laporan praktik kerja lapangan r1
DESCRIPTION
BLK yogyaTRANSCRIPT
LAPORAN PRAKTIK KERJA LAPANGANDI BALAI LABORATORIUM KESEHATAN YOGYAKARTA
PEMBUATAN MEDIA DAN PENGIDENTIFIKASIAN BAKTERI Mycobacterium tuberculosis DI BALAI LABORATORIUM KESEHATAN YOGYAKARTAOleh :
Dyah Wulandhari
4411411018
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS NEGERI SEMARANG
2014
HALAMAN PENGESAHANLaporan Praktik Kerja Lapangan telah disahkan oleh Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta dan Jurusan Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Negeri Semarang.
Hari
:
Tanggal
:Dosen Pembimbing Pembimbing LapanganDr. Ari Yuniastuti, Spt, M.Kes.
Andi Priono, Amd.AK(NIP. 196806021998032002)
NIP. (198809252011011005)Mengetahui,Mengetahui,
Ketua Jurusan BiologiKepala Laboratorium
Andin Irsadi S.Pd,M.Si Drg. H.M. Taufiq. A.K, M.Kes(NIP.197403102000031001)(NIP. 196007021989031010)KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Tuhan Yang Maha Esa atas karunia, rahmat dan hidayahNYA, sehingga pelaksanaan dan penyusunan Laporan Praktik Kerja Lapangan ini dapat berjalan dengan baik. Praktik Kerja Lapangan di Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta telah banyak memberikan wawasan dan pengetahuan di bidang pembuatan cat bakteri dan pengidentifikasiannya serta komposisi yang terkandung didalamnya yang sudah seharusnya dimiliki sesuai dengan kompetensi program studi biologi.
Laporan ini disusun sebagai pertanggungjawaban dari pelaksanaan Praktik Kerja Lapangan yang telah berlangsung lebih kurang selama satu bulan. Pelaksanaan PKL dimulai pada tanggal 4 Agustus 2014 sampai dengan 4 September 2014 di Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta.
Selama pelaksanaan PKL, baik pada saat persiapan, pelaksanaan kegiatan hinggapenyusunan laporan ini, banyak pihak yang memberikan kontribusi bagi kebaikan penyusunan laporan ini. Untuk itu dengan segala kerendahan hati, penulis mengucapkan terimakasih kepada: 1. Bapak Prof. Dr. Fathur Rokhman, M.Hum selaku Rektor Universitas Negeri Semarang2. Bapak Prof.Dr. Wiyanto, M.Si selaku Dekan Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Negeri Semarang3. Bapak Andin Irsadi, S.Pd, M.Pd selaku Ketua Jurusan Biologi Universitas Negeri Semarang4. Bapak Drg. H.M. Taufiq AK, M.Kes., selaku Kepala Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta.5. Ibu Dr. Ari Yuniastuti , SPt, M.Kes. selaku Dosen Pembimbing Lapangan PKL6. Bapak Andi Priono, Amd.Ak sebagai pembimbing lapangan PKL7. Bapak Irvan, Ibu Siti, Ibu Darwani, Mbak Wulan, Mbak Evina, yang telah memberikan bimbingan dan arahan dalam pelaksanaan PKL.
8. Teman-teman sesama peserta PKL (nunung dan Srim) serta teman-teman baru dari poltekes Yogyakarta (Pak Dwi, Mbak Nurul, Mbak Ida, Pak Leo, Mbak Mita, Mbak Lia dan Mbak Ana, Tante Peni, Mas Kiko)
9. Serta semua pihak yang telah membentu secara langsung maupun tidak langsung, baik bantuan materiil maupun moril.
Dengan terbatasnya kemampuan, penulis menyadari bahwa laporan PKL ini masih banyak kekurangan, oleh karena itu penulis mengharapkan masukan berupa kritik dan saran yang bersifat membangun guna kesempurnaan laporan PKL ini.Akhir kata penulis mengharapkan semoga laporan PKL ini dapat berguna serta memberikan manfaat bagi kita semua.
Yogyakarta, 1 September 2014 PenulisDAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL
iHALAMAN PENGESAHAN
iiKATA PENGANTAR
iiiDAFTAR ISI
ivABSTRAK
vBAB I PENDAHULUAN
A Latar belakang
1B. Identifikasi masalah
2C. Pembatasan masalah
2D. Rumusan masalah
2E. Tujuan
2F. Manfaat
3BAB II KAJIAN PUSTAKA
A. Kajian Pustaka
4B. Kerangka berpikir teoretis
9BAB III METODE PKL
A.Lokasi PKL
10B. Desain PKL
10C. Objek PKL
10D. Metoda Pengumpulan Data
11E. Instrumen PKL
11BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN
13BAB V KESIMPULAN DAN SARAN
39DAFTAR PUSTAKA
40LAMPIRAN
41ABSTRAK
PEMBUATAN MEDIA DAN PENGIDENTIFIKASIAN BAKTERI Mycobacterium tuberculosis DI BALAI LABORATORIUM KESEHATAN YOGYAKARTABiologi,S1-Biologi
Universitas Negeri Semarang
2014Praktik Kerja Lapangan ini dilakukan untuk mengetahui gambaran tentang profil Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta, menambah ilmu pengetahuan dan pengalaman kerja sesuai dengan ilmu biologi, mendapatkan wawasan tentang cara praktik laboratorium yang baik dan benar, serta mendapatkan keterampilan dalam mengoperasikan instrumen laboratorium.Berdasarkan permasalahan di atas, dalam pengumpulan data digunakan berbagai metode observasi, metode praktik kerja, metode interview dan metode literatur. Metode observasi yaitu dengan cara pengamatan langsung proses pembuatan media bakteri, sedangkan metoda praktik kerja lapangan yaitu dengan melakukan kerja praktik secara langsung, sedangkan metoda literatur yaitu dengan membaca berbagai buku sebagai dasar atau acuan teori dalam melaksanakan dan membuat laporan PKL.Dari observasi dan kerja praktik yang telah dilakukan di Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta, maka diperoleh gambaran tentang profil Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta. Salah satu bidang yang diikuti diantaranya adalah mikrobiologi dan bidang media. Mikrobiologi yang merupakan suatu cabang ilmu yang kurang kuantitatif sehingga hasil akhir lebih ditekankan pada kesempurnaan teknis. Bidang media merupakan suatu reagensia yang terdiri dari reagensia yang terdiri dari bahan kimia, makanan, dan mikroorganisme yang telah melalui proses pengolahan tertentu menjadi perbenihan untuk menanam bakteri, jamur, maupun virus. Meliputi berbagai macam jenis media dan reagensia, uji sterilisasi alat dan media, uji kualitas dan penanaman bakteri, pembuatan cat bakteri dan pengidentifikasian bakteri sehingga dari informasi tersebut dapat bermanfaat bagi perkembangan ilmu pengetahuan mengenai bakteri.BAB I
PENDAHULUAN
A. Latar BelakangProgram Studi Biologi merupakan salah satu program studi yang berada di bawah jurusan Biologi FMIPA UNNES. Berdasarkan visi dan misi Program Studi Biologi, maka diperlukan mata kuliah Praktik Kerja Lapangan (PKL) bagi mahasiswa program studi biologi, sebagai usaha untuk memberikan bekal pengalaman sebelum lulusan benar-benar terjun di lapangan (industri).Praktik Kerja Lapangan di Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta ini dilaksanakan pada semester gasal dengan bobot 4 SKS. PKL dilaksanakan sekitar satu bulan, tepatnya pada tanggal 4 Agustus sampai dengan 4 September 2014. Pelaksanaan PKL perlu bekerja sama denganindustri-industri yang memenuhi syarat yang relevan dengan program studi biologi, salah satunya yaitu Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta.
Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta merupakan unit Pelasanaan Teknis Dinas Kesehatan di lingkungan Pemda Propinsi D.I. Yogyakarta. Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta bertugas merencanakan dan melaksanakan penyediaan sarana dan prasarana, mengelola sarana dan prasarana melalui kegiatan pemeliharaan peralatan, melayani pemeriksaan klinis dan atau medis, melayani pemeriksaan kesehatan masyarakat, individu dan institusi, melayani pengujian higiene sanitasi, menyelenggarakan pembinaan laboratorium kesehatan, menyelenggarakan kerjasama pelatihan, melayani konsultasi bidang kesehatan yang berkaitan dengan hasil laboratorium dan melaksanakan ketatausahaan.Pembuatan media digunakan untuk sarana penyediaan sampel atau untuk uji sampel dan sebagai bahan untuk penyedia reagen dalam bidang mikrobiologi misalnya digunakan untuk pengecatan bakteri dan pengidentifikasian bakteri. Media yang telah jadi selanjutnya digunakan untuk tiap-tiap sampel sesuai dengan kebutuhan pada masing-masing bidang, di dalam Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta. Bidang-bidang yang sering membutuhkan media antara lain mikrobiologi dan imunologi.B. Identifikasi Masalah1. Gambaran tentang profil BLK Yogyakarta2. Instrumen laboratorium yang digunakan3. Pembuatan media untuk pengujian sampelC. Pembatasan Masalah1. Gambaran tentang profil BLK Yogyakarta2. Instrumen yang digunakan seperti autoclave, oven pensteril, lemari es, water bath, dll.3. Media yang dibuat diantaranya EC, BGLB, Nutrien agar, cat bakteri, Erlich, Nitrat AgarD. Rumusan Masalah1. Bagaimana gambaran profil BLK Yogyakarta?2. Bagaimana cara menggunakan instrumen dalam pembuatan media?3. Bagaimana cara pembuatan media?E. Tujuan
Tujuan dari praktik Kerja Lapangan (PKL) antara lain :
1. Memberikan kesempatan penerapan ilmu bagi mahasiswa dengan dijiwai visi dan misi universitas maupun fakultas.
2. Membantu mahasiswa memahami dunia kerja sesuai dengan bidang ilmu yang dipelajarinya.
3. Membantu mahasiswa untuk terampil dan bekerja sama.
4. Membangun instansi lokasi praktik kerja lapangan.
5. Sebagai wahana memperoleh umpan balik untuk peningkatan kualitas penyelenggaraan pendidikan sesuai kebutuhan dunia kerja.F. Manfaat
1. Bagi mahasiswa
a. Memperoleh pengetahuan baru tentang proses pengambilan dan penangan bahan pemeriksaan, penggunaan alat dan bahan, metode dan cara pemeriksaan, pembacaan hasil, dan evaluasi hasil.
b. Memperoleh pengetahuan tentang administrasi laboratorium dan mampu mengadministrasikan mulai dari pengambilan bahan pemeriksaan sampai dengan menuangkan dalam administrasi laboratorium.
2. Bagi Lembaga Pendidikana. Dapat membangun hubungan baik antara Program Studi Biologi khususnya dan Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam UNNES pada umumnya dengan Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta sehingga memungkinkan kerjasama ketenagakerjaan dan bentuk kerjasama lainnya.
b. Mendapat umpan balik untuk meningkatkan kualitas pendidikan sehingga selalu dapat mengikuti perkembangan dunia industri. BAB II
KAJIAN PUSTAKA
A. Kajian Pustaka
1. Pengertian Media
Metode laboratorium langsung seperti mikroskopi memberikan informasi awal tentang bakteri yang menyebabkan sebuah penularan penyakit tetapi pertumbuhan bakteri biasanya dibutuhkan suatu pengenalan dan mempraktikkan pengolahan bakteri yang mempunyai tiga tujuan utama :a. Untuk menumbuhkan dan memisahkan semua bakteri yang ada dalam sebuah penularan penyakit.b. Untuk membedakan dari bakteri yang tumbuh yang hampir semua disebabkan penularan penyakit dan pencemar atau koloni.c. Untuk mendapatkan pertumbuhan bakteri yang cukup relevan secara klinis agar bisa diidentifikasi dan dikarakterisasi.Untuk menumbuhkan suatu organisme diperlukan suatu substrat makanan yang biasa disebut media yang mengandung unsur-unsur makanan yang diperlukan oleh jasad tersebut. Unsur-unsur makanan itu dapat berupa garam-garam anorganik dan senyawa-senyawa organik seperti protein, pepton, asam-asam amino, dan vitamin-vitamin yang diperlukan untuk pertumbuhan. Bahan-bahan nutrien yang disediakan untuk menumbuhkan mikroorganisme di dalam laboratorium disebut kultur media. Fungsi Media di Laboratorium Mikrobiologi bukan hanya merupakan makanan untuk pertumbuhan bakteri, kapang, dan khamir, akan tetapi juga mempunyai fungsi khusus yaitu :a. Isolasi bakteri dari populasi mikroorganisme campuran.b. Diferensiasi kelompok-kelompok bakteri berdasarkan kenampakan makroskopis koloni dan reaksi-reaksi biokimiawi di dalam media.c. Perhitungan jumlah bakteri.d. Uji zat-zat yang disintesis secara alamiah, misalnya: antibiotik, vitamin, dan produk-produk fermentasi.e. Karakteristik dan identifikasi bakteri melalui kemampuannya menghasilkan perubahan-perubahan kimiawi pada media yang berbeda.1.1 Klasifikasi-klasifikasi Media dan Fungsi media
Media dikategorikan berdasarkan fungsi dan kegunaannya. Dalam diagnosa bakteri terdapat empat kategori umum dari media : pengayaan, pendukung, selektif, dan perbedaan. Media pengayaan terdiri dari persyaratan nutrisi khusus untuk pertumbuhan dari bakteri patogen khusus yang mungkin diberikan sendiri atau dengan bakteri spesies lain dalam jenis yang sama. Jenis media ini digunakan untuk memperkaya pertumbuhan dari sebuah bakteri patogen khusus dari sebuah pencampuran mikroorganisme dengan menggunakan nutrisi khusus.Media pendukung terdiri dari makanan bergizi yang mendukung dari kebanyakan organisme bukan pemilih tanpa memberikan keuntungan pada pertumbuhan organisme. Media selektif terdiri dari satu atau lebih agen dimana merupakan penghambat semua organisme-organisme kecuali yang telah ditemukan. Dengan kata lain, media ini memilih tumbuh dari bakteri lain yang dirugikan. Agen-agen penghambat digunakan untuk tujuan ini termasuk warna celupan, garam air empedu, alkohol, cuka, dan antibiotik. Sebuah contoh dari sebuah mesia selektif adalah fenil etil alkohol.
1.2. Jenis-jenis Media1. Berdasarkan konsistensinya, media dapat dibagi menjadi :a. Media padat, yaitu media yang berbentuk padat. Contoh : media kentang, nasi, wortel, dan lain-lain.
b. Media cair, yaitu media yang berbentuk cair. Contoh : media susu, nutrient broth (bouilon daging), glukosa pepton, dan lain-lain.
c. Media semi padat, yaitu media yang dapat berbentuk padat apabila suhunya dingin, dan dapat berbentuk cair apabila suhunya panas. Media ini merupakan media yang dibubuhi atau ditambah agar-agar sebagai bahan pemadat.2. Berdasarkan komposisi/susunannya, media dapat dibagi menjadi a. Media sintesis, yaitu media yang dapat diketahui dengan pasti susunan kimianya. Contoh : Bushnel-Hazs yang terdiri dari : 1000 mL air suling, 0,2 gram MgSO4, 0,002 gram CaCl2, 1 gram KH2PO4, 1 gram NH4NO3, 2 tetes larutan FeCl3.b. Media non sintesis, yaitu media yang tidak dapat diketahui susunan kimianya , merupakan bahan-bahan alami seperti kentang, nutrien kaldu, telur, dan lain sebagainya. 3. Berdasarkan sifatnya, media dapat dibagi menjadi :a. Media Umum, yaitu media yang dapat digunakan untuk pertumbuhan dan perkembangan bermacam-macam mikroba.b. Media Khusus, yaitu media yang hanya dapat digunakan untuk menumbuhkan satu macam mikroba. Contoh : Endoagar, yaitu suatu media khusus yang digunakan untuk menumbuhkan Eschericia coli. Dalam endoagar sebenarnya dapat tumbuh bakteri lain, akan tetapi dengan melihat warnanya, dapat diketahui Eschericia coli yang berwarna kuning merah seperti warna emas.c. Media Eksklusif, yaitu media yang hanya dapat tumbuh pada satu jenis bakteri, sedang bakteri lain akan mati.4. Berdasarkan fungsi dan kegunaannya, media dapat dibagi menjadi:
a. Media selektif, Media ini memberi nutrien yang cukup untuk pertumbuhan satu mikroba dapat menghambat pertumbuhan mikroba lain yang tidak diharapkan yang juga dapat tumbuh pada media ini. Contoh : Sabourouds glucose agar, mempunyai derajat keasaman (pH) 5,6 digunakan untuk mengisolasi fungsi. b. Media diferensial, media ini digunakan untuk menumbuhkan mikroba tertentu dan dapat membedakan berbagai macam jenis mikroba.c. Media penguji (Assay media), media ini digunakan untuk pengujian viamin-vitamin, asam-asam amino, dan antibiotik.d. Media untuk perhitungan bakteri, media ini digunakan untuk menghitung jumlah bakteri yang terdapat dalam suatu bahan.Masih banyak lagi tipe-tipe media lain, seperti Maintainance Media, semi solid media, dan lain-lain. Berikut ini contoh media selektif dan media differensial yang sering digunakan di dalam laboratorium mikrobiologi.2. Penyakit TuberkulosisTuberkulosis adalah penyakit menular langsung yang disebabkan oleh Mycobacterium tuberculosis, bakteri ini berbentuk batang dan bersifat tahan asam sehingga dikenal juga sebagai Batang Tahan Asam (BTA). Bakteri ini pertama kali ditemukan oleh Robert Koch pada tanggal 24 Maret 1882, sehingga untuk mengenang jasanya bakteri tersebut di beri nama Baksil Koch. Bahkan, penyakit TBC dan paru-paru kadang di sebut sebagai Koch Pulmonum (KP). (Kapita Selekta Kedokteran, 2000).
