PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK DAUN SIRIH MERAH (Piper crocatum) DOSIS BERTINGKAT PERORAL SELAMA 14

HARI TERHADAP GAMBARAN LIMFOSIT DARAH TEPI

Studi pada mencit Balb/c yang diinfeksi Salmonella Typhimurium

LAPORAN HASIL KARYA TULIS ILMIAH

Diajukan untuk memenuhi persyaratan guna mencapai gelar sarjana

Program Strata-1 Kedokteran Umum

LEVINA AMELINE MOELYONO

22010113130196

PROGRAM PENDIDIKAN SARJANA KEDOKTERAN FAKULTAS KEDOKTERAN

UNIVERSITAS DIPONEGORO 2016

 

   

ii  

Mengetahui a.n. Dekan , Sekretaris Ketua Program Studi Pendidikan Dokter

dr. Farah Hendara Ningrum, Sp.Rad (K) NIP. 197806272009122001

 

LEMBAR PENGESAHAN LAPORAN HASIL AKHIR KTI

PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK DAUN SIRIH MERAH (Piper crocatum) DOSIS BERTINGKAT PERORAL SELAMA 14

HARI TERHADAP GAMBARAN LIMFOSIT DARAH TEPI Studi pada mencit Balb/c yang diinfeksi Salmonella Typhimurium

Disusun oleh

LEVINA AMELINE MOELYONO

22010113130196

Telah disetujui

Semarang, Agustus 2016

Pembimbing 1 Pembimbing 2

dr. Akhmad Ismail, M.Si.Med. dr. Neni Susilaningsih, M.Si.

NIP. 197108281997021001 NIP. 196301281989022001

Ketua Penguji Penguji

dr. Ratna Damma Purnawati, M.Kes. dr. Ika Pawitra. M, M.Kes., Sp. PA NIP. 196311141990032001 NIP. 196206171990012001

 

   

iii  

PERNYATAAN KEASLIAN

Yang bertanda tangan di bawah ini,

Nama mahasiswa : Levina Ameline Moelyono NIM : 22010113130196

Program Studi : Program Pendidikan Sarjana Program Studi Pendidikan Dokter Fakultas Kedokteran Uninversitas Diponegoro Judul KTI : Pengaruh Pemberian Ekstrak Daun Sirih Merah (Piper crocatum) Dosis Bertingkat Peroral Selama 14 Hari Terhadap Gambaran Limfosit Darah Tepi: Studi pada Mencit Balb/c yang Diinfeksi Salmonella Typhimurium.

Dengan ini menyatakan bahwa : 1. KTI ini dituis sendiri tulisan asli saya sendiri tanpa bantuan orang lain

selain pembimbing dan narasumber yang diketahui oleh pembimbing. 2. KTI ini sebagian atau seluruhnya belum pernah dipublikasi dalam bentuk

artikel ataupun tugas ilmiah lain di Universitas Diponegoro maupun di perguruan tinggi lain.

3. Dalam KTI ini tidak terdapat karya atau pendapat yang telah ditulis orang lain kecuali secara tertulis dicantumkan sebagai rujukan dalam naskah dan tercantum pada daftar kepustakaan.

 

                             

Semarang, Yang membuat pernyataan,

Levina Ameline Moelyono NIM. 22010113130196

 

   

iv  

KATA PENGANTAR

Puji syukur penulis panjatkan kepada Tuhan Yang Maha Esa, karena atas

berkat dan rahmat-Nya penulis dapat menyelesaikan tugas Karya Tulis Ilmiah

dengan judul “Pengaruh Pemberian Ekstrak Daun Sirih Merah (Piper crocatum)

Dosis Bertingkat Peroral Selama 14 Hari Terhadap Gambaran Limfosit Darah Tepi:

Studi pada Mencit Balb/c yang Diinfeksi Salmonella Typhimurium”. Karya Tulis

Ilmiah ini bertujuan untuk memenuhi sebagian syarat guna menperoleh gelar

Sarjana Kedokteran Universitas Dipongeoro.

Penulis menyadari bahwa Karya Tulis Ilmiah ini masih jauh dari kesempurnaan,

dan tidak akan mungkin dapat terselesaikan dengan baik tanpa bantuan serta

bimbingan dari berbagai pihak. Oleh karena itu penulis mengharapkan kritik dan

saran dari semua pihak demi kesempurnaan dari Karya Tulis Ilmiah ini, dan dengan

penuh hormat dan penghargaan yang setinggi-tingginya penulis mengucapkan

terima kasih yang sebesar-besarnya kepada:

1. Rektor Universitas Diponegoro Semarang yang telah memberi kesempatan

bagi penulis untuk menimba ilmu di Universitas Diponegoro tercinta ini.

