7/24/2019 KAI HPLC

1/24

LAPORAN TETAP

KIMIA ANALITIK INSTRUMEN

KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI

Disusun Oleh:

Kelompok

AD!I PRA"OGATAMA

# $%&&$&%'( )

ADI AGUSTIANS"A!

# $%&&$&%'& )

AGUNG ADIT"A PRATAMA

# $%&&$&%'* )

AK!MAD !AFI+ AD"TIA

# $%&&$&%'% )

APRIANS"A!

# $%&&$&%', )

C!ERL" MEIGITA

# $%&&$&%'- )DELI KUSUMA .ARDANI

# $%&&$&%'' )

ENDA! D!ITA PRATI.I

# $%&&$&,$$ )

KELAS: /EGC

INSTRUKTUR:

7/24/2019 KAI HPLC

2/24

I01 K1 A1 Ri234n5 M1 T

JURUSAN TEKNIK KIMIA

POLITEKNIK NEGERI SRI.IJA"A

/$*

KROMATOGRAFI CAIR KINERJA TINGGI

I. TUJUAN Menjelaskan teori kromatograf cair kinerja tinggi

Mengoerasikan alat kromatograf cair !engan "aik !an

"enar

Menganalisa s#at# sen$a%a kimia "aik secara k#antitati&

ma##n k#alitati& !engan mengg#nakam alat

kromatograf cair tekanan tinggi

'aat melak#kan rearasi !engan teat !an ak#rat(

serta !aat mengik#ti man#al engoerasian )*+C. 'aat menent#kan,meng-it#ng ka!ar at a!iti& !alam

samel min#man.

II. Alat 'an /a-an 0ang 'ig#nakan

1eerangkat alat )*+C ata# KCKT

Kolom c234

1$ringe

*en$aring miliole Neraca analitik

+a"# t#kar

*iet 5ol#m

Corong gelas

Gelas kimia

Gelas ia

7/24/2019 KAI HPLC

3/24

III. 'asar Teori

11

Se640

4h

Kromatograf a!ala- s#at# istila- #m#m $ang !ig#nakan

#nt#k "ermacam2macam teknik emisa-an $ang !i!asarkanatas artisi samel !iantara s#at# rasa gerak $ang "isa "er#a

gas ata##n cair !an rasa !iam $ang j#ga "isa "er#a cairan

ata##n s#at# a!atan. *enem# Kromatograf a!ala- Ts%ett $ang

a!a ta-#n 3678( menco"a memisa-kan igmen2igmen !ari

!a#n !engan mengg#nakan s#at# kolom $ang "erisi ka#r

9Ca1O:;. lstila- kromatograf !icitakan ole- Ts%ett #nt#k

mel#kiskan !aera-2!aera- $ang "er%arna $ang "ergerakke"a%a- kolom. *a!a %akt# $ang -amir "ersamaan( '.T. 'a$

j#ga mengg#nakan kromatograf #nt#k memisa-kan &raksi2&raksi

etrole#m( nam#n Ts%ett la- $ang ertama !iak#i se"agai

enem# !an $ang menjelaskan tentang roses kromatogra&i.

*en$eli!ikan tentang kromatograf ken!or #nt#k "e"eraa

ta-#n samai !ig#nakan s#at# teknik !alam "ent#k kromatograf

a!atan cair 9+1C;. Kem#!ian a!a ak-ir ta-#n 3687 an !anerm#laan ta-#n 36:7 an( kromatograf m#lai "erkem"ang. 'asar

kromatograf laisan tiis 9T+C; !iletakkan a!a ta-#n 3684 ole-

Imailo5 !an 1c-rei"er( !an kem#!ian !ier-al#s ole- 1ta-l a!a

ta-#n 36

7/24/2019 KAI HPLC

4/24

gas !an kromatograf kertas. *a!a ta-#n 36

7/24/2019 KAI HPLC

5/24

meto!e ini jika !i"an!ingkan !engan meto!e lainn$a 9'one !kk(

36B: 1n$!er !an Kirklan!( 36B6 )amilton !an 1e%ell( 364=

Jo-nson !an 1te5enson( 36B4;. Kele"i-an it# antara lainD

II1 JENIS8JENIS KROMA TOGRAFI

/11 K0om49o04;i p42494n

7/24/2019 KAI HPLC

6/24

le"i- ta-an lama( tela- !ikem"angkan engeakan &ase !iam

$ang "erikatan secara kimia !engan en!#k#ng inert. /ent#k

kromatograf artisi ini !ise"#t kromatograf &ase terikat 9/*C

/on!e!

