PENGARUH EKSTRAK DAUN JERUJU (Acanthus ilicifolius L.) TERHADAPFOLIKULOGENESIS PADA OVARIUM MENCIT (Mus musculus L.)

( Skripsi )

Oleh

Oksa Trinanda

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAMUNIVERSITAS LAMPUNG

BANDARLAMPUNG2018

ABSTRAK

PENGARUH EKSTRAK DAUN JERUJU (Acanthus ilicifolius L.)TERHADAP FOLIKULOGENESIS PADA OVARIUM MENCIT

(Mus musculus L.)

Oleh

Oksa Trinanda

Jeruju (Acanthus ilicifolius) merupakan tanaman yang hidup di kawasanmangrove,dan sangat jarang di daratan. Tanaman jeruju memiliki kandungansenyawa metabolit sekunder seperti senyawa glukosida, alkaloid, flavonoid, asamlemak, steroid, lignan, komponen fenol dan terpenoid. Kandungan senyawametabolit pada daun jeruju dinilai bersifat antiestrogenik karena memiliki strukturkimia yang menyerupai struktur estrogen pada tubuh sehingga digunakan sebagaiantifertilitas. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh ekstrak daunjeruju terhadap perkembangan folikel pada ovarium mencit. Dalam penelitian ini,akan menggunakan hewan uji mencit betina berumur 3 bulan yang diberi ekstrakdaun jeruju secara oral dan dilihat pengaruhnya terhadap folikulogenesis padaovarium. Percobaan dilakukan menggunakan metode Rancangan Acak Lengkap(RAL) dengan 1 kelompok Kontrol (K) yang diberi 0,3 ml aquabides/30 grBB,dan 3 kelompok perlakuan yaitu P1 diberi 3,75 mg/30 grBB dalam 0,3 mlaquabides, P2 diberi 7,5 mg/30 grBB dalam 0,3 ml aquabides, P3 diberi 15 mg/30grBB dalam 0,3 ml aquabides selama 14 hari. Selanjutnya, data yang didapatkandianalisis menggunakan metode analisis One Way Anova dan uji BNT pada taraf5%. Hasil pengamatan menunjukkan bahwa ekstrak daun jeruju menurunkanjumlah folikel primer, sekunder, tersier dan de Graff serta diameter masing-masing folikel mengalami penurunan setelah pemberian ekstrak daun jeruju(Acanthus ilicifolius) dan perkembangan folikel terhenti sampai tahap folikeltersier karena banyak folikel yang mengalami artesia akibat pemberian ekstrakdaun jeruju.

Kata Kunci :Tanaman jeruju (Acanthus ilicifolius), antiestrogen, antifertilitas,ovarium, folikulogenesis.

PENGARUH EKSTRAK DAUN JERUJU (Acanthus ilicifolius L.)

TERHADAP FOLIKULOGENESIS PADA OVARIUM MENCIT

(Mus musculus L.)

Oleh

Oksa Trinanda

Skripsi

Sebagai salah satu syarat untuk mencapai gelar

SARJANA SAINS (S.Si)

pada

Jurusan Biologi

Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

UNIVERSITAS LAMPUNG

BANDAR LAMPUNG

2018

Dengan Ridho ALLAH SWT,

Kupersembahkan karya kecilku ini kepada Mama dan Papaku Tercinta

yang selalu senantiasa memanjatkan doa untuk putra tercintanya dan

telah menghantarkan diriku sampai jenjang ini dengan segala daya upaya

tanpa kenal lelah. Juga untuk para sahabat, teman, orang terkasih yang

aku sayangi.

Serta Almamater dan Para Pendidik ku Yang Kusayangi.

MOTTO

Hiduplah kamu bersama manusia sebagaimana pohon berbuah,mereka melemparinya dengan batu, tetapi ia membalasnya dengan

buah. (Abu Hamid Al Ghazali)

Kekuatan terbesar yang dimiliki dunia adalah generasi muda dankecantikan seorang wanita. (Chanakya)

JUST COFFEE, BLACK. LIKE MY SOUL. (Cassandra Clare)

DAFTAR ISI

Halaman

ABSTRAK ................................................................................................ i

HALAMAN PENGESAHAN .................................................................. ii

SANWACANA ......................................................................................... iii

DAFTAR ISI.............................................................................................. iv

DAFTAR TABEL .................................................................................. v

DAFTAR GAMBAR ................................................................................ vi

I. PENDAHULUAN ................................................................................ 1

A. Latar Belakang .......................................................................... ... 1

B. Tujuan Penelitian ........................................................................ ... 3

C. Manfaat Penelitian........................................................................... 3

D. Kerangka Pemikiran .................................................................. ... 3

E. Hipotesis ......................................................................................... 4

II. TINJAUAN PUSTAKA ..................................................................... 5

A. Tanaman Jeruju (Acanthus ilicifolius L.) ........................................ 5

1. Klasifikasi dan Morfologi Jeruju (Acanthus ilicifolius L.)....... 52. Tempat tumbuh dan penyebaran………………………………. 73. Kandungan Kimia Dan Manfaat Tanaman Jeruju……………. 7

B. Biologi Mencit (Mus musculus L.).................................................. 9

1. Klasifikasi Mencit (Mus musculus L.) ...................................... 9

2. Reproduksi Mencit (Mus musculus L.) ..................................... 10

3. Folikulogenesis ......................................................................... 15

1. Folikel Primordial ................................................................ 152. Folikel Sekunder .................................................................. 163. Folikel Tersier ...................................................................... 174. Folikel de Graaf.................................................................... 18

4. Hormon-Hormon Reproduksi .............................................. .... 191. FSH dan LH ......................................................................... 192. Estrogen ................................................................................ 203. Progesteron .......................................................................... 214. Gonadotropin Releasing Hormone (GnRH) ............................... 21

III. METODE PENELITIAN ................................................................. 22

A. Waktu dan Tempat Penelitian ....................................................... 22

B. Alat dan Bahan ..............................................................................

1. Alat ........................................................................................... 222. Bahan ........................................................................................ 23

C. Prosedur Penelitian ........................................................................ 23

1. Persiapan kandang...................................................................... 232. Persiapan Hewan Uji.................................................................. 233. Pembuatan Ekstrak daun jeruju (Acanthus ilicifolius L.) .......... 244. Pemberian Perlakuan ................................................................. 245. Perhitungan Penetapan Dosis .................................................... 256. Pembedahan Mencit (Mus musculus L.) ................................... 25

D. Pengamatan dan Pengukuran Diameter Folikel .............................. 26

a. Trimming..................................................................................... 26b. Dehidrasi ..................................................................................... 26c. Embedding................................................................................... 27d. Cutting......................................................................................... 27e. Staining........................................................................................ 28f. Mounting...................................................................................... 28h. Parameter yang Diamati .............................................................. 28

E. Rancangan Penelitian dan Analisis Data ......................................... 29

F. Diagram Alir Penulisan .................................................................... 30

IV. HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN ................................ 31

A. Hasil Penelitian ............................................................................... 31

1. Jumlah Folikel............................................................................ 312. Diameter Folikel......................................................................... 33

B. Pembahasan ..................................................................................... 36

V. KESIMPULAN DAN SARAN ........................................................... 42

A. Kesimpulan ..................................................................................... 42B. Saran ................................................................................................ 42

DAFTAR PUSTAKA ............................................................................... 43

LAMPIRAN............................................................................................... 47

DAFTAR TABEL

Tabel Halaman

1. Jumlah folikel primer pada ovarium mencit setelah pemberianekstrak daun jeruju (Acanthus ilicifolius L)…………………… 31

2. Jumlah folikel sekunder pada ovarium mencit setelahPemberian ekstrak daun jeruju (Acanthus ilicifolius L)….…… 31

3. Jumlah folikel tersier pada ovarium mencit setelah pemberianekstrak daun jeruju (Acanthus ilicifolius L)…………………… 32

4. Diameter Folikel Primer pada ovarium mencit setelahPemberian ekstrak daun jeruju (Acanthus ilicifolius L)........... 33

