RIZKI TEGUH DWI SETIYAWANJ500090022

FAKULTAS KEDOKTERANUNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA

2013

PENGARUH PEMBERIAN EKSTRAK BUAH MENGKUDU (Morinda citrifolia L) TERHADAP PENINGKATAN KADAR ALT (alanin amino

transaminase) PADA TIKUS PUTIH (Rattus norvegicus) GALUR WISTAR YANG DIINDUKSI DENGAN ASETAMINOFEN

PENDAHULUAN

BAB I

• Bangsa Indonesia telah lama mengenal dan menggunakan tanaman berkhasiat sebagai salah satu upaya menanggulangi masalah kesehatan

• Obat-obatan herbal pada umumnya lebih aman daripada obat modern. Hal ini disebabkan oleh sedikitnya efek samping yang ditimbulkan obat-obatan herbal daripada obat modern (Lusia, 2006).

LATAR BELAKANG

Allah telah berfirman dalam surat an-Nahl ayat 11:

“Dia menumbuhkan bagi kamu dengan air hujan itu tanam-tanaman; zaitun, korma, anggur dan segala macam buah-buahan. Sesungguhnya pada yang demikian itu benar-benar ada tanda (kekuasaan Allah) bagi kaum yang memikirkan.”

Morinda citrifolia atau yang lebih dikenal sebagai mengkudu memiliki sejarah penggunaan sebagai obat herbal. Buah mengkudu mengandung lebih dari 150 nutrisi (Wang et al., 2007).

Buah ini memiliki manfaat antara lain mengobati penyakit degeneratif, liver, hipertensi, kanker, dll (Cristina, 2005).

Hati dianggap sebagai salah satu organ paling vital yang berfungsi sebagai pusat metabolisme (Phaneendra, 2011).

Penyakit hati telah menjadi salah satu penyebab utama morbiditas dan mortallitas pada manusia dan hewan di seluruh dunia (Sharma,

2009).

ASETAMINOFEN

Enzim Transaminase

Rumusan Masalah

• Apakah pemberian buah mengkudu (Morinda citrifolia) berpengaruh terhadap kadar ALT hepar tikus yang diinduksi dengan asetaminofen.

Tujuan

• Untuk mengetahui apakah pemberian buah mengkudu (Morinda citrifolia) berpengaruh terhadap kadar ALT hepar tikus yang diinduksi dengan asetaminofen.

Manfaat TeoritisPenelitian ini diharapkan dapat digunakan sebagai tambahan pengetahuan dan referensi tentang manfaat buah mengkudu.

Manfaat PraktisPenelitian ini dapat sebagai tambahan alternatif pengobatan atau obat herbal dalam melindungi hati dan mengatasi kerusakan pada hati yang disertai komplikasi.

Manfaat

LANDASAN TEORI

BAB II

Taksonomi• Kingdom: Plantae• Filum : Angiospermae• Sub filum : Dycotiledones• Divisi : Lignosae• Famili : Rubiaceae• Genus : Morinda• Spesies : Citrifolia (Santosa, 2005)

Nama Lain› Sinonim : Morinda citrifolia› Nama daerah : pace (Jawa Tengah), bentis (Jawa Timur), cangkudu (Jawa

Barat), bengkudu (Sumatra), wangkudu (Kalimantan). (Suprapti, 2005)

Kandungan KimiaBuah mengkudu secara umum mengandung polifenol, saponin, flavonoid, terpenoid, dan antrakinon (Wardiny, 2006).

MENGKUDU

Uraian TumbuhanAkar: struktur perakaran tunggang

Batang: berbentuk bulat, panjang, berkulit kasarDaun: hijau tua, berbentuk oval

Buah: bulat panjang, berbenjol-benjol, memiliki mata

Kegunaan EmpirisAnalgesik, antiarthiritis, antirheumatik, antitumor, diuretik, antiemetik, fungisida, hipotensif, sedatif,

tonik (Duke, 2002)

Flavonoid Antioksidan kuat

Radikal bebas akan diikat oleh

flavonoid

Mencegah kerusakan

fungsional sel

Keadaan patologis dapat

dihindari

MEKANISME HEPATOPROTEKTOR KANDUNGAN BUAH MENGKUDU

Struktur mikroskopis

• Lobus dan lobulus• Sel hati• Sel kupffer

Fungsi • ORGAN METABOLIK TERBESAR

HATI Hati adalah kelenjar dalam tubuh, berat rata-rata sekitar 1500 gr

atau 2% berat badan orang dewasa normal (Pierce, 2005).

