laporan sementara bioproses
DESCRIPTION
mikrobiologiTRANSCRIPT
-
7/21/2019 LAPORAN SEMENTARA bioproses
1/17
LAPORAN SEMENTARA/ TETAP
PRAKTIKUM TEKNOLOGI BIOPROSES
IDENTITAS PRAKTIKAN
Nama : Aprilia Sulistianingsih
NIM : 03031281320020
Shift/ Kelompok : Jumat Siang/ 2
I. JUDUL PERCOBAAN : !em"uatan Me#ium
II. TUJUAN PERCOBAAN :
1$
2$
3$
III. DASAR TEORI
Mikroorganisme seperti organisme %ang lain memerlukan nutrisi untuk
kelangsungan hi#upn%a$ &leh karena itu' #iperlukan me#ia ()amak' me#ium*
untuk kulti+asi mikroorganisme$ Me#ium a#alah suatu "ahan %ang ter#iri #ari
,ampuran nutrisi untuk menum"uhkan mikroorganisme$ Selain untuk
menum"uhkan mikroorganisme' me#ium #apat #igunakan untuk isolasi'
pengu)ian sifat-sifat fisiologi' #an perhitungan )umlah mikroorganisme$
Me#ium pertum"uhan (#isingkat me#ium* a#alah tempat untuk
menum"uhkan mikro"a$ Mikro"a memerlukan nutrisi untuk memenuhi ke"utuhan
energi #an untuk "ahan pem"angun sel' untuk sintesa protoplasma #an "agian-
"agian sel lain$ Setiap mikro"a mempun%ai sifat fisiologi tertentu' sehingga
memerlukan nutrisi tertentu pula$ Susunan kimia sel mikro"a relatif tetap' "aik
unsur kimia maupun sen%a.a %ang terkan#ung #i #alam sel$ ari hasil analisis
kimia #iketahui "ah.a pen%usun utama sel a#alah unsur kimia ' ' &' N' #an !'%ang )umlahn%a 4 5 #ari "erat kering sel' se#angkan sisan%a tersusun #ari
unsur-unsur lain (6ihat 7a"el*$ Apa"ila #ilihat susunan sen%a.an%a' maka air
merupakan "agian ter"esar #ari sel' se"an%ak 80-0 5' #an "agian lain se"an%ak
10-20 5 ter#iri #ari protoplasma' #in#ing sel' lipi#a untuk ,a#angan makanan'
polisakari#a' polifosfat' #an sen%a.a lain$
Susunan unsur-unsur pen%usun sel "akteriE.coli
nsur-unsur kimia !ersentase "erat kering
ar"on (* 40
&ksigen (&* 20
Nitrogen (N* 19
-
7/21/2019 LAPORAN SEMENTARA bioproses
2/17
i#rogen (* 8
osfor (!* 3
;elerang (S* 1Kalium (K* 1
Natrium (Na* 1
Kalsium (a* 0'4
Magnesium (Mg* 0'4
Klor (l* 0'4
;esi (e* 0'2
6ain-lain 0'3
A. FUNGSI NUTRISI UNTUK MIKROBA
Setiap unsur nutrisi mempun%ai peran tersen#iri #alam fisiologi sel$ nsurterse"ut #i"erikan ke #alam me#ium se"agai kation garam anorganik %ang
)umlahn%a "er"e#a-"e#a tergantung pa#a keperluann%a$ ;e"erapa golongan
mikro"a misaln%a #iatomae #an alga tertentu memerlukan silika (Si* %ang
"iasan%a #i"erikan #alam "entuk silikat untuk men%usun #in#ing sel$ ungsi #an
ke"utuhan natrium (Na* untuk "e"erapa )asa# "elum #iketahui )umlahn%a$
Natrium #alam ka#ar %ang agak tinggi #iperlukan oleh "akteri tertentu %ang hi#up
#i laut' algae hi)au "iru' #an "akteri fotosintetik$ Natrium terse"ut ti#ak #apat
#igantikan oleh kation mono+alen %ang lain$
Jasa# hi#up #apat menggunakan makanann%a #alam "entuk pa#at maupun
,air (larutan*$ Jasa# %ang #apat menggunakan makanan #alam "entuk pa#at
