1

LAPORAN PRAKTIKUM

MIKROBIOLOGI DAN VIROLOGI

PEMERIKSAAN AIR

DISUSUN OLEH:

NAMA : M. AVERIL PRIMA PUTRA R.

NIM : 1208505098

KELOMPOK : VI

GOLONGAN : III

TGL PRAKTIKUM : 13 APRIL 2014

ASISTEN DOSEN : SITI DIDAH ALAWIAH

JURUSAN FARMASI

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

UNIVERSITAS UDAYANA

2014

2

I. PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Air merupakan suatu senyawa yang menjadi kebutuhan mutlak bagi setiap

makhluk hidup di dunia. Sumber air dapat diperoleh dari air tanah, air tumbuhan

air danau dan air hujan. Air hujan mampu membawa mikroba dari sampah,

kotoran hewan/manusia, dan limbah pabrik (Dwijoseputro, 2003). Secara umum

fungsi air dalam tubuh setiap mikroorganisme adalah sebagai pelarut senyawa

organik, menstabilkan suhu tubuh dan sebagai media keberlangsungan berbagai

reaksi kimia tingkat seluler (Campbell et al., 2002).

Kebersihan air adalah syarat utama terjaminnya suatu kesehatan, oleh karena

itu, perlu dilakukan identifikasi komponen apa saja yang terkandung didalam air

yang selalu kita konsumsi atau disebut dengan identifikasi derajat pencemaran air.

Air yang terkontaminasi merupakan air yang didalamnya terdapat

mikroorganisme, sehingga air tersebut dapat dikatakan tidak steril. Sebagian besar

bahkan kebanyakan bakteri atau mikroorganisme memiliki habitat hidup di air,

sehingga air merupakan salah satu perantara penyebaran penyakit-penyakit

menular (Madigan et al., 1997). Dalam pemeriksaan derajat pencemaran air secara

mikrobiologis, umumnya ditujukan dengan adanya bakteri indikator yaitu

coliform. Sehingga dengan ditemukannya suatu bakteri coliform di dalam

makanan atau minuman akan menunjukkan bahwa dalam makanan dan minuman

tersebut terdapat mikroorganisme lain selain coliform yang bersifat

enteropatogenik atau toksigenik yang berbahaya bagi kesehatan (Fardiaz, 1993).

Biasanya untuk mengetahui jumlah coliform dalam sampel, digunakan metode

MPN (Most Probable Number) dengan cara fermentasi ganda. Metode ini lebih

baik dibandingkan metode menggunakan cawan hitung, karena metode MPN

lebih spesifik dan mampu mendeteksi coliform dalam jumlah yang rendah. Uji

kualitatif coliform secara lengkap terdiri dari tiga tahap yaitu uji penduga, uji

penetapan, dan uji pelengkap. Dalam pengujian kualitatif coliform tidak harus

dilakukan secara lengkap, hal ini tergantung dari berbagai faktor misalnya waktu,

jenis sampel, biaya, tujuan analisis, dan faktor lainnya (Fardiaz, 1993)

3

1.2 Tujuan

1.2.1 Mengetahui metode yang digunakan dalam pemeriksaan kualitas air.

1.2.2 Menentukan parameter dalam penentuan kualitas air (ada atau tidak adanya

bakteri coliform dalam berbagai sampel air).

1.2.3 Mengetahui jumlah coliform dan E. coli yang ada dalam sampel air.

II. MATERI DAN METODE

2.1 Uji Dugaan

Pada uji derajat pencemaran air, digunakan sampel air isi ulang yang

diperoleh dari enam tempat berbeda yaitu, air isi ulang Pedungan, air isi ulang

Tabana, air isi ulang Blahkiuh, air isi ulang Subita, air isi ulang Nusa Dua dan air

isi ulang Kenyeri. Pertama dilakukan uji dugaan, dimana sebanyak 10 ml air

sampel dipipet dan dimasukkan ke dalam tiga tabung reaksi yang telah berisi

medium kaldu laktose konsentrasi ganda. Kemudian masing-masing air sampel

dipipet lagi sebanyak 1 ml dan dimasukkan ke dalam tiga tabung reaksi yang

berisi kaldu laktose konsentrasi normal, serta air sampel dipipet lagi sebanyak 0,1

ml dan dimasukkan ke dalam tiga tabung reaksi yang berisi kaldu laktose

konsentrasi normal. Sehingga diperoleh sembilan tabung dimana tiap tiga tabung

reaksi memiliki konsnetrai yang sama yaitu 10 mL, 1 mL dan 0,1 mL. Selanjutnya

seluruh tabung reaksi diinkubasi pada suhu 37C selama 24 jam dan hasil positif

ditunjukkan dengan adanya gas dalam tabung durham.