5. Diameter Folikel Sekunder pada ovarium mencit setelahPemberian Ekstrak daun jeruju (Acanthus ilicifolius L).......... 33

6. Diameter Folikel Tersier pada ovarium mencit setelahPemberian ekstrak daun jeruju (Acanthus ilicifolius L).......... 34

7. Hasil analisis uji statistik One Way ANOVA pengaruhekstrak daun jeruju terhadap jumlah folikel primerpada ovarium mencit ............................................................. 47

8. Hasil uji Beda Nyata Terkecil (BNT) pengaruhekstrak daun jeruju terhadap jumlah folikel primerpada ovarium mencit ............................................................. 47

9. Hasil analisis uji statistik One Way ANOVA pengaruhekstrak daun jeruju terhadap jumlah folikel sekunderpada ovarium mencit ............................................................ 48

10. Hasil Uji Beda Nyata Terkecil (BNT) pengaruh ekstrakdaun jeruju terhadap jumlah folikel sekunder padaovarium mencit ................................................................ 48

11. Hasil analisis uji One way ANOVA pengaruh ekstrakdaun jeruju terhadap jumlah folikel tersier padaovarium mencit ............................................................... 49

12. Hasil Uji Beda Nyata Terkecil (BNT) pengaruh ekstrakdaun jeruju terhadap terhadap jumlah folikel tersier padaovarium mencit ............................................................... 50

13. Hasil analisis uji statistik One Way ANOVA pengaruhekstrak daun jeruju terhadap diameter folikel primerpada ovarium mencit ............................................................. 50

14. Hasil uji Beda Nyata Terkecil (BNT) pengaruhekstrak daun jeruju terhadap diameter folikel primerpada ovarium mencit ............................................................. 51

15. Hasil analisis uji statistik One Way ANOVA pengaruhekstrak daun jeruju terhadap diameter folikel sekunderpada ovarium mencit ............................................................ 52

16. Hasil Uji Beda Nyata Terkecil (BNT) pengaruh ekstrakdaun jeruju terhadap diameter folikel sekunder padaovarium mencit ................................................................ 52

17. Hasil analisis uji One way ANOVA pengaruh ekstrakdaun jeruju terhadap diameter folikel tersier padaovarium mencit ............................................................... 53

18. Hasil Uji Beda Nyata Terkecil (BNT) pengaruh ekstrakdaun jeruju terhadap terhadap diameter folikel tersier padaovarium mencit ............................................................... 53

1

I. PENDAHULUAN

A. Latar Belakang

Indonesia memang sangat kaya dengan sumber daya alamnya yang

melimpah, tumbuhan yang memiliki potensi atau nilai pengobatan bisa

dimanfaatkan khasiatnya serta luar biasa kualitas yang di hasilkan dari

memanfaatkan tumbuhan tersebut, salah satunya dari manfaat akar, daun

dan biji tumbuhan jeruju (Anastasika, 2007).

Jeruju (Acanthus ilicifolius) hidup di kawasan mangrove, dan sangat

jarang di daratan. Memiliki kekhasan sebagai herba yang tumbuh rendah

dan kuat, yang memiliki kemampuan untuk menyebar secara vegetatif

karena perakarannya yang berasal dari batang horizontal, sehingga

membentuk bagian yang besar dan kukuh. Bunga kemungkinan diserbuki

oleh burung dan serangga. Biji tertiup angin, sampai sejauh 2m. Jeruju

(Acanthus ilicifolius) merupakan tanaman herba rendah, terjurai di

permukaan tanah, kuat, agak terkayu, tinggi mencapai 2m. Cabang

umumnya muncul dari bagian-bagian yang lebih tua. Akar udara muncul

dari permukaan bawah horizontal (Suryono, 2013).

Gaurin, (2004) menyatakan bahwa daun jeruju berkhasiat sebagai obat

hepatitis, leprosy, neuralgia, asma, diabetes, diuretik cacing gelang,

2

rematik, penyakit kulit, sakit perut, antifertilitas, tumor dan borok (resin).

Tanaman jeruju memiliki kandungan senyawa metabolit sekunder

terutama pada bagian batang, akar, daun dan biji. Jeruju atau Acanthus

ilicifolius L. mengandung senyawa glukosida, alkaloid, flavonoid, asam

lemak, steroid, lignan, komponen fenol dan terpenoid (Kanchanapoom

dkk, 2001).

Berdasarkan penelitian-penelitian sebelumnya mengenai tanaman yang

berpotensi sebagai antifertilitas, memiliki kandungan senyawa-senyawa

alkaloid seperti flavonoid, triterpenoid saponin, minyak esensial, dan

fitosterol. Diduga kandungan tersebut ada yang bersifat sebagai

antiestrogen yang berperan dalam penghambatan siklus reproduksi

(Wostmann dan Liebezeid, 2008).

Dalam siklus reproduksi betina, salah satu organ yang berperan adalah

ovarium sebagai tempat pematangan ovum. Folikulogenesis tersebut

dipengaruhi oleh mekanisme siklus hormon diantaranya FSH (Follicle

Stimulating Hormone) dan Estrogen yang dikendaikan oleh hipotalamus

pada otak. Kandungan ekstrak daun jeruju yang mengandung senyawa-

senyawa seperti flavonoid, triterpenoid saponin, minyak esensial, dan

fitosterol. Menurut Wostmann dan Liebezeid (2008) golongan senyawa

flavonoid termasuk salah satu golongan senyawa fitoestrogen karena

memiliki struktur yang mirip dengan estrogen. Sehingga flavonoid dalam

ekstra tersebut akan berikatan dengan reseptor estrogen dalam tubuh dan

akan mempengaruhi sekresi hormon FSH (Follicle Stimulating Hormone)

3

oleh hipotalamus yang merupakan hormon yang berperan penting dalam

pematangan ovum. Kadar estrogen yang tinggi dalam tubuh, akan

memberikan umpan balik negatif ke hipotalamus untuk menghentikan

sekresi FSH (Follicel Stimulating Hormone). Bila FSH terhambat, maka

folikulogenesis akan terhambat juga dan menyebabkan pematangan ovum

tidak berjalan.

B. Tujuan Penelitian

Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh ekstrak daun jeruju

(Acanthus ilicifolius L.) terhadap jumlah, diameter, serta perkembangan

folikel primer, sekunder, dan tersier, dan pada ovarium mencit (Mus

musculus L.)

C. Manfaat Penelitian

Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi ilmiah dan

gambaran umum bagi masyarakat mengenai dampak dan manfaat daun

jeruju terhadap perkembangan folikel primer, sekunder, dan tersier pada

ovarium mencit (Mus musculus L.) betina. Agar selanjutnya dapat diteliti

dengan hewan tingkat tinggi lainnya

D. Kerangka pikir

Tanaman yang berpotensi sebagai obat telah ditemukan di hutan mangrove

Indonesia (Hamdani, 2007). Hutan mangrove Indonesia memiliki keunikan

dan kekhasan keanekaragaman hayati yang terbesar di dunia. Seperti

4

banyak ditemukannya tumbuhan bergenus Acanthus pada ekosistem

mangrove. Salah satu jenis dari Acanthus yang dimanfaatkan sebagai obat

yaitu Acanthus ilicifolius L. yang dikenal dengan jeruju. Kandungan

senyawa-senyawa alkaloid seperti flavonoid, triterpenoid saponin, minyak

esensial, dan fitosterol. Mungkin diantara kandungan tersebut ada yang

bersifat sebagai anti estrogen yang berperan dalam penghambatan siklus

reproduksi.

