-
8/16/2019 LAPORAN PRAKTIKUM 'Pembuatan Media Dan Sterilisasi'
1/17
LAPORAN PRAKTIKUM
“PERSIAPAN MEDIA DAN STERILISASI”
OLEH :
NAMA : RITA ANGGREANI WIDIASTUTI
NIM : D1C1 14 155
KELOMPOK : IV
KELAS : TPG-A 2014
JURUSAN TEKNOLOGI PANGAN
FAKULTAS TEKNOLOGI DAN INDUSTRI PERTANIAN
UNIVERSITAS HALU OLEO
KENDARI
201
-
8/16/2019 LAPORAN PRAKTIKUM 'Pembuatan Media Dan Sterilisasi'
2/17
I! PENDAHULUAN
I!1 L"#"$ %&'"(")*
Medium memiliki syarat harus steril, agar tidak ada kontaminan yang
tumbuh, untuk itu penyiapan medium dan sterilisasi alat dan bahan yang akan
digunakan harus disterilkan terlebih dahulu. Selain itu, medium harus memiliki
kandungan nutrient dan zat-zat yang sesuai dengan jenis dan tujuan medium
tersebut. Nutrien dalam medium harus memenuhi kebutuhan dasar makhluk
hidup, yang meliputi air, karbon, energi, nitrogen, mineral dan faktor tumbuh.
Mikroorganisme dapat ditumbuhkan dan dikembangkan pada suatu
substrat yang disebut medium. Medium yang digunakan untuk menumbuhkan dan
mengembangbiakkan mikroorganisme tersebut harus sesuai susunanya dengan
kebutuhan jenis-jenis mikroorganisme yang bersangkutan. Beberapa
mikroorganisme dapat hidup baik pada medium yang sangat sederhana yang
hanya mengandung garam anargonik ditambah sumber karbon organik seperti
gula. Sedangkan mikroorganime lainnya memerlukan suatu medium yang sangat
kompleks yaitu berupa medium ditambahkan darah atau bahan-bahan kompleks
lainnya.
I!2 T+,+")
Tujuan dari praktikum ini yaitu untuk menyiapkan media tumbuh
mikroorganisme yang steril.
II! TINJAUAN PUSTAKA
-
8/16/2019 LAPORAN PRAKTIKUM 'Pembuatan Media Dan Sterilisasi'
3/17
Mikroorganisme harus dibiakkan di laboratorium pada bahan nutrien yang
berperan penting untuk pertumbuhan dan perkembangbiakannya. Susunan bahan
nutrien, baik bahan alami maupun sintetik/buatan, yang dipergunakan untuk
pertumbuhan dan perkembangan bakteri. Maam nutrien yang digunakan
tergantung dari maam bakteri yang dibiakkan !"ani, #$%%&.
Medium merupakan suatu bahan yang terdiri atas ampuran zat makanan
!nutrient & yang berfungsi sebagai tempat tumbuh mikrobia. Selain untuk
menumbuhkan mikrobia, medium dapat digunakan juga untuk isolasi,
memperbanyak, pengujian sifat'sifat fisiologi, dan perhitungan jumlah mikrobia
!Tim (enyusun, #$%)&.
Media pertumbuhan mikroorganisme adalah suatu bahan yang terdiri dari
ampuran zat-zat makanan atau nutrisi yang diperlukan oleh mikroorganisme
untuk pertumbuhannya. Mikroorganisme memanfaatkan nutrisi di dalam media
berupa molekul-molekul keil yang dirakit untuk menyusun komponen sel.
*engan media, pertumbuhan dapat dilakukan dengan isolasi mikroorganisme
menjadi kultur murni dan juga memanipulasi komposisi media pertumbuhannya.
Bahan dasar adalah air !+#& sebagai pelarut dari agar-agar !rumput laut& dimana
agar-agar tersebut berfungsi sebagai pemadat media !Soni, #$%$ dalam Mirsadi,
#$%&.
