AKTIVITAS SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL BIJI SRIKAYA (Annona squamosa L.) TERHADAP SEL T47D

SKRIPSI

OLEH:

MUSTIKA ERLINANINGRUM K 100 080 187

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA

SURAKARTA 2012

i

AKTIVITAS SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL BIJI SRIKAYA (Annona squamosa L.) TERHADAP SEL T47D

SKRIPSI

Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai derajat Sarjana Farmasi (S. Farm) pada Fakultas Farmasi

Universitas Muhammadiyah Surakarta di Surakarta

Oleh : MUSTIKA ERLINANINGRUM

K 100 080 187

FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA

SURAKARTA 2012

iii

DEKLARASI

Dengan ini saya menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat

karya yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu

Perguruan Tinggi, dan sepanjang pengetahuan saya juga tidak terdapat

karya atau pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain,

kecuali yang secara tertulis diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam

daftar pustaka.

Surakarta, 10 Maret 2012

Penulis

Mustika Erlinaningrum

iv

KATA PENGANTAR

Assalamu alaikum warahmatullahi wabarakatuh

Alhamdulillah, dengan menyebut nama Allah yang Maha Pengasih lagi

Maha Penyayang, segala puji bagi Allah SWT yang telah melimpahkan rahmat

dan karunia-Nya kepada penulis sehingga penulis mampu menyusun dan

k Etanol Biji

Srikaya (Annona squamosa

memenuhi salah satu syarat dalam mencapai derajat Sarjana Farmasi (S. Farm)

pada Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Surakarta. Pada kesempatan

kali ini, penulis ingin menyampaikan rasa terima kasih kepada berbagai pihak

yang telah memberikan bantuan berupa arahan, dorongan, dan motivasi selama

penulis menyelesaikan skripsi ini. Oleh karena itu, penulis ingin menyampaikan

ucapan terima kasih kepada :

1. Bapak Dekan Fakultas Farmasi UMS

2. Bapak Dr. Haryoto, M.Sc., selaku pembimbing utama skripsi

3. Bapak Dr. Supardi Wongso, Apt., selaku pembimbing akademik

4. Bapak Prof. Dr. M. Kuswandi, SU, M. Phil., Apt., selaku penguji I

5. Bapak Peni Indrayudha, M. Biotech., Apt., selaku penguji II

6. Kedua orang tuaku dan adik-adikku serta abangku Edi Iskandar, Oben

Priandra, Rohman, dan Noorhadi Seto yang selalu memberi motivasi untukku

7. Tim peneliti aktivitas sitotoksik terhadap sel T47D yang terdiri dari Wildan,

Yennie, Desilia, Adi, Eva, Indah, Iwan, Umma, Woro, Cita, dan Hefi

Semoga segala kebaikan yang telah diberikan mendapatkan balasan yang

berlimpah dari Allah SWT. Penulis menyadari bahwa penulisan ini masih banyak

kekurangan karena keterbatasan kemampuan, pengetahuan, dan pengalaman. Oleh

karena itu, penulis mengharapkan saran dan kritik dari pembaca. Penulis berharap

penelitian ini dapat bermanfaat bagi perkembangan ilmu pengetahuan.

Wassalamu alaikum warahmatullahi wabarakatuh

Surakarta, 28 Februari 2012

Penulis

v

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL.............................................................................. i

HALAMAN PENGESAHAN................................................................ ii

HALAMAN DEKLARASI.................................................................... iii

KATA PENGANTAR............................................................................ iv

DAFTAR ISI........................................................................................... v

DAFTAR TABEL................................................................................... vii

DAFTAR GAMBAR.............................................................................. viii

DAFTAR LAMPIRAN.......................................................................... ix

DAFTAR SINGKATAN........................................................................ x

INTISARI............................................................................................... xi

BAB I. PENDAHULUAN..................................................................... 1

A. Latar Belakang Masalah...................................................... 1

B. Perumusan Masalah............................................................. 2

C. Tujuan Penelitian................................................................. 3

D. Tinjauan Pustaka.................................................................. 3

1. Tumbuhan Srikaya........................................................ 3

a. Sistematika Tanaman............................................. 3

b. Nama Daerah......................................................... 3

c. Nama Asing............................................................ 4

d. Nama Simplisia....................................................... 4

e. Morfologi Tumbuhan............................................. 4

f. Kandungan Kimia................................................... 4

g. Bagian Tanaman yang Digunakan.......................... 5

h. Khasiat................................................................... . 5

i. Ekstraksi dan Isolasi............................................... 5

2. Metode Penyarian........................................................... 6

3. Kanker............................................................................ 6

vi

4. Sel T47D.......................................................................... 8

5. Sitotoksik......................................................................... 9

6. Metode MTT................................................................... 9

E. Landasan Teori....................................................................... 10

F. Hipotesis................................................................................. 11

BAB II. METODE PENELITIAN............................................................ 12

A. Kategori Penelitian................................................................. 12

B. Variabel Penelitian................................................................. 12

C. Alat dan Bahan....................................................................... 13

D. Tempat Penelitian.................................................................. 13

E. Jalannya Penelitian................................................................ 13

1. Determinasi Tanaman..................................................... 13

2. Pengumpulan Bahan....................................................... 13

3. Preparasi Bahan.............................................................. 13

4. Analisis Kualitatif........................................................... 14

5. Uji Sitotoksik.................................................................. 15

F. Analisis Data.......................................................................... 17

BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN................................................. 19

