(jacq.) sw.) terhadap kadar kolesterol total tikus … · sebelumnya. data kadar kolesterol total...

perpustakaan.uns.ac.id digilib.uns.ac.id

commit to user

PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK LABU SIAM (Sechium edule

(Jacq.) Sw.) TERHADAP KADAR KOLESTEROL TOTAL TIKUS

PUTIH (Rattus norvegicus) YANG DIBERI PAKAN

HIPERKOLESTEROLEMIK

SKRIPSI

Untuk Memenuhi Persyaratan

Memperoleh Gelar Sarjana Kedokteran

RIZKA DEWI PARAMITHA

G0007144

FAKULTAS KEDOKTERAN

UNIVERSITAS SEBELAS MARET

SURAKARTA

2010


commit to user

ii

DAFTAR ISI

PRAKATA .......................................................................................................... i

DAFTAR ISI ....................................................................................................... ii

DAFTAR TABEL .............................................................................................. iv

DAFTAR GRAFIK ............................................................................................ v

DAFTAR LAMPIRAN....................................................................................... vi

BAB I PENDAHULUAN .................................................................................. 1

A. Latar Belakang Masalah ................................................................... 1

B. Perumusan Masalah........................................................................... 3

C. Tujuan Penelitian .............................................................................. 3

D. Manfaat Penelitian ............................................................................ 4

BAB II LANDASAN TEORI............................................................................. 5

A. Tinjauan Pustaka .............................................................................. 5

1. Kolesterol ................................................................................... 5

2. Labu Siam ..................................................................................11

3. Peran Ekstrak Labu Siam dalam Menurunkan Kolesterol Total

Darah ......................................................................................... 13

B. Kerangka Berpikir ........................................................................... 20

C. Hipotesis .......................................................................................... 21

BAB III METODE PENELITIAN ................................................................... 22

A. Jenis Penelitian ................................................................................ 22

B. Lokasi Penelitian ............................................................................. 22


commit to user

ii

C. Subjek dan Besar Sampel Penelitian ............................................... 22

D. Teknik Sampling ............................................................................. 23

E. Identifikasi Variabel Penelitian ....................................................... 23

F. Definisi Operasional Variabel.......................................................... 24

G. Rancangan Penelitian ...................................................................... 30

H. Alat Yang Digunakan....................................................................... 31

I. Bahan Penelitian .............................................................................. 31

J. Jalannya Penelitian........................................................................... 32

K. Teknik Analisis Data ....................................................................... 34

BAB IV HASIL PENELITIAN ........................................................................ 36

BAB V PEMBAHASAN................................................................................... 42

BAB VI SIMPULAN DAN SARAN................................................................ 47

A. Simpulan........................................................................................... 47

B. Saran ................................................................................................. 47

DAFTAR PUSTAKA........................................................................................ 48

LAMPIRAN


commit to user

ii

DAFTAR TABEL

Tabel 4.1 Data Hasil Pengukuran Kadar Kolesterol Total Tikus Putih Sebelum

Diberi Perlakuan ………………………………………...……….... 36

Tabel 4.2 Data Hasil Pengukuran Kadar Kolesterol Total Tikus Putih Setelah

Diberi Perlakuan ………………………………………...……….... 37

Tabel 4.3 Data Hasil Pengukuran Kadar Kolesterol Total Tikus Putih Sebelum

dan Setelah Diberi Perlakuan………………………………………. 38

Tabel 4.4 Data Hasil Pengukuran Selisih Kadar Kolesterol Total Tikus Putih..39

Tabel 4.5 Hasil Uji Normalitas Saphiro-Wilk terhadap Rerata Selisih Kadar

Kolesterol Total……………………………………………………. 40

Tabel 4.6 Nilai Signifikansi Rerata Selisih Kadar Kolesterol Total Antar

Kelompok pada Uji Mann-Whitney …………………………….…. 41


commit to user

ii

DAFTAR GRAFIK

Grafik 4.1 Histogram Rerata Kadar Kolesterol Total Tikus Putih Sebelum dan

Setelah Diberi Perlakuan (mg/dl)……….……………………….....38

Grafik 4.2 Histogram Rerata Selisih Kadar Kolesterol Total Tikus Putih

(mg/dl)………………………………………………………………39


commit to user

ii

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1 Komposisi Pakan Pelet AD-2

Lampiran 2 Data Kadar Kolesterol Total Keempat Kelompok Perlakuan Pre

Test dan Post Test

Lampiran 3 Data Statistik Uji Deskriptif, Normalitas, dan Varians Selisih Kadar

Kolesterol Total Tiap Kelompok Sebelum dan Setelah Diberi

Perlakuan

Lampiran 4 Hasil Uji Kruskal-Wallis untuk Selisih Kadar Kolesterol Total Tiap

Kelompok Sebelum dan Setelah Diberi Perlakuan

Lampiran 5 Hasil Uji Mann-Whitney untuk Selisih Kadar Kolesterol Total Tiap

Kelompok Sebelum dan Setelah Diberi Perlakuan

Lampiran 6 Ethical Clearance


commit to user

ABSTRAK Rizka Dewi Paramitha, G0007144, 2010, Pengaruh Pemberian Ekstrak Labu Siam (Sechium edule (Jacq.) Sw.) terhadap Kadar Kolesterol Total Tikus Putih (Rattus norvegicus) yang Diberi Pakan Hiperkolesterolemik. Fakultas Kedokteran, Universitas Sebelas Maret, Surakarta. Latar Belakang: Penyakit kardiovaskuler, khususnya Penyakit Jantung Koroner (PJK) dan stroke adalah penyakit yang sangat mematikan. Salah satu upaya mencegah terjadinya PJK adalah dengan menurunkan kadar kolesterol total dalam darah. Tujuan : Untuk mengetahui pengaruh pemberian ekstrak Labu Siam (Sechium edule (Jacq.) Sw.) terhadap kadar kolesterol total tikus putih (Rattus norvegicus) yang diberi pakan hiperkolesterolemik Metode : Desain penelitian ini adalah pre and post test with control group, dilakukan di Laboratorium Biokimia Universitas Sebelas Maret Surakarta. Objek penelitian adalah tikus putih jantan strain Wistar sebanyak 28 ekor.. Tikus diberi pakan hiperkolesterolemik dan Propiltiourasil sebanyak dua kali sehari selama 7 hari dan diperiksa kadar kolesterol total pretest. Selama 21 hari berikutnya, diberi perlakuan pada kelompok I sebagai kontrol, kelompok II diberi ekstrak Labu Siam dosis 80 mg/200gr BB, kelompok III dengan dosis 160 mg/200gr BB, dan kelompok IV dengan dosis 240 mg/200gr BB, masing-masing perlakuan dua kali sehari. Pembuatan ekstrak Labu Siam menggunakan metode perkolasi. Semua tikus diperiksa kadar kolesterol total postest setelah dipuasakan 12 jam sebelumnya. Data kadar kolesterol total darah tikus dianalisis menggunakan uji Kruskal-Wallis dan Mann-Whitney dengan bantuan program SPSS for Windows versi 16. Hasil : Tidak terdapat perbedaan yang signifikan pada kadar kolesterol total tikus putih dalam 4 kelompok coba (p=0,006). Simpulan : Pemberian ekstrak Labu Siam (Sechium edule (Jacq.) Sw.) tidak dapat mencegah kenaikan kadar kolesterol total tikus putih (Rattus norvegicus) yang diberi pakan hiperkolesterolemik. Kata kunci : Ekstrak Labu Siam, kolesterol total, tikus putih.


commit to user

ABSTRACT Rizka Dewi Paramitha, G0007144, 2010, The Effect of Chayote Extract (Sechium edule (Jacq.) Sw.) on Total Cholesterol Level of White Rat (Rattus norvegicus). Medical Faculty, Sebelas Maret University, Surakarta. Background : Cardiovascular disease, especially coroner heart disease and stroke, is the most common death cause. Decreasing the level of total blood cholesterol is one of ways to prevent coroner heart disease. Objective:. To find the effect of Chayote Extract (Sechium edule (Jacq.) Sw.) on total cholesterol level of white rat (Rattus norvegicus) induced by hypercholesterolemic food. Methods: The design of this research is a pre and post test with control group, was done in Biochemistry Laboratorium of Sebelas Maret University, Surakarta, Indonesia. The research subjects are 28 white Wistar strain male rats. Rats were feed with hypercholesterolemic food and Propiltiourasil twice a day for 7 days and the cholesterol level were checked as pretest. For the next 21 days, induced to group I as control, group II induced by 80 mg/200gr BB of Chayote Extract, group III induced by 160 mg/200gr BB of Chayote Extract and group IV induced by 240 mg/200gr BB of Chayote Extract, twice a day for every inducing. The Chayote extraction used a percolation method. Then, the cholesterol level was checked as a posttest after the rats had a fasting for 12 hours before. The data of total blood cholesterol level of rats was analyzed with Kruskal-Wallis test and Mann-Whitney test with SPSS for Windows 16 version program. Result: The test shows there is not a significant total cholesterol level difference between 4 groups of rats (p= 0,006). Conclusion: The treatment of Chayote Extract (Sechium edule (Jacq.) Sw.) cannot prevent the increase of total cholesterol level of white rat (Rattus norvegicus) induced by hypercholesterolemic food.