Setiap bagian dari akar, batang, daun, biji dan bunga tanaman jeruju ini

memiliki banyak manfaat. Namun, bagian daun tanaman jeruju inilah yang

paling banyak dimanfaatkan sebagai obat. Untuk mengetahui pemanfaatan

ekstrak daun jeruju, maka perlu dilakukan penelitian guna mengetahui

tingkat keamanan apakah daun jeruju sebagai obat menghambat

perkembangan folikel primer, sekunder, dan tersier pada ovarium mencit

(Mus musculus L.).

E. Hipotesis

Hipotesis yang diajukan dalam penelitian ini adalah ekstrak daun jeruju

(Acanthus ilicifolius L.) dapat menghambat jumlah, diameter, serta

perkembangan folikel primer, sekunder, dan tersier pada ovarium mencit

(Mus musculus L.)

5

II. TINJAUAN PUSTAKA

A. Tanaman Jeruju (Acanthus ilicifolius L.)

1. Klasifikasi dan Morfologi

Menurut Plantamor (2016) klasifikasi tumbuhan jeruju adalah sebagai

berikut :

Kingdom : Plantae

Divisi : Magnoliophyta

Kelas : Magnoliopsida

Ordo : Scrophulariales

Famili : Acanthaceae

Genus : Acanthus

Spesies : Acanthus ilicifolius L.

Gambar 1. Tanaman jeruju (Biodiversity, 2013).

6

Jeruju merupakan herba rendah, terjurai di permukaan tanah, kuat, agak

berkayu, ketinggian hingga 2 m. Cabang umumnya tegak tapi cenderung

kurus sesuai dengan umurnya. Percabangan tidak banyak dan umumnya

muncul dari bagian-bagian yang lebih tua. Akar udara muncul dari

permukaan bawah batang horizontal (Noor et al., 2006).

Daun jeruju memiliki dua sayap gagang daun yang berduri terletak pada

tangkai. Permukaan daun halus, tepi daun bervariasi: zigzag/bergerigi

besar-besar seperti gergaji atau agak rata dan secara gradual menyempit

menuju pangkal. Unit dan letak: sederhana, berlawanan. Bentuk: lanset

lebar. Ujung: meruncing dan berduri tajam. Ukuran: 9-30 x 4-12 cm (Noor

et al., 2006).

Jeruju (Acanthus ilicifolius) hidup di kawasan mangrove, dan sangat

jarang di daratan. Memiliki kekhasan sebagai herba yang tumbuh rendah

dan kuat, yang memiliki kemampuan untuk menyebar secara vegetatif

karena perakarannya yang berasal dari batang horizontal, sehingga

membentuk bagian yang besar dan kukuh. Bunga kemungkinan diserbuki

oleh burung dan serangga. Biji tertiup angin, sampai sejauh 2 m. Jeruju

(Acanthus ilicifolius) merupakan tanaman herba rendah, terjurai di

permukaan tanah, kuat, agak terkayu, tinggi mencapai 2m. Cabang

umumnya muncul dari bagian – bagian yang lebih tua. Akar udara muncul

dari permukaan bawah horizontal (Suryono,2013).

7

2. Tempat tumbuh dan penyebaran

Biasanya pada atau dekat mangrove, sangat jarang di daratan. Memiliki

kekhasan sebagai herba yang tumbuh rendah dan kuat, yang memiliki

kemampuan untuk menyebar secara vegetatif karena perakarannya yang

berasal dari batang horizontal, sehingga membentuk bagian yang besar

dan kukuh. Bunga kemungkinan diserbuki oleh burung dan serangga.

Biji tertiup angin, sampai sejauh 2 m. Di Bali berbuah sekitar Agustus

(Noor et al., 2006).

Mahkota bunga berwarna biru muda hingga ungu lembayung, kadang agak

putih. Panjang tandan bunga 10-20 cm, sedangkan bunganya sendiri 5-

4 cm. Bunga memiliki satu pinak daun penutup utama dan dua sekunder.

Acanthus ilicifolius dan A. ebracteatus merupakan spesies merambat yang

biasa tumbuh hingga setinggi 2m. Banyak ditemukan pada tanah lunak

yang berlumpur di sepanjang bantaran sungai. Seringkali di daerah

mangrove yang ditebangi. Ada dua spesies utama di Asia Tenggara.

Spesies Acanthus ilicifolius dan A. ebracteatus, di Thailand dan Indonesia,

daun spesies ini diolah menjadi teh herbal karena memiliki khasiat obat.

Jenis yang tidak berduri biasanya dijadikan makanan ternak.Nilai nutrisinya

belum banyak diketahui masyarakat pesisir (Priyono et al., 2010).

3. Kandungan Kimia Dan Manfaat Tanaman Jeruju

Studi fitokimia pada jeruju mengungkapkan bahwa tanaman ini

mengandung senyawa alkaloid, 2 glikosida siklolignan yaitu (+)-

lyoniresinol 3a-O-b-D-galactopyranosyl-(6)-b-D-glucopyranoside (+)-

8

lyoniresinol 2a-O-b-D-galactopyranosyl-3a-O-b-D-glucopyranoside yang

terdapat pada bagian aerial tanaman. Selain itu terdapat juga di dalamnya

glikosida feniletanoid (ilicifolioside A) dan glikosida alcohol alifatik

(ilicifolioside B). Turunan senyawa koumarin acancifoliuside, acteoside,

isoacteoside, canthaminoside, (+)-lyoniresinol 3a-O-beta glucopyranoside,

(-)-lyoniresinol dan alpha-amyrin telah berhasil diisolasi dari ekstrak

metanol daun Acanthus ilicifolius L. (Saroya dan Amritpal, 2011). Hasil

penelitian menunjukkan bahwa ekstrak tumbuhan jeruju dapat membunuh

serangga ulat grayak sebesar ekstrak jeruju adalah 85,8% dan perlakuan

Mimba (pembanding insektisida nabati) hanya mencapai 70,6% (Akbar, B.

2010).

Jeruju berasal dari keluarga Acanthaceace, ekstrak tumbuhan Jeruju

(Acanthus sp), menduduki urutan kedua dengan persentase kematian larva

ulat grayak 85,8%. Tumbuhan ini kebanyakan tumbuh pada lahan-lahan

pasang surut yang berair atau ditepi-tepi drainase atau saluran air. Daun, biji

dan akar Acanthus sp berkhasiat sebagai obat cacing, disamping itu daun

muda berkhasiat sebagai obat sakit perut. Daun, akar dan biji tumbuhan

jeruju (Acanthus sp) mengandung saponin, flavonoid dan polifenol, di

samping itu bijinya juga mengandung alkoloida. Hal ini bahwa kandungan

kimia yang terdapat pada tanaman jeruju adalah saponin, flavonoida dan

polifenol yang banyak terdapat pada daun, akar dan biji Acanthus. Selain itu

bijinya juga mengandung alkaloida, yang bermanfaat untuk mengobati

berbagai penyakit yakni sakit perut, dan juga penyakit cacingan (Saroya dan

Ampritpal, 2011).

9

Daun jeruju mengandung senyawa verbaskosida dan asam fenolat. Dari

isolasi ekstrak etanol daun teh jeruju dihasilkan senyawa verbaskosida yaitu

suatu glikosida ester turunan asam kafeat yang diperoleh secara

kromatografi lapis tipis, spektrofotometri ultraviolet dan infra merah,

sedangkan senyawa asam fenolat yaitu asam vanilat, asam siringat, asam

ferulat, asam p-hidroksibenzoat dan asam p-kumarat dapat diidentifikasi

dari ekstrak etanol secara kromatografi lapis tipis selulosa dua dimensi.