(ersyaratan yang harus dipenuhi dalam penyiapan medium supaya
mikroorganisme dapat tumbuh baik adalah mengandung semua nutrisi yang
mudah digunakan oleh mikroba, mempunyai tekanan osmose, tegangan
permukaan, dan p+ yang sesuai, tidak mengandung zat-zat penghambat dan steril
!akhma0ati, #$%#&.
-
8/16/2019 LAPORAN PRAKTIKUM 'Pembuatan Media Dan Sterilisasi'
4/17
Media dapat digolongkan berdasarkan bentuk, susunan kimia, dan
fungsinya. Berdasarkan bentuk atau konsistensinya media terdiri dari media padat
! solid medium& berbentuk padat, tidak mengandung agen air, media air !liquid
medium& berbentuk air, media ini dapat berupa bahan organik alamiah !yang
dibuat dari kentang, 0ortel&, atau dapat juga berupa bahan anorganik !misal silia
gel&, dan media semi padat ! semi solid medium&, media padat yang dapat
diairkan, apabila dalam keadaan panas berbentuk air, sedangkan dalam keadaan
dingin berbentuk padat, misalnya media agar !Tim (enyusun, #$%)&.
Media 1MB2 ! Eosin Methylen Blue Agar & mempunyai keistime0aan
mengandung laktosa dan berfungsi untuk memilih mikroba yang
memfermentasikan laktosa seperti staphyloous aureus, (. aerugenosa dan
salmonella. Mikroba yang memfermentasikan laktosa akan menghasilkan koloni
dengan inti ber0arna gelap dengan kilap logam. Sedangkan mikroba lain yang
dapat tumbuh koloninyan tidak ber0arna !+asto0o, %33# dalam Bashar, #$%&.
-
8/16/2019 LAPORAN PRAKTIKUM 'Pembuatan Media Dan Sterilisasi'
5/17
III! METODOLOGI PRAKTIKUM
!1! T&./"# ") W"(#+
(raktikum dilaksanakan di 4aboratorium 2groteknologi 5nit 6itopatologi,
6akultas (ertanian pada hari Selasa, Mei #$%7 pukul %.$$-%8.$$ 9:T2.
!2! %"") ") A'"#
Bahan yang digunakan dalam praktikum ini yaitu media sintesis 1MB2,
auades, Nutrient Broth, agar, %8; skim milk , pepton, Na
-
8/16/2019 LAPORAN PRAKTIKUM 'Pembuatan Media Dan Sterilisasi'
6/17
• Menambahkan auades sebanyak %$$$ ml.
• Menghomogenkan ampuran media tersebut menggunakan magnetic
stirrer , setelah itu memasukkan ampuran kedalam botol Schoot .
• Sterilisasi media tersebut menggunakan Autoclae.
- M&" +, "&$ ") ")"&$
• Menimbang pepton #.$ gA Na
-
8/16/2019 LAPORAN PRAKTIKUM 'Pembuatan Media Dan Sterilisasi'
7/17
IV! HASIL DAN PEM%AHASAN
4!1! H"3'
4!2! P&.""3")
A : .&" +, /$#&'#(
% : .&" NA
C : .&" PDA
D : .&" EM%A
E : .&" +, ".''#(
F : +, "&$ ") ")"&$
-
8/16/2019 LAPORAN PRAKTIKUM 'Pembuatan Media Dan Sterilisasi'
8/17
Medium merupakan bahan yang digunakan untuk menumbuhkan
mikroorganisme di atas atau di dalamnya, medium tersebut harus memenuhi
syarat-syarat, antara lain adalah harus mengandung semua zat hara yang mudah
digunakan oleh mikroba, harus mempunyai tekanan osmosis, tegangan permukaan
dan p+ yang sesuai dengan kebutuhan mikroba yang akan ditumbuhkan, tidak
mengandung zat-zat yang dapat menghambat pertumbuhan mikroba, harus berada
dalam keadaan steril sebelum digunakan, agar mikroba yang di tumbuhkan dapat
tumbuh dengan baik. Medium juga merupakan makanan atau ampuran dari
beberapa bahan makanan yang disiapkan untuk pertumbuhan mikroorganisme.
