DUA SENYAWA MANGOSTIN DARI EKSTRAK N-HEKSANA KAYU AKAR MANGGIS (Garcinia mangostana, Linn.) ASAL KAB.

NGANJUK, JAWA TIMUR

Oleh : Dosen Pembimbing :PRIMA AGUSTI LUKIS PROF. DR . TASLIM ERSAM1407 100 030

Seminar Hasil

MIND MAP

Pendahuluan

Metodologi

Hasil dan Pembahasan

Kesimpulan dan Saran

LATAR BELAKANG

Metabolit Primer

Metabolit Sekunder

Benzofenon, Flavonoid, Kumarin, Santon, dll.

(gartanin)

O

O OH

OH O

MeO

(3-isomangostin)

(Chaverry, 2008)O

O OH

OH O

MeO

PERMASALAHAN

TUJUANMENGEKSPLORASI SENYAWA MANGOSTIN YANG DAPATDIPISAHKAN PADA EKSTRAK N-HEKSANA DARI KAYU AKARMANGGIS (G.mangostana,Linn.)MEMBERIKAN INFORMASI BAHWA PADA KAYU AKARMANGGIS MENGANDUNG SENYAWA YANG BERBEDADENGAN SENYAWA MANGOSTIN PADA KULIT BUAHMANGGIS

APAKAH TERDAPAT PERBEDAAN ANTARA SENYAWAMANGOSTIN YANG DAPAT DIPISAHKAN PADA KAYU AKARDENGAN SENYAWA YANG DITEMUKAN PADA KULIT BUAHMANGGIS ?

METODOLOGI

1. ALAT :- Seperangkat alat gelas seperti Erlenmeyer, beaker glass, gelas

ukur, pengaduk, penyaring vakum, peralatan kolomkromatografi (KCV).

- Ekstraktor, Eyela Rotary Evaporator N-1001, lampu ultraviolet(UV) dengan λ 254 dan 366 nm, Melting Point ApparatusFisher – Johns, Spektrofotometer UV-VIS 1700 PharmastecShimadzu, Spektrofotometer IR BUCK Scientific 500 danSpektrometri 1H dan 13C-NMR Jeol JMN ECA 500 MHz.

METODOLOGI

2. BAHAN- Kayu akar tanpa kulit G.mangostana dalam bentuk

serbuk kering, pelarut organic seperti n-heksana,metilen klorida, kloroform, etil asetat, aseton danmetanol.

- TLC aluminium sheets 20x20 cm Silica gel 60 F254untuk KLT, Silica gel 60 untuk impregnasi, Silica gel60 G untuk kromatografi cair vakum, penampaknoda serium sulfat (Ce(SO4)2) 1,5% dalam H2SO