*-ase C-romatogra-$;. /*C !engan ceat menja!i sala-

sat# "ent#k $ang aling o#ler !ari KCKT. Kromatograf artisi

9++C !an /*C;( !ise"#t &ase normal "ila &ase !iam le"i- olar

!ari &ase gerak !an &ase ter"alik "ila &ase gerak le"i- olar !ari

a!a &ase !iam.

/1(1 K0om49o04= penuk40 ion #IEC)

Teknik ini tergant#ng a!a en#karan 9a!sorsi; ion2ion !i

antara &ase gerak !an temat2temat "erion !ari engeak.

Ke"an$akan mesin2mesin "erasal !ari koolimer !i5inil"enen

stiren !imana g#g#s2g#g#s ngsin$a tela- !itam"a-. Asam

s#l&onat !an amin k#arterner mer#akan jenis resin ili-an aling

"aik #nt#k !ig#nakan Ke!#an$a( &ase terikat !an resin tela-

!ig#nakan. Teknik ini !ig#nakan secara l#as !alam li&e sciences

!an !ikenal #nt#k emisa-an asam2asam amino. Teknik ini !aat

!iakai #nt#k ke!#an$a kation !an anion.

/1&1 K0om49o04= eksklusi

Teknik ini #nik karena !alam emisa-an !i!asarkan a!a

#k#ran molek#l !ari at a!at. *engeak a!ala- s#at# gel !engan

erm#kaan "erl#"ang2l#"ang sangat kecil 9oro#s; $ang inert.

Molek#l2rnolek#l kecil !aat mas#k !alarn jaringan

Kromatograf ekskl#si rnern#n$ai "an$ak nama( $ang aling

#m#m !ise"#t ermeasi gel 9G*C; !an &iltrasi gel. Aa#n

naman$a( mekanismen$a teta sama. 'alam "i!ang "iologi(

1e-a!e( s#at# Cross2linke! !etran gel( tela- !ig#nakan secara

l#as( -an$a engeak keras !an semi keras 9olistiren( silika(

glass; $ang !ig#nakan !alam KCKT. 'etran gel l#nak ti!ak !aat

7/24/2019 KAI HPLC

7/24

mena-an kinerja !iatas 3 ata# = atmos&er. Tenik ini

!ikem"angkan #nt#k analisis olimer2olimer !an "a-an2"a-an

"iologi( ter#tama !ig#nakan #nt#k rnolek#l2molek#l kecil.

/1*1 K0om49o04=

p4s4n4n ion #IPC)

Kromatogtaf asangan ion se"agai en$es#aian ter-a!a

KCKT termas#k "ar#( emakaian ertama sekali a!a

ertenga-an ta-#n 36B7. 'iteriman$a I*C se"agai meto!e "ar#

KCKT mer#akan -asil kerja 1c-ill !an ka%an2ka%an !an !ari

"e"eraa ke#nt#ngan $ang #nik. Ka!ang2ka!ang I*C !ise"#t j#ga

kromatograf ekstraksi( kromatograf !engan s#at# cairan en#kar

ion !an aire! ion c-romatogra-$ 9*IC;. 1etia teknik2teknik ini

mem#n$ai !asar $ang sama.

*o#laritas I*C m#nc#l ter#tama sekali !ari keter"atasan

IEC !an !ari s#kan$a menangani samel2samel tertent# !engan

meto!e2meto!e +C lainn$a 9seerti sen$a%a $ang sangat olar(

sen$a%a $ang terionisasi secara komleks !an sen$a%a "asa

k#at;.

I*C !aat !ilaksanakan !alam !#a tie $ait# &ase normal !an

&ase "alik. Fase !iam !ari rase "alik I*C !aat ter!iri !ari s#at#

engeak silika $ang !isilanisasi 9misaln$a C4 ata# C34 /on!e!