tergolong tipe holozoik' se#angkan %ang menggunakan makanan #alam "entuk
,air tergolong tipe holofitik$ Jasa# holofitik #apat pula menggunakan makanan
#alam "entuk pa#at' tetapi makanan terse"ut harus #i,ernakan le"ih #ulu #i luar
sel #engan pertolongan en
-
7/21/2019 LAPORAN SEMENTARA bioproses
3/17
Sum"er kar"on untuk mikro"a #apat "er"entuk sen%a.a organik maupun
anorganik$ Sen%a.a organik meliputi kar"ohi#rat' lemak' protein' asam amino'
asam organik' garam asam organik' polialkohol' #an se"again%a$ Sen%a.a
anorganik misaln%a kar"onat #an gas &2%ang merupakan sum"er kar"on utama
terutama untuk tum"uhan tingkat tinggi$
&. Sumber $'e()%r e*e#)r%
!roses oksi#asi "iologi merupakan proses pengam"ilan #an pemin#ahan elektron
#ari su"strat$ Karena elektron #alam sel ti#ak "era#a #alam "entuk "e"as' maka
harus a#a suatu a' S,' Si' 7u' #an se"again%a %ang ti#ak #iperlukan )asa#$
nsur %ang #igunakan #alam )umlah "esar #ise"ut unsur makro' #alam )umlah
se#ang unsur oligo' #an #alam )umlah sangat se#ikit unsur mikro$ nsur mikro
sering ter#apat se"agai ikutan (impurities* pa#a garam unsur makro' #an #apat
masuk ke #alam me#ium le.at kontaminasi gelas tempatn%a atau le.at partikel
#e"u$
Selain "erfungsi se"agai pen%usun sel' unsur mineral )uga "erfungsi untuk
mengatur tekanan osmose' ka#ar ion (kemasaman' p*' #an potensial
oksi#asire#uksi (redox potential* me#ium$
,. F$#)%r )umbu-
aktor tum"uh ialah sen%a.a organik %ang sangat #iperlukan untuk pertum"uhan
(se"agai prekursor' atau pen%usun "ahan sel* #an sen%a.a ini ti#ak #apat
#isintesis #ari sum"er kar"on %ang se#erhana$ aktor tum"uh sering )uga #ise"ut
-
7/21/2019 LAPORAN SEMENTARA bioproses
4/17
#alam "entuk gas N2(
-
7/21/2019 LAPORAN SEMENTARA bioproses
5/17
)asa# Sum"er energi Sum"er #onor
elektron
,ontoh
otolitotrof aha%a =at anorganik 7um"uhan tingkat
tinggi' alga
otoorganotrof aha%a =at organik ;akteri "elerangfotosintetik
Khemolitotrof &ksi#asi
-
7/21/2019 LAPORAN SEMENTARA bioproses
6/17
)umlah %ang sangat se#ikit$ Jasa# aero" fakultatif ialah )asa# %ang #apat hi#up
#alam kea#aan anaero" maupun aero"$ Jasa# ini )uga "ersifat anaero" toleran$
Jasa# kapnofil ialah )asa# %ang memerlukan ka#ar &2 ren#ah #an ka#ar &2
tinggi$
C. INTERAKSI ANTAR JASAD DALAM MENGGUNAKAN NUTRIEN
Jika #ua atau le"ih )asa# %ang "er"e#a #itum"uhkan "ersama-sama #alam suatu
me#ium' maka akti+itas meta"olismen%a se,ara kualitatif maupun kuantitatif akan
"er"e#a )ika #i"an#ingkan #engan )umlah akti+itas masing-masing )asa# %ang
#itum"uhkan #alam me#ium %ang sama tetapi terpisah$
enomena ini merupakan hasil interaksi meta"olisme atau interaksi #alam
penggunaan nutrisi %ang #ikenal se"agai sintropik atau sintropisme atau
sinergitik$Se"agai ,ontoh ialah "akteri penghasil metan %ang anaero" o"ligat ti#ak #apat