(Anantasika, 2007).

B. Biologi Mencit (Mus musculus L)

1. Klasifikasi Mencit ( Mus musculus L.)

Klasifikasi mencit (Mus musculus L.) menurut Priyambodo (2003) adalah

sebagai berikut :

Kingdom : Animalia

Phyllum : Chordata

Class : Mamalia

Ordo : Rodentia

Familia : Muridae

Genus : Mus

Spesies : Mus musculus L.

Mencit adalah kelompok hewan mamalia rodensia (pengerat) yang masuk

dalam famili Muridae. Hewan ini sering ditemukan di dekat pemukiman

10

dengan bentuk seperti tikus kecil. Di alam, hewan ini sering dijumpai

dengan warna hitam-keabuan sementara untuk hewan uji, warna tikus ini

diseleksi yang albino (putih). Hewan mencit sebagai hewan percobaan

sering digunakan dalam penelitian biologi, biomedis, dan reproduksi.

Gambar morfologi mencit dapat dilihat pada gambar 2.

Gambar 2. Morfologi Mencit (Mus musculus L) (Anonim b, 2012).

2. Reprodusi Mencit

Ovarium merupakan organ penting dalam sistem reproduksi. Organ ini

memiliki fungsi eksokrin karena menghasilkan sel telur (ovum) dan juga

memiliki fungsi endokrin karena menghasilkan hormon reproduksi seperti

estrogen dan progesteron (Frandson 1992; Hafez dan Hafez, 2000). Setiap

hewan memiliki sepasang ovarium yang letaknya berbeda pada setiap

jenisnya, namun pada umumnya, ovarium kanan terletak di caudal ginjal

kanan dan ovarium kiri terletak di caudal ginjal kiri (Frandson 1992).

Bentuk ovarium bervariasi bergantung pada jenis hewan dan siklus birahi

(Samuelson 2007; Pineda dan Dooley 2003), tetapi secara umum bentuk

ovarium dapat dideskripsikan sesuai dengan jenis kebuntingan pada hewan.

Secara histologis, ovarium terdiri dari bagian korteks dan medula yang

dibungkus oleh lapisan epitel kubus sebaris yang disebut germinal

11

epithelium. Bagian medula terdiri dari jaringan ikat fibroelastik, jaringan

saraf dan pembuluh darah.

Menurut Partodihardjo (1980), bentuk ovarium pada setiap jenis hewan

berbeda-beda. Berdasarkan jumlah keturunan yang dilahirkan, bentuk

ovarium dibagi menjadi dua, yaitu :

a. Monotocous : Ovarium yang berbentuk bulat panjang atau oval dan

dimiliki oleh hewan yang melahirkan satu anak dalam 1 kali kelahiran.

Contoh : sapi dan kerbau.

b. Polytocous : ovarium berbentuk seperti buah murbei dan dimiliki oleh

hewan yang melahirkan anak dengan jumlah yang banyak dalam satu

kali kelahiran. Contoh : tikus dan babi.

Anatomi organ reproduksi pada mencit betina dapat dilihat pada Gambar 3.

Gambar 3. Sistem Reproduksi Mencit Betina (Wikipedia, 2008).a)ovarium; b) tuba uterina; c) urinary

Fungsi reproduksi wanita memiliki siklus aktivitas yang ditandai dengan

pertumbuhan dan perkembangan dari folikel dominan. Normalnya ovarium

a

b

c

12

akan memproduksi satu folikel dominan yang akan mengalami ovulasi

pada setiap siklus menstruasi. Folikel dominan akan memproduksi

estradiol pada saat fase folikuler dari siklus ovarium. Setelah ovulasi,

folikel akan berubah menjadi corpus luteum yang akan mensekresi

progesteron dalam jumlah besar saat fase luteal dari siklus menstruasi.

estradiol dan progesteron bekerja pada uterus untuk mempersiapkan

kondisi uterus sebagai tempat implantasi embrio.

Proses Perkembangan Folikel (folikulogenesis) dalam Ovarium

Perkembangan folikel ovarium atau folikulogenesis terjadi pada masa

prenatal dan postnatal. Proses awal perkembangan folikel terjadi pada masa

prenatal (Wandji et al. 1996). Sel benih primordial bermigrasi dari kantung

kuning telur menuju ovarium, kemudian berdiferensisi menjadi oogonia.

Sebagian besar oogonia melakukan mitosis sedangkan sebagian lainnya

berdiferensiasi menjadi oosit primer. Oosit primer yang dikelilingi oleh

epitel pipih selapis dikenal dengan nama folikel primordial. Folikel

primordial mengandung oosit yang berada dalam tahap profase I, namun

belum menyelesaikan pembelahan meiosis pertamanya sampai mencapai

masa pubertas. Folikel primordial pada beberapa mamalia seperti rodensia

dan kelinci, melanjutkan proses meiosis pada periode neonatal (Fortune

1994). Folikel yang mengandung oosit mengalami perkembangan ketika

hewan mencapai masa pubertas. Sel epitel yang mengelilingi oosit berubah

menjadi epitel kubus sebaris (Wandji et al. 1996; Fortune 1994) dan disebut

dengan folikel primer. Folikel primer berkembang menjadi folikel sekunder

dengan karakteristik telah bertambahnya sel epitel yang mengelilingi oosit

13

sampai dengan 5 lapis sel. Zona pelusida mulai terbentuk pada folikel

sekunder, sebagai suatu lapisan tipis di sekeliling oosit. Folikel tersier

merupakan folikel antral yang akan berkembang menjadi folikel de Graaf.

Folikel ini memiliki karakteristik telah terbentuknya antrum folikuli, yaitu

ruangan yang terbentuk akibat perkembangan sel sel folikuler. Antrum

folikuli pada awalnya terpisah, tetapi kemudian bersatu menjadi suatu

ruangan berbentuk bulan sabit. Antrum folikuler terus membesar hingga

mendesak sel telur menuju tepian folikel hingga akhirnya terjadi proses

ovulasi.

Pada folikel tersier, sel folikuler di sekitar oosit tetap utuh dan membentuk

kumulus ooforus. Selain sel-sel folikuler, folikel ini dikelilingi oleh dua

lapis jaringan ikat, yaitu lapis teka interna dan lapis teka eksterna. Lapis teka

interna merupakan lapisan bagian dalam yang menghasilkan estrogen dan

kaya pembuluh darah (Aughey dan Frye 2001). Lapis teka eksterna

merupakan lapis luar yang akan bersatu dengan stroma ovarium. Skema

perkembangan folikel dalam ovarium dapat dilihat dalam Gambar 3. Sisa

folikel de Graaf akan berkembang menjadi folikel hemoragikum (korpus

rubrum) setelah terjadi ovulasi. Selanjutnya korpus rubrum berkembang

menjadi korpus luteum yang banyak mengandung sel lutein. Jika terjadi

proses fertilisasi setelah ovulasi, korpus luteum akan berubah menjadi

korpus luteum graviditatum. Jika tidak ada proses fertilisasi, maka korpus

luteum akan mengalami regresi dan berubah menjadi korpus albikan yang

mengandung banyak jaringan ikat.

14

Gambar 4. Proses Folikulogenesis dan Ovulasi di ovarium pada mamalia(Barnes, Rosenfield, 2009).

Reproduksi merupakan faktor penting dalam kehidupan. Reproduksi pada

mamalia erat kaitannya dengan siklus estrus. Hormon progesteron

merupakan salah satu hormon yang berperan penting dalam siklus estrus.