*-ase; ata# !ari s#at# engeak $ang !ierole- secara

mekanik( &ase organik $ang ti!ak !aat "ercam#r !engan air

seerti 3 entanol. Fase !iam $ang !iakai a!ala- Cs ata# CI1 /*C

*acking. Fase gerak ter!iri !ari s#at# lar#tan "#&er 9!itam"a-

s#at# kosol5en organik seerti metanol ata# asetonitril #nt#k

emisa-an &ase terikat; !an s#at# enam"a-an ion tan!ing($ang

m#atann$a "erla%anan !engan molek#l samel.

P0insip ke064 ins9umen94si !PLC

7/24/2019 KAI HPLC

8/24

)*+C mengg#nakan &asa gerak #nt#k memisa-kan komonen

!ari se"#a- cam#ran komonen 9analit;. *rinsi keja )*+C

a!ala- emisa-an setiaa komonen !alam samel "er!asarkan

keolarann$a. 0ang aling mem"e!akan )*+C !engan

kromatograf lainn$a a!ala- a!a )*+C !ig#nakan tekanan tinggi

#nt#k men!orong &asa gerak. Fasa !iam $ang "iasa !ig#nakan

9a!a kolom; )*+C jenis &asa ter"alik a!ala- RMe=1iCl( !imana R

a!ala- rantai alkana C234 ata# C4.

1ementara &asa gerakn$a "er#a lar#tan $ang !iat#r

komosisin$a 9gra!ien el#si;( misaln$a D airDasetonitril 947D=7;( -al

ini "ergant#ng a!a keolaran analit $ang akan !iisa-kan.

Cam#ran analit akan terisa- "er!asarkan keolarann$a( !an

%akt# retensin$a akan "er"e!a( -al ini akan teramati a!a

sektr#m $ang #nsak2#ncakn$a terisa-.

*rinsi !asar )*+C a!ala- emisa-an komonen2komonen

terja!i karena er"e!aan kek#atan interaksi antara sol#t2sol#t

ter-a!a &asa !iam. Ke#ngg#lan mengg#nakan )*+C

!i"an!ingkan kromatograf gas $ait# terletak a!a

kemam#ann$a #nt#k menganalisis c#likan $ang ti!ak meng#a

!an la"il a!a s#-# tinggi. )*+C ti!ak ter"atas a!a sen$a%a

organik tai mam# menganalisis sen$a%a anorganik( mam#

menganalisis c#likan $ang mem#n$ai molek#l tinggi 9"eratn$a;(

mam# menganalisis c#lik $ang mem#n$ai titik !i!i- $ang

sangat tinggi seerti olimer.

C404 ke064 ins9umen94si !PLC

*rinsi kerja alat )*+C a!ala- ertama &asa gerak !ialirkan

melal#i kolom ke!etektor !engan "ant#an oma. Kem#!ian

c#likan !imas#kan ke !alam aliran &asa gerak !engan cara

en$#ntikan. 'i!alam kolom terja!i emisa-an komonen2

komonen cam#ran karena er"e!an kek#atan interaksi antara

sol#t2sol#t ter-a!a &asa !iam. 1ol#t2sol#t $ang k#rang k#at

7/24/2019 KAI HPLC

9/24

interaksin$a !engan &asa !iam akan kel#ar !ari kolom terle"i-

!a-#l#. 1e"alikn$a sol#t2sol#t $ang interaksin$a k#at !engan &asa

!iam akan kel#ar !ari kolom le"i- lama. 1etia komonen $ang

cam#ran $ang kel#ar kolom !i!eteksi ole- !etektor kem#!ian

!irekam !alam "ent#k kromatogram.

Komonen2komonen instr#mentasi )*+C

3. Fasa Gerak

Fasa gerak !ari )*+C mer#akan at cair $ang !ise"#t el#en

ata# elar#t. 'alam )*+C &asa gerak selain "erngsi #nt#k

mem"a%a komonen2komonen cam#ran men#j# ke !etektor(

selain it# j#ga !aat "erinteraksi !engan sol#t2sol#t. Ole- karena

it#( &asa gerak !alam )*+C mer#akan sala- sat# &aktor enet#

ke"er-asilan roses emisa-an. *ers$aratan at cair $ang akan

!ig#nakan se"agai &asa gerak se"agai "erik#tD

a. Hat cair -ar#s "ertin!ak se"agai elar#t $ang "aik #nt#k

c#likan $ang akan !ianalisis

". Hat cair -ar#s m#rni( #nt#k meng-in!ari mas#kn$a kotoran$ang !aat menggangg# interretasi kromatogram

