laporan praktikum 'pembuatan media dan sterilisasi

8/16/2019 LAPORAN PRAKTIKUM 'Pembuatan Media Dan Sterilisasi'

1/17

LAPORAN PRAKTIKUM

“PERSIAPAN MEDIA DAN STERILISASI”

OLEH :

NAMA : RITA ANGGREANI WIDIASTUTI

NIM : D1C1 14 155

KELOMPOK : IV

KELAS : TPG-A 2014

JURUSAN TEKNOLOGI PANGAN

FAKULTAS TEKNOLOGI DAN INDUSTRI PERTANIAN

UNIVERSITAS HALU OLEO

KENDARI

201


2/17

I! PENDAHULUAN

I!1 L"#"$ %&'"(")*

Medium memiliki syarat harus steril, agar tidak ada kontaminan yang

tumbuh, untuk itu penyiapan medium dan sterilisasi alat dan bahan yang akan

digunakan harus disterilkan terlebih dahulu. Selain itu, medium harus memiliki

kandungan nutrient dan zat-zat yang sesuai dengan jenis dan tujuan medium

tersebut. Nutrien dalam medium harus memenuhi kebutuhan dasar makhluk

hidup, yang meliputi air, karbon, energi, nitrogen, mineral dan faktor tumbuh.

Mikroorganisme dapat ditumbuhkan dan dikembangkan pada suatu

substrat yang disebut medium. Medium yang digunakan untuk menumbuhkan dan

mengembangbiakkan mikroorganisme tersebut harus sesuai susunanya dengan

kebutuhan jenis-jenis mikroorganisme yang bersangkutan. Beberapa

mikroorganisme dapat hidup baik pada medium yang sangat sederhana yang

hanya mengandung garam anargonik ditambah sumber karbon organik seperti

gula. Sedangkan mikroorganime lainnya memerlukan suatu medium yang sangat

kompleks yaitu berupa medium ditambahkan darah atau bahan-bahan kompleks

lainnya.

I!2 T+,+")

Tujuan dari praktikum ini yaitu untuk menyiapkan media tumbuh

mikroorganisme yang steril.

II! TINJAUAN PUSTAKA


3/17

Mikroorganisme harus dibiakkan di laboratorium pada bahan nutrien yang

berperan penting untuk pertumbuhan dan perkembangbiakannya. Susunan bahan

nutrien, baik bahan alami maupun sintetik/buatan, yang dipergunakan untuk

pertumbuhan dan perkembangan bakteri. Maam nutrien yang digunakan

tergantung dari maam bakteri yang dibiakkan !"ani, #$%%&.

Medium merupakan suatu bahan yang terdiri atas ampuran zat makanan

!nutrient & yang berfungsi sebagai tempat tumbuh mikrobia. Selain untuk

menumbuhkan mikrobia, medium dapat digunakan juga untuk isolasi,

memperbanyak, pengujian sifat'sifat fisiologi, dan perhitungan jumlah mikrobia

!Tim (enyusun, #$%)&.

Media pertumbuhan mikroorganisme adalah suatu bahan yang terdiri dari

ampuran zat-zat makanan atau nutrisi yang diperlukan oleh mikroorganisme

untuk pertumbuhannya. Mikroorganisme memanfaatkan nutrisi di dalam media

berupa molekul-molekul keil yang dirakit untuk menyusun komponen sel.

*engan media, pertumbuhan dapat dilakukan dengan isolasi mikroorganisme

menjadi kultur murni dan juga memanipulasi komposisi media pertumbuhannya.

Bahan dasar adalah air !+#& sebagai pelarut dari agar-agar !rumput laut& dimana

agar-agar tersebut berfungsi sebagai pemadat media !Soni, #$%$ dalam Mirsadi,

#$%&.

(ersyaratan yang harus dipenuhi dalam penyiapan medium supaya

mikroorganisme dapat tumbuh baik adalah mengandung semua nutrisi yang

mudah digunakan oleh mikroba, mempunyai tekanan osmose, tegangan

permukaan, dan p+ yang sesuai, tidak mengandung zat-zat penghambat dan steril

!akhma0ati, #$%#&.


4/17

Media dapat digolongkan berdasarkan bentuk, susunan kimia, dan

fungsinya. Berdasarkan bentuk atau konsistensinya media terdiri dari media padat

! solid medium& berbentuk padat, tidak mengandung agen air, media air !liquid

medium& berbentuk air, media ini dapat berupa bahan organik alamiah !yang

dibuat dari kentang, 0ortel&, atau dapat juga berupa bahan anorganik !misal silia

gel&, dan media semi padat ! semi solid medium&, media padat yang dapat

diairkan, apabila dalam keadaan panas berbentuk air, sedangkan dalam keadaan

dingin berbentuk padat, misalnya media agar !Tim (enyusun, #$%)&.