Penyakit TBC (Tuberkulosa) merupakan penyakit kronis (menahun) telah lama di kenal oleh masyarakat luas dan ditakuti, karena menular. Namun demikian TBC dapat disembuhkan dengan memakan obat anti TB dengan betul yaitu teratur sesuai petunjuk dokter atau petugas kesehatan lainnya. (Depkes RI, 2003).
Penderita TB Paru kategori I adalah TB Paru yang tergolong dalam penderita kasus baru dengan hasil pemeriksaan dahak pewarnaan langsung BTA positif (+) atau BTA negatif (-) namun dengan lesi yang luas.Resistensi primer adalah strain Mycobacterium tuberculosis yang mengalami resisten terhadap obat anti tuberkulosis dimana pasien yang tidak memiliki riwayat pengobatan sebelumnya atau telah mendapat pengobatan antituberkulosis dengan lamanya kurang dari 1 (satu) bulan.
Kerentanan penyakit Tuberkulosis terjadi karena daya tahan tubuh yang rendah yang disebabkan oleh karena gizi yang buruk, terlalu lelah, kedinginan, dan cara hidup yang kurang teratur. Kelompok umur yang biasa diserang berada dalam kelompok usia produktif antara 16-64 tahun, yang memiliki pola hidup tidak sehat serta kurang gizi. Sehingga biasanya penyakit ini menyerang masyarakat rendah yang berada golongan sosial ekonomi rendah, dimana keadaan sosial ekonomi rendah, terdapat kemiskinan dan kurangnya pengetahuan tentang cara-cara hidup yang sehat. Akan tetapi bukan berarti masyarakat golongan menengah keatas dapat terbebas dari penyakit Tuberkulosis. (Depkes RI, 2003). 2.1. Mycobacterium tuberculosisMycobacterium tuberculosis berbentuk batang lurus atau sedikit melengkung, tidak berspora dan tidak berkapsul. Bakteri ini berukuran lebar 0,30,6 mm dan panjang 14 mm. Dinding M. tuberculosis sangat kompleks, terdiri dari lapisan lemak cukup tinggi (60%). Penyusun utama dinding sel M. tuberculosis ialah asam mikolat, lilin kompleks (complex-waxes), trehalosa dimikolat yang disebut cord factor, dan mycobacterial sulfolipids yang berperan dalam virulensi. Asam mikolat merupakan asam lemak berantai panjang (C60 C90) yang dihubungkan dengan arabinogalaktan
oleh ikatan glikolipid dan dengan peptidoglikan oleh jembatan fosfodiester. Unsur lain yang terdapat pada dinding sel bakteri tersebut adalah polisakarida seperti arabinogalaktan dan arabinomanan. Struktur dinding sel yang kompleks tersebut menyebabkan bakteri M. tuberculosis bersifat tahan asam, yaitu apabila sekali diwarnai akan tetap tahan terhadap upaya penghilangan zat warna tersebut dengan larutan asamalkohol.
B. Kerangka Berfikir Teoretis
Pada proses pembuatan media bakteri sangat berpengaruh terhadap pertumbuhan bakteri yang akan digunakan, oleh karena itu, pembuatan media bakteri dipengaruhi oleh kadar pembuatannya sesuai dengan kebutuhan. Pemilihan media dalam penanaman bakteri disesuaikan dengan kondisi yang ada. Pembuatan cat bakteri harus sesuai takaran pula karena bila tidak akan mempengaruhi pengecatan bakteri yang akan diamati. Bakteri yang digunakan dalam proses ini bermacam-macam, misalnya bakteri TBC, bakteri E-Coli dan bakteri yang ada di lingkungan sekitar.Pembuatan media bakteri dan pembuatan cat bakteri dilakukan di Laboratorium media Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta, teknik pengambilan data dilakukan dengan praktik langsung di Lboratorium hal-hal yang dilakukan di Laboratorium tersebut diantaranya adalah penanaman bakteri, pengecatan bakteri, pengidentifikasian bakteri dan pengidentifikasian virus TBC dilakukan di Laboratorium Mikrobiologi Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta. Selanjutnya data yang diperoleh dari laboratorium diserahkan kepada pihak-pihak yang bersangkutan seperti pada Puskesmas, Instansi-instansi kesehatan, rumah sakit dan yang bersangkutan dengan hal-hal kesehatan.BAB III
PELAKSANAAN KEGIATANA. Lokasi PKL
1. Nama Laboratorium
: Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta Propinsi DIY
2. Alamat Laboratorium : Jalan Ngadinegaran MJ III/62 Yogyakarta B. Waktu Pelaksanaan
Praktik Kerja Lapangan dilaksanakan pada tanggal 4 Agustus 2014 sampai dengan 4 September 2014, dengan jam kerja senin sampai dengan sabtu.C. Metode Pengumpulan Data
Dalam pengumpulan data untuk membuat laporan PKL ini, metode yang digunakan antara lain :
1. Metode observasi
Penulis secara langsung mengamati dan melakukan proses pembuatan media, pengidentifikasian bakteri, dan penanaman bakteri
2. Metode praktik kerja
Penulis mendapatkan pengetahuan dan dapat mebumpulkan data dengan cara melakukan kerja prakti di laboratorium. Kegiatan praktik yang dilakukan adalah membuat media, penanaman bakteri, pengujian jamur dan kuman pada kosmetik.
3. Metode interview
Pada metode ini digunakan penulis untuk mengumpulkan data dengan cara menanyakan langsung kepada tenaga ahli, laboran dan juga karyawan.
4. Metode literature
Metode literature ialah metode yang dilakukan sepanjang pelaksanaan PKL untuk memperoleh bahan atau data dari sumber tertilis sebagai dasar atau acuan teori dalam melaksanakan dan membuat laporan PKL, sebagai pembanding antara praktik kerja di lapangan dengan teori yang dipelajari. Referensi penulis yang didapatkan dari perpustakaan Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta, buku petunjuk praktik di Laboratorium Media dan Laboratorium Mikrobiologi di Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta, perpustakaan jurusan Biologi UNNES dan media internet.D. Instrumen PKL
Alat-alat yang dipakai dalam Praktik Kerja Lapangan di Balai Laboratorium Media dan Laboratorium Mikrobiologi meliputi :
1. Autoclave
2. Oven
3. Timbangan
4. Waterbath
5. Magnetic stirrer
6. Lemari es penyimpan media
7. Erlenmeyer
8. Beker glass
9. Labu ukur
10. Gelas ukur
11. Tabung reaksi
12. Kapas
13. Cawan petri
14. Dispente
15. Kertas saring
16. Tabung durham
17. Corong gelas
18. Spatula
19. Autolaktiv
BAB IV
HASIL PRAKTIK KERJA LAPANGANDari hasil pelaksanaan Praktik Kerja Lapangan di Laboratorium mikrobiologi dan media yang telah dilakukan oleh penulis, maka diperoleh data mengenai profil BLK Yogyakarta dan pembuatan beberapa media bakteri serta identifikasi bakteri dan kuman.
