pemberian sel punca cd34 darah tepi manusia … awal.pdf · kulit adalah organ terluas dari tubuh...

TESIS

PEMBERIAN SEL PUNCA CD34+ DARAH TEPI

MANUSIA SECARA SUBKUTAN MENINGKATKAN

JUMLAH SEL FIBROBLAS DAN KOLAGEN PADA

KULIT TIKUS JANTAN WISTAR YANG DIPAJAN

SINAR ULTRA VIOLET B

MOCHAMAD SYAIFUDIN

PROGRAM PASCASARJANA

UNIVERSITAS UDAYANA

DENPASAR

2015

ii

TESIS






MOCHAMAD SYAIFUDIN

NIM 1290761013

PROGRAM MAGISTER

PROGRAM STUDI ILMU BIOMEDIK


UNIVERSITAS UDAYANA

DENPASAR

2015

i

iii

TESIS






Tesis untuk Memperoleh Gelar Magister

Pada Program MagisterProgram Studi Ilmu Kedokteran Biomedik

Program Pascasarjana Universitas Udayana

MOCHAMAD SYAIFUDIN

NIM 1290761013

PROGRAM MAGISTER

PROGRAM STUDI ILMU BIOMEDIK


UNIVERSITAS UDAYANA

DENPASAR

2015

ii

iv

Lembar Pengesahan

TESIS INI TELAH DISETUJUI

PADA TANGGAL 4 Agustus 2015

Pembimbing I Pembimbing II

Prof.Dr.dr.Wimpie I. Pangkahila, SpAnd,FAACS Dr.dr. Ida Sri Iswari, Sp.MK.,M.Kes

NIP : 194612131971071001 NIP :196105051990022001

Mengetahui

Ketua Program Studi

Magister Ilmu Biomedik

Program Pascasarjana

Universitas Udayana

Dr.dr. Gde Ngurah Indraguna Pinatih, M.Sc, Sp.GK

NIP : 195805211985031002

Direktur

Program Pascasarjana

UniversitasUdayana,

Prof. Dr.dr.A.A. Raka Sudewi, Sp.S.(K)

NIP. 195902151985102001

iii

v

Tesis ini Telah Diuji dan Dinilai

Pada tanggal : 4 Agustus 2015

Panitia Penguji Tesis Berdasarkan SK Direktur

Program Pasca Sarjana Universitas Udayana

No : 1969/ UN 14.4/ HK/ 2015 Tanggal : 1 Juli 2015

Panitia Penguji Tesis adalah:

Ketua : Prof. Dr. dr. Wimpie I. Pangkahila, SpAnd, FAACS

Anggota :

1. Dr.dr. Ida Sri Iswari, Sp.MK,M.Kes

2. Prof. dr. IGM. Aman, Sp.FK

3. Prof. dr. N. Tigeh Suryadhi, MPH,Ph.D

4. Dr. dr.Basuki Supartono, Sp.OT, MARS

iv

vi

PERNYATAAN ORISINALITAS TESIS

Saya yang bertanda tangan di bawah ini menyatakan dengan sebenar –

benarnya bahwa sepanjang sepengetahuan saya di dalam tesis dengan

judulPEMBERIAN SEL PUNCA CD34+ DARAH TEPI MANUSIA SECARA

SUBKUTAN MENINGKATKAN JUMLAH SEL FIBROBLAS DAN

KOLAGEN PADA KULIT TIKUS JANTAN WISTAR YANG DIPAJAN

SINAR ULTRA VIOLET B.

Tidak terdapat karya ilmiah yang pernah diajukan orang lain untuk

memperoleh gelar akademik di suatu perguruan tinggi dan tidak terdapat karya

atau pendapat yang pernah dituliskan atau diterbitkan orang lain, kecuali yang

secara tertulis dikutip dalam naskah ini disebutkan dalam sumber kutipan dan

daftar pustaka.

Apabila ternyata dalam naskah Tesis ini dapat dibuktikan ada unsur

plagiasi, saya bersedia Tesis ini digugurkan dan gelar akademik yang saya peroleh

dibatalkan, serta diproses sesuai dengan perundang – undangan yang berlaku (UU

No. 12 Tahun 2003 pasal 25 ayat 2 dan pasal 70).