c. Hat cair -ar#s jerni-( #nt#k meg-in!ari en$#m"atan a!a

kolom!. Hat cair -ar#s m#!a- !ierole-( m#ra-( ti!ak m#!a- ter"akar

!an ti!ak "erac#ne. Hat cair ti!ak kental !an -ar#s ses#ai !engan !etektor

Fasa gerak se"el#m !ig#nakan -ar#s !isaring terle"i-

!a-#l# #nt#k meng-in!ari artikel2artikel kecil. 1elain it# a!an$a

gas !alam &asa gerak j#ga -ar#s !i-ilangkan( se"a" a!an$a gas

akan "erk#m#l !engan komonen lain ter#tama !o oma !an

!etektor se-ingga akan mengaca#kan analisis.

El#si !aat !ilak#kan !engan cara isokratik 9komosisi &asa gerak

teta selama el#si; ata# !engan cara "ergra!ien 9komosisi &ase

gerak "er#"a-2#"a- selama el#si; $ang analog !engan

emrograman s#-# a!a kromatograf gas. El#si "ergra!ien

7/24/2019 KAI HPLC

10/24

!ig#akan #nt#k meningkatkan resol#si cam#ran $ang komleks

ter#tama jika samel mem#n$ai kisaran olaritas $ang l#as.

Fase gerak $ang aling sering !ig#nakan #nt#k emisa-an !engan

&ase ter"alik a!ala- cam#ran lar#tan "#er !engan metanol at#a

cam#ran air !engan asetonitril. Unt#k emisa-an !engan &ase

normal( &asa gerak $ang aling sering !ig#nakan a!ala- cam#ran

elar#t2elar#t -i!rokar"on !engan elar#t $ang terklorisasi ata#

mengg#nakan elar#t2elar#t jenis alko-ol. *emisa-an !engan

&ase normal ini k#rang #m#m !i"an!ing &ase ter"alik.

=. Kolom

Kolom )*+C "iasan$a ter"#at !ari stailess steel( akan tetai

a!a j#ga $ang ter"#at !ari gelas "er!in!ing te"al. Kolom #tama

"erisi &asa !iam( teat terja!in$a emisa-an cam#ran menja!i

komonen2komonen. /ergant#ng keerl#ann$a kolom #tama

!aat !ig#nakan #nt#k analisis ata# rearati& setia komonen

$ang kel#ar kolom !itam#ng a!a ta"#ng

$ang "er"e!a !an kel#aran )*+C !i-#"#ngkan !engan &raction

colector selain kolom #tama !ikenal #la kolom engaman.

Kolom #tama "erisi &asa !ian !an jenisn$a "er5ariasi "ergant#ng

a!a keerl#an( misaln$a !ikenal kolom C4( C234( c$anoro$l(

!an en#kar ion. Kolom #tama #nt#k )*+C "iasan$a "er#k#ran

anjang "erkisar antara mm "iasan$a

!iaking !engan artikel silika "er#k#ran "esar !ari #k#ran

artikel kolom #tama. Kolom engaman mem#n$ai !#a ngsi

$ait#D men$aring kotoran $ang ter"a%a ole- &asa gerak !an #nt#k

menjen#-kan &asa gerak !alam rangka meng-in!arkan terja!in$a

erosi &asa !iam ole- aliran elar#t.

7/24/2019 KAI HPLC

11/24

Kolom mer#akan jant#ng kromatogra&( ke"er-asilan ata#

kegagalan analisis "ergant#ng a!a il-an kolom !an kon!isi kerja

$ang teat. Kolom !aat !i"agi menja!i !#a kelomokD

a; Kolom analitik

Garis tenga- !alam =2> mm( anjang "ergant#ng a!a jenis

kemasan( #nt#k kemasan elikel "iasan$a anjang kolom mm ata# le"i- "esar( !ananjang =

7/24/2019 KAI HPLC

12/24

*oma ini ter!iri !ari r#angan kecil temat elar#t $ang

!ioma !engan cara gerakan iston maj# m#n!#r $ang

!ijalankan ole- motor. Gerakan iston mem"erikan aliran el#en

$ang konstan( memiliki 5ol#me internal kecil 98

7/24/2019 KAI HPLC

13/24

'alam raktekn$a( loo ti!ak erl# !iisi en#-( tai "ila ti!ak

!iisi en#- akan mengaki"atkan le"i- jelekn$a resisi -asil

ekserimen !an ketergant#ngan resisi terse"#t kea!a

"agaimana si2oerator mengg#nakan en$#ntik.