Kadar progesteron dan estradiol dalam tubuh dapat dijadikan parameter

dalam penentuan fase pada siklus estrus (Khanum, 2011).

Siklus estrus merupakan jarak antara estrus yang satu sampai pada estrus

yang berikutnya. Setiap hewan mempunyai siklus estrus yang berbeda-

beda, ada golongan hewan monoestrus (estrus sekali dalam satu tahun),

golongan hewan poliestrus (estrus beberapa kali dalam satu tahun), dan

golongan hewan poliestrus bermusim (estrus hanya selama musim tertentu

dalam setahun). Daur atau siklus estrus terdiri dari empat fase, yaitu

proestrus, estrus, metestrus, dan diestrus. Fase estrus berbeda dengan siklus

estrus. Fase estrus merupakan fase dimana telur diovulasikan dari ovarium

ke saluran telur. Fase ini menandakan bahwa individu betina telah masak

Folikel

matang oositFolikelsekunder

Folikel primer

Stroma

Peleburan korpus luteum

Korpusluteum

Folikelpecah

Ovum

15

kelamin. Fase estrus setiap spesies berbeda-beda dan dapat diamati dengan

metode vaginal smear, tetapi tidak dapat diamati jika hewan betina tersebut

belum masak kelamin dan sedang hamil (Hafez, 2011).

3. Folikulogenesis

1. Folikel Primordial

Secara histologis, folikel primordial mengandung satu oosit primer

berukuran kecil (diameter ~ 25µm) yang tertahan dalam stadium profase

dari meiosis I, satu lapis sel granulosa gepeng atau skuamous, dan lamina

basalis. Dengan adanya lamina basalis, maka akan tercipta suatu

lingkungan mikro yang mendukung pertumbuhan dari sel granulosa dan

oosit, yang mana lamina basalis ini berfungsi agar kontak langsung

dengan sel-sel lain tidak terjadi. Folikel primordial tidak memiliki suplai

darah sendiri dan oleh karena itu hubungan dengan sistem endokrin pun

menjadi terbatas. Seluruh folikel primordial (oosit) dibentuk pada saat

masa fetus diantara umur gestasi bulan ke-6 dan ke-9. Oleh karena itu, dapat

dipahami bahwa semua oosit yang berpartisipasi dalam siklus

reproduksi wanita selama hidupnya telah ada dalam ovarium sejak lahir.

Jumlah folikel primordial atau sel telur dalam ovarium wanita berhubungan

dengan masa reproduksi wanita atau ovary reserve (OR) (Anonim a. 2009).

16

Gambar 5. Folikel Primer Ovarium Mamalia (Singh, 1991). a) oosit; b)inti; c) sel folikel; d) stroma.

2. Folikel Sekunder

Pertumbuhan folikel primer menjadi folikel sekunder merupakan

pertumbuhan tahap kedua dan terjadi pada waktu hewan betina telah lahir

serta menjalani proses pendewasaan tubuh. Hanya sebagian folikel primer

yang akan tumbuh menjadi folikel sekunder (Anantasika, 2007).

Gambar 7. Folikel Sekunder Ovarium Mamalia (Singh,1991). a) zonapelucida ; b) sel folikel menjadi silindris; c) membran basal.

Guyton dan Hall (1997), menyatakan bahwa proliferasi yang berlangsung

cepat dari sel granulosa merupakan tahap awal terbentuknya folikel

sekunder. Setelah proliferasi berlangsung selama beberapa hari, sel-sel

granulosa akan mengesekresi cairan folikuler yang mengandung estrogen.

a

b

c

d

a

b

c

17

Folikel sekunder ditandai dengan oosit mencapai besar maksimal dan

letaknya ekstentrik dalam folikel. Meiosis 1 sampai pada tahap diploten

profase. Sel granulosa terdiri dari 6-12 lapis sel (Yatim, 1994).

3. Folikel tersier

Setelah MVP oosit kita terpilih, terus tumbuh semakin besar sampai

mencapai kematangan. Tahap folikel tersier ditandai dengan kehadiran

bentuk yang besar, berisi ruang cairan di dalam folikel matang, atau folikel

Graafian, yang hanya istilah lain untuk folikel matang. Anda dapat

memberitahu tahap ini selain tahap sekunder karena ruang di tengah folikel,

antrum, lebih besar dan lebih baik didefinisikan pada tahap perkembangan

maka pada tahap folikel sekunder (Airul, 2010).

Gambar 8. Folikel Tersier Ovarium Mamalia (Singh, 1991). a) oosit; b)zona pelucida; c) stroma; d) rongga atrum

a

b

c

d

18

4. Folikel de Graaf

Folikel ini merupakan tingkatan terakhir dalam fase folikuli. Folikel ini

terbentuk karena adanya peningkatan FSH pada ovarium. Folikel de graff

yang matang berisi likuor folikel, mengandung estrogen dan siap berovulasi.

Folikel de Graff ditandai dengan munculnya suatu ruang (kavitas) atau

antrum yang mengandung cairan yang disebut cairan folikuler atau liquor

folliculi. Folikel Graaf dapat juga disebut sebagai folikel antral. Cairan

folikuler adalah eksudat dari plasma yang merupakan hasil sekresi dari

oosit dan sel granulosa. Cairan tersebut merupakan medium yang mana

residu sel granulosa dan oosit serta molekul-molekul regulator harus

melewatinya untuk keluar dari dan melalui membran folikel.

Gambar 9. Folikel de Graff Ovarium Mamalia (Singh, 1991). a.)kumulusooforus; b) oosit; c) zona pelucida; d) duskus proligerus; e)rongga folikel; f) membran granulosa; g) teka interna; h) tekaeksterna.

a

b

cd

e

f gh

19

4. Hormon-hormon Reproduksi

Hormon gonadotropik (GnRH) pada perkembangan folikel sangat berperan

penting. GnRH merupakan hormon yang diproduksi oleh hipotalamus di

otak. GnRH akan merangsang pelepasan Folikel Stimulating Hormone

(FSH) di hipofisis (Campbell et al, 2010). Pada perkembangan awal, tidak

terlihat perlunya fluktuasi siklik sekresi FSH dan LH. Peran FSH dimulai

dengan merangsang pembentukan folikel pre-ovulasi yang kemudian akan

ber-ovulasi dan membentuk korpus luteum yang memiliki respon terhadap

LH. Dengan adanya sekresi hormon luteinizing (LH) yang mendadak (LH

surge), lonjakan LH akan merangsang folikel Graff pecah dan sel telur akan

dikeluarkan, meninggalkan sel folikel untuk menjadi korpus luteum. Pada

sebagian besar mamalia, proses ini terjadi pada masa kehamilan. Setelah

menarche, diperkirakan bahwa waktu yang diperlukan oleh sebuah folikel

primordial untuk menjadi folikel pre-antral besar membutuhkan waktu

sekitar 85-150 hari, sehingga setiap folikel yang berujung dengan proses

ovulasi sebenarnya telah tumbuh sejak paling tidak 3-5 siklus menstruasi

sebelumnya (Drummond, 2006).

1. FSH dan LH

FSH dan LH akan memicu pematangan folikel pada ovarium dan

sekresi estrogen. Sintesis FSh dan lh di atur oleh gonadotropin( GnRH).

FSH berfungsi untuk merangsang pembentukan folikel masak tetapi tidak

menyebabkan sel telur untuk ovulasi. Selanjutnya proses ovulasi akan

dirangsang oleh hormone LH. Folikel yang telah matang kemudian

20

mensintesis dan mensekresi pembentukan estrogen. Pada fase folikel ini

bertepatan dengan fase proliferasi pada uterus, peningkatan kadar

estrogen merangsang endometrium untuk menebal dan mempunyai

banyak pembuluh darah. Kadar estrogen yang meningkat menyebabkan

penghambatan sekresi FSH dan secara langsung merangsang peningkatan

sekresi LH selama fase folikel (Sherwood, 2001).