Media 1MB2 ! Eosin Methylen Blue Agar & mempunyai keistime0aan

mengandung laktosa dan berfungsi untuk memilih mikroba yang

memfermentasikan laktosa seperti staphyloous aureus, (. aerugenosa dan

salmonella. Mikroba yang memfermentasikan laktosa akan menghasilkan koloni

dengan inti ber0arna gelap dengan kilap logam. Sedangkan mikroba lain yang

dapat tumbuh koloninyan tidak ber0arna !+asto0o, %33# dalam Bashar, #$%&.


5/17

III! METODOLOGI PRAKTIKUM

!1! T&./"# ") W"(#+

(raktikum dilaksanakan di 4aboratorium 2groteknologi 5nit 6itopatologi,

6akultas (ertanian pada hari Selasa, Mei #$%7 pukul %.$$-%8.$$ 9:T2.

!2! %"") ") A'"#

Bahan yang digunakan dalam praktikum ini yaitu media sintesis 1MB2,

auades, Nutrient Broth, agar, %8; skim milk , pepton, Na


6/17

• Menambahkan auades sebanyak %$$$ ml.

• Menghomogenkan ampuran media tersebut menggunakan magnetic

stirrer , setelah itu memasukkan ampuran kedalam botol Schoot .

• Sterilisasi media tersebut menggunakan Autoclae.

- M&" +, "&$ ") ")"&$

• Menimbang pepton #.$ gA Na


7/17

IV! HASIL DAN PEM%AHASAN

4!1! H"3'

4!2! P&.""3")

A : .&" +, /$#&'#(

% : .&" NA

C : .&" PDA

D : .&" EM%A

E : .&" +, ".''#(

F : +, "&$ ") ")"&$


8/17

Medium merupakan bahan yang digunakan untuk menumbuhkan

mikroorganisme di atas atau di dalamnya, medium tersebut harus memenuhi

syarat-syarat, antara lain adalah harus mengandung semua zat hara yang mudah

digunakan oleh mikroba, harus mempunyai tekanan osmosis, tegangan permukaan

dan p+ yang sesuai dengan kebutuhan mikroba yang akan ditumbuhkan, tidak

mengandung zat-zat yang dapat menghambat pertumbuhan mikroba, harus berada

dalam keadaan steril sebelum digunakan, agar mikroba yang di tumbuhkan dapat

tumbuh dengan baik. Medium juga merupakan makanan atau ampuran dari

beberapa bahan makanan yang disiapkan untuk pertumbuhan mikroorganisme.

(raktikum ini menggunakan media uji 1MB2 ! Eosin Methylen Blue Agar &.

Media 1MB2 ! 1osin Methylen Blue 2gar & mempunyai keistime0aan


memfermentasikan laktosa seperti Staphylococcus aureus, P! aerugenosa dan

Salmonella. Mikroba yang memfermentasikan laktosa akan menghasilkan koloni

dengan inti ber0arna gelap dengan kilap logam. Sedangkan mikroba lain yang

dapat tumbuh koloninya tidak ber0arna. 2danya eosin dan methylen blue

membantu mempertajam perbedaan tersebut. 2gar 1MB !leine& merupakan

media padat yang dapat digunakan untuk menentukan jenis bakteri oli dengan

memberikan hasil positif dalam tabung. 1MB yang menggunakan eosin dan

metilen blue sebagai indikator memberikan perbedaan yang nyata antara koloni

yang meragikan laktosa dan yang tidak. Medium tersebut mengandung sukrosa

karena kemempuan bakteri koli yang lebih epat meragikan sukrosa daripada

laktosa.


9/17

N2 ! Nutrient Agar & digunakan sebagai media pertumbuhan bakteri. N2

dibuat dengan komposisi agar-agar yang sudah dipadatkan sehingga N2 juga bisa

disebut dengan nutrient padat yang digunakan untuk menumbuhkan bakteri.

Medium N2 adalah salah satu medium padat yang memiliki komposisi yaitu agar-

agar yang telah dipanaskan dan menair dengan suhu 38 C


10/17

hidrolisis amilum pada bakteri ditandai dengan tampaknya area jernih di sekitar

pertumbuhan bakteri yang digoreskan. 6ungi atau bakteri memproduksi D-amilase

sehingga mampu menguraikan amilum dengan eksoenzim amilolitik tersebut amat

luas antara mikroorganisme.