A. Determinasi Tanaman............................................................ 19

B. Pengumpulan Bahan.............................................................. 19

C. Ekstraksi Bahan...................................................................... 19

D. Hasil Uji Aktivitas Sitotoksik................................................. 20

E. Analisis Kualitatif Kandungan Kimia..................................... 23

BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN.................................................. 28

A. Kesimpulan............................................................................. 28

B. Saran....................................................................................... 28

DAFTAR PUSTAKA................................................................................ 29

LAMPIRAN.............................................................................................. 33

vii

DAFTAR TABEL

Tabel 1. Kadar Ekstrak Etanol Biji Srikaya dan Prosentase Sel Hidup

Setelah Perlakuan ........................................................................... 22

Tabel 2. Hasil Skrining Fitokimia Ekstrak Etanol Biji Srikaya

(Annona squamosa L.) .................................................................. 23

Tabel 3. Hasil Uji KLT Ekstrak Etanol Biji Srikaya (Annosa squamosa L.). 25

viii

DAFTAR GAMBAR

Gambar 1. Skema Uji Aktivitas Sitotksik Ekstrak Etanol Biji Srikaya

(Annona squamosa L.) Terhadap Sel T47D.................................. 18

Gambar 2. Reaksi Reduksi MTT menjadi Farmazan oleh Enzim Reduktase .. 21

Gambar 3. 21

Gambar 4. Kurva Hubungan %Sel Hidup dengan Log Konsentrasi................. 22

Gambar 5. Kromatografi Lapis Tipis Ekstrak Etanol Biji Srikaya Sebelum

Disemprot....................................................................................... 25

Gambar 6. Kromatografi Lapis Tipis Ekstrak Etanol Biji Srikaya Sesudah

Disemprot....................................................................................... 26

ix

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Surat Keterangan Determinasi ............................................... 33

Lampiran 2. Gambar Tumbuhan Srikaya ................................................... 35

Lampiran 3. Perhitungan Seri Konsentrasi ................................................ 36

Lampiran 4. Perhitungan Kadar Tertinggi DMSO Ekstrak ....................... 37

Lampiran 5. Perhitungan Jumlah Sel Tiap Sumuran ................................. 38

Lampiran 6. Data Absorbansi Sel Hasil Uji Aktivitas Sitotoksik............... 39

Lampiran 7. Perhitungan % Sel Hidup Setelah Penambahan Ekstrak

Etanol Biji Srikaya (Annona squamosa L)............................ 40

Lampiran 8. Perhitungan IC50 Ekstrak etanol Biji Srikaya

(Annona squamosa L.) Terhadap Sel T47D........................ 42

x

DAFTAR SINGKATAN

A-549 Human Lung Carcinoma

BCl-2 B-Cell Limphoma 2

BCLXL B-Cell Limphoma Extra Large

Bel-7402 Human Hepatocellular Carcinoma

CNE2 Human Nasopharyngeal Carcinoma

DMSO Dimetil sulfoksida

ELISA Enzyme Linked Immuno Sorbant Assay

FBS Fetal Bovine Serum

HT-29 Human COLON adenocarcinoma

IC50 Inhibitory Concentration 50%

KLT Kromatografi Lapis Tipis

K-562 Human Erythtomyeloblastoid Leukemia

LAF Laminar Air Flow

MCF-7 Human Breast Carcinoma

MTT 3-(4,5-Dimetilltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolium bromide

PBS Phosphate Buffered Saline

PC-3 Human Prostate Adenocarcinoma

Penstrep Penicillin Streptomycin

Rf Retardation fact

ROS Reactive Oxygen Species

T47D Human Ductal Breast Epitheal Tumor

UV Ultraviolet

xi

INTISARI

Beberapa penelitian menunjukkan bahwa senyawa asetogenin dalam biji srikaya mempunyai aktivitas sitotoksik, antiparasit, pestisida, dan imunosupresif. Telah dilakukan penelitian uji aktivitas sitotoksik ekstrak etanol biji srikaya (Annona squamosa L.) terhadap sel T47D. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui harga IC50, efek sitotoksik ekstrak etanol biji srikaya terhadap sel T47D, dan senyawa yang terkandung dalam ekstrak etanol biji srikaya. Ekstrak etanol biji srikaya dibuat dengan cara maserasi menggunakan pelarut etanol 96%. Ekstrak diuji aktivitas sitotoksiknya terhadap sel T47D dengan seri konsentrasi 150; 100; 50; 25; dan 10 µg/mL menggunakan metode MTT assay dan dibaca pada ELISA reader.

Hasil uji aktivitas sitotoksik menunjukkan bahwa ekstrak etanol biji srikaya mempunyai efek penghambatan sel kanker payudara dengan nilai IC50 sebesar 62,80 µg/mL. Hasil analisisis kualitatif dengan menggunakan uji kromatografi lapis tipis menunjukkan adanya kandungan senyawa flavonoid, alkaloid, dan polifenol. Kata kunci : Sitotoksik, sel T47D, Annona squamosa L., MTT assay, IC50