2. Dekan Fakultas Kedokteran Universitas Diponegoro yang telah

menyediakan sarana dan prasarana serta telah memberikan kesempatan pada

penulis untuk menimba ilmu dengan baik hingga akhirnya bisa

menyelesaikan Karya Tulis Ilmiah ini dengan baik dan lancar.

3. dr. Akhmad Ismail, M.Si, Med. dan dr. Neni Susilaningsih, M.Si. selaku

dosen pembimbing yang telah rela menyediakan waktu, tenaga, dan pikiran

dalam membantu dan membimbing penulis dalam menyusun proposal

hingga menyelesaikan laporan hasil akhir Karya Tulis Ilmiah.

4. dr. Ratna Damma Purnawati, M.Kes. selaku ketua penguji dan dr. Ika

Prawitra. M, M.Kes., Sp. PA selaku penguji yang telah memberikan saran

dan arahan perbaikan dalam penulisan Karya Tulis Ilmiah ini.

 

   

v  

5. Bapak Arif selaku staf bagian histopatologi yang membantu dalam

perawatan, serta terminasi mencit.

6. Ibu Wiwik selaku laboran laboratorium CEBIOR yang membantu dalam

penelitian-penelitian awal penulis.

7. Orangtua, keluarga, serta teman-teman penulis yang selalu mendukung,

menyemangati, dan mendoakan penulis agar selalu diberi kemudahan dan

kelancaran dalan menyelsaikan Karya Tulis Ilmiah.

8. Serta pihak lain yang tidak dapat penulis sebutkan satu persatu atas

bantuannya baik secara langsung maupun tidak langsung sehingga Karya

Tulis Ilmiah ini dapat terselesaikan dengan baik.

Akhir kata, semoga Tuhan Yang Maha Esa membalas segala kebaikan

semua pihak yang telah membantu dengan sepenuh hati. Semoga Karya Tulis

Ilmiah ini dapat bermanfaat bagi pembaca sekalian.

Semarang,

Levina Ameline Moelyono

 

   

vi  

DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL ................................................................................................. i

LEMBAR PENGESAHAN PROPOSAL KTI .......................................................... ii

PERNYATAAN KEASLIAN ................................................................................... iii

KATA PENGANTAR ............................................................................................... iv

DAFTAR ISI ............................................................................................................. vi

DAFTAR TABEL ..................................................................................................... ix

DAFTAR GAMBAR ................................................................................................. x

DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................................. xi

DAFTAR SINGKATAN ........................................................................................... xii

ABSTRAK ................................................................................................................. xiii

ABSTRACT ................................................................................................................ xiv

BAB I PENDAHULUAN .......................................................................................... 1

1.1 Latar belakang ............................................................................................... 1

1.2 Rumusan masalah penelitian ......................................................................... 3

1.3 Tujuan penelitian ........................................................................................... 3

1.3.1 Tujuan umum ................................................................................................. 3

1.3.2 Tujuan khusus ................................................................................................ 3

1.4 Manfaat penelitian ........................................................................................ 4

1.4.1 Bidang ilmu pengetahuan ............................................................................. 4

1.4.2 Bidang pelayanan masyarakat ...................................................................... 4

1.4.3 Bidang penelitian .......................................................................................... 4

1.5 Orisinalitas penelitian ................................................................................... 5

BAB II TINJAUAN PUSTAKA ............................................................................... 8

2.1 Limfosit ......................................................................................................... 8

2.1.1 Morfologi limfosit ........................................................................................ 8

2.1.2 Regulasi limfosit .......................................................................................... 10

2.1.2.1 Limfosit B .................................................................................................... 11

2.1.2.2 Limfosit T .................................................................................................... 12

 

   

vii  

2.1.3 Imunitas terhadap bakteri intraseluler .......................................................... 15

2.1.4 Proliferasi limfosit ....................................................................................... 16

2.1.5 Sirkulasi limfosit .......................................................................................... 17

2.1.6 Limfosit darah tepi ....................................................................................... 18

2.2 Sirih merah ................................................................................................... 19

2.2.1 Flavonoid ..................................................................................................... 20

2.2.1.1 Efek flavonoid terhadap regulasi limfosit T dan B ...................................... 22

2.3 Salmonella Typhimurium ............................................................................ 23

2.3.1 Respon imun tubuh terhadap Salmonella Typhimurium ............................. 25

2.4 Kerangka teori .............................................................................................. 27

2.5 Kerangka konsep .......................................................................................... 27

2.6 Hipotesis ...................................................................................................... 28

2.6.1 Hipotesis umum ........................................................................................... 28

2.6.2 Hipotesis khusus .......................................................................................... 28

BAB III METODOLOGI PENELITIAN .................................................................. 29

3.1 Ruang lingkup penelitian ............................................................................. 29

3.2 Tempat dan waktu penlitian ......................................................................... 29

3.3 Jenis dan rancangan penelitian .................................................................... 29

3.4 Populasi dan sampel ................................................................................... 31

3.4.1 Populasi ....................................................................................................... 31

