plagiat merupakan tindakan tidak terpuji - core.ac.uk · capung indah abadi, ibu lis setyowati,...

DAY

Roxb. ex

YA ANTI –

x Colebr. --

DiMe

UN

– INFLAMA

Indian fra

iajukan untuemperoleh G

Progr

T

N

FAKNIVERSIT

Y

ASI EKST

ankincense

SKRIP

uk MemenuGelar Sarjanram Studi Il

Oleh

TH. Avi Ha

NIM : 0481

KULTAS FTAS SAN

YOGYAK2008

TRAK BOS

e PADA M

PSI

uhi Salah Sana Farmasi lmu Farmas

:

ardhiani

114091

FARMASNATA DH

KARTA 8

SWELLIA

MENCIT PU

atu Syarat (S.Farm.)

si

SI HARMA

SERRATA

UTIH BET

INA

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJIPLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

ii

DAYA ANTI – INFLAMASI EKSTRAK BOSWELLIA SERRATA

Roxb. ex Colebr. -- Indian frankincense PADA MENCIT PUTIH BETINA

SKRIPSI

Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)

Program Studi Ilmu Farmasi

Oleh :

TH. Avi Hardhiani

NIM : 048114091

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SANATA DHARMA

YOGYAKARTA 2008


iii


iv


v

Kadang……

Di dalam perjalanan hidup ini, kita mendapat kesulitan yang membuat

hidup kita terasa berat, dan tidak menentu.......Namun, kupercaya

bahwa Yesus Yang Maha Kudus akan menemani setiap langkah kita

dalam perjalanan hidup ini, untuk meneguhkan hati kita

serta meluaskan wawasan kita.......

” Bapa bisa datang dengan cara apa saja ”

Skripsi ini kupersembahkan untuk Bapa dan Bunda yang ada di

Surga, Bapak dan Ibuku,Kakakku,

Seseorang yang selalu ada dihatiku, serta

Almamaterku


vi


vii

PRAKATA

Puji syukur penulis haturkan kepada Allah Bapa di Surga atas segala berkah,

karunia, kekuatan dan kasihNya sehingga penulis dapat melakukan penelitian dan

mampu menyelesaikan skripsi yang berjudul : ”Daya Anti-inflamasi Ekstrak

Boswellia serrata Roxb. ex Colebr. -- Indian frankincense Pada mencit Putih

Betina” yang merupakan realisasi dari kerjasama antara IOT. Sari Sehat -- PT.

Capung Indah Abadi dan Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma serta sebagai

salah satu syarat untuk mencapai gelar Sarjana Farmasi (S. Farm.) di Fakultas

Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.

Dalam menyusun skripsi ini, penulis banyak memperoleh pengarahan,

bimbingan, bantuan dan dukungan dari berbagai pihak. Oleh karena itu, penulis ingin

mengucapkan terima kasih kepada :

1. Ibu Rita Suhadi, M.Si., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sanata

Dharma.

2. Yosef Wijoyo, M.Si., Apt. selaku dosen pembimbing yang telah memberi banyak

pengarahan, bimbingan, dan bantuan selama penelitian dan penyusunan skripsi ini.

3. Ipang Djunarko, S.Si, Apt. atas pengetahuan, bantuan, masukan kepada penulis

hingga terselesaikannya skripsi ini serta telah memberikan kesediaannya sebagai

dosen penguji.

4. Drs. Mulyono, Apt. yang telah memberikan kesediaannya sebagai dosen penguji.


viii

5. IOT. Sari Sehat -- PT. Capung Indah Abadi, Ibu Lis Setyowati, atas kerja sama

dan bantuannya dalam pengadaan bahan uji yang digunakan dalam penelitian ini.

6. Ign. Y. Kristio Budiasmoro, M.Si., yang telah memberikan pengetahuan bagi

penulis dalam penyelesaian skrispsi ini.

7. Drs. P. Sunu Hardiyanta, S.J., M.Sc. yang telah membantu penulis dalam

pengolahan data secara statistik.

8. Mas Heru yang telah membantu dalam pengadaan hewan uji, Mas Parjiman yang

senantiasa memberikan waktu dalam menyediakan peralatan, Mas Khayat, Mas

Otok, dan Mas Yuwono selaku laboran dan karyawan Fakultas Farmasi USD

yang telah membantu penulis selama pelaksanaan penelitian di laboratorium

farmakologi.

9. Staff pengajar dan segenap dosen Fakultas Farmasi, Universitas Sanata Dharma,

Yogyakarta.

10. Untuk keluargaku : Bapak, Ibu, kakakku, Artha, yang senantiasa memberikan

dukungan, semangat, kasih, pengorbanan yang sungguh besar bagi penulis.

11. Mas Beny yang selalu memberikan waktu dan memberikan bantuan kepada

penulis dalam menyelesaikan skripsi ini.

12. Dhimas Angga W.K. yang senantiasa menemani dalam suka-duka, memberikan

semangat kepada penulis untuk terus berjuang dalam menyelesaikan skripsi ini.

13. Tante Santi, Mbak Ella, terima kasih atas nasehat yang selalu diberikan bagi

penulis untuk terus belajar yang rajin.


ix

14. Ratna Puspita, Keke Sakti Damayanti, Caecilia Ratna, teman-teman

seperjuanganku dalam bergelut di laboratorium farmakologi, terima kasih atas

kerjasamanya.

15. Teman-teman terdekatku : Lian, Filisia, Feri, Ratna, Erlin, Siska, Widya, Indah,

Maduma, Meidina, atas kerjasamanya selama ini serta dukungan kepada penulis

dalam menyelesaikan skripsi ini.

16. Mas Surya, Mas Galih, dan Mas Angga, terima kasih atas pengetahuan yang

diberikan kepada penulis sehingga terselesaikan skripsi ini.

17. Tetangga kamarku : Sinta, Mbak Ica, Mbak Ana, Vita, Mbak Melon, Mbak Desi

serta Riska, Treza, Fila, Marlin, Enggar, Mbak Yeyen, terima kasih atas

kebersamaan kalian selama ini yang selalu memberikan keceriaan di kost tercinta.

18. Mahasiswa Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma khususnya angkatan

2004 dan semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu persatu.

Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih sangat jauh dari kata sempurna

sehingga penulis menerima saran dan kritik yang bersifat membangun. Penulis

berharap semoga skripsi ini dapat berguna dan memberikan pengetahuan bagi semua.

Penulis


x

INTISARI

Seiring dengan perkembangan teknologi, pengobatan alami juga mengalami kemajuan yang sangat pesat dan mulai menjadi “tren” saat ini, dimana pengobatan herbal juga melengkapi pengobatan kimiawi.

Boswellia serrata merupakan tumbuhan yang didalamnya terkandung senyawa aktif asam β-boswelat yang dapat digunakan untuk mengobati inflamasi. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek anti-anflamasi, besarnya daya anti-inflamasi dan potensi daya anti-inflamasi Boswellia serrata dalam mengurangi radang pada mencit putih betina.

Jenis penelitian ini adalah penelitian eksperimental murni dengan rancangan acak lengkap pola searah. Pada penelitian ini digunakan hewan uji sebanyak delapan puluh lima ekor mencit galur Swiss, umur 2 – 3 bulan, berat badan 20 – 30 g. Hewan uji dibagi secara acak menjadi 8 kelompok. Kelompok I diberi karagenin 1% sebagai kontrol negatif, kelompok II diberi aquadest sebagai kontrol negatif, kelompok III diberi natrium diklofenak sebagai kontrol positif, kelompok IV diberi CMC-Na 1% sebagai kontrol negatif, dan kelompok V hingga VIII diberi ekstrak Boswellia serrata dengan peringkat dosis 24,25 mg/kgBB; 72,8 mg/kgBB; 218,4 mg/kgBB; dan 655,2 mg/kgBB. Tiga jam setelah injeksi karagenin 1%, mencit dikorbankan, kedua kaki belakang dipotong pada sendi tarsocrural, dan ditimbang. Data bobot udema dianalisis dengan uji Kolmogorov-Smirnov untuk melihat distribusinya, dilanjutkan analisis secara statistik menggunakan uji Kruskal Wallis lalu dilanjutkan dengan uji Mann Whitney bertaraf kepercayaan 95%.

Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak Boswellia serrata terbukti tidak memiliki efek anti-inflamasi namun mampu menurunkan udema pada dosis 24,25 mg/kgBB dan 72,8 mg/kg BB. Prosentase respon daya anti-inflamasi yang dihasilkan secara berurutan pada peringkat dosis 24,25 mg/kgBB; 72,8 mg/kgBB; 218,4 mg/kgBB; dan 655,2 mg/kgBB yaitu 23,04 %; 11,12%; -14,89%; dan -26,29%. Prosentase daya anti-inflamasi yang dihasilkan pada dosis 24,25 mg/kgBB; 72,8 mg/kgBB; 218,4 mg/kgBB; dan 655,2 mg/kgBB yaitu 33,18%; 15,99%; -21,44% dan -37,86%.

Kata kunci : Ekstrak Boswellia serrata, anti-inflamasi


xi

ABSTRACT

With the developing of the technology, the treatment with herbal drug also has going to better and going to be trend in now, where the treatment with herbal drug has complementary with chemical drug.

Boswellia serrata is one of a plant that containing compound active β-boswellic acid for the treatment of inflammatory disease. The purpose of this research is to prove the truth of anti-inflammation effect, percentage of anti-inflammation ability and to know amount of potency of anti-inflammation ability of Boswellia serrata extract to decrease inflammation on white female mice.

The type of his research was purely experimental with complete random pattern design. Subject whose used in this research is eighty five mice was Switzerland white female mice whose age 2-3 month and have weight between 20-30 gram. The subject were divided into eight groups. Group I was treated by carrageenan 1 % as negative control, group II was treated by aquadest as positive control, group III was treated by diclofenac natrium as positive control, group IV was treated by CMC-Na % as negatif control , and group V, VI, VII, and VIII were treated Boswellia serrata extract which have dosage 24,25 g/kg bw; 72,8 g/kg bw; 214,8 g/kg bw, and 655,2 g/kg bw. Three hours after has injection with carrageenan 1%, were killed and its two back legs were cut at tarsocrural joint. The data about oedema weight that already obtained were analyzed with Kolmogorov-Smirnov to see its distribution, then analyzed with Kruskal Wallis test and continued with Mann Whitney test on 95% significance level. The result of this research showed that Boswellia serrata extract that Boswellia serrata extract hasn’t anti-inflamation effect but can decrease oedema in dosage 24,25 mg/kgBB and 72,8 mg/kgBB. The percentage of anti-inflammation ability in dosage 24,25 mg/kgBB; 72,8 mg/kgBB; 218,4 mg/kgBB; dan 655,2 mg/kgBB was successively 23,04 %; 11,12%; -14,89%; dan -26,29%. Relative potency of anti-inflammation ability in dosage 24,25 mg/kgBB and 72,8 mg/kgBB was successively 33,18% dan 15,99%. Keyword : Boswellia serrata extract, anti-inflammatory


xii

DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL …………………………………………………...……

HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING …………………………….

HALAMAN PENGESAHAN ……………………………………………….

HALAMAN PERSEMBAHAN ……………………………………………..

PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ………………...…………………...

PRAKATA …………………………………………………………………..

INTISARI ………….………………………………………………………...

ABSTRACT ………………………………………………...………………...

DAFTAR ISI ...………………………………………………………………

DAFTAR TABEL ..………………………………………………………….

DAFTAR GAMBAR ….……………………………………...……………..

DAFTAR LAMPIRAN ..…………………………………………………….

BAB I. PENGANTAR .……………………………………………………..

A. Latar Belakang …………………………….………………………...

1. Permasalahan ……………………….………………………..

2. Keaslian penelitian …………….…………………………….

3. Manfaat penelitian .…………….…………………………….

B. Tujuan Penelitian ……………….………………………....................

BAB II. PENELAAHAN PUSTAKA …….………………………………...

HAL

ii

iii

iv

v

vi

vii

x

xi

xii

xvi

xviii

xx

1

1

3

3

4

5

6


xiii

A. Boswellia serrata Roxb. ex Colebr. -- Indian frankincense........

1. Klasifikasi umum………………………………………………..

2. Nama daerah……………………………………………………

3. Sinonim…………………………………………………………

4. Morfologi tanaman……………………………………………....

5. Kandungan kimia………………………………………………..

6. Kegunaan………………………………………………………..

7. Anjuran pemakaian……………………………………………...

B. Ekstrak……………………………………………………………….

C. Inflamasi ……...……………………………………………………..

1. Definisi ….…………………………………………………...

2. Klasifikasi …………………………………………………...

3. Penyebab….…………………………………………….........

4. Gejala ………………………………………………..………

5. Mekanisme…………………………………………………...

6. Mediator inflamasi.…………………………………………..

D. Obat Anti Inflamasi ..………………………………………………...

E. Natrium Diklofenak ………………..………………………………..

F. Metode Uji Daya Anti-inflamasi………………………………….....

In-vivo :................................................................................................

1. Uji eritema……………………………………………………

6

6

6

6

7

7

9

9

9

10

10

11

11

11

13

17

21

23

24

24

24


xiv

2. Uji paw edema ……………………………………………….

3. Pleurisy test (uji radang selaput dada)…………………….....

4. Tes kantong granuloma………………………………………

In-vitro :………………………………………………………………

1. Uji kemotaksis leukosit polimorfonuklear...............................

2. Agregasi leukosit polimorfonuklar yang diinduksi FMLP......

G. Landasan Teori……………………………………………………….

H. Hipotesis……………………………………………………………...

BAB III. METODE PENELITIAN ……….…………………………..........

A. Jenis dan Rancangan Penelitian ……………………………………..

B. Variabel dan Definisi Operasional…………………………………...

C. Bahan Penelitian……………………………………………………...

D. Alat Penelitian ...………...…………………………………………...

E. Tata Cara Penelitian ..………………………………………………..

1. Perolehan ekstrak tanaman Boswellia serrata ...…...……….

2. Penyiapan hewan uji………..…..……………………………

3. Perhitungan dan penetapan dosis….… ……………………..

4. Pembuatan suspensi karagenin 1%…………………...……...

5. Pembuatan larutan natrium diklofenak...................................

6. Pembuatan CMC-Na 1%........................................................

7. Penetapan dosis ekstrak Boswellia serrata.............................

25

26

27

27

27

28

28

29

30

30

30

32

33

34

34

34

34

35

36

38

38


xv

8. Uji pendahuluan.......................................................................

9. Perlakuan hewan uji.................................................................

10. Perhitungan prosentase respon daya anti-inflamasi................

11. Perhitungan prosentase daya anti-inflamasi...........................

F. Analisis Hasil........................................................................................

BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ………….......................………....

A. Hasil Uji Pendahuluan..…………………………..........................…..

1. Uji penetapan selang waktu pemotongan kaki........................

2. Uji penetapan selang waktu pemberian natrium diklofenak...

B. Hasil Uji Daya Anti-inflamasi Ekstrak Boswellia serrata……….......

BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN …….………………………………

A. Kesimpulan ..…………………………………………………………

B. Saran ...……………………………………………………………….

DAFTAR PUSTAKA ...……………………………………………………..

LAMPIRAN ………...……………………………………………………….

BIOGRAFI PENULIS ..……………………………………………………...

40

41

42

42

43

44

44

44

48

52

67

67

67

69

73

113


xvi

DAFTAR TABEL

I. Rata-rata bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1%

subplantar dalam berbagai variasi selang waktu pemotongan

kaki..…….................................................................................................

II Rangkuman hasil uji Anova satu arah data bobot udema kaki mencit

akibat injeksi karagenin 1% subplantar dalam berbagai variasi selang

waktu pemotongan kaki……………………….….…………………......

III Rangkuman hasil uji Scheffe data bobot udema kaki mencit akibat

injeksi karagenin 1% subplantar dalam berbagai variasi selang waktu

pemotongan kaki…………………………………….……..……………

IV. Rata-rata bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1%

subplantar dengan berbagai variasi selang waktu pemberian natrium

diklofenak………………………………………………………………..

V. Rangkuman hasil uji Anova satu arah data rata-rata bobot udema kaki

mencit akibat sebelum injeksi karagenin 1% subplantar dengan

berbagai variasi selang waktu pemberian natrium diklofenak…………

VI. Rangkuman hasil uji Scheffe data data rata-rata bobot udema kaki mencit

akibat injeksi karagenin 1% subplantar setelah pemberian natrium

diklofenak 4,48 mg/kgBB dengan berbagai variasi selang waktu………

VII. Rata-rata bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1%

Hal

46

47

47

49

50

51


xvii

subplantar baik pada kelompok kontrol maupun perlakuan

ekstrak....................................................................................................

VIII. Rata-rata prosentase respon daya anti-inflamasi baik pada kelompok

kontrol maupun perlakuan ekstrak…………………………………...

IX. Hasil uji Kruskall Wallis rata-rata prosentase respon daya anti-

inflamasi baik pada kelompok kontrol maupun perlakuan ekstrak…..

X. Rangkuman uji Mann-Whitney rata-rata prosentase respon daya anti-

inflamasi baik pada kelompok kontrol maupun perlakuan

ekstrak………………………………………………………………..

XI. Prosentase daya anti-inflamasi kelompok perlakuan ekstrak

Boswellia serrata..................................................................................

53

56

59

59

61


xviii

DAFTAR GAMBAR

Gambar 1

Gambar 2

Gambar 3

Gambar 4

Gambar 5

Gambar 6

Gambar 7

Gambar 8

Gambar 9

Gambar 10

Gambar 11

Gambar 12

Empat asam triterpenoid pentasiklik Boswellia serrata ……..

Mekanisme terjadinya peradangan.....……………………......

Skema mediator yang berasal dari asam arakhidonat dan kerja

obat anti-inflamasi.......................……………………..............

Klasifikasi obat Anti-Inflamasi Steroid (AINS).........................

Mekanisme kerja obat anti inflamasi …………………………

Struktur natrium diklofenak........……………………….........

Skema kerja uji pendahuluan.....................................................

Skema kerja perlakuan terhadap hewan uji...............................

Grafik rata-rata bobot udema kaki mencit akibat injeksi

karagenin 1% subplantar dalam berbagai variasi selang waktu

pemotongan kaki........................................................................

Grafik rata-rata bobot udema kaki mencit akibat injeksi

karagenin 1% subplantar dengan berbagai variasi selang

waktu pemberian natrium diklofenak.........................................

Diagram rata-rata bobot udema akibat injeksi karagenin 1%

baik pada kelompok kontrol maupun perlakuan.......................

Diagram rata-rata prosentase daya anti-inflamasi pada

kelompok kontrol dan perlakuan ..............................................

Hal

8

15

20

21

23

24

40

41

46

49

54

56


xix

Gambar 13

Gambar 14

Gambar 15

Gambar 16

Gambar 17

Tumbuhan Boswellia serrata..................................................... Getah resin tanaman Boswellia serrata..................................... Ekstrak kering Boswellia serrata.............................................. Ekstrak Boswellia serrata dalam bentuk suspensi CMC-Na

1%..............................................................................................

Neraca Analitik Merk Mettler Toledo AB 204.........................

73

73

74

74 75


xx

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1

Lampiran 2

Lampiran 3

Lampiran 4

Lampiran 5

Lampiran 6

Lampiran 7

Lampiran 8

Lampiran 9

Lampiran 10

Lampiran 11

Lampiran 12

Tumbuhan Boswellia serrata.....................................................

Getah resin tumbuhan Boswellia serrata...................................

Foto ekstrak kering Boswellia serrata ......................................

Foto Boswellia serrata dalam bentuk suspensi CMC-Na 1%..

Foto alat neraca analitik Merk Mettler Toledo AB 204.............

Surat pernyataan sah tentang bahan uji yang diperoleh dari

IOT. Sari Sehat qq. PT. Capung Indah Abadi............................

Certificate of Analysis ekstrak Boswellia serrata 65%..............

Perhitungan konsentrasi ekstrak Boswellia serrata....................

Langkah kerja uji penetapan selang waktu pemotongan kaki

mencit setelah injeksi karagenin 1%..........................................

Hasil uji penetapan selang waktu pemotongan kaki mencit

setelah injeksi karagenin 1%......................................................

Hasil uji distribusi data pada penetapan selang waktu

pemotongan kaki mencit setelah injeksi karagenin 1% dengan

uji Kolmogorov- Smirnov..........................................................

Hasil uji Anova satu arah pada penetapan selang waktu

pemotongan kaki mencit setelah injeksi karagenin 1%.............

Hal

73

73

74

74

75

76

78

79

80

81

82

82


xxi

Lampiran 13

Lampiran 14

Lampiran 15

Lampiran 16

Lampiran 17

Lampiran 18

Lampiran 19

Lampiran 20

Langkah kerja uji penetapan selang waktu pemberian natrium

diklofenak dengan dosis 4,48 mg/kgBB sebelum injeksi

karagenin 1%.............................................................................

Hasil uji penetapan selang waktu pemberian natrium

diklofenak dengan dosis 4,48 mg/kgBB sebelum injeksi

karagenin 1%..............................................................................

Hasil uji distribusi data penetapan selang waktu pemberian

natrium diklofenak dengan dosis 4,48 mg/kgBB sebelum

injeksi karagenin 1% dengan uji Kolmogorov- Smirnov...........

Hasil uji Anova satu arah data penetapan selang waktu

pemberian natrium diklofenak dengan dosis 4,48 mg/kgBB

sebelum injeksi karagenin 1%....................................................

Langkah kerja perlakuan terhadap hewan uji.............................

Data selisih bobot udema kaki mencit setelah pemberian

ekstrak Boswellia serrata dalam 4 peringkat dosis beserta

kontrol …...................................................................................

Hasil uji distribusi data bobot udema kaki mencit setelah

pemberian ekstrak Boswellia serrata dalam 4 peringkat dosis

beserta kontrol dengan uji Kolmogorov- Smirnov....................

Hasil uji Anova satu arah data bobot udema kaki mencit

setelah pemberian ekstrak Boswellia serrata dalam 4

84

85

86

86 89

90

91


xxii

Lampiran 21

Lampiran 22

Lampiran 23

Lampiran 24

Lampiran 25

Lampiran 26

Lampiran 27

peringkat dosis beserta kontrol...................................................

Hasil uji Kruskal Wallis data bobot udema kaki mencit setelah


beserta kontrol............................................................................

Hasil uji Mann-Whitney data bobot udema kaki mencit setelah


beserta kontrol............................................................................

Rangkuman hasil uji Mann-Whitney data selisih bobot udema

kaki mencit setelah pemberian ekstrak Boswellia serrata

dalam 4 peringkat dosis beserta 4 kontrol..................................

Data prosentase (%) respon daya anti-inflamasi ekstrak

Boswellia serrata dalam 4 peringkat dosis beserta 4 kontrol

(sebelum terkoreksi)..................................................................

