260110140084_ai siti rika f_modul 7,8 & 9

8/16/2019 260110140084_AI SITI RIKA F_MODUL 7,8 & 9

1/27

LAPORAN AKHIR PRAKTIKUM

PEMERIKSAAN BAHAN BAKU KLORAMFENIKOL SERTAPENETAPAN KADARNYA DALAM SEDIAAN KRIM DENGAN

METODE SPEKTROFOTOMETRI

NAMA : AI SITI RIKA FAUZIAH

NPM : 260110140084

HARI/TANGGAL : SELASA, 3, 10 & 17 NOVEMBER 2015

PRAKTIKUM

ASISTEN :1. HASYA AQDAN

2. HESTI JUWITA SARI

LABORATORIUM ANALISIS FARMASI

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS PADJADJARAN

JATINANGOR

2015


2/27

ABSTRAK

Pemeriksaan bahan baku kloramfenikol meliputi pemeriksaan secara kualitatif

maupun kuantitatif sedangkan kloramfenikol dalam krim diuji kadarnya. Tujuannya

yaitu untuk mengetahui identitas & mutu dari bahan baku dan kadar kloramfenikol

dalam sediaan. Pengujian kualitatif meliputi uji kelarutan dan uji warna. Sedangkan

pengujian secara kuantitatif meliputi pengujian kadar air dan pengujian kadar sampel

dengan menggunakan metode spektrofotometri. Prinsip dari percobaan kali ini yaitu

kelarutan suatu senyawa dalam pelarut, reaksi senyawa dengan reagen, dan interaksi

antara molekul dengan radiasi elektromagnetik (spektrofotometri). Hasil dari uji

kelarutan yaitu sampel tidak larut dalam air maupun etanol dengan cara yang

disebutkan dalam farmakope; dalam uji warna (dengan reagen fujiwara dan Nessler)

sampel menunjukkan hasil positif kloramfenikol. Hasil dari pengujian sampel secara

kuantitatif dengan pengujian kadar air didapat sebesar 0,175%. Didapat kadar bahan

baku kloramfenikol dengan metode spektrofotometri uv sebesar 82,87% Dan kadar

kloramfenikol dalam sediaan krim sebesar 0,73%.

Kata Kunci: kloramfenikol, uji mutu, uji warna, kelarutan, kadar, spektrofotometri,

krim


3/27

ABSTRACT

Basic substance chloramphenicolum testing included quantitative and qualitative

testing whereas chloramphenicolum on cream was tested the concentration. It is

purposed to know the identity & quality of the sample and the concentration of the

other sample. Qualitative testing included solubility and color testing. Quantitative

testing included the content of water and concentration of basic substance

chloramphenicolum used spectrophotometry method. The principle of this practice

was solubility of the compound on the solvent, reaction of sample with reagent and

interaction between molecule with electromagnetic radiation (spectrophotometric).

The result of solubility testing was the sample didn’t soluble in water or ethanol

followed the rule on FI; the color testing (with fujiwara and Nessler reagen), sample

showed positive result as chloramphenicolum. The result of quantitative testing with

content of water testing is got the percentage 0,175% and the concentration of basic

substance chloramphenicolum with spectrophotometry method was 82,87%. And the

concentration of sample on the cream was 0,73%.

Key words: chloramphenicolum, quality testing, color test, solubility, concentration,

spectrophotometric, cream


4/27

I. PENDAHULUAN

Bahan baku adalah semua

bahan baik yang berkhasiat (zat

aktif) maupun tidak berkhasiat,

yang berubah maupun tidak

berubah, yang digunakan dalam

pengolahan obat walaupun tidak

semua bahan tersebut masih

terdapat di dalam produk ruahan.

Semua bahan baku yang digunakan

harus memenuhi persyaratan

farmakope atau buku resmi lain

yang disetujui oleh industry

farmasi yang bersangkutan. Selain

itu, bahan-bahan yang dibeli harus

sesuai dengan spesifikasi hasil uji

agar diperoleh mutu obat yang

konsisten dan memenuhi

persyaratan keamanan, khasiat,

stabilitas, dan ketersediaan hayati

(Siregar, 2010).

Kloramfenikol merupakan

zat hablur halus berbentuk jarum

atau lempeng memanjang

berwarna putih hingga putih kelabu

atau putih kekuningan, sukar larut

dalam air, mudah larut dalam

etanol dan propilenglikol, memiliki

titik lebur antara 149 – 153 C

(Depkes RI, 1995).

Rumus struktur:

Menurut Farmakope Indonesia edisi

IV (1995), Kloramfenikol dapat

ditetapkan kadarnya secara KCKT

dan menurut Farmakope Indonesia

edisi III (1979) Kloramfenikol

ditentukan secara nitrimetri setelah

direduksi terlebih dahulu dengan

Zn/HCl.

