AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK KASAR CACING LAUT Nereis sp, CACING TANAH Lumbricus rubellus, DAN CACING TANAH Eisenia foetida, DENGAN PELARUT ETIL ASETAT TERHADAP BAKTERI Salmonella typhi

SKRIPSI PROGRAM STUDI TEKNOLOGI HASIL PERIKANAN JURUSAN MANAJEMEN SUMBERDAYA PERAIRAN

Oleh: SARASTRIA MAHARANI NIM: 135080307111004

FAKULTAS PERIKANAN DAN ILMU KELAUTAN UNIVERSITAS BRAWIJAYA

MALANG 2017

i

AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK KASAR CACING LAUT Nereis sp, CACING TANAH Lumbricus rubellus, DAN CACING TANAH Eisenia foetida, DENGAN PELARUT ETIL ASETAT TERHADAP BAKTERI Salmonella typhi

SKRIPSI PROGRAM STUDI TEKNOLOGI HASIL PERIKANAN

JURUSAN MANAJEMEN SUMBERDAYA PERIKANAN

Sebagai Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Perikanan Pada Fakultas Perikanan Dan Ilmu Kelautan

Universitas Brawijaya

Oleh:

SARASTRIA MAHARANI NIM: 135080307111004

FAKULTAS PERIKANAN DAN ILMU KELAUTAN UNIVERSITAS BRAWIJAYA MALANG

2017

ii

iii

PERNYATAAN ORISINALITAS

Dengan ini saya menyatakan bahwa dalam usulan skripsi yang saya tulis

ini benar-benar merupakan hasil karya saya sendiri, dan sepanjang pengetahuan

saya juga tidak terdapat karya atau pendapat yang pernah ditulis atau diterbitkan

oleh orang lain kecuali yang tertulis dalam naskah ini dan disebutkan dalam

daftar pustaka.

Apabila di kemudian hari terbukti atau dapat dibuktikan usulan skripsi ini

hasil penjilplakan (plagiasi), maka saya bersedia menerima sanksi atas

perbuatan tersebut, sesuai hukum yang berlaku di Indonesia.

Malang, Juli 2017

Mahasiswa

Sarastria Maharani

iv

UCAPAN TERIMA KASIH

Penulis mengucap terima kasih kepada semua pihak yang telah

berkontribusi dalam membantu kelancaran penelitian hingga penulisan laporan

usulan skripsi ini dapat terselesaikan. Ucapan terima kasih yang sebesarnya

diberikan kepada:

1. Allah SWT yang telah berkehendak atas segala kelancaran dan

kemudahan yang diberikan dalam penyelesaian penelitian dan penulisan

laporan usulan skripsi ini.

2. Kedua orang tua (Bapak Imam Kusnadi dan Ibu Lilik Sri Astuti) yang telah

memberikan doa, dukungan, dan semangat sehingga penulisan laporan

skripsi ini dapat terselesaikan dengan baik.

3. Ibu Dr. Ir. Hartati Kartikaningsih, MS, selaku dosen pembimbing I atas

kesediaan waktunya telah memberikan bimbingan dan bantuan dalam

penyelesaian laporan.

4. Ibu Dr. Ir. Dwi Setijawati, M.Kes, selaku dosen pembimbing II atas

kesediaan waktunya telah memberikan bimbingan dan bantuan dalam

penyelesaian laporan.

5. Mbak Megawati Kusuma, S.Gz. selaku laboran Laboratorium Keamanan

Hasil Perikanan, Mbak Reni selaku laboran laboratorium Perekayasaan

Hasil Perikanan, Mbak titin selaku laboran Penyakit dan Parasit Ikan,

yang telah mencukupi kebutuhan lab selama penelitian

6. Fittarina Sartika dan Iis Nur Vianingrum yang telah memberikan ilmu dan

semangat sehingga laporan ini dapat terselesaikan dengan baik.

7. Denmas Asta Negara, yang telah memberikan semangat dan dukungan

sehingga laporan ini dapat terselesaikan.

v

8. Tiffany, Happy, Rifqi, Udin, Amir, Panji, Iyan, Dio, Aufa, Wibi, Shella, Mita,

Firli, Iis, Nadya, Intan, khun, Silvi, Valdy, Fendi, Liza, Faisal, Fara Kurnia,

Oni dan Afiq yang telah banyak membantu selama kegiatan penelitian

berlangsung.

