pengecatan gram alat dan bahan: wire loop · ose bulat (wire loop) 2. objek glass ... fuchsin) 4....

PENGECATAN GRAM

ALAT DAN BAHAN:

1. Ose bulat (wire loop) 2. Objek glass 3. Set pewarna Gram (crystal violet, iodine/lugol, alcohol 96%, dan safranin atau carbol

fuchsin) 4. Api Bunsen 5. Rak pengecatan 6. Pensil kaca 7. Tisu 8. Label

CARA KERJA: PEMBUATAN PREPARAT HAPUSAN:

1. Tulis identitas (nama dan 3 digit NIM terakhir) pada region identitas dari objek glas (teraba kasar).

2. Balik objek glass. 3. Buatlah lingkaran (target circle) pada 2 bagian objek glas dengan menggunakan pensil

kaca. 4. Balik objek glass.

5. Setelah itu ambil biakan bakteri/ specimen dengan menggunakan ose bulat, buatlah suspensi bakteri pada lingkaran yang sudah dibuat sebelumnya.

6. Jika specimen berupa cairan, langsung dapat dibuat hapusan di dalam lingkaran, tetapi jika bakteri berupa biakan, maka sebelumnya diambil aquades diletakkan pada kedua lingkaran, kemuadian diambil 1 ose biakan bakteri dan dibuat suspensi.

7. Setiap pengambilan specimen dan bahan lain ose selalu diseterilkan dengan cara membakar diatas api Bunsen sampai membara.

8. Suspensi bakteri dibuat se-homogen mungkin dan tidak terlalu tebal. 9. Tunggu hingga kering dengan diangin-angikan. 10. Lakukan fiksasi dengan cara melewatkan kaca objek diatas api bunsen 2-3 kali sehingga

hapusan specimen kering.

11. Kaca objek siap untuk dicat Gram dengan prosedur sebagai berikut:

PENGECATAN GRAM:

INTERPRETASI HASIL Setelah pewarnaan, slide/ gelas objek dilihat dibawah mikroskop dengan perbesaran 1000X, dengan minyak imersi. Bakteri Gram positif akan berwarna biru/ungu dan bakteri Gram negative berwarna merah/pink. Hasil intepretasi pengecatan Gram adalah berupa identifikasi bentuk dan Gram (positif atau negatif) dari suatu bakteri. Contoh: bakteri batang Gram negatif, bakteri kokus Gram positif.