Hasil analisis data prosentase (%) respon daya anti-inflamasi

ekstrak Boswellia serrata dalam 4 peringkat dosis beserta 3

kontrol (terkoreksi tanpa karagenin 1%)..................................

Hasil uji distribusi data prosentase (%) respon daya anti-

inflamasi ekstrak Boswellia serrata dalam 4 peringkat dosis

beserta 3 kontrol dengan uji Kolmogorov- Smirnov.................

Hasil uji Anova satu arah data prosentase respon daya anti-


91

92

93

98

99

100

103


xxiii

Lampiran 28

Lampiran 29 Lampiran 30 Lampiran 31 Lampiran 32

beserta 3 kontrol dengan uji Kolmogorov- Smirnov..................

Hasil uji Kruskal Wallis data prosentase respon daya anti-


beserta 3 kontrol........................................................................

Hasil uji Mann-Whitney data prosentase respon daya anti-


beserta 3 kontrol.........................................................................

Rangkuman hasil uji Mann-Whitney data prosentase respon

daya anti-inflamasi ekstrak Boswellia serrata dalam 4

peringkat dosis beserta 3 kontrol................................................

Perhitungan prosentase daya anti-inflamasi ekstrak Boswellia

serrata.........................................................................................

Rincian konversi dosis mencit 20 gram ke manusia 70 kg........

103 104 105

109 110 112


1

BAB I

PENGANTAR

A. Latar Belakang

Inflamasi merupakan salah satu masalah yang banyak dialami oleh

masyarakat. Peradangan merupakan suatu reaksi vaskuler yang menimbulkan

adanya pengiriman cairan, zat terlarut, dan sel darah menuju jaringan intertisial

pada daerah cedera (Price dan Wilson, 1984). Reaksi inflamasi diperlukan karena

inflamasi ini merupakan respon biologik dari reaksi-reaksi kimia berurutan,

berfungsi melindungi tubuh dari infeksi, dan memperbaiki jaringan yang rusak

akibat trauma (Wilmana, 1995).

Walaupun teknologi berkembang sangat pesat, pengobatan alami juga

mengalami kemajuan yang sangat pesat yang sekarang ini mulai menjadi “tren” ,

dimana pengobatan herbal juga melengkapi pengobatan kimiawi. Oleh karena itu

banyak masyarakat yang semakin tertarik untuk memanfaatkan obat-obat dari

bahan alam yang sering dianggap sebagai pengobatan tradisional untuk mengobati

inflamasi, sebab selain harganya yang lebih murah juga karena tersedianya bahan

alam terutama tumbuh-tumbuhan di alam sekitar kita sehingga dapat menekan

biaya pengobatan. Walaupun begitu, penggunaan obat tradisional juga harus

memperhatikan klaim khasiatnya dan tidak cukup apabila hanya dengan

keterangan empiris saja.

Boswellia serrata merupakan salah satu tumbuhan digunakan pada

pengobatan Ayurveda untuk mengobati penyakit inflamasi (Borrelli, Capasso,


2

Cappasso, Ascione, Aviello, Longo, dkk, 2006). Bagian tanaman Boswellia

serrata yang digunakan adalah bagian batang dimana dari bagian tanaman

tersebut dapat dihasilkan getah resin/ oleoresin yang merupakan bahan ekstrak

Boswellia serrata. Getah oleoresin yang merupakan campuran antara resin dan

minyak yang bersifat mudah menguap tersebut terdiri dari minyak esensial, getah

resin, dan terpenoid. Secara tradisional, minyak esensial yang dihasilkan dapat

digunakan pada aromaterapi untuk relaksasi, membantu dalam pernafasan, dan

sistem imun ketika batuk, flu, bronchitis, dan laryngitis. Penggunaan lain

termasuk untuk anti-inflamasi, antiseptik, dan astringent (Briggs, Cheiman, Clark,

dan Linda, 2004).

Berdasarkan uraian tentang khasiat ekstrak Boswellia serrata sebagai

anti-inflamasi, maka pada penelitian ini akan digunakan ekstrak Boswellia serrata

yang diperoleh dari IOT Sari Sehat – PT. Capung Indah Abadi yang merupakan

salah satu industri obat tradisional dan bahan tersebut diimpor dari Phytotech

Extract Pvt. Ltd. India. Pada penelitian ini akan dilakukan uji daya anti-inflamasi

dengan menggunakan metode Langford, Holmes dan Emele (1972) yang telah

dimodifikasi sehingga dapat diketahui pengaruhnya terhadap inflamasi yang

terjadi dan juga untuk mengetahui besarnya daya anti-inflamasi yang dimiliki.

Dengan adanya penelitian tentang daya anti-inflamasi ekstrak Boswellia

serrata ini diharapkan dapat membuktikan kebenaran dari khasiat ekstrak

Boswellia serrata serta digunakan sebagai bukti praklinik serta acuan untuk

pengembangan Boswellia serrata sebagai obat anti-inflamasi.


3

1. Permasalahan

Beberapa permasalahan yang muncul antara lain sebagai berikut :

a. Apakah ekstrak Boswellia serrata memiliki efek anti-inflamasi ?

b. Seberapa besar prosentase respon daya anti-inflamasi yang dihasilkan oleh

ekstrak Boswellia serrata ?

c. Seberapa besar prosentase daya anti-inflamasi yang dihasilkan oleh ekstrak

Boswellia serrata?

2. Keaslian penelitian

Penelitian tentang Boswellia serrata yang sudah pernah dilakukan

antara lain sebagai berikut :

a. Efek Boswellia serrata pada motilitas usus hewan pengerat dalam

menghambat diare tanpa konstipasi (Borrelli dkk, 2006).

Hasil : diketahui bahwa Boswellia serrata dapat menormalkan adanya

perubahan motilitas usus yang disebabkan adanya rangsangan inflamasi dan

memiliki aktivitas antidiare. Secara in-vitro ditunjukkan bahwa ekstrak

Boswellia serrata secara langsung menghambat motilitas usus dengan

mekanisme yang meliputi L-type Ca2+ channels.

b. Kemanjuran dan toleransi ekstrak Boswellia serrata pada pengobatan

osteoarthritis pada lutut kaki : A randomized double blind placebo controlled

trial (Brenda, 2003).

Hasil : diketahui bahwa pengobatan pasien yang menderita osteoarthritis

dengan 333 mg ekstrak Boswellia serrata 3 kali sehari selama 8 minggu dapat

meningkatkan kemanjuran.


4

c. Open, randomized, controlled clinical trial : Ekstrak Boswellia serrata

diibandingkan valdecoxib pada osteoarthritis pada lutut kaki (Sontakke,

Thawani, Pimpalkhute, Kabra, Babhulkar, dan Hingorani, 2007).

Hasil : diketahui bahwa ekstrak Boswellia serrata memiliki onset dan durasi

yang lebih lama setelah perlakuan dihentikan jika dibandingkan dengan

valdecoxib. Keamanan, kemanjuran, dan durasi yang ditunjukkan dari ekstrak

Boswellia serrata lebih baik jika dibandingkan valdecoxib.

Penelitian tentang Boswellia serrata ini berbeda dengan penelitian

yang sejauh ini telah dilakukan karena pada penelitian ini digunakan metode

radang telapak kaki oleh Langford dkk (1972) yang telah dimodifikasi.

3. Manfaat penelitian

a. Manfaat teoritis

Penelitian ini diharapkan dapat memberikan pengetahuan tentang khasiat

tanaman obat terutama ekstrak Boswellia serrata yang memiliki khasiat

sebagai anti-inflamasi sehingga dapat bermanfaat bagi ilmu kefarmasian.

b. Manfaat praktis

Dari hasil penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi yang

berguna untuk masyarakat tentang khasiat dari ekstrak Boswellia serrata

yang memiliki khasiat sebagai anti-inflamasi.


5

B. Tujuan Penelitian

1. Tujuan umum

Penelitian ini bertujuan untuk memberikan informasi yang pasti

bahwa ekstrak Boswellia serrata memiliki khasiat sebagai anti-inflamasi.

2. Tujuan khusus

Penelitian ini memiliki beberapa tujuan khusus antara lain untuk

mengetahui efek anti-inflamasi dari ekstrak Boswellia serrata, besarnya

prosentase respon daya anti-inflamasi, dan besarnya prosentase daya anti-

inflamasi dari ekstrak Boswellia serrata.


6

BAB II

PENELAAHAN PUSTAKA

A. Boswellia serrata

1. Klasifikasi umum

Kingdom : Plantae

Subkingdom : Tracheobionta

Divisi : Magnoliophyta

Kelas : Magnoliopsida

Subkelas : Rosidae

Ordo : Sapindales

Famili : Burseraceae

Genus : Boswellia Roxb. ex Colebr. -- boswellia

Species : Boswellia serrata Roxb. ex Colebr. -- Indian

frankincense (Anonim, 2007a).

2. Nama daerah

Luban (Bengali); salai, Indian frankincense tree, Indian olibanum tree

(Inggris); salai, saler, salga, salhe, sali (Hindi); kunduru, sallaki (Sanskrit)

gugulu, kundrikam, kungli, morada, parangisambrani (Tamil) (Anonim,

2007b).

3. Sinonim

Boswellia glabra Roxb. dan Boswellia thurifera Roxb.( Anonim, 2007b).


7

4. Morfologi tanaman

Boswellia serrata Roxb (Fam. Burseracease), merupakan tanaman

berukuran sedang sampai besar yang merupakan tanaman asli dari India Afrika

Utara dan Timur Tengah (Borrelli dkk, 2006). Boswellia serrata memiliki daun

mengkilat dan mahkota daun yang tersebar. Kulit kayu tebal, berwarna hijau

keabu-abuan, abu-abu kemerahan dan mengandung klorofil pada bagian luarnya

yang tebal. Daunnya serta bunga yang berwarna putih tersebar banyak pada

pangkal cabang (Anonim, 2007b).

4. Kandungan kimia

Pada batang tanaman Boswellia serrata yang kulit kayunya telah

dihilangkan untuk proses penyadapan akan dihasilkan getah oleoresin yang terdiri

dari minyak, terpenoid dan getah resin. Hampir 16% dari resin tersebut terdiri dari

minyak esensial, dimana sebagian besar adalah α-thujene dan p-cymene. Resin

bukan merupakan produk kompleks kimia alami, keras, transparan, ketika

dipanaskan membentuk kompleks antara asam resin, resin alkohol, resinotanol,

ester, dan resen (Robbers, Speedle, and Tyler, 1996). Asam β-boswelat

merupakan salah satu dari empat asam triterpen pentasiklik yang berada dalam

minyak esensial. Asam Boswellic ini akan menghambat jalur 5-lipoksigenase yang

akan mengubah asam arakhidonat menjadi leukotrien (Anonim, 2007c). Getah

resin pada Boswellia serrata terdiri dari :

a. Monoterpen (α-thujene)

b. Diterpen (makrosiklik diterpenoid seperti icensole, incensole oksida

isoicensole oksida, diterpen alkohol (serratol)


8

c. Triterpen (seperti α- β –amyrin)

d. Asam triterpenoid pentasiklik (asam boswelat)

e. Asam triterpenoid tetrasiklik (tirucall-8, 24-diena, asam-21-oat) (Anonim,

2007d).

Empat asam triterpen pentasiklik yang terkandung dalam ekstrak

etanol getah resin dari batang tanaman Boswellia serrata terdiri dari konstituen

utama beserta derivatnya adalah sebagai berikut :

1. asam β- boswelat (I)

2. asam 3-O-asetil – β- boswelat (II)

3. asam 11-keto-β-boswelat (III)

4. asam 3-O-asetil-11-keto-β- boswelat (IV).

Gambar 1. Empat asam triterpenoid pentasiklik Boswellia serrata (Sharma,

Mann,Gajbhiye, Kharya, 2007)

HO

COOH AcO

COOH ( I ) ( II )

HO

COOH

O

AcO

COOH

O

(III) (IV)


9

5. Kegunaan

Getah resin yang merupakan bagian dari tanaman Boswellia serrata

dapat digunakan sebagai pengobatan tradisional di India dan Cina untuk

mengatasi berbagai penyakit seperti inflamasi, nyeri tulang dan luka (Huang, Ma,

Badmaev, Shao, dan Chin Chee-Kok, 2000).

Secara tradisional, Boswellia juga digunakan untuk sakit perut dan

kembung. Minyak yang dihasilkan dapat digunakan pada aromaterapi untuk

relaksasi dan untuk mengurangi pernafasan yang lambat. Minyak esensialnya

dipercaya untuk membantu dalam pernafasan dan sistem imun ketika batuk, flu,

bronchitis, dan laryngitis. Penggunaan lain termasuk untuk anti-inflamasi,

antiseptik, dan astringent (Briggs dkk, 2004).

6. Anjuran pemakaian

Range dosis untuk ekstrak Boswellia serrata ini 200-400mg 3 kali

sehari, sedangkan dosis yang umumnya digunakan sekitar 400 mg 3 kali sehari

(Anonim, 2007e). Untuk anti-inflamasi atau bronkokontriksi, digunakan ekstrak

Boswellia serrata dosis 400 mg tiga kali sehari (Anonim, 2007c). Ekstrak

Boswellia serrata juga tersedia dalam bentuk minyak esensial dan sediaan tablet

250 mg (Briggs dkk, 2004).

B. Ekstrak

Ekstrak adalah sediaan kering, kental atau cair dibuat dengan menyari

simplisia nabati atau hewani menurut cara yang cocok, di luar pengaruh cahaya

matahari langsung (Anonim, 1979). Ekstrak juga dapat didefinisikan sebagai


10

sediaan kental yang diperoleh dengan mengekstraksi senyawa aktif dari simplisia

nabati atau hewani menggunakan pelarut sesuai, kemudian semua atau hampir

semua pelarut diuapkan dan massa atau serbuk yang tersisa diperlakukan

sedemikian hingga memenuhi baku yang telah ditetapkan (Anonim, 2000).

Ekstrak kering harus mudah digerus menjadi serbuk. Cairan penyari yang

biasanya digunakan antara lain air, eter, atau campuran etanol dan air (Anonim,

1979).

Penyarian simplisia dengan air dapat dilakukan dengan maserasi, perkolasi,

atau penyeduhan dengan air mendidih. Penyarian campuran etanol dan air

dilakukan dengan cara maserasi atau perkolasi. Penyarian dengan eter dilakukan

dengan perkolasi. Hasil akhir ekstrak cair dengan penyari etanol harus dibiarkan

di tempat sejuk selama 1 bulan, kemudian disaring, sambil mencegah penguapan

(Anonim, 1979 ).

C. Inflamasi

1. Definisi

Radang ialah reaksi jaringan hidup terhadap semua bentuk jejas,

dimana dalam reaksi ini berperan juga pembuluh, syaraf, cairan, serta sel-sel

tubuh di tempat jejas (Sander, 2003). Reaksi inflamasi merupakan respon

nonspesifik terhadap beberapa zat asing yang menyebabkan terjadinya kerusakan

sel (Crowley, 2001). Selain itu, peradangan juga merupakan suatu reaksi vaskuler

yang menghasilkan adanya pengiriman cairan, zat terlarut, dan sel-sel darah yang

bersirkulasi ke dalam jaringan interstisial pada daerah cedera atau nekrosis (Price

dan Wilson, 1984).


11

2. Klasifikasi

Ditinjau dari waktu terjadinya, radang terbagi menjadi dua, yaitu yang

pertama, radang akut yang disebabkan oleh rangsangan yang berlangsung sesaat

atau mendadak (akut); yang kedua, radang kronis yang disebabkan oleh jejas atau

injury yang berlangsung beberapa minggu, bulan, atau bersifat menetap dan

merupakan kelanjutan dari radang akut. Radang kronis ini sering disebut juga

radang proliferatif karena selalu diikuti terjadinya proliferasi fibroblast (Sander,

2003).

3. Penyebab

Terhadap pengaruh-pengaruh yang merusak (noksi) dari berbagai jenis,

jaringan ikat pembuluh bereaksi dengan cara yang sama pada tempat kerusakan

yang menyebabkan terjadinya suatu radang. Noksi dapat berupa noksi kimia,

noksi fisika, infeksi dengan mikroorganisme atau parasit (Mutschler, 1986). Noksi

fisika dapat berupa panas atau dingin sedangkan noksi kimia dapat berupa

konsentrasi asam atau basa (Crowley, 2001).

4. Gejala

Gejala reaksi meradang yang dapat diamati antara lain : pemerahan

(rubor), pembengkakan (tumor), panas meningkat (kalor), nyeri (dolor), dan

gangguan fungsi (functiolaesa) (Mutschler, 1986).

a. Rubor merupakan warna kemerahan yang berhubungan erat terhadap

meningkatnya aliran darah yang disebabkan karena vasodilatasi (Karch, 2003).

Kemerahan biasanya merupakan hal pertama yang dialami setelah terjadi

peradangan. Ketika muncul peradangan, arteriola yang mensuplai daerah


12

tersebut melebar sehingga darah yang masuk ke dalam mikrosirkulasi lokal

menjadi lebih banyak. Kapiler yang sebelumnya kosong dengan cepat terisi

oleh darah, yang sering disebut hyperemia atau kongesti. Karena pembuluh

terisi banyak darah maka dapat mengakibatkan timbulnya kenaikan tekanan

intravaskuler (Price dan Wilson, 1984).

b. Tumor adalah benjolan akibat penimbunan cairan abnormal pada jaringan

interstitial atau rongga tubuh, yang dinamakan dengan oedema (Sander, 2003).

Pembengkakan lokal (tumor) merupakan gejala tanda yang paling menyolok

dari peradangan akut, dimana pembengkakan itu disebabkan karena

pengiriman cairan dan sel-sel dari sirkulasi darah ke jaringan interstisial.

Cairan dan sel yang saling bercampur dan tertimbun di daerah peradangan

sering disebut dengan eksudat. Untuk keadaan dini reaksi peradangan eksudat

tersebut berupa cair. Kemudian leukosit meninggalkan aliran darah dan

selanjutnya tertimbun sebagai bagian dari eksudat (Price dan Wilson, 1984).

c. Kalor merupakan rasa panas pada daerah radang akibat terjadi vasodilatasi

(Sander, 2003). Panas hanya merupakan suatu reaksi peradangan pada

permukaan badan, yang dalam keadaan normal lebih dingin dari 370C, yaitu

suhu di dalam tubuh. Saat terjadi peradangan, kulit menjadi lebih panas karena

banyak darah yang disalurkan dari dalam tubuh ke permukaan daerah yang

terkena daripada yang disalurkan ke daerah yang normal (Price dan Wilson,

1984).

d. Dolor adalah rasa nyeri pada daerah radang akibat iritasi syaraf tepi oleh

mediator kimia dan penekanan ”nerve ending” oleh cairan extravaskuler


13

(Sander, 2003). Perubahan pH lokal atau konsentrasi lokal ion-ion tertentu

dapat merangsang ujung-ujung syaraf. Selain itu, juga dapat disebabkan

adanya pengeluaran zat kimia tertentu seperti histamin atau zat kimia bioaktif

lainnya (Price dan Wilson, 1984) dan juga dapat timbul akibat adanya aktivasi

syaraf nyeri yang disebabkan oleh sistem kinin (Karch, 2003).

e. Functiolesia yaitu berkurangnya fungsi dari organ yang mengalami

keradangan, akibat terbentuknya metabolit-metabolit yang merugikan oleh sel-

sel yang mengalami trauma dan peningkatan temperatur di daerah keradangan

untuk reaksi biokimia sehingga fungsi organ menurun (Sander, 2003).

5. Mekanisme

Respon inflamasi merupakan reaksi lokal dari tubuh karena adanya

luka. Kerusakan pada sel menyebabkan aktivasi zat kimia pada plasma yang

disebut faktor VII atau Hageman factor. Hageman factor bertanggungjawab

untuk mengaktifkan 3 sistem dalam tubuh, salah satunya adalah sistem kinin.

Hageman factor akan mengaktifkan kallikrein merupakan substansi yang

ditemukan pada jaringan lokal, yang dapat menyebabkan berubahnya kininogen

menjadi bradikinin dan kinin lain (Karch, 2003). Bradikinin berkaitan erat dengan

peptida kalidin yang merupakan peptida vasoaktif yang dibentuk dari aktivitas

enzim pada substrat protein yang disebut kininogen. Pembentukan bradikinin dari

kininogen oleh kallikrein terjadi pada plasma (Rang dkk, 2003). Bradikinin

menyebabkan terjadinya vasodilatasi lokal yang akan membawa darah menuju

daerah luka dan diikuti keluarnya sel darah putih menuju jaringan (Karch, 2003).


14

Bradikinin juga dapat menyebabkan lepasnya asam arakidonat dari

membran sel. Asam arakidonat diketahui dapat menyebabkan terlepasnya

substansi lain yang disebut autocoid yang terdiri dari prostaglandin (memperbesar

reaksi inflamasi), leukotrien (menyebabkan vasodilatasi dan meningkatkan

permeabilitas kapiler), dan tromboksan (menyebabkan vasokontriksi lokal dan

agregasi platelet) (Karch, 2003).

Ketika Hageman factor memulai aktivitasnya, pada jalur lain

menghasilkan respon pada daerah lokal. Kerusakan terhadap membran sel

menyebabkan pelepasan histamin secara lokal. Histamin menyebabkan

vasodilatasi, yang membawa darah dan komponen darah yang sangat banyak

menuju daerah luka, mengubah permeabilitas kapiler, sehingga neutrofil dan

darah sangat mudah untuk meninggalkan sirkulasi darah dan menuju daerah luka,

dan merangsang adanya nyeri. Karena banyaknya cairan menuju jaringan

menyebabkan perubahan pada permebilitas pembuluh kapiler sehingga terjadi

tumor (bengkak). Kalor (panas) terjadi karena meningkatnya aliran darah ke

daerah luka. Begitu juga juga gejala rubor (kemerahan) berhubungan erat dengan

adanya peningkatan aliran darah yang disebabkan adanya vasodilatasi. Dolor

(nyeri) muncul karena adanya aktivasi saraf nyeri oleh histamin dan sistem kinin

(Karch, 2003).

Beberapa leukotrien yang diaktifkan oleh asam arakidonat memiliki

sifat yaitu kemotaksis. Kemotaksis merupakan kemampuan menarik neutrofil dan

merangsangnya dan beberapa makrofag lain pada daerah itu sehingga menjadi

sangat aktif. Ketika neutrofil aktif, dan beberapa zat kimia lain terlepas menuju


15

daerah luka, neutrofil dapat merusak sel-sel tersebut. Rusaknya sel akan

menyebabkan terlepasnya enzim liposom dari sel. Enzim itu akan melisiskan atau

merusak membran sel dan protein seluler (Karch, 2003). Mekanisme peradangan

dapat dilihat pada Gambar 2.