3.4.1.1 Populasi target ............................................................................................. 31

3.4.1.2 Populasi terjangkau ...................................................................................... 31

3.4.2 Sampel ......................................................................................................... 32

3.4.2.1 Kriteria inklusi ............................................................................................. 32

3.4.2.2 Kriteria eksklusi ........................................................................................... 32

3.4.3 Cara sampling .............................................................................................. 32

3.4.4 Besar sampel ................................................................................................ 32

3.5 Variabel penelitian ....................................................................................... 33

3.5.1 Variabel bebas .............................................................................................. 33

3.5.2 Variabel tergantung ...................................................................................... 33

3.6. Definisi operasional ..................................................................................... 33

 

   

viii  

3.7 Cara pengumpulan data ................................................................................. 34

3.7.1 Bahan ............................................................................................................. 34

3.7.2 Alat .............................................................................................................. 34

3.7.3 Jenis data ........................................................................................................ 35

3.7.4 Cara kerja ....................................................................................................... 35

3.8 Alur penelitian ............................................................................................... 37

3.9 Analisis data ................................................................................................... 38

3.10 Etika penelitian .............................................................................................. 38

BAB IV HASIL PENELITIAN ................................................................................. 39

4.1 Analisis sampel .............................................................................................. 39

4.2 Analisis deskriptif .......................................................................................... 39

4.2 Analisis inferensial ........................................................................................ 41

BAB V PEMBAHASAN ........................................................................................... 43

BAB VI SIMPULAN DAN SARAN ........................................................................ 48

6.1 Simpulan ........................................................................................................ 48

6.2 Saran .............................................................................................................. 48

DAFTAR PUSTAKA ................................................................................................ 50

LAMPIRAN .............................................................................................................. 55

 

   

ix  

DAFTAR TABEL  Tabel 1. Orisinalitas penelitian ............................................................................. 5

Tabel 2. Definisi operasional ................................................................................ 33

Tabel 3. Hasil analisis deskriptif presentase jenis limfosit darah tepi ................... 40

Tabel 4. Nilai p pada uji Post Hoc Tukey .............................................................. 42

 

   

x  

DAFTAR GAMBAR

Gambar 1. Limfosit besar ...................................................................................... ..9

Gambar 2. Limfosit kecil ...................................................................................... 10

Gambar 3 Aktivasi sel B intraseluler .................................................................... 12

Gambar 4. Jalur aktivasi sel T CD8+ ..................................................................... 14

Gambar 5. Sirkulasi limfosit ................................................................................. 18

Gambar 6. Daun sirih merah ................................................................................. 20

Gambar 7. Struktur dasar flavonoid ...................................................................... 22

Gambar 8. Kerangka teori ..................................................................................... 27

Gambar 9. Kerangka konsep ................................................................................. 27

Gambar 10. Skema penelitian ............................................................................... 30

Gambar 11. Alur penelitian ................................................................................... 37

Gambar 12. Grafik rerata presentase limfosit darah tepi ...................................... 40

 

 

   

xi  

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Cara pembuatan ekstrak daun sirih merah ……………………......55

Lampiran 2. Perhitungan dosis ekstrak daun sirih merah ...…………………....57

Lampiran 3. Prosedur pembuatan preparat darah hapus .. ..………………........58

Lampiran 4. Ethical clearance……………………………………………….....59

Lampiran 5. Gambaran mikroskopis limfosit darah tepi…………………..........60

Lampiran 6. Hasil penghitungan presentase limfosit darah tepi…………….......62

Lampiran 7. Data SPSS………………………………………………….………64

Lampiran 8. Dokumentasi penelitian…………………………………………….71

Lampiran 9. Biodata penulis…………………………………………………......74

 