2.2 Uji Penetapan

Setelah uji dugaan selesai dilakukan uji penetapan, dimana tabung yang

menunjukkan hasil positif pada uji dugaan diinokulasikan ke dalam medium

BGBB sebanyak 1 tetes dengan menggunakan jarum ose. Kemudian dinkubasi

selama 24 jam. Hasil positif akan ditunjukkan oleh adanya gas dalam tabung

durham, dan jumlah bakteri dapat dihitung dengan metode MPN (Most Probable

Number). Tabung yang menunjukkan hasil positif dipindahkan ke medium EMBA

dengan cara streak for single colony pada permukaan medium EMBA atau Endo

Agar pada cawan petri. Medium EMBA diinkubasi pada suhu 37C selama 24

4

jam. Apabila dalam sampel terdapat bakteri E. coli, maka akan ditunjukkan

dengan koloni yang berwarna merah kehijauan yang mengkilat.

III. HASIL DAN PEMBAHASAN

3.1 Hasil

(Terlampir).

3.2 Pembahasan

Pada praktikum ini, dilakukan uji kualitas air menggunakan sampel air isi

ulang yang diperoleh dari enam tempat berbeda yaitu, air isi ulang Pedungan, air

isi ulang Tabana, air isi ulang Blahkiuh, air isi ulang Subita, air isi ulang Nusa

Dua dan air isi ulang Kenyeri. Metode yang digunakan adalah metode MPN (Most

Probable Number), yaitu metode perhitungan menggunakan nilai atau angka

hitung terdekat. Metode ini lebih baik dari metode cawan hitung karena lebih

sensitif dan dapat mendeteksi coliform dalam jumlah yang sangat sedikit. Hasil

positif adanya mikroba golongan coliform ditunjukkan dengan adanya gelembung

gas dalam tabung durham. Gas ini timbul sebagai akibat dari kemampuan bakteri

coliform dalam memfermentasikan laktosa dengan menghasilkan asam dan gas

dalam waktu 24-48 jam dan pada suhu 37oC (Pelczar dan Chan, 2005).

Pemeriksaan kualitas air dilakukan dengan 3 tahap, yaitu tahap uji dugaan, uji

penetapan dan uji pelengkap. Uji dugaan, pengambilan sampel dilakukan tiga kali

untuk masing-masing voleme yang berbeda yaitu 10 mL, 1 mL, dan 0,1 mL.

Penggunaan 3 seri tabung reaksi untuk setiap volume masing-masing sampel,

bertujuan agar diperoleh ketelitian yang tinggi dalam menghitung jumlah bakteri

yang terkandung dalam sampel (Fardiaz, 1993). Setelah air sampel dan medium

lactosa broth tercampur, medium diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37oC.

Hasil positif ditandai dengan adanya gelembung gas pada tabung durham. Hasil

dari uji ini masih berupa dugaan bahwa tabung yang menunjukkan adanya

gelembung mengandung mikroorganisme coliform.

Selanjutnya pada uji penetapan, hasil positif pada uji dugaan diinokulasikan

ke dalam medium BGBB (Brilliant Green 2 % Bile Broth). Digunakannya

medium BGBB karena warna medium yang hijau berlian dapat menghambat

5

pertumbuhan bakteri gram positif, dan mempercepat pertumbuhan bakteri gram

negatif (Dwijoseputro, 2003). Dimaksudkan, medium BGBB hanya untuk bakteri

gram negatif seperti E. coli. Hasil pengamatan positif dapat diketahui dengan

melihat adanya gelembung gas pada tabung durham.

Dari keenam sampel, diperoleh hasil sebagai berikut; air isi ulang dari

Pedungan tidak terdapat gelembung gas sama sekali pada tabung durham yang

artinya tidak tradapat mikroorganisme golongan coliform pada air isi ulang

Pedungan. Sampel air isi ulang Tabanan menunjukan hasil positif pada

kesembilan tabung untuk tiga konsentrasi berbeda, tiga positif pada konsentrasi 10

mL, tiga positif pada kosentrasi 1 mL dan tiga positif pada konsentrasi 0,1 mL.