Plasma tertarik Histamin lepas pada daerah luka

Hageman factor aktif

Prekallikrein Kalikrein aktif

Kininogen Bradikinin

Asam Arakidonat Permeabilitas Vasodilatasi lepas Kapiler ↑

Leukotrien (LTs) Prostaglandin(PGs) Eksudasi protein ( LTB4, LTC4, (PGI2) plasma Aliran

LTD4,LTE4 ) Darah↑

Kemotaksis leukosit, Edema neutrofil aktif

Fagositosis

Penghilangan sisa luka pada daerah luka untuk proses penyembuhan

Gambar 2. Mekanisme terjadinya peradangan (Karch, 2003)

Bengkak

Merah

PanasNyeri

Jaringan Rusak


16

Manifestasi dari suatu peradangan akut menurut Sander (2003) ada tiga

macam antara lain yaitu perubahan hemodinamik, perubahan permeabilitas, dan

white cell event.

a. Perubahan dinamik dapat disebabkan karena adanya tekanan hidrostatik dalam

pembuluh darah akibat meningkatnya aliran darah pada daerah yang

mengalami kerusakan sehingga cairan keluar menuju daerah yang bertekanan

rendah yaitu intertisial.

b. Perubahan permeabilitas pembuluh darah yang meningkat dapat menyebabkan

terjadi kebocoran pembuluh darah dan akhirnya plasma protein dengan berat

molekul yang besar dapat menerobos dinding pembuluh darah ke jaringan

interstisial.

c. White cells event merupakan sel-sel leukosit yang dalam keadaan normal

berjalan di tengah-tengah dari pembuluh darah, maka pembuluh darah sekitar

daerah peradangan akan melebar dan sel-sel radang PMN akan menepi yang

sering disebut marginasi. Kemudian terjadi emigasi, yaitu sel-sel radang

keluar dari pembuluh darah karena permeabilitas kapiler meningkat. Sel-sel

PMN yang berada di luar pembuluh darah akan menuju ke pusat radang

karena pengaruh adanya mediator kimia dan sering disebut dengan kemotaksis.

Lalu terjadi agregasi, dimana sel-sel PMN akan menggerombol pada pusat

radang atau mengelilingi pusat radang untuk melokalisir daerah radang, dan

akhirnya terjadi fagositosis, yaitu.sel-sel PMN akan memakan kuman atau sel-

sel mati dan dicerna oleh enzim katalitik dari lisosom.


17

6. Mediator inflamasi

Mekanisme terjadinya radang sangat dipengaruhi oleh senyawa dan

mediator yang dihasilkan oleh asam arakidonat. Bila membran sel mengalami

kerusakan oleh suatu rangsangan kimiawi, fisik, atau mekanis, maka enzim

fosfolipase diaktifkan untuk mengubah fosfolipid yang ada menjadi asam

arakidonat (Tjay dan Raharja, 2002). Asam arakidonat sendiri diproduksi oleh

eikosanoid yang merupakan derivat kelompok asam lemak endogen yang sangat

penting. muncul karena adanya beberapa rangsang seperti kerusakan fisik dan

reaksi imun. Rangsangan tersebut akan mengaktifkan enzim fosfolipase pada sel

membran atau sitoplasma dan asam arakidonat terlepas dari membran fosfolipid.

Fosfolipida selain diubah menjadi arakhidonat oleh enzim fosfolipase juga diubah

menjadi lyso-glyseril-fosforilkolin yang kemudian diubah lagi menjadi Platelet

Activating Factor (PAF). Platelet Activating Factor dapat menimbulkan

peradangan dan tidak hanya pada menyebabkan vasodilatasi lokal saja namun

juga dapat meningkatkan permeabilitas pembuluh (Rang, Dale, Ritter, and Moore,

2003).

Arakidonat dimetabolisme dengan beberapa mekanisme di antaranya

dua mekanisme yang paling penting, yaitu :

a. Metabolisme untuk membentuk produk dengan ikatan lurus dengan

lipoksigenase, yang kemudian menghasilkan leukotrien.

b. Mekanisme siklis dengan siklooksigenase, yang menghasilkan prostasiklin,

prostaglandin, dan tromboksan. Siklooksigenase ada 2 bentuk yaitu

siklooksigenase 1 (COX-1), ditemukan pada beberapa jaringan, dan


18

siklooksigenase 2 (COX-2), terutama ditemukan pada sel inflamasi (Katzung,

Enthony, dan Susan, 2002).

Asam arakhidonat dikatalis oleh enzim siklooksigenase menjadi asam

endoperoksida dan seterusnya menjadi prostaglandin (PG) yang dibentuk oleh

semua jaringan, prostasiklin (PGI2) yang dibentuk di dinding pembuluh dan

berdaya vasodilasi, dan tromboksan (TXA2, TXB2) yang khusus dibentuk dalam

trombosit dan berdaya vasokonstriksi serta menstimulasi agregasi pelat darah

(trombotis) (Tjay dan Rahardja, 2002).

Dibawah ini merupakan beberapa mediator yang penting dalam proses

inflamasi, yaitu sebagai berikut :

a. Leukotrien (LTB4), LTC4, LTD4, dan LTE4), merupakan senyawa

sulfidopeptida yang dibentuk sebagai hasil metabolisme asam arkidonat dan

merupakan mediator radang dan nyeri. Melalui rute lipoksigenase terbentuk

LTA4 yang tidak stabil lalu diubah menjadi LTB4 atau LTC4, dan kemudian

diubah lagi menjadi LTE4. Leukotrien C4 (LTC4), LTD4, dan LTE4 terutama

dibentuk di granulosit eosinofil dan memiliki efek vasokontriksi di bronkus

dan permeabilitas pembuluh dengan menimbulkan udema. Leukotrien B4

khusus disintesa di makrofag dan neutrofil alveolar dan bekerja kemotaksis

yaitu menstimulasi migrasi leukosit. Tertarik oleh leukotrien, leukosit dalam

jumlah besar menginvasi daerah peradangan dan mengaktifkan banyak gejala

radang (Tjay dan Rahardja, 2002).

b. Tromboksan, merupakan mediator inflamasi lain yang dibentuk melalui jalur

siklooksigenase adalah tromboksan. Tromboxan (TXA2 dan TXB2) khusus


19

dibentuk dalam trombosit dan memiliki daya vasokontriksi (di jantung) dan

menstimulasi agregase platelet darah (trombosis) (Tjay dan Rahardja, 2002).

Tromboksan biasanya dibentuk pada platelet, sedangkan prostasiklin pada sel

endoteliel (Katzung dkk, 2002).

c. Prostaglandin, merupakan mediator yang merupakan hasil dari metabolisme

asam arakidonat melalui jalur siklooksigenase yang mempunyai berbagai efek

di pembuluh darah, ujung syaraf, dan pada sel-sel yang terlibat dalam

inflamasi (Katzung, 2001). Prostaglandin yang paling penting adalah PgE2 dan

PgF2 memiliki daya vasodilatasi dan meningkatkan permeabilitas dinding

pembuluh dan cairan sinovial sehingga terjadi radang dan rasa nyeri (Tjay dan

Rahardja, 2002).

d. Histamin, merupakan basa amin yang dibentuk dari histidin dengan

dekarboksilase histidin. Histamin dalam bentuk terikat secara biologis tidak

aktif, tetapi banyaknya stimulus dapat memicu keluarnya histamin sel mast,

menyebabkan amin bebas untuk menjalankan aksinya pada derah di sekitarnya

(Katzung, 2001). Histamin merupakan mediator yang menyebabkan

vasodilatasi, mengubah permeabilitas kapiler, sehingga neutrofil dan darah

meninggalkan sirkulasi darah, menuju daerah luka, dan merangsang nyeri.

Karena banyaknya cairan menuju jaringan maka dapat menyebabkan

terjadinya perubahan pada permebilitas pembuluh kapiler (Karch, 2003).


20

Stimuli Fosfolipase A2 aktif Fosfolipid di membran sel

Asam arakidonat Liso-gliseril- fosforilkolin

Lipoksigenase (LOX) Siklooksigenase (COX)

PAF Hidroperoksida Endoperoksida (vasodilator,meningkatkan

permeabilitas vascular, bronkononstriktor,

kemotaksin) 12-LOX 5-LOX 15-LOX

12 HPETE 5 HPETE 15 HPETE 12 HETE 5 HETE LTA4 15 HETE Tromboksan Prostaglandin Prostasiklin

(TXA) ( PGE,PGF) ( PGI) LTB4 Lipoksin (kemotaksin) Adan B

Gambar 3. Skema mediator yang berasal dari asam arakhidonat dan kerja obat anti-inflamasi (Rang dkk, 2003; Katzung dkk, 2002)

Keterangan: OAINS = Obat Anti-Inflamasi Non Steroid PAF = Platelet Activating Factor LT = leukotrien = diubah = kerja obat anti-inflamasi (menghambat)

LTC4 LTD4 LTE4

(bronkokonstriktor;

meningkatkan permeabilitas

vaskular

5-Lipoksig

enase inhibitor,

co: zileutin

Reseptor antagonis

leukotrien , co:

zafirlukas, montelukas

TXA2 (trombotik;

vasokonstriktor) PGI2

(vasodilator; hiperalgesik;

menghentikan agregasi platelet)

PGD2α (bronkokon

striktor; kontraksi

miometrial)

PGD2 (menghambat agregasi

platelet; vasodilator)

PGE2 (vasodilator

; hiperalgesi

k)

Antagonis PG

OAINS

Antagonis TXA2

Antagonis PAF

Glukokortikoid


21

D. Obat – Obat Anti- inflamasi

Penggunaan obat anti-inflamasi digunakan untuk mengurangi terjadinya

radang. Pengobatan pada pasien yang mengalami inflamasi biasanya ditujukan

untuk meringankan rasa nyeri yang merupakan gejala awal dan merupakan

keluhan utama pada pasien, dan membatasi proses perusakan jaringan (Katzung,

2001).

Golongan kortikosteroid mempunyai efek samping yang lebih berbahaya

pada dosis tinggi dan penggunaan lama (Tjay dan Rahardja, 2002) sehingga obat-

obat Anti-Inflamasi Non Steroid (AINS) memegang peran utama dalam

pengobatan radang (Katzung, 2001). Klasifikasi AINS berdasarkan kimiawinya

dapat dilihat pada gambar 4.

ASAM KARBOKSILAT ASAM ENOLAT

Asam Derivat Asam Derivat Asam Derivat Asam Derivat Derivat Asetat Salisilat Propionat Fenamat Pirazolon Oksikam

Aspirin As. Tiaprofenat As. mefenamat Azapropazon Piroksikam

Benorilat Fenbufen Meklofenamat Fenilbutazon Tenoksikam Diflunisal Fenoprofen Oksifenbutazon Salsalat Flurbiprofen

Ibuprofen Ketoprofen

Naproksen Derivat Asam Fenilasetat Derivat Asam asetat Inden/indol: Diklofenak Indometasin Fenklofenak Sulindac Tolmetin

Gambar 4. Klasifikasi obat Anti-Inflamasi Non Steroid (AINS) (Wilmana, 1995)

OBAT AINS


22

Mekanisme utama dari AINS adalah menghambat metabolisme asam

arakidonat oleh siklooksigenase. Obat AINS hendaknya hanya menghambat

COX-2 (peradangan) dan tidak COX-1 (perlindungan mukosa lambung) (Tjay dan

Rahardja, 2002). Pada inflamasi, prostaglandin berperan dalam menyebabkan

vasodilatasi dan meningkatkan permeabilitas vaskuler. Akan tetapi, inhibisi

sintesis prostaglandin oleh AINS mengurangi inflamasi daripada

menghilangkannya karena obat ini tidak menghambat mediator inflamasi lainnya .

Meskipun demikian, pada sebagian besar pasien dengan antritis reumatoid, efek

anti-inflamasi OAINS yang relatif ringan dapat mengurangi nyeri, kekakuan dan

pembengkakkan (Neal, 2005). Berbagai AINS mungkin memiliki mekanisme

kerja tambahan termasuk kemotaksis, regulasi darah produksi interleukin-1,

penurunan produksi radikal bebas dan superoksida, dan campur tangan dengan

kejadian-kejadian intraseluler yang diperantarai kalsium. Selain efek terapi, AINS

juga dapat menimbulkan efek samping karena didasarkan oleh hambatan pasa

sistem biosintesis prostaglandin. Efek samping yang paling sering terjadi adalah

induksi tukak lambung yang kadang disertai dengan anemia sekunder akibat

perdarahan saluran cerna. Beratnya efek berbeda pada masing-masing obat

(Wilmana, 1995). Mekanisme kerja obat anti-inflamasi dapat dilihat pada gambar

5.


23

Enzim lipooksigenase Enzim siklooksigenase

Gambar 5. Mekanisme kerja obat anti inflamasi (Wilmana, 1995; Katzung dkk, 2002).

Keterangan : : menghambat

E. Natrium Diklofenak

Diklofenak merupakan turunan sederhana dari asam fenilasetat yang

mirip baik dengan flurbiprofen dan meklofenamat. Diklofenak berpotensi sebagai

penghambat siklooksigenase. Obat ini dianjurkan untuk inflamasi kronis seperti

arthritis reumatik, osteoarthritis, dan untuk pengobatan pada nyeri akut

musculoskeletal (Katzung, 1995).

Trauma/luka pada sel

Gangguan pada membrane sel

Asam Arakidonat

Hidroperoksid

Fosfolipid Enzim fosfolipase A2 Kortikosteroid

Enderoperoksid PGG2/PGH

AINS

Leukotrienm PGE2,

PGF2, PGD2

Tromboksan A2

Prostasiklin

Reseptor

zileuton

zafirlukast


24

Absorbsi obat ini melalui saluran cerna berlangsung cepat dan lengkap.

Obat ini terikat 99% pada protein plasma dan mengalami efek lintas pertama

sebesar 40-50%. Walaupun waktu paruhnya singkat yaitu 1-3 jam, diklofenak

diakumulasi di cairan sinovia yang menjelaskan efek terapi di sendi jauh lebih

panjang dari waktu paruh obet tersebut (Wilmana, 1995).

Efek samping terjadi pada pada pasien kira-kira 20% dan meliputi

bahaya pada lambung, pendarahan lambung, dan ulserasi lambung (Katzung,

1995), sehingga pemakaian obat ini harus hati-hati pada penderita tukak lambung

(Wilmana, 1995). Selain itu, efek samping lain antara lain mual, gastritis, eritema

kulit, dan sakit kepala (Wilmana, 1995). Struktur Natrium diklofenak dapat dilihat

pada gambar 6.

Gambar 6. Struktur natrium diklofenak (Hanson, 2000).

F. Metode Uji Daya Anti-inflamasi

Ada beberapa uji in-vivo yang dilakukan untuk menguji daya anti-

inflamasi, antara lain sebagai berikut :

1) Uji erythema

Hewan uji yang digunakan yaitu marmot galur Pirrbright baik jantan

atau betina yang memiliki berat kira-kira 350 gram. Kemudian diberikan

NH

Cl

ClNaOCCH2

O


25

perlakuan barium sulfida dalam bentuk suspensi. Pada hari berikutnya, senyawa

uji yang dilarutkan dalam pembawa yang sesuai dan setengah dosis dari senyawa

tersebut diberikan dengan gavage pada 10 ml/kg 30 menit sebelum penyinaran

UV. Kotrol diberikan perlakuan pembawa saja. Empat hewan digunakan untuk

setiap kelompok perlakuan dan kontrol. Mermot tersebut diletakkan pada manset

kulit dengan lubang ukuran 1,5x2,5 cm dan dilakukan penyinaran UV. Setelah 2

jam, setengah dosis senyawa uji yang masih tersisa diberikan kembali pada

hewan uji dan diamati 2 dan 4 jam setelahnya (Vogel, 2002)

Uji erythema dengan UV ini dilakukan pada kulit marmot albino

dengan bobot rata-rata marmot albino sebesar 350 gram. Penilaian erythema dapat

dilakukan sebagai berikut : jika tidak ada inflamasi= 0, erythema ringan= 1,

erythema berat= 2, dan erythema sangat berat/kuat= 4. Hewan uji dengan nilai 0

atau 1 dianggap terlindungi, sedangkan nilai setelah 2 dan 4 harus diberi indikasi

durasi efeknya (Vogel, 2002). Keuntungan metode ini adalah sederhana namun

membutuhkan latihan bagi pengguna dalam pemakaian fotometer refleksi yang

bertujuan untuk menghilangkan penilaian subjektif yang tidak perlu (Vogel, 2002).

2) Uji paw edema

Diantara beberapa metode yang digunakan untuk skrining obat anti-

inflamasi, terdapat satu dari teknik yang biasa digunakan pada kemampuan

beberapa bahan uji untuk menghambat produksi udema kaki hewan uji setelah

injeksi bahan pembuat radang. Beberapa zat pembuat radang (iritan) yang telah

digunakan seperti brewer’s yeast, formaldehid, dextran, albumin telur, kaolin,

aerosol, karagenin, atau naphthoylheparamin. Biasanya ukuran udema kaki hewan


26

uji hasil injeksi diukur sebelum dan setelah perlakuan iritan dan ukuran udema

kaki tersebut dibandingkan dengan kontrol. Pada metode ini digunakan hewan uji

tikus Sprague-Dawley dengan berat 100-150 gram. Unutk memastikan hidrasi,

tikus diberikan 5 ml air ke dalam saluran pencernaan (kontrol) atau bahan uji yang

dilarutkan pada volume yang sama. Setelah 30 menit, tikus diberikan secara

injeksi subkutan 0,05 ml karagenin 1% pada bagian kaki kiri. Volume udema

diukur menggunakan secara plethymographycally setelah injeksi, 3 dan 6 jam dan

24 jam (Vogel, 2002).

3) Pleurisy test (uji radang selaput dada)

Radang selaput dada dikenal sebagai fenomena inflamasi eksudatif

pada manusia. Pada penelitian radang selaput dada dapat diinduksi dengan

beberapa iritan seperti histamine, bradikinin, prostaglandin, degranulator sel mast,

dextran, enzyme, antigen, mikroba, dan iritan nonspesifik seperti turpentine dan

karagenin. Radang pada tikus yang diinduksi oleh karagenin akan

dipertimbangkan sebagi model inflamasi akut yang baik, dimana keluarnya cairan,

migrasi leukosit, dan beberapa parameter biokimia yang berkaitan pada respon

inflamasi dapat diukur secara mudah dari eksudatnya (Vogel, 2002). Model

radang selaput dada dapat diterima sebagai metode yang dapat dipercaya untuk

mengetahui inflamasi akut dan subakut yang diikuti determinasi beberapa

parameter secara bersama-sama (Vogel, 2002).

Tikus jantan bergalur Sprague-Dawley dengan berat 220-260 gram

dapat digunakan dalam metode ini. Sebanyak 0,1 ml karagenin 2% diinjeksikan ke

dalam rongga selaput dada. Kemudian 1 jam sebelum injeksi karagenin, 24 jam,


27

dan 48 jam sesudahnya, kelompok yang terdiri dari 10 tikus diberi perlakuan

dengan senyawa standar atau senyawa uji melalui oral atau subkutan. Kelompok

kontrol hanya diberikan pelarut senyawa uji (Vogel, 2002).

4) Tes kantung granuloma

Merupakan suatu metode yang menggunakan minyak kroton sebagai

iritan. Metode ini sering digunakan untuk memperkirakan potensi dari anti

inflamasi kortikosteroid baik setelah pemberian local maupun sistemik. Dengan

penyuntikkan dan induksi pada kantung granuloma setelah beberapa interval

waktu sampai 4 minggu durasi efek dapat diketahui (Vogel, 2002).

Pada metode ini digunakan tikus jantan atau betina Sprague-Dawley

dengan berat antara 150-200 gram. Hewan uji 10 ekor digunakan unutk kelompok

perlakuan dan kontrol. Pada bagian punggunag dicukur dan disinfeksi, kemudian

dengan jarum pneumoderma diinjeksikan 20 ml udara dibawah pengaruh anestesi.

Kemudian diinjeksikan 0,5 ml larutan minyak kroton. Empat puluh delapan jam

kemudian, kantung udara terbentuk Saat pembentukan kantung udara, hewan uji

setiap hari diberikan perlakuan senyawa uji atau standar secara oral atau subkutan.

Setelah 4 atau 5 hari, hewan uji diberi obat bius, kantung udara dibuka, dan

eksudat diletakkan dalam gelas silinder lalu diukur (Vogel, 2002)

Selain beberapa uji in-vivo di atas, uji daya anti-inflamasi juga dapat

dilakukan dengan beberapa uji in-vitro antara lain sebagai berikut :

1. Uji kemotaksis leukosit polimorfonuklear

Akumulasi leukosit merupakan faktor penting pada mekanisme

pertahanan tubuh. Faktor kemotaksis menarik leukosit pada darah terinfeksi atau


28

bagian yang terinflamasi. Metode Boyden (1962) digunakan untuk mengukur efek

kemotaksis pada leukosit polimorfonuklear.

Kecepatan migrasi dihitung sebagai persentase dari jumlah PMNs pada

kompartemen rendah atau jumlah penggunaan PMNs pada kompartemen tinggi.

Kecepatan migrasi tergantung pada konsentrasi chemoattractant seperti zymosan

activated serum. Selain itu, dosisnya tergantung penurunan kecepatan migrasi

yang dicapai oleh inhibitor kemotaksis (Vogel, 2002).

2. Agregasi leukosit polimorfonuklear yang diinduksi FMLP

Agregasi PMNs dapat diinduksi dengan FMLP (formil-L-methionil-L-

leucyl-L-fenilalanin). Agregasi dapat dihambat dengan turunan xantin. Suspensi

sel PMNs disiapkan dari eksudat peritonial yang diambil 17 jam setelah injeksi

intraperitonial 10 ml 6% sodium caseinate terhadap tikus Sprague Dawley.

Senyawa uji dan standart (pentoxiphylline) dilarutkan dalam GBSS (Geys-

balanced-salt-solution). FMLP dilarutkan dalam DMSO. Dilusi selanjutnya

dibuat sampai mencapai konsentrasi 10-7 mol FMLP dalam GBSS. Sebelum

ditambahkan FMLP, suspensi sel diinkubasi awal selama 10 menit dengan obat.

Agregasi PMNs masuk ke dalam a Born aggregometer (Vogel, 2002).

G. Landasan Teori

Inflamasi merupakan respon jaringan lokal terhadap adanya kerusakan.

Peradangan merupakan suatu reaksi vaskular yang hasilnya merupakan

pengiriman cairan, zat-zat terlarut dan sel-sel darah yang bersirkulasi ke dalam

jaringan–jaringan intertisial pada daerah cedera atau nekrosis.


29

Boswellia serrata merupakan tanaman dimana pada bagian batang

tanaman ini dapat dihasilkan getah resin/ oleoresin yang merupakan bahan ekstrak

Boswellia serrata. Dalam tanaman Boswellia serrata terdapat empat asam

triterpen pentasiklik dengan asam β- boswelat yang menjadi konstituen utama

Boswellia ini. Asam boswelat akan menghambat jalur 5-lipoksigenase yang

mengubah asam arakhidonat menjadi leukotrien.