A. Profil Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta
Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta adalah instansi pelayanan kesehatan milik Pemerintah Derah Propinsi DIY berdiri sejak tanggal 25 Januari 1950 merupakan laboratorium type A.
Sejak berlakunya otonomi daerah Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta yang sebelumnya merupakan UPT Departemen Kesehatan diserahkan kepada Pemerintah Daerah Propinsi DIY yang merupakan unit Pelaksana Teknis Dinas Kesehatan di lingkungan Pemerintah Daerah Propinsi DIY.
1. Sejarah
Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta pada awalnya sebalai Laboratorium Assaineering DIY yang berada di bawah Fakultas Teknik Universitas Gadjah Mada Yogyakarta. Pada tanggal 25 Januari 1950 laboratorium ini menerima secara resmi gabungan bagian Kimia Laboratorium Pusat Klaten dan disebut Laboratorium Umum atau Laboratorium Kesehatan Yogyakarta (SK. Kem Kes. Nomor: 126/secr.Dj/64 tanggal 25 Januari 1950) beralamat di Polowijan, Ngasem, Yogyakarta, memiliki bagian kimia (termasuk hortus medicus di Tawangmangu) , bagian Bakteriologi, bagian Serologi dan bagian Kesehatan Teknik yang dipimpin oleh Prof.Dr.Sarjidto.Pada tanggal 1 januari 1952 nama Laboratorium diubah menjadi Laboratorium Kesehatan Yogyakarta (Labkesda) menunjuk wilayah kerja yang meliputi Daerah Istimewa Yogyakarta dan Jawa Tengah bagian selatan yang dipimpin oleh M. Soepadi Sastrodarsono dan supervisor Prof. Dr. Sardjito (SK Kem. Kes Nomor: 8848/UK/III, tanggal 24 Februari 1952). Pada bulan Agustus 1952 bagian Kimia, bagian Bakteriologi dan Serologi pindah menempati lokasi di Jl. Malioboro 16 Yogyakarta.
Pada tanggal 1 Juli 1953 bagian Kesehatan Teknik bergabung dengan Laboratorium Ilmu Kesehatan Teknik Bandung. Sejak 1 Maret 1960 Laboratorium Kesehatan Daerah menempati bekas Dalem Ngadinegaran MD.VII/48 Yogyakarta atau sekarang Ngadinegaran MJ.III/62 Yogyakarta bersama dengan sekolah Penjenang Kesehatan Tingkat F (SPKF).
Pada bulan Juni 1974 nama Laboratorium Kesehatan Daerah berubah menjadi Laboratorium Kesehatan Yogyakarta pada tanggal 28 April 1978, Laboratorium Kesehatan Yogyakarta berubah menjadi Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta (SK Men. Kes RI Nomor 142/Menkes/SK/IV/1978) sesuai dengan undang-undang Nomor 22 tahun 1999 tentang Pemerintah Daerah dan Peraturan Pemerintah Nomor 25 tahun 2000 tentang kewenangan emerintah dan Propinsi sebagai Daerah Otonomi, maka Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta yang semula unit pelaksana teknis yang dikelola oleh pusat melalui kantor wilayah departemen kesehatan Propinsi DIY diserahkan kepada Pemerintah Propinsi DIY. Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta adalah Balai Laboratorium Kesehatan yang merupakan Unit Pelaksana Teknis Daerah di lingkungan Pemda Yogyakarta yang menyelenggarakan pelayanan pemeriksaan laboratorium kesehatan, berada di bawah dan bertanggungjawab kepada Kepala Dinas Kesehatan Propinsi DIY. Periode Kepemimpinan Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta
a. Tahun 1950-1951: Prof. Dr. Sardjito
b. Tahun 1952-1961: M. Soepadi S.
c. Tahun 1962-1963: R. Noerudin
d. Tahun 1964-1968: R.M.Jatman
e. Tahun 1969-1992: Dr. Soetrisno Eram, MPH.
f. Tahun 1993-1998: Dr. Drajat nenrosuwito,MSc.
g. Tahun 1999-2000: Dr.dr. Harundriyo, MPH.
h. Tahun 2000-2001: Dr. Bambang Sugiarto,MPHM,DTMH.
i. Tahun 2003-2005: Dr. M. Kristi Indrati S.
j. Tahun 2005-2006: Dr. Sri Sudardjijah
Tahun 2007-sekarang: Drg. H.M. Taufiq AK,M.Kes.
2. Visi, Misi dan Tujuana. Visi
Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta sebagai pusat pelayanan laboratorium dan laboratorium rujukan berkualitas mendukung terbentuknya masyarakat sehat.b. Misi
1. Memberikan pelayanan secara profesional, terjangkau semua lapisan masyarakat2. Menerapkan sistem mutu laboratorium
3. Berperan dalam meningkatkan kesehatan masyarakat
4. Berperan dalam meningkatkan sumber daya manusia di bidang kesehatan
5. Mengembangkan dan menerapkan ilmu pengetahuan dan teknologi
c. Tujuan
1. Meningkatkan kualitas pelayanan pemeriksaan laboratorium sehingga dapat memberikan pelayanan yang tepat, cepat, akurat dapat menunjang ketepatan diagnosa dan dapat memberikan kepuasan pelanggan.
2. Meningkatkan cakupan dan jangkauan pelayanan sehingga mudah diterima oleh masyarakat, terjangkau dan dapat menjangkau semua lapisan masyarakat.
3. Meningkatkan kesehatan masyarakat.
4. Meningkatkan kualitas cakupan pembinaan sehingga dapat memberikan pembinaan secara proffesional serta meningkatkan SDM tenaga kesehatan yang berkualitas.
5. Meningkatkan penelitian yang didukung Sumber Daya Manusia (SDM) profesional yang berpengalaman.3. Fungsi dan Tugas Balai Laboratorium Kesehatan YogyakartaSesuai dengan Keputusan Gubernur Derah Istimewa Yogyakarta Nomor 160 Tahun 2002 tentang Uraian Tugas dan Tata Kerja Unit Pelaksana Teknis Dinas Kesehatan Propinsi Yogyakarta. Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta Mempunyai Fungsi dan Tugas, sebagai berikut :
a. FungsiBalai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta mempunyai fungsi sebagai unsur pelaksana operasional sebagian kewenangan dinas dalam bidang pelayanan laboratorium kesehatan masyarakat melalui kegiatan pemeriksaan laboratorium dan kegiatan rujukan
b. Tugas1. Merencanakan dan melaksanakan penyediaan sarana dan prasarana.2. Mengelola sarana dan prasarana melalui kegiatan pemeliharaan peralatan.3. Melayani pemeriksaan klinis atau medis.4. Melayani kesehatan masyarakat individu dan institusi.5. Melayani pelayanan higiene sanitasi.6. Menyelenggarakan pembinaan laboratorium kesehatan.7. Menyelenggarakan kerjasama pelatihan.8. Melayani konsultasi bidang kesehatan yang berkaitan dengan hasil laboratorium.9. Melaksanankan ketatausahaan.4. Struktur OrganisasiStruktur organisasi Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta terdiri:1. Kepala Balai Laboratorium Kesehatan.2. Sub Bagian Tata Usaha3. Kelompok Jabatan Fungsional.4. Seksi Mikrobiologi dan Immunologi.5. Seksi Kimia Kesehatan.6. Seksi Patologi.7. Seksi Media dan Reagensia.5. Kemampuan Pemeriksaan Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta Seksi Mikrobiologi dan Immunologi1. Bakteriologi a. Identifikasi mikroorganisme (aerob dan anaerob) secara mikroskopik, biakan maupun percobaan hewan.b. Tes kepekaan (resistensi).c. Angka kuman, pemeriksaan infeksi nosokomial.d. Pemeriksaan bakteriologi air, makanan atau minuman, bahan obat, kain kasa.e. Pemeriksaan bakteriologik keracunan makanan (dari bahan makanan dan minuman, muntahan darah, tinja, air bersih).2. Parasitologia. Identifikasi parasit dari preparat direk (amoeba, cacing, Plasmodium malaria, jamur, dll.)b. Biakan dan tes kepekaan (jamur, larva, cacing, dll.)3. Virologia. Isolasi dan identifikasi enterovirus (polio, Echo, Coxsackie) dengan biakan jaringan.b. Identifikasi flu burung secara PCR.4. Immunologia. Pemeriksaan antibody terhadap jasad renik.b. Pemeriksaan antibody terhadap virus.c. Pemeriksaan antibody lain. Seksi Patologi1. Hematologi a. Hematologi rutin, hematologi lengkap.b. Morfologi sel-sel darah.c. Pemeriksaan fungsi koagulasi, hemostasis, bank darah, (CT/BT, PPT, Coombs test,dll).d. Pemeriksaan LE sel.2. Kimia Klinika. Bahan darah, cairan tubuh, LCS,tinja,Kolesterol,Trigliserida, Apo A/B, Protein.b. Enzim SGOT/SGPT/AP, CPK, CKMB, LDH, dll.c. Hormon T3, T4.d. Elektrolit.e. Urinalisa lengkap.f. Analisa sperma.g. Analisa batu saluran kemih.3. Medikal ForensikMemeriksa sampel dari hasil otopsi untuk mengetahui penyebab kematian pasien bekerjasama dengan kepolisian dan RSUP Dr. Sardjito Yogyakarta.