   

xii  

DAFTAR SINGKATAN

ALV : Afferent Lymphatic Vessel

APC : Antigen presenting cells

ATP : Adenosine tri phospahte

BCR : B cells receptor

CD : Cluster of differentiation

CTLs : Cytotoxic T lymphocytes

DAG : Diacyl glycerol

DTH : Delayed type hipersensitivity

ELV : Efferent Lymphatic Vessel

IFN : Interferons

Ig : Immunoglobulin

ILC : Innate lymphoid cells

IP3 : Inositol triphospate

ITAM : Immunoreceptor tyrosine activation motifs

LGL : Large granuler lymphocytes

LPC : Lymphoid progenitor cells

MHC : Major histocompatibility complex

NK :Natural killer

NKT : Natural killer T cells

NO : Nitric oxide

PAIs : Pathogenicity islands

PIP2 : Phosphatidylinositol 4,5 biphosphate

PRR :Pattern recognition receptor

ROS : Reactive oxygen species

TCR : T cells receptor

ZAP-70 : Zeta chain asscociated protein kinase

 

   

xiii  

ABSTRAK

Latar Belakang: Flavonoid merupakan senyawa yang terkandung dalam ekstrak daun sirih merah, yang memiliki sifat antikanker, antiseptik, antiinflamasi, dan imunomodulator. Sebagai imunomodulator, flavonoid dapat meningkatkan respon TH1 yang merupakan komponen sistem imun adaptif yang dimediasi limfosit T CD4+, yang berperan pada imunitas terhadap bakteri intraseluler, seperti Salmonella Typhimurium.

Tujuan: Mengetahui pengaruh pemberian ekstrak daun sirih merah terhadap gambaran limfosit darah tepi mencit Balb/c yang diinfeksi Salmonella Typhimurium.

Metode: Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental dengan post test only control group design. Sampel sebanyak 25 ekor mencit Balb/c yang memenuhi kriteria inklusi dan eksklusi, dilakukan randomisasi dan dibagi menjadi 5 kelompok dan kemudian dilakukan adaptasi selama 7 hari. Kelompok K1 diberi ekstrak daun sirih merah dengan dosis 10 mg/hari/mencit selama 14 hari. Kelompok K2 diinfeksi dengan Salmonella Typhimurium sebanyak 105 CFU intraperitoneal pada hari ke-10. Kelompok P1, P2, dan P3 diberi ekstrak daun sirih merah per oral dengan dosis masing-masing 10, 30, dan 100 mg/hari/mencit selama 14 hari dan diinfeksi dengan 105 CFU Salmonella Typhimurium intraperitoneal pada hari ke-10. Pada hari ke-22 dilakukan pengambilan sampel. Hasil : Rerata presentase limfosit tertinggi didapatkan pada kelompok P3 (mean=59.20±6.535). Pada uji Post Hoc Tukey didapatkan adanya perbedaan signifikan gambaran limfosit darah tepi antar kelompok P1 dan P3 (p=0.048).

Simpulan: Terdapat peningkatan presentase limfosit darah tepi yang signifikan pada kelompok P3 dibanding kelompok P1.

Kata Kunci: Piper crocatum, limfosit darah tepi, Salmonella Typhimurium

 

   

xiv  

ABSTRACT

Background: Flavonoid is a compound contained in red betel leaves extract, which has anticancer, antiseptic, antiinflammation, and immunomodulatory effects. As an immunomodulator, flavonoid increases TH1 response as a part of adaptive immunity mediated by CD4+ T lymphocyte, which is important in immunity against intracelullar bacterias, such as Salmonella Typhimurium.

Aim: To determine the effect of red betel leaves extract on peripheral lymphocyte count in Balb/c mice which were infected by Salmonella Typhimurium.

Methods: This was an experimental laboratoric research with a post test only control group design. There were 25 Balb/c mice, which had met the inclusion and exclusion criteria, randomized into 5 groups and adapted for 7 days. The K1 group was given 10 mgs/mouse/day red betel leaves extract for 14 days. The K2 group was infected by 105 CFU Salmonella Typhimurium intraperitoneally on the 10th day. Experimental group 1, 2, and 3 ( P1, P2, and P3) were given 10, 30, and 100 mgs/day/mouse red betel leaves extract for 14 days and were infected by 105 CFU Salmonella Typhimurium intraperitoneally on the 10th day. On the 22nd day samples were taken. Results : Highest mean of lymphocyte count is found in experimental group 3 (mean=59.20±6.535). Post Hoc Tukey Test shows significant difference between experimental group 1 and experimental group 3 (p=0.048).

Conclusion: There is significant higher lymphocyte count in experimental group 3 compared to experimental group 1.

Keywords : Piper crocatum, peripheral lymphocyte count, Salmonella

Typhimurium