Berdasarkan penelitian Sontakke dkk, 2007 diketahui bahwa keamanan,

kemanjuran, dan durasi dari ekstrak Boswellia serrata lebih baik jika

dibandingkan valdecoxib, dan namun onset pada ekstrak Boswellia serrata lebih

lama jika dibandingkan dengan valdecoxib yang merupakan salah satu obat anti-

inflamasi non-steroid. Selain itu, ekstrak Boswellia serrata juga dapat

meningkatkan kemanjuran pada pengobatan pasien yang menderita osteoarthritis

dengan mengkonsumsi 333 mg ekstrak Boswellia serrata 3 kali sehari selama 8

minggu (Milot, 2003).

Oleh karena itu, pada penelitian ini akan dilakukan penelitian secara in-

vivo terhadap ekstrak Boswellia serrata dengan menggunakan metode Langford

dkk (1972) untuk mengetahui apakah ekstrak Boswellia serrata benar-benar dapat

digunakan sebagai anti-inflamasi.

H. Hipotesis

Ekstrak Boswellia serrata Roxb. ex Colebr. -- Indian frankincense

memiliki efek anti-inflamasi terhadap mencit putih betina.


30

BAB III

METODE PENELITIAN

A. Jenis dan Rancangan Penelitian

Penelitian tentang daya anti-inflamasi ekstrak Boswellia serrata pada

mencit betina putih merupakan jenis penelitian eksperimental murni dengan

menggunakan rancangan acak lengkap pola searah. Maksud dari eksperimental

adalah penelitian yang dilakukan dengan mengadakan perlakuan terhadap objek

penelitian serta adanya kontrol. Lengkap berarti setiap hewan uji dalam satu

kelompok perlakuan menerima jenis perlakuan yang sama. Pola satu arah

menunjukkan hanya ada satu variabel bebas yaitu dosis sediaan ekstrak Boswellia

serrata.

B. Variabel dan Definisi Operasional

1. Variabel penelitian

a. Variabel bebas

Dosis ekstrak Boswellia serrata tiap kg berat badan mencit betina.

b. Variabel tergantung

Bobot udema kaki mencit yang mengalami radang buatan dengan karagenin

1% yang akan menentukan besarnya prosentase daya anti–inflamasi dari

ekstrak Boswellia serrata.

c. Variabel pengacau terkendali

1) Umur mencit : 2 – 3 bulan

2) Jenis kelamin mencit : betina


31

3) Berat badan mencit : 20 – 30 gram

4) Galur mencit : Swiss

5) Keadaan mencit : sehat secara fisik

d. Variabel pengacau tak terkendali

1) Keadaan patologis hewan uji, seperti kemungkinan hewan uji sakit.

2. Definisi operasional

a. Ekstrak Boswellia serrata

Ekstrak Boswellia serrata adalah ekstrak yang mengandung asam

boswelat tidak kurang dari 65% yaitu sebesar 66,3%, yang diperoleh dengan

mengekstraksi getah minyak resin dari tanaman Boswellia serrata dengan

pelarut alkohol.

b. Dosis sediaan ekstrak Boswellia serrata

Dosis diperoleh dengan menimbang sekian miligram serbuk Boswellia

serrata per kilogram berat badan dilarutkan dengan CMC-Na 1% kemudian

diberikan secara peroral tiap kilogram berat badan mencit.

c. Uji daya anti-inflamasi

Uji ini dilakukan dengan menggunakan mencit galur Swiss sebagai

hewan uji yang diradangkan telapak kaki kirinya, dan diukur bobot kakinya

dengan cara memotong kedua kaki belakang mencit pada bagian torsocrural,

kemudian ditimbang dan dibandingkan dengan kelompok kontrol negatif

karagenin 1% sub plantar.


32

d. Efek anti-inflamasi

Efek yang ditunjukkan dengan adanya penurunan udema pada bobot

rata-rata udema kaki mencit yang dihasilkan dari sekian miligram serbuk

Boswellia serrata per kilogram berat badan yang dilarutkan dengan CMC-Na

1% dan hasilnya signifikan terhadap kontrol negatif.

e. Prosentase respon daya anti-inflamasi

Prosentase daya anti-inflamasi dihitung dari selisih rata-rata perubahan

bobot kaki kontrol negatif karagenin 1% dengan perubahan bobot kaki yang

diinjeksi dengan ekstrak Boswellia serrata dan dibagi dengan rata-rata

perubahan bobot kaki kontrol negatif karagenin 1% kemudian dikalikan

seratus persen.

C. Bahan Penelitian

Bahan-bahan yang digunakan dalam penelitian ini antara lain sebagai

berikut :

1. Hewan uji yang digunakan yaitu mencit betina galur Swiss, dengan usia 2 – 3

bulan, dengan berat badan 20–30 g yang diperoleh dari Laboratorium

Farmakologi & Toksikologi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.

2. Bahan uji yang digunakan adalah sediaan ekstrak Boswellia serrata dari IOT.

Sari Sehat - PT. Capung Indah Abadi yang diimpor dari Phytotech Extract Pvt.

Ltd. India dan mengandung 66,3 % asam boswelat..

3. Karagenin sebagai zat peradang (inflamatogen) yang diproduksi oleh PT.

Bratacco.


33

4. Tablet generik natrium diklofenak 25 mg sebagai kontrol positif yang

diproduksi oleh PT. Phapros dan diperoleh dari Apotek Master, Sleman.

5. NaCl fisiologis 0,9 % (Otsuka) sebagai pensuspensi karagenin yang diperoleh

dari Apotek Kimia Farma, Sleman.

6. Carboxymethylcellulose-natrium (Bratacco) sebagai pensuspensi ekstrak

Boswellia serrata yang diperoleh dari Laboratorium Farmakologi &

Toksikologi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.

7. Alkohol yang diperoleh dari Laboratorium Farmakologi & Toksikologi

Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.

8. Aquadest yang diperoleh dari Alfa Kimia sebagai pelarut natrium dikofenak.

D. Alat Penelitian

Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah sebagai berikut :

1. Alat – alat gelas seperti beker glass, labu takar, gelas ukur, pipet tetes,

pengaduk bermerk Pyrex Iwaki Glass, Japan.

2. Spuit injeksi oral (0,1 – 1,0 ml) yang ujungnya diberi bulatan kecil dengan

lubang ditengahnya agar tidak melukai hewan uji.

3. Spuit injeksi subplantar (0,1 – 1,0 ml).

4. Gunting bedah.

5. Alat pemanas aquadest dan stirer.

6. Neraca analitik merk Mettler Toledo AB 204.


34

E. Tata Cara Penelitian

1. Perolehan ekstrak tanaman Boswellia serrata

Ekstrak Boswellia serrata yang digunakan dalam penelitian ini

diperoleh dan disediakan oleh IOT. Sari Sehat- PT. Capung Indah Abadi yang

diimpor dari Phytotech Extract Pvt. Ltd. India (terlampir certificate of analysis

Boswellia serrata pada lampiran 6).

2. Penyiapan hewan uji

Hewan uji yang dibutuhkan adalah delapan puluh lima ekor mencit

betina galur Swiss, umur 2 – 3 bulan, berat badan 20 – 30 g. Hewan uji dibagi

secara acak menjadi 2 kelompok, yaitu :

a. Kelompok untuk orientasi sebanyak 45 ekor, dan

b. Kelompok perlakuan sebanyak 40 ekor. Kelompok perlakuan terdiri dari 8

kelompok yang masing – masing terdiri dari 5 ekor, untuk perlakuan kontrol

negatif karagenin 1%, kontrol pelarut ekstrak Boswellia serrata, kontrol

negatif aquadest, kontrol positif natrium diklofenak, dan kelompok perlakuan

sediaan ekstrak Boswellia serrata dalam 4 peringkat dosis.

Sebelum diberi perlakuan, hewan uji dipuasakan delapan belas sampai

dua puluh empat jam dan pemberian minum untuk hewan uji tidak dihentikan.

3. Perhitungan dan penetapan dosis

a. Karagenin 1%

Menurut Williamson (1996), konsentrasi karagenin yang digunakan

pada mencit adalah 1% dengan volume 0,05 ml. Volume 0,05 ml karagenin


35

1% adalah volume pemberian untuk mencit dengan berat 20 g sehingga dosis

bisa dicari dengan rumus:

V ml = mlmgC

kgBBxBBkgmgD/

/

0,05 ml = mlmg

kgxBBkgmgD/10

02,0/

D = 25 mg/kg BB dan V = {2,5 x BB kg} ml.

b. Natrium diklofenak

Dosis yang digunakan pada penelitian ini berdasarkan dosis efektif

yang diperoleh dari penelitian Noni, Djunarko, dan Donatus (2003) dan

penelitian Rosiana (2007) yaitu sebesar 4,48 mg/kgBB.

c. CMC- Na 1%

Sebagai kontrol negatif CMC 1% diberikan secara per oral, dan

volume pemberian maksimal pada mencit adalah 1ml, diketahui berat mencit

maksimal dalam penelitian ini adalah 30 gram sehingga bisa dihitung dengan

rumus:

V ml = mlmgC

kgBBxBBkgmgD/

/

1 ml = mlmg

kgxBBkgmgD/10

03,0/

D = 333,3 mg/kg BB dan V = {33,3 x BB kg} ml.

4. Pembuatan suspensi karagenin 1%

Timbang 100 mg karagenin, larutkan dengan larutan NaCl fisiologis

0,9% dalam labu takar 10 ml sehingga diperoleh konsentrasi suspensi karagenin


36

1% sebagai zat inflamatogen pada kaki mencit. Apabila akan digunakan kembali

sebaiknya diletakkan dalam almari es.

5. Pembuatan larutan natrium diklofenak

Natrium diklofenak yang digunakan pada penelitian ini adalah natrium

diklofenak 25 mg berbentuk tablet salut sehingga perlu dilakukan terlebih dahulu

uji keseragaman bobot. Dosis efektif natrium diklofenak yang digunakan sebesar

4,48 mg/kg BB berdasarkan penelitian Noni dkk (2003) dan Rosiana (2007),

sehingga konsentrasi natrium diklofenak yang diharapkan adalah sebagai berikut :

C = Vml

kgBBxBBkgmgD /

= mlmg

kgxBBkgmg/5,0

03,0/48,4

= 0,269 mg/ml

= 2,7 mg/10 ml = 0,0027 g/ml.

Syarat uji keseragaman bobot menurut Farmakope Indonesia edisi III yaitu :

Timbang 20 tablet, hitung bobot rata-rata tiap tablet. Jika ditimbang

satu per satu, tidak boleh lebih dari 2 tablet yang masing-masing bobotnya

menyimpang dari bobot rata-ratanya lebih besar dari harga yang ditetapkan pada

kolom A, dan tidak satu tabletpun yang bobotnya menyimpang dari bobot rata-

ratanya lebih dari harga yang ditetapkan kolom B. Jika tidak mencukupi 20 tablet,

dapat digunakan 10 tablet; tidak satu tabletpun yang bobotnya menyimpang lebih

besar dari bobot rata-rata yang ditetapkan kolom A dan tidak satu tabletpun yang

bobotnya menyimpang lebih besar dari bobot rata-rata yang ditetapkan kolom B.


37

Bobot rata-rata Penyimpangan Bobot rata-rata dalam % A B

25 mg atau kurang 26 mg sampai dengan 150 mg

151 mg sampai dengan 300 mg lebih dari 300 mg

15 % 10%

7,5 % 5%

30% 20% 15% 10%

( Anonim,1979).

Tablet sebanyak 20 buah ditimbang satu per satu dan dihitung jumlah

bobot secara keseluruhan serta rata-ratanya. Untuk mengetahui jumlah serbuk

yang akan ditimbang, maka perlu dilakukan penggerusan tablet. Jumlah serbuk

yang ditimbang dapat diperoleh dengan cara sebagai berikut :

Natrium diklofenak yang ditimbang (g) = ×BA berat total tablet yang digerus

Keterangan : A : Jumlah natrium diklofenak yang diinginkan B : Jumlah natrium diklofenak pada kemasan x jumlah tablet yang digerus Pada penelitian ini, jumlah tablet yang akan digerus sebanyak 4 tablet

masing-masing 25 mg sehingga akan diperoleh serbuk sebanyak 100 mg = 0,1 g.

Oleh karena itu ambil 4 tablet, timbang satu per satu dan dihitung bobot

keseluruhan. Untuk mendapatkan zat aktif natrium diklofenak dengan konsentrasi

0,0027 g/ml, maka dapat dihitung sebagai berikut :

Misal, jumlah 4 tablet = 0,7443 g.

Berat natrium diklofenak yang ditimbang (g) = ×g

g1,0

0027,0 0,7443 g

= 0,02 g.

Serbuk natrium diklofenak yang diperoleh dari perhitungan,ditimbang

seksama, lalu larutkan dalam 10 ml aquadest. Aquadest yang berada dalam

kondisi hangat juga dapat digunakan untuk meningkatkan kelarutan natrium

diklofenak


38

6. Pembuatan larutan CMC-Na 1%

Timbang 1 g CMC-Na, disuspensikan sampai 100 ml dengan aquadest

hangat, kemudian aduk sampai diperoleh larutan yang homogen.

7. Penetapan dosis ekstrak Boswellia serrata

Ekstrak Boswellia serrata memiliki range dosis sebesar 200-400 mg,

dan dosis yang biasanya digunakan sebesar 400 mg 3 kali sehari. Selain itu,

menurut Briggs dkk (2004), ekstrak Boswellia serrata juga tersedia dalam bentuk

tablet 250 mg. Oleh karena itu, pada penelitian ini digunakan dosis 400 mg tiga

kali sehari sehingga dosis penggunaan sehari ekstrak Boswelia serrata untuk

manusia 50 kg ialah 1200 mg. Cara pemberian ekstrak Boswellia serrata ini

dibuat dalam bentuk suspensi. Dalam penelitian digunakan 4 peringkat dosis,

yaitu : 1/9 kali, 1/3 kali, 1 kali dan 3 kali dosis penggunaan pada manusia.

Berikut ini ialah rincian konversi dosis manusia 70 kg ke mencit 20

gram dengan faktor konversi 0,0026 :

1) 1 / 9 kali

1 / 9 x 1200 mg = 133,33 mg

133,33 mg/50 kg = 186,66 mg/70 kg

Konversi ke mencit 20 gram = 186,66 mg/70 kg BB x 0,0026

= 0,485 mg/20 gram BB

= 24,25 mg/kg BB

2) 1 / 3 kali

1 / 3 x 1200 mg = 400 mg

400 mg/50 kg = 560 mg/70 kg


39

Konversi ke mencit 20 gram = 560 mg/70 kg BB x 0,0026

= 1,456 mg/20 gram BB

= 72,8 mg/kg BB

3) 1 kali

1 x 1200 mg = 1200 mg

1200 mg/50 kg = 1680 mg/70 kg


= 4,368 mg/20 gram BB

= 218,4 mg/kg BB

4) 3 kali

3 x 1200 mg = 3600 mg

3600 mg/50 kg = 5040 mg/70 kg


= 13,104 mg/20 gram BB

= 655,2 mg/kg BB.

Dengan ketentuan volume maksimal pemberian per oral pada mencit

ialah 1 ml dan volume pemberian sebanyak 0,5 ml, serta berat badan mencit

maksimal sebesar 30 g, maka dapat diperoleh konsentrasi ekstrak Boswellia

serrata yang akan dapat terlihat pada lampiran 7.


40

8. Uji Pendahuluan

Gambar 7. Skema kerja uji pendahuluan

Keterangan : I : Kelompok perlakuan 1 jam setelah injeksi karagenin 1% II : Kelompok perlakuan 2 jam setelah injeksi karagenin 1% III : Kelompok perlakuan 3 jam setelah injeksi karagenin 1% IV : Kelompok perlakuan 4 jam setelah injeksi karagenin 1% A : Kelompok perlakuan injeksi karagenin 1% 15 menit sesudah natrium diklofenak B : Kelompok perlakuan injeksi karagenin 1% 30 menit sesudah natrium diklofenak C : Kelompok perlakuan injeksi karagenin 1% 45 menit sesudah natrium diklofenak D : Kelompok perlakuan injeksi karagenin 1% 60 menit sesudah natrium diklofenak E : Kelompok perlakuan injeksi karagenin 1% 90 menit sesudah natrium diklofenak

Uji selang waktu pemotongan kaki setelah injeksi karagenin 1%

Uji selang waktu pemberian Na Diklofenak dengan dosis efektif 4,48 mg/kgBB

Dua puluh ekor mencit dibagi 4 kelompok

Kaki kiri bagian belakang diinjeksi dengan 0,05 ml suspensi karagenin

1%, kaki kanan diinjeksi dengan spuit injeksi tanpa karagenin 1%,

keduanya secara subplantar

Dua puluh lima ekor mencit dibagi 5 kelompok

Masing-masing diberi perlakuan natrium diklofenak dengan

dosis 4,48mg/kgBB

I II III IV

A E C B D

Kaki kiri bagian belakang diinjeksi dengan 0,05 ml suspensi karagenin 1%, kaki kanan

diinjeksi dengan spuit injeksi tanpa karagenin 1%, keduanya secara subplantar

selang waktu 3 jam

Mencit dikorbankan, kedua kaki bagian belakang dipotong pada sendi tarsocrural, ditimbang

Uji Pendahuluan


41

9. Perlakuan hewan uji

Gambar 8. Skema kerja perlakuan hewan uji Keterangan : I : Kelompok kontrol negatif karagenin 1% II : Kelompok kontrol positif natrium diklofenak III : Kelompok kontrol negatif CMC-Na 1 % IV : Kelompok kontrol negatif aquadest V : Kelompok perlakuan ekstrak Boswellia serrata dosis 24,25 mg/kg BB VI : Kelompok perlakuan ekstrak Boswellia serrata dosis 72,8 mg/kg BB VII : Kelompok perlakuan ekstrak Boswellia serrata dosis 218,4 mg/kg BB VIII : Kelompok perlakuan ekstrak Boswellia serrata dosis 655,2 mg/kg BB

Empat puluh ekor hewan uji dibagi menjadi 8 kelompok

I II III VIII VII VI V IV

Diberikan ekstrak Boswellia serrata secara peroral

Perlakuan injeksi 0,05ml karagenin 1% kaki kanan dan kaki kiri tanpa karagenin 1%, keduanya secara subplantar

Lalu mencit dikorbankan, kedua kaki belakang dipotong pada bagian tarsocrural

Selang waktu 90 menit

Selang waktu 3 jam

Ditimbang


42

10. Perhitungan prosentase respon daya anti – inflamasi

Dari hasil penimbangan berat kedua kaki belakang hewan uji untuk

masing-masing peringkat dosis dapat dicari prosentase respon daya anti –

inflamasi. Adapun rumus menurut Langford dkk (1972) adalah sebagai

berikut:

Prosentase respon daya anti – inflamasi = ( ) %100xD

DU −

= 1001 xDU

⎟⎠⎞

⎜⎝⎛ − %

Karena prosentase respon anti-inflamasi dihitung dari pengurangan

bobot udema, maka rumus di atas diubah menjadi :

Prosentase respon daya anti – inflamasi = ( ) %100xU

DU −

= 1001 xUD⎟⎠⎞

⎜⎝⎛ − %

Keterangan : U = bobot kaki terinduksi karagenin – bobot kaki normal D = bobot kaki perlakuan – bobot kaki normal

11. Perhitungan prosentase daya anti – inflamasi

Prosentase daya anti – inflamasi = 100xRAndRAbs %

Keterangan : RAbs = % respon anti inflamasi kelompok perlakuan sediaan ekstrak Boswellia serrata RAnd = % respon anti inflamasi kelompok natrium diklofenak

F. Analisis hasil

Data yang telah diperoleh dianalisis secara non parametric dengan uji

Kolmogorov – Smirnov satu sample untuk mengetahui pola distribusi data.


43

Apabila sudah terdistribusi normal maka dilanjutkan dengan uji homogenitas

variansi. Jika data yang diperoleh diketahui terdistribusi normal, maka dapat

dilanjutkan dengan uji analysis of variance (ANOVA) one way taraf kepercayaan

95% untuk mengetahui adanya perbedaan pada kelompok perlakuan. Setelah itu,

untuk menguji perbedaan hasil tersebut bermakna atau tidak bermakna secara

statistik, maka dilanjutkan dengan uji Scheffe. Secara statistik, perbedaan tersebut

bermakna jika hasil yang diperoleh memiliki nilai signifikansi (p)<0,05. Namun,

jika signifikansi (p)>0,05 maka tidak terdapat perbedaan bermakna secara statistik.

Apabila data yang sudah terdistribusi normal tersebut dilanjutkan dengan

uji homogenitas itu menghasilkan data yang variansinya tidak homogen, maka

tidak dapat dilanjutkan dengan uji Anova satu arah. Namun analisis data dapat

dilanjutkan dengan uji non-parametrik Kruskal Wallis untuk mengetahui ada

tidaknya perbedaan secara statistik dan untuk menguji perbedaan hasil tersebut

berbeda bermakna atau tidak bermakna secara statistik, maka dapat dilanjutkan

dengan uji Mann Whitney. Perbedaan tersebut bermakna secara statistik jika nilai

signifikansi (p)<0,05 dan tidak bermakna jika nilai signifikansi (p)>0,05.


44

BAB IV

HASIL DAN PEMBAHASAN

Pada penelitian kali ini dilakukan dua uji pendahuluan yaitu uji

penetapan selang waktu pemotongan kaki mencit setelah injeksi karagenin 1%

dan selang waktu pemberian natrium diklofenak sebelum pemberian injeksi

karagenin 1%. Uji pendahuluan dosis efektif natrium diklofenak tidak dilakukan

karena penelitian ini mengacu pada penelitian terdahulu yaitu penelitian Noni dkk

(2003) dan Rosiana (2007), yang menghasilkan dosis efektif natrium diklofenak

sebesar 4,48 mg/kg BB. Uji pendahuluan ini dimaksudkan agar metode uji yang

digunakan valid dan dapat digunakan secara maksimal oleh peneliti sehingga

dapat diperoleh hasil yang sebenarnya, valid, dan dapat diterima.

A. Hasil Uji Pendahuluan

1. Uji penetapan selang waktu pemotongan kaki mencit setelah injeksi karagenin 1%

Tujuan dilakukan uji penetapan selang waktu pemotongan kaki adalah

untuk menentukan berapa waktu yang tepat (1, 2, 3, atau 4 jam) setelah injeksi

karagenin 1%, dimana akan dihasilkan bobot kaki mencit yang paling besar dan

untuk selanjutnya selang waktu dengan bobot yang paling besar akan digunakan

pada perlakuan berikutnya setelah injeksi karagenin 1%.