menggunakan glukosa se"agai su"strat' tetapi "akteri terse"ut akan segera tum"uh
oleh a#an%a hasil meta"olisme "akteri anaero" lain %ang #apat menggunakan
glukosa$
ontoh lain ialah "iakan ,ampuran %ang ter#iri atas #ua )enis mikro"a atau
le"ih sering ti#ak memerlukan faktor tum"uh untuk pertum"uhann%a$ Mikro"a
%ang #apat mensintesis "ahan seln%a #ari sen%a.a organik se#erhana #alam
me#ium' akan mengekskresikan "er"agai +itamin atau asam amino %ang sangat
penting untuk mikro"a lainn%a$ A#an%a ekskresi terse"ut memungkinkan
tum"uhn%a mikro"a lain$
Ken%ataan ini #apat menim"ulkan koloni satelit %ang #apat #ilihat pa#a me#ium
pa#at$ Koloni satelit han%a #apat tum"uh kalau a#a ekskresi #ari mikro"a lain
%ang menghasilkan faktor tum"uh esensiil "agi mikro"a terse"ut$
;entuk interaksi lain a#alah cross feeding %ang merupakan "entuk
se#erhana #ari sim"iose mutualistik$ alam interaksi ini pertum"uhan )asa# %ang
satu tergantung pa#a pertum"uhan )asa# lainn%a' karena ke#ua )asa# terse"ut
saling memerlukan faktor tum"uh esensiil %ang #iekskresikan oleh masing-
masing )asa#$
!ers%aratan %ang harus #ipenuhi #alam pen%iapan me#ium supa%amikroorganisme #apat tum"uh "aik a#alah:
1$ Mengan#ung semua nutrisi %ang mu#ah #igunakan oleh mikro"a
2$ Mempun%ai tekanan osmose' tegangan permukaan' #an p %ang sesuai
3$ 7i#ak mengan#ung
-
7/21/2019 LAPORAN SEMENTARA bioproses
7/17
mikro"a )ika ka#arn%a terlalu tinggi (misaln%a garam #ari asam lemak' gula' #an
se"again%a*$ ;an%ak alga %ang sangat peka terha#ap fosfat anorganik$ isamping
itu #alam me#ium %ang terlalu pekat akti+itas meta"olisme #an pertum"uhan
mikro"a #apat "eru"ah$ !eru"ahan faktor lingkungan men%e"a"kan akti+itas
fisiologi mikro"a #apat terganggu' "ahkan mikro"a #apat mati$
Me#ium memerlukan kemasaman (p* tertentu tergantung pa#a )enis
)asa# %ang #itum"uhkan$ Akti+itas meta"olisme mikro"a #apat mengu"ah p'
sehingga untuk mempertahankan p me#ium #itam"ahkan "ahan "uffer$
;e"erapa komponen pen%usun me#ium #apat )uga "erfungsi se"agai "uffer$
E. MACAM MEDIUM PERTUMBU0AN
1. Meium $'$r/ b$'$* mier$*Me#ium #asar a#alah me#ium %ang mengan#ung ,ampuran sen%a.a anorganik$
Me#ium #asar ini selan)utn%a #itam"ah
-
7/21/2019 LAPORAN SEMENTARA bioproses
8/17
ti#ak memerlukan faktor tum"uh$ Me#ium %ang )uga termasuk me#ium kompleks
a#alah %ang mengan#ung ekstrak tanah$
&. Meium i(er#$$
Me#ium Me#ium #iperka%a a#alah me#ium %ang #itam"ah
-
7/21/2019 LAPORAN SEMENTARA bioproses
9/17
Komposisi #apat sintetis #apat pula alami$ Kea#aan ,air karena ti#ak #itam"ahkan
"ahan pema#at$
b. Mei$ ($$)
Sama haln%a #engan me#ia ,air han%a "e#an%a #isini #itam"ahkan "ahan
pema#at (agar-agar' amilum atau gelatin*$ 4
. Mei$ 'emi ($$)
Se"enarn%a me#ia ini termasuk me#ia pa#at tapi karena kea#aan%a lem"ek
#ise"ut semisoli#$ ;ahan pema#at %ang #itam"ahkan kurang #ari setengah