*erl# !iingat( "a-%a en$#ntik ti!ak "ole- !ica"#t se"el#m

egangan 9-an!le; en$#ntik !i#tar !ari osisi loa! 9engisa;

ke osisi inject 9s#ntik;. Karena samel akan mengalir ke sal#ran

em"#angan. )al $ang terak-ir ini tent#n$a ti!ak !iinginkan(

egangan en$#ntik -ar#s !i#tar ceat agar em#t#san aliran ke

!alam !iinginkan.

*egangan en$#ntik -ar#s !i#tar ceat agar em#t#san aliran ke

!alam kolom( antara osisi engisian 9loa!; !an osisi

en$#ntikan 9inject; "erlangs#ng ceat.

0ang menja!i &aktor keti!ak teatan eng#k#ran )*+C sala-

sat#n$a terletak a!a keter#langan emas#kan c#likan ke!alam

aking kolom. Masala-n$a ke"an$akan memas#kan c#likan

ke!alam kolom !aat men$e"a"kan "an! "roa!ening. Ole- karen

it# c#likan $ang !imas#kkan -ar#s sekecil "e"eraa #l#-

mikroliter. /e"eraa teknik emas#kan c#likan ke!alam sistem

!aat !i#raikan se"agai "erik#t D

a; Injeksi 1$ringe

1$ringe !is#ntikan melal#i set#m 9seal karet; !an #nt#k ini

!irancang s$ringe $ang ta-an tekanan samai 3

7/24/2019 KAI HPLC

14/24

kolom. 1etela- men$am"#ng kem"ali kolom maka elar#t

!ialirkan kem"ali. Unt#k memas#kkan c#likan ke!alam &asa

gerak erl# !#a langka- D sej#mla- 5ol#me c#likan !is#ntikkan

ke !alam loo !an osisi Ploa!Q. C#likan masi- "era!a !alam loo

kran !i#tar #nt#k meng#"a- osisi Ploa!Q menja!i osisi PinjeksiQ

!an &asa gerak mem"a%a c#likan ke!alam kolom 9kran c#likan;.

c; Kran C#likan

Jenis emas#kan c#likan ini !ise"#t j#ga loo !an aling "an$ak

!ig#nakan. Unt#k memas#kan c#likan ke !alam aliran &asa gerak

erl# = langka-( $ait#D sej#mla- 5ol#me c#likan !is#ntikan ke

!alam loo !alam osisi loa!( c#likan masi- "era!a !alam loo

kran !i#tar #nt#k meng#"a- osisi loa! menja!i osisi injeksi

!an &asa gerak mem"a%a c#likan ke !alam kolom.

7/24/2019 KAI HPLC

15/24

mer#sak sen$a%a $ang !i analisis( !an mem#ngkinkan #nt#k

melak#kan el#si "ergra!ien. A!a $ang !iasang a!a anjang

gelom"ang teta $ait# a!a anjang gelom"ang =

7/24/2019 KAI HPLC

16/24

!. Unt#k sal#ran em"#angan( g#nakanla- selang teLon

"er!iameter !alam 9inner !iameter; $ang "esar tai en!ek.e. Tematkan !etektor a!a kon!isi s#-# $ang !ieli-ara teta.

Jaga agar sel in!eks "ias selal# "ersi-.

1el em"an!ing -ar#s !iisi !engan elar#t $ang tela- !ile%atkan

melal#i kolom(

'etektor 1ektrometer Massa

'etektor 1ektrometer In&ramera-

"; 'etektor 1elekti&

'etektor Fl#oresensi

'i!asarkan kea!a rinsi "a-%a molek#l2molek#l tertent# !aat

men$era energi a!a anjang gelom"ang $ang le"i- en!ek

mem"ent#k s#at# kea!aan tereksitasi !an kem#!ian secara

-ami "ersamaan t#r#n kem"ali ke kea!aan !asar 9gro#n! state;

!engan memancarkan energi a!a anjang gelom"ang $ang le"i-

anjang.

