laporan farmakologi 5

8/10/2019 LAPORAN FARMAKOLOGI 5

1/9

LAPORAN PRAKTIKUM FARMAKOLOGI I

PERCOBAAN 5

PENGUJIAN AKTIVITAS ANTIDIABETES

(METODE TOLERANSI GLUKOSA)

Kelompok 7-B

Akmal Yuliandi Pratama (10060312030)

Riri Indri Septiani (10060312033)

M. Azril Aidineka Jaelani (10060312034)

Taufik Nugraha Esa (10060312035)

Chyntia Karimah (10060312037)

Asisten: Vita Purwanti, S.farm

Tanggal Praktikum: 6 Oktober 2014

Tanggal Laporan: 13 Oktober 2014

LABORATORIUM TERPADU FARMASI UNIT D

PROGRAM STUDI FARMASI

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

UNIVERSITAS ISLAM BANDUNG

2014


2/9

PERCOBAAN 5

PENGUJIAN AKTIVITAS ANTIDIABETES

(METODE TOLERANSI GLUKOSA)

I. Tujuan Percobaan

Dapat memiliki keterampilan dalam melalkukan pengujian aktivitas seuatu

obat antidiabetes dengan metode toleransi glukosa, mengetahui hubungan antara

asupan glukosa terhadap sekresi insulin dan pengaruh sediaan obat uji terhadap

penurunan kadar glukosa darah

II. Teori

Percobaan mengenai diabetes mellitus dengan menggunakan hewan percobaan

didasarkan pada patogenesis penyakit tersebut pada manusia. Penelitian

menggunakan hewan percobaan yang dibuat secara patologis menderita diabetes

mellitus, telah banyak penemuan mengenai bermacam-macam diagnosa, terapi

maupun obat-obat yang digunakan dalam penanganan penyakit diabetes mellitus.

Meskipun demikian, kondisi patologis hewan percobaan tersebut tidak sepenuhnya

menggambarkan kondisi patologis secara real pada manusia. Hal ini disebabkan

karena beberapa hal antara lain :

Perbedaan kondisi fisiologi.

Perbedaan patologis dari beberapa model diabetes mellitus.

Ragamnya penyakit diabetes mellitus.

Adanya komplikasi yang menyertai dari penyakit tersebut.

Menurut Cheta (1998), berdasarkan cara pembuatannya, hewan percobaan

diabetes mellitus dibedakan menjadi dua yaitu : (1) terinduksi (induced), misalnya

melalui pankreaktomi, senyawa kimia (diabetogenik) dan virus; (2) spontan

(spontaneous), misalnya menggunakan tikus BB (bio breeding) atau mencit NOD

(non-obese diabetic). Spontaneous animal models mempunyai karakteristik yang

relatif sama dengan kondisi diabetes mellitus pada manusia meliputi gejala-gejala

penyakit, imunologi, genetik maupun karakteristik klinik lainnya. Pada tulisan ini

akan disajikan macam-macam hewan percobaan diabetes mellitus, dan selanjutnya


3/9

akan ditekankan pada mekanisme molecular dua diabetogenik yang sering digunakan

yaitu streptozotosin dan aloksan. (Cheta,1998)

Diabetes diturunkan dari bahasa Yunani yaitu diabetes yang berarti pipa

air melengkung (syphon). Diabetes dinyatakan sebagai keadaan di mana terjadi

produksi urin yang melimpah pada penderita (Lawrence, 1994). Diabetes mellitus

(DM) merupakan suatu penyakit yang melibatkan hormon endokrin pankreas, antara

lain insulin dan glukagon. Manifestasi utamanya mencakup gangguan metabolisme

lipid, karbohidrat, dan protein yang pada gilirannya merangsang kondisi

hiperglikemia. Kondisi hiperglikemia tersebut akan berkembang menjadi diabetes

mellitus dengan berbagai macam bentuk manifestasi komplikasi (Unger dan Foster,

1992).