(raktikum ini menggunakan media uji 1MB2 ! Eosin Methylen Blue Agar &.
Media 1MB2 ! 1osin Methylen Blue 2gar & mempunyai keistime0aan
mengandung laktosa dan berfungsi untuk memilih mikroba yang
memfermentasikan laktosa seperti Staphylococcus aureus, P! aerugenosa dan
Salmonella. Mikroba yang memfermentasikan laktosa akan menghasilkan koloni
dengan inti ber0arna gelap dengan kilap logam. Sedangkan mikroba lain yang
dapat tumbuh koloninya tidak ber0arna. 2danya eosin dan methylen blue
membantu mempertajam perbedaan tersebut. 2gar 1MB !leine& merupakan
media padat yang dapat digunakan untuk menentukan jenis bakteri oli dengan
memberikan hasil positif dalam tabung. 1MB yang menggunakan eosin dan
metilen blue sebagai indikator memberikan perbedaan yang nyata antara koloni
yang meragikan laktosa dan yang tidak. Medium tersebut mengandung sukrosa
karena kemempuan bakteri koli yang lebih epat meragikan sukrosa daripada
laktosa.
-
8/16/2019 LAPORAN PRAKTIKUM 'Pembuatan Media Dan Sterilisasi'
9/17
N2 ! Nutrient Agar & digunakan sebagai media pertumbuhan bakteri. N2
dibuat dengan komposisi agar-agar yang sudah dipadatkan sehingga N2 juga bisa
disebut dengan nutrient padat yang digunakan untuk menumbuhkan bakteri.
Medium N2 adalah salah satu medium padat yang memiliki komposisi yaitu agar-
agar yang telah dipanaskan dan menair dengan suhu 38 C
-
8/16/2019 LAPORAN PRAKTIKUM 'Pembuatan Media Dan Sterilisasi'
10/17
hidrolisis amilum pada bakteri ditandai dengan tampaknya area jernih di sekitar
pertumbuhan bakteri yang digoreskan. 6ungi atau bakteri memproduksi D-amilase
sehingga mampu menguraikan amilum dengan eksoenzim amilolitik tersebut amat
luas antara mikroorganisme.
5ji proteolitik diujikan pada bakteri proteolitik yaitu enzim pemeah protein
yang diproduksi didalam sel kemudian dilepaskan keluar dari sel tetapi tidak
semua mempunyai enzim protease ekstraselular. Pengujian secara kualitatif
dilakukan dengan cara mengamati zona bening yang berada di
sekitar koloni bakteri, kemudian membagi diameter zona bening
dengan diameter koloni bakteri. Hasil bagi diameter tersebut
dinyatakan sebagai aktitas protease secara relatif. Aktivitas
bakteri proteolitik juga dapat diketahui secara kuantitatif dengan
menggunakan spektrofotometer pada panjang gelombang ultra
violet 2! nm. Panjang gelombang tersebut dapat ditangkap dan
dipantulkan kembali oleh asam amino suatu protein berdasarkan
gugus aromatik terutama asam amino tirosin, triptofan dan
fenilalanin. "elebihan metode ini yaitu sederhana, mudah serta
tidak memerlukan penambahan reagen tertentu.
#ji aerob dan anaerob, energi diperoleh melalui fosforilase
oksidatif tetapi dalam prosesnya bisa menggunakan oksigen
sebagai aseptor elektron terakhir $respirasi aerob% atau senya&a
anorganik lain $respirasi anaerob%. Pada mikroorganisme aerob,
oksigen digunakan sebagai aseptor elektron terakhir, tidak
-
8/16/2019 LAPORAN PRAKTIKUM 'Pembuatan Media Dan Sterilisasi'
11/17
diperlukan reduksi senya&a intermediator seperti dalam
fermentasi. Hasilnya senya&a'senya&a intermediet tersebut
dapat dioksidasi sempurna menjadi karbon dioksida dan air.
(etabolisme anaerob, elektron yang dibebaskan melalui reaksi
oksidasi ditransfer melalui serangkaian transfer elektron dan
energi dihasilkan melalui fosforilase oksidatif. )etak perbedaan
antara respirasi aerob dana anaerob yaitu respirasi anaerob yang
berperan sebagai aseptor elektron terakhir adalah senya&a
anorganik, bukan oksigen.