'etektor Kon!#kti5itas +istrik

'etektor elektrokimia "iasan$a !i!asarkan a!a !a$a -antar

listrik 9kon!#ktometri; !an olarograf. 'etektor jenis

kon!#ktometri "iasan$a !ig#nakan #nt#k men!eteksi sol#t2sol#t

$ang !aat mengalami reaksi re!oks "aik sen$a%a organik

ma##n anorganik. A!a#n ers$aratan !etektor $ait#D c#k#

sensiti&( sta"ilitas( !an keter#langan tinggi( ti!ak er#sak c#likan(

reson linier ter-a!a sol#t( relia"ilitas tinggi !an m#!a-

!ig#nakan.

I!ealn$a( s#at# !etektor -ar#s mem#n$ai karakteristik se"agai

"erik#t D

a. Mem#n$ai reson ter-a!a sol#t $ang ceat !an rero#si"el". Mem#n$ia sensitiftas $ang tinggi( $akni mam# men!eteksi

sol#t a!a ka!ar sangat kecil

7/24/2019 KAI HPLC

17/24

c. 1ta"il !alam engoerasiann$a!. Mem#n$ia sel 5ol#me $ang kecil se-ingga mam#

meminimalkan ele"aran itae. 1ignal $ang !i-asilkan "er"an!ing l#r#s !engan konsentrasi

sol#t a!a kisaran $ang l#as&. Ti!ak eka ter-a!a er#"a-an s#-# !an keceatan alir &asa

gerak

>.Rekor!er

Rekor!er a!ala- alat #nt#k mencetak -asil erco"aan a!a

lem"ar "er#a k#m#lan #ncak 9kromatogram; kromatogram

)*+C $ang !i!aat "erg#na #nt#k analisis k#alitati& !an

k#antitati&. +#as eak men$atakan konsentrasi komonen !alam

cam#ran !an j#mla- eak men$atakan j#mla- komonen.

Analisis k#alitati& !aat !ilak#kan !engan cara mem"an!ingkan

%akt# retensi 9rt; analit ata# samel !engan %akt# retensi

stan!ar. 1e!angkan analisis k#antitati& !eat !ilak#kan !engan

!i!asarkan a!a l#as eak ata# tinggi eak !engan meto!e

stan!ar kali"rasi.

Penen9u4n K4;ein :

Ka&ein a!ala- s#at# sen$a%a organik $ang mem#n$ai

nama lain $ait# ka&ein( tein( ata# 3(8(B2trimetilantin. Kristal

ka&ein !alam air "er#a jar#m2jar#m "erca-a$a. /ila ti!ak

mengan!#ng air( ka&ein melele- a!a s#-# =8:oC =86oC !an

men$#"lim a!a s#-# $ang le"i- ren!a-. Ka&ein m#!a- lar#t

!alam air anas !an kloro&orm( tetai se!ikit lar#t !alam air !ingin

!an alko-ol 9A"ra-am( =737;

7/24/2019 KAI HPLC

18/24

Ka&eina8:( ata# le"i- o#lern$a ka&ein( iala- sen$a%a alkaloi!

antina "er"ent#k kristal !an "erasa a-it $ang "ekerja se"agai

o"at erangsang sikoakti& !an !i#retik ringan

Ka&eina j#ga !ise"#t g#aranina ketika !item#kan a!a g#arana(

mateina ketika !item#kan a!a mate( !an teina ketika !item#kan

a!a te-. 1em#a istila- terse"#t sama2sama mer#j#k

a!a sen$a%a kimia $ang sama. Ka&eina !ij#mai secara alami

a!a "a-an angan seerti "iji koi( !a#n te-( "#a- kola( g#arana(

!an matV. *a!a t#m"#-an( ia "ereran se"agai estisi!a alami

$ang mel#m#-kan !an mematikan serangga2serangga tertent#

$ang memakan tanaman terse"#t. Ia #m#mn$a !ikons#msi ole-

man#sia !engan mengekstraksin$a !ari "iji koi !an !a#n te-.