9. Serta berbagai pihak yang tidak bisa disebutkan satu-persatu.

Malang, Juli 2017

Penullis

vi

RINGKASAN

SARASTRIA MAHARANI ( 135080307111004 ). Aktivitas Antibakteri Ekstrak Kasar Cacing Laut Nereis sp, Cacing Tanah Lumbricus rubellus, dan Cacing Tanah Eisenia foetida, dengan Pelarut Etil Asetat terhadap Bakteri Salmonella typhi (dibawah bimbingan Dr. Ir. Hartati Kartikaningsih, MS dan Dr. Ir. Dwi Setijawati, M.Kes).

Salmonella typhi adalah jenis bakteri gram negatif yang menyebabkan gangguan kesehatan pada organ pencernaan. Pertumbuhan Salmonella typhi dapat berakibat merugikan. Penggunaan antibiotik secara kimiawi dalam pengendalian penyakit dan bakteri dapat menimbulkan efek samping dan dapat menimbulkan resistensi. Efek samping penggunaan obat biasanya diketahui setelah digunakan oleh banyak orang. Oleh sebab itu diperlukan penelitian mengenai potensi dari berbagai bahan alami yang dapat digunakan sebagai antibakteri dan tidak menimbulkan efek atau dampak tertentu. Berbagai penelitian terdahulu telah menunjukkan bahwa cacing laut Nereis sp. cacing tanah Lumbricus rubellus, dan cacing tanah Eisenia foetida memiliki manfaat sebagai antibakteri. Setiap jenis cacing memiliki bahan aktif yang dapat berpotensi sebagai antibakteri. Untuk mengeluarkan bahan aktif yang terkandung dalam cacing laut dan cacing tanah diperoleh melalui ekstraksi dengan pelarut. Salah satu pelarut yang dapat digunakan adalah etil asetat. Dibandingkan dengan aquades yang memiliki titik didih sebesar 1000C, pelarut etil asetat memiliki titik didih yang lebih rendah yaitu 77,10C. Penggunaan suhu yang lebih tinggi pada proses ektraksi dapat mengakibatkan kerusakan pada bahan aktif yang berpotensi sebagai antibakteri yang dimiliki oleh cacing.

Penelitian ini bertujuan mengetahui ada atau tidaknya aktivitas antibakteri dari cacing laut Nereis sp. cacing tanah Lumbricus rubellus, dan Eisenia foetida terhadap bakteri Salmonella typhi. Penelitian dilaksanakan di Laboratorium Keamanan Hasil Perikanan, Laboratorium Perekayasaan Hasil Perikanan, Laboratorium Parasit dan Penyakit Ikan, Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Universitas Brawijaya, Malang dan Laboratorium Universitas Negeri Malang, pada Bulan Februari-Juni 2017.

Metode yang digunakan dalam penelitian ini adalah eksperimental untuk mengetahui daya hambat ketiga ekstrak cacing terhadap Salmonella typhi yang dilanjutkan dengan uji MIC, MBC, dan pengamatan morfologi bakteri dengan pewarnaan sederhana dan Scanning Electron Microscope (SEM).

Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak Lumbricus rubellus dan Eisenia foetida memiliki aktivitas antibakteri terhadap Salmonella typhi dan bersifat bakteristatik terhadap bakteri Salmonella typhi. Nilai minimum inhibiton concentration (MIC) ekstrak cacing laut Nereis sp., cacing tanah Lumbricus rubellu.,s dan cacing tanah Eisenia foetida berturut-turut adalah >50.000 ppm., >12.500 ppm., dan >12.500 ppm. Hasil pengamatan morfologi dengan pewarnaan dengan perbesaran 100x dan Scanning Electron Microscope perbesaran 15.000x menunjukkan adanya perubahan morfologi bakteri Salmonella typhi yang terpapar ekstrak Nereis sp., Lumbricus rubellus, dan Eisenia foetida.

sebaiknya dapat dilakukan uji lanjutan pada ekstrak etil asetat cacing laut Nereis sp., cacing tanah Lumbricus rubellus dan cacing tanah Eisenia foetida dengan menggunakan dosis yang lebih tinggi agar dapat diaplikasikan dalam bentuk obat pada penelitian selanjutnya.

vii

KATA PENGANTAR

Dengan menyebut Nama Allah Yang Maha Pengasih lagi Maha

Penyayang. Puji syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT karena atas

limpahan rahmat serta karunia-Nya, penulis dapat menyelesaikan laporan Usulan

Skripsi dengan Judul ” Aktivitas Antibakteri Ekstrak Kasar Etil Asetat Cacing Laut

(Nereis sp), Cacing Tanah Lumbricus rubellus, dan Cacing Tanah Eisenia

foetida, terhadap Bakteri Salmonella typhi”. Laporan usulan skripsi ini berisikan

tentang pengujian aktivitas antibakteri menggunakan ekstrak kasar etil asetat

cacing laut berjenis Nereis sp, cacing tanah berjenis Lumbricus rubellus, dab

Eisenia foetida, terhadap bakteri gram negatif yaitu bakteri Salmonella typhi.

Pengujian yang dilakukan meliputi preparasi sampel dan penepungan sampel,

ekstraksi, evaporasi, uji aktivitas anti bakteri dengan metode cakram, dan

dilanjutkan dengan uji minimum inhibition concentration (MIC), uji Minimum

Bactericidal Concentration (MBC), pengamatan morfologi bakteri dengan

pewarnaan sederhana, dan scanning electron microscopy (SEM).

Laporan skripsi ini disusun sebagai salah satu syarat memperoleh gelar

sarjana perikanan dari Fakultas Perikanan dan Ilmu Kelautan Universitas

Brawijaya Malang. Penyusunan laporan usulan skripsi ini, penulis telah

mengusahakan semaksimal mungkin dalam pengerjaannya. Bantuan dan

dukungan yang diberikan oleh dosen pembimbing dan beberapa pihak, dapat

membantu penulis untuk memperlancar proses penelitian dan pembuatan

laporan usulan skripsi ini. Penulis juga ingin mengucapkan rasa terima kasih

yang sebesar-besarnya kepada semua pihak yang telah memberikan dorongan

dan semangat kepada penulis dalam penyelesaian penelitian serta penulisan

laporan ini.

viii

Penulis menyadari bahwa penyusunan laporan ini masih jauh dari

kesempurnaan. Kritik serta saran yang membangun dari semua pihak perlu di

berikan kepada penulis agar penulisan laporan ini menjadi lebih baik. Penulis

berharap agar laporan ini dapat bermanfaat bagi semuanya khususnya bagi para

pembaca, serta dapat bermanfaat untuk penelitian kedepannya.

Malang, Juli 2017

Penulis

ix

DAFTAR ISI

Halaman HALAMAN SAMPUL.............................................................................................. HALAMAN COVER .............................................................................................. i LEMBAR PENGESAHAN ........................................ Error! Bookmark not defined. PERNYATAAN ORISINALITAS ......................................................................... iii UCAPAN TERIMA KASIH .................................................................................. iv RINGKASAN ...................................................................................................... vi KATA PENGANTAR ......................................................................................... vii DAFTAR ISI ....................................................................................................... ix DAFTAR TABEL ................................................................................................ xi DAFTAR GAMBAR ........................................................................................... xii DAFTAR LAMPIRAN ....................................................................................... xiii 1. PENDAHULUAN .................................................. Error! Bookmark not defined.

1.1 Latar Belakang .................................... Error! Bookmark not defined. 1.2 Rumusan Masalah.............................. Error! Bookmark not defined. 1.3 Tujuan Penelitian ................................ Error! Bookmark not defined. 1.4 Kegunaan Penelitian ........................... Error! Bookmark not defined. 1.5 Hipotesis ............................................. Error! Bookmark not defined. 1.6 Waktu dan Tempat Penelitian ............. Error! Bookmark not defined.

2. TINJAUAN PUSTAKA ......................................... Error! Bookmark not defined. 2.1 Cacing Laut ( Nereis sp ) ..................... Error! Bookmark not defined. 2.2 Cacing Tanah Lumbricus rubellus dan Eisenia foetida ............... Error!

Bookmark not defined. 2.3 Ekstraksi ............................................. Error! Bookmark not defined. 2.4 Pelarut Etil Asetat................................ Error! Bookmark not defined. 2.5 Bakteri Uji Salmonella typhi ................. Error! Bookmark not defined. 2.6 Uji Aktivitas Antibakteri ........................ Error! Bookmark not defined. 2.7 Pengamatan Morfologi Bakteri dengan Pewarnaan Sederhana . Error!

Bookmark not defined. 2.8 Pengamatan Morfologi Bakteri dengan Scanning Electron

Microscopy .......................................... Error! Bookmark not defined. 3. MATERI DAN METODE ....................................... Error! Bookmark not defined.

3.1 Materi Penelitian ................................. Error! Bookmark not defined. 3.1.1 Alat-Alat Penelitian .................. Error! Bookmark not defined. 3.1.2 Bahan Penelitian ..................... Error! Bookmark not defined.

3.2 Metode Penelitian ............................... Error! Bookmark not defined. 3.3 Prosedur Penelitian ............................. Error! Bookmark not defined. 3.4 Penelitian Pendahuluan ...................... Error! Bookmark not defined.

3.4.1 Preparasi Sampel .................... Error! Bookmark not defined. 3.4.2 Pembuatan Ekstrak Kasar Etil Asetat cacing laut Nereis sp,

cacing tanah Lumbricus rubellus, Eisenia foetida .......... Error! Bookmark not defined.

3.4.3 Pembuatan Kurva Standar Brown ......... Error! Bookmark not defined.

3.5 Penelitian Utama ................................. Error! Bookmark not defined. 3.5.1 Sterilisasi Alat ......................... Error! Bookmark not defined. 3.5.2 Peremajaan Bakteri ................. Error! Bookmark not defined. 3.5.3 Pembuatan Suspensi Bakteri .. Error! Bookmark not defined. 3.5.4 Uji Daya Hambat Metode Kirby-Bauer .. Error! Bookmark not

defined.

x

3.5.5 Penentuan Minimum Inhibition Concentration (MIC) dan Minimum Bactericidal Concentration (MBC) . Error! Bookmark not defined.

3.5.6 Pengamatan Morfologi Bakteri dengan Pewarnaan Sederhana .............................. Error! Bookmark not defined.

3.5.7 Pengamatan dengan Scanning Electron Microscopy (SEM).................................................................................... Error! Bookmark not defined.

4. PEMBAHASAN .................................................... Error! Bookmark not defined. 4.1 Karakteristik Ekstrak Cacing Laut Nereis sp, Cacing Tanah

Lumbricus rubellus, dan Cacing Tanah Eisenia foetida .............. Error! Bookmark not defined.

4.2 Kurva Standar Brown .......................... Error! Bookmark not defined. 4.3 Uji Daya Hambat Metode Kirby-Bouer . Error! Bookmark not defined. 4.4 Uji Minimum Inhibition Concentration (MIC) ...... Error! Bookmark not

defined. 4.5 Uji Minimum Bactericidal Concentration (MBC) . Error! Bookmark not

defined. 4.6 Pengamatan Morfologi ........................ Error! Bookmark not defined.

4.6.1 Pengamatan Morfologi dengan Mikroskop Cahaya ........ Error! Bookmark not defined.

4.6.2 Pengamatan Menggunakan Scaning Electron Microscope (SEM) ...................................... Error! Bookmark not defined.

5. KESIMPULAN DAN SARAN ................................ Error! Bookmark not defined. 5.1 Kesimpulan ......................................... Error! Bookmark not defined. 5.2 Saran .................................................. Error! Bookmark not defined.

DAFTAR PUSTAKA ................................................. Error! Bookmark not defined. LAMPIRAN ............................................................... Error! Bookmark not defined.

xi

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

1. Desain Rancangan Acak Lengkap Faktorial Uji Daya Hambat ................ Error!

Bookmark not defined.

2. Desain Percobaan Uji MIC ............................... Error! Bookmark not defined.

3. Larutan Brown ................................................. Error! Bookmark not defined.

4. Desain Penanaman Uji Daya Hambat .............. Error! Bookmark not defined.

5. Hasil Pembuatan Ekstrak Etil Asetat ................ Error! Bookmark not defined.

6. Kepadatan Suspensi Bakteri ............................ Error! Bookmark not defined.

7. Diameter zona hambat ..................................... Error! Bookmark not defined.

8. Hasil Absorbansi MIC (λ 686 nm)..................... Error! Bookmark not defined.

9. Hasil Uji MBC................................................... Error! Bookmark not defined.

xii

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

1. Cacing Laut Nereis sp .................................... Error! Bookmark not defined.

2. Cacing Tanah Lumbricus rubellus .................... Error! Bookmark not defined.

3. Cacing Tanah Eisenia foetida .......................... Error! Bookmark not defined.

4. Bakteri Salmonella typhi ................................. Error! Bookmark not defined.

5. Garis Besar Penelitan ...................................... Error! Bookmark not defined.

6. Uji Daya Hambat Ekstrak Nereis sp ................ Error! Bookmark not defined.

7. Uji Daya Hambat Ekstrak Lumbricus rubellus . Error! Bookmark not defined.

8. Uji Daya Hambat Ekstrak Eisenia foetida ........ Error! Bookmark not defined.

9. Pengamatan Salmonella typhi yang terpapar ekstrak etil asetat Nereis sp

............................................................................. Error! Bookmark not defined.

10. Pengamatan Salmonella typhi yang terpapar ekstrak etil asetat Lumbriscus rubellus... .............................................................................. 50 11. Pengamatan Salmonella typhi terpapar ekstrak Eisenia foetida ................. 53 12. Pengamatan Bakteri Salmonella typhi Terpapar Ekstrak Cacing Laut Nereis sp dengan Scanning Electron Microscop (perbesaran 15.000X) ...... 56 13. Pengamatan Bakteri Salmonella typhi Terpapar Ekstrak Cacing tanah Lumbricus rubellus dengan Scanning Electron Microscop (15.000X) .......... 57 14. Pengamatan Bakteri Salmonella typhi Terpapar Ekstrak Cacing tanah Eisenia foetida dengan Scanning Electron Microscop (15.000X) ................ 56

xiii

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran Halaman 1. Prosedur Preparasi Sampel ........................... Error! Bookmark not defined. 2. Pembuatan Ekstrak Etil asetat ........................ Error! Bookmark not defined. 3. Pembuatan Larutan Brown ............................. Error! Bookmark not defined. 4. Penentuan Panjang Gelombang dan Pembuatan Kurva Standar ........... Error! Bookmark not defined. 5. Prosedur Peremajaan Isolat ............................ Error! Bookmark not defined. 6. Pembuatan Suspensi Isolat ............................ Error! Bookmark not defined. 7. Prosedur Uji Daya Hambat Metode Kirby-bouer ........... Error! Bookmark not defined. 8. Uji Minimum Inhibition Concentration (MIC) .... Error! Bookmark not defined. 9. Prosedur Uji Minimum Bactericidal Concentration (MBC) .... Error! Bookmark not defined. 10. Pengamatan Bakteri dengan Pewarnaan ....... Error! Bookmark not defined. 11. Preparasi Pengamatan Morfologi dengan SEM ........... Error! Bookmark not defined. 12. Dokumentasi Penepungan dan Ekstraksi Sampel ........ Error! Bookmark not defined. 13. Dokumentasi Uji Daya Hambat ...................... Error! Bookmark not defined. 14. Dokumentasi Uji MIC & MBC ......................... Error! Bookmark not defined. 15. Dokumentasi Pengamatan Morfologi Bakteri . Error! Bookmark not defined. 16. Perhitungan Presentase Pelarut yang Terevaporasi.....................................79 17. Perhitungan Regresi Linier .......................................................................... 80 18. Pembuatan Larutan ..................................... Error! Bookmark not defined.3 19. Hasil Uji Daya Hambat Ekstrak Etil Asetat Cacing Laut Laut ................ Error! Bookmark not defined. 20. Hasil Absorbansi Minimum Inhibition Concentration (MIC) .. Error! Bookmark not defined. 21. Hasil Pengamatan Uji Minimum Bactericidal Concentration (MBC) ....... Error! Bookmark not defined.

1