Keywords : Chayote Extract, total cholesterol, white rats.


commit to user

BAB I

PENDAHULUAN

A. Latar Belakang Masalah

Penyakit kardiovaskuler, khususnya Penyakit Jantung Koroner (PJK) dan

stroke adalah penyakit yang sangat mematikan. Suatu survey yang dilakukan

Departemen Kesehatan RI tahun 1992 menyebutkan bahwa penyakit kardiovaskuler

menjadi penyebab kematian nomor satu di Indonesia (Rifqi, 2004). Tiap 34 detik

diperkirakan satu orang meninggal dunia karena penyakit ini (Siswono, 2005). Data

terakhir menyebutkan, hingga tahun 2010 penyakit kardiovaskuler merupakan

penyakit peringkat teratas penyebab kematian.

Proses dasar yang menyebabkan PJK adalah infiltrasi lemak pada arteri

koronaria yang dikenal sebagai aterosklerosis (Sargowo, 1998). Aterosklerosis adalah

penyakit arteri besar dan sedang di mana lesi lemak timbul pada permukaan dalam

dinding arteri. Penyebab utama aterosklerosis adalah konsentrasi kolesterol yang

tinggi dalam plasma darah atau hiperkolesterolemia. Sejauh ini tindakan preventif

utama untuk menurunkan hiperkolesterolemia adalah konsumsi diet rendah lemak.

Selain itu dapat juga menggunakan obat penurun kolesterol yang terjadi melalui

berbagai mekanisme (Guyton and Hall, 2007). Diperkirakan bahwa terapi obat

kombinasi dapat memberikan hasil terapi yang lebih bermakna dibandingkan dengan

pemberian obat tunggal. Namun terapi kombinasi dapat meningkatkan efek samping,


commit to user

intoleransi pasien, mempengaruhi compliance pasien, serta interaksi obat (Arif,

2008).

Selain dengan obat-obatan, juga terdapat terapi herbal untuk mengatasi

hiperkolesterol. Terapi herbal adalah penggunaan tanaman obat atas kemampuannya

untuk menyembuhkan penyakit (Parto, 2010). World Health Organization (WHO)

merekomendasikan penggunaan herbal karena dinilai lebih aman daripada

penggunaan obat modern karena herbal memiliki efek samping yang relatif lebih

sedikit dari pada obat modern (Kumalasari, 2006).

Beberapa tanaman yang berkhasiat menurunkan kolesterol adalah teh

(Camelia sinensis) dan Labu Siam (Sechium edule (Jacq.) Sw.). Salah satu tanaman

penurun kolesterol yang murah dan mudah didapat adalah Labu Siam. Labu Siam

diketahui memiliki efek diuretik, antioksidan, antimikroba, dan antihipertensi

(Astawan, 2007a). Berdasarkan penelitian sebelumnya, perasan Labu Siam dapat

dimanfaatkan sebagai penurun glukosa darah (Khikmawati, 2009). Khasiat lain

adalah ekstra Labu Siam dapat menurunkan kadar kolesterol total dan trigliserida

darah yang disebutkan Marlina dalam Agustini et al. (2006a). Labu Siam

mengandung saponin yang bermanfaat untuk menghambat dan mencegah penyerapan

kolesterol di dalam tubuh, dan alkaloid yang mampu memperlancar peredaran darah

sehingga mencegah penyakit stroke (Maryam, 2009). Selain itu, terdapat niasin yang

berfungsi menurunkan produksi kolesterol LDL (Low Density Lipoprotein) dan

trigliserida (Astawan, 2007b). Berdasarkan fakta-fakta tersebut maka dilakukan


commit to user

penelitian tentang pengaruh pemberian ekstrak Labu Siam (Sechium edule (Jacq.)

Sw.) terhadap kadar kolesterol total tikus putih (Rattus norvegicus) yang diberi pakan

hiperkolesterolemik.

B. Perumusan Masalah

1. Apakah pemberian ekstrak Labu Siam (Sechium edule (Jacq.) Sw.) dapat

mencegah kenaikan kadar kolesterol total tikus putih (Rattus norvegicus) yang

diberi pakan hiperkolesterolemik?

2. Adakah perbedaan pengaruh pemberian beberapa dosis ekstrak Labu Siam

(Sechium edule (Jacq.) Sw.) terhadap kadar kolesterol total tikus putih (Rattus

norvegicus) yang diberi pakan hiperkolesterolemik?

C. Tujuan Penelitian

1. Untuk mengetahui pengaruh pemberian ekstrak Labu Siam (Sechium edule

(Jacq.) Sw.) terhadap pencegahan kenaikan kadar kolesterol total tikus putih

(Rattus norvegicus) yang diberi pakan hiperkolesterolemik.

2. Untuk mengetahui perbedaan pengaruh pemberian beberapa dosis ekstrak Labu

Siam (Sechium edule (Jacq.) Sw.) terhadap kadar kolesterol total tikus putih

(Rattus norvegicus) yang diberi pakan hiperkolesterolemik.


commit to user

D. Manfaat Penelitian

1. Manfaat teoretis:

Penelitian ini diharapkan dapat memberikan bukti-bukti empiris atau

informasi tentang manfaat ekstrak Labu Siam (Sechium edule (Jacq.) Sw.)

terhadap pencegahan kenaikan kadar kolesterol total darah tikus putih (Rattus

norvegicus) yang diberi pakan hiperkolesterolemik.

2. Manfaat praktis

Penelitian ini dapat dijadikan dasar untuk mengolah Labu Siam menjadi

suatu bentuk yang mudah diambil manfaatnya guna mencegah kenaikan kadar

kolesterol darah yang menjadi faktor risiko penyakit kardiovaskuler.


commit to user

BAB II

LANDASAN TEORI

A. Tinjauan Pustaka

1. Kolesterol

a. Definisi dan Fungsi

Kolesterol merupakan lipid amfipatik yang menjadi komponen

struktural esensial yang membentuk membran sel dan lapisan luar

lipoprotein plasma (Mayes, 2009). Kolesterol diklasifikasikan menjadi

kolesterol endogen yang sintesisnya berasal dari tubuh sendiri dan

kolesterol eksogen yang didapat dari makanan.

1) Kolesterol endogen

Prekursor untuk sintesis kolesterol adalah asetil Ko-A sitosol.

Asetil Ko-A dihasilkan dari prekursor utamanya, glukosa dan asam

lemak, terutama di mitokondria, serta dibentuk juga dari katabolisme

asam amino (Marks et al., 2000). Semua jaringan yang mempunyai sel

berinti mampu mensintesis kolesterol khususnya hati, korteks adrenal,

kulit, usus, testis, aorta, fraksi mikrosom dan sitosol sel. Sintesa

kolesterol terjadi di sitoplasma sedangkan enzimnya terdapat dalam

retikulum endoplasma. Biosintesis kolesterol dapat dibagi menjadi


commit to user

lima tahap, yaitu: a) Asetil Ko-A membentuk HMG Ko-A dan

mevalonat, b) Mevalonat membentuk unit isopenoid yang aktif, c) Enam

unit isoprenoid membentuk skualen, d) Skualen dikonversi menjadi

lanosterol, e) Lanosterol dikonversi menjadi kolesterol (Mayes, 2009).

2) Kolesterol eksogen

Jenis-jenis makanan yang banyak mengandung kolesterol antara

lain daging (sapi maupun unggas), susu dan produk olahannya.

Sebagian kolesterol yang terkandung dalam produk hewani ini terdapat

dalam bentuk ester kolesterol sehingga lipase yang diaktifkan garam

empedu mengkatalisis reaksi hidrolisis ester kolesterol, ester vitamin

yang larut dalam lemak, fosfolipid dan trigliserida (Ganong, 2002).

Kolesterol siap diserap dari usus halus jika terdapat empedu dan getah

pankreas. Kolesterol diubah melalui proses esterifikasi menjadi

kolesterol bebas dan asam lemak dengan katalisator kolesterol esterase

(Gropper, et al., 2005). Saat lipid masuk usus halus, kandung empedu

berkontraksi dan mensekresi empedu yang diproduksi oleh hati.