Seksi Kimia Kesehatan1. Toxicologia. Pemeriksaan toksikologi logam berat dalam spesimen manusia.b. Toksikologi obat dalam spesimen manusia (narkotika, alkohol, psikotropika, dan zat aditif lainnya).2. Kimia Lingkungana. Pemeriksaan kimia organik atau anorganik terhadap kualitas air minum, air bersih, air kolam renang, air limbah, dll.b. Pemeriksaan kualitas makanan, minuman dan bahayanya.c. Pemeriksaan kandungan kimia tertentu dalam makanan dan minuman. Seksi Media dan ReagensiaUntuk mendukung kebutuhan media dan reagensia Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta memiliki seksi media dan reagensia dengan kegiatan.
1. Membuat media dan reagensia yang rutin digunakan untuk kebutuhan pemeriksaan seksi mikrobiologi dan seksi lainnya.2. Melaksanakan uji coba laboratorium dengan menggunakan hewan percobaan.3. Pembuatan cat Ziehl Nielsen.4. Melaksanakan pencucian dan sterilisaasi alat-alat gelas untuk keperluan rutin.5. Menyediakan hewan-hewan coba untuk keperluan penelitian.6. Peningkatan Mutu PelayananDalam upaya peningkatan untuk memberikan pelayanan peeriksaan laboratorium yang berkualitas sesuai dengan kebutuhan masyarakat dan berorientasi pada kepuasan pelanggan, maka Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta sejak tahun 2005 telah diakreditasi oleh Komite Akreditasi Laboratorium Kesehatan (KALK) berdasarkan SK Menkes No. 943 tahun 2002 dan mendapatkan status Akreditasi penuh sesuai dengan SK Dinas Kesehatan Propinsi DIY pada tanggal 14 Januari 2006 No. 445/0299/IV.2
Disamping itu Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta saat ini dalam persiapan untuk akreditasi oleh Komite Akreditasi Nasional sesuai dengan standard ISO 17025 tahun 2005 yang diharapkan pada tahun2007 sudah memperoleh sertifikat akreditasi dari KAN.
7. Aspek Teknis
a. Alur SampelSampel diterima kemudian masuk ke sub seksi yang bersangkutan, dilakukan preparasi sampel (penyimpanan, pengawetan, dan pengerjaan), analisa hasil. Hasil diberikan kepada kepala urusan data pengetikan, kepala seksi pengetikan, kepala seksi pengecekan, kepala seksi atau kepala BLK, kepala urusan data pengarsipan, hasil diberikan kepada pengirim sampel.
b. Keselamatan Kerja
Maksud dan tujuan untuk mencegah terjadinya kecelakaan sebagai akibat dari pekerjaan baik bagi petugas maupun orang lain, bahkan lingkungan serta menghindari kerusakan alat sebagai akibat dari kelalaian petugas.
1. Pembuatan tanda-tanda bahaya.
2. Kotak P3K.
3. Alat pemadam kebakaran.
4. Pemakaian jas praktik, sarung tangan dan masker.
5. Sterilisasi meja kerja.
6. Pencegahan alat-alat gelas dilakukan terlebih dahulu dengan merendamnya di dalam larutan anti septic.
7. Bekerja sesuai dengan protap.c. Pengolahan Limbah Laboratorium
Untuk limbah yang sifatnya infeksius diberi dengan desinfektan terlebih dahulu baru kemudian dibuang kesaluran pembuangan limbah selanjutnya dilakukan pengolahan limbah lebih lanjut dengan cara aerosi, apabila limbah cair sudah aman selanjutnya dilarikan ke saluran lingkungan.d. Pemantapan Mutu atau Quality ControlBalai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta telah melakukan kewajibannya dalam upaya mempertahankan mutu pelayanan berupa kegiatan pemantapan mutu internal dan eksternal.
1. Pemantapan Mutu Internal (PMI)
a. Pemantapan Mutu Internal Mikrobiologi dan immunologi meliputi:
Pemantauan suhu almari es, incubator, deepfreezer, waterbath. Penyertaan bahan atau strain kuman untuk kontrol kualitas pemeriksaan.
Uji kualitas Media Reagensia dan zat warna
Pemeliharaan dan kalibrasi terhadap alat laboratorium seperti miro elisa, centrifuge, almari es,dll.
Pemantauan sterilitas ruang pemeriksaan sacara rutin.
b. Pemantapan Mutu Internal Kimia Kesehatan meliputi:
Pencatatan atau pemantauan suhu almari es.
Kalibrasi turbidimetri.
Kalibrasi alat GC.
Kalibrasi alat AAS.
c. Pemantapan Mutu Internal Patologi meliputi :
Pencatatan atau pemantauan suhu almari es.
Kalibrasi fotometer.
Pemeriksaan gula.
Pemeriksaan SGOT.
Pemeriksaan SGPT.
Pemeriksaan kreatin.
Pemeriksaan ureum.
Pemeriksaan cholesterol.
Pemerisaan trigliserid.
Pemeriksaan uric acid.
d. Pemeriksaan Mutu Internal Media dan Reagensia meiputi :
Monitoring suhu oen.
Monitoring suhu autoclave.
Monitoring suhu refrigerator.
Indicator autoclave tape.
Uji kualitas media dengan kuman kontrol positif dan negatif.
2. Pemantapan Mutu Eksternal (PME)
a. Pemantapan Muru Eksternal Mikrobiologi biakan dan uji kepekaan.
Jumlah peserta 59 laboratorium yang terdiri dari 25 BLK di Indonesia, 33 laboratorium RS di Indonesia dan 1 Laboratorium FKUI di Jakarta. Kegiatan tersebut selama tahun 2002 dilaksanakan I periode dengan penilaian dan evaluasi dilakukan oleh Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta dan feed back dikirim ke Dinkes Propinsi DIY dan ke Ditlabkes sebagai laporan.b. Pemantapan Mutu Eksternal Regional (PMER) meliputi :
PMER- Urinalisa dengan peserta sebanyak 40 laboratorium Puskesmas Kab/Kota dan dilaksanakan I periode.
PMER- Kimia Klinik dengan peserta sebanyak 60 terdiri dari 54 laboratorium RSU di DIY dan Jawa Tengah dan 6 laboratorium RS Swasta di Yogyakarta dilakukan I periode.
PMEM- TB, malaria dan telor cacing dengan peserta 70 laboratorium puskesmas dan Rumah Sakit Kab/Kota di Propinsi DI Yogyakarta dilakukan I tahap. PME Pemantapan Kualitas air dengan peserta sebanyak 15 laboratorium dan dilakukan I periode.