Kloramfenikol adalah

antimikroba jenis bakteriostatik

broad-spectrum. Kloramfenikol

efektif melawan bakteri Gram-

positif maupun Gram-negatif, dan

kebanyakan organisme anaerob

(Falagas & Michalopoulos, 2008).

Mekanisme kerja antibiotik

kloramfenikol ialah menghambat

sintesis protein yang dibutuhkan

untuk pembentukan sel-sel bakteri

sehingga kloramfenikol

menghambat fungsi RNA dari

bakteri (Wattimena dkk, 1991).


5/27

Analisis kimia adalah salah

satu hal penting dalam

menganalisa sampel yang tidak

diketahui dengan menggunakan

beberapa teknik yang berbeda.

Analisi kualitatif merupakan cara

deteksi elemen yang ada dalam

suatu senyawa. Analisis ini hanya

dapat menganalisa adanya suatu

elemen, tidak dengan persentase

atau jumlah elemen yang terdapat

dalam senyawa tersebut

(Tutorvista, ______). Sedangkan

analisis kuantitatif yaitu berkaitan

dengan penetapan berapa banyak

suatu zat tertentu yang terkandung

dalam suatu sampel (Underwood,

2002).

Metode analisis berperan

sebagai salah satu hal yang vital

dalam pengembangan performulasi

dan formulasi, stablitas, quality

control, dan program quality

assurance. Pengujian analisis dari

produk farmasi dibutuhkan untuk

memastikan stabilistas,

keselamatan, dan efektivitas obat

(Theivarasu et al, 2010).

Spektroskopi Ultraviolet adalah

teknik fisika dari spektroskopi

optical yang menggunakan sinar di

daerah tampak, ultraviolet, dan

rengtang pada daerah inframerah.

Hukum Lambert Beer menyatakan

bahwa absorbansi dari larutan

secara langsung sebanding dengan

konsentrasi dari zat yang

terabsorbsi dalam larutan dan pada

panjang gelombang. Dengan

demikian, dari panjang gelombang,

dapat diketahui konsentrasi larutan

dari serapannya (Gandhimathi et

al, 2012).

II. METODE

Alat

Batang pengaduk, beaker glass,

kaca preparat, labu ukur, neraca

analitik, penangas air, pipet

volume.

Bahan

Aquades, aseton, etanol,

kloramfenikol, pereaksi Nessler,

reagen Fujiwara.


6/27

Uji Kelarutan

Ditimbang sampel kloramfenikol

masing-masing 200 mg untuk dua

kali percobaan. Masing-masing

dilarutkan dalam 400 bagian air

dan 2,5 bagian etanol. Diamati

kelarutannya.

Uji Kadar Air

Ditimbang botol dan dikeringkan

pada suhu 105 C selama 30 menit.

Didinginkan dengan desikator

selama 15 menit kemudian

ditimbang. Setelah itu, kira-kira 3

gr bubuk sampel dimasukkan ke

dalam botol timbang kemudian

dikeringkan pada suhu 105 C

hingga bebas air (± 60 menit).

Setelah dingin, ditimbang bobot

serta isinya (dilakukan secara

duplo).

Uji Warna

Uji Fujiwara

Dicampurkan 2ml reagen +

1 m l piridin. Ditambahkan

sampel dan dipanaskan di

atas penangas 100 C selama

2 menit. Diamati perubahan

yang terjadi.

Uji Nessler

Ditambahkan pereaksi ke

dalam sampel lalu

dipanaskan pada 100 C

dalam penangas air.

Diperiksa tiap 10 menit

(dilakukan hal yang sama

pada blanko), diamati

perubahan yang terjadi.

Uji Kemurnian dengan

Spektrofotometri UV

Pembuatan Larutan Baku

Kloramfenikol

Dibuat larutan indukkloramfenikol 0,02%

Ditimbang seksama 10,0

mg

kloramfenikol,dimasukkan

dalam beker glass dan

dilarutkan dengan

etanol,jika perlu

dihangatkan,diaduk hingga

larut

sempurna.Dimasukkan

dalam labu ukur 50 ml dan


7/27

diencerkan dengan etanol

hingga tanda. Dibuat seri

larutan baku 8,12,16,20,

dan 24 ppm dari larutan

induk Pipet 2,3,4,5 dan 6

ml larutan

kloramfenikol,masing-

masing dimasukkan dalam

labu ukur 50 ml,diencerkan

dengan etanol hingga tanda

batas.

Penentuan λ Maksimum

Kloramfenikol

Diukur serapan seri larutan

baku pada λ maksimum

mulai dari kadar terkecil

Dihitung persamaan regresilinier yang merupakan

hubungan antara

konsentrasi vs serapan

,serta ditentukan koefisien

kolerasinya

Panetapan Kadar Sampel

Diukur serapan masing-

masing replikasi Dihitung

kadar kloramfenikol

dengan menggunaka

persamaan regresi linier.