Empedu mengemulsi partikel lemak sampai enzim pencerna lemak dari

pankreas mengubahnya menjadi partikel yang lebih kecil untuk diserap

(Sizer and Whitney, 2006). Partikel hasil digesti lipid yang bercampur

dengan garam empedu membentuk agregat polimolekuler yang disebut

misel (Gropper, et al., 2005). Pembentukan misel selanjutnya


commit to user

melarutkan lipid dan memungkinkan mekanisme transportnya ke

enterosit. Misel bergerak ke konsentrasi yang lebih rendah ke brush

border sel-sel mukosa. Hampir semua kolesterol yang diserap

tergabung dalam kilomikron yang masuk ke sirkulasi melalui aliran

limfatik (Ganong, 2002).

Hepar merupakan tempat metabolisme utama kolesterol.

Kolesterol di hepar berasal dari sintesis di hepar sendiri dan dari

plasma. Kolesterol plasma berasal dari diet maupun dari jaringan

perifer. Sebagian kolesterol akan disimpan dalam bentuk kolesterol

ester dan sebagian lagi akan dikatabolisme menjadi asam empedu,

disekresi ke dalam empedu sebagai kolesterol bebas atau disekresi ke

dalam bentuk lipoprotein (Grundy, 1978).

Sebagian kolesterol hepar akan dibawa ke jaringan perifer

untuk memenuhi kebutuhan jaringan-jaringan tersebut. Kolesterol

memerlukan lipoprotein untuk transpor dalam plasma, karena sifatnya

yang tidak larut air (Mayes, 2009).

Ada 4 kelompok besar lipoprotein yang penting (Mayes, 2009),

yaitu:

a) Kilomikron

Kilomikron berasal dari penyerapan triasilgliserol di dalam

usus. Kilomikron hanya ditemukan di dalam chylus yang dibentuk


commit to user

oleh cairan limfatik. Kilomikron bertanggung jawab dalam

transportasi lipid dari makanan ke saluran darah (Mayes, 2009).

b) Very Low Density Lipoprotein (VLDL)

Very Low Density Lipoprotein (VLDL) disintesis dan

disekresikan oleh hepar. Very Low Density Lipoprotein (VLDL)

merupakan alat pengangkut triasilgliserol dari hepar ke jaringan di

luar hepar (ekstrahepatik) (Mayes, 2009).

c) Low Density Lipoprotein (LDL)

Low Density Lipoprotein merupakan derivat dari VLDL.

Perubahan VLDL menjadi LDL terjadi dengan adanya enzim-

enzim tertentu. (Mayes,2009).

d) High Density Lipoprotein (HDL)

High Density Lipoprotein disintesis dalam hepar dan usus dari

zat bakal yang mengandung fosfolipid, kolesterol bebas dan

apoprotein HDL yaitu apoprotein A, apoprotein C dan apoprotein

E (Mayes, 2009). Fungsi utama HDL dalam sirkulasi yaitu sebagai

reservoir apoprotein C dan E yang diperlukan untuk metabolisme

kilomikron dan VLDL (Mayes, 2009). Fungsi lain adalah sebagai

scavenger kelebihan kolesterol bebas dan fosfolipid, serta sebagai

media transpor kolesterol bebas dari jaringan perifer ke hepar

untuk dikatabolisasi dan diekskresi (Miller, 1987).


commit to user

b. Metabolisme kolesterol

Kolesterol diangkut oleh lipoprotein plasma dan proporsi terbesar

kolesterol terdapat dalam LDL. Kolesterol akan diangkut ke dalam

plasma oleh VLDL yang terbentuk di hati (Montgomery, et al., 1993).

Very Low Density Lipoprotein (VLDL) akan mengalami hidrolisis oleh

lipoprotein lipase segera setelah keluar dari hepar dan masuk ke dalam

sirkulasi, sehingga akan kehilangan sebagian trigliserida dan terbentuklah

Intermediate Density Lipoprotein (IDL/VLDL remnant). Intermediate

Density Lipoprotein (IDL) akan mengalami hidrolisis lagi dan

terbentuklah LDL. Low Density Lipoprotein (LDL) kemudian akan

diambil oleh reseptor LDL dalam hepar dan jaringan ekstrahepatik.

Pengambilan LDL dari sirkulasi terutama melalui reseptor LDL di

permukaan sel. Hampir semua jaringan tubuh mampu mensintesis

reseptor LDL dan hepar merupakan organ dengan tingkat aktivitas

reseptor paling tinggi. Kolesterol bebas dikeluarkan dari jaringan oleh

HDL dan kemudian diangkut ke hati (Murray, et al., 2003). HDL yang

telah diambil oleh hepar akan diekskresikan dalam bentuk asam empedu

dan kolesterol, yang melengkapi proses transpor balik kolesterol (Brewer,

2004). Transformasi kolesterol menjadi asam empedu hanya terjadi


commit to user

dalam hepar. Asam empedu tersebut akan masuk ke duodenum dan

digunakan dalam pencernaan makanan. Sebagian besar asam empedu

(98%-99%) akan direabsorbsi melalui ileum dan selanjutnya akan

mengikuti sirkulasi enterohepatik atau digunakan lagi dalam pencernaan

makanan. Asam empedu yang tidak direabsorbsi akan dibuang bersama-

sama feses (Mayes, 2009). Ekskresi kolesterol dalam feses melalui

bentuk: 1) Sterol netral yang dipengaruhi oleh enzim-enzim bakteri usus

2) Garam empedu (Montgomery, et al., 1993).

c. Peranan kolesterol terhadap kejadian aterosklerosis

Aterosklerosis merupakan penyakit terbentuknya plak di dinding arteri

besar sehingga mempersempit lumen pembuluh darah tersebut, aliran

darah menjadi terganggu serta menurunkan elastisitas pembuluh darah

tersebut. Aterosklerosis terbentuk oleh akumulasi lipoprotein di dalam

intima pembuluh darah arteri, adhesi monosit di dalam endotelium arteri,

dan migrasi monosit ke intima arteri yang merupakan respons terhadap

rangsang kemotaktik. Pada tahap berikutnya, sel otot halus bermigrasi

dari tunika media arteri ke intima, kemudian terjadi proliferasi dan

akumulasi kolesterol (Marks, et al., 2000). Jika aterosklerosis terjadi di

dalam arteri ke otak (arteri karotid) maka dapat terjadi stroke, sedangkan

jika terjadi di dalam arteri yang menuju ke jantung (arteri koroner) dapat

terjadi PJK (Oentoro, 2007).


commit to user

2. Labu Siam

a. Taksonomi

Kingdom : Plantae (Tumbuhan)

Subkingdom : Tracheobionta (Tumbuhan berpembuluh)

Super Divisi : Spermatophyta (Menghasilkan biji)

Divisi : Magnoliophyta (Tumbuhan berbunga)

Kelas : Magnoliopsida (berkeping dua / dikotil)

Sub Kelas : Dilleniidae

Ordo : Violales

Famili : Cucurbitaceae (suku labu-labuan)

Genus : Sechium

Spesies : Sechium edule (Jacq.) Sw.

(Plantamor, 2008).

b. Morfologi

Habitus Labu Siam berupa perdu dan merambat. Batangnya

lunak, beralur, banyak cabang, terdapat pembelit berbentuk spiral,

kasap, dan berwarna hijau. Daunnya tunggal, bentuk jantung, tepi

bertoreh, ujung meruncing, pangkalnya runcing, kasap, panjang 4-

25 cm, lebar 3-20 cm, tangkai panjang, pertulangan menjari, dan


commit to user

berwarna hijau. Bunga merupakan bunga majemuk, berada di

ketiak daun, kelopak bertaju lima, mahkota beralur, benang sari

lima, kepala sari berwarna jingga, putik satu, dan berwarna kuning.

Buah berbentuk buni bulat, menggantung, permukaan berlekuk, dan

berwarna hijau keputih-putihan. Biji berbentuk pipih, berkeping

dua, dan berwarna putih. Akar berupa akar tunggang, dan berwarna

putih kecoklatan (Backer and Van Den Brink, 1968).

c. Komponen

Seratus gram Labu Siam mengandung zat-zat antara lain:

Energi 17 kkal, protein 0,82 gr, lemak 0,13 gr, karbohidrat 3,9 gr,

serat 1,7 gr, gula 1,85 gr, kalsium 17 mg, besi 0,34 mg, magnesium

12 mg, fosfor 18 mg, kalium 125 mg, atrium 2 mg, seng 0,74 mg,

tembaga 0,12 mg, mangan 0,19 mg, selenium 0,2 mg, vitamin C 7,7

mg, tiamin 0,03 mg, riboflavin 0,03 mg, niasin 0,47 mg, vitamin B6

0,08 mg, folat 93 mkg, vitamin E 0,12 mkg, vitamin K 4,6 mkg

(Astawan, 2007), serta mengandung saponin 1,65%, alkaloida

1,57%, dan flavonoid 0,95% (Pramono, 2005). Labu Siam

mempunyai kegunaan sebagai penurun tekanan darah, mempunyai

efek diuretik, dapat menyembuhkan gangguan sariawan, panas

dalam, demam pada anak-anak serta baik digunakan oleh penderita

asam urat dan diabetes mellitus. Labu Siam juga memiliki efek


commit to user

antioksidan, antimikrobial, diuretik, antihipertensi, dan

hipokolesterol. Selain itu Labu Siam mempunyai efek hipoglikemik

(Khikmawati, 2009).