Menurut Jain (cit., Rosiana, 2003), karagenin 1% berguna sebagai zat

peradang yang sering digunakan karena merupakan salah satu pilihan dari

berbagai zat peradang yang tidak menimbulkan kerusakan pada jaringan, tidak


45

menimbulkan bekas, serta memberikan respon yang lebih peka terhadap aktivitas

anti-inflamasi. Selain itu, hasil udema yang diperoleh dari penggunaan karagenin

1% juga cukup reproduksibel.

Menurut Ranisford (cit., Supriatna, 2002), mekanisme karagenin dalam

menimbulkan udema terbagi menjadi dua fase. Fase pertama mekanisme udema

ditandai dengan dilepaskannya histamin dan serotonin (5-hidroksitritamin) dari sel

mast dan diikuti dengan terbentuknya kinin dalam aliran darah. Adanya mediator

tersebut menyebabkan gangguan pembuluh darah sehingga jaringan mengalami

inflamasi. Pelepasan amin dan kinin masih terus berlanjut hingga fase kedua yang

diikuti oleh terjadinya ekstravasasi protein plasma dan penetrasi sel-sel inflamasi

dalam jaringan terinflamasi. Pada fase kedua terjadi pelepasan enzim lisosomal

yang mengawali terjadinya gangguan jaringan dan diikuti produksi radikal bebas

yang dapat merusak jaringan. Adanya radikal bebas ini menyebabkan

pembentukan lipid peroksida reaktif yang akan menstimulasi fosfolipase pada

fosfolipid sehingga akan terbentuk asam arakhidonat yang kemudian akan

memproduksi prostaglandin.

Data yang diperoleh tentang selang waktu pemotongan kaki pada tiap

kelompok dapat dilihat pada lampiran 10, sedangkan bobot rata-rata udema kaki

mencit dapat dilihat pada tabel I dan grafik pada gambar 9.


46

Tabel I. Rata-rata bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1% suplantar dalam berbagai variasi selang waktu pemotongan kaki

Selang Waktu Pemotongan ( jam) Rata-rata bobot udema kaki mencit (g)

+ SE (n = 5) 1 0,0302 + 0,0033 2 0,0417 + 0,0045 3 0,0620 + 0,0055 4 0,0618 + 0,0044

Gambar 9. Grafik rata-rata bobot udema kaki mencit (±SE) setelah injeksi karagenin 1%

dalam berbagai variasi selang waktu pemotongan

Pada gambar 10. dapat diketahui bahwa rata-rata bobot udema kaki mencit

setelah injeksi karagenin 1% meningkat pada selang waktu 1, 2, dan 3 jam.

Namun pada selang waktu 4 jam, terlihat bobot udema kaki mencit mulai

menurun walaupun tidak terlalu besar perbedaannya. Hal itu dapat disebabkan

efek karagenin 1% yang mulai menurun dalam menimbulkan bengkak. Selain

itu, dari grafik juga dapat diketahui bahwa karagenin 1% sudah menimbulkan efek

optimal pada selang waktu pemotongan 3 jam setelah injeksi karagenin 1%

dengan rata-rata bobot udema paling besar yaitu 0,0620 g.

Data bobot udema kaki mencit setelah injeksi karagenin 1% kemudian

dianalisis secara statistik dengan menggunakan uji Kolmogorov-Smirnov. Dari


47

analisis statistic diketahui nilai p (probabilitas)>0,05 yaitu sebesar 0,979 sehingga

dapat dikatakan bahwa semua data terdistribusi normal (Ho diterima). Kemudian

dilanjutkan uji uji Anova satu arah yang dapat dilihat dapat dilihat pada Tabel II.

Tabel II. Rangkuman hasil uji Anova satu arah bobot udema kaki mencit setelah pemberian karagenin 1 % dalam berbagai variasi selang waktu pemotongan kaki

Keterangan df F Probabilitas (p) Bobot udema antarkelompok

perlakuan 3 12,287 0,000

Apabila dari uji homogenitas diketahui memiliki nilai probabilitas(p)>

0,05 maka dapat diketahui data penetapan selang waktu pemotongan bersifat

homogen (Ho diterima). Namun jika nilai p<0,05 data hasil penelitian bersifat

tidak homogen (Ho ditolak). Dari hasil uji Anova pada tabel II, diketahui bahwa

nilai p<0,05 yaitu sebesar 0,000. Hal itu berarti paling tidak ada perbedaan secara

bermakna antar dua kelompok perlakuan dan dapat dilanjutkan dengan uji Scheffe.

Rangkuman hasil uji Scheffe dapat dilihat pada tabel III.

Tabel III. Rangkuman hasil uji Scheffe data bobot udema kaki mencit setelah injeksi karagenin 1% dengan berbagai variasi selang waktu pemotongan kaki

Kelompok __Χ ± SE (n=5)

Bobot udema kaki mencit dibandingkan kelompok pada selang waktu

1 jam 2 jam 3 jam 4 jam 1 jam 0,0302 + 0,0033 - tb bb bb 2 jam 0,0417 + 0,0045 tb - bb bb 3 jam 0,0620 + 0,0055 bb bb - tb

4 jam 0,0618 + 0,0044 bb bb tb - Keterangan :

__Χ = bobot udema kaki mencit rata-rata SE = standard error bb = berbeda bermakna (p<0,05) tb = berbeda tidak bermakna (p>0,05)


48

Pada tabel III ditunjukkan bahwa bobot udema pada kelompok

pemotongan kaki dengan selang waktu 1 jam berbeda tidak bermakna terhadap

kelompok dengan selang waktu 2 jam, namun berbeda bermakna terhadap

kelompok pemotongan kaki dengan selang waktu baik 3 jam atau 4 jam.

Sedangkan kelompok pemotongan kaki dengan selang waktu 3 jam berbeda tidak

bermakna terhadap kelompok pemotongan kaki dengan selang waktu 4 jam.

Bobot udema paling besar diperoleh pada pemotongan kaki dengan selang waktu

3 jam sehingga dapat dikatakan bahwa pada selang waktu pemotongan dengan

selang waktu 3 jam, karagenin 1% tersebut berefek paling optimal. Oleh karena

itu untuk perlakuan selanjutnya, digunakan selang waktu pemotongan 3 jam

setelah injeksi karagenin 1% dengan alasan selain pada selang waktu 3 jam

dihasilkan bobot udema yang paling optimal juga karena faktor efisiensi waktu.

2. Uji penetapan selang waktu pemberian natrium diklofenak dengan dosis efektif sebelum injeksi karagenin 1%

Tujuan dari uji penetapan selang waktu pemberian natrium diklofenak

untuk mengetahui waktu yang tepat dimana dengan adanya pemberian natrium

diklofenak sebelum injeksi karagenin 1% memberikan hasil yang optimal yaitu

turunnya udema pada kaki mencit setelah injeksi karagenin 1%. Pada uji ini,

digunakan variasi selang waktu selama 15, 30. 45, 60, dan 90 menit sebelum

injeksi karagenin 1 %. Setelah selang waktu 3 jam, mencit korbankan dan kedua

kaki dipotong pada bagian sendi tarsocrural, lalu ditimbang. Hasil data mengenai

bobot udema kaki mencit yang sebelum injeksi karagenin 1% diberikan natrium

diklofenak dengan berbagai selang waktu dapat dilihat pada lampiran 14,


49

sedangkan rata-rata bobot udema kaki mencit dapat dilihat pada tabel IV dan

grafik pada gambar 10.

Tabel IV. Rata-rata bobot udema kaki mencit sebelum injeksi karagenin 1% dengan berbagai selang waktu pemberian natrium diklofenak

Gambar 10.Grafik rata-rata bobot udema kaki mencit (±SE) akibat injeksi karagenin 1%

dengan berbagai selang waktu pemberian natrium diklofenak

Dari grafik di atas dapat diketahui bahwa setelah injeksi karagenin 1%

dengan selang waktu 15 dan 30 menit bobot udema kaki mencit mengalami

sedikit kenaikan. Begitu juga dengan selang waktu 45 menit, walaupun

mengalami kenaikan rata-rata bobot udema kaki namun hasilnya berbeda tidak

bermakna dengan selang waktu 15 dan 30 menit. Selain itu, dapat terlihat jelas

bahwa pada selang waktu 60 dan 90 menit, efek dari natrium diklofenak mulai

terlihat dengan adanya penurunan udema akibat injeksi karagenin 1% walaupun

hasilnya untuk udema pada selang waktu 60 menit berbeda tidak bermakna

Selang Waktu Pemberian (menit) Rata-rata bobot udema kaki mencit (g) + SE (n = 5) 15 0,0289 + 0,0045 30 0,0291 + 0,0028 45 0,0334 + 0,0041 60 0,0241 + 0,0018 90 0,0152 + 0,0029


50

dengan udema kaki yang dihasilkan pada selang waktu 45 menit. Namun pada

selang waktu 90 menit terjadi penurunan udema yang cukup tajam, rata-rata bobot

udema yang dihasilkan relatif sangat kecil yaitu 0,0152 gram jika dibandingkan

selang waktu 45 menit dengan rata-rata bobot udema sebesar 0,0334 gram. Hal itu

berarti natrium diklofenak sudah terabsorpsi secara sempurna dan menimbulkan

efek optimal pada selang waktu 90 menit dalam menurunkan udema pada kaki

mencit.

Rata-rata bobot udema kaki mencit tersebut kemudian diuji dengan

menggunakan uji Kolmogorov-Smirnov dan diperoleh nilai p (probabilitas) ≥ 0,05

yaitu sebesar 0,891 sehingga dapat dikatakan bahwa semua data terdistribusi

normal dan homogen yang ditunjukkan dengan nilai p ≥ 0,05 yaitu sebesar 0,279

(Ho diterima). Hasil uji Anova satu arah dapat dilihat pada tabel V.

Tabel V. Rangkuman hasil uji Anova satu arah data bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1% setelah pemberian natrium diklofenak dosis 4,48 mg/kg BB dengan berbagai selang waktu

Keterangan df F Probabilitas (p)

Bobot udema antarkelompok perlakuan 4 4,240 0,012

Berdasarkan uji Anova satu arah pada tabel VI, diketahui bahwa nilai p<

0,05 yaitu sebesar 0,012 (Ho ditolak). Untuk melihat apakah berbeda bermakna

secara statistik atau tidak, dapat dilakukan dengan uji Scheffe yang dapat dilihat

pada tabel VI.


51

Tabel VI. Rangkuman hasil uji Scheffe data bobot udema kaki mencit akibat injeksi karagenin 1% setelah pemberian natrium diklofenak dosis 4,48 mg/kg dengan berbagai variasi selang waktu pemotongan kaki

Kelompok

__Χ ± SE (n=5)

Bobot udema kaki mencit dengan berbagai variasi selang waktu pemotongan kaki

15’ 30’ 45’ 60’ 90’

15’ 0,0289 + 0,0045 - tb tb tb tb 30’ 0,0291 + 0,0028 tb - tb tb tb 45’ 0,0334 + 0,0041 tb tb - tb bb 60’ 0,0241 + 0,0018 tb tb tb - tb 90’ 0,0152 + 0,0029 tb tb bb tb -

Keterangan :

__Χ = bobot udema kaki mencit rata-rata SE = standard error bb = berbeda bermakna (p<0,05) tb = berbeda tidak bermakna (p>0,05)

Berdasarkan hasil uji Scheffe dapat diketahui bahwa kelompok yang

diberikan natrium diklofenak dengan selang waktu 15 menit sebelum injeksi

karagenin 1%, memberikan efek penghambatan udema sehingga udema yang

dihasilkan hanya sebesar 0,0289 g walaupun hasilnya berbeda tidak bermakna

terhadap kelompok yang diberikan natrium diklofenak dengan selang waktu 30,

45, 60, dan 90 menit. Hal itu dapat disebabkan karena absorpsi natrium diklofenak

yang belum optimal sehingga belum menimbulkan efek dalam penghambatan

udema kaki mencit yang bersamaan dengan aksi karagenin 1% yang menginduksi

udema pada kaki mencit tersebut. Namun, dari tabel VII juga dapat terlihat jelas

bahwa pada kelompok yang diberikan natrium diklofenak dengan selang waktu 45

menit terlihat memiliki bobot udema yang berbeda bermakna terhadap kelompok

dengan selang waktu 90 menit. Pada gambar 10. juga dapat terlihat jelas bahwa

pada selang waktu 90 menit terjadi penurunan udema yang cukup tajam, rata-rata

bobot udema yang dihasilkan relatif sangat kecil yaitu 0,0152 g jika dibandingkan


52

selang waktu 45 menit dengan rata-rata bobot udema sebesar 0,0334 g. Hal itu

berarti natrium diklofenak sudah diabsorpsi secara optimal untuk memberikan

penurunan bobot udema yang berarti dan menimbulkan efek yang paling optimal

pada selang waktu 90 menit pada kaki mencit sebelum injeksi karagenin 1%. Oleh

karena itu, selang waktu dengan rata-rata bobot udema yang paling kecil yaitu 90

menit digunakan pada perlakuan berikutnya.

B. Hasil Uji Daya Anti-Inflamasi Ekstrak Boswellia serrata pada Hewan Uji

Penelitian mengenai daya anti-inflamasi ekstrak Boswellia serrata ini

bertujuan untuk mengetahui apakah ekstrak Boswellia serrata memiliki efek anti-

inflamasi, seberapa besar prosentase respon daya anti-inflamasi, dan berapa besar

prosentase daya anti-inflamasi. Pada penelitian ini digunakan metode induksi

udema oleh Langford dkk (1972) yang telah dimodifikasi ini ditandai dengan

penurunan bobot udema pada telapak kaki mencit yang telah disuntik dengan

karagenin 1% subplantar. Penggunaan metode ini karena sederhana dan murah

baik dari segi bahan, peralatan, serta cara kerjanya.

Dalam penelitian ini digunakan hewan uji sebanyak empat puluh ekor

mencit yang dibagi secara acak menjadi 8 kelompok, masing-masing kelompok

terdiri dari 5 ekor dengan perlakuan sebagai berikut : kelompok I merupakan

kelompok kontrol negatif karagenin 1% sebagai inflamatogen; kelompok II

merupakan kelompok kontrol negatif aquadest sebagai pelarut natrium diklofenak;

kelompok IlI adalah kelompok kontrol positif natrium diklofenak; kelompok IV

merupakan kelompok kontrol negatif CMC-Na 1% sebagai pelarut Boswellia


53

serrata; kelompok V,VI,VII,VIII diberikan perlakuan sediaan ekstrak Boswella

serrata dengan 4 peringkat dosis yaitu sebesar 24,25 mg/kg BB; 72,8 mg/kg BB;

218,4 mg/kgBB; dan 655,2 mg/kgBB.

Pada penelitian ini digunakan CMC-Na 1% karena merupakan

pensuspensi ekstrak Boswellia serrata sedangkan aquadest digunakan sebagai

pelarut natrium diklofenak. Natrium diklofenak digunakan sebagai kontrol positif

karena merupakan salah satu obat memiliki aktivitas anti-radang yang kuat

dengan efek samping yang rendah dibanding dengan obat kuat lainnya seperti

indometasin, dan piroksikam (Tjay dan Rahardja, 2002) serta direkomendasikan

untuk inflamasi kronis (reumatoid arthritis dan osteoarthritis) dan untuk

pengobatan nyeri akut muskoskeletal (Katzung dkk, 1995). Udema yang

ditimbulkan akibat injeksi karagenin 1% baik pada kelompok kontrol maupun

perlakuan dapat dilihat pada lampiran 18, sedangkan rata-rata bobot udema akibat

injeksi karagenin dapat dilihat pada tabel VII dan grafik pada gambar 11.

Tabel VII. Rata-rata bobot udema akibat injeksi karagenin 1% suplantar baik pada kelompok kontrol maupun perlakuan

Kelompok Perlakuan Rata-rata bobot udema (g) + SE (n = 5)

Karagenin 1% 0,0620 + 0,0055 Aquadest 0,0498 + 0,0079 Natrium diklofenak 4,48 mg/kg BB 0,0152 + 0,0029 CMC Na 1% 0,0481 + 0,0038 Ekstrak Boswellia serrata dosis 24,25 mg/kgBB 0,0370 + 0,0030 Ekstrak Boswellia serrata dosis 72,8 mg/kgBB 0,0427 + 0,0074 Ekstrak Boswellia serrata dosis 214,8 mg/kgBB 0,0552 + 0,0033 Ekstrak Boswellia serrata dosis 655,2 mg/kgBB 0,0608 + 0,0045


54

Gambar 11. Diagram rata-rata bobot udema akibat injeksi karagenin 1% baik pada kelompok kontrol maupun perlakuan

Keterangan : I : Kelompok kontrol negatif karagenin 1% II : Kelompok kontrol negatif aquadest sebagai pelarut natrium diklofenak III : Kelompok kontrol positif natrium diklofenak IV : Kelompok kontrol negatif CMC-Na 1% senagai pensuspensi ekstrak V : Kelompok perlakuan ekstrak Boswellia serrata dosis 24,25 mg/kgBB VI : Kelompok perlakuan ekstrak Boswellia serrata dosis 72,8 mg/kgBB VII : Kelompok perlakuan ekstrak Boswellia serrata dosis 218,4 mg/kgBB VIII : Kelompok perlakuan ekstrak Boswellia serrata dosis 655,2 mg/kgBB Dari gambar 11, dapat dilihat bahwa kelompok karagenin 1% memiliki

rata-rata bobot udema yang paling besar yaitu 0,062 g . Selain itu juga dapat

dilihat pada kelompok natrium diklofenak, dengan adanya pemberian oral natrium

diklofenak terjadi penurunan bobot udema yang berbeda bermakna terhadap

karagenin 1%, sehingga terbukti bahwa natrium diklofenak berkhasiat sebagai

anti-inflamasi. Pada kelompok perlakuan aquadest dan CMC-Na 1%, terlihat

bahwa terjadi penurunan udema dan rata-rata bobot udema yang dihasilkan lebih

kecil daripada kelompok karagenin 1% yaitu secara berurutan 0,0498 g dan

0,0481 g. Setelah diuji secara statistik, diketahui bahwa kelompok perlakuan

aquadest dan CMC-Na 1% memiliki p<0,05 yang berarti berbeda bermakna

terhadap natrium diklofenak. Hal itu berarti aquadest dan CMC-Na 1% mampu


55

menurunkan udema namun tidak sebesar kemampuan natrium diklofenak. Pada

kelompok perlakuan ekstrak Boswellia serrata dosis 24,25 mg/kgBB dan 72,8

mg/kgBB juga dapat ditunjukkan bahwa terjadi penurunan bobot rata-rata udema

jika dibandingkan dengan perlakuan karagenin 1% yaitu secara berurutan 0,0370

g dan 0,0427 g.

Pada diagram juga ditunjukkan bahwa semakin meningkatnya peringkat

dosis ekstrak Boswellia serrata maka kemampuan menurunkan radang semakin

kecil. Data mengenai prosentase respon daya anti-inflamasi yang dihasilkan oleh 4

peringkat dosis ekstrak Boswellia serrata dan ke-empat kontrol dapat dilihat pada

lampiran 24.

Oleh karena itu untuk mengetahui besarnya prosentase respon daya anti-

inflamasi baik pada natrium diklofenak maupun pada ekstrak Boswellia serrata,

maka besar prosentase respon daya anti-inflamasi keduanya dikurangi dengan

masing-masing pelarut/pensuspensinya. Hal itu dilakukan agar hasil prosentase

respon daya anti-inflamasi yang dihasilkan benar-benar baik dari natrium

diklofenak maupun bahan uji. Data mengenai prosentase respon daya anti-

inflamasi serta perhitungan prosentase respon daya anti-inflamasi ekstrak

Boswellia serrata dan kontrol setelah terkoreksi dapat dilihat pada lampiran 25,

sedangkan rata-rata prosentase respon daya anti-inflamasi pada setiap kelompok

perlakuan dapat dilihat pada tabel VIII.


56

Tabel VIII. Rata-rata prosentase respon daya anti-inflamasi pada kelompok kontrol dan perlakuan

Kelompok Perlakuan vs Prosentase Respon Daya Anti-inflamasi (%)

0 0

69.44

23.0411.12

-14.89-26.29

-60-40-20

020406080

100

I II III IV V VI VII

Kelompok Perlakuan

% Daya Anti-inflamasi

Gambar 12. Diagram rata-rata prosentase respon daya anti-inflamasi pada kelompok kontrol dan perlakuan

Keterangan : I : Kelompok kontrol negatif aquadest sebagai pelarut natrium diklofenak II : Kelompok kontrol negatif CMC-Na 1% sebagai pensuspensi ekstrak III : Kelompok kontrol positif natrium diklofenak IV : Kelompok perlakuan ekstrak Boswellia serrata dosis 24,25 mg/kgBB V : Kelompok perlakuan ekstrak Boswellia serrata dosis 72,8 mg/kgBB VI : Kelompok perlakuan ekstrak Boswellia serrata dosis 218,4 mg/kgBB VII : Kelompok perlakuan ekstrak Boswellia serrata dosis 655,2 mg/kgBB : 2x SE Dari gambar 12 dapat dilihat bahwa telah terbukti bahwa rata-rata

prosentase respon daya anti-inflamasi yang dihasilkan pada kelompok natrium

Kelompok Perlakuan Rata-rata prosentase respon

daya anti-inflamasi (%) + SE (n = 5)

Aquadest 0,00 + 15,83 Natrium diklofenak 4,48 mg/kg BB 69,44 + 5,80 CMC Na 1% 0,00 + 7,81 Ekstrak Boswellia serrata dosis 24,25 mg/kgBB 23,04 + 6,14 Ekstrak Boswellia serrata dosis 72,8 mg/kgBB 11,12 + 15,31 Ekstrak Boswellia serrata dosis 218,4 mg/kgBB -14,89 + 6,95 Ekstrak Boswellia serrata dosis 655,2 mg/kgBB -26,29 + 9,37


57

diklofenak sangat besar (grafik menjulang ke atas) dan tepat jika digunakan

sebagai kontrol positif. Pada penelitian ini tidak disertakan karagenin 1% karena

pada perhitungan prosentase respon daya anti-inflamasi karagenin 1% bukan

sebagai pembanding melainkan hanya sebagai penginduksi radang saja. Selain itu,

dari penelitian ini juga telah diketahui bahwa kelompok perlakuan CMC-Na 1%

dan aquadest memiliki kemampuan menurunkan udema jika dibandingkan dengan

udema pada kelompok karagenin 1%. Oleh karena itu, kelompok perlakuan

aquadest dan CMC-Na 1% dibuat sedemikian rupa sehingga tidak memiliki

prosentase respon daya anti-inflamasi. Hal itu dilakukan agar prosentase respon

daya anti-inflamasi yang diperoleh benar-benar murni berasal dari bahan uji. Dari

diagram di atas, dapat diketahui bahwa kelompok perlakuan kontrol negatif

(aquadest dan CMC-Na) tepat berada pada 0% daya anti-inflamasi jika

dibandingkan perlakuan baik kelompok kontrol positif maupun perlakuan bahan

uji. Pada kelompok perlakuan ekstrak Boswellia serrata dosis 24,25 mg/kgBB dan

dosis 72,8 mg/kg BB diketahui memiliki kemampuan menurunkan udema

walaupun hasilnya kurang begitu optimal jika dibandingkan dengan kelompok

perlakuan natrium diklofenak. Sedangkan pada dosis 214,8 mg/kgBB dan 655,2

mg/kgBB, dapat dilihat secara jelas bahwa kedua peringkat dosis memiliki bentuk

diagram yang berkebalikan (menjulang ke bawah) dengan diagram kelompok

natrium diklofenak. Hal itu berarti kedua peringkat dosis tersebut tidak memiliki

efek anti-inflamasi udema namun memiliki efek inflamasi. Selain itu, juga dapat

disimpulkan bahwa prosentase respon daya anti-inflamasi ekstrak Boswellia

serrata berbanding terbalik dengan meningkatnya dosis yang diberikan.