me#ium pa#at se#angkan komposisin%a sama #engan %ang lainn%a$
Ber$'$r#$ Ke!u$$$$. Mei$ umum
Me#ia ini #igunakan se,ara umum artin%a me#ia ini #apat #itum"uhi oleh
"er"agai )enis mikroorganisme "aik "akteri maupun )amur misaln%a NA (nutrient
agar* #an lain-lain$
b. Mei$ 'e*e#)i3
Me#ia ini #ipakai untuk men%eleksi mikroorganisme sesuai #engan %ang
#iinginkan ' )a#i han%a satu )enis mikroorganisme sa)a %ang #apat tum"uh #alam
me#ia ini atau han%a satu kelompok tertentu sa)a' misaln%a me#ia salmonella
sigella agar %aitu me#ia khusus untuk mengamati atau men%eli#iki salmonella
ataushigella #ari makanan atau "ahan lain$
. Mei$ e3ere'i$*
Me#ia ini #igunakan untuk men%eleksi mikroorganisme$ Me#ium ini #apat
#itum"uhi "er"agai )enis mikroorganisme tapi salah satu #iantaran%a #apat
mem"erikan salah satu ,iri %ang khas sehingga #apat #i"e#akan #ari %ang lain #an
#apat #ipisahkan
. Meium (e!$$
Me#ium ini #igunakan untuk menum"uhkan mikroorganisme untuk keperluan
tertentu$ i"iakkan #alam me#ium ini supa%a sel-sel mikroorganisme tertentu
#apat "erkem"ang #engan ,epat sehingga #iperoleh populasi %ang tinggi$
Komposisi me#ium sangat #iperluka #an sangat menguntungkan "agi
pertum"uhan sel mirkoorganisme %ang "ersangkutan$
Ketepatan komposisi me#ium tergantung pa#a ke"utuhanspecies%ang akan #i
kulti+asi karena ke"utuhan nutrisi sangat "er+ariasi$ !engetahuan tentang ha"itat
-
7/21/2019 LAPORAN SEMENTARA bioproses
10/17
normal mikroorganisme sering "erguna untuk menentukan me#ium %ang ,o,ok
karena ke"utuhan tergantung lingkungan alamin%a$ Meskipun pers%aratan
me#ium untuk menum"uhkan mikroorganisme sangat "eragam' namun se"agai
organisme hi#up mempun%ai ke"utuhan #asar %ang sama %aitu memerlukan
sum"er kar"on' energi' air' nitrogen' fosfat' #an mineral$
Me#ium %ang #igunakan #alam mikro"iologi sangat "eraneka ma,am$
Me#ium #apat #i"uat se,ara alami maupun mem"eli su#ah #alam "entuk kemasan
)a#i$ !em"uatan me#ium menggunakan "ahan-"ahan alami selain le"ih murah
)uga #apat untuk mengantisipasi )ika ti#ak a#a stok #ari pa"rik$ am"ar 1
menun)ukkan "er"agai me#ium #alam kemasan #ari pa"rik (misaln%a Oxoid'
Difco' #ll*$ Me#ium #apat #i"e#akan "er#asarkan komposisi kimia' konsistensi'
#an fungsin%a$ ;er#asarkan komposisi kimia.i komponen pen%usun me#ium'maka me#ium #i"e#akan men)a#i #ua kategori %aitu me#ium kompleks (complex*
#an sintetik (defined*$ Me#ium kompleks tersusun atas "ahan-"ahan #engan
ma,am #an komposisi ti#ak semua #iketahui #engan pasti$ ontoh me#ium
kompleks a#alah Nutrient Agar(NA* %ang mengan#ung beef extract#an pepton$
Me#ium sintetik tersusun atas "ahan ma,am #an komposisin%a #iketahui #engan
pasti$ Misaln%a me#ium untuk menum"uhkan Escherichia coli "erikut (gr/l*:
glukosa (1'0*? Na2!&9 (1C'9*? K2!&9(1'4*? (N9*2S&9 (2'0*? MgS&9$D2& (0'2*?