› Hati merupakan organ lintas pertama dari obat yang diabsorbsi dari mukosa usus halus sebelum mencapai bagian tubuh (Rosalina, 2010).

› Penyakit hati adalah salah satu ancaman utama terhadap kesehatan masyarakat dan merupakan masalah di seluruh dunia (Adewusi and Afolayan, 2010).

ASETAMINOFEN• Merupakan metabolit

aktif dari phenacetin• Memiliki efek analgesik

(anti nyeri) dan antipiretik (penurun panas)

• Eritema• Urtikaria• Nekrosis hati

• Dosis toksik 10-15 gram, 20-25 gram bisa menyebabkan kematian.

• Indikasi klinis muncul 2-4 hari setelah meminum dosis toksik (Goodman and Gillman, 2007)

• Konsentrasi dalam darah mencapai puncak biasanya tercapai dalam 30-60 menit

• Dimetabolisme oleh enzim mikrosomal hati (Katzung, 2002)

Asetaminofen Efek Toksik

HepatotoksisitasFarmakokinetik

dan Metabolisme

Enzim Transaminase

ALT(Alanin Amino Transaminase)

5-35 SI/I

Lebih spesifik untuk kerusakan hati

AST(Aspartat Amino Transaminase)

10-41 SI/I

PEMERIKSAAN BIOKIMIA HATI

KERANGKA KONSEP› Asetaminofen

› Pengaktifan enzim sitokrom P450

› Bentuk toksik

› N-acetyl-p-benzoquinoneimine

› (NAPQI)

› Membentuk makromolekul dengan sel hati

› Nekrosis sel hati

› Glukoronidasi › Senyawa non toksik

› Sintesis Prostaglandin

› Radikal bebas

› N-acetylbenzo-semiquinoneimine

› Buah mengkudu

› FLAVONOID

› Meningkatkan glutation

› Menghambat pembentukan radikal bebas

› = membentuk

› = menghambat

HIPOTESIS

Pemberian buah mengkudu dapat menghambat peningkatan kadar enzim ALT

pada tikus yang diinduksi dengan asetaminofen

METODE PENELITIAN

BAB III

Jenis Penelitian •Eksperimental laboratorik dengan rancangan penelitian pre and post test control group design

Tempat Penelitian •Laboratorium Farmakologi Fakultas Kedokteran UMS

Subyek Penelitian •Buah mengkudu (Morinda citrifolia)

•Tikus jantan galur Wistar dengan berat badan 200-250 g dan berumur 3-4 bulanHewan Uji•Purposive samplingTeknik Sampling

•Perhitungan menggunakan rumus FedererBesar Sampel

Rumus Federer

(K-1)(N-1) > 15(5-1)(n-1) > 15 4n > 15+4 n > 4,75 n = 5

K = jumlah kelompokn = jumlah sampel dalam tiap kelompok

Kriteria Inklusi

- Tikus putih jantan galur wistar- Sehat dan mempunyai aktifitas normal

- Umur kurang lebih 2-3 bulan- Berat badan antara 150-200 gram

Kriteria Restriksi

Variabel bebas Ekstrak buah mengkudu rasio

Variabel terikat Kadar enzim ALT rasio

Variabel luarDapat dikendalikan:

Jenis kelamin, umur, berat badan, variasi genetik

Tidak dapat dikendalikan:Kondisi psikologis, kondisi awal tikus

Identifikasi Variabel

Variabel bebas: ekstrak buah mengkuduEkstrak buah mengkudu adalah buah mengkudu yang telah

dikeringkan kemudian diekstraksi menggunakan metode maserasi dengan cairan penyari adalah etil asetat

Variabel terikat: kadar enzim ALTParameter pemeriksaan aktifitas enzim ALT adalah kadar

enzim ALT dalam darah tikus

Definisi Operasional

Alat•Kandang tikus 5 buah•Timbangan•Gelas ukur dan pengaduk•Sonde lambung•Tabung mikrokapiler•Tabung reaksi dan rak kecil•Alat sentrifugasi