Denpasar, Agustus 2015

Mahasiswa,

MOCHAMAD SYAIFUDIN

NIM. 1290761013

PS : Magister Ilmu Biomedik

Program Pasca Sarjana

Universitas Udayana

v

vii

UCAPAN TERIMA KASIH

Assalamu’alaikum warrahmatullahi wabarakatuh.

Segala puji dan syukur yang sedalam-dalamnya penulis panjatkan kepada

Allah SWT karena atas rahmat dan karunia-NYA sehingga penulis dapat

menempuh pendidikan Program Magister Ilmu Biomedik Kekhususan Kedokteran

Anti Penuaan (Anti Aging Medicinee) dan menyelesaikan tesis yang berjudul

PEMBERIAN SEL PUNCA CD34+ DARAH TEPI MANUSIA SECARA




Selama penelitian ini, penulis mendapat banyak pengalaman sangat

berharga yang dapat memperkaya wawasan dan menjadi pengalaman berharga

dalam proses pembelajaran hidup penulis, baik dari segi ilmiah maupun aspek

nilai sosial dan agama. Semua ini tidak lepas dari peran serta orang – orang di

sekitar penulis. Pada kesempatan yang sangat berbahagia ini perkenanlah peenulis

menghaturkan rasa hormat, penghargaan dan terima kasih yang sebesar –

besarnya kepada :

1. Prof. Dr.dr. Wimpie I. Pangkahila, SpAnd, FAACS, selaku Pembimbing

Tesis I, yang telah banyak memberikan waktu, dorongan semangat,

perhatian yang besar, masukan ilmu yang berharga demi tercapainya

kemajuan penulis dalam menyelesaikan tesis ini.

2. Dr.dr. Ida Sri Iswari, Sp.MK.,M.Kes, selaku Pembimbing Tesis II, yang

telah banyak memberikan waktu, dorongan semangat, perhatian serta

vi

viii

masukan ilmu yang berharga demi tercapainya kemajuan penulis dalam

menyelesaikan tesis ini.

3. Prof. dr. IGM. Aman, Sp.FK, selaku Penguji Tesis, yang telah meluangkan

banyak waktu, arahan khususnya metodologi penelitian dan statistik serta

perbaikan demi tercapainya kemajuan penulis dalam menyelesaikan tesis

ini.

4. Prof. dr. N. Tigeh Suryadhi, MPH. Ph.D, selaku Penguji Tesis, yang telah

meluangkan banyak waktu, arahan dan perbaikan demi tercapainya


5. Dr.dr.Basuki Supartono, Sp.OT, MARS, selaku Penguji Tesis, yang telah

meluangkan banyak waktu, arahan khususnya pengertian dan pemahaman

sel punca CD34+ serta perbaikan demi tercapainya kemajuan penulis

dalam menyelesaikan tesis ini.

6. Dr. I. Gusti Kamasan Nyoman Arijana, M.Si.Med,yang telah banyak

membantu dan mengarahkan pekerjaan histologi PA pada laboratorium

histologi Fakultas Kedokteran Universitas Udayana demi tercapainya


7. Drs. Ketut Tunas, yang telah banyak membantu dan membimbing dalam

analisis data statistik sehingga tesis ini bisa menunjukkan hasil yang lebih

sempurna.

8. I Gede Wiranatha, S.Si, yang telah membantu dan memberikan bimbingan

di dalam pekerjaan persiapan dan pelaksanaan hewan coba di Animal Lab

Unit Bagian Farmapologi FK Udayana sehingga tercapainya kemajuan

penulis dalam menyelesaikan tesis ini.

vii

ix

9. Latifah, Amd.Kep, yang telah membantu pekerjaan laboratorium sel punca

CD34+

mulai dari pengambilan sampel darah tepi hingga proses separasi

sel punca CD34+sehingga tercapainya kemajuan penulis dalam


10. Niswatin, AMAK, yang telah membantu pekerjaan laboratorium sel punca

CD34+

mulai dari pengambilan sampel darah tepi hingga proses separasi

sel punca CD34+ hingga tercapainya kemajuan penulis dalam


11. Kepada seluruh dosen yang telah memberikan kuliah penulis, memberikan

ilmu dan ketrampilan di Program Pascasarjana ini, kami haturkan terima

kasih yang tulus dan penghargaan yang setinggi – tingginya.