2. Estrogen

Estrogen merupakan salah satu hormon reproduksi pada hewan betina.

Hormon ini terutama disekresi oleh sel-sel granulosa penyusun folikel

ovarium. Estrogen dibentuk oleh sel-selgranulosa dalam folikel ovarium

melalui serangkaian konversi melalui reaksi enzimatis. Sintesis hormon

estrogen akan meningkat seiring dengan perkembangan folikel dalam

ovarium. Estrogen bekerja dalam merangsang pertumbuhan miometrium

dan endometrium. Peningkatan dalam sintesis reseptor progesteron di

dalam endometrium dipengaruhi oleh hormon estrogen sehingga

progesteron mampu merangsang endometrium tetapi setelah

endometrium tersebut di rangsang oleh estrogen. Estrogen akan

memberikan umpan balik negatife ke hipotalamus bila kadar nya dalam

tubuh berlebih yang berakibat pada penghentian sintesis FSH

(Yatim,1994).

21

3. Progesteron

Progesteron di sintesis oleh korpus luteum setelah proses ovulasi terjadi.

Pasca Ovulasi, folikel de graff akan bertansformasi menjadi korpus

luteum. Korpus tersebut yang akan mensistesis hormon progesteron yang

beperan merangsang kelenjar-kelenjar dalam endometrium . Progesteron

bekerja pada endometrium yang telah dipersiapkan untuk menerima

ovum yang sudah dibuahi. Progesteron juga mempersiapkan

endometrium untuk menampung embrio yang baru berkembang dengan

cara merangsang kelenjar-kelenjar endometrium agar mengeluarkan dan

menyimpan glikogen dalam jumlah besar sehingga menyebabkan

pertumbuhan pembuluh darah endometrium (Sherwood, 2001).

4. Gonadotropin Releasing Hormon (GnRH)

Hipotalamus di otak, akan merangsang pelepasan hormon GnRH yang

merupakan sinyal bagi kelenjar pituitari untuk merangsang pelepasan

folikel stimulating hormone (FSH) sebagai respon posistif dari rendahnya

kadar estrogen dalam tubuh begitupula sebaliknya (Campbell et al,

2010).

22

III. METODE PENELITIAN

A. Waktu dan Tempat Penelitian

Penelitian ini dilaksanakan pada bulan November sampai bulan Desember

2017 di Laboratorium Zoologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan

Alam Universitas Lampung. Pembuatan ekstrak daun jeruju dilakukan di

Laboratorium Kimia Organik, Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan

Alam Universitas Lampung. Untuk pembuatan preparat histologi dilakukan

di Laboratorium Patologi Balai Penyidikan dan Pengujian Veteriner (BPPV)

Regional III Bandar Lampung.

B. Alat dan Bahan

1. Alat

Alat-alat yang digunakan dalam penelitian ini adalah kandang mencit

yang berbentuk persegi dengan ukuran 15x15cm beserta penutup yang

terbuat dari kawat sebanyak 20 unit, wadah pakan mencit, botol minum

mencit, sonde lambung yang dihu bungkan dengan alat suntik digunakan

untuk pemberian ekstrak secara oral, mikropipet untuk mengambil ekstrak

daun jeruju, gelas ukur, gelas kimia, papan fiksasi, jangka sorong sebagai

23

alat ukur, milimeter blok sebagai alat ukur, seperangkat alat bedah, kertas

label, mikroskop.

2. Bahan

Bahan yang digunakan adalah 20 ekor mencit betina, sekam padi sebagai

alas kandang mencit, pelet sebagai pakan mencit, air minum mencit,

ekstrak jeruju, aquabides, kloroform, kapas, alkohol 95%, pewarna

Hematoxylyn eosin dan alkohol bertingkat.

C. Prosedur Penelitian

1. Persiapan Kandang

Sebelum penelitian ini dilaksanakan, terlebih dahulu disiapkan kandang

dari kawat dengan ukuran 15 x15 cm. Perlakuan terhadap pertama-tama

mencit ditempatkan pada ruangan.

2. Persiapan Hewan Uji

Dalam penelitian ini digunakan mencit (Mus musculus L.) betina berumur

3 bulan dengan berat badan 30-35gram yang diperoleh dari Laboratorium

Balai Penyidikan dan Pengujian Veteriner (BPPV) Regional III Bandar

Lampung. Sebelum penelitian dimulai mencit diaklimatisasi selama satu

minggu dalam kondisi laboratoriumyang bertujuan untuk penyesuaian

pada mencit dalam lingkungan dan perlakuan yang baru dan membatasi

pengaruh lingkungan dalam percobaan. Setiap hari pukul 08.00 WIB

mencit diberi makanan pelet dan air minum.

24

3. Pembuatan Ekstrak Jeruju (Acanthus ilicifolius L.)

Untuk mendapatkan ekstrak jeruju digunakan metode evaporasi. Jeruju

dicuci dan dibersihkan lalu dijemur tanpa bantuan sinar matahari hingga

kering. Selanjutnya ketika daun mengering jeruju kemudian digiling

hingga menjadi serbuk. Setelah digiling serbuk jeruju seberat 500 gram

direndam dalam 5 liter larutan etanol selama 24 jam. Kemudian disaring

menggunakan kertas saring. Cairan hasil saringan tersebut kemudian

dipekatkan dengan cara evaporasi menggunakan alat rotary evaporator

selama 4 jam dengan suhu 50oC dan tekanan 120 atm. Kemudian

didapatkan ekstrak jeruju sebanyak ± 200ml.

4. Pemberian Perlakuaan

Pemberian ekstrak daun jeruju dilakukan dengan cara dicekok (secara oral)

menggunakan spuit yang ujungnya ditumpulkan dan diberi pipa karet

kecil. Untuk setiap perlakuan digunakan 4 ekor mencit betina dengan 5

kali pengulangan. Perlakuan pencekokan ini dilakukan satu kali sehari

selama 14 hari dengan pemberian dosis yang berbeda-beda untuk setiap

kelompok perlakuan. Berdasarkan acuan metode penelitian jurnal

farmakologi dan farmasi klinik (Latifah dkk, 2015) mengenai potensi

tumbuhan mangrove daun jeruju (Acanthus ilicifolius) sebagai obat anti

diabetes dengan menggunakan dosis 125mg/KgBB, 250mg/KgBB dan

500mg/KgBB dalam 1 ml aquadest. Maka, setelah dikonversikan dengan

dosis mencit yang memiliki berat 30 gram, dosis yang diberikan setiap

pergram berat badan mencit yaitu :

25

Berat jeruju = 125 mg x

Berat hewan 1000 g 30g

x = 3,75 mg

Melalui perhitungan di atas, maka kelompok perlakuan dalam penelitian

ini adalah sebagai berikut.

1. Kelompok kontrol, diberi 0,3mlaquabides

2. Kelompok dosis 3,75 mg/30 grBB dalam 0,3 mlaquabides (P1)

3. Kelompok dosis 7,5 mg/30 grBB dalam 0,3 mlaquabides (P2)

4. Kelompok dosis 15 mg/30 grBB dalam 0,3 mlaquabides (P3)

` 5. Proses Pembedahan Mencit (Mus musculus L)

Setelah mencit diberi perlakuan selama 14 hari, kemudian di hari ke 15

dilakukan pembedahan. Mencit yang dibedah terlebih dahulu diberi

kloroform, setelah mencit pingsan dilakukan pembedahan pada bagian

ventral tubuh mencit secara vertikal lalu diambil dan diletakkan pada bak

parafin. Kemudian diambil organ ovariumnya, ovarium yang telah diambil

lalu difiksasi dengan menggunakan larutan formalin 10%. Perbandingan

volume spesimen dengan larutan formalin 1:10 untuk mendapatkan hasil

sempurna. Kemudian dibawa ke Laboratorium Patologi Balai Penyidikan

dan Pengujian Veteriner (BPPV) Regional III Bandar Lampung untuk

dibuat preparat histologi sehingga dapat diamati.