Ka&eina mer#akan o"at erangsang sistem #sat sara& a!a

man#sia !an !aat meng#sir rasa kant#k secara sementara.

Min#man $ang mengan!#ng ka&eina( seerti koi( te-( !an

min#man ringan( sangat !igemari. Ka&eina mer#akan at

sikoakti& $ang aling "an$ak !ikons#msi !i !#nia. Ti!ak seerti

at sikoakti& lainn$a( ka&eina legal !an ti!ak !iat#r ole- -#k#m !i

-amir sel#r#- $#ri!iksi !#nia. 'i Amerika Utara( 67 orang

!e%asa mengkons#msi ka&eina setia -ari 9Anonim( =737;

Koi a!ala- sejenis min#man $ang "erasal !ari roses engola-an

!an ekstraksi "iji tanaman koi.= Kata koi sen!iri "erasal !ari

"a-asa Ara" @a-%a- $ang "erarti kek#atan( karena a!a a%aln$a

koi !ig#nakan se"agai makanan "erenergi tinggi.8 Kata @a-%a-

kem"ali mengalami er#"a-an menja!i ka-5e- $ang "erasal !ari

"a-asa T#rki !an kem#!ian "er#"a- lagi menja!i koWe !alam

7/24/2019 KAI HPLC

19/24

"a-asa /elan!a.r#j#kanX *engg#naan kata koWe segera !isera

ke !alam "a-asa In!onesia menja!i kata koi $ang !ikenal saat

ini.8 1ecara #m#m( ter!aat !#a jenis "iji koi( $ait# ara"ika

9k#alitas ter"aik; !an ro"#sta.: 1ejara- mencatat "a-%a

enem#an koi se"agai min#man "erk-asiat !an "erenergi

ertama kali !item#kan ole- /angsa Etioia !i "en#a A&rika

sekitar 8777 ta-#n 93777 1M; $ang lal#. 'i

saming rasa !an aroman$a $ang menarik( koi j#ga !aat

men#r#nkan risiko terkena en$akit kanker( !ia"etes( "at#

eme!#( !an "er"agai en$akit jant#ng 9kar!io5ask#ler; 9Anonim(

=737;

Ka&ein mer#akan jenis alkaloi! $ang secara alamia- ter!aat

!alam "iji koi( !a#n te-( !a#n mete( "iji kola( "iji coklat( !an

"e"eraa min#man en$egar. Ka&ein memiliki "erat molek#l

36:.36 !engan r#m#s kimia C4)37N4O= !an ) >.6 9lar#tan

ka&ein 3 !alam air;. 1ecara ilmia-( e&ek langs#ng !ari ka&ein

ter-a!a kese-atan se"et#ln$a ti!ak a!a( tetai $ang a!a a!ala-

e&ek tak langs#ngn$a seerti menstim#lasi erna&asan !an

jant#ng( serta mem"erikan

e&ek saming "er#a rasa gelisa- 9ne#roses;( ti!ak !aat ti!#r

9insomnia;( !an !en$#t jant#ng tak "erart#ran 9tac-$car!ia;. 'ari

"e"eraa literat#r( !iketa-#i "a-%a koi !an te- "an$ak

mengan!#ng ka&ein !i"an!ingkan jenis tanaman lain( karena

tanaman koi !an te- meng-asilkan "iji koi !an !a#n te- !engan

7/24/2019 KAI HPLC

20/24

sangat ceat( sementara eng-anc#rann$a sangat lam"at

9)ermanto( =77B;

Tai( !i "alik kan!#ngan ka&ein $ang l#ma$an "esar it#( koi

se"et#ln$a memiliki seg#!ang man&aat "agi man#sia. K-asiat koi

$ang s#!a- #m#m !ikenal orang sejak !#l# a!ala- meng#rangi

rasa kant#k !an lela-. Ka&ein $ang terkan!#ng !alam koi

mam# merangsang sistem sara& #sat( se-ingga kita "isa

"erikir cemerlang( ti!ak mengant#k( !an konsentrasi kita terjaga.