12. Istriku tersayang Farida Usmandita, atas pengorbanan, doa, kesetiaan dan

perjuangan dalam mendampingi penulis hingga tercapainya kemajuan

penulis dalam menyelesaikan tesis ini.

13. Anak – anakku tercinta Itmamul Wafa, Atina Izzah Ar Rahma, Fathiyah

Mu’azzaroh, Mochamad Wildan dan Sayyidah Thalia Adenia, yang selalu

memberi dukungan dan kasih sayang, menyemangati sekaligus memberi

inspirasi penulis demi tercapainya kemajuan penulis dalam menyelesaikan

tesis ini.

14. Teman seperjuangan dari angkatan ke VII Program Magister Ilmu

Biomedik Kekhususan Anti-Aging Medicine, yang telah memberikan

dukungan sehingga penulis dapat menyelesaikan tesis ini.

viii

x

15. Kepada seluruh staf administrasi program pascasarjana jurusan anti-aging

medicine yang selalu memberikan bantuan dan kerjasamanya tidak

mengenal lelah, baik sewaktu kuliah hingga selesainya tesis ini.

Kepada semua pihak yang namanya tidak dapat penulis sebutkan satu per

satu yang telah mendukung serta memberikan doanya, penulis

mengucapkan terima kasih yang tak terhingga.

Semoga Allah SWT selalu melimpahkan rahmat-Nya kepada semua pihak

yang telah membantu dalam pelaksanaan dan penyelesaian tesis ini.

Akhir kata, semoga penelitian sel punca CD34+ ini bermanfaat bagi

perkembangan ilmu pengetahuan dan sumbangsih aplikasi klinis di masa yang

akan datang. Amin ya Robbal ‘alamin.

Denpasar, Juli 2015

Penulis

ix

xi

Abstrak

PEMBERIAN SEL PUNCA CD34+ DARAH TEPI MANUSIA SECARA




Kulit adalah organ terluas dari tubuh manusia yang setiap hari mengalami

proses penuaan oleh karenapajanan sinar ultraviolet matahari dengan menurunnya

jumlah sel fibroblas dan kolagen. Sel punca CD34+dapat berdiferensiasi menjadi

sel fibroblas dan kolagen. Tujuan penelitian ini untuk mengetahui pemberian sel

punca CD34+ darah tepi manusia secara subkutan meningkatkan jumlah sel

fibroblas dan kolagen pada kulit tikus jantan wistar yang dipajan sinar ultraviolet

B.

Penelitian ini adalah penelitian eksperimental menggunakan metode

penelitian Randomized Posttest Only Control Group Design. Dua kelompok tikus

jantan wistar masing–masing 18 ekor dipajan ultra violet selama 4 minggu.

Kelompok pertama diberikan injeksi secara subkutan dengan cairan PBS

(Phosphate Buffered Saline), sedangkan kelompok kedua diberikan injeksi sel

punca CD 34+secara subkutan.Setelah 4 minggu dibuat sediaan histologi patologi

– anatomi kulit tikus untuk dilihat jumlah sel fibroblas dan kolagen pada kedua

kelompok tersebut.

Hasil dari penelitian ini adalahterjadi regenerasi jumlah sel fibroblas dan

kolagen. Uji t – independent pada jumlah sel fibroblas menunjukkan bahwa nilai t

= 5,53 dan nilai p = 0,001, berarti rerata jumlah sel fibroblas pada kedua

kelompok sesudah diberikan perlakuan berbeda secara bermakna (p<0,05). Uji t –

independent pada jumlah kolagen menunjukkan bahwa nilai t = 7,05 dan nilai p =

0,001, berarti rerata jumlah kolagen pada kedua kelompok sesudah diberikan

perlakuan berbeda secara bermakna (p < 0,05).Hal ini terjadi karena pemberian

sel punca CD 34+ darah tepi manusia secara subkutan bersama jaringan mikro

perancah dan sinyal molekul keratinocytes stem cells (KSCs) dan sinyal molekul

lain yang ada dalam lapisan dermal kulit tikus bisa tumbuh menjadi sel fibroblas

dan kolagen.

Pemberian sel punca CD 34+ darah tepi manusia secara subkutan dapat

meningkatkan jumlah sel fibroblas dan kolagen pada kulit tikus jantan wistar yang

dipajan sinar ultraviolet B. Perlu dilakukan uji klinik sebelum dilakukan pada

manusia.