5ji proteolitik diujikan pada bakteri proteolitik yaitu enzim pemeah protein

yang diproduksi didalam sel kemudian dilepaskan keluar dari sel tetapi tidak

semua mempunyai enzim protease ekstraselular. Pengujian secara kualitatif

dilakukan dengan cara mengamati zona bening yang berada di

sekitar koloni bakteri, kemudian membagi diameter zona bening

dengan diameter koloni bakteri. Hasil bagi diameter tersebut

dinyatakan sebagai aktitas protease secara relatif. Aktivitas

bakteri proteolitik juga dapat diketahui secara kuantitatif dengan

menggunakan spektrofotometer pada panjang gelombang ultra

violet 2! nm. Panjang gelombang tersebut dapat ditangkap dan

dipantulkan kembali oleh asam amino suatu protein berdasarkan

gugus aromatik terutama asam amino tirosin, triptofan dan

fenilalanin. "elebihan metode ini yaitu sederhana, mudah serta

tidak memerlukan penambahan reagen tertentu.

#ji aerob dan anaerob, energi diperoleh melalui fosforilase

oksidatif tetapi dalam prosesnya bisa menggunakan oksigen

sebagai aseptor elektron terakhir $respirasi aerob% atau senya&a

anorganik lain $respirasi anaerob%. Pada mikroorganisme aerob,

oksigen digunakan sebagai aseptor elektron terakhir, tidak


11/17

diperlukan reduksi senya&a intermediator seperti dalam

fermentasi. Hasilnya senya&a'senya&a intermediet tersebut

dapat dioksidasi sempurna menjadi karbon dioksida dan air.

(etabolisme anaerob, elektron yang dibebaskan melalui reaksi

oksidasi ditransfer melalui serangkaian transfer elektron dan

energi dihasilkan melalui fosforilase oksidatif. )etak perbedaan

antara respirasi aerob dana anaerob yaitu respirasi anaerob yang

berperan sebagai aseptor elektron terakhir adalah senya&a

anorganik, bukan oksigen.

(eran utama nutrien adalah sebagai sumber energi, bahan pembangun sel,

dan sebagai aseptor elektron dalam reaksi bioenergetik !reaksi yang menghasilkan

energi&. leh karenanya bahan makanan yang diperlukan terdiri dari air, sumber

energi, sumber karbon, sumber aseptor elektron, sumber mineral, faktor

pertumbuhan, dan nitrogen. Selain itu, seara umum nutrien dalam media

pembenihan harus mengandung seluruh elemen yang penting untuk sintesis

biologik organisme baru.


12/17

V! PENUTUP

5!1! K&3./+'")

Medium merupakan bahan yang digunakan untuk menumbuhkan

mikroorganisme di atas atau di dalamnya. Media juga merupakan makanan atau

ampuran dari beberapa bahan makanan yang disiapkan untuk pertumbuhan

mikroorganisme.

Media 1MB2 ! 1osin Methylen Blue 2gar & mempunyai keistime0aan


memfermentasikan laktosa. 2gar 1MB !leine& merupakan media padat yang

dapat digunakan untuk menentukan jenis bakteri oli dengan memberikan hasil

positif dalam tabung.

5!2! S"$")

(raktikum ini seharusnya dilakukan dengan benar karena praktikum ini

berkaitan satu sama lain dengan praktikum selanjutnya.


13/17

DAFTAR PUSTAKA

Bashar, "azhid. #$%. Pembuatan EMBA dan M"A.

http>//yazhid#?bashar.blogspot.o.id/#$%/$)/pembuatan-emba-dan-

maE%).html. *i akses tanggal ) Mei #$%7.

Mirsadi, 4uky. #$%. #aporan Praktikum Mikrobiologi Pertanian. 5niersitas

Sebelas Maret. Surakarta.

akhma0ati, 2nna. #$%#. Penyiapan Media Mikroorganisme. 5niersitas Negeri

"ogyakarta. "ogyakarta.

Tim (enyusun. #$%). Petun$uk Praktikum M!%! Mikrobiologi Pertanian.5niersitas Sebelas Maret. Surakarta.

"ani. #$%%. Media Pertumbuhan Mikroba.

http>//[email protected]/#$%%/$7/media-pertumbuhan-mikroba.html.

*i akses tanggal ) Mei #$%7.

http://yazhid28bashar.blogspot.co.id/2013/04/pembuatan-emba-dan-mca_14.htmlhttp://yazhid28bashar.blogspot.co.id/2013/04/pembuatan-emba-dan-mca_14.htmlhttp://unsa73.blogspot.co.id/2011/06/media-pertumbuhan-mikroba.htmlhttp://unsa73.blogspot.co.id/2011/06/media-pertumbuhan-mikroba.htmlhttp://unsa73.blogspot.co.id/2011/06/media-pertumbuhan-mikroba.htmlhttp://yazhid28bashar.blogspot.co.id/2013/04/pembuatan-emba-dan-mca_14.htmlhttp://yazhid28bashar.blogspot.co.id/2013/04/pembuatan-emba-dan-mca_14.html


14/17

LAMPIRAN


15/17


16/17


17/17

laporan praktikum 'pembuatan media dan sterilisasi

Documents