al2 (0'01* #an eS&9$D2& (0'0004*$
am"ar 1 Me#ium #alam kemasan
Me#ium #apat #i"e#akan men)a#i 3 "er#asarkan konsistensin%a %aitu
me#ium ,air' semipa#at' #an pa#at$ Me#ium ,air ( liquid broth* han%a
mengan#ung nutrien-nutrien %ang #ilarutkan (am"ar 2*$ ontoh me#ium ,aira#alah Nutrient Broth (N;*' glukosa broth' #an lain-lain$ Me#ium ini #apat
#igunakan untuk per"an%akan (propagasi* mikroorganisme #alam )umlah "esar'
u)i fermentasi' #an "er"agai u)i lain$ am"ar 3 menampakkan me#ia ,air #alam
per"an%akan mikroorganisme$ am"ar 9 memperlihatkan me#ium ,air %ang
#igunakan untuk u)i fermentasi gula$
-
7/21/2019 LAPORAN SEMENTARA bioproses
11/17
am"ar 2$ Me#ium Nutrien ;roth #alam ta"ung reaksi
am"ar 3 Me#ium nutrient ;roth #alam erlenme%er
am"ar 9 Me#ium u)i fermentasi gula
Me#ium pa#at (soli#* mengan#ung nutrien-nutrien %ang #ilarutkan
#alam aEua#es #itam"ah "ahan pema#at (solidifying agent* %aitu agar$ Kriteria
"ahan pema#at %ang "aik %aitu ti#ak gunakan oleh mikroorganisme' ti#ak
mengham"at pertum"uhan mikroorganisme' #an ti#ak men,air pa#a temperaturkamar$ Me#ium pa#at sering #igunakan untuk isolasi mikroorganisme' u)i
akti+itas "iokimia.i' perhitungan )umlah mikroorganisme' #an lain-lain$ am"ar
4 memperlihatkan isolasi meto#estreak plate me#iumNutrient Agar (NA* #alam
petri#ish$ am"ar C menun)ukkan u)i akti+itas amilolitik mikroorganisme
menggunakan me#ium tarch Agar (SA*$ =ona )ernih #i sekitar koloni setelah
#itetesi io# menun)ukkan hasil positif$
Me#ium semipa#at (semisolid* sama #engan me#ium pa#at tetapi
konsentrasi "ahan pema#at (agar atau gelatin* le"ih se#ikit sehingga
konsistensin%a seperti )eli$ Me#ium semisoli# terutama #igunakan untuk
eksperimen motilitas mikroorganisme ataupun hi#rolisis gelatin$
-
7/21/2019 LAPORAN SEMENTARA bioproses
12/17
am"ar 4 Isolasi mikroorganisme pa#a me#ium Nutrient Agar
am"ar C$ )i akti+itas amilolitik pa#a me#ium Star,h Agar
Me#ium menurut kegunaann%a #i"e#akan men)a#i 3 %aitu me#ia
selektif' #iferensial' #an penga%aan$ Me#ium selektif merupakan me#ium %ang
#itam"ah
-
7/21/2019 LAPORAN SEMENTARA bioproses
13/17
2$ !en%aringan me#ium
;e"erapa )enis me#ium ka#ang perlu #isaring menggunakan kertas saring atau
kain tipis$
3$ !engaturan p
Me#ium ka#angkala memerlukan nilai p tertentu sehingga perlu #ilakukan
pengaturan p$ !engaturan p #apat #ilakukan #engan penam"ahan larutan
Na& atau l$ !enam"ahan l #ilakukan apa"ila nilai p terlalu tinggi' untuk
per"e#aan p "esar #igunakan 1 N l se#angkan kalau per"e#aan p ke,il
#igunakan 0'1 N l$ !rose#ur sama #ilakukan apa"ila p terlalu ren#ah han%a
sa)a larutan %ang #igunakan a#alah Na&$ !engaturan p #apat #ilakukan
se"elum sterilisasi$9$ !enam"ahan anti"iotik