(eran utama nutrien adalah sebagai sumber energi, bahan pembangun sel,
dan sebagai aseptor elektron dalam reaksi bioenergetik !reaksi yang menghasilkan
energi&. leh karenanya bahan makanan yang diperlukan terdiri dari air, sumber
energi, sumber karbon, sumber aseptor elektron, sumber mineral, faktor
pertumbuhan, dan nitrogen. Selain itu, seara umum nutrien dalam media
pembenihan harus mengandung seluruh elemen yang penting untuk sintesis
biologik organisme baru.
-
8/16/2019 LAPORAN PRAKTIKUM 'Pembuatan Media Dan Sterilisasi'
12/17
V! PENUTUP
5!1! K&3./+'")
Medium merupakan bahan yang digunakan untuk menumbuhkan
mikroorganisme di atas atau di dalamnya. Media juga merupakan makanan atau
ampuran dari beberapa bahan makanan yang disiapkan untuk pertumbuhan
mikroorganisme.
Media 1MB2 ! 1osin Methylen Blue 2gar & mempunyai keistime0aan
mengandung laktosa dan berfungsi untuk memilih mikroba yang
memfermentasikan laktosa. 2gar 1MB !leine& merupakan media padat yang
dapat digunakan untuk menentukan jenis bakteri oli dengan memberikan hasil
positif dalam tabung.
5!2! S"$")
(raktikum ini seharusnya dilakukan dengan benar karena praktikum ini
berkaitan satu sama lain dengan praktikum selanjutnya.
-
8/16/2019 LAPORAN PRAKTIKUM 'Pembuatan Media Dan Sterilisasi'
13/17
DAFTAR PUSTAKA
Bashar, "azhid. #$%. Pembuatan EMBA dan M"A.
http>//yazhid#?bashar.blogspot.o.id/#$%/$)/pembuatan-emba-dan-
maE%).html. *i akses tanggal ) Mei #$%7.
Mirsadi, 4uky. #$%. #aporan Praktikum Mikrobiologi Pertanian. 5niersitas
Sebelas Maret. Surakarta.
akhma0ati, 2nna. #$%#. Penyiapan Media Mikroorganisme. 5niersitas Negeri
"ogyakarta. "ogyakarta.
Tim (enyusun. #$%). Petun$uk Praktikum M!%! Mikrobiologi Pertanian.5niersitas Sebelas Maret. Surakarta.
"ani. #$%%. Media Pertumbuhan Mikroba.
http>//[email protected]/#$%%/$7/media-pertumbuhan-mikroba.html.
*i akses tanggal ) Mei #$%7.
http://yazhid28bashar.blogspot.co.id/2013/04/pembuatan-emba-dan-mca_14.htmlhttp://yazhid28bashar.blogspot.co.id/2013/04/pembuatan-emba-dan-mca_14.htmlhttp://unsa73.blogspot.co.id/2011/06/media-pertumbuhan-mikroba.htmlhttp://unsa73.blogspot.co.id/2011/06/media-pertumbuhan-mikroba.htmlhttp://unsa73.blogspot.co.id/2011/06/media-pertumbuhan-mikroba.htmlhttp://yazhid28bashar.blogspot.co.id/2013/04/pembuatan-emba-dan-mca_14.htmlhttp://yazhid28bashar.blogspot.co.id/2013/04/pembuatan-emba-dan-mca_14.html
-
8/16/2019 LAPORAN PRAKTIKUM 'Pembuatan Media Dan Sterilisasi'
14/17
LAMPIRAN
-
8/16/2019 LAPORAN PRAKTIKUM 'Pembuatan Media Dan Sterilisasi'
15/17
-
8/16/2019 LAPORAN PRAKTIKUM 'Pembuatan Media Dan Sterilisasi'
16/17
-
8/16/2019 LAPORAN PRAKTIKUM 'Pembuatan Media Dan Sterilisasi'
17/17