58

Karena dari hasil penelitian telah diketahui bahwa aquadest dan CMC-Na

1% memiliki kemampuan menurunkan udema, maka rumus perhitungan menurut

metode Langford dkk (1972) termodifikasi diubah menjadi sebagai berikut yaitu

dengan membagi bobot kaki yang diberi perlakuan pelarut yang dikurangi bobot

kaki normal dikurangi bobot kaki perlakuan yang dikurangi bobot kaki normal

dibagi bobot kaki yang diberi perlakuan pensuspensi/pelarut yang dikurangi bobot

kaki normal.

Pada penelitian ini, prosentase respon daya anti-inflamasi pada kelompok

natrium diklofenak dibandingkan terhadap udema rata-rata pada kelompok

aquadest karena aquadest sebagai pelarutnya. Begitu juga pada ekstrak Boswellia

serrata, prosentase respon daya anti-inflamasi diperoleh dengan membandingkan

terhadap rata-rata udema pada perlakuan CMC-Na 1% sebab CMC-Na 1%

merupakan pensuspensi ekstrak Boswellia serrata. Kemudian data yang diperoleh

dianalisis secara statistik dan diketahui bahwa data terdistribusi normal karena

diperoleh nilai p>0,05. Namun setelah dilakukan uji homogenitas, diketahui

bahwa data tersebut tidak homogen karena nilai p<0,05 yaitu sebesar 0,02. Oleh

karena itu data tersebut dilanjutkan dengan uji Kruskal-Wallis dan dari hasil

analisis statistik diketahui bahwa terdapat perbedaan antar kelompok perlakuan

yang ditunjukkan dengan nilai p<0,05 yaitu sebesar 0,003. Hasil uji Kruskal-

Wallis prosentase respon daya anti-inflamasi pada kelompok perlakuan ekstrak

dan kontrol dapat dilihat pada tabel IX.


59

Tabel IX. Hasil uji Kruskal Wallis prosentase respon daya anti-inflamasi pada kelompok perlakuan ekstrak dan kontrol

Prosentase respon daya anti-inflamasi (%)

Chi-Square df

Probabilitas

19,474 6

0,003

Kemudian analisis data dilanjutkan dengan uji Mann Whitney yang

merupakan analisis post hoc untuk uji Kruskal Wallis. Rangkuman hasil uji Mann

Whitney dapat dilihat pada tabel X.

Tabel X. Rangkuman uji Mann Whitney rata-rata prosentase respon daya anti-inflamasi pada kelompok perlakuan ekstrak dan kontrol

Kelom- Mean(g) + SE Kelompok perlakuan pok (n = 5) I II III IV V VI VII

I 0,00 + 15,83 - tb bb tb tb tb tb II 0,00 + 7,81 tb - bb bb tb tb bb III 69,44 + 5,80 bb bb - bb bb bb bb IV 23,04 + 6,14 tb bb bb - tb bb bb V 11,12 + 15,31 tb tb bb tb - tb tb VI -14,89 + 6,95 tb tb bb bb tb - tb VII -26,29 + 9,37 tb bb bb bb tb tb -

Keterangan :

I : Kelompok perlakuan kontrol negatif aquadest sebagai pelarut natrium diklofenak II : Kelompok perlakuan kontrol negatif CMC-Na 1% sebagai pelarut ekstrak Boswellia serrata III : Kelompok perlakuan kontrol positif natrium diklofenak IV : Kelompok perlakuan Boswellia serrata dosis 24,25 mg/kg BB V : Kelompok perlakuan Boswellia serrata dosis 72,8 mg/kg BB VI : Kelompok perlakuan Boswellia serrata dosis 218,4 mg/kg BB VII : Kelompok perlakuan Boswellia serrata dosis 655,2 mg/kg BB bb : berbeda bermakna (p<0,05) tb : berbeda tidak bermakna ( p>0,05)

Pada tabel X dari hasil uji Mann Whitney, dapat diketahui bahwa

prosentase respon daya anti-inflamasi pada kelompok perlakuan natrium

diklofenak berbeda bermakna baik dengan kelompok perlakuan aquadest maupun


60

kelompok perlakuan CMC-Na 1%. Hal itu berarti membuktikan bahwa natrium

diklofenak mempunyai efek anti-inflamasi yang besar karena terlihat dari adanya

penurunan udema serta memiliki prosentase respon daya anti-inflamasi yang

berbeda bermakna terhadap kedua kontrol negatif yang tidak memiliki efek anti-

inflamasi.

Berdasarkan uji statistik Mann Whitney dapat diketahui bahwa prosentase

respon daya anti-inflamasi pada kelompok perlakuan ekstrak Boswellia serrata

dosis 24,25 mg/kgBB berbeda tidak bermakna terhadap kelompok ekstrak

Boswellia serrata dosis 72,8 mg/kgBB namun berbeda bermakna terhadap

kelompok perlakuan CMC-Na 1% sebagai kontrol negatif dan berbeda bermakna

dengan kelompok kontrol positif. Karena prosentase daya anti-inflamasi yang

dihasilkan yaitu sebesar 23,04% dan besarnya sepertiga dari prosentase respon

daya anti-inflamasi natrium diklofenak sebesar 69,44% serta terdapat perbedaan

yang signifikan pada kontrol negatif dan kontrol positif, maka dapat disimpulkan

bahwa ekstrak Boswellia serrata dosis 24,25 mg/kgBB terbukti tidak memiliki

efek anti-inflamasi namun hanya mampu menurunkan udema walaupun tidak

sekuat daya anti-inflamasi natrium diklofenak.

Dari tabel X dapat diketahui bahwa pada kelompok perlakuan ekstrak

Boswellia serrata dosis 72,8 mg/kgBB ternyata memiliki prosentase respon daya

anti-inflamasi sebesar 11,12% yang nilainya berbeda tidak bermakna baik

terhadap ketiga peringkat dosis lain juga dengan kontrol negatif CMC-Na 1%.

Oleh karena itu dapat dikatakan bahwa kelompok perlakuan ekstrak Boswellia

serrata dosis 72,8 mg/kgBB tidak memiliki efek anti-inflamasi namun hanya


61

mampu menurunkan udema walaupun sangat kecil dibandingkan natrium

diklofenak.

Pada kelompok perlakuan ekstrak Boswellia serrata dosis 218,4 mg/kgBB

dan 655,2 mg/kgBB dapat diketahui bahwa prosentase respon daya anti-inflamasi

yang dihasilkan sebesar -14,89% dan -26,29%, dan nilainya berbeda tidak

bermakna dengan kedua kontrol negatif yaitu kelompok perlakuan aquadest dan

CMC-Na 1% serta mampu menimbulkan udema. Oleh karena itu, dapat

disimpulkan bahwa bahwa ekstrak Boswellia serrata dosis 218,4 mg/kgBB dan

dosis 655,8 mg/kgBB tidak memiliki efek anti-inflamasi.

Setelah diketahui prosentase respon daya anti-inflamasi ekstrak Boswellia

serrata, maka dapat diketahui pula prosentase daya anti-inflamasi dari ekstrak

Boswellia serrata yang dapat dilihat pada tabel XI serta perhitungan prosentase

daya anti-inflamasi yang dapat dilihat pada lampiran 31.

Tabel XI. Prosentase daya anti-inflamasi kelompok perlakuan ekstrak Boswellia serrata

Pada tabel XI dapat diketahui bahwa prosentase daya anti-inflamasi dari

ekstrak Boswellia serrata berada di bawah 100% (prosentase daya pada

kelompok kontrol positif). Hal itu berarti ekstrak Boswellia serrata dosis 24,25

Kelompok Perlakuan Prosentase daya anti-

inflamasi (%)

Ekstrak Boswellia serrata dosis 24,25 mg/kg BB




33,18

15,99

-21,44

-37,86


62

mg/kgBB dan 72,8 mg/kgBB dalam menurunkan udema lebih rendah atau lemah

jika dibandingkan dengan natrium diklofenak. Namun, karena prosentase respon

yang dihasilkan secara berurutan yaitu 23,04% berbeda bermakna terhadap

kontrol positif dan negatif serta 11,12% yang berbeda bermakna terhadap kontrol

negatif, maka dapat disimpulkan bahwa ekstrak Boswellia serrata tidak memiliki

efek anti-inflamasi. Sedangkan pada dosis 218,4 mg/kgBB dan dosis 655,2

mg/kgBB memiliki prosentase daya anti-inflamasi kurang dari nol (bernilai

negatif) serta tidak mampu menurunkan udema sehingga dapat dikatakan tidak

memiliki efek anti-inflamasi.

Pada penelitian ini, dapat ditunjukkan bahwa dengan semakin

meningkatnya dosis ekstrak Boswellia serrata maka kemampuan menurunkan

udema semakin kecil. Hal itu dapat disebabkan karena tanaman Boswellia serrata

memiliki komponen yang bermacam- macam dan tidak hanya terdiri dari senyawa

aktif tunggal sehingga dapat dimungkinkan senyawa aktif lain apabila dalam

jumlah yang besar dapat menyebabkan toksisitas pada jaringan sehingga

berpengaruh pada udema yang ditimbulkan dengan dosis yang tinggi.

Dari hasil penelitian diketahui bahwa ekstrak Boswellia serrata terbukti

memiliki efek anti-inflamasi yang ditandai dengan adanya penurunan udema

walaupun hanya terjadi pada dosis 24,25 mg/kgBB dan 72,8 mg/kgBB. Selain itu,

kedua peringkat dosis diatas juga memiliki prosentase respon daya anti-inflamasi

yang bernilai positif secara berurutan sebesar 23,04% dan 11,12% walaupun

kemampuannya tidak sekuat natrium diklofenak dengan prosentase respon sebesar

69,44%. Karena kecilnya prosentase respon daya anti-inflamasi yang dihasilkan


63

oleh ekstrak Boswellia serrata pada dosis 24,25 mg/kgBB dan 72,8 mg/kgBB,

maka perlu dilakukan penelitian pada ekstrak Boswellia serrata ini dengan dosis

yang lebih rendah dari 24,25 mg/kgBB untuk memperoleh efek optimal dan

dilakukan penambahan frekuensi penggunaan untuk mengetahui pengaruh

Boswellia serrata tersebut. Kedua peringkat dosis 24,25 mg/kgBB dan 72,8

mg/kgBB di atas apabila dikonversikan ke manusia 70 kg sebesar 188 mg/kgBB

dan 564,78 mg/kgBB. Contoh perhitungan dapat dilihat pada lampiran 32.

Nyeri merupakan salah satu manifestasi adanya suatu inflamasi. Oleh

sebab itu, karena pada penelitian ini diketahui memiliki efek anti-inflamasi pada

pada dosis 24,25 mg/kgBB dan 72,8 mg/kgBB, maka perlu dilakukan penelitian

lebih lanjut tentang uji analgesik pada ekstrak Boswellia serrata untuk

mengetahui seberapa besar ekstrak ini mampu menekan adanya respon nyeri

sehingga dapat diketahui seberapa besar pengaruhnya terhadap prosentase daya

anti-inflamasi dari ekstrak tersebut. Selain itu, ekstrak ini juga dapat

dikombinasikan dengan tanaman yang memiliki khasiat anti-inflamasi untuk

mengetahui pengaruh kombinasi tersebut terhadap inflamasi dan diharapkan dapat

memberikan efek anti-inflamasi yang lebih maksimal.

Pada tanaman Boswellia serrata terdapat minyak esensial (3-8%), getah

(27-35%) dan resin (60-70%). Minyak esensial tersebut merupakan campuran dari

monoterpen, diterpen dan sesquiterpen. Bagian resin memiliki komponen utama

asam triterpen pentasiklik yang didalamnya terdapat senyawa aktif yaitu asam

boswelat (Sharma dkk, 2007; Evans, 2002). Komponen utama lain dari resin

adalah diterpen yang dikenal juga dengan asam resin, resin alkohol, dan resin


64

fenol yang larut dalam alkohol, eter dan pelarut organik lain namun tidak larut

dalam air dan heksan (Simon dan Bone, 2000). Triterpenoid terbagi menjadi dua

kelas yaitu senyawa tetrasiklik dan senyawa pentasiklik (Robbers dkk, 1996).

Resin yang merupakan fraksi penting dari Boswellia serrata mengandung asam

triterpen pentasiklik yang terdiri dari asam β-boswelat, asam 3-O-asetil – β-

boswelat, asam11-keto- β- boswelat, dan asam 3-O-asetil-11-keto- β- boswelat.

Asam boswelat dalam hal ini masih baru, spesifik, dan menghambat 5-

lipoksigenase secara nonredoks, dimana secara signifikan mengikat enzim pada

metabolime asam arakidonat, yang merupakan kelompok hidrofilik serta

ditemukan pada C-4 dan penting untuk penghambatan 5-lipoksigenase (Sharma

dkk, 2007). Lipoksigenase merupakan jalur pembentukan leukotrien dari asam

arakidonat yang merupakan salah satu mediator inflamasi. Ekstrak alkoholik

Boswellia serrata berperan menghambat inflamasi yang diinduksi oleh naiknya

serum transaminase dan naiknya jumlah leukosit. Neutrofil yang sering disebut

neutrofil polimorfonuklear (PMN) merupakan sel yang bergerak secara aktif

memberikan respon terhadap stimuli kemotaksis serta fagosit aktif (Price dan

Wilson, 1984). PMN itu mampu berdiapedesis, yaitu bergerak keluar dari aliran

darah dan melakukan proses fagosistosis yang meliputi proses menelan dan

mencerna zat asing. Ketika tubuh mengalami kerusakan/luka atau terkena zat

patogen, neutrofil dapat secara cepat terbentuk dan bergerak menuju daerah yang

luka untuk menghambat zat asing tersebut (Karch, 2003). Adanya penghambatan

jumlah serum transaminase dan migrasi leukosit tersebut maka akan dapat

mengurangi terjadinya inflamasi.


65

Menurut Milot (2003), berdasarkan penelitian yang dilakukan oleh

Kimmatkar dkk (2003), diketahui bahwa dengan penggunaan 333mg ekstrak

Boswellia serrata 3 kali sehari selama 8 minggu dapat meningkatkan kemanjuran

pada pengobatan osteoarthritis. Osteoarthritis merupakan salah satu penyakit

inflamasi yang terjadi pada persendian tulang. Terjadinya osteoarthritis terutama

karena adanya degenerasi dari kartilago yang sangat penting pada bagian

sambungan tulang yang susah untuk digerakkan sehingga gerakan tulang dengan

sendi yang lain menjadi lebih baik dan bahkan kartiolago tersebut dapat berfungsi

sebagi pelicin dan mempermudah gerakan (Crowley, 2001). Berdasarkan jumlah

asam boswelat yang terkandung dalam ekstrak Boswellia serrata yang digunakan

pada penelitian ini yaitu sebesar 66,3%, maka dapat diketahui jumlah asam

boswelat yang digunakan dalam pengobatan arthritis pada penelitian Kimmatkar,

dkk (cit., Brenda, 2003) yaitu sebanyak 220,78 mg dari 333 mg ekstrak Boswellia

serrata (untuk manusia 70kg) dan diperlukan 3,154 mg untuk tiap kg BB manusia.

Penggunaan ekstrak alkohol Boswellia serrata ini dapat mengurangi

infiltrasi dan migrasi leukosit PMN sebab sel neutrofil PMN berasal dari nuklei

sel-sel neutrofil yang tidak berlobus atau polimorfi yang merupakan sel-sel

pertama yang muncul dalam jumlah besar di dalam cairan pada saat awal

peradangan. Apabila migrasi leukosit PMN tersebut berkurang maka akan

menurunkan adanya penumpukan sel-sel darah ataupun cairan abnormal lain

sehingga peradangan yang terjadi juga semakin berkurang (Milot, 2003).

Berdasarkan penelitian Sontakke dkk (2007), diketahui bahwa ekstrak

Boswellia serrata memiliki onset dan durasi yang lebih lama jika dibandingkan


66

valdecoxib. Valdecoxib merupakan salah satu golongan obat anti-inflamasi non-

steroid yang menghambat jalur siklooksigenase selektif siklooksigenase 2 yang

memiliki waktu onset 60 menit (Lacy, Amstrong, Goldman, Lance, 2003). Dalam

penelitian ini digunakan selang waktu yang relatif lebih lama dari 60 menit yaitu

sebesar 90 menit (hasil penetapan selang waktu pemberian natrium diklofenak)

agar bisa menimbulkan efek. Namun efek yang dihasilkan dari sediaan ekstrak

Boswellia serrata ini hanya kecil pada dosis 24,25 mg/kgBB dan 72,8 mg/kgBB

jika dibandingkan dengan natrium diklofenak. Hal itu dapat disebabkan karena

adanya injeksi karagenin 1% pada selang waktu 90 menit setelah ekstrak

Boswellia serrata sehingga saat ekstrak Boswellia serrata memulai aksinya

dengan waktu onset lebih dari 60 menit (90 menit) terhambat dengan adanya

karagenin 1% yang memiliki potensi yang kuat sebagai inflamatogen.

Penelitian ini memiliki hipotesis bahwa ekstrak Boswellia serrata Roxb.

ex Colebr. -- Indian frankincense memiliki efek anti-inflamasi terhadap mencit

putih betina. Berdasarkan hasil yang telah diperoleh, diketahui bahwa ekstrak

Boswellia serrata pada dosis 24,25 mg/kgBB dan 72,8 mg/kgBB terbukti tidak

memiliki efek anti-inflamasi sehingga hipotesis pada penelitian ini tidak terbukti.

Hal itu dapat terlihat bahwa dosis 24,25 mg/kgBB hanya mampu menurunkan

bobot udema namun hasilnya signifikan baik terhadap kontrol negatif maupun

kontrol positif dengan prosentase respon daya anti-inflamasi hanya sebesar

23,04% (sepertiga kali dari natrium diklofenak) serta dosis 72,8 mg/kgBB juga

mampu menurunkan bobot udema namun juga tidak signifikan terhadap kontrol

negatif dengan prosentase respon daya anti-inflamasi sebesar 11,12%.


67

BAB V

KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan

Berdasarkan penelitian yang telah dilakukan, maka diperoleh

kesimpulan sebagai berikut :

1. Ekstrak Boswellia serrata terbukti tidak memiliki efek anti-inflamasi namun

mampu menurunkan udema pada peringkat dosis 24,25 mg/kgBB dan 72,8

mg/kg BB.

2. Prosentase respon daya anti-inflamasi yang dihasilkan oleh ekstrak Boswellia

serrata secara berurutan pada peringkat dosis 24,25 mg/kgBB; 72,8 mg/kg

BB; 218,4 mg/kgBB; dan 655,2 mg/kg BB yaitu sebesar 23,04%; 11,12%; -

14,89%; dan -26,29%.

3. Prosentase daya anti-inflamasi yang dihasilkan oleh ekstrak Boswellia serrata

secara berurutan pada peringkat dosis 24,25 mg/kgBB; 72,8 mg/kg BB; 218,4

mg/kgBB; dan 655,2 mg/kg BB yaitu sebesar 33,18 %; 15,99%; -21,44%; dan

-37,86%.

B. Saran

1. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut pada ekstrak Boswellia serrata dengan

dosis yang lebih rendah dari dosis 24,25 mg/kgBB untuk mendapat efek anti-

inflamasi yang optimal.


68

2. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut pada ekstrak Boswellia serrata dengan

menambah frekuensi pemakaian pada peringkat dosis yang lebih rendah dari

dosis 24,25 mg/kgBB untuk mendapat efek anti-inflamasi yang optimal.

3. Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut tentang uji daya analgesik pada ekstrak

Boswellia serrata.

4. Dapat dilakukan uji daya anti-inflamasi ekstrak Boswellia serrata pada

peringkat dosis 24,25 mg/kgBB yang dikombinasikan dengan tanaman herbal

lain yang memiliki khasiat anti-inflamasi.


69

DAFTAR PUSTAKA Anonim, 1979, Farmakope Indonesia edisi III, 7, Departemen Kesehatan

Republik Indonesia, Jakarta Anonim, 2000, Parameter Standar Umum Ekstrak Tumbuhan Obat, cetakan

pertama, 5 , Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta Anonim, 2007a, Taxonomy Boswellia serrata, http: www.itis.gov/servlet, diakses

pada tanggal 20 Agustus 2007 Anonim, 2007b, A Tree Species Reference and Selection, http://www.