3. Peran Ekstrak Labu Siam dalam Menurunkan Kolesterol Total Darah

Ekstrak Labu Siam mengandung beberapa bahan aktif yang dapat

menurunkan kadar kolesterol total darah, antara lain:

a. Saponin

Saponin adalah glikosida yang setelah dihidrolisis akan

menghasilkan gula (glikon) dan sapogenin (aglikon). Senyawa sapogenin

mempunyai bagian bukan gula yang larut dalam lemak dan bagian gula

yang larut dalam air. Sebagian besar saponin mudah bergabung dengan

kolesterol yang menyebabkan rendahnya aktifitas saponin, rasa pahit dan

memiliki sifat yang berbusa. Saponin membentuk molekul kompleks

dengan berbagai senyawa 3β-hidroksisteroid. Reseptor yang berupa 3β-

hidroksisteroid termasuk kolesterol membran merupakan tempat aktivitas

hemolitik saponin. Saponin mampu berikatan dengan berbagai senyawa

3β-hidroksisteroid dan membentuk molekul kompleks yang sulit untuk

dipisahkan (Widodo, 2010).

Terbentuknya molekul kompleks saponin-kolesterol menyebabkan

terganggunya organisasi dalam sel karena pelepasan ikatan normal antara

kolesterol dan fosfolipida dalam membran. Saponin dapat membentuk


commit to user

senyawa kompleks dengan kolesterol yang kokoh ikatannya. Hal ini

dapat dibuktikan dengan terjadinya penurunan kolesterol dalam jaringan

dan dalam darah, maupun penurunan absorpsi kolesterol dan peningkatan

ekskresi kolesterol dalam feses. Saponin juga dapat terikat dengan

garam-garam empedu yang diperlukan untuk proses absorpsi kolesterol

atau karena permukaan golongannya menjadi aktif, dapat juga

menyebabkan garam-garam empedu menjadi terhimpit yang akhirnya

menjadi polisakarida dalam otot. Pengaruh saponin terhadap rendahnya

kolesterol darah akan menghalangi penyerapan kolesterol kembali setelah

dikeluarkan dari empedu sehingga meningkatkan asam empedu dan sterol

netral pada feses (Widodo, 2010).

b. Niasin

Niasin merupakan derivat asam monokarboksilat dari pirimidin.

Bentuk aktif dari niasin adalah Nikotinamida Adenin Dinukleotida

(NAD+) dan Nikotinamida Adenin Dinukleotida Phosphat (NADP+)

yang merupakan komponen penting dalam lintasan metabolik yang

melibatkan karbohidrat, lipid serta asam amino. Niasin menurunkan

kadar kolesterol plasma melalui inhibisi aliran asam lemak bebas dari

jaringan adiposa yang mengurangi pembentukan lipoprotein yang

membawa kolesterol, yaitu VLDL, IDL, LDL, yang pada akhirnya dapat

menurunkan kadar kolesterol total dalam darah (Tika, 2002).


commit to user

c. Alkaloid

Alkaloid secara umum mengandung paling sedikit satu buah atom

nitrogen yang bersifat basa dan merupakan bagian dari cincin

heterosiklik. Kebanyakan alkaloid berbentuk padatan kristal. Alkaloid

dapat juga berbentuk amorf atau cairan (Putra, 2007). Kandungan

alkaloid memiliki efek menghambat aktivitas enzim lipase, sehingga

dapat menghambat pemecahan lemak menjadi molekul-molekul lemak

yang lebih kecil. Hal ini mengakibatkan terjadinya pengurangan jumlah

lemak yang dapat diabsorpsi (Agustina, 2009).

d. Vitamin A

Secara garis besar, senyawa vitamin A dibagi menjadi dua, yaitu

preformed vitamin A (vitamin A, retinoid, retinol, dan derivatnya) dan

provitamin A (karotenoid/karoten dan senyawa sejenis) yang merupakan

prekursor vitamin A (Dewoto, 2007). Dalam Labu Siam itu sendiri,

vitamin A yang terkandung didapat dalam bentuk karoten (Mélo, et al.,

2006)

Vitamin A berperan dalam melindungi endotelium dan juga

merupakan antioksidan yang dapat melindungi peroksidasi lemak.

Vitamin A dapat melindungi kejadian agregasi platelet, mempengaruhi

transpor oksigen dan penggunaannya, meningkatkan HDL dan

meningkatkan kemampuan asam nikotinat dalam menurunkan lipid


commit to user

darah. Vitamin A dapat berperan dalam pencegahan primer terhadap

kelainan metabolisme yang merupakan penyebab hiperlipoproteinemia,

dan dapat pula berperan dalam pencegahan sekunder utuk mengurangi

lipid darah yang dapat menyebabkan risiko aterogenesis (Herman,

1991).

e. Vitamin C

Vitamin C atau asam askorbat mula-mula dikenal sebagai asam

heksuronat dengan rumus C6H8O6. Vitamin C bekerja sebagai suatu

koenzim dan pada keadaan tertentu merupakan reduktor dan antioksidan

(Dewoto, 2007).

Dalam metabolisme kolesterol, vitamin C berperan meningkatkan

laju ekskresi kolesterol dalam bentuk asam empedu, meningkatkan

kadar HDL, dan berfungsi sebagai pencahar sehingga meningkatkan

pembuangan kotoran. Pada gilirannya, hal ini akan menurunkan

penyerapan kembali asam empedu dan pengubahannya menjadi

kolesterol (Sotyaningtyas, 2007).

Vitamin C dapat menurunkan kolesterol dan trigliserida pada

sejumlah orang yang biasanya memiliki kadar kolesterol dan trigliserida

tinggi. Namun, sayangnya hal itu tidak berlaku pada orang dengan kadar

kolesterol dan trigliserida normal. Jadi, rupanya vitamin C berperan


commit to user

menjaga keseimbangan (homeostasis) di dalam tubuh (Sotyaningtyas,

2007).

f. Flavonoid, Polifenol, dan Proantosianidin

Senyawa flavonoid adalah suatu kelompok senyawa fenol yang

terbesar yang ditemukan di alam, serta berpotensi sebagai antioksidan

dan mempunyai bioaktivitas sebagai obat (Rohyami, 2008).

Kemampuan flavonoid sebagai antioksidan tergantung pada struktur

molekulnya. Posisi rantai hidroksil pada flavonoid penting untuk

perannya sebagai antioksidan dan untuk mengatasi aktivitas radikal

bebas (Buhler and Cristobal, 2000). Berdasarkan penelitian, flavonoid

dapat menangkap radikal bebas dan dapat mencegah proses peroksidasi

lipid di mikrosom dan liposom (Peng and Kuo, 2003).

Fenol adalah senyawa dengan suatu gugus OH yang terikat pada

cincin aromatik. Senyawa fenolik dalam tumbuhan dapat berupa fenol

sederhana, antraquinon, asam fenolat, kumarin, lignin, tanin, dan

proantosianidin (Rohyami, 2008; Pratimasari, 2009). Senyawa polifenol

dan proantosianidin memiliki aktivitas antioksidan yang berfungsi dalam

menangkal radikal bebas serta mencegah proses oksidasi LDL (Mélo, et

al., 2006). Polifenol memiliki andil dalam menurunkan sekresi

lipoprotein yang terdapat di hepar dan usus. Polifenol yang terdapat

mengurangi proses esterifikasi kolesterol sehingga terjadi penurunan


commit to user

kadar ester kolesterol, dimana ester kolesterol merupakan komponen

pembentuk utama kilomikron dan VLDL. Efek lain dari polifenol adalah

menghambat sintesis Apo B-48 dan Apo B-100 yang disintesis di dalam

enterosit dan hepar. Kadar Apo B-48 dan Apo B-100 yang menurun

menyebabkan pembentukkan kilomikron, VLDL, IDL, dan LDL

terganggu sehingga kadar trigliserida darah juga menurun (Vidal, et al.,

2007).

Proantosianidin menghambat absorbsi kolesterol melalui

penghambatan pembentukan misel. Proantosianidin menurunkan

aktivitas enzim HMG-KoA reduktase sehingga proses produksi VLDL

di hati turun dan aliran VLDL yang keluar dari hati berkurang.