Kata kunci : sel punca CD34+, sel fibroblas, kolagen, degenerasi kulit, regenerasi

kulit.

x

xii

Abstract

THESUBCUTANEOUS INJECTION OF CD34+HUMAN PERIPHERAL

BLOOD STEM CELL COULD INCREASED AMOUNT OF

FIBROBLASTS AND COLLAGENS IN THE SKIN OF MALE WISTAR

RATS THAT EXPOSED TO ULTRAVIOLET B

Skin is the largest humanorgan which is skin ageing process to exposed

with ultraviolet B of the sun, can decrease amount of fibroblasts and

collagens.The CD34+ human peripheral blood stem cell can differentiate to

become fibroblasts and collagens. The aim of this research is to know that

thesubcutaneous injection of CD34+human peripheral blood stem cell could

increased amount of fibroblasts and collagens in the skin of male Wistar rats that

exposed to ultraviolet B.

This research is experimental research using the research method of

Randomized Posttest Only Control Group Design. Two groups of male Wistar

rats for each group divided to eighteen male Wistar rats were exposed with

ultraviolet Bfor 4 weeks. The once group was administered with subcutaneous

injection containing PBS (Phosphate Buffered Saline), whereas the second group

was administered with the subcutaneous injection CD34+ stem cells followed for

4 weeks.After four weeks, it was made the histology pathology – anatomy rats

skin have been seen the amount of fibroblasts and collagens for the both of

groups.

There was a regeneration of the number of fibroblasts and collagens.

Independent t-test to the number of fibroblasts showed that the value of t=5.53

and p=0.001, it meant that the average of the number of fibroblast in both groups

after treatment was significantly different (p<0.05). Independent t-test to the

number of collagens showed that the value of t=7.05 and p= 0.001, meant that the

average of the number of collagens in both groups after treatment was

significantly different (p<0.05). It happened because the subcutaneous injection of

CD34+human peripheral blood stem cell with the scaffold and signaling molecule

keratinocytes stem cells (KSCs) and the others regenerated to become fibroblasts

and collagens.

The subcutaneous injection of CD34+human peripheral blood stem cell

could increased amount of fibroblasts and collagens in the skin of male Wistar

rats that exposed to ultraviolet B. It needs to do trial clinic before doing it to the

human.

Key words: Stem cells CD34+, fibroblast, collagen, skin regeneration.

xi

xiii

DAFTAR ISI

Halaman

SAMPUL DALAM .................................................................................. i

PRASYARAT GELAR ................................................................................. ii

LEMBAR PENGESAHAN .......................................................................... iii

PENETAPAN PANITIA PENGUJI ............................................................. iv

PERNYATAAN ORISINALITAS TESIS ................................................... v

UCAPAN TERIMA KASIH ......................................................................... vi

ABSTRAK .................................................................................................... x

ABSTRACT .................................................................................................. xi

DAFTAR ISI ................................................................................................ xii

DAFTAR TABEL ....................................................................................... xvi

DAFTAR GAMBAR ................................................................................... xvii

DAFTAR SINGKATAN .............................................................................. xviii

DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................ xix

BAB I PENDAHULUAN ..................................................................... 1

1.1 Latar Belakang ..................................................................... 1

1.2 Rumusan Masalah ................................................................ 6

1.3 Tujuan Penelitian ................................................................. 7

1.3.1 Tujuan Umum ........................................................... 7

1.3.2 Tujuan Khusus ......................................................... 7

1.4 Manfaat Penelitian ............................................................... 7

1.4.1 Manfaat Metodologis ................................................ 7

1.4.2 Manfaat Teoritis ........................................................ 7

xii

xiv

1.4.3 Manfaat Aplikatif ...................................................... 8

BAB II KAJIAN PUSTAKA .................................................................. 9

2.1 Penuaang (Aging) ................................................................ 9

2.2 Kulit .................................................................................... 10

2.2.1 Penuaan Kulit Kronologis ....................................... 12

2.2.2 Penuaan Kulit Biologis (Photoaging) ..................... 15

2.2.3 Fibroblas .................................................................. 19

2.2.4 Kolagen ................................................................... 21

2.3 Sel Punca (Stem Cell) .......................................................... 25

2.3.1 Sel Punca Hematopoietik ........................................ 27

2.3.2 Sifat Plastis Sel Punca Hematopoietik .................... 27

2.3.3 Sel Punca CD34+ ...................................................... 29

BAB III KERANGKA BERPIKIR, KONSEP DAN HIPOTESIS

PENELITIAN ............................................................................ 32

3.1 Kerangka Berpikir ............................................................... 32

3.2 Kerangka Konsep ................................................................ 33

3.3 Hipotesis Penelitian ............................................................. 33

BAB IV METODE PENELITIAN ........................................................... 35

4.1 Rancangan Penelitian ........................................................... 35

4.2 Lokasi dan Waktu Penelitian ............................................... 35

4.2.1 Lokasi Penelitian ...................................................... 35

4.2.2 Waktu Penelitian ...................................................... 36

4.3 Populasi dan Sampel ............................................................ 36

4.3.1 Populasi ..................................................................... 36

xiii

xv

4.3.2 Kriteria Sampel ......................................................... 36

4.3.3 Besar Sampel ............................................................ 36

4.3.4 Teknik Pengambilan Sampel .................................... 37

4.4 Variabel ................................................................................ 37

4.4.1 Klasifikasi Variabel .................................................. 37

4.4.2 Definisi Operasional Variabel .................................. 38

4.4.3 Hubungan Antar Variabel ........................................ 40

4.5 Alat dan Bahan Penelitian .................................................... 40

4.5.1 Alat Penelitian .......................................................... 40

4.5.2 Bahan Penelitian ....................................................... 41

4.6 Prosedur Penelitian ............................................................... 42

4.6.1 Pada Hewan Tikus .................................................... 42

4.6.2 Pada Manusia ............................................................ 43

4.7 Alur Penelitian ...................................................................... 53

4.8 Analisis Data ......................................................................... 54

BAB V HASIL PENELITIAN ................................................................. 55

5.1 Hasil Penelitian .................................................................... 55

BAB VI HASIL DAN PEMBAHASAN ................................................... 62

6.1 Subyek Penelitian ................................................................ 62

6.2 Distribusi dan Homogenitas Data Hasil Penelitian ............. 62

6.3 Pengaruh Pemberian Suspensi Sel Punca CD34+ ............... 62

BAB VII SIMPULAN DAN SARAN ........................................................ 68

7.1 Simpulan .............................................................................. 68

7.2 Saran .................................................................................... 68

xiv

xvi

DAFTAR PUSTAKA .................................................................................. 69

LAMPIRAN .................................................................................................. 76

xv

xvii

DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 2.1 Anatomi Kulit ...................................................................... 11

Gambar 2.2 Efek Radiasi UV .................................................................. 16

Gambar 2.3 Histologis Photodamage, Pewarnaan HE ............................ 18

Gambar 2.4 Fibroblas ............................................................................... 19

Gambar 2.5 Sifat Plastis Sel Punca Hematopoietik ................................. 28

Gambar 2.6 Skin Tissue Engineering ...................................................... 30

Gambar 2.7 Alur kerja sel punca CD34+ untuk regenerasi sel fibroblas

dan kolagen. ........................................................................... 31

Gambar 3.1 Kerangka Konsep Penelitian ................................................ 33

Gambar 4.1 Skema Rancangan Penelitian In Vivo ................................... 35

Gambar 4.2 Kerangka Hubungan Antar Variabel .................................... 40

Gambar 4.3 Skema Alur Penelitian .......................................................... 53

Gambar 5.1 Perbandingan Jumlah Sel Fibroblas antara Kelompok

Kontrol dengan Kelompok Perlakuan ................................... 57

Gambar 5.2 Perbandingan Jumlah Kolagen antara Kelompok Kontrol

dengan Kelompok Perlakuan ................................................. 58

Gambar 5.3 Jumlah Sel Fibroblas pada Jaringan Dermis Tikus Jantan

Wistar dengan Pengecatan HE .............................................. 59

Gambar 5.4 Jumlah Kolagen pada Jaringan Dermis Tikus Jantan Wistar

dengan Pengecatan Picro-Sirius Red ..................................... 59

xvi

xviii

DAFTAR TABEL

Halaman

Tabel 2.1 Manifestasi histologis penuaan kulit kronologis

(YaarM,2006 ) ....................................................................... 11