26

6. Proses Pembuatan Preparat Histologi

Pembuatan preparat histologis ovarium mencit ini dilakukan di

Laboratorium Patologi, Balai Penyidikan dan Pengujian Veteriner

(BPPV) Regional III. Adapun cara yang dilakukan dalam pembuatan

preparat sebagai berikut:

a. Fiksasi

Fiksasi adalah suatu proses yang dilakukan untuk sel atau jaringan agar

tetap dalam posisinya dan tidak berubah baik bentuk ataupun ukurannya.

Spesimen hasil nekropsi yang berupa organ ginjal yang berasal dari

kelompok kontrol dan kelompok hewan yang diberi perlakuan paparan

kebisingan dimasukkan ke dalam larutan fiksasi (pengawet), buffer

formalin 1:10.

b. Trimming

Trimming adalah suatu pencucian untuk menghilangkan larutan fiksasi,

dimana Buffer formalin 10% dihilangkan dengan menggunakan air

mengalir selama 30 menit.

27

c. Dehidrasi

Dehidrasi adalah proses yang dilakukan setelah proses trimming. Proses

ini bertujuan untuk mengeluarkan air yang terkandung di dalam

jaringan. Organ diletakkan di atas tisu untuk mengeringkan air. Proses ini

dilakukan menggunakan alat Embedding cassette. Proses selanjutnya

adalah organ tersebut diberi perlakuan sebagai berikut secara berurutan :

Tabel Tahapan Proses Dehidrasi:

Tahap Waktu Zat Kimia

Dehidrasi2 jam Alkohol 80%2 jam Alkohol 95%2 jam Alkohol 95%

Clearing

1 jam Alkoholabsolut I1 jam Alkoholabsolut II1 jam Alkoholabsolut III1 jam Xylol I1 jam Xylol II1 jam Xylol III

Impregnasi2 jam Parafin I2 jam Parafin II2 jam Parafin III

d. Embedding

Proses penanaman jaringan ke dalam media parafin. Tujuannya adalah

untuk mempermudah dalam melakukan proses pemotongan atau

pengirisan sampel. Dilakukan dengan mengeluarkan jaringan yang sudah

diimpregnasi dari moldtray, kemudian menanamnya ke dalam lempengan

blok yang berisi parafin cair. Setelah itu ditutup dengan menggunakan

casette and deckel lalu didinginkan pada cold plat

28

e. Cutting

Proses pemotongan atau pengirisan jaringan dengan menggunakan

mikrotom. Sampel yang dipotong tebalnya sekitar 4-5 mikron.

Pemotongan akan berhasil jika pisau tidak tumpul, tidak berkarat, dan tidak

terdapat sisa- sisa parafin dari hasil pemotongan sebelumnya dan posisi

sampel lurus dan baik. Suhu pisau dan suhu sampel serta suhu ruangan

harus sama agar sampel tidak patah atau terpotong-potong saat pengirisan.

f. Staining/Pewarnaan

Setelah pembuatan preparat selesai, dilakukan pewarnaan dengan

menggunakan pewarna Haematoxylin Eosin. Zat kimia yang digunakan

dalam pewarnaan ini adalah Hematoxylin Kristal, Alkohol absolut,

Ammonium, Aquadest, Mercury oxide.

g. Mounting

Setelah pewarnaan slide selesai, slide ditempelkan di atas kertas tisu pada

tempat yang datar dan selanjutnya ditetesi dengan menggunakan Canada

Balsam dan ditutup dengan menggunakan cover glass dan dicegah jangan

sampai ada gelembung udara.

h. Parameter yang Diamati

Parameter yang diamati dalam penelitian adalah jumlah, diameter, serta

perkembangan folikel primer, sekunder, dan tersier pada ovarium mencit

(Mus musculus L.) setelah pemberian ekstrak daun jeruju (Acanthus

ilicifolius L).

29

E . Rancangan dan Analisis Data

Rancangan percobaan yang digunakan dalam penelitian ini adalah

Rancangan Acak Lengkap (RAL) dengan 4 perlakuan dan masing-masing

perlakuan dilakukan pengulangan sebanyak 5 kali. Dalam penelitian ini

terdapat 20 ekor mencit yang dibagi menjadi 4 kelompok, yaitu 1 kelompok

sebagai kontrol dan 3 kelompok sebagai perlakuan.

Gambar 9. Susunan Rancangan Percobaan

Keterangan :

P = Perlakuan yang digunakan (P1; P2; P3)

K = Kontrol (K)

U = Ulangan (U1,U2,U3,U4,U5).

Analisis Data

Data hasil penelitian dilakukan secara kuantitatif dan deskriptif dengan

menyajikan hasil penelitian berupa presentasi perubahan yang terjadi pada

folikel primer, sekunder, dan tersier dan artesia mencit (Mus musculus L.)

setelah pemberian ekstrak daun jeruju (Acanthus ilicifolius L.).

KU1 P1U1 P2U1 P3U1

P3U2 KU2 P1U2 P2U2

KU3 P2U5 P3U3 P1U3

P1U4 P3U4 P2U3 KU4

P2U4 P1U5 KU5 P3U5

30

F. Diagram Alir Penelitian

Gambar 10. Diagram Alir Penelitian

Persiapan Penelitian

Analisis Data

20 mencit betina di aklimatisasi

Pembuatan Ekstrak Jeruju

Pembedahan dan Pengamatan Serta Pembuatan PreparatOvarium Mencit

Laporan Penelitian

Perlakuan Terhadap Mencit

V. KESIMPULAN DAN SARAN

A. Kesimpulan

Dari hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa pemberian ekstrak daun jeruju

(Acanthus ilicifolius L.) :

1. Dapat menyebabkan penurunan pada jumlah folikel primer, folikel

sekunder, dan folikel tersier.

2. Dapat mengecilkan diameter folikel primer, folikel sekunder, dan folikel

tersier.

3. Dapat menyebabkan folikel banyak yang mengalami artesia.

B. Saran

Perlu dilakukan penelitian dengan bahan ekstrak daun jeruju (Acanthus

ilicifolius L.) terhadap ketebalan sel-sel granulosa dan pengukuran kadar

estrogen.

43

DAFTAR PUSTAKA

Airul, 2010. Ovarian follicular dynamics: a review with emphasis on the bovinespecies. Part I: Folliculogenesis and pre-antral follicle development.Reprod Dom Anim.

Agoramoorthy, G.,F.A. Chen.,V. Venkatesalu, P.C. Shea,. 2009.Bioconcentration of heavy metals in selected medicinal plants of India. JEnviron Biol 30 (2): 175-178.

Akbar, B. 2010.Tumbuhan Dengan Kandungan Senyawa Ak tif YangBerpotensiSebagaiBahanAntifertilitas. Adabia Press. Jakarta. Ed 1. Hal59.978602-19751-7-6.

Anantasika, A. 2007. Manfaat tanaman obat jeruju bagi kesehatan PertemuanIlmiah Tahunan (PIT) III- HIFERI 24-27 Januari 2007. Yogyakarta

Anonim a.2009. Alat Reproduksi Wanita. Copyright@asiamaya.com. Diakses 21Juni 2017.