Akibatnya, produksi kolesterol total, LDL, trigliserida plasma menurun

(Yoko, et al., 2005).

g. Serat Larut (Pektin) dan Serat Tidak Larut

Serat adalah bagian dari tanaman yang tidak dapat diserap oleh

tubuh. Serat makanan, terutama yang terdiri dari selulosa, hemiselulosa,

dan lignin sebagian besar tidak dapat dihancurkan oleh enzim-enzim dan

bakteri di dalam traktus digestivus. Di samping menyerap air, serat

makanan juga menyerap asam empedu sehingga proses pencernaan

lemak akan terhambat. Serat makanan dapat berikatan dengan garam


commit to user

asam lemak di dalam usus halus, dan kemudian dilepaskan untuk kerja

bakteri di dalam kolon (Kusharto, 2006).

Pektin merupakan serat makanan yang dapat larut, yang diketahui

dapat mencegah hiperkolesterol, kanker usus besar, dan diabetes. Efek

pektin yang terpenting adalah penurunan absorbsi asam-asam empedu

(Agustini, et al., 2006). Pektin menstimulasi ekskresi lipid melalui

pembuangan kolesterol dan koprostanol, peningkatan oksidasi

kolesterol melalui efek induksi pada enzim 7α-hidroksilase dan

mengurangi absorbsi lemak di dalam usus (Aprikian, et al., 2003).


commit to user

B. Kerangka berpikir

Menurunkan kadar

kolesterol total darah

Meningkatkan ekskresi kolesterol

Labu Siam

Saponin

Senyawa saponin berikatan dengan garam

empedu

Senyawa saponin berikatan kuat dengan

senyawa 3b-hidroksisteroid

Menurunkan absorbsi kolesterol

Niasin

Alkaloid

Menurunkan aliran asam lemak dari jaringan adiposa

Menghambat aktivitas enzim lipase

Vitamin C Menurunkan absorbsi kembali asam empedu

Menaikkan kadar HDL

Vitamin A Meningkatkan

kemampuan niasin dalam menurunkan lipid darah

Mencegah peroksidasi lipid di mikrosom

Flavonoid

Proantosianidin Menurunkan aktivitas

enzim HMG-KoA reduktase

Berikatan dengan asam empedu

Menurunkan absorbsi kolesterol

Polifenol

Serat

Menurunkan sintesis Apo B-48 dan Apo B-100

Menurunkan VLDL,LDL, dan

kilomikron

Berikatan dengan asam lemak di dalam usus

Menyerap asam empedu

Pektin

Faktor lain yang dapat menghambat penurunan kadar kolesterol : stress, penyakit hati, makanan, hormon, genetik, jenis kelamin, varietas Labu Siam

Faktor lain yang dapat memicu penurunan kadar kolesterol : psikologis, makanan, genetik, jenis kelamin, varietas Labu Siam


commit to user

Keterangan Gambar:

: kandungan zat di dalam tubuh

: menimbulkan efek

Beberapa kandungan zat di dalam Labu Siam bekerja di dalam tubuh dengan

mekanisme tertentu. Misalnya pada saponin dan serat, kedua zat tersebut bekerja

dengan cara menurunkan absorbsi kolesterol dan meningkatan ekskresi kolesterol.

Sedangkan niasin menurunkan aliran asam lemak dari jaringan adiposa. Dari

keseluruhan mekanisme tersebut menyebabkan penurunan kadar kolesterol total

darah.

C. Hipotesis

1. Pemberian ekstrak Labu Siam (Sechium edule (Jacq.) Sw.) dapat mencegah

kenaikan kadar kolesterol total tikus putih (Rattus norvegicus) yang diberi

pakan hiperkolesterolemik.

2. Ada perbedaan pengaruh pemberian beberapa dosis ekstrak Labu Siam

(Sechium edule (Jacq.) Sw.) terhadap kadar kolesterol total tikus putih (Rattus

norvegicus) yang diberi pakan hiperkolesterolemik.


commit to user

BAB III

METODE PENELITIAN

A. Jenis Penelitian

Penelitian ini bersifat experimental laboratorium dengan menggunakan

rancangan penelitian pre and post test control group design.

B. Lokasi Penelitian

Penelitian dilakukan di Laboratorium Biokimia Fakultas Kedokteran

Universitas Sebelas Maret Surakarta.

C. Subjek dan Besar Penelitian

1. Tikus putih dengan kriteria galur Wistar, jantan, berumur kira-kira 3 bulan

dengan berat badan kira-kira 200 gram. Tikus putih diperoleh dari

Laboratorium Penelitian dan Pengujian Terpadu (LPPT) Universitas

Gadjah Mada Yogyakarta.

2. Besarnya sampel ditentukan dengan menggunakan Rumus Federer, dengan

perhitungan sebagai berikut:

Rumus Federer : (n-1) (t-1) > 15

n : besar sampel

t : jumlah kelompok


commit to user

Jadi besarnya sampel yang diperlukan, menurut rumus Federer:

(n-1) (t-1) > 15 ; t = 4

(n-1) (4-1) > 15

3n-3 > 18

n > 6

Jumlah sampel harus lebih besar dari 6 ekor tikus tiap kelompok.

Dalam penelitian ini, setiap kelompok terdiri dari 7 ekor tikus, sehingga

besarnya sampel menjadi 28 ekor tikus.

D. Teknik Sampling

Pengambilan sampel sebanyak 28 ekor tikus jantan dilakukan secara

purposive random sampling, dengan kriteria tikus jantan, galur Wistar, sehat

dan mempunyai aktivitas normal, tidak kawin, berumur 3 bulan dengan berat

badan kira-kira 200 gram. Dua puluh delapan ekor tikus putih tersebut dibagi

menjadi 4 kelompok dengan cara random sampling, tiap-tiap kelompok terdiri

atas 7 ekor tikus putih. Kelompok I sebagai kelompok kontrol sedangan

kelompok II, III dan IV sebagai kelompok perlakuan.

E. Identifikasi Variabel Penelitian

1. Variabel bebas : Ekstrak Labu Siam.

2. Variabel terikat : Kadar kolesterol total darah tikus putih


commit to user

3. Variabel luar

a. Dapat dikendalikan : Makanan, minuman, genetik tikus

putih, jenis kelamin tikus putih,

varietas Labu Siam.

b. Tidak dapat dikendalikan : Kondisi psikologis (stress), hormon,

penyakit hati.

F. Definisi Operasional Variabel

1. Variabel Bebas

Ekstrak Labu Siam

Ekstrak Labu Siam adalah hasil ekstraksi buah labu yang menggunakan

beberapa metode pada prosesnya. Dalam penelitian ini, digunakan metode

perkolasi. Metode perkolasi adalah penyarian zat aktif yang dilakukan

dengan cara serbuk simplisia, yaitu bahan baku alamiah setelah

dikeringkan, yang dimaserasi selama 3 jam, kemudian simplisia

dipindahkan ke dalam bejana silinder yang bagian bawahnya diberi sekat

berpori, cairan penyari dialirkan dari atas ke bawah melalui simplisia

tersebut, cairan penyari akan melarutkan zat aktif dalam sel-sel simplisia

yang dilalui sampai keadaan jenuh (Utami, 2009). Ekstrak kasar hasil

perkolasi yang berbentuk semisolid diencerkan dalam air dengan dosis

yang berbeda-beda. Pada penelitian ini digunakan 3 dosis ekstrak yaitu 80

mg/200gr BB (dosis terapi), 160 mg/200gr BB (2 kali dosis terapi), dan


commit to user

240 mg/200gr BB (3 kali dosis terapi) untuk diuji pengaruhnya pada kadar

kolesterol total. Ekstrak Labu Siam diperoleh dari Laboratorium Penelitian

dan Pengujian Terpadu (LPPT) Universitas Gadjah Mada Yogyakarta

sehingga dapat dikendalikan.

Skala data: ordinal.

2. Variabel Terikat

Kadar Kolesterol Total Darah

Yang dimaksud dengan kadar kolesterol total darah adalah kadar

kolesterol total darah hewan uji yang diukur dengan alat spectofotometry,

setelah subjek dipuasakan selama 12 jam dengan satuan mg/dl. Pengukuran

kadar kolesterol total dapat dilakukan dengan mengambil darah tikus putih

melalui sinus orbitalis dengan pipet mikro hematokrit, lalu darah

ditampung dalam tabung sentrifuge. Setelah itu, diperiksa kadar kolesterol

totalnya di laboratorium klinik.

Skala data: rasio.