Ini karena sara& kita terstim#lasi( terang 1ata%ati /ar!osono(

akar gii !ari Uni5ersitas In!onesia. 1elain it#( sen$a%a ka&ein

$ang tergolong alkaloi! it# se"et#ln$a j#ga mam# meningkatkan

ke%asa!aan sara& motorik. Ka&ein #n menim"#lkan

erangsangan a!a sistem erna&asan !an sistem em"#l#-

!ara- !an jant#ng. )asiln$a( orang $ang memin#m koi akan

mam# le"i- "erkonsentrasi !alam melak#kan ekerjaann$a.

1elain it#( orang akan merasa le"i- segar setela- memin#m koi.

)al inila- $ang mem"#at "an$ak

orang mengkons#msi koi !i agi -ari. Nam#n( teori it# !itentang

ole- *ro&esor *eter Rogers !ari Uni5ersitas /ristol( Inggris.

Men#r#t enelitian $ang !ilak#kann$a( ka&ein $ang terkan!#ng

!alam koi terse"#t ti!ak akan akan mem#nc#lkan k-asiat2k-asiat

it# "ila orang $ang memin#mn$a s#!a- ter"iasa !engan engar#-

ka&ein 9Anonim( =774;.

IS. *RO1E'UR *ERCO/AAN

A1Ope04sion4l K0om49o04= C4i0

Catatan D Jangan erna- mem"iarkan oma "eroerasi

tana flter elar#t teren!am !alam elar#t

7/24/2019 KAI HPLC

21/24

*ili- anjang gelom"ang US2sinar tamak !an n$alakan

!etektor #nt#k stan!"$. 1etela- 3 menit n$alakan !etektor

ke osisi ON. *engat#ran 7(7:AUF1 akan c#k#.

Jika oma "el#m !in$alakan( ertama ili- sol5ent line

$ang !ierl#kan 9solvent select dial)!an kel#arkan solvent

line!engan gam"ar sekitar =7 m+ elar#t kel#ar melal#i

fush outlet9"era!a !i"a%a- solvent select dial;. +ak#kan ini

!engan mengg#nakan s$ringe( mas#kkan !alam o#tlet( "#ka

kat# !an kel#arkan sol5ent. T#t# kat# kem"ali.

*a!a saat elar#t tela- terili- !engan teat( t#rn on

oma !an secara erla-an naikkan laj# aliran a!a le5el

$ang !iinginkan. T#ngg# sekitar 3

7/24/2019 KAI HPLC

22/24

injeksi !engan cara mem#tar kat# ke osisi inject.

*encatat 9recor!er; akan start secara otomatis.

*engat#ran recor!er D Mengg#nakan 1-ima!# recor!er. At#rsee! a!a

7/24/2019 KAI HPLC

23/24

S. ANA+I1I1 *ERCO/AAN

Kromatograf Cair Kinerja Tinggi 9 KCKT ; ata# )*+C

a!ala- meto!e emisa-an komonen !alam lar#tan"er!asarkan #k#ran !an olaritas molek#ln$a. Fase gerak

!alam erco"aan ini a!ala- etanol !an a@#a!est( se!angkan

&ase !iamn$a a!ala- kolom. 'engan langka- kerja !aat

!ili-at a!a jo"s-eet kimia analitik instr#ment( *oliteknik

Negeri 1ri%ija$a.

'alam erco"aan ini( aliran kolom !alam &ase gerak

$ang !iinginkan !engan Lo% 3 ml , menit !an kami -an$amengg#nakan caeine se"agai "a-an #ji( !engan

mengasilkan %akt# retensi $ait# B(3B.

SI. KE1IM*U+AN3. Kromatograf Cair Kinerja Tinggi 9 KCKT ; ata# )*+C a!ala-

meto!e emisa-an komonen !alam lar#tan "er!asarkan

#k#ran !an olaritas molek#ln$a.=. Keolaran !aat memengar#-i retensi %akt#.

SII. 'AFTAR *U1TAKA3. Jo"s-eet *en#nt#n *raktik#m Kimia Analitik Instr#men(

J#r#san Teknik Kimia( *rogram 1t#!i ' IS Teknik Energi(

*oliteknik Negeri 1ri%ija$a( =73: , =73AR ALAT

7/24/2019 KAI HPLC

24/24

Alat Kromatograf Cair Kinerja Tinggi 9 KCKT ; , )*+C