Worldagroforestry.org., diakses pada tanggal 06 Agustus 2008. Anonim, 2007c, Boswellia serrata extract, http: www. Phytotek.com, diakses

pada tanggal 30 Agustus 2007 Anonim, 2007d, Gum Resin of Boswellia serrata, http: www.primaryinfo.com/

diakses pada tanggal 21 September 2007 Anonim, 2007e, Boswellia, http: www.globinmed.com/), diakses pada tanggal 20

September 2007 Anonim, 2007f, Tumbuhan Boswellia serrata, http: www.evitamins.com/Images/

diakses pada tanggal 20 Agustus 2007 Anonim, 2007g, Tumbuhan Boswellia serrata, http :

www.motherherb.com/Images/ diakses pada tanggal 20 Agustus 2007 Briggs, M., Cheiman, D., Clark, and Linda M. E., 2004, Nursing 2004 Herbal

Medicine Handbook, 2nd edition, 84, Lippincot Wlilliams and Wilkins, USA

Borrelli F., Capasso F., Cappasso R., Ascione V., Aviello G., Longo R., dkk, 2006,

Effect of Boswellia serrata on intestinal motility in rodents: inhibition of diarrhoea without constipation, British Journal of Pharmacology (2006) 148, 553–560, http://www.nature.com/bjp/journal/, diakses pada tanggal 28 April 2008

Crowley L.V. M.D., 2001, An Introduction to Human Disease : Pathology and Pathophysiology Correlations, 5th edition, 68-71, 730, Jones and Bartlett Publishers, Canada

Evans, W.C, 2002, Trease and Evans Pharmacognosy, 15th edition, 286, W.B. Saunders Company, London


70

Hanson, G.R., 2000, Analgesic, Antipyretic, and Anti Inflammatory Drugs, in Gennaro (Ed.), Remmington: The Science and Practise of Pharmacy, 20th Edition, p 1456, Lippincott Williams and Wilkins, USA

Huang, M.T, Ma W., Badmaev V., Shao Y., and Chin Chee-Kok, 2000, Antitumor Activity of an Extract of The Gum Exudate from the Tree Boswellia serrata dalam Phytochemicals and Phytopharmaceuticals, 308-310, AOCS Press, Champaign, Illinois

Karch, A.M., 2003, Focus on Nursing Pharmacology, 2nd edition, 198,203, 209-211, Lippincot Williams dan Wilkins E Wolter Kluwer Company, New York

Katzung, B.G., 1995 , Basic and Clinical Pharmacology, 6th edition, 544,

Appleton and Lange, USA Katzung, B.G., 2001 , Farmakologi Dasar dan Klinik Buku 1, 449-453, 457,

Penerbit Salemba Medika, Jakarta. Katzung B. G, Enthony J.T., and Susan B.M., 2002, Pharmacology :

Examination and Board Review, 5th edition, 174-323, Lange Medical Books/ Mc. Graw-Hill, USA

Lacy, C., F., Amstrong. L., L., Goldman, M.,P., Lance, L., L., 2003, Drug

Information Handbook, 11th edition, 1422-1423, Lexi-comp Inc, Kanada Langford, F.D., Holmes, P.A., and Emele, J.F., 1972, Objective Methods to

Evaluation of Analgesic/ Anti Inflammatory Activity, J.Pharm. Sci., 61(1), 75-77

Milot, B., 2003, Treating Osteoarthritis of Knee with Boswellia serrata Extract, HerbalClip TM,(cit. Kimmatkar N., Thawani V., Hingorani L., and Khiyani R., 2003, Efficacy and tolerability of Boswellia serrata extract in treatment of osteoarthritis of knee—A randomized double blind placebo controlled trial, Phytomedicine ;10:3–7), http : www. Herbalgram.org. diakses pada tanggal 20 September 2007

Mutschler, E.,1986, Arieneimittelwirkungen, diterjemahkan oleh Mathilda

B.,Widyanto dan Ranti, A.S., Dinamika Obat, 193-195 ITB, Bandung Neal, M.J., 2005, At A Glance Farmakologi Medis, edisi V ,71, Erlangga, Jakarta Newland, J. R., 1995, Examination Board Review : Pathology, 456 , Prentice-

Hall International, Inc. USA Noni, Djunarko, I., dan Donatus, I.E., 2003, Pengaruh Perasaan Buah Mengkudu

( Morinda citrifolia, L,) Terhadap Daya Antiradang Diklofenak Pada


71

Mencit Jantan, Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta

Price, S.A and Wilson, L.M.C, 1984, Patofisiologi : Konsep Klinik Proses-Proses

Penyakit, Bagian I, edisi 2, 32-38, EGC, Jakarta Rang, H.P., Dale, M.M., Ritter, J.M., and Moore, P.K., 2003, Pharmacology, 5th

Edition, p 229-239, Elseiver Science Ltd, Churchill Livingstone Robbers, J.E, Speedle, M.K, and Tyler, V.E, 1996, Pharmacognosy and

Pharmacobiotechnology, 88-89, William and Wilkins E Waverty Company, USA

Rosiana, V., 2007, Pengaruh Penambahan Virgin Coconut Oil ( VCO) pada

Perasan Dagimg Buah Makuto Dewo (Phaleria macrocarpa (Scheff.) Boerl.) pada Mencit Putih Betina Kajian Terhadap Efek Anti-Inflamasi , Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas Gadjah Mada, Yogyakarta

Simon , M. and Bone, K, 2000, Principle and Practice of Phytotheraphy: Modern

Herbal Medicine, 37, Ghuchill Livingstone, London. Sander, M.A., 2003, Atlas Patologi Anatomi, 12, UMM Press, Malang Sharma, A., Mann, A.S., Gajbhiye,V., and Kharya M.D., 2007, Phytochemical

Profile of Boswellia serrata, Pharmacognosy Reviews, volume 1, issue1, Departement of Pharmaceuticals Science, India.

Sopiyudin, M.D.dr, 2004, Statistika untuk Kedokteran dan Kesehatan : Uji

Hipotesis dengan Menggunakan SPSS, seri 1, 101-106, PT.Erkans, Jakarta Sontakke S., Thawani V., Pimpalkhute S., Kabra P., Babhulkar S., and Hingorani

L., 2007, Open, randomized, controlled clinical trial of Boswellia serrata extract as compared to valdecoxib in osteoarthritis of knee, Indian J Pharmacol (serial online), volume : 39 , Issue : 1,27-29 http://www.ijp-online.com/article diakses pada tanggal 20 September 2007

Supriatna, D., 2002, Daya Anti-inflamasi Ekstrak Etanol Herba Daun Seribu

(Achillea millefolium L.) Pada Mencit Jantan dan Profil Kromatografinya, Skripsi, Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta

Tjay, T.H., dan Rahardja, K., 2002, Obat-Obat Penting: Khasiat, Penggunaan,

dan Efek-Efek Sampingnya, Edisi V, 307-311, Penerbit PT. Elex Media Komputindo Kelompok Gramedia, Jakarta

Vogel, H.G., 2002, Drug Discovery & Evaluation: Pharmalogical Assays, 2nd

Edition, p 726-750, Springer- Verlag, Germany


72

Wilmana, P.F., 1995, Analgesik Anti-inflamasi Nonsteroid dan Obat Pirai, dalam

Ganiswara, S.G. (Editor), Farmakologi dan Terapi, Edisi IV, 207-210, Bagian Farmakologi-Fakultas Kedokteran Universitas Indonesia, Jakarta


73

LAMPIRAN Lampiran 1. Tumbuhan Boswellia serrata

Gambar 13. Tumbuhan Boswellia serrata

Lampiran 2. Getah resin tumbuhan Boswellia serrata

Gambar 14. Getah resin tumbuhan Boswellia serrata


74

Lampiran 3. Foto ekstrak kering Boswellia serrata

Gambar 15. Ekstrak kering Boswellia serrata

Lampiran 4. Foto ekstrak Boswellia serrata dalam bentuk suspensi CMC-Na1%

Gambar 16. Ekstrak Boswellia serrata dalam bentuk suspensi CMC-Na1%


75

Lampiran 5. Foto alat neraca analitik Merk Mettler Toledo AB 204

Gambar 17. Neraca analitik Merk Mettler Toledo AB 204


76

Lampiran 6. Surat pernyataan sah tentang bahan uji yang diperoleh dari IOT. Sari Sehat qq. PT. Capung Indah Abadi


77


78

Lampiran 7. Certificate of Analysis Ekstrak Boswellia serrata 65%


79

Lampiran 8. Perhitungan konsentrasi ekstrak Boswellia serrata

Rumus perhitungan konsentrasi V

BBDC

BBDVC×

=

×=×

a). 1 / 9 kali (dosis1 = 24,25 mg/kg BB)

mlmgCml

kgkgBBmgC

/455,15,0

03.0/25,24

=

×=

1,455 mg/ml dibuat dalam labu ukur 10 ml, bahan yang diperlukan = 14,55 mg.

b). 1 / 3 kali ( dosis 2 = 72,8 mg/kg BB)

mlmgCml

kgkgBBmgC

/37,45,0

03.0/8,72

=

×=

4,37 mg/ml dibuat dalam labu ukur 10 ml,bahan yang diperlukan = 43,7 mg.

c). 1 kali (dosis 3 = 218,4 mg/kg BB)

mlmgCml

kgkgBBmgC

/10,135,0

03.0/4,218

=

×=

13,10 mg/ml dibuat dalam labu ukur 10 ml, bahan yang diperlukan = 131,0 mg.

d). 3 kali (dosis 4 = 655,2 mg/kg BB)

mlmgCml

kgkgBBmgC

/31,395,0

03.0/2,655

=

×=

39,31 mg/ml dibuat dalam labu ukur 10 ml,bahan yang diperlukan = 393,1 mg.


80

Lampiran 9. Langkah kerja uji penetapan selang waktu pemotongan kaki mencit setelah injeksi karagenin 1%

Keterangan : Kelompok I : Kelompok perlakuan 1 jam setelah injeksi karagenin 1% Kelompok II : Kelompok perlakuan 2 jam setelah injeksi karagenin 1% Kelompok III : Kelompok perlakuan 3 jam setelah injeksi karagenin 1% Kelompok IV : Kelompok perlakuan 4 jam setelah injeksi karagenin 1%

Dua puluh ekor mencit dibagi dalam 4 kelompok

Kelompok I

Kelompok II

Kelompok III

Kelompok IV

Mencit dikorbankan lalu kedua kaki bagian belakang dipotong pada sendi torsocrural

Ditimbang


81

Lampiran 10. Hasil uji penetapan selang waktu pemotongan kaki mencit setelah injeksi karagenin 1%

Keterangan : Berdasarkan Uji SPSS Anova satu arah, maka dipilih selang waktu 3 jam.

No Keterangan (g)

Bobot Udema Kaki mencit (g) Pada Rentang Waktu (jam) Setelah Injeksi Karagenin 1%

1 2 3 4

1 Kaki kiri 0,1955 0,1992 0,2155 0,2100 Kaki kanan 0,1548 0,1411 0,1630 0,1550 Bobot udem 0,0407 0,0581 0,0525 0,0550

2

Kaki kiri 0,1738 0,1939 0,2360 0,2380 Kaki kanan 0,1439 0,1600 0,1577 0,1718 Bobot udem 0,0299 0,0339 0,0783 0,0662




Mean ± SE (n = 5)

0,0302 ± 0,0033

0,0417 ± 0,0045

0,0620 ± 0,0055

0,0618 ± 0,0044


82

Lampiran 11. Hasil uji distribusi data penetapan selang waktu pemotongan kaki mencit setelah injeksi karagenin 1% dengan uji Kolmogorov Smirnov

One-Sample Kolmogorov-Smirnov Test

20.048930

.0167406.106.106

-.086.472.979

NMeanStd. Deviation

Normal Parameters a,b

AbsolutePositiveNegative

Most ExtremeDifferences

Kolmogorov-Smirnov ZAsymp. Sig. (2-tailed)

selisih

Test distribution is Normal.a.

Calculated from data.b.

Lampiran 12. Hasil uji Anova satu arah data penetapan selang waktu

pemotongan kaki mencit setelah injeksi karagenin 1% dengan uji Kolmogorov Smirnov

Oneway

Descriptives

selisih

5 .030160 .0074433 .0033288 .020918 .039402 .0200 .04075 .041700 .0101062 .0045196 .029152 .054248 .0339 .05815 .062040 .0122028 .0054573 .046888 .077192 .0508 .07835 .061820 .0098218 .0043924 .049625 .074015 .0489 .0737

20 .048930 .0167406 .0037433 .041095 .056765 .0200 .0783

selang waktu 1 jamselang waktu 2 jamselang waktu 3 jamselang waktu 4 jamTotal

N Mean Std. Deviation Std. Error Lower Bound Upper Bound

95% Confidence Interval forMean

Minimum Maximum

Test of Homogeneity of Variances

selisih

1.088 3 16 .382

LeveneStatistic df1 df2 Sig.


83

ANOVA

selisih

.004 3 .001 12.287 .000

.002 16 .000

.005 19

Between GroupsWithin GroupsTotal

Sum ofSquares df Mean Square F Sig.

Post Hoc Tests

Multiple Comparisons

Dependent Variable: selisihScheffe

-.0115400 .0063475 .377 -.031326 .008246-.0318800* .0063475 .001 -.051666 -.012094-.0316600* .0063475 .001 -.051446 -.011874.0115400 .0063475 .377 -.008246 .031326

-.0203400* .0063475 .043 -.040126 -.000554-.0201200* .0063475 .046 -.039906 -.000334.0318800* .0063475 .001 .012094 .051666.0203400* .0063475 .043 .000554 .040126.0002200 .0063475 1.000 -.019566 .020006.0316600* .0063475 .001 .011874 .051446.0201200* .0063475 .046 .000334 .039906

-.0002200 .0063475 1.000 -.020006 .019566

(J) selangselang waktu 2 jamselang waktu 3 jamselang waktu 4 jamselang waktu 1 jamselang waktu 3 jamselang waktu 4 jamselang waktu 1 jamselang waktu 2 jamselang waktu 4 jamselang waktu 1 jamselang waktu 2 jamselang waktu 3 jam

(I) selangselang waktu 1 jam

selang waktu 2 jam

selang waktu 3 jam

selang waktu 4 jam

MeanDifference

(I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound95% Confidence Interval

The mean difference is significant at the .05 level.*.

Homogeneous Subsets

selisih

Scheffe a

5 .0301605 .0417005 .0618205 .062040

.377 1.000

selangselang waktu 1 jamselang waktu 2 jamselang waktu 4 jamselang waktu 3 jamSig.

N 1 2Subset for alpha = .05

Means for groups in homogeneous subsets are displayed.Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000.a.


84

Lampiran 13. Langkah kerja uji penetapan selang waktu pemberian natrium diklofenak dengan dosis 4,48 mg/kgBB sebelum karagenin 1%

Selang waktu 3jam

Keterangan :

Kelompok I : Perlakuan injeksi karagenin 1% 15 menit sesudah Na Diklofenak Kelompok II : Perlakuan injeksi karagenin 1% 30 menit sesudah Na Diklofenak Kelompok III : Perlakuan injeksi karagenin 1% 45 menit sesudah Na Diklofenak Kelompok IV : Perlakuan injeksi karagenin 1% 60 menit sesudah Na Diklofenak Kelompok V : Perlakuan injeksi karagenin 1% 90 menit sesudah Na Diklofenak

Dua puluh lima ekor mencit dibagi dalam 5 kelompok

Kelompok I

Kelompok II

Kelompok III

Kelompok IV

Mencit dikorbankan lalu kedua kaki bagian belakang dipotong pada sendi torsocrural

Ditimbang

Diberi perlakuan Na Diklofenak Dosis 4,48 mg/kgBB peroral

Kelompok IV

Kaki bagian kiri diinjeksi 0,05 ml karagenin 1% suplantar dan kaki kanan diinjeksi tanpa karagenin 1%


85

Lampiran 14.Hasil uji penetapan selang waktu pemberian natrium diklofenak dengan dosis 4,48 mg/kgBB sebelum pemberian injeksi karagenin 1%

No Keterangan (g)Bobot Udema Kaki Mencit (g) Setelah Pemberian Natrium Diklofenak (menit) Dengan

Selang Waktu Tertentu Sebelum Injeksi Karagenin 1% 15 30 45 60 90

1 Kaki kiri 0,1596 0,1990 0,2043 0,1782 0,1670 Kaki kanan 0,1448 0,1659 0,1634 0,1565 0,1544 Bobot udem 0,0148 0,0331 0,0409 0,0217 0,0126

2

Kaki kiri 0,1745 0,1930 0,1727 0,1849 0,1825 Kaki kanan 0,1404 0,1634 0,1446 0,1656 0,1617 Bobot udem 0,0341 0,0296 0,0281 0,0193 0,0208




Mean + SE (n = 5)

0,0289 + 0,0045

0,0291+ 0,0028

0,0334 + 0,0041

0,0241 + 0,0018

0,0152 + 0,0029

Keterangan : berdasarkan Uji SPSS Anova satu arah, maka dipilih selang waktu 90 menit


86

Lampiran 15. Hasil uji distribusi data penetapan selang waktu pemberian natrium diklofenak dengan dosis 4,48 mg/kgBB sebelum pemberian injeksi karagenin 1%dengan tes Kolmogorov Smirnov


25.026144

.0093435.116.116

-.068.579.891

NMeanStd. Deviation

Normal Parametersa,b




Selisih



Lampiran 16. Hasil uji Anova satu arah distribusi data penetapan selang waktu

pemberian natrium diklofenak dengan dosis 4,48 mg/kgBB sebelum pemberian injeksi karagenin 1%

Oneway

Descriptives

Selisih

5 .028880 .0099798 .0044631 .016488 .041272 .0148 .0416

5 .029060 .0062412 .0027912 .021310 .036810 .0186 .0345

5 .033420 .0092783 .0041494 .021899 .044941 .0254 .0458

5 .024140 .0041332 .0018484 .019008 .029272 .0193 .0285

5 .015220 .0064608 .0028894 .007198 .023242 .0081 .0232

25 .026144 .0093435 .0018687 .022287 .030001 .0081 .0458

Selang Waktu 15 menitsebelum karageninSelang Waktu 30 menitsebelum karageninSelang Waktu 45 menitsebelum karageninSelang Waktu 60 menitsebelum karageninSelang Waktu 90 menitsebelum karageninTotal



Minimum Maximum


Selisih

1.372 4 20 .279


ANOVA

Selisih

.001 4 .000 4.240 .012

.001 20 .000

.002 24

Between GroupsWithin GroupsTotal

Sum ofSquares df Mean Square F Sig.


87

Post Hoc Tests Multiple Comparisons

Dependent Variable: SelisihScheffe

-.0001800 .0047620 1.000 -.016304 .015944

-.0045400 .0047620 .920 -.020664 .011584

.0047400 .0047620 .908 -.011384 .020864

.0136600 .0047620 .125 -.002464 .029784

.0001800 .0047620 1.000 -.015944 .016304

-.0043600 .0047620 .930 -.020484 .011764

.0049200 .0047620 .896 -.011204 .021044

.0138400 .0047620 .117 -.002284 .029964

.0045400 .0047620 .920 -.011584 .020664

.0043600 .0047620 .930 -.011764 .020484

.0092800 .0047620 .456 -.006844 .025404

.0182000* .0047620 .022 .002076 .034324

-.0047400 .0047620 .908 -.020864 .011384

-.0049200 .0047620 .896 -.021044 .011204

-.0092800 .0047620 .456 -.025404 .006844

.0089200 .0047620 .495 -.007204 .025044

-.0136600 .0047620 .125 -.029784 .002464

-.0138400 .0047620 .117 -.029964 .002284

-.0182000* .0047620 .022 -.034324 -.002076

-.0089200 .0047620 .495 -.025044 .007204

(J) OrientasiSelang Waktu 30 menitsebelum karageninSelang Waktu 45 menitsebelum karageninSelang Waktu 60 menitsebelum karageninSelang Waktu 90 menitsebelum karageninSelang Waktu 15 menitsebelum karageninSelang Waktu 45 menitsebelum karageninSelang Waktu 60 menitsebelum karageninSelang Waktu 90 menitsebelum karageninSelang Waktu 15 menitsebelum karageninSelang Waktu 30 menitsebelum karageninSelang Waktu 60 menitsebelum karageninSelang Waktu 90 menitsebelum karageninSelang Waktu 15 menitsebelum karageninSelang Waktu 30 menitsebelum karageninSelang Waktu 45 menitsebelum karageninSelang Waktu 90 menitsebelum karageninSelang Waktu 15 menitsebelum karageninSelang Waktu 30 menitsebelum karageninSelang Waktu 45 menitsebelum karageninSelang Waktu 60 menitsebelum karagenin

(I) OrientasiSelang Waktu 15 menitsebelum karagenin

Selang Waktu 30 menitsebelum karagenin




MeanDifference

(I-J) Std. Error Sig. Lower Bound Upper Bound95% Confidence Interval

The mean difference is significant at the .05 level.*.


88

Homogeneous Subsets

Selisih

Scheffe a

5 .015220

5 .024140 .024140

5 .028880 .028880

5 .029060 .029060

5 .033420

.117 .456

OrientasiSelang Waktu 90 menitsebelum karageninSelang Waktu 60 menitsebelum karageninSelang Waktu 15 menitsebelum karageninSelang Waktu 30 menitsebelum karageninSelang Waktu 45 menitsebelum karageninSig.

N 1 2Subset for alpha = .05

Means for groups in homogeneous subsets are displayed.Uses Harmonic Mean Sample Size = 5.000.a.


89

Lampiran 17. Langkah kerja perlakuan terhadap hewan uji

Keterangan : I : Kelompok kontrol negatif karagenin 1% II : Kelompok kontrol positif natrium diklofenak III : Kelompok kontrol negatif CMC-Na 1 % IV : Kelompok kontrol negatif aquadest V : Kelompok perlakuan ekstrak Boswellia serrata dosis 24,25 mg/kg BB VI : Kelompok perlakuan ekstrak Boswellia serrata dosis 72,8 mg/kg BB VII : Kelompok perlakuan ekstrak Boswellia serrata dosis 218,4 mg/kg BB VIII : Kelompok perlakuan ekstrak Boswellia serrata dosis 655,2 mg/kg BB

Empat puluh ekor hewan uji dibagi menjadi 8 kelompok

I II III VIII VII VI V IV

Diberikan ekstrak Boswellia serrata secara peroral

Perlakuan injeksi karagenin 1% kaki kanan dan kaki kiri tanpa karagenin 1%

Lalu mencit dikorbankan, kedua kaki belakang dipotong pada bagian torsocrural

Selang waktu 90 menit

Selang waktu 3 jam

Ditimbang


90

Lampiran 18.Hasil uji dan analisis data selisih bobot udema kaki mencit setelah pemberian ekstrak Boswellia serrata dalam 4 peringkat dosis beserta kontrol

No Keterangan

(g) Kontrol

4 Peringkat Dosis Ekstrak Boswellia serrata (mg/kg BB)

Karagenin 1%

Aquadest Natrium Diklofenak

CMC Na 1% 24,25 72,8 218,4 655,2

1 Kaki kiri 0,2155 0,1771 0,1670 0,2274 0,1689 0,1846 0,1947 0,1847 Kaki kanan 0,1630 0,1442 0,1544 0,1689 0,1341 0,1542 0,1348 0,1289 Bobot udem 0,0525 0,0329 0,0126 0,0585 0,0348 0,0304 0,0599 0,0558


3 Kaki kiri 0,1797 0,2112 0,1699 0,1819 0,1559 0,1572 0,2402 0,1890 Kaki kanan 0,1289 0,1473 0,1467 0,1403 0,1202 0,1260 0,1761 0,1285 Bobot udem 0,0508 0,0639 0,0232 0,0416 0,0357 0,0312 0,0640 -,0605



Mean ± SE (n = 5)

0,0620 ± 0,0055

0,0498 ± 0.0079

0,0152 ± 0,0029

0,0481 ± 0,0038

0,0370 + 0,0030

0,0427 + 0,0074

0,0552 + 0,0033

0,0608 + 0,0045


91

Lampiran 19. Hasil uji distribusi data selisih bobot udema kaki mencit setelah pemberian ekstrak Boswellia serrata dalam 4 peringkat dosis beserta kontrol


40.046355

.0177277.086.076

-.086.542.931

NMeanStd. Deviation





Selisih



Lampiran 20. Hasil uji Anova satu arah data selisih bobot udema kaki

mencit setelah pemberian ekstrak Boswellia serrata dalam 4 peringkat dosis beserta kontrol

Oneway

Descriptives

Selisih

5 .062040 .0122028 .0054573 .046888 .077192 .0508 .07835 .049800 .0176326 .0078856 .027906 .071694 .0329 .07275 .015220 .0064608 .0028894 .007198 .023242 .0081 .02325 .048080 .0083918 .0037529 .037660 .058500 .0393 .0585

5 .037000 .0066049 .0029538 .028799 .045201 .0324 .0486

5 .042740 .0164602 .0073612 .022302 .063178 .0304 .0618

5 .055240 .0074735 .0033422 .045960 .064520 .0442 .0640

5 .060720 .0100790 .0045075 .048205 .073235 .0476 .0745

40 .046355 .0177277 .0028030 .040685 .052025 .0081 .0783

Karagenin 1%AquadestNatrium diklofenakCMC-Na 1%Ekstrak Boswellia serratadosis 24,25 mg/kgBBEkstrak Boswellia serratadosis 72,8 mg/kgBBEkstrak Boswellia serratadosis 218,4 mg/kgBBEkstrak Boswellia serratadosis 655,2 mg/kgBBTotal



Minimum Maximum


Selisih

4.367 7 32 .002


Keterangan : Dari hasil uji homogenitas, ternyata data tidak homogen (p<0,05),

sehingga tidak bisa dilanjutkan dengan uji Anova melainkan dengan uji non-parametrik Kruskal Wallis


92

Lampiran 21. Hasil uji Kruskal Wallis data selisih bobot udema kaki mencit setelah pemberian ekstrak Boswellia serrata dalam 4 peringkat dosis beserta kontrol

Kruskal-Wallis Test

Ranks

5 30.005 22.505 3.005 21.00

5 13.30

5 16.80

5 26.60

5 30.80

40

PerlakuanKaragenin 1%AquadestNatrium diklofenakCMC-Na 1%Ekstrak Boswellia serratadosis 24,25 mg/kgBBEkstrak Boswellia serratadosis 72,8 mg/kgBBEkstrak Boswellia serratadosis 218,4 mg/kgBBEkstrak Boswellia serratadosis 655,2 mg/kgBBTotal

SelisihN Mean Rank

Test Statisticsa,b

22.3047

.002

Chi-SquaredfAsymp. Sig.