3. Variabel Luar

a. Dapat Dikendalikan


commit to user

1) Makanan

Makanan merupakan nutrisi yang diperlukan makhluk hidup

untuk mempertahankan metabolisme hidupnya. Makanan dapat

mempengaruhi kadar kolesterol total tikus. Cara pengendaliannya

adalah pengaturan pakan tikus. Selama masa adaptasi 7 hari dan

perlakuan selama 21 hari setelah masa adaptasi, semua kelompok tikus

diberikan makanan standar yaitu pelet standar AD-2.

2) Genetik Tikus Putih

Faktor genetik adalah riwayat keturunan sifat fenotipe dan genotipe

suatu organisme (Aji, 2005). Faktor genetik mempunyai peran dalam

menentukan kadar kolesterol dan tidak dapat dikendalikan secara

mutlak. Hal ini diatasi dengan pemilihan subjek penelitian yang

berasal dari galur yang sama (galur Wistar) dan menggunakan sistem

randomisasi sehingga diharapkan distribusi dari faktor genetik ini

merata pada tiap kelompok penelitian.

3) Jenis Kelamin Tikus Putih

Jenis kelamin merupakan perbedaan sistem reproduksi pada

makhluk hidup. Penelitian ini menggunakan tikus putih (Rattus

norvegicus) jantan supaya sampel bersifat homogen serta menghindari

adanya pengaruh hormon esterogen. Hormon esterogen pada tikus


commit to user

betina dapat berpengaruh terhadap penurunan kadar kolesterol total

darah (Shin, et al., 2005).

4) Varietas Labu Siam

Varietas merupakan keanekaragaman hayati pada organisme.

Varietas dapat mempengaruhi kadar kandungan zat aktif dari Labu

Siam. Varietas Labu Siam dapat dikendalikan dengan cara

menggunakan Labu Siam yang diambil dari tempat yang sama, yaitu

LPPT Universitas Gadjah Mada Yogyakarta.

b. Tidak Dapat Dikendalikan

1) Kondisi psikologis

Kondisi psikologis merupakan status mental yang dimiliki

makhluk hidup. Kondisi psikologi tikus dapat dipengaruhi oleh

perlakuan yang berulang kali. Keadaan stress memacu produksi

hormon epinefrin, norepinefrin, kortikotropin dan glukokortikoid

yang akan mengaktifkan hormon peka lipase trigliserid yang

memecah trigliserid dan meningkatkan asam lemak bebas (Guyton

and Hall, 2007). Pengaruh ini dapat dikurangi dengan adanya waktu

adaptasi sebelum percobaan dan pemisahan subjek penelitian dalam

kandang yang terpisah.

2) Hormon


commit to user

Hormon merupakan zat kimiawi dalam darah yang bekerja pada

target organ tertentu. Sistem hormon berpengaruh pada pengaturan

kadar kolesterol darah. Hormon yang berpengaruh terhadap

metabolisme kolesterol salah satunya adalah hormon tiroid. Hormon

sensitif lipase akan diaktifkan oleh hormon tiroid sehingga proses

katabolisme lipid dalam tubuh tikus tinggi (Mayes, 2009). Induksi

hiperkolesterol dengan pakan hiperkolesterolemik dipermudah

dengan menurunkan aktivitas hormon tiroid tikus putih dengan

menggunakan propiltiourasil. Propiltiourasil (PTU) adalah zat kimia

yang dapat menekan aktivitas kelenjar tiroid (Marina, 1994).

Hotimah dalam Hardiningsih dan Nurhidayat (2006) menyebutkan

bahwa pemberian propiltiourasil (PTU) ke dalam ransum tikus dapat

meningkatkan konsentrasi kolesterol serum tikus. PTU diberikan

dengan dosis 0,5 mg/kg BB (Hardiningsih dan Nurhidayat, 2006),

setara dengan 0,1 mg/200gr BB. Pengendalian hormon tiroid

dilakukan dengan pemberian PTU, namun tidak sepenuhnya karena

tidak dilakukan pengukuran kadarnya, apakah status eutiroid sudah

tercapai atau belum.


commit to user

3) Penyakit hati

Penyakit hati adalah gangguan pada sistem metabolisme pada

hepar yang dapat menimbulkan kelainan pada kadar kolesterol

karena hepar merupakan tempat metabolisme kolesterol. Penyakit

hati pada tikus merupakan variabel yang tidak sepenuhnya dapat

dikendalikan karena sulitnya pendeteksian dini dan membutuhkan

pemeriksaan yang membutuhkan biaya besar. Namun, untuk

mengurangi pengaruh faktor penyakit hati dapat dipilih tikus yang

sehat dan aktif.


commit to user

28 ekor tikus putih sesuai dengan kriteria penelitian

Dipuasakan 12 jam

Post test kadar kolesterol darah



Uji Statistik

Dipuasakan 12 jam Dipuasakan 12 jam Dipuasakan 12 jam

Dipuasakan 12 jam Dipuasakan 12 jam Dipuasakan 12 jam

G. Rancangan Penelitian

Rancangan penelitian pre and post test control group design.

Dikelompokkan menjadi empat kelompok dengan cara purposive random sampling

Kel. I Kel. II Kel. III Kel. IV 7 ekor tikus 7 ekor tikus 7 ekor tikus 7 ekor tikus diadaptasikan 7 hari diadaptasikan 7 hari diadaptasikan 7 hari diadaptasikan 7 hari Induksi Induksi Induksi Induksi

hiperkolesterolemik+PTU hiperkolesterolemik+PTU hiperkolesterolemik+PTU hiperkolesterolemik+PTU 7 hari 7 hari 7 hari 7 hari

Dipuasakan 12 jam

Pre test Pre test Pre test Pre test

kadar kolesterol darah kadar kolesterol darah kadar kolesterol darah kadar kolesterol darah

Kel.I Kel.II Kel.III Kel.IV Hiperkolesterolemik Hiperkolesterolemik Hiperkolesterolemik Hiperkolesterolemi +PTU dan diberi ekstrak dan diberi ekstrak dan diberi ekstrak

Labu Siam Labu Siam Labu Siam Diberi perlakuan 80mg/200gBB+PTU 160mg/200gBB+PTU 240mg/200gBB+PTU selama 21 hari Diberi perlakuan Diberi perlakuan Diberi perlakuan selama 21 hari selama 21 hari selama 21 hari



commit to user

H. Alat yang Digunakan

1. Kandang hewan percobaan beserta kelengkapan pemberian pakan dan

minum

2. Gelas ukur

3. Pipet tetes

4. Pipet volume

5. Cawan petri

6. Timbangan

7. Tabung centrifuge

8. Centrifuge

9. Pipa kapiler

10. Spuit needle feeding

11. Rak tabung reaksi

I. Bahan Penelitian

1. Makanan dan minuman hewan uji (pelet dan air putih)

2.Pakan hiperkolesterolemik (serbuk kolesterol, kuning telur itik, minyak

babi, minyak goreng)

3. Ekstrak Labu Siam

4. Propiltiourasil (PTU) 0,1 mg


commit to user

J. Jalannya Penelitian

1. Tikus putih sebanyak 28 ekor, dikelompokkan dalam empat kelompok

secara purposive random sampling, masing-masing kelompok terdiri dari 7

ekor tikus lalu dimasukkan ke dalam kandang, diadaptasikan dengan

lingkungan Laboratorium Biokimia Fakultas Kedokteran UNS selama tujuh

hari, diberi makan pelet dan air matang.

2. Setelah diadaptasikan selama seminggu, pada hari ke-8 semua tikus

diinduksi pakan hiperkolesterolemik berupa campuran homogen yang

mengandung 5 ml kuning telur itik, 10 ml minyak babi, 1 ml minyak kelapa,

dan 0,1 gram serbuk kolesterol untuk menaikkan kolesterolnya sampai hari

ke-14.

3. Pada hari ke-14 semua subyek diambil darah untuk pemeriksaan kadar

kolesterol total darah pre test. Semua tikus dipuasakan selama 12 jam

sebelum diambil darahnya. Pengambilan darah dilakukan dengan cara

menusukkan pipa kapiler di daerah saccus medianus orbitalis kemudian

darah akan mengalir di dalam pipa kapiler dan dimasukkan ke dalam tabung

centrifuge. Darah dipusingkan selama 10-15 menit dengan kecepatan 3000

rpm sehingga didapatkan serum darah untuk diperiksa kadar kolesterol total

pre test. Perbedaan rerata kadar kolesterol total pre test dianalisis

menggunakan uji ANOVA.


commit to user

4. Pada hari ke-15, keempat kelompok diberikan perlakuan sebagai berikut:

Kelompok I : diinduksi pakan hiperkolesterolemik 2,5 ml dan

minuman berupa air matang yang dicampur PTU 0,1

mg dalam 0,5 cc air secara oral dengan menggunakan

sonde lambung sebanyak dua kali sehari (pukul 07.00

dan 15.00) sampai hari ke-35.