Tabel 5.1 Hasil Uji Normalitas Data Jumlah Sel Fibroblas dan

Kolagen Sesudah Perlakuan .................................................. 55

Tabel 5.2 Homogenitas Data Jumlah Sel Fibroblas dan Kolagen antar

Kelompok Perlakuan ............................................................. 56

Tabel 5.3 Perbedaan Rerata Jumlah Sel Fibroblas antar Kelompok

Sesudah Diberikan Suspensi Sel Punca CD34+ ................... 56

Tabel 5.4 Perbedaan Rerata Jumlah Kolagen antar Kelompok

Sesudah Diberikan Suspensi Sel Punca CD34+ PBS .......... 57

Tabel 5.5 Gambaran histo PA kulit tikus kelompok kontrol dan

perlakuan ............................................................................... 60

xvii

xix

DAFTAR SINGKATAN

1. ABC = ATP-binding cassette

2. ADM = Adrenomedulin

3. BFGF = Basic Fibroblast Growth Factor

4. BMI-1 = Polycomb Group Protein 1

5. bESCS = Multipotent Epitelial Stem Cells

6. CKS/14/15 = Cytokeratins 5/14/15

7. DC = Dendritic Cell

8. EDTA = Ethylene Diamine Tetra Acetic Acid

9. EGFR = Epidermal Growth Factor Receptor

10. FB = Fibroblast

11. GM – CSF = Granulocyte Macrophage Colony Stimulating Factor

12. HE = Hematoxillin Meyer

13. HGF = Hepatocyte Growth Factor

14. HLA – G5 = Human Leukocyte Antigen G5

15. IGF – 1 = Insuline Like Growth Factor-1

16. IL – 6 = Interleukin 6

17. INOS = Inducible Nitric Oxide Synthase

18. IRF6 = Interferon Requlatery factor 6

19. KC = Keratinocyte

20. KCl = Kalium Chloride

21. KCSs = Keratinous Stem Cells

22. LIF = Leukemia Inhibitory Factor

23. M – CSF = Macrophage Colony Stimulating Factor

24. MCP – 1 = Monocytes Chemoatractant Protein – 1

25. MMP = Matriks Metalo Proteinase

26. MNC = Mono Nuclear Cell

27. NaCl = Natium Chloride

28. NFKB = Nuclear Factor – KB

29. NK = Natural Killer

30. PBS = Phosphate Buffered Saline

31. PGE – 2 = Prostaglandin E2

32. P63 = Imunohistokimia p63

33. ROS = Reactive Oxygen Species

34. SCF = Stem Cell Factor

35. SDF – 1 = Stromal Derived Factor – 1

36. TGF – β = Transforming Growth Factor – β

37. Treg = T Cell Regulatory

38. UV-B = Ultra violet B

39. VEGF = Vascular Endothelial Growth Factor

xviii

xx

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

Lampiran 1 Uji Normalitas Data Jumlah Sel Fibrolas dan Kolagen ...... 76

Lampiran 2 Uji t-independent Data Jumlah Sel Fibrolas dan Kolagen

antara Kelompok Kontrol dengan Kelompok Perlakuan .... 77

Lampiran 3 Hasil Jumlah Sel Fibrolas per tiga lapangan pandang

pembesaran 400 kali pada kelompok kontrol...................... 78

Lampiran 4 Hasil Jumlah Sel Fibrolas per tiga lapangan pandang

pembesaran 400 kali pada kelompok perlakuan ................. 80

Lampiran 5 Hasil prosentase jumlah kolagen pada tiga lapangan

pandang pembesaran 400 kali pada kelompok kontrol ....... 82

Lampiran 6 Hasil prosentase jumlah kolagen pada tiga lapangan

pandang pembesaran 400 kali pada kelompok kontrol ....... 84

Lampiran 7 Prosedur Hasil Penelitian .................................................... 86

Lampiran 8 Keterangan Kelaikan Etik (Ethical Clearance) ................... 90

Lampiran 9 Persetujuan Tindakan (Indormed Concern) ........................ 91

Lampiran 10 Persetujuan Setelah Penjelasan, Donor Stem Cell

Sukarelawan ........................................................................ 93

xix

pemberian sel punca cd34 darah tepi manusia … awal.pdf · kulit adalah organ terluas dari tubuh...

Documents