Bahan•Larutan acetaminophen•Ekstrak buah Mengkudu•Makanan hewan percobaan (pelet dan air PAM) •Aquades

Skema PenelitianSampel 30 ekor tikus dibagi menjadi 5

kelompok

Pengukuran ALT pertama

Kontrol I Kontrol II Perlakuan I Perlakuan II Perlakuan III

Ekstrak buah mengkudu dosis 9/ 200 gram BB (hari

1-10)

Ekstrak buah mengkudu dosis 18/ 200 gram BB

(hari 1-10)

Ekstrak buah mengkudu dosis 36/ 200 gram BB

(hari 1-10)Ekstrak buah

mengkudu dosis 18 mg/200

gBB(hari 1-12) Pemberian asetaminofen

dosis toksik 180 mg/200g

Asetaminofen dosis toksik

180mg/200g per oral (hari 11-12)

Asetaminofen dosis toksik

180mg/200g per oral (hari 11-12)

Asetaminofen dosis toksik

180mg/200g per oral (hari 11-12)

Pengukuran ALT kedua

Data hasil pengukuran kadar ALT serum darah tikus kemudian akan dianalisa menggunakan uji statistik. Uji statistik yang digunakan yaitu:

› Uji statistik Shapiro-Wilk untuk menguji distribusi data yang didapat.

› Uji statistik Test of Homogenecity of Variance untuk menguji homogenitas dari varian data.

› Uji statistik Kruskal Wallies untuk mengetahui apakah ada perbedaan dari data.

› Uji statistik Mann-Whitney untuk mengetahui kelompok data yang memiliki perbedaan.

Analisis Data

HASIL DAN PEMBAHASA

N

BAB IV

Determinasi

Kunci determinasi tanaman mengkudu adalah sebagai berikut:

1b, 2b, 3b, 4b, 5b, 6b, 7b, 8b, 9b, 10b, 11b, 12b, 13b, 14b, 16a, 239b, 243b, 244b, 248b, 249b, 250a, 251a, 252b, …… Familia: Rubiaceae

1b, 3b, 4b, 5a, ………… Genus: Morinda

Species: Morinda citrifolia L.

(Tjitrosoepomo, 2007; Steenis, 2005)

Hasil Penelitian

Berat kering

bahan = 500 gr

Hasil ekstraksi = 25 gr

Jadi 1 gr buah

mengkudu kering = 0,05

gr ekstrak kental.

Rendemen

Uji Orientasi

Hewan ujikadar ALT

Pretest Posttest

Kontrol 2 (asetaminofen 1440 mg/200 g BB) 45 82

Ekstrak buah mengkudu dosis 9 mg/ 200gBB 25 23

Ekstrak buah mengkudu dosis 18 mg/ 200gBB 12 9

Hasil uji hepatoprotektor

Kelompok

Kadar ALT

Awal (sebelum perlakuan) Akhir (sesudah perlakuan)

Kelompok Kontrol I (Ekstrak dosis 18 mg/200gr tikus)

34 42

22 55

31 10

45 23

Kelompok kontrol II (Parasetamol)

40 54

34 57

39 54

33 59

37 56

Kelompok Perlakuan I (Dosis 9 mg/200gr Tikus)

35 68

37 60

14 53

24 57

23 62

Kelompok Perlakuan II (Dosis 18 mg/200gr Tikus)

31 51

26 62

23 66

16 64

Kelompok Perlakuan III (Dosis 36 mg/200gr Tikus)

17 14

26 17

22 42

Uji Distribusi Data

Hasil analisis Shapiro-Wilk didapatkan nilai p = 0,001 ,karena nilai p < 0,05 maka dapat

disimpulkan distribusi data TIDAK NORMAL

Test of Homogenity of Variance

Hasi analisis Test of Homogenity of Variance didapatkan nilai p = 0,001, Karena nilai p < 0,05

maka dapat disimpulkan variansi data TIDAK NORMAL

Uji Kruskal-Wallis

Hasil analisis uji Kruskal-Wallis didapatkan nilai p=0,014, karena nilai p<0,05 maka dapat disimpulkan minimal terdapat 2 kelompok yang memiliki perbedaan bermakna dari kadar ALT

