 6.965 9.92483 1.638 2.3534 3.1825 4.541 5.84094 1.533 2.1318 2.7764 3.747 4.60415 1.476 2.0150 2.5706 3.365 4.03216 1.440 1.9432 2.4469 3.143 3.70747 1.415 1.8946 2.3646 2.998 3,49958 1.397 1.8595 2.3060 2.896 3.35549 1.383 1.8331 2.2622 2.821 3.2498

10 1.372 1.8125 2.2281 2.764 3.1693l l 1.363 1.7959 2.2010 2.718 3.1058i 2 1.356 1.7823 2.1788 2.681 3.054513 1.350 1.7709 2.1604 2.650 3,012314 1.345 1.7613 2.1448 2.624 2.976815 1.341 1.7530 2.1315 2.602 2.946716 1.337 1.7459 2.1199 2.583 2.920817 1.333 1.7396 2.1098 2.567 2.898218 1.330 1.7341 2.1009 2.552 2.87841 9 1.328 1.7291 2.0930 2.539 2.860920 1.325 1.7247 2.0860 2.528 2.845321 1.323 1.7207 2,0796 2.518 2.831422 1.321 1.7171 2.0739 2.508 2.818823 1.319 J .7-139 2.0687 2.5<X) 2.807324 1,318 1.7109 2.0639 2.492 2.796925 1.316 1.7081 2.0595 2.485 2.787426 . 1.315 1.7056 2.0555 2.479 2.778727 1.314 1.7033 2.05)8 2.473 2.770728 1.313 1.7011 2.0484 2.467 2.763329 1.311 1.6991 2,0452 2.462 2.756430 1.310 1.6973 2.0423 2.457 2.750035 1.3062 1.6896 2.0301 2.438 2.723940 1.3031 1.6839 2.0211 2.423 2.704545 1.3007 1.6794 2.0141 2.412 2.689650 1.2987 1.6759 2.0086 2.40J 2.677860 1,2959 1.6707 2.0003 2.390 2.660370 1.2938 1.6669 1.9945 2.381 2.648080 1.292?. 1.6641 1.9901 2.374 2.638890 1.2910 1.6620 1.9867 2.368 2.6316

100 1.2901 1.6602 1.9840 2.364 2.6260120 1.2887 1.6577 1.9799 2.358 2.6175140 1.2876 1.6558 1.9771 2.353 2.61 14160 1.2869 1.6545 1.9749 2.350 2.6070180 1.2863 1.6534 1.9733 2.347 2.6035200 1.2858 1.6525 1.9719 2.345 2.6006

CO 1.282 1.645 1.96 2.326 2.576

Dikutip dari :Daniel WW, B ios ta t is t ics : A Foundation fo r Analysis in The Health Sciences, 2n Ed, 197B.

.132

LAMPIKAN XXXI

Tabel 11 F ”

£ . P d i s t r i b u t i o n { 3 « 0 .0 5 *

w in r

m / * « ^ u ^ D c ^ y ^ hftri.m fru m v ro io r D rf ire e i o f Frefdomw ' * ■ 4 ‘ * f <* tf) I ! u 20 24 ■ . « 40 iy>

161 4 199.5 215.7 224.6 230.21U.3I 1900 >9 Ift 19.25 19 3i10.13 955 9.2i 9 12 9017.71 6.94 6.59 6.39 6.266.61 5 79 5 41 5 10 5.05«.w> 5.J4 4 7ft 4 53 4 >95.5V 4 74 4 X 4.12 3 975 32 4 4ft 407 3 K4 3 693 .i: J . ’ ( 3fc* 3 63 ■\4>

4 96 4.11 ' 71 3 44 3.3 *4 S i ?.9l. 3 5V 3.36 3!204 ■*< 3 *9 3 4<» 3 26 3 114 67 38! 3 4: 3. It* 3 034 ftfl 3.74 3.34 3.H 2 '♦ft4.54 3 («ft 3.29 U v . 29*.4 40 3 ft3 3 2 i 3.(11 2 *54 4 ' V«s ?.2«i 29ft 2.M4 41 3 5; 3 16 2.9- 2.77* 3K 3.52 • 1 3 2 >«• 2 7J4 3 49 ‘ 1*. 2 J>7 27|i 32 '>47 « r ■* 2 S i 2.A«J . m 3 44 U>‘ 2 •' 2 WJ.2v 3 42 ■>0 - 2 *i< 2 M4.2ft 3 4(1 301 2.71; 2 ^ 24 24 3.3« 2.9m 2.7h 26 0i 23 i 2 9'. 2 74 2 S'»* 2 ) 3 1,1 2Mi' 2 77 2,5*4 :<> 314 2«? 271 2.5ft4 n 3 33 2V3 2.70 2.5.‘4 17 3 32 292 2 ftv 2 *14 l» 3.23 2 s j 2 61 2.4*iV' M f 2 7( 15.- 2.3*3.92 3’6 : 2ft» 24* 2.2v7 K4 ■* f¥- 2 ftO ' \m, 2.21