Penetapan Kadar Kloramfenikol

Dalam Sediaan Kr im

Ditimbang krim setara zat aktif

40 mg dalam beaker glass. Krim

dilarutkan dengan methanol 20 ml

kemudian disonikasi. Kemudian

dididinginkan hingga basis

menggumpal. Lalu saring filtrate

menggunakan kertas saring ke

dalam labu ukur 100 ml dan ad

dengan methanol hingga 100 ml.

Hasil pengenceran tersebut dipipet

10 ml dan dimasukan ke dalam

labu 50 ml lalu ad sampai tanda

batas dengan methanol. Perlakuan

ini dilakukan secara triplo.

Selanjutnya, diukur kadarnya

menggunakan metode

spektrofotometri uv-vis.


8/27

III. HASIL

Uji Kelarutan

No. Perlakuan Hasil

1

Ditimbang sampel

kloramfenikol masing-masing

200 mg untuk dua kali

percobaan

Didapat 100 mg kloramfenikol

dalam masing-masing tabung

2100 mg sampel dilarutkan

dalam 400 bagian airSampel tidak larut

3100 mg sampel dilarutkan

dalam 2,5 bagian etanolSampel tidak larut

Uji kadar air

No. Perlakuan Hasil

1 Cawan penguap ditimbang dan

dikeringkan pada suhu 105 C

selama 30 menit

Bobot cawan sebelum

pengeringan = 39,1406 gr

2 Cawan didinginkan dalam

desikator selama 15 menit, lalu

ditimbang

Bobot cawan setelah

pengeringan = 39,1391

3 Sampel ditimbang 3 gram dan

dimasukkan ke dalam cawan

Bobot cawan + sampel sebelum


4 Sampel dikeringkan pada suhu

105 C hingga bebas air (± 60

menit) lalu ditimbang

Bobot cawan + sampel setelah


5 Dihitung kadar air Didapat kadar air sebesar

0,175%


9/27

Uji warna

- Uji Fujiwara

No. Perlakuan Hasil

1 Dicampurkan 2ml reagen + 1 m

l piridin pada sampel

Larutan berwarna kuning dan

terdapat endapan

2 Ditambahkan sampel,

dipanaskan 2 menit lalu

dikocok

Hasil (+) : larutan menjadi

merah tua + endapan

Reaksi:

- Uji Nessler

No. Perlakuan Hasil

1 Dimasukkan blanko (pereaksi

nessler) ke dalam tabung dan

sampel + pereaksi

-Blanko: larutan kuning bening

-Sampel: kuning keruh

2 Blanko serta sampel + pereaksi

dipanaskan pada suhu 100 C

-10 menit pertama: sampel

berwarna orange terang +

endapan; blanko berwarna

kuning + endapan putih

-10 menit kedua: blanko


10/27

berwarna kuning bening +

endapan kehitaman; sampel

berwarna orange pekat +

endapan cokelat

Uj i Kadar sampel dengan metode spektr o Uv

No. Perlakuan Hasil

1 Dibuat larutan baku kloramdfenikol

dengan dilarutkan 10 mg sampel

dengan etanol

Didapat larutan stok

kloramfenikol

2 Dibuat seri larutan baku 8,12,16,20,

dan 24 ppm dari larutan induk Pipet

2,3,4,5 dan 6 ml sampel lalu

dimasukkan dalam labu ukur 50

ml,diencerkan dengan etanol hingga

tanda.

Didapat larutan sampel

dengan konsentrasi tersebut

3 Diukur serapan seri larutan baku

pada λ maks mulai dari kadar terkecil

lalu dihitung persamaan regresi linier

serta ditentukan koefisien

kolerasinya

Didapat persaman linernya

yaitu y= 0,029x – 0,0366 dan

R 2= 0,647

4 Diukur serapan masing-masing

replikasi. Dihitung kadar

kloramfenikol dengan menggunaka

persamaan regresi linier

Didapat kadar kloramfenikol

sebesar 82,87%


11/27

Absorbansi Larutan Sampel

C I II III A

8 ppm 0,0245 0,0246 0,0249 0,024667

12 ppm 0,4802 0,4806 0,4799 0,480233

16 ppm 0,5082 0,5084 0,5089 0,5085

20 ppm 0,5625 0,5629 0,5627 0,5627

24 ppm 0,567 0,5633 0,5637 0,564667

50 ppm 1,472 1,4810 1,4749 1,4760

Sampel 20 ppm

Data/Pengujian Pertama Kedua Ketiga

I 0,4474 0,4484 0,4382

II 0,4475 0,4492 0,4378

III 0,4477 0,4488 0,4381

Rata-rata 0,447533 0,4488 0,438033

Kurva kalibarasi

y = 0.029x - 0.0366

R² = 0.647

0

0.2

0.4

0.6

0.8

0 10 20 30 R a t a - r a t a A

b s o r b a n s i

Konsentrasi (Ppm)

Chart Title

Series1

Linear (Series1)

Linear (Series1)


12/27

Penetapan Kadar Kloramfenikol Dalam Sediaan Kr im

No. Perlakuan Hasil

1 Ditimbang krim setara zat aktif 40

mg dalam beaker glass

Krim ditimbang sebanyak 2

gram secara triplo (setara zat

aktif 40 mg)

2 Krim dilarutkan dengan methanol

20 ml kemudian disonikasi dan

dididinginkan hingga basis

menggumpal.