Uji Mann-WhitneyKelompok P Keterangan

K1 – K2 0.049 Berbeda signifikan

K1 – P1 0.027 Berbeda signifikan

K1 – P2 0.047 Berbeda signifikan

K1 – P3 0.593 Tidak berbeda

K2 – P1 0.207 Tidak berbeda

K2 – P2 0.219 Tidak berbeda

K2 – P3 0.024 Berbeda signifikan

P1 – P2 0.712 Tidak berbeda

P1 – P3 0.025 Berbeda signifikan

P2 – P3 0.034 Berbeda signifikan

Pengambilan keputusan pada uji Mann-Whitney berdasarkan nilai probabilitas :

Jika nilai p<0,05 maka terdapat perbedaan bermaknaJika nilai p>0,05 maka tidak dapat perbedaan yang bermakna

Kontrol I(dosis ekstrak

18mg/200gBB)

Kontrol II(asetaminofen dosis 1440 mg/200gBB)

Perlakuan I(dosis ekstrak 9

mg/200gBB)

Perlakuan II(dosis ekstrak

18mg/200gBB)

Perlakuan III(dosis ekstrak

36mg/200gBB)

Pembahasan

Pengukuran kadar ALT darah tikus dilakukan pada hari 1 (pretest) dan 12 (postest) Uji statistik

Kontrol 1

Kontrol 2

Perlakuan 1

Perlakuan 2

Perlakuan 3

Tidak memiliki efek hepatotoksis pada hati K1 : K2 (P = 0,049)

Sebagai pembanding dengan kelompok lain

Tidak dapat menghambat kenaikan enzim ALT, dan terdapat perbedaan bermakna. K2:P1 (P = 0,207)

Tidak dapat menghambat kenaikan enzim ALT, dan terdapat perbedaan bermakna. K2:P2 (P = 0,219)

Dapat menghambat kenaikan enzim ALT, dan terdapat perbedaan bermakna. K2:P3 (P = 0,024)

Kontrol IPerlakuan 3 Kontrol 2

Pada penelitian ini hasilnya mendukung dari penelitian sebelumnya dilakukan oleh Masruroh, (2009) karena pada penelitian ini ekstrak buah mengkudu pada kontrol 1 dan

perlakuan 3 secara efektif dapat menurunkan kadar ALT tikus putih .

Perlakuan1 dan 2Tidak memiliki efek

hepatoprotektif

Penyebab Laboratorium yang mempengaruhi

1. Waktu pengambilan sampel2. Spesimen penyimpanan3. Hemolisis

(Dufour, 2000)

Kelemahan Penelitian

1. Uji orientasi yang kurang baik2. Kurangnya variasi dosis3. Belum diketahui senyawa aktif dalam buah mengkudu yang berperan

sebagai hepatoprotektif4. Kesalahan teknis penggunaan sonde

Tempat tikus dan suhu ruangan yang sering berubah

Pengambilan, pengiriman, dan pengukuran sampel yang kurang tepat waktu

KESIMPULAN DAN SARAN

BAB V

KESIMPULAN

a) Pemberian ekstrak buah mengkudu (Morinda citrifolia L) memberikan

pengaruh terhadap penurunan kadar ALT (Alanin Aminotransferase) pada

hati tikus putih yang diinduksi asetaminofen.

b) Dosis yang paling efektif menurunkan kadar ALT adalah dosis 36

mg/200gBB.

SARAN

a) Perlu dilakukan penelitian lebih lanjut tentang efek hepatoprotektif ekstrak buah mengkudu (Morinda citrifolia L) dengan lebih banyak variasi dosis agar dapat diketahui dosis yang paling efektif.

b) Penelitian selanjutnya sebaiknya menggunakan waktu perlakuan yang lebih lama untuk menilai tingkat protektif hati terhadap obat yang menyebabkan hepatotoksik.

c) Identifikasi senyawa aktif yang terkandung dalam buah mengkudu (Morinda citrifolia L) sangat diperlukan untuk mengetahui senyawa mana yang berefek dalam penurunan kadar ALT.

TERIMA KASIH