Terdapat beberapa definisi yang dapat merepresentasikan penyebab, perantara

dan wujud komplikasi tersebut. Diabetes mellitus menurut Beenen (1996) adalah

suatu sindrom yang mempunyai ciri kondisi hiperglikemik kronis, gangguan

metabolisme karbohidrat, lemak dan protein, terkait dengan defisiensi sekresi

dan/atau aksi insulin secara absolut atau relatif, sedangkan Kahn (1995) memberikan

definisi diabetes mellitus sebagai sindrom kompleks yang terkait dengan

metabolisme karbohidrat, lemak dan protein dengan ciri-ciri hiperglikemik dan

gangguan metabolism glukosa, serta terkait secara patologis dengan komplikasi

mikrovaskuler yang spesifik, penyakit mikrovaskuler sekunder pada perkembangan

aterosklerosis, dan beberapa komplikasi yang lain meliputi neuropati, komplikasi

dengan kehamilan, dan memperparah kondisi infeksi.

Aloksan (2,4,5,6-tetraoksipirimidin; 5,6-dioksiurasil) merupakan senyawa

hidrofilik dan tidak stabil. Waktu paro pada suhu 37C dan pH netral adalah 1,5

menit dan bisa lebih lama pada suhu yang lebih rendah. Sebagai diabetogenik,

aloksan dapat digunakan secara intravena, intraperitoneal dan subkutan. Dosis

intravena yang digunakan biasanya 65 mg/kg BB, sedangkan intraperitoneal dan

subkutan adalah 2-3 kalinya (Szkudelski, 2001; Rees dan Alcolado, 2005).

Streptozotosin (STZ) atau 2-deoksi-2-[3-(metil-3-nitrosoureido)-D-gluko

piranose] diperoleh dari Streptomyces achromogenes dapat digunakan untuk

menginduksi baik DM tipe 1 maupun tipe 2 pada hewan uji. Struktur kimia

streptozotosin dapat dilihat pada gambar 2. Dosis yang digunakan untuk menginduksi


4/9

DM tipe 1 untuk intravena adalah 40-60 mg/kg, sedangkan dosis intraperitoneal

adalah lebih dari 40 mg/kg BB. STZ juga dapat diberikan secara berulang, untuk

menginduksi DM tipe 1 yang diperantarai aktivasi sistem imun. Untuk menginduksi

DM tipe 2, STZ diberikan intravena atau intraperitoneal dengan dosis 100 mg/kg BB

pada tikus yang berumur 2 hari kelahiran, pada 8-10 minggu tikus tersebut

mengalami gangguan respon terhadap glukosa dan sensitivitas sel terhadap

glukosa. Di lain pihak, sel dan tidak dipengaruhi secara signifikan oleh

pemberian streptozotosin pada neonatal tersebut sehingga tidak membawa dampak

pada perubahan glukagon dan somatostatin. Patofisiologis te rsebut identik pada DM

tipe II (Bonner-Weiret al., 1981; Szkudelski, 2001; Jackerottetal., 2006; Tormoet al.,

2006).

Prinsip metode toleransi glukosa, mencit atau tikus yang telah dipuasakan 18-

20 jam sebelumnya, diberikan larutan glukosa per oral setangah jam sesudah

pemberian sediaan obat yang diuji. Pada awal percobaan sebelum pemberian obat,

dilakukan pengambilan cuplikan darah dari ekor mencit sebagai kadar glukosa darah

awal yang diukur menggunakan alat glukotest atau CCA (clinical chemistry analyser)

untuk tikus. Pengambilan cuplikan darah vena diulangi setelah perlakuan pada

waktu-waktu tertentu. (Petunjuk praktikum farmakologi,2014)

Kerja samping terpenting adalah hipoglikemia, yang khusus dapat muncul

setelah pemberian sulfonilureum yang bekerja kuat sehingga dapat terjadi interaksi

obat melalui pendesakan sulfonilureum dari pengikatan protein plasma maupun

kompetisi untuk mekanisme sekresi tubulus (Schunak. W., 1990).