Basis dengan zat aktif memisah

3 Lalu disaring filtrate

menggunakan kertas saring ke

dalam labu ukur 100 ml dan ad

dengan methanol hingga 100 ml.

Filtrat larut

4 Hasil pengenceran tersebut dipipet

10 ml dan dimasukan ke dalam

labu 50 ml lalu ad sampai tanda

batas dengan methanol (perlakuan

ini dilakukan secara triplo)

Selanjutnya,

Konsentrasi larutan sebesar 20

ppm

5 Diukur absorbansi menggunakan

metode spektrofotometri uv-vis.

Didapat hasil absorbansi sampel:

-sampel 1: 0,1519

-sampel 2: 0,081

-sampel 3: 0,1317

6 Dihitung kadarnya Didapat kadarnya sebesar 0,73%


13/27

- Absorbansi Baku

Konsentrasi/

Perlakuan

5 ppm 10 ppm 15 ppm 20 ppm 25 ppm

I 0,2694 0,4171 0,5634 0,6840 0,7996

II 0,2691 0,4167 0,5633 0,6839 0,8003

III 0,2690 0,4169 0,5628 0,6838 0,8000

Rata-rata 0,2692 0,4169 0,5632 0,6839 0,7999

Kurva Baku

- Absorbansi sampel

Sampel Serapan Rata-rata

serapanPerlakuan I II III

1 0,1518 0,1520 0,1519 0,15192 0,0811 0,0807 0,0812 0,081

3 0,1318 0,1318 0,1317 0,1317

y = 0.0266x + 0.148

R² = 0.9966

0

0.2

0.4

0.6

0.8

1

0 10 20 30

R a t a - r a t a A b s o r b a n s i

Konsentrasi (Ppm)

Chart Title

Series1

Linear (Series1)

Linear (Series1)


14/27

IV. PEMBAHASAN

Pada praktikum kali ini

dilakukan pengujian mutu bahan

baku kloramfenikol dan kadar

kloramfenikol dalam sediaan

krim. Pengujian bahan baku yang

dilakukan meliputi pengujian

kualitatif dan kuantitatif.

Pengujian secara kualitatif

bertujuan untuk mengetahui

identitas dari sampel dengan

mengidentifikasi suatu elemen

yang ada dalam kloramfenikol

menggunakan uji kelarutan dan

metode reaksi warna. Sedangkan

uji kuantitatif bertujuan untuk

mengetahui jumlah atau kadar

suatu elemen dalam sampel yang

dalam hal ini dilakukan analisis

kadar air dan dengan metode

spektrofotometri uv-vis.

Uji kelarutan dilakukan

untuk mengetahui apakah sampel

yang diuji kelarutannya sama

dengan standar yang telah

ditetapkan pada farmakope atau

tidak sehingga dapat ditetapkan

sebagai uji identitas dari sampel.

Uji kelarutan ini tidak bisa

dijadikan sebagai acuan dalam

uji kualitatif, uji ini hanya

dijadikan sebagai uji tambahan

karena hasilnya tidak terlalu

spesifik. Yang pertama,

dilakukan uji kelarutan

kloramfenikol terhadap air.

Dalam literature, kloramfenikol

larut dalam 400 bagian air.

Dalam hal ini, sampel yang

digunakan sebanyak 100 mg

maka 400 bagian air yaitu

sebanyak 400 ml. Setelah diuji,

ternyata kloramfenikol tidak

larut dalam 400 bagian air

tersebut. Uji yang kedua yaitu

menggunakan etanol. Dalam

literature disebutkan bahwa

kloramfenikol larut dalam 2,5

bagian etanol namun setelah

diuji, sampel tidak larut. Hal ini

menunjukkan bahwa sampel

tersebut tidak murni karena

kelarutannya kurang dari standar

yang telah ditetapkan. Hal ini

dimungkinkan adanya

kontaminan yang ada pada

sampel sehingga sampel dengan

jumlah tertentu tidak larut pada


15/27

pelarut dnegan jumlah yang telah

ditentukan atau kemungkinan

lainnya yaitu sampel yang diuji

telah rusak karena lamanya

penyimpanan ataupun

penyimpanan yang kurang baik

sehingga tercemar kontaminan

dari luar.