Disamping sebagai penyelenggara, BLK Yogyakarta juga sebagai peserta Pemantapan Mutu Nasional dan Internasional sebagai berikut :
Nasional
1. Pemantapan Mutu Bidang Immunologi yaitu HBs Ag, Anti HIV, VDRL dan Widal.
2. Pemantapan Mutu Bidang Toksikologi dan Kimia Air.
3. Pemantapan Mutu Bidang Kmia Klinik dan Hematology.
Internasional
1. Pemantapan Mutu Bidnag Mikrobiologi atau Immunologi yaitu isolasi virus campak oleh CDC di Atlanta serta IgM campak dan IgM Rubella oleh WHO SEARO India-Australia.
e. Peningkatan Mutu Pelayanan
Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta dalam upaya meningkatkan mutu pelayanannya telah mengikuti akreditasi yang dilaksanakan oleh Komite Akreditasi Laboratorium Kesehatan (KAKL) dari hasil audit memperoleh nilai akhir 88,66% sehingga memiliki status penuh sesuai SK Kepala Dinas Kesehatan Propinsi DIY tanggal 14 Januari 2006 No.445/0299/IV.2.
f. Kegiatan Unggulan
1. Satu-satunya Laboratorium Kesehatan di Indonesia yang mampu membuat antigen F1 untuk pemeriksaan Serologi Pes yang hasilnya setara dengan produk dari ford Collins Amerika Serikat.
2. Memelihara 302 jenis strain kuman yang sangat bermanfaat untuk penelitian/pendidikan dan program Pemantapan Mutu Eksternal Mikrobiologi.
3. Pemeriksaan dan isolasi virus campak (untuk wilayah DIY dan Jawa Tengah).
4. Sebagai Laboratorium rujukan pemeriksaan NAPZA.
5. Penyelenggara Pemantapan Mutu Eksternal (PME) / Uji profisiensi:
a. Tingkat Nasional
PME isolasi dan identifikasi kuman
Uji kepekaan kuman terhadap antibiotik (peserta Balai Labkes seluruh Indonesia dan Laboratorium RS).
b. Tingkat Regional
PME pemeriksaan kadar gula, kolesterol, SGOT, Total protein dan bilirubin (peserta RS pemerintah dan swasta di wilayah propinsi DIY dan Jawa Tengah)
c. Tingkat Propinsi
PME pemeriksaan mikroskopis BTA, malaria dan telur cacing serta PME pemeriksaan urinalisa (peserta laboratorium Puskesmas dan RSUD di Wilayah Propinsi DIY).B. Pembuatan Media Bakteri Serta Cara Identifikasi Bakteri TBC
1. Pembuatan Media Bakteri
a. Nutrient Agar (250 mili liter)
Fungsi :
Sebagai media penanaman bakteri
Untuk mengidentifikasi dan mencari ciri khas bakteri
Bahan :
Nutrient agar 7 gram Aquades 250 ml
Alat :
Autoclave
Dispenset
Tabung reaksi
Sendok penyu Timbangan
Tabung erlenmeyer Gelas ukur
Persiapan Kerjs
1. Membersihkan meja dengan alkohol2. Membersihkan timbangan dan memposisikan pada angka nol
3. Mengisi autoclave dengan air sebelum digunakan
4. Menyiapkan tabung reaksi dan erlenmeyer
Cara Kerja :
1. Menimbang 7 gram serbuk nutrient agar lalu dimasukkan kedalam erlenmeyer.
2. Menambahkan 250 ml aquades, dikocok sampai larut dan homogen.3. Dimasukkan dalam waterbath, lalu dipanaskan diatas kompor hingga larut.
4. Dituang dalam tabung reaksi, ditutup dengan kapas, dikumpulkan lalu diikat dan kemudian ditutup dengan kertas.5. Larutan disterilkan dengan autoclave pada suhu 1210 C selama 15 menit.
6. Setelah dingin diambil dan diletakkan dalam posisi miring, lalu didinginkan sampai suhu 500C.
Pembahasan : Nutrien Agar adalah medium untuk uji air dan produk dairy. NA juga digunakan untuk pertumbuhan mayoritas dari mikroorganisme yang tidak selektif, dalam artian mikroorganisme heterotrof. Media ini merupakan media sederhana yang dibuat dari ekstrak beef, pepton, dan agar . NA merupakan salah satu media yang umum digunakan dalam prosedur bakteriologi seperti uji biasa dari air, sewage, produk pangan, untuk membawa stok kultur, untuk pertumbuhan sampel pada uji bakteri, dan untuk mengisolasi organisme dalam kultur murni. Untuk komposisi nutrien agar adalah ekstrak beef, pepton, NaCl, air destilat, dan agar. Bahan-bahan yang diperlukan dalam pembuatan media agar ini adalah serbuk nutrien agar dan aquades. Aquades berfungsi untuk melarutkan, selain itu dibutuhkan beberapa alat diantaranya yaitu kapas dan kertas payung atau dapat pula diganti dengan aluminium foil, alat ini digunakan agar larutan tidak terkontaminasi oleh suhu luar, autoclave digunakan sebagai alat penyeteril.b. Briliant Green Lactose Bile
Fungsi :
Sebagai media penanam bakteri
Untuk mengidentifikasi dan mencari ciri khas bakteri
Bahan
46 gram BGLB
1000 ml aquades
Alat
Autoclave
Dispenset Sendok penyu
Erlenmeyer
Tabung reaksi
Kapas
Auto laktif
Cara Kerja
1. Menimbang 46 gram BGLB kemudian dimasukkan kedalam tabung erlenmeyer
2. Menambahkan 1000 ml aquades
3. Larutan kemudian dikocok sampai homogen
4. Memasukkan dalam dispente lalu di stel pada ukuran 10 ml
5. Kemudian dimasukkan dalam tabung reaksi
6. Setelah itu ditutup dengan kapas kemudian disterilkan didalam autoclave
Pembahasan :
BGLB (Briliant Green Lactose Bile) merupakan media penumbuh bakteri. Bahan utamanya adalah serbuk BGLB. Langkah kerja dalam pembuatan BGLB adalah menimbang 46 larutan BGLB dan memasukkannya kedalam tabung erlenmeyer. Selanjutnya dalam erlenmeyer dimasukkan 1000 ml aquades setelah itu dikocok sampai homogen, setelah larut dimasukkan dalam dispente yang distel pada ukuran 10 ml. Larutan BGLB yang telah homogen tersebut dimasukkan kedalam tabung reaksi sebanyak 10 ml. Setelah tabung terisi, langkah selanjutnya menutup tabung reaksi dengan kapas dan disterilkan didalam autoclave. Untuk mengetahui bahan0bahan yang dibuat telah steril atau belum pada bagian erlenmeyer diberi kertas autolaktiv, apabila bahan sudah steril maka kertas laktiv akan berwarna kehitaman yang sebelumnya berwarna coklat. c. Lauryl Triptose Sulfat Broth (single)Fungsi :
Sebagai media penanam bakteri
Untuk mengidentifikasi dan mencari ciri khas bakteri
Bahan :
2000 ml aquades
72 gram serbuk LTSB
Alat :
Dispenset Erlenmeyer
Tabung reaksi
Kapas
Cara kerja
1. Menimbang 72 gram LTSB kemudian dimasukkan kedalam erlenmeyer2. Kedalam erlenmeyer ditambahkan aquades 2000 ml
3. Tabung dikocok sampai larutan homogen
4. Memasukkan larutan dalam tabung reaksi yang telah diisi tabung sebanyak 10 ml
Pembahasan :
Pembuatan LTSB sebagai media untuk mendeteksi kehadiran koliform dalam air, makanan, dan produk susu. Selain itu media ini digunakan sebagai kaldu pemerkaya (pre-enrichment broth) untuk Salmonellae. Laktosa menyediakan sumber karbohidrat yang dapat difermentasi untuk organisme koliform. Pertumbuhan dengan pembentukan gas adalah presumptive test untuk koliform. Komposisi media Lactose Broth terdiri dari 0,3% ekstrak beef, 0,5% pepton, dan 0,5% laktosa. Pepton dan ekstrak beef menyediakan nutrien esensial untuk metabolisme bakteri. Bahan-bahan yang digunakan dalam pembuatan LTSB adalah serbuk LTSB dan 2 liter aquades sebagai pelarut. Pembuatan LTSB single ini caranya tidak jauh beda dengan pembuatan nutrien agar yaitu langkah pertama adalah menimbang 72 gram serbuk LTSB lalu memasukkan kedalam tabung erlenmeyer. Menambahkan aquades kedalam erlenmeyer sebanyak 2 liter, setelah itu, larutan kemudian dihomogenkan dengan dikocok. Memasukkan larutan yang telah homogen kedalam dispente dan mengisikannya kedalam tabung reaksi yang berisi tabung durham dengan voume 10 ml. Setelah LTSB dimasukkan kedalam tabung reaksi selanjutnya di tata dan dimasukkan kedalam autoclave. d. Lauryl Triptose Sulfat Broth (triple)Fungsi :
Sebagai media penanam bakteri
Untuk mengidentifikasi dan mancari ciri khas bakteriBahan :