Hasil diatas kemudian dicocokan dengan tabel perhitungan MPN dimana

diperoleh total coliform sebesar 1.100 MPU/100 mL. Sampel air isi ulang

Blahkiuh hanya didapat satu hasil positif pada satu tabung reaksi konsentrai 10

mL sehingga total coliform yang diperoleh sebesar 4 MPU/100 mL. Sampel air isi

ulang Subita diperoleh tiga hasil positif pada konsentrasi 10 mL dan satu positif

pada konsentrasi 1 mL. Sehingga total coliform yang ada dalam sampel air isi

ulang Subita adalah 43 MPU/100 mL. Sampel air isi ulang Nusa Dua, diperoleh

dua hasil positif pada konsentrasi 10 mL dan satu hasil positif pada konsentrasi 1

mL. Sehingga total colifom yang ada dalam sampel air isi ulang Nusa Dua adalah

15 MPU/100 mL. Sampel air isi ulang Kenyeri diperoleh tiga hasil positif pada

konsentrasi 10 mL dan satu hasil positif pada konsentrasi 1 mL. Sehingga total

coliform pada sampel air isi ulang Kenyeri adalah 43 MPU/100 mL. Hasil yang

diperoleh dari uji ini sudah dapat ditetapkan bahwa tabung yang memiliki

gelembung gas positif tercemar bakteri coliform.

Selanjutnya dilakukan uji pelengkap untuk mengetahui kandungan E. coli

pada hasil positif coliform dalam medium BGBB. Tabung yang menunjukkan

hasil positif pada medium BGBB dipindahkan ke medium EMBA dengan cara

streak for single colony pada permukaan medium EMBA atau Endo Agar pada

cawan petri. Kemudian medium EMBA diinkubasi pada suhu 37C selama 24

jam. Hasil yang diperoleh adalah negatif untuk sampel air isi ulang Pedungan, air

isi ulang Tabanan, air isi ulang Blahkiuh, air isi ulang Nusa Dua dan air isi ulang

6

Kenyeri. Tidak ditemukan adanya koloni berwarna merah kehijauan yang

mengkilat pada kelima sampel diatas. Hasil positif diperoleh dari sampel air isi

ulang Subita. Diperoleh koloni dengan warna merah kehijauan yang mengkilat

pada hasil biakan konsentrasi 1 mL, yang menunjukan bahwa total E. coli yang

ada pada sampel air isi ulang Subita dalah 3 MPN/100 mL.

Berdasarkan Permenkes No.416/Menkes/Per/IX/1990 tentang syarat-syarat

dan pengawasan kualitas air menyebutkan bahwa, syarat-syarat mikrobiologis

untuk air minum adalah jumlah MPN coliform/100 cc sampel air adalah 0 (air

minum). Sedangkan untuk air bersih adalah 10 (air perpipaan) dan 50 (air bukan

perpipaan) (Widayanti dan Ristiati, 2004). Pada praktikum kali ini, sampel air isi

ulang yang sesuai dan memenuhi syarat adalah air isi ulang Pedungan, air isi

ulang Tabanan, air isi ulang Blahkiuh, air isi ulang Nusa Dua dan air isi ulang

Kenyeri dengan total coliform 0 MPN/100 mL. Sementara air isi ulang Subita

tidak memenuhi persyaratan air minum dikarenakan mengandung bakteri E. coli

sebesar 3 MPN/100 mL.

IV. KESIMPULAN

4.1 Metode yang digunakan adalah metode perhitungan MPN atau Most

Probable Number. Dimana terdiri dari tiga tahap uji yaitu Uji Dugaan, Uji

Penetapan dan Uji Pelengkap.

4.2 Bakteri atau mikroorganisme yang dapat digunakan sebagai indikator

cemaran di air adalah coliform khususnya E. coli. Dikarenakan E. coli

merupakan mikroorganisme resisten yang dapat bertahan di lingkungan

ekstrim. Jika E. coli ada dalam makan atau minuman, dapat diindikasikan

mikroorganisme lain jug ada dalam makanan atau minuman tersebut.

4.3 Jumlah E. coli yang ada dalam sampel diperoleh hanya pada sampel air isi

ulang Subita yaitu 3 MPN/100 mL.

7

DAFTAR PUSTAKA

Campbell, N. A., J.B. Reece, L.G. Mitchell. 2002. Biologi Jilid 2 edisi Kelima.

Erlangga. Jakarta.

Dwidjosoeputro,D. 2005. Dasar- Dasar Mikrobiologi. Djambatan. Malang

Fardiaz, Srikandi. 1992. Mikrobiologi Pangan 1. PT. Gramedia Pustaka Utama.

Jakarta.

Madigan, MT., J. M. Martinka, and J. Parker. 1997. Biology of Microorganism.

Eight Edition. Prentice Hall International, Inc. New Jersey.

Pelczar, M. J., dan E. C. S. Chan. 2007. Dasar Dasar Mikrobiologi. Universitas

Indonesia. Jakarta.

Widiyanti, Manik dan Ristiati. 2004. Analisis Kualitatif Bakteri Kaliform pada

Depo Air Minum Isi Ulang di Kota Singaraja Bali. Jurnal Ekologi Kesehatan

Vol. 3 No 1.

8

LAMPIRAN

Gambar 1. Hasi Positif adanya Coliform pada medium BGBB.