Metode reaksi warna yang

dilakukan adalah uji warna

Fujiwara dan Nessler. Pereaksi

Fujiwara terdiri dari 2 ml larutan

NaOH yang dibuat segar

dicampurkan dengan 1 ml piridin

dan kemudian dipanaskan pada

penangas air. Pereaksi ini

biasanya digunakan untuk

mengidentifikasi senyawa yang

memiliki paling tidak 2 atom

halogen yang terikat pada satu

atom karbon. Hasil positif dari

reaksi ini yaitu ditandai dengan

terbentuknya warna merah pada

lapisan piridin. Pada sampel

yang diuji, warna larutan

berubah menjadi merah tua serta

terdapat endapan yang

sebelumnya larutan sampel +

reagen adalah warna kuning +

endapan. Ini berarti

menunjukkan bahwa sampel

yang diuji positif kloramfenikol.

Uji warna yang kedua adalah

dengan pereaksi Nessler.

Pereaksi ini terdiri dari larutan

merkuri klorida jenuh yang

ditambahkan kalium iodide padat

hingga endapan yang terbentuk

larut kembali, kemudian

ditambahkan sejumlah volume

yang sama larutan NaOH.

Identifikasi ini dilakukan dengan

cara menambahkan sampel

dengan pereaksi Nessler yang

kemudian dipanaskan di atas

penangas air. Digunakan blanko

sebagai pembanding pada

pengujian ini. Pada menit ke 10

menit pertama: sampel berwarna

orange terang + endapan; blanko

berwarna kuning + endapan,

sedangkan 10 menit kedua:

blanko berwarna kuning bening

+ endapan kehitaman; sampel

berwarna orange pekat +

endapan cokelat. Hal ini sesuai

literature dimana hasil positif

dengan pereaksi Nessler ditandai


16/27

dengan adanya endapan

berwarna coklat. Maka sampel

yang diuji ini juga

mengahasilkan reaksi positif

pada uji Nessler.

Pengujian kuantitatif yang

dilakukan yaitu uji kadar air. Hal

ini bertujuan untuk mengetahui

kandungan air yang terdapat

dalam sampel lalu dibandingkan

dengan literature untuk

mengetahui batas maksimal

kandungan air yang ada dalam

bahan baku kloramfenikol.

Kadar air pada bahan baku

kloramfenikol yang disebutkan

dalam literatur adalah tidak

lebiih dari 1% (Depkes RI,

1979). Pengujian kadar air ini

menggunakan metode

gravimetri. Gravimetri dalam

ilmu kimia adalah salah satu

metode kimia analitik untuk

menentukan kuantitas suatu zat

atau komponen yang telah

diketahui dengan cara mengukur

berat komponen dalam keadaan

murni setelah melakukan proses

pemisahan. Pengujian kadar air

ini dilakukan dengan cara

memanskan sampel beserta

cawannya pada suhu 105 C

selama 30 menit yang kemudian

dikeringkan menggunakan oven

sampai bebas air. Dengan

pemanasan ini, maka kadar air

yang ada dalam sampel akan

menguap sehingga bobot sampel

yang didapat setelah pemanasan

merupakan bobot sampel bebas

air. Penimbangan dan pemanasan

dilakukan beberapa kali sampai

didapat bobot tetap dengan

penimbangan sebelumnya yang

menandakan bahwa sampel

sudah benar-benar bebas air.

Bobot cawan + sampel sebelum


sedangkan bobot setelah

pengeringan didapat 42,1135 gr.

Dari perhitungan didapat bahwa

kadar air dalam sampel sebanyak

0,175%. Ini menunjukkan bahwa

sampel mengandung kadar air

yang sangat sedikit sesuai

dengan yang disyaratkan dalam

literature.


17/27

Pengujian kuantitatif

selanjutnya yaitu pengujian

kadar kloramfenikol dengan

menggunakan metode

spektrofotometri uv.

Spektrofotometri merupakan

metode untuk mengukur suatu

interaksi antara molekul dengan

radiasi elektromagnetik sehingga

terjadi proses absorpsi yaitu

penyerapan energy dengan

adanya eksitasi electron valensi

dari suatu molekul. Dalam

penentuan kadar dengan metode

spektro ini, diperlukan adanya

kurva kalibrasi untuk didapat

persamaan regresi linear yang

selanjutnya digunakan untuk

menghitung kadar dari sampel

yang telah diuji absorbansinya.

Prinsip yang digunakan pada

metode ini yaitu berdasarkan

hukum Lambert-Beer yang

menunjukkan hubungan lurus

antara absorban dan kadar

sampel.