Selisih

Kruskal Wallis Testa.

Grouping Variable: Perlakuanb.

Keterangan : Dari hasil uji Kruskal Wallis, ternyata ada perbedaan pada kelompok

perlakuan (p<0,05) , maka untuk melihat perbedaan tersebut, maka uji statistik dilanjutkan dengan uji Mann-Whitney


93

Lampiran 22. Hasil uji Mann-Whitney data selisih bobot udema kaki mencit setelah pemberian ekstrak Boswellia serrata dalam 4 peringkat dosis beserta kontrol

Beberapa contoh hasil uji Mann-Whitney antara dua kelompok perlakuan antara

lain sebagai berikut :

NPar Tests Mann-Whitney Test

Ranks

5 6.60 33.005 4.40 22.00

10

PerlakuanKaragenin 1%AquadestTotal

SelisihN Mean Rank Sum of Ranks

Test Statistics b

7.00022.000-1.149

.251

.310a

Mann-Whitney UWilcoxon WZAsymp. Sig. (2-tailed)Exact Sig. [2*(1-tailedSig.)]

Selisih

Not corrected for ties.a.


NPar Tests

Mann-Whitney Test Ranks

5 8.00 40.005 3.00 15.00

10

PerlakuanKaragenin 1%Natrium diklofenakTotal


Test Statistics b

.00015.000-2.611

.009

.008a


Selisih




94


Ranks

5 7.00 35.005 4.00 20.00

10

PerlakuanKaragenin 1%CMC-Na 1%Total


Test Statistics b

5.00020.000-1.567

.117

.151a


Selisih



NPar Tests


5 8.00 40.00

5 3.00 15.00

10

PerlakuanKaragenin 1%Ekstrak Boswellia serratadosis 24,25 mg/kgBBTotal


Test Statistics b

.00015.000-2.611

.009

.008a


Selisih




95


Ranks

5 6.80 34.00

5 4.20 21.00

10



Test Statistics b

6.00021.000-1.358

.175

.222a


Selisih



NPar Tests

Mann-Whitney Test

Ranks

5 6.00 30.00

5 5.00 25.00

10



Test Statisticsb

10.00025.000

-.522.602

.690a


Selisih




96


Ranks

5 5.60 28.00

5 5.40 27.00

10



Test Statistics b

12.00027.000

-.104.917

1.000a


Selisih



NPar Tests

Mann-Whitney Test

Ranks

5 3.00 15.005 8.00 40.00

10

PerlakuanNatrium diklofenakCMC-Na 1%Total


Test Statisticsb

.00015.000-2.611

.009

.008a


Selisih




97


Ranks

5 3.00 15.00

5 8.00 40.00

10

PerlakuanNatrium diklofenakEkstrak Boswellia serratadosis 24,25 mg/kgBBTotal


Test Statistics b

.00015.000-2.611

.009

.008a


Selisih



NPar Tests

Mann-Whitney Test

Ranks

5 3.00 15.00

5 8.00 40.00

10

PerlakuanNatrium diklofenakEkstrak Boswellia serratadosis 72,8 mg/kgBBTotal


Test Statisticsb

.00015.000-2.611

.009

.008a


Selisih




98

Lampiran 23. Rangkuman hasil uji Mann-Whitney data selisih bobot udema kaki mencit setelah pemberian ekstrak Boswellia serrata dalam 4 peringkat dosis beserta 4 kontrol

Kelompok perlakuan

Besar signifikansi (uji statistik)

I II III IV V VI VII VIII I - 0,251 (tb) 0,009 (bb) 0,117 (tb) 0,009 (bb) 0,175 (tb) 0,602 (tb) 0,917 (tb) II 0,251 (tb) - 0,009 (bb) 0,917 (tb) 0,209 (tb) 0,175 (tb) 0,465 (tb) 0,251 (tb) III 0,009 (bb) 0,009 (bb) - 0,009 (bb) 0,009 (bb) 0,009 (bb) 0,009 (bb) 0,009 (bb)IV 0,117 (tb) 0,917(tb) 0,009 (bb) - 0,047 (bb) 0,602 (tb) 0,251 (tb) 0,047 (tb) V 0,009 (bb) 0,209 (tb) 0,009 (bb) 0,047 (bb) - 0,602 (tb) 0,016 (bb) 0,016 (bb)VI 0,175 (tb) 0,175 (tb) 0,009 (bb) 0,602 (tb) 0,602 (tb) - 0,251(tb) 0,117 (tb) VII 0,602 (tb) 0,465 (tb) 0,009 (bb) 0,251 (tb) 0,016 (bb) 0,251(tb) - 0,251 (tb) VIII 0,917 (tb) 0,251 (tb) 0,009 (bb) 0,047 (tb) 0,016 (bb) 0,117 (tb) 0,251 (tb) -

Keterangan :

bb : Berbeda bermakna (p<0,05) tb : Berbeda tidak bermakna ( p>0,05) I : Kelompok perlakuan kontrol negatif karagenin 1% II : Kelompok perlakuan kontrol negatif aquadest sebagai pelarut natrium diklofenak III : Kelompok perlakuan kontrol positif natrium diklofenak IV : Kelompok perlakuan kontrol negatif CMC-Na 1% sebagai pelarut ekstrak Boswellia serrata. V : Kelompok perlakuan Boswellia serrata dosis 24,25 mg/kg BB VI : Kelompok perlakuan Boswellia serrata dosis 72,8 mg/kg BB VII : Kelompok perlakuan Boswellia serrata dosis 218,4 mg/kg BB VIII : Kelompok perlakuan Boswellia serrata dosis 655,2 mg/kg BB


99

Lampiran 24. Data prosentase (%) respon daya anti-inflamasi ekstrak Boswellia serrata dalam 4 peringkat dosis beserta 4 kontrol (sebelum terkoreksi)

No Persentase (%) respon daya anti-inflamasi

Kontrol 4 peringkat dosis ekstrak Boswelia serrata

Karagenin 1% CMC-Na 1% Aquadest Natrium

diklofenak

24,25 (mg/kg

BB)

72,8 (mg/kg

BB)

218,4 (mg/kg

BB)

655,2 (mg/kg

BB)

1 15,38 5,71 46,97 79,69 43,91 51,00 3,45 10,06

2 -26,21 36,65 -17,18 66,47 46,00 0,39 12,31 23,28

3 18,12 32,95 -3,00 62,60 42,46 49,71 -3,16 2,48

4 -15,25 26,02 29,40 81,62 47,78 3,77 13,44 -5,09

5 7,96 11,19 42,46 86,94 21,66 50,68 28,76 -20,08

X % daya

0.00 22,50 19,73 75,47 40,36 31,11 10,96 2,13


100

Lampiran 25.Hasil analisis data prosentase (%) respon daya anti-inflamasi ekstrak Boswellia serrata dalam 4 peringkat dosis beserta 3 kontrol (terkoreksi tanpa karagenin 1%)

No

Persentase (%) daya anti-inflamasi Kontrol 4 peringkat dosis ekstrak Boswelia serrata

CMC-Na 1% Aquadest Natrium

diklofenak

24,25 (mg/kg

BB)

72,8 (mg/kg

BB)

218,4 (mg/kg

BB)

655,2 (mg/kg

BB)

1 -21,67 33,94 74,70 27,62 36,77 -24,58 -16,06 2 18,26 -45,98 58,23 30,32 -28,54 -13,14 0,99 3 13,48 -28,31 53,41 25,75 35,11 -33,11 -25,83 4 4,53 12,05 77,11 32,61 -24,17 -11,69 -35,61 5 -14,60 28,31 83,74 -1,08 36,36 8,07 -54,95

% daya 0,00 0,00 69,44 23,04 11,12 -14,89 -26,29 X


101

Contoh Perhitungan :

Prosentase respon daya anti – inflamasi = %1001 xUD⎟⎠⎞

⎜⎝⎛ −

Keterangan : U = bobot kaki terinduksi karagenin – bobot kaki normal D = bobot kaki perlakuan – bobot kaki normal

a). Kontrol CMC-Na 1%

% respon DAI = %10004808,00585,01 x⎟

⎠

⎞⎜⎝

⎛ − = -21,67 % (Hewan uji kelompok 1)

U = bobot rata-rata udema dengan perlakuan CMC Na 1% D = bobot udema setiap hewan uji yang diberi perlakuan CMC Na 1% Bobot rata-rata udema perlakuan CMC-Na1% 0,04808 (5 angka di belakang

koma)

(Hasil % respon DAI CMC-Na 1% pada kelompok lain diperoleh dengan cara

yang sama).

b). Kontrol aquadest

% respon DAI = %1000498,00329,01 x⎟

⎠

⎞⎜⎝

⎛− = 33,94 % (Hewan uji kelompok 1)

U = bobot rata-rata udema dengan perlakuan aquadest D = bobot udema setiap hewan uji yang diberi perlakuan aquadest (Hasil % respon DAI Aquadest pada kelompok lain diperoleh dengan cara yang

sama).

c). Kontrol natrium diklofenak

% DAI = %1000498,00126,01 x⎟

⎠

⎞⎜⎝

⎛ − = 74,70% ( Hewan uji kelompok 1)

U = bobot rata-rata udema dengan perlakuan pelarut natrium diklofenak D = bobot udema setiap hewan uji yang diberi perlakuan pelarut natrium diklofenak


102

(Hasil % respon DAI natrium diklofenak pada kelompok lain diperoleh dengan

cara yang sama).

d). Perlakuan ekstrak Boswellia serrata

% respon DAI = %10004808,00348,01 x⎟

⎠

⎞⎜⎝

⎛ − = 27,62 % (kelompok dosis 24,25

mg/kgBB) U = bobot rata-rata udema pensuspensi Boswellia serrata D = bobot udema setiap hewan uji yang diberi perlakuan Boswellia serrata

Bobot rata-rata udema perlakuan CMC-Na1% 0,04808 (5 angka di belakang

koma)

(Hasil % respon DAI ekstrak Boswellia serrata pada kelompok lain diperoleh

dengan cara yang sama).


103

Lampiran 26. Hasil uji distribusi data prosentase (%) respon daya anti-inflamasi ekstrak boswellia serrata dalam 4 peringkat dosis beserta kontrol dengan uji Kolmogorov Smirnov


358.9154

36.07032.116.116

-.080.687.733

NMeanStd. Deviation





Persendaya



Keterangan : Dari analisis statistic dengan Kolmogorov Smirnov, diperoleh signifikansi sebesar >0,05. Hal itu berarti semua data terdistribusi normal.

Lampiran 27. Hasil uji Anova satu arah data prosentase (%) respon daya anti-

inflamasi ekstrak Boswellia serrata dalam 4 peringkat dosis beserta kontrol

Oneway

Descriptives

Persendaya

5 .0020 35.40550 15.83382 -43.9597 43.9637 -45.98 33.945 .0000 17.45285 7.80515 -21.6706 21.6706 -21.67 18.265 69.4380 12.97701 5.80350 53.3249 85.5511 53.41 83.74

5 23.0440 13.73570 6.14279 5.9889 40.0991 -1.08 32.61

5 11.1060 34.23740 15.31143 -31.4054 53.6174 -28.54 36.77

5 -14.8900 15.54291 6.95100 -34.1891 4.4091 -33.11 8.07

5 -26.2920 20.96021 9.37369 -52.3175 -.2665 -54.95 .99

35 8.9154 36.07032 6.09700 -3.4752 21.3060 -54.95 83.74

AquadestCMC-Na 1%Na DiklofenakEkstrak Boswellia serratadosis 24,25mg/kgBBEkstrak Boswellia serratadosis 72,8 mg/kgBBEkstrak Boswellia serratadosis 218,4 mg/kgBBEkstrak Boswellia serratadosis 655,2 mg/kgBBTotal



Minimum Maximum


104


Persendaya

4.753 6 28 .002


Keterangan : Dari hasil uji homogenitas, ternyata data tidak homogen (p<0,05),

sehingga tidak bisa dilanjutkan dengan uji Anova melainkan dengan uji Kruskal Wallis

Lampiran 28. Hasil uji Kruskal Wallis data prosentase (%) respon daya anti-

inflamasi ekstrak Boswellia serrata dalam 4 peringkat dosis beserta kontrol

NPar Tests

Kruskal-Wallis Test Ranks

5 15.605 16.005 33.00

5 22.20

5 20.20

5 11.40

5 7.60

35

PerlakuanAquadestCMC-Na 1%Na DiklofenakEkstrak Boswellia serratadosis 24,25mg/kgBBEkstrak Boswellia serratadosis 72,8 mg/kgBBEkstrak Boswellia serratadosis 218,4 mg/kgBBEkstrak Boswellia serratadosis 655,2 mg/kgBBTotal

PersendayaN Mean Rank

Test Statisticsa,b

19.4746

.003

Chi-SquaredfAsymp. Sig.

Persendaya

Kruskal Wallis Testa.



105

Keterangan : Dari hasil uji Kruskal Wallis, ternyata ada perbedaan pada kelompok perlakuan (p<0,05) , maka untuk melihat perbedaan tersebut, maka uji statistik dilanjutkan dengan uji Mann-Whitney

Lampiran 29. Hasil uji Mann-Whitney data prosentase (%) respon daya anti-

inflamasi ekstrak Boswellia serrata dalam 4 peringkat dosis beserta 3 kontrol

Beberapa contoh hasil uji Mann-Whitney antara dua kelompok perlakuan antara lain

sebagai berikut :


Ranks

5 5.60 28.005 5.40 27.00

10

PerlakuanAquadestCMC-Na 1%Total

PersendayaN Mean Rank Sum of Ranks

Test Statisticsb

12.00027.000

-.104.917

1.000a


Persendaya



NPar Tests


5 3.00 15.005 8.00 40.00

10

PerlakuanAquadestNa DiklofenakTotal



106

Test Statisticsb

.00015.000-2.611

.009

.008a


Persendaya



NPar Tests


5 4.80 24.00

5 6.20 31.00

10

PerlakuanAquadestEkstrak Boswellia serratadosis 24,25mg/kgBBTotal


Test Statisticsb

9.00024.000

-.731.465

.548a


Persendaya



NPar Tests


5 3.00 15.005 8.00 40.00

10

PerlakuanCMC-Na 1%Na DiklofenakTotal



107

Test Statisticsb

.00015.000-2.611

.009

.008a


Persendaya


Grouping Variable: Perlakuanb. NPar Tests


5 3.60 18.00

5 7.40 37.00

10

PerlakuanCMC-Na 1%Ekstrak Boswellia serratadosis 24,25mg/kgBBTotal


Test Statisticsb

3.00018.000-1.984

.047

.056a


Persendaya




Ranks

5 5.00 25.00

5 6.00 30.00

10

PerlakuanCMC-Na 1%Ekstrak Boswellia serratadosis 72,8 mg/kgBBTotal


Test Statisticsb

10.00025.000

-.522.602

.690a


Persendaya




108


Ranks

5 6.60 33.00

5 4.40 22.00

10



Test Statisticsb

7.00022.000-1.149

.251

.310a


Persendaya



NPar Tests


5 7.40 37.00

5 3.60 18.00

10



Test Statisticsb

3.00018.000-1.984

.047

.056a


Persendaya




109

Lampiran 30. Rangkuman hasil uji Mann-Whitney data prosentase (%) respon daya anti-inflamasi ekstrak Boswellia serrata dalam 4 peringkat dosis beserta 3 kontrol

Kelom- Mean(g) + SE Besar signifikansi (hasil uji statistik)

pok (n = 5) I II III IV V VI VII

I 0,00 + 15,83 - 0,917 (tb) 0,009(bb) 0,465 (tb) 0,251 (tb) 0,465 (tb) 0,251 (tb)

II 0,00 + 7,81 0,917 (tb) - 0,009(bb) 0,047(bb) 0,602 (tb) 0,251(tb) 0,047(bb)

III 69,44 + 5,80 0,009(bb) 0,009 (bb) - 0,009 (bb) 0,009(bb) 0,009(bb) 0,009 (bb)

IV 23,04 + 6,14 0,465 (tb) 0,047(bb) 0,009(bb) - 0,602 (tb) 0,016(bb) 0,016 (bb)

V 11,12 + 15,31 0,251 (tb) 0,602 (tb) 0,009(bb) 0,602 (tb) - 0,251 (tb) 0,117 (tb)

VI -14,89 + 6,95 0,465 (tb) 0,251 (tb) 0,009(bb) 0,016 (bb) 0,251 (tb) - 0,251 (tb)

VII -26,29 + 9,37 0,251 (tb) 0,047(bb) 0,009(bb) 0,016 (bb) 0,117 (tb) 0,251 (tb) - Keterangan :

I : Kelompok perlakuan kontrol negatif aquadest sebagai pelarut natrium diklofenak II : Kelompok perlakuan kontrol negatif CMC-Na 1% sebagai pelarut ekstrak Boswellia serrata III : Kelompok perlakuan kontrol positif natrium diklofenak IV : Kelompok perlakuan Boswellia serrata dosis 24,25 mg/kg BB V : Kelompok perlakuan Boswellia serrata dosis 72,8 mg/kg BB VI : Kelompok perlakuan Boswellia serrata dosis 218,4 mg/kg BB VII : Kelompok perlakuan Boswellia serrata dosis 655,2 mg/kg BB bb : berbeda bermakna (p<0,05) tb : berbeda tidak bermakna ( p>0,05)


110

Lampiran 31. Perhitungan prosentase daya anti-inflamasi ekstrak Boswellia

serrata

Peringkat dosis 24,25 mg/kgBB

1. Prosentase daya = %44,69%62,27 x 100% = 39,76%.




5. Prosentase daya = %44,69%08,1− x 100% = -1,56%.

Rata-rata prosentase daya anti-inflamasi :5

%9,165 = 33,18 %.








%96,79 = 15,99 %


111


1. Prosentase daya = %44,69%58,24− x 100% = -35,40%


3. Prosentase daya = %44,69%11,33− x 100% = - 47,68%


5. Prosentase daya = %44,69

%07,8 x 100% = 11,62%


%21,107 = -21,44 %



2. Prosentase daya = %44,69

%99,0 x 100% = 1,43%


4. Prosentase daya = %44,69%61,35− x 100% = - 51,28%



%31,189− = -37,86 %


112

Lampiran 32. Rincian konversi dosis mencit 20 gram ke manusia 70 kg

Faktor konversi dosis mencit 20 gram ke manusia 70 kg sebesar 387,9

Contoh perhitungan :

Peringkat dosis 24,25 mg/kg BB

24,25mg/kgBB = 0,485 mg/20 g BB

0,485 mg/20 g BB x 387,9 = 188,70 mg/kgBB.

Peringkat dosis 72,8 mg/kg BB

72,8 mg/kgBB = 1,456 mg/20 g BB

1,456 mg/20 g BB x 387,9 = 564,78 mg/kgBB.


113

113

BIOGRAFI PENULIS

Penulis bernama TH. Avi Hardhiani, lahir di Sleman pada

tanggal 16 Desember 1985 yang merupakan putri kedua

dari dua bersaudara dari pasangan St. Ngadi Hartono dan

Agnes Sri Wardani. Penulis pernah menempuh pendidikan

di TK Kanisius Klepu pada tahun 1990 dan pada tahun

1991 melanjutkan pendidikan sekolah dasar di SD Kanisius

Klepu, yang keduanya berlokasi di Minggir, Sleman. Kemudian menempuh

pendidikan SLTP pada tahun 1997 di SLTP Pangudi Luhur Moyudan yang

berlokasi di Moyudan, Sleman dan melanjutkan pendidikan sekolah menengah

umum di SMU Stella Duce 1 Yogyakarta pada tahun 2001. Setelah selesai

menempuh pendidikan SMU pada tahun 2004, penulis melanjutkan di Fakultas

Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta. Selama kuliah di Universitas

Sanata Dharma, penulis pernah mengikuti beberapa kegiatan, antara lain :

mengikuti kegiatan PSF (Paduan Suara Farmasi) dalam acara pengambilan

Sumpah Apoteker angkatan 13, mengikuti kegiatan penyuluhan JMKI (Jaringan

Mahasiswa Kesehatan Indonesia) sebagai seksi konsumsi, mengikuti kegiatan

PEC (Pharmacy Event Cup) sebagai sekretaris II pada tahun 2006. Di luar kampus,

penulis mengikuti kegiatan Mudika Bhakti Dharma, Lingkungan Aloysius, Paroki

Sedayu sampai sekarang.


plagiat merupakan tindakan tidak terpuji - core.ac.uk · capung indah abadi, ibu lis setyowati,...

Documents