17,8 gram LTSB
Aquades 500 ml
Alat
Dispente
Erlenmeyer
Tabung reaksi
Kapas
Gelas ukur
Cara Kerja
1. Menimbang 7,8 gram LTSB kemudian dimasukkan kedalam erlenmeyer .
2. Kedalam erlenmeyer ditambahkan 500 ml aquades
3. Mengocok tabung sampai larutan yang ada di tabung homogen
4. Memasukkan larutan dalam tabung reaksi yang telah diisi tabung durham sebanyak 5 ml
Pembahasan :
Pembuatan Lauryl Triptose Sulfat Broth (LTSB) triple cara nya tidak jauh berbeda dengan Lauryl Triptose Sulfat Broth single. Sama hal nya dengan LTSB single, LTSB triple berfungsi sebagai media pertumbuhan bakteri. Bahan-bahan yang digunakan dalam pembuatan medium ini adalah LTSB serbuk dan aquades 500 ml. Langkah pertama yang dilakukan saat akan membuat larutan ini adalah menimbang 17,8 gram serbuk LTSB kemudian dilarutkan dengan aquades 500 ml dalam tabung erlenmeyer setelah itu dihomogenkan dengan cara dikocok. Larutan kemudian dimasukkan dalam dispente dan diisikan kedalam tabung reaksi 5 ml.e. Saburout Dextrosa AgarFungsi : Sebagai media penanam bakteri (media pertumbuhan) Untuk mengidentifikasi dan mencari ciri khas bakteriBahan
Aquades 500 ml
Serbuk SDA
Alat
Dispente
Timbangan
Erlenmeyer
Tabung reaksi
Cara Kerja
1. Menimbang 32,5 gram SDA kemudian dimasukkan kedalam labu erlenmeyer
2. Menambahkan 500 ml aquades
3. Larutan dihomogenkan dengan mengocok labu erlenmeyer
4. Memanaskan erlenmeyer yang berisi larutan kedalam waterbath
5. Setelah larutan bening kemudian diangkat dari waterbath setelah itu dimasukkan kedalam tabung reaksi dalam keadaan masih panas
6. Tabung ditutup dengan kapas, kemudian didinginkan dengan posisi dimiringkan
7. Ditaruh didalam tempat yang steril
Pembahasan :
SDA digunakan untuk pertumbuhan bakteri. Di bagian Laboratorium Media di Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta. Adapun bahan-bahan yang digunakan adalah aquades dan serbuk SDA. Langkah pertama yang dilakukan adalah menimbang 32,5 gram SDA kemudian dimasukkan dalam erlenmeyer dan ditambahkan 500 ml aquades kemudian dikocok sampai homogen, setelah itu larutan dipanaskan dalam waterbath setelah larut dan larutan berwarna menjadi bening kemudian dimasukkan dalam tabung reaksi dalam keadaan panas kemudian tabung dimiringkan. Setelah memadat medium kemudian ditempatkan pada ruangan dengan suhu -150 C supaya tetap steril.f. EC Bouillon
Fungsi :
Sebagai media penanam bakteri
Untuk mengidentifikasi dan mencari ciri khas bakteri
Bahan
37 gram EC Bouillon
1000 ml aquades
Alat
Autoclave
Dispente
Erlenmeyer
Tabung reaksi
Kapas
Autolaktiv
Cara kerja
1. Menimbang 37 gram EC Bouillon kemudian dimasukkan kedalam erlenmeyer
2. Menambahkan 1000 ml aquades kedalam erlenmeyer
3. Larutan dihomogenkan dengan cara di kocok
4. Larutan dimasukkan dalam dispente kemudian di stel pada ukuran 10 ml
5. Memasukkan larutan dalam atbung reaksi
6. Tabung reaksi ditutup dengan kapas kemudian disterilkan dalam autoclave
Pembahasan:EC Bouillon digunakan sebagai media pertumbuhan bakteri. Bahan-bahan utamanya untuk membuat media ini adalah aquadest 1000 ml dan serbuk EC Bouillon 37 gram. Langkah pertama yaitu menimbang 37 gram EC Bouillon kemudian dimasukkan dalam erlenmeyer dan dilarutkan kedalam aquades 1000 ml setelah itu di kocok agar homogen. Setelah homogen dimasukkan dalam dispente dan kemudian larutan diisikan kedalam tabung reaksi sebanyak 10 ml, setelah itu tabung ditutup dengan kapas lalu disterilkan dalam autoclave.g. SSFungsi
Sebagai media untuk penanaman bakteri
Untuk mengidentifikasi dan mencari ciri khas bakteriBahan
250 ml aquades
16 gram ss
Alat
Dispente
Timbangan
Erlenmeyer
Cawan petri
Cara kerja
1. Menimbang 16 gram ss lalu dimasukkan kedalam erlenmeyer
2. Menambahkan 250 ml aquades
3. Larutan dikocok hingga homogen
4. Erlenmeyer kemudian di panaskan di waterbath
5. Setelah larutan berwarna bening, erlenmeyer diangkat
6. Larutan dimasukkan kedalam cawan petri saat masih hangat-hangat kuku
7. Setelah itu ditunggu membeku kemudian apabila sudah beku dimasukkan kedalam tempat yang steril
Pembahasan :Media SS selain digunakan sebagai penanaman bakteri juga digunakan sebagai media untuk pertumbuhan bakteri. Bahan utama yang digunakan untuk membuat media ini adalah serbuk SS dan aquades. Cara kerja yang dilakukan adalah dengan menimbang 16 gram SS lalau memasukkan serbuk SS kedalam erlenmeyer selanjutnya kedalam erlenmeyer tersebut ditambahkan aquadest sebanyak 250 ml, kemudian dikocok agar larutan homogen. Erlenmeyer yang berisi larutan kemudian dipanaskan dalam waterbath sampai larutan menjadi berarna jernih. Setelah larutan jernih erlenmeyer diangkat dari waterbath, kemudian menunggu hingga larutan hangat-hangat kuku setelah itu larutan dimasukkan kedalam cawan petri. Media kemudian disimpan didalam tempat yang steril.
h. PCA (Plate Count Agar)
Fungsi :
Sebagai media penanam bakteri
Untuk mengidentifikasi dan mencari ciri khas bakteri
Bahan: 500 ml aquades
9 gram PCA
Alat:
Dispenset Sendok penyu
autoclave
Timbangan
Erlenmeyer
Cawan petri
Persiapan kerja
1. Membersihkan meja dengan alkohol
2. Membersihkan timbangan dan memposisikan pada angka nol
3. Mengisi autoclave dengan air sebelum digunakan
4. Menyiapkan tabung reaksi dan erlenmeyerCara kerja
1. Menimbang 9 gram PCA lalu dimasukkan kedalam erlenmeyer
2. Menambahkan aquades 500 ml pada erlenmeyer
3. Larutan kemudian dikocok sampai homogen
4. Larutan dipanaskan di waterbath sampai berwarna bening
5. Setelah bening ditunggu agak dingin kemudian dimasukkan kedalam cawan petri
Pembahasan:
PCA merupakan media yang berfungsi untuk media pertumbuhan bakteri. Bahan utama yang digunakan adalah serbuk PCA dan aquades. Cara kerja yang dilakukan adalah menimbang PCA sebanyak 9 gram kemudian dimasukkan dalam erlenmeyer. Selanjutnya kedalam erlenmeyer ditambahkan aquadest sebanyak 500 ml kemudian dikocok agar larutan homogen, erlenmeyer kemudian dipanaskan dalam waterbath sampai larutan berwarna jernih setelah agak dingin larutan dimasukkan kedalam cawan petri dan disimpan dalam tempat yang steril.i. Garam NaCl Isotonis (0,8%-0,9%)Fungsi
sebagai garam larutan standard sebagai pelarut dalam perendaman.