23J.O 236* 238 9 24Q.« 2*1.9 243.9 245,9 24X(\ 2*91 250.1 251.1 '*32 2 253 3 2 * 4 1

I 19,37 1,38 1940 1941 1941 1945 ,9J’ 1946 1947 I94* 1949 ]9 <.*5* ffj ?'79 8,74 8 70 l'-6* 8 64 *-6- 8.59 8.57 KJI ft J‘ ......................... 5ft6 .J 6 6.09 6.04 6 00 5.96 5.91 J S6 .5 * 0 5 71 5^75 s!?2 5*9 5.ftt

I t . *.** 4'8* 4'77 4 ,4 4&* **3 *-50 4*6 443 44n i\,3ft 3.2. 2.9

4-*t - 2I 4 I ' 4 <<* 4 -06 4 « i V9J 3 .R7 3 JH j g j 3 7 7 3 7 .- 3 j r; •*,7t ^ 7-' •' ^ 3.51 3 44 3 4 1 3 3& 3.34 J.30 ' 2'j.5ft 3.50 3 4J 3.3V 3.35 3.2K 3.22 3.15 3.12 3.OS 3.04 301 ' 9 '?'■ ’ 3.29 3.23 3.IK J.J4 30* 3.01 2 W 190 2.86 183 2.7^ 2.75 2.7

3 2 : 3 14 3 0* 3.0: 2.98 2.91 2.*5 2.77 2.74 2 70 2.66 2 6 - ' *fc '*<3 09 3 01 2.95 290 2*5 2.79 2.72 2 .65 2.61 2.57 2 53 ->49 -*4< 2 4C3 Of* 2 91 2 ? « 2K0 2.75 2 69 2 62 2*4 2 J I 2 47 2 43 13V 2.34 2 3 '2.v : 2 > - 2 77 2.71 2 67 J « > 2.53 2.4ft 242 2.'K 2*4 2 ' 0 ■*';2 « 5 2.>fr 271) 2t>5 2 w 2.53 24ft 2 3« 2.35 2.31 2.27 2.22 2?v ■

2 71' 271 2 W 2.5** 2.54 24v 2 * ' 2 3 s 1 ** >0 ** |ft ' I l ' » •2 74 26ft 2.5V 2 .M 2 49 2 4 : 2 35 2.2$ 2.2* 2 ^ 9 : T s 2-11 20> 20!2 70 2 ft) 2.55 2 4* 2.45 2.3> 2 31 2.21 2 1« 2 1 ' , 10 "Oft ’ 01 1 <»rJ M 2 5* 2.51 24h 241 2.>J 2.27 2.19 2.15 2 U 20ft 20* 19* 19*

2.5J 2 4k 2 42 2 3* 2.31 223 2. 1* 2.11 2 0 ' 2.03 t « v l M3 I x>

2M> 2 5 ! 24< 2.39 2.35 2-2* 2.20 2 12 2.08 2.1K 1.99 19* 1 90 : 14- * 249 2-s: 2 3* 2.32 2.25 2 ! ? 2 10 2.05 201 1.96 1.92 | <7 | SI2 f * 2 4,. 24(i 2.34 2.30 2.2' 2 IS 2 m 203 1 9 i 194 1 * 9 1 « . 1 7 *2.5* 2 44 2.3’ 2.32 2 27 2 20 2 13 2 « 5 2.01 19ft 1.91 I.Xft 1X1 i 7ft2-51 242 2.3ft 2.30 2.25 2 IS 21/ 203 J.9S 1.94 |.89 J.?4 j 7<5 j .73

2 4t 2 40 2 34 1 2 b 121 : . » f 2C* 2 01 1.9ft 1 92 1.87 1.82 I T J 7}2 * ’ 2 39 2?2 2.2* 2.22 2-1 *• 20* 1 9 « 1.95 1.90 1.85 1.80 J ?J 16924(- 2.37 2.31 2.25 2.20 2-1' 2.0ft 1.07 1.93 1.88 I .*4 1.79 J 73 I ft'2 J ' l ' « 2.2,< 2.24 2 19 2.12 2 (U 1 ** 191 U 7 1.82 1.77 1 7| 1 ft‘2 iX 2.35 2.2* 2.22 2.18 2.10 2 03 I « - 190 185 I.KJ 1.75 !. , f« 1 M

2.12 2.33 2 21 2.21 M*> 1 W 2.01 1 9> 18* 1.JU 1.79 J.74 ) w \ tZ2..VJ 2.25 2.13< 2 12 20* 2 00 1 92 I fU | 7V 1.74 1.69 j . W ; M l2 2:' 2 1* 2.10 2.<K 1.99 1 92 I.K- 1.75 1 i.o5 1.5V 1.55 1 - 7 1.392.17 2 f v 2.0: 1 9 f 1.91 1.83 1.75 1.66 I ft! 1.55 130 | 4 » J >5 1.2'2.10 2 0 ! 1 V4 I XS 1 K» J 75 I ft' 1.5* 1.51 1.4ft t . io 1 3 2 112 to n

penggunaan metode kromatografi gas untuk …repository.unair.ac.id/10336/12/fulltext-2.pdf ·...

Documents