Kelompok II : diinduksi pakan hiperkolesterolemik 2,5 ml dan


mg dalam 0,5 cc air secara oral dengan menggunakan

sonde lambung sebanyak dua kali sehari serta

ditambah ekstrak Labu Siam 80 mg/200gr BB juga

dengan menggunakan sonde lambung, dua kali sehari

(pukul 07.00 dan 15.00) sampai hari ke-35.

Kelompok III : diinduksi pakan hiperkolesterolemik 2,5 ml dan


mg dalam 0,5 cc secara oral dengan menggunakan

sonde lambung sebanyak dua kali sehari serta

ditambah ekstrak Labu Siam 160 mg/200gr BB juga

dengan menggunakan sonde lambung, dua kali sehari

(pukul 07.00 dan 15.00) sampai hari ke-35.


commit to user

Kelompok IV : diinduksi pakan hiperkolesterolemik 2,5 ml dan


mg secara oral dengan menggunakan sonde lambung

sebanyak dua kali sehari serta ditambah ekstrak Labu

Siam 240 mg/200gr BB juga dengan menggunakan

sonde lambung, dua kali sehari (pukul 07.00 dan

15.00) sampai hari ke-35.

5. Setelah perlakuan, semua subyek penelitian yang telah dipuasakan 12 jam

sebelumnya, diambil darahnya untuk pemeriksaan kadar kolesterol total

darah post test. Pengambilan darah dilakukan dengan cara menusukkan

pipa kapiler di daerah saccus medianus orbitalis kemudian darah akan

mengalir di dalam pipa kapiler dan dimasukkan ke dalam tabung

centrifuge. Setelah itu, diperiksa kadar kolesterol totalnya dengan

menggunakan alat spectophotometer.

6. Membandingkan kadar kolesterol total tiap kelompok dan mengolah data

hasil pemeriksaan kadar kolesterol total tikus putih.

K. Teknik Analisis Data

Perbedaan rerata keempat kelompok dianalisis dengan ANOVA test

menggunakan software SPSS for Windows versi 16. Data yang diolah

menggunakan ANOVA test harus memenuhi syarat yaitu memiliki sebaran

yang normal dan kesamaan varian, yang dapat diperiksa dengan uji normalitas


commit to user

dan uji homogenitas varian. Jika terdapat perbedaan yang bermakna

dilanjutkan dengan uji komparatif Post Hoc dengan derajat kemaknaan a =

0,05.


commit to user

BAB IV

HASIL PENELITIAN

A. Hasil Penelitian

Penelitian ini menggunakan sampel tikus putih (Rattus norvegicus) yang

dibagi secara acak menjadi 4 kelompok perlakuan, masing-masing kelompok

terdiri dari 7 ekor sampel tikus. Semua sampel diadaptasikan selama tujuh hari

dan untuk mencapai kondisi hiperkolesterolemia, pada hari ke-8 semua tikus

diinduksi pakan hiperkolesterolemik sampai hari ke-14. Pada hari ke-14 semua

sampel diperiksa kadar kolesterol total pre test dengan hasil sebagai berikut:

Tabel 4.1. Data hasil pengukuran kadar kolesterol total tikus putih sebelum diberi perlakuan

Kelompok N Rerata kadar kolesterol total ± SB (mg/dl)

Kelompok I 7 107,89 ± 45,54

Kelompok II 7 83,10 ± 10,74

Kelompok III 7 87,81 ± 12,10

Kelompok IV 7 80,39 ± 16,36


commit to user

Perlakuan yang diberikan adalah pada kelompok I sebagai kontrol, kelompok

II diberi pakan hiperkolesterolemik dan ekstrak labu siam dosis 80 mg/200gr BB,

kelompok III diberi pakan hiperkolesterolemik dan ekstrak labu siam dosis 160

mg/200gr BB, serta kelompok IV diberi pakan hiperkolesterolemik dan ekstrak

labu siam dosis 240 mg/200gr BB. Pada hari ke-36, semua sampel diperiksa kadar

kolesterol total post test. Hasilnya sebagai berikut:

Tabel 4.2. Data hasil pengukuran kadar kolesterol total tikus putih setelah diberi perlakuan

Kelompok N Rerata kadar kolesterol total postest ± SB

(mg/dl)

Kelompok I 7 107,89 ± 45,54

Kelompok II 7 83,10 ± 10,74

Kelompok III 7 87,81 ± 12,10

Kelompok IV 7 80,39 ± 16,36


commit to user

Bila hasil postest dan pretest kita analisis, maka hasilnya adalah sebagai

berikut:

Tabel 4.3. Data Hasil Pengukuran Kadar Kolesterol Total Tikus Putih Sebelum dan

Setelah Diberi Perlakuan

Grafik 4.1. Histogram Rerata Kadar Kolesterol Total Tikus Putih Sebelum dan Setelah Diberi Perlakuan (mg/dl)

Pada kelompok I dan III terdapat penurunan rerata kadar kolesterol total.

Sedangkan kelompok II dan IV mengalami kenaikan rerata kadar kolesterol total.

Kelompok N Rerata kadar kolesterol total sebelum perlakuan + SB (mg/dl)

Rerata kadar kolesterol total setelah perlakuan ± SB (mg/dl)

Kelompok I 7 107,89 ± 45,54 88,59 ± 27,51

Kelompok II 7 83,10 ± 10,74 91,49 ± 33,23

Kelompok III 7 87,81 ± 12,10 71,67 ± 13,58

Kelompok IV 7 80,39 ± 16,36 114,77 ± 75,80


commit to user

Dari data rerata kadar kolesterol total sebelum dan setelah perlakuan, dapat diperoleh

data selisih kadar kolesterol total, yaitu sebagai berikut:

Tabel 4.4. Data Hasil Pengukuran Selisih Kadar Kolesterol Total Tikus Putih

Grafik 4.2. Histogram Rerata Selisih Kadar Kolesterol Total Tikus Putih (mg/dl)

Dari hasil uji normalitas Saphiro-Wilk terhadap rerata selisih kadar kolesterol

total pada kelompok I sampai dengan kelompok IV, didapatkan hasil sebagai berikut :

Kelompok N Rerata kadar

kolesterol total sebelum perlakuan

+ SB (mg/dl)

Rerata kadar kolesterol total

setelah perlakuan ± SB (mg/dl)

Rerata selisih kadar kolesterol

total + SB (mg/dl)

Kelompok I 7 107,89 ± 45,54 88,59 ± 27,51 -19,30 + 19,74

Kelompok II 7 83,10 ± 10,74 91,49 ± 33,23 8,39 + 31,09

Kelompok III 7 87,81 ± 12,10 71,67 ± 13,58 -16,14 + 16,28

Kelompok IV 7 80,39 ± 16,36 114,77 ± 75,80 47,13 + 52,47

-40

-20

0

20

40

60

Kontrol Ekstrak 80mg/200gBB

Ekstrak 160mg/200gBB

Ekstrak 240mg/200gBB

Series 1


commit to user

Tabel 4.5. Hasil Uji Normalitas Saphiro-Wilk terhadap rerata selisih kadar kolesterol total

Dari hasil di atas dapat diketahui bahwa data kelompok I, II, dan III tidak

memenuhi syarat untuk dapat dianalisis secara parametrik. Untuk itu, dalam langkah

selanjutnya akan digunakan uji non parametrik, yaitu Kruskal-Wallis (lampiran 4)

untuk menganalisis bahwa di antara kelompok-kelompok tersebut paling sedikit

terdapat satu kelompok yang berbeda kadar kolesterol dimana hasil p=0,006 (p<0,05)

sehingga dapat disimpulkan bahwa terdapat perbedaan rerata selisih kadar kolesterol

total sebelum dan setelah perlakuan yang bermakna. Selanjutnya digunakan uji

Mann-Whitney untuk mengetahui antarkelompok manakah yang memiliki perbedaan

rerata selisih kadar kolesterol total sebelum dan setelah perlakuan yang signifikan.

Dari hasil uji Mann-Whitney (lampiran 5), didapatkan hasil sebagai berikut:

Kelompok Nilai P Keterangan

distribusi data

Kelompok I 0.025 Tidak normal

Kelompok II 0.002 Tidak normal

Kelompok III 0.021 Tidak normal

Kelompok IV 0.653 Normal


commit to user

Tabel 4.6. Nilai Signifikansi Rerata Selisih Kadar Kolesterol Total Antarkelompok pada Uji Mann-Whitney

Dari tabel di atas, dapat dilihat bahwa terdapat perbedaan rerata selisih

kolesterol total yang signifikan (p<0,05) pada kelompok I dengan kelompok II,

kelompok I dengan kelompok IV, kelompok II dengan kelompok III, dan kelompok

III dengan kelompok IV.