Anti"iotik ka#ang #iperlukan untuk men,egah pertum"uhan )enis mikroorganisme
lain %ang ti#ak #ikehen#aki$ Misaln%a penam"ahan ,hloramfeni,ol untuk
men,egah pertum"uhan "akteri ketika kita ingin menum"uhkan fungi$
!enam"ahan anti"iotik #apat #ilakukan se"elum atau sesu#ah sterilisasi
tergantung )enis anti"iotikn%a tahan panas atau ti#ak$
4$ !emasukan me#ium #alam tempat (.a#ah* tertentu
7ahap ini perlu #ilakukan se"elum sterilisasi$ Fa#ah %ang #apat #igunakan
misaln%a ta"ung reaksi atau erlenme%er$ Fa#ah terse"ut harus "ersih' "e"as #e"u'
#an ti#ak terkontaminasi$ 7a"ung reaksi #igunakan misaln%a untuk pem"uatan
agar miring #an agar tegak' se#angkan erlenme%er #igunakan untuk me#ium %ang
akan #ituang #alam petri#ish$ Me#ium #imasukkan ke #alam ta"ung reaksi
se"an%ak G 4-C ml (agar miring* atau GD-8 ml (agar tegak*' tergantung ta"ung
reaksi %ang #igunakan$ am"ar 10 memperlihatkan "er"agai tampilan me#ia
pa#at #alam ta"ung reaksi$ Me#ium %ang akan #isterilkan #alam erlenme%er ti#ak
"oleh le"ih #ari 2/3 +olume erlenme%er untuk menghin#ari men%em"urn%a me#ia
ke tutup$ al ini #apat ter)a#i karena prinsip sterilisasi menggunakan uap panas
"ertekanan$ 7a"ung reaksi #an erlenme%er selan)utn%a #isum"at #engan kapas
atau penutup tahan panas lain$ Sum"at ini harus #apat menutup .a#ah #engan
-
7/21/2019 LAPORAN SEMENTARA bioproses
14/17
kuat #an rapat tetapi masih #apat #i"uka #engan men)epitn%a memakai )ari
kelingking$ !em"uatan me#ium agar tegak #ilakukan #engan memposisikan
ta"ung se,ara tegak se,epatn%a setelah sterilisasi$ Se#angkan pem"uatan me#ium
agar miring #engan meletakkan ta"ung miring #engan kemiringan tertentu #an
#i"iarkan sampai me#ium mema#at$ Kemiringan me#ium #apat kita atur sesuai
tu)uan misaln%a untuk pen%impanan (stock culture* atau pem"uatan suspensi
(am"ar 11*$ Me#ium #alam erlenme%er setelah #isterilisasi #apat #ituang
se"an%ak G 14 ml tiap petri#ish$ !roses penuangan me#ium ke #alam petri#ish
#ilakukan se,ara aseptik (am"ar 12*$ Me#ium steril #alam erlenme%er #apat
#ituang ke #alam petri#ish steril apa"ila suhu me#ium G C0 H (ti#ak terlalu panas
tetapi masih ,air* untuk menghin#ari ter)a#in%a pen)en#alan #an uap air #alam
petri#ish$ Me#ium apa"ila telah mema#at maka harus #i,airkan kem"ali #alampenangas air #an )angan memanaskan langsung #i atas api$
C$ Sterilisasi me#ium
Sterilisasi me#ium #apat #ilakukan #engan "er"agai ,ara tergantung
ma,amn%a me#ium$ Salah satu ,ara %ang paling sering #igunakan a#alah
menggunakan otoklaf$ !rinsip ker)a otoklaf a#alah uap panas "ertekanan (tekanan
1 atm? suhu 121o selama 14 menit*$ ara lain %aitu #engan pasteurisasi untuk
me#ium %ang mengan#ung "ahan-"ahan %ang ti#ak tahan panas tinggi$