Antidiabetika Oral Kombinasi Metformin dan Glibenklamid, Kombinasi ini

sangat cocok digunakan untuk penderita diabetes melitus tipe 2 pada pasien yang

hiperglikemianya tidak bisa dikontrol dengan single terapi (metformin atau

glibenklamid saja), diet, dan olahraga. Di samping itu, kombinasi ini saling

memperkuat kerja masing-masing obat, sehingga regulasi gula darah dapat terkontrol

dengan lebih baik (Yosef, 2007).

Kombinasi ini memiliki efek samping yang lebih sedikit, apabila dibandingkan

dengan efek samping apabila menggunakan monoterapi (metformin atau

glibenklamid saja). Metformin dapat menekan potensi glibenklamid dalam

menaikkan berat badan pada pasien diabetes melitus tipe 2, sehingga cocok untuk


5/9

pasien diabetes melitus tipe 2 yang mengalami kelebihan berat badan (80% dari

semua pasien diabetes melitus tipe 2 adalah terlalu gemuk dengan kadar gula tinggi

sampai 17-22 mmol/l) (Yosef, 2007).

DM dapat dicegah dengan menerapkan hidup sehat sedini mungkin yaitu

dengan mempertahankan pola makan sehari-hari yang sehat dan seimbang dengan

meningkatkan konsumsi sayuran, buah dan serat, membatasi makanan yang tinggi

karbohidrat, protein dan lemak, mempertahankan BB yang normal sesuai dengan

umur dan tinggi badan (TB) serta olah raga (OR) teratur sesuai umur & kemampuan

(Anonim, 2008).

Biasanya, penderita diabetes diberi dosis tunggal salah satu preparat insulin

bermasa kerja lama setiap hari, ia meningkatkan seluruh metabolisme karbohidratnya

sepanjang hari, kemudian insulin regular (suatu preparat bermasa kerja singkat yang

berlangsung hanya beberapa jam) tambahan diberikan pada setiap saat kadar glukosa

darah cenderung meningkat terlalu tinggi, seperti waktu makan. Jadi, setiap penderita

diberi pengobatan rutin secara individual (Guyton, A. C., 1990).

III.

Alat dan Bahan

Alat yang digunakan dalam pengujian aktivitas antidiabetes (metode

toleransi glukosa) yaitu jarum dan alat suntik, jarum suntik oral, glukotest, tabung

sentrifus mikro, alat sentrifus, dan CCA/spektrofotometer. Bahan yang digunakan

yaitu sediaan uji, zat pembanding acarbose, metformin atau glibenklaid, air suling,

larutan glukosa standard an bahan pengsuspensi. Sedangkan hewan yang digunakan

yaitu mencit.


6/9

IV. Prosedur Percobaan

Dalam percobaan pengujian aktivitas antidiabetes, pada hari percobaan

semua hewan ditimbang dan dikelompokkan dan diberi tanda pada ekor. Dilakukan

pengambilan darah pada ekor (T=0) sebelum pemberian obat. Sediaan obat dalam

larutan pensuspensi CMC Na/tragakan 2% diberikan secara oral. Satu jam

kemudian hewan diberikan sediaan glukosa 50% diberikan dengan dosis 1g/kg

bobot-badan kepada semua kelompok kecuali kelompok kontrol negative. Setelah

selesai pemberian oral, dilakukan pengambilan darah pada menit ke-30, 60 dan 90.

Pengukuran kadar glukosa darah dilakukan dengan menggunakan glukotest. Dibuat

kurva respon kadar glukosa darah dengan sumbu x adalah t pengambilan darah dan

sumbu y adalah kadar gula darah. Penurunan kadar gula darah pada kelompok uji

diketahui dengan membandingkan hasil yang diperoleh dengan hasil dari kelompok

control positif. Maka semua data dievaluasi secara statistic menggunakan ANOVA

dan uji t.