Kelompok Kelompok Nilai p Keterangan

I II 0.013 signifikan

III 0.565 tidak signifikan

IV 0.013 signifikan

II I 0.013 signifikan

III 0.035 signifikan

IV 0.142 tidak signifikan

III I 0.565 tidak signifikan

II 0.035 signifikan

IV 0.013 signifikan

IV I 0.013 signifikan

II 0.142 tidak signifikan

III 0.013 signifikan


commit to user

BAB V

PEMBAHASAN

Dari tabel Tabel 4.4 yang berisi data hasil pengukuran selisih kadar

kolesterol total tikus putih, dapat dilihat bahwa terdapat penurunan kadar kolesterol

total pada kelompok I (kontrol) yaitu sebesar -19,30 mg/dl. Hal yang sama juga

terlihat pada kelompok III (kelompok perlakuan dengan dosis ekstrak 160 mg/200gr

BB). Pada kelompok III terjadi penurunan kadar kolesterol total sebesar 16,14 mg/dl.

Sementara pada kelompok II dan IV terjadi peningkatan kadar kolesterol total. Pada

kelompok I, tidak seharusnya mengalami penurunan kadar kolesterol total yang

berarti karena kelompok kontrol hanya diinduksi pakan hiperkolesterolemik tanpa

diberi ekstrak Labu Siam sehingga diharapkan kelompok kontrol mengalami

peningkatan kadar kolesterol total. Akan tetapi pada penelitian ini ternyata terjadi

penurunan. Hal ini mungkin disebabkan oleh pakan hiperkolesterolemik yang tidak

adekuat untuk membuat kondisi hiperkolesterolemia. Penurunan kadar kolesterol

total pada kelompok III memiliki kemungkinan bahwa dosis pada kelompok III yaitu

160 mg/200gr BB adalah dosis paling optimal dibanding dosis 80 mg/200gr BB dan

dosis 240 mg/200gr BB.

Sedangkan peningkatan kadar kolesterol total pada kelompok II dan IV dapat

disebabkan oleh faktor pemberian dosis yang tidak tepat. Selain itu, ekstrak

sebaiknya diberikan satu jam setelah pemberian pakan (Agustini, et al., 2006b).


commit to user

Tetapi pada penelitian, ekstrak diberikan 15 menit setelah pemberian pakan

dimana hal ini dapat mengurangi fungsi penyerapan ekstrak secara optimal di dalam

tubuh. Selain itu, wadah penyimpanan juga mempengaruhi kualitas ekstrak. Pada

penelitian, ekstrak disimpan dalam tabung plastik bening yang ditutupi dengan plastik

dan karet. Hal-hal tersebut memungkinkan terjadinya kerusakan kandungan zat aktif

yang terdapat dalam ekstrak sehingga memiliki efek toksik.

Selanjutnya dari tabel 4.6 di atas dapat dilihat bahwa terdapat perbedaan

yang signifikan pada kelompok kontrol dengan kelompok II (dosis 80 mg/200gr BB),

kelompok kontrol dengan kelompok IV (dosis 240 mg/200gr BB), kelompok II

(dosis 80 mg/200gr BB) dengan kelompok III (dosis 160 mg/200gr BB), dan

kelompok III (dosis 160 mg/200gr BB) dengan kelompok IV (dosis 240 mg/200gr

BB). Namun karena kelompok kontrol telah mengalami penurunan kadar kolesterol

total yang seharusnya tidak terjadi maka perbedaan yang signifikan pada kelompok-

kelompok tersebut menjadi tidak bermakna. Selain itu, dapat diketahui bahwa tidak

setiap pemberian dan kenaikan dosis ekstrak Labu Siam diikuti dengan penurunan

kadar kolesterol total. Hasil tersebut tidak sesuai dengan hipotesis awal bahwa

pemberian ekstrak Labu Siam dapat menurunkan kadar kolesterol total tikus putih

yang diberi pakan hiperkolesterolemik. Marlina dalam Agustini et al. (2006a) juga

menyebutkan bahwa Labu Siam dapat menurunkan kadar kolesterol total dan

trigliserida darah. Hasil penelitian tersebut berbeda dengan hasil penelitian ini di


commit to user

mana ekstrak Labu Siam tidak dapat menurunkan kadar kolesterol total. Ada

beberapa faktor yang dapat mempengaruhi hal tersebut, antara lain:

A. Pakan Hiperkolesterolemik

Seperti yang sudah disebutkan sebelumnya bahwa pakan

hiperkolesterolemik dan lama pemberian juga berpengaruh dalam peningkatan

kadar hiperkolesterolemia sehingga perlu diteliti, apakah sudah sesuai untuk

mencapai kondisi hiperkolesterolemia bagi tikus putih.

B. Teknik Pemberian Ekstrak

Langkah-langkah pemberian ekstrak juga perlu diperhatikan, seperti

interval waktunya, antara ekstrak dengan pemberian oral lainnya. Ekstrak

sebaiknya diberikan satu jam setelah pemberian pakan (Agustini, et al.,

2006b).

C. Kualitas Ekstrak

Kualitas kandungan ekstrak Labu Siam yang seharusnya diperhatikan

pada saat pemberian ekstrak agar diketahui apakah masih dapat digunakan.

Sebaiknya ekstrak diberikan dalam keadaan segar agar dapat berfungsi secara

optimal. Pada penelitian ini dilakukan pengenceran ekstrak Labu Siam setiap

dua hari. Selanjutnya, wadah penyimpanan juga mempengaruhi kualitas

ekstrak. Ekstrak sebaiknya disimpan dalam botol gelap steril yang kedap

udara (Chevallier, 1996).


commit to user

D. Kondisi Psikologis dan Lingkungan

Perlakuan sonde lambung dan pengambilan darah yang berulang

sangat rentan menyebabkan gangguan kondisi psikologis seperti stres. Selain

itu, kondisi kandang dan lingkungan tikus putih kurang ideal, baik dari segi

sanitasi, kelembapan dan suhunya. Kondisi ini juga dapat mempengaruhi

metabolisme tubuh dari tikus putih.

E. Penimbangan Berat Badan Tikus Putih

Berat badan seharusnya ditimbang secara berkala agar dapat dilakukan

penyesuaian dosis ekstrak Labu Siam (Hartanto, 2008). Pada penelitian ini

tidak dilakukan penimbangan berat badan tikus putih.

F. Efek Farmakologi

Zat aktif pada tanaman obat umunya dalam bentuk metabolit sekunder,

sedangkan satu tanaman bisa menghasilkan beberapa metabolit sekunder,

sehingga memungkinkan tanaman tersebut memiliki lebih dari satu efek

farmakologi. Efek tersebut adakalanya saling mendukung, tetapi ada juga

yang seakan-akan saling berlawanan atau kontradiksi (Katno et al., 2003).

Kemungkinan hanya salah satu zat aktif yang mendominasi metabolisme

tubuh dapat terjadi dikarenakan dosis ektrak yang tidak tepat.

G. Standar Deviasi

Standar Deviasi juga turut berperan dalam pengaruh pemberian

ekstrak Labu Siam terhadap kadar kolesterol total. Simpangan data yang


commit to user

terlalu besar menyebabkan margin of error turut menjadi besar sehingga

semakin tidak presisi.

H. Jumlah Sampel

Pada penelitian ini jumlah sampel terlalu sedikit sehingga dapat

mengurangi kekuatan dari penelitian ini.


commit to user

BAB VI

SIMPULAN DAN SARAN

A. Simpulan

1. Pemberian ekstrak labu siam (Sechium edule (Jacq.) Sw.) tidak dapat

mencegah kenaikan kadar kolesterol total tikus putih (Rattus norvegicus) yang

diberi pakan hiperkolesterolemik.

2. Tidak ada perbedaan pengaruh pemberian beberapa dosis ekstrak labu siam

(Sechium edule (Jacq.) Sw.) yang signifikan terhadap kadar kolesterol total

tikus putih (Rattus norvegicus) yang diberi pakan hiperkolesterolemik.

B. Saran

Pada penelitian lanjutan, perlu diperhatikan:

1. Kualitas kandungan ekstrak labu siam agar dapat memberikan efek secara

optimal baik dari waktu maupun cara penyimpanan.

2. Kandungan pakan dan lama pemberian pakan hiperkolesterolemik agar

tercapai kondisi hiperkolesterolemia.

3. Penimbangan berat badan secara berkala sehingga penyesuaian dosis ekstrak

dapat dilakukan.

4. Standar Deviasi dan jumlah sampel yang sesuai.

5. Teknik, metode dan fasilitas penunjang yang lebih baik.

(jacq.) sw.) terhadap kadar kolesterol total tikus … · sebelumnya. data kadar kolesterol total...

Documents