!enge,ekan apakah me#ium %ang #isterilisasi ti#ak terkontaminasi maka me#ium
#i#iamkan semalam se"elum #igunakan$ Me#ium %ang telah terkontaminasi ti#ak
"oleh #i steril #ua kali karena akan merusak me#ium terse"ut$
-
7/21/2019 LAPORAN SEMENTARA bioproses
15/17
D$ !en%impanan me#ium
Me#ium %ang su#ah #i"uat #an su#ah steril mungkin ti#ak langsung #igunakan
sehingga se"aikn%a #i simpan #i refrigerator (lemari es*$ Me#ium apa"ila
#isimpan #alam suhu kamar untuk perio#e lama maka ,en#erung kehilangan
kelem"a"an (#ehi#rasi* #an le"ih mu#ah terkontaminasi$
STERILISASI
Suatu alat #an "ahan #ise"ut steril apa"ila "ahan terse"ut "e"as #ari
mikroorganisme$ Sterilisasi #apat #ilakukan #engan "er"agai ,ara %aitu: ,ara
kimia' mekanik atau fisik$
$. S)eri*i'$'i $r$ #imi$
;ahan atau sen%a.a kimia %ang memiliki sifat mem"unuh mikroorganisme #apat
#igunakan untuk sterilisasi atau #esinfektan' misaln%a #i"i#ang ke#okteran$
ontohn%a alkohol D05' #etergen' kar"ol' lisol' merkurokhrom #an lain-lain
b. S)eri*i'$'i $r$ me#$i#
Sterilisasi ini #ilakukan #engan menggunakan alat pen%aring %ang sangat halus$
. S)eri*i'$'i $r$ 3i'i#
mumn%a #ilakukan #engan ,ara pemanasan pa#a suhu tinggi$ Salah satu
,ontohn%a a#alah menggunakan alat autoklaf' #isterilkan pa#a suhu 121o #engan
tekanan 1'4 kg/,m2 (14 l"s* #alam )angka .aktu tertentu "ergantung pa#a apa
%ang #isterilkan$
-
7/21/2019 LAPORAN SEMENTARA bioproses
16/17
I4. ALAT DAN BA0AN
&.1. A*$)
1$ 7a"ung reaksi
2$ !ipet tetes
3$ Kompor listrik
9$ Autoklaf
4$ Spatula
&.2. B$-$
1$ Kentang %ang "agus
2$ Agar-agar
3$ ekstrose
9$ Air suling
4. PROSEDUR PERCOBAAN
I$ Agar Kentang ekstrosa (AK* / !otato ekstrose Agar (!A* untuk
menum"uhkan )amur$
1$ u,ilah kentang kemu#ian #ipotong-potong ke,il #an masak selama 1 )am$
>olume air #i)aga supa%a tetap #engan menam"ahkan air suling$
-
7/21/2019 LAPORAN SEMENTARA bioproses
17/17
2$ Saringlah kentang %ang telah #imasak ta#i #an masukan #ekstrose ke #alam
fitrat kentang serta agar-agar sampai larut #engan "aik$
3$ 7uangkan ke #alam ta"ung sesuai #engan ke"utuhan' sum"atkan #engan
kapas$
9$ Sterilkan #alam autoklaf (121o/ 14 l"s* selama 14 menit$
II$ Sterilisasi #engan Autoklaf
1$ Isi autoklaf #engan air suling se"an%ak 3-4 liter' panaskan sampai semua
u#ara keluar #ari autoklaf$
2$ Siapkan alat/ "ahan %ang akan #isterilkan #an letakkan pa#a rak #ari
autoklaf$
3$ Masukkan rak terse"ut ke #alam autoklaf' tutup rapat ke,uali klep u#arasupa%a u#ara %ang mungkin masih a#a #alam autoklaf #apat keluar' Karena
)ika #alam autoklaf masih a#a u#ara se#angkan klep su#h #itutup rapat'
maka sterilisasi ti#ak #apat men,apai suhu #an tekanan %ang #iharuskan
(121o/ 14 l"s*$