7/9

V. Data Pengamatan

5.1Berdasarkan data pengamatan perkelompok

Jenis pengujian kelompokKadar gula darah dalam interfal waktu

t0 t30 t60 t90

Control positif

menggunakan CMC

Na

kelompok 2 164 mg / dL 580 mg / dL 272 mg / dL 435 mg / dL

Kelompok 5 120 mg / dL 215 mg / dL 288 mg / dL -

Control uji 1

menggunakan

acarbose 10.4 mg /

20ml

Kelompok 1 130 mg / dL 335 mg / dL 107 mg / dL -

Kelompok 6 84 mg / dL 350 mg / dL 136 mg / dL 140 mg / mL

Control uji 2

menggunakan

metformin 104 mg /

20 ml

Kelompok 3 97 mg / dL 306 mg / dL 368 mg / dL 128 mg / dL

Kelompok 7123 mg / dL

438 mg / dL 403 mg / dL 266 mg / dL

Control uji 3

menggunakan

glibenklamid 0.52mg / 20 ml

Kelompok 4 73 mg / dL 340 mg / dL 284 mg / dL 338 mg / mL

Kelompok 7 170 mg / dL 170 mg / dL 73 mg / dL Mencit mati

5.2 Berdasarkan control pengujian

Dari data pengamatan diatas, maka kami perkecil data dengan cara menyatukan dan

merata-ratakan nilai kadar gula darah pada mencit sesuai jenis kontrol pengujian dan

sediaan obatnya

Jenis pengujian kelompokKadar gula darah dalam interfal waktu

t0 t30 t60 t90Control positif

menggunakan CMCNa

kelompok 2 &

kelompok 5 142 mg / dL

397.5 mg /

dL 280 mg / dL

217.5 mg /

dL

Control uji 1

menggunakan

acarbose 10.4 mg /

20ml

Kelompok 1 &

kelompok 6107 mg / dL

342.5 mg /

dL

121.5 mg /

dL70 mg / mL

Control uji 2

menggunakan

metformin 104 mg /

20 ml

Kelompok 3 &

kelompok 7110 mg / dL 372 mg / dL

385.5 mg /

dL197 mg / dL

Control uji 3

menggunakanglibenklamid 0.52

mg / 20 ml

Kelompok 4 &kelompok 7

121.5 mg /dL

255 mg / dL 178.5 mg /dL

169 mg / mL


8/9

VI. Pembahasan

VII. Kesimpulan

VIII.Daftar Pustaka

-

Ani, D. V., Savitha, B., Paulose, C.S., 2006, Decreased alpha1-adrenergic

16811694. receptor binding in the cerebral cortex and brain stem during

pancreatic regeneration in rats,Neurochemical Research, 31(6):727-34.

- Beenen, H.M., 1996, Diabetes Mellitus and Hypertension, General

Introduction, Dissertation, Universiteit Van Amsterdam, Netherlands.

- Rowland, N.E. and Bellush, L.L., 1989, Diabetes Mellitus : Stress.

Neurochemistry and Behavior, Neuroscience and BiobehavioralReviews, 13

(4) : 199-206.

- Shafrir, E., Ziv, E. and Mosthaf, L., 1999, Nutritionally Induced Insulin

Resistance and Reseptor Defect Leading to -Cell Failure in Animal Models,Annals of The New York Academy of Sciences,892 : 223-46.

Control Positif

Control Uji 1

Control Uji 2

Control Uji 3

0

50

100

150

200

250

300

350

400

t0t30

t60t90

142

397.5

280

217.5

107

342.5

121.5

70

110

372 385.5

197121.5

255

178.5169

rentan waktu

Grafik Nilai Kadar gula darah pada setiapjenis sediaan berdasarkan rentan watku


9/9

-

Szkudelski, T., 2001, TheMechanism Of Alloxan And Streptozotocin Action In

Cells Of The Rat Pancreas, Physiology Research, 50: 536-54

-

Walde, S.S., Dohle, C., Schott-Ohly, P., Gleichmann, H., 2002, Molecular

target structures in alloxan-induced diabetes in mice, Life Sciences, 71,

- Wilson, G.L. and LeDoux, S.P., 1989, The Role of Chemical in The Etiology

of Diabetes Mellitus, Toxicologic Pathology, 17 : 357 3 62.

laporan farmakologi 5

Documents