Bahan : Garam NaCl 17 gram Akuades 2000 mlAlat
Dispenset
Erlenmeyer
Timbangan analitik
Kertas pH
NaOHCara Kerja :1. Menimbang NaCl sebanyak 17 gram kemudian dimasukkan dalam erlenmeyer
2. Ditambahkan aquades 250 ml kedalam erlenmeyer kemudian dikocok hingga homogen
3. Larutan yang sudah homogen kemudian ditambah dengan 8 tetes NaOH agar pH netral setelah itu di cek dengan kertas pH
4. Sisa aquades kemudian dimasukkan kedalam erlenmeyer
5. Larutan disaring menggunakan kertas saring
6. Larutan dimasukkan kedalam tabung rekasi sebanyak 9 ml
7. Dimasukkan kedalam autoclave untuk di sterilkanPembahasan : Fungsi dari media garam NaCl ini adalah untuk pembuatan larutan garam standar dan sebagai pelarut dalam perendaman. Larutan garam ini berwarna putih jernih. Komposisi secara umumnya adalah garam dan akuades. Larutan garam ini dibuat pada pH 7.2. Pengujian Mikroskopis Bakteri Tahan Asam (Mycobacterium tubercolosis)a. Alat
Bio Sfety Cabinet Ose atau lidi yang dipipihkan pada bagian ujungnya Lampu spirtus
Rak tabung reaksi
Object glass
b. Bahan dan reagensia
Cat ziehl nielsen
Minyak imersi
Sampel dahak
c. Cara Kerja1. Membersihkan meja kerja BSC dengan desinfektan
2. Mencuci tangan dengan sabun dan air
3. Menyediakan kaca sediaan yang telah bebas lemak kemudian ditulisi dengan pensil 2B nomor identitas sediaan di bagian ujung yang buram dan kasar
4. Mengambil sputum dengan menggunakan ose atau lidi dan dipilih bagian yang berkualitas
5. Apabila menggunakan ose dalam membaut sediaan, ose tersebut dicelupkan kedalam pasir alkohol 70% kemudiaan disterilkan dengan cara dibakar diatas api sampai membara
6. Apabila sediaan sudah setengah kering, ukir dengan lidi lancip dengan arah tegak lurus
7. Sediaan ditunggu hingga kering udara, kemudiaan dilakukan fiksasi dengan melewatkan diatas nyala api 3 kali dengan perukaan yang ada smear berada menghadap atas
8. Meletakkan sediaan yang telah difiksasi dengan bagian apusan menghadap keatas diatas rak pengecatan.
9. Mengeenangi seluruh permukaan sediaan dengan ZN A (carbol fuchsin 3%),
10. Dipanaskan dari bawah dengan menggunakan api setiap sediaan sampai keluar uap, kemudian didiamkan selama 5 menit
11. Sediaan dibilas secara hati-hati dengan air mengalir
12. Menggenangi sediaan dengan ZN B (asam alkohol 3%) sampai warna merah laru, kemudian dibilas dengan air mengalir13. Menggenangi permukaan sediaan dengan ZN c (metil biru 0,3 %) selama 10-20 detik
14. Dibilas dengan air mengalir
15. Sediaan kemudian dimiringkan pada rak pengering supaya sediaan cepat kering
16. Setelah kering diamati di mikroskop, pertama menggunakan lensa objektif 10X untuk menetapkan fokus dan menemukan lapang pandang. Sediaan yang baik pada umumnya ditemukan sel leukosit lebih banyak daripada sel epitel
17. Meneteskan satu tetes minyak emersi
18. Memutar lensa objek 100X dengan hati-hati keatas sediaan
19. Menyesuaikan fokus dengan hati-hati sampai sel-sel terlihat dengan jelas menggunakan mikrometerd. Pembahasan Bakteri Tahan Asam adalah sekelompok mikroorganisme yang pada pengecatan Ziehl Neelsen berbentuk batang tunggal, rantai, atau berkelompok dan berwarna merah. Contoh bakteri tahan asam adalah Mycobacterium tubercolosis. Pewarnaan Ziel Nielseen adalah suatu reagensia yang terdiri dari ZN A (Fuchsin 0,3%), ZN B(asam alkohol 3%), dan ZN C (metil biru 0,3%). Salah satu alat yang digunakan adalah ose, ose disini berfungsi sebagai pemindah koloni dari media ke media lain, menanam sampel media dan membuat sediaan/smear pada objek.
Untuk perhitungan hasil dibaca sesuai dengan acuan IUATLD (International Unit Tuberculosis Lung Desesases), sebagai berikut :
a. Negatif : jika tidak ditemukan BTA minimal 100 lapang pandang
b. Scanty : jika ditemukan 1-9 BTA dalam 100 lapang pandang
c. Positif 1 : jika ditemukan 10-99 BTA dalam 100 lapang pandang
d. Positif 2 : jika ditemukan 1-10 BTA dalam 1 lapang pandang, minimal diperiksa 50 lapang pandang
e. Positif 3 : jika ditemukan lebih dari 10 BTA dalam 1 lapang pandang, minimal diperiksa 20 lapang pandang
BAB VKESIMPULAN DAN SARANA. Kesimpulan
Berdasarkan pelaksanaan program Praktik Kerja Lapangan di Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta dapat diambil kesimpulan yaitu :1. Diperoleh gambaran tentang profil Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta
2. Diperoleh ilmu pengetahuan dan pengalaman kerja sesuai dengan ilmu biologi
3. Mendapatkan wawasan tentang cara praktik laboratorium yang baik dan benar
4. Mendapatkan keterampilan dalam pembuatan media pertumbuhan bakteri dan pengidentifikasian bakteri tahan asam (Mycobacterium tubercolosis)
B. Saran
Dalam pelaksanaan Praktik Kerja Lapangan selanjutnya diharapkan agar :
1. Semua pihak yang berkaitan dapat saling membantu sehingga dapat mengoptimalkan kinerja mahasiswa.
2. Peralatan yang digunakan untuk pemeriksaan ditambah jumlahnya agar pemeriksaan dapat berjalan dengan baik.
3. Para mahasiswa yang melaksanakan PKL lebih proaktif.
DAFTAR PUSTAKAAkiko fujiki. Quality Examination Smear make Quality TB Control Programme. The research Institute of Tuberculosis.Japan.2000.Anonim . 2007. Profil Balai Laboratorium Kesehatan Yogyakarta. Yogyakarta : Balai Laboratorium Kesehatan.
Boyle, E.C dan B.B. Finlay. (2003).Bacterial Pathogenitas : exploithing celluler adherence. Cuur Opin Cell Biol Oct 15(5) : 633-9Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Pedoman Nasional Penanggulangan Tuberkulosis.2007.
Departemen Kesehatan Republik Indonesia. Panduan Bagi Petugas Laboratorium Pemeriksaan Mikroskopis Tuberkulosis.2007Shihnyoto,dkk. (2007). Sistem Pengendalian Mutu Laboratorium Mikrobiologi. Yogyakarta : Balai Laboratorium Kesehatan.Soemarno. 2000. Isolasi dan Identifikasi Bakteri Klinik. Yogyakarta : Akademi Analis Kesehatan.LAMPIRAN
NoGambarKeterangan
1Penuangan cat ziehl Nielsen
Preparasi uji BTA
Preparasi uji BTA
Penempatan sampel dahak
Medium LY
Preparasi pembuatan medium darah
Medium BP
Penuangan darah kedalam petridish
Penuangan darah dalam media NA
Gelas ukur
Medium LTSB triple
Medium LTSB single
Nacl
Medium BGLB
Pengepakan medium yang akan dimasukkan dalam autoclave
Pengepakan medium yang akan dimasukkan dalam autoclave
Memasukkan medium BGLB dari dispenset ke tabung reaksi yang diisi tabung durham
Pembuatan medium BGLB tahap pengocokan agar homogen
Preparasi alat untuk membuat medium (memasukkan tabung durham ke tabung reaksi)
Preparasi alat untuk membuat medium
Ose (alat untuk mengambil dan menanam bakteri)
Rak (untuk tempat meletakkan tabung reaksi)
Inkubator 35 0C untuk inkubasi bakteri yang sudah ditanam pada medium
2