Dalam pembuatan kurva

kalibrasi awal, digunakan seri

larutan kerja yang berbeda

konsentrasinya dan blanko

sebagai control. Semakin banyak

deret konsentrasi larutan kerja

yang digunakan untuk membuat

kurva kalibrasi, maka secara

sistematika semakin baik

persamaan regresi yang

terbentuk. Jenis kurva kalibrasi

yang dibuat yaitu standar

eksternal dimana kurva yang

dibuat dari larutan baku yang

dibuat dalam beberapa

konsentrasi yang berbeda. Pada

proses pembuatan larutan stok

yang akan diukur absorbansinya,

harus diperhatikan

konsentrasinya. Suatu instrument

dalam mendeteksi suatu sampel

uji mempunyai kepekaan yang

berbeda-beda, di sini,

spektrofotometri uv mempunyai

kepekaan terhadap absorbansi

antara 0,2 – 0,8. Sehingga

larutan stok yang dibuat harus

diperkirakan supaya dapat

terdeteksi oleh instrument

tersebut, tidak terlalu tinggi

maupun terlalu rendah

konsentrasinya. Maka agar


18/27

didapat penjang gelombang

maksimum, dibuat larutan stok

dengan konsentrasi 50 ppm yang

kemudian dilakukan

pengenceran menjadi 8, 12, 16,

20 dan 24 ppm. Dibuat juga

larutan sampel dengan

konsentrasi 20 ppm.

Pada senyawa

kloramfenikol, terdapat gugus

benzena yang merupakan

kromofor terikat dengan NO2

sehingga menjadi ausokrom, hal

ini menyebabkan serapan dari

senyawa tersebut meningkat/

lebih sensitive. Adanya ikatan

rangkap terkonjugasi dari

senyawa yang akan diuji adalah

salah satu syarat agar dapat

terdeteksi oleh spektrofotometer

uv. Molekul yang berbeda

mengabsorbsi radiasi pada

panjang gelombang yang

berbeda juga.

Dari pengujian didapat

persamaan regresi linear y =

0,029x – 0,036 dengan nilai R 2 =

0,647. Hal ini menunjukkan

grafik yang terbentuk tidak

linear. Nilai R 2 ini tidak

memenuhi persyaratan,

seharusnya untuk persamaan

regregsi linear, nila R 2

harus >

0,990. Nilai R 2

yang kecil

menunjukkan bahwa pada saat

kalibrasi alat masih terdapat

kontaminan dari senyawa kimia

maupun aquades yang digunakan

sebagai pelarutnya. Dari hasil

perhitungan didapat rata-rata

persen kadar bahan baku

kloramfenikol sebesar 82,87%.

Hal ini tidak sesusai dengan

literature, yaitu berada pada

rentang 98-103%. Hal ini terjadi

karena dimungkinkan adanya

kontaminan dalam sampel saat

pengambilan bahan atau bahkan

sampel ini sendiri sudah

terdegradasi sehingga kadarnya

kurang dari yang disyaratkan

sehingga bahan baku

kloramfenikol ini tidak bias

dipergunakan sebagai bahan

baku obat.

Pengujian selanjutnya yaitu

pengujian kadar kloramfenikol


19/27

dalam sediaan krim. Hal ini

bertujuan untuk mengetahui

kadar zat aktif (kloramfenikol)

dalam suatu sediaan krim apakah

memenuhi kadar yang telah

disyaratkan atau tidak. Metode

yang digunakan sama seperti

pengujian kadar bahan baku

kloramfenikol. Perbedaannya,

dalam pengujian ini sampel yang

diuji sudah bergabung dalam

suatu sediaan sehingga

dibutuhkan perlakuan khusus.

Perlakuan khusus disini yaitu

pemisahan antara sampel (zat

aktif kloramfenikol) dari

basisnya.

Pertama, dibuat terlebih

dahulu kurva kalibrasi dengan

cara yang sama seperti

sebelumnya. Dari pengukuran

kurva kalibrasi ini, didapat

koefesien kolerasi atau R, adalah

0,996 dan kurva yang didapat

linear. Perbedaan dengan

persamaan regresi sebelumnya

yaitu ada dari ketepatan dalam

penimbangan sampel. Dalam

pembuatan kurva kalibrasi ini,

sampel ataupun pelarut yang

digunakan dalam pengujian

untuk diukur absorbansinya

harus seakurat mungkin. Jika

tidak, makan kurva tidak akan

linear. Dengan nilai koefesien

kolerasi yang mendekati 1 ini

maka persamaan regresinya pun

bisa akurat untuk digunakan

dalam penghitungan kadar

sampel karena factor

kesalahannya semakin kecil.

Selanjutnya preparasi larutan

sampel. Krim ditimbang

sebanyak 2 gram. Dalam 2 gram

ini setara zat aktif 40 mg yang

akan diuji. Cara pemisahannya

yaitu dengan melarutkan krim

dalam 20 ml methanol. Setelah

dilarutkan, sampel disonikasi.

Sonikasi yaitu suatu teknologi

yang memanfaatkan gelombang

ultrasonic. Gelombang ini dapat

merambat pada medium padat,

cair maupun gas. Proses sonikasi

ini mengubah sinyal listrik

menjadi getaran fisik. Efek

sonikasi ini yaitu pecahnya

molekul pada sampel. Tujuannya


20/27

adalah untuk memisahkan antara

zat aktif kloramfenikol dengan

basisnya sampai basis tersebut

menggumpal di permukaan

larutan. Kemudian filtratnya

disaring menggunakan kertas

saring untuk didapat

kloramfenikol yang terdapat

dalam krim setelah dipisahkan

dengan basisnya. Kemudian

dilakukan pengenceran sampai

didapat konsentrasi 20 ppm.