Anonim b. 2012. Digital Library Unila https://www.google.co.id/ . Diakses pada16 November 2017 pukul 20.00

Aughey, E., F.L.Frye,. 2001. Comparative Veterinary Histology with ClinicalCorrelates. London: Manson.

Barnes, R.B ., Rosenfield.2009. The Follicular Phase of the estrous Cycle.Dikutip dari http://www.wisc.edu/ansci_repro//

Biodiversity. 2013. https://www.google.co.id/ tanamanjeruju diakses padatanggal 19 Oktober 2017.

Camara, A.C.L., I.C.N.Gadelha., P.A.C.Borges., S.A.de Paifa., M.M. Melo., andSoto-Blanco, B. 2015.Toxoicity of Gossytol From Cottonseed Cake toSheep Ovarian Folicels. Plos ONE.10(11):1-11.

44

Campbell, N.A., J.B. Reecee., L.A. Urry., M..L. Cain., S.A .Wasserman., P. V.Minorsky., dan R. B. Jackson. 2010. Biologi Campbell Edisi 8 Jilid III.Erlangga. Jakarta.

Digital Library Unila, 2012. Pengantar praktikum struktur hewan. UniversitasLampung. Lampung.

Donnez, J and Dolmans. 2013. Reproductive Endocrinology and Infertility. Austin(US): Landes Bioscience.

Drummond Ann E. 2006: The Role of Steroids in Follicular Growth.Reproductive Biology & Endocrinology 2006, 4:16

Fortune, J.E. 1994. Ovarian follicular growth and development in mammals. BiolReprod 50: 225-232.

Gaurin, 2004. Potensi Mangrove Sebagai Tanaman Obat. Jurnal Biota IX (2) :125-126.

Guyton, A.C.dan J.E.Hall. 1997. Buku Ajar Histologi Kedokteran. Edisi ke-9.Diterjemahkan oleh dr. Irawati Setiawan, dkk. Buku Kedokteran (EGC).Jakarta.

Hafez, B. 2011. Anatomy of female reproduction. Di dalam: Hafez B, Hafez,E.S.E, editor. Reproduction in Farm Animal Ed ke-5. USA: LippincottWilliams and Wilkins. hlm 13-29.

Hamdani, 2007. Mengenal Tanaman Obat Nusantara. PT Panca Anugrah Sakti.Jakarta.

Frandson, R.D. 1992. Anatomi dan Fisiologi Ternak Ed ke-4. Penerjemah: B.Srigandono, Koen Praseno. Yogyakarta: Universitas Gadjah Mada.

Kanchanapoom, T., M.S. Kamel, R. Kasai, K. Yamasaki, C. Picheansoonthon,and Y. Hiraga. 2001. Lignan glucosides from Acanthus ilicifolius.Phytochemistry 56:369-372.

Khanum, 2011. Reliability of follicle- stimulating hormone measurements inserum. Reproductive Biology and Endocrinologyhttp://www.RBEj.com/content/

45

Latifah, E., P, Prasojo dan S. Dhuta. 2015. Potensi Tumbuhan Mangrove DaunJeruju (Acanthus ilicifoilus) SEbagai Obat Antidiabetes. JurnalFarmakologi dan Farmasi Klinik. LP3M Universitas MuhammadiyahMagelang.

Leung, P.C.K., E.Y. Adashi. 2004. The Ovary: Dynamics of Primate FollicularGrowth: A Physiological Perspective. second edition. San Diego (US):Elsevier Academic Pr.

Limbong, T. 2007. Pengaruh Ekstrak Ethanol Kulit Batang Pakettu (Ficus superbaMiq) Terhadap Folikulogenesis Ovarium Mencit (Mus musculus). DalamAbstrak Jurnal Penelitian. Universitas Airlangga. Surabaya.

Meles, D.K dan W. Sastrowardoyo. 2001. Efek Infusa Impatiens Balsamia Linnpada Stadium Pembelahan Sel (Cleavage) dalam Upaya Pencarian ObatAntifertilitas. PPOT. Lemlit. Universitas Airlangga. Surabaya.

Mossa, F.,F, Berlinguer.,S.Succu., M. Madeddu., D. Bebbere., G.G. Leoni., S.Naitana. 2007. Follicle Number Affects in vitro DepvelopmentalCompetence Of Sheep Oocytes Biol. Reprod.2(7)1-7.

Noor Lucia., dan H. Killburn. 2006. Mengenal TanamanObat Nusantara. PT. Panca Anugrah Sakti. Jakarta.http://biodiversitywarriors.org/jeruju-daruju.html. diakses pada tanggal18 Oktober 2017.

Partodihardjo, S. 1980. Ilmu Reproduksi Hewan. Mutiara. Jakarta.Hal. 44-50.

Pineda, M.H.M.P, Dooley, 2003. McDonald’s Veterynary Endocrinology andReproduction Ed ke-5. Iowa: Blackwell Publishing Company.

Plantamor, 2016. Plantamor Situs Dunia Tumbuhan, Informasi SpesiesJeruju.[Internet]. Terdapat pada :http://www.plantamor.com/database-tumbuhan-Acanthus-ilicifolius/ Diakses pada : 25 September 2017.

Priyono, Suharno,B. dan K. Amri. 2010. Deskripsi Umum Tanaman Pepaya.Biopic.com diakses pada tanggal 18 Oktober 2017.

Redha, A. 2010. Flavonoid: Struktur, Sifat Antioksidatif dan Peranannya DalamSistem Biologis. Jurnal Belian , 9, 196-202.

Saptiani, G.,B.P, Slamet., dan A.Sutrisno. 2012..Potensi Tumbuhan MangroveDaun Jeruju (Acanthus ilicifolius) Sebagai Obat Antidiabetes[Skripsi].Fakultas Farmakologi dan Farmasi Klinik. UniversitasMuhammadiyah Magelang.

46

Samuelson, D.A. 2007. Textbook of Veterynary Histology. Missouri: SaundersElsevier Inc.

Saroya, S., dan Amritpal. 2011. Herbalism, Phytochemistry andEtnopharmacology. Hal.336-340. diakses pada tanggal 15 Oktober 2017.

Sherwood, L,. 2001. Fisiologi Manusia dari Sel ke Sistem. Edisi 2. Alih bahasaBrahm U. Pendit; Editor Beatricia I. Santoso. Jakarta:EGC

Silva P. Reproductive Physic dari http://www2.ufp./qfisio/reproduction.

Singh, I. 1991. Teks dan Histologi Manusia. Binarupa aksara. Jakarta. Hal 293.

Suryono, 2013. Tanaman Air Kebun Raya Bogor.Vol. 1 No. 5.Kebun Raya Bogor.Bogor. diakses pada tanggal 18 Oktober 2017.

Susetyarini, E. 2009. Efek Senyawa Aktif Daun Beluntas Terhadap KadarTestosteron Tikus Putih (Ratus norwegicus) Jantan. Jurnal Gamma (5),No. 1, September hal 21-27.

Wandji, S.A., V. Srsen, A.K Voss , J.J. Eppig, J.E. Fortune. 1996. Initiation invitro of growth of bovine primordial follicle. Biol Reprod 55: 942-948.

Wikipedia. 2008. Mus musculus Linn.http://images.google.co.id/images?um=1&hl=id&q=mus+musculus++Linn&btnG=Cari+Gambar. 7 april 2017.

Wostmann dan Liebezeid.2008. Pengaruh Pemberian Ekstrak Jahe Merah(Zingiber officinale Linn. Var. rubrum) Terhadap Libido Mencit Jantan.

Yatim, W. 1994. Reproduksi dan Embriologi. Tarsito. Bandung.