Perlakuan ini dilakukan

sebanyak tiga kali agar didapat

hasil yang lebih akurat dan

presisi. Setelah itu diukur

absorbansinya. Didapat

absorbansi dari sampel 1 0,1519;

sampel 2 0,081; sampel 3

0,1317.

Kadar kloramfenikol yang

didapat dari pengujian ini sangat

kecil. Konsentrasi yang diukur

pada saat pengujian tidak tepat

20 ppm dimana pada saat

formulasi krim, kadar

kloramfenikol dalam sediaan

tidak tepat 200 mg dalam setiap

10 gram. Hal ini dikarenakan

sediaan yang dibuat massanya

melebihi dari yang tercantum

dalam formula sehingga kadar

kloramfenikolnya pun berkurang

tidak sesuai dengan yang

diperhitungkan dalam formula

tersebut. Selain itu, saat

penyaringan filtrate ke dalam

labu, terdapat beberapa bagian

dari basisnya yang ikut tersaring

ke dalam labu sehingga

dimungkinkan ada cemaran

berupa basis dalam sampel yang

diuji ke dalam spektrofotometer

tersebut atau mungkin saat

disonikasi, ada beberapa bagian

molekul dari kloramfenikol yang

tidak pecah dan ikut

menggumpal bersama basis

sehingga tidak tersaring dalam

labu ukur. Kemungkinan

kesalahan lain yaitu dalam

preparasi sampel. Kadar sampel

yang akan diuji menggunakan

spektrofotometer adalah 20 ppm.

Kemungkinan terjadi kesalahan

ketika menambahkan methanol

dalam labu ukur tidak tepat. Ini

merupakan pengujian kuantitatif


21/27

dimana konsentrasi dari masing-

masing sampel yang digunakan

harus tepat dan akurat sehingga

didapat hasil yang sesuai. Dari

instrument sendiri terdapat eror

dimana untuk sampel 2 dan 3

didapat hasil kadar dengan nilai

negative, ini dimungkinkan

karena pembilasan kuvet tidak

bersih sehingga menghasilkan

nilai absorbansi yang sangat

kecil.

Kadar kloramfenikol dalam

sediaan krim ini hanya sebesar

0,73% sehingga sediaan krim ini

tidak dapat digunakan oleh

konsumen karena efek terapi dari

krim ini tidak akan tercapai

dengan sangat sedikitnya kadar

zat aktif dalam sediaan.

V. KESIMPULAN

1. Didapat kadar bahan baku

kloramfenikol dari

pengujian menggunakan

metode spektrofotometri uv

sebesar 82,87%. Hal ini

tidak sesuai dengan

literature yang seharusnya

yaitu antara 98-103 %.

2. Dari hasil pengujian,

didapat kadar

kloramfenikol dalam

sediaan krim adalah

sebesar 0,73%. Hasil ini

sangat kecil sehingga dapat

dikatakan bahwa krim

tersebut tidak mempunyai

efek teurapetik.

VI.

DAFTAR PUSTAKA

Depkes RI. 1979. Farmakope

Indonesia Edisi III . Jakarta:

Depkes RI.

Depkes RI. 1995. Farmakope

Indonesia Edisi IV . Jakarta:

Depkes RI.

Falagas, M. E.; Michalopoulos,

A. A.; "Potential of old-

generation antibiotics to

address current need for

new antibiotics"; Expert

Rev Anti Infect Ther., 6,

593 – 600, 2008.

Gandimathi et al. 2012.

Analytical Process of


22/27

Drugs By Ultraviolet

(UV) Spectroscopy.

International Journal of

Pharmaceutical Research

& Analysis. Vol 2. 72-72.

Siregar, S. 2010. Statistika

Deskriptif Untuk

Penelitian. Jakarta:

Rajawali Pers.

Svehla, G. 1985. Vogel Bagian

Satu Buku Teks Analisis

Anorganik Kuantitatif

Makro dan Semi Makro

Edisi Kelima. Jakarta:

PT. Kalimar Media

Pustaka.

Theivarasu et al. 2010. Uv

Spectrophotometric

Determination of

Carvedilol in

Pharmaceutical

Formulation. Asian

Journal of

Pharmaceutical and

Clinical Research. Vol.

3. Issue 4

Tutorvista. ______.Qualitative

and Quantitative

Analysis. Tersedia online

di

http://chemistry.tutorvista.

com/analytical-

chemistry/qualitative-

analysis.html [Diakses

pada 5 November 2015].

Underwood, A.L. 2002.

Analisis Kimia Kuantitatif.

Jakarta: Erlangga.

Wattimena JR dkk. 1991.

Farmakodinamik dan

Terapi Antibiotik .

Yogyakarta: Gajah Mada

University.

http://chemistry.tutorvista.com/analytical-chemistry/qualitative-analysis.htmlhttp://chemistry.tutorvista.com/analytical-chemistry/qualitative-analysis.htmlhttp://chemistry.tutorvista.com/analytical-chemistry/qualitative-analysis.htmlhttp://chemistry.tutorvista.com/analytical-chemistry/qualitative-analysis.htmlhttp://chemistry.tutorvista.com/analytical-chemistry/qualitative-analysis.htmlhttp://chemistry.tutorvista.com/analytical-chemistry/qualitative-analysis.htmlhttp://chemistry.tutorvista.com/analytical-chemistry/qualitative-analysis.htmlhttp://chemistry.tutorvista.com/analytical-chemistry/qualitative-analysis.htmlhttp://chemistry.tutorvista.com/analytical-chemistry/qualitative-analysis.htmlhttp://chemistry.tutorvista.com/analytical-chemistry/qualitative-analysis.htmlhttp://chemistry.tutorvista.com/analytical-chemistry/qualitative-analysis.htmlhttp://chemistry.tutorvista.com/analytical-chemistry/qualitative-analysis.html


23/27

Lampiran

Perhitungan

Kadar air

% kadar air =

x 100%

=()()

() x 100%

= 0,175%

Kadar bahan baku kloramfenikol

1)

Y = 0,029x – 0,036

0,4475 = 0,029x – 0,036

0,029x = 0,4835

X = 16,67 ppm

% kadar =

x 100%

= 83,35%

2) Y = 0,029x – 0,036

0,4488 = 0,029x – 0,036

0,029x = 0,4848

X = 16,71 ppm

% kadar =

x 100%

= 83,55%

3) Y = 0,029x – 0,036

0,438 = 0,029x – 0,036

0,029x = 0,474


24/27

X = 16,34 ppm

% kadar =

x 100%

= 81,7%

% rata-rata kadar =

= 82,87 %

Perhitungan kadar kloramfenikol dalam sediaan krim

Sediaan krim setiap 10 gr mengandung 200 mg kloramfenikol, dibutuhkan

zat aktif 40 mg untuk pengujian, maka:

X = 2 gr (2 gram krim mengandung 40 mg kloramfenikol)

Pengenceran Konsentrasi untuk kurva baku

1000 ppm dibuat dengan melarutkam 100 mg dalam methanol 100 ml.

- Pengenceran jadi 25 ppm

1000ppm. X = 25 ppm. 20 ml

X = 0,5 ml

-

Pengenceran jadi 20 ppm1000ppm. X = 20 ppm. 20 ml

X = 0,4 ml


1000ppm. X = 15 ppm. 20 ml

X = 0,3 ml


1000ppm. X = 10 ppm. 20 ml

X = 0,2 ml


1000ppm. X = 5 ppm. 20 ml

X = 0,1 ml


25/27

Perhitungan konsentrasi sampel (ppm)

40 mg sampel dilarutkan dalam 100 ml methanol

40 mg/ 100 ml = 400 ppm

Pengenceran 400 ppm menjadi 20 ppm

V1.N1 = V2.N2

x. 400 = 50.20ppm

x = 2,5 ml

Perhitungan Kadar sampel

1)

Sampel 1 (y= 0,1519)

Y = 0,0266x + 0,148

0,1519 = 0,0266x + 0,148

0,0266x= 0,1519 - 0,148

X = 0,146 ppm

% kadar =

x 100% = 0,73%

2)

Sampel 2 (y= 0,081)

Y = 0,0266x + 0,148

0,081 = 0,0266x + 0,148

0,0266x= 0,081 - 0,148

X = - 2,5188 ppm

3) Sampel 3 (y= 0,1317)

Y = 0,0266x + 0,1480,1317 = 0,0266x + 0,148

0,0266x= 0,1317 - 0,148

X = - 0,6128 ppm


26/27

Gambar

Uji dengan Fujiwara

2 ml reagen + 1 ml piridin

(larutan kuning dan terdapat endapan)

Larutan dipanaskan 2 menit

(larutan menjadi merah tua + endapan)

Uji Nessler

Blanko (pereaks)i

(kuning bening)

Sampel (sampel + pereaksi)

(kuning keruh)


27/27

Dipanaskan pada suhu 100 C

(10 menit pertama: sampel berwarna

orange terang + endapan; blanko

berwarna kuning + endapan putih)

(10 menit kedua: blanko berwarna kuning

bening + endapan kehitaman; sampel

berwarna orange pekat + endapan

cokelat)

Uji Kadar Kloramfenikol dalam Krim

Menimbang sediaan krimKrim dimasukkan ke dalam labu ukur

lalu ditambahkan pereaksi metanol

260110140084_ai siti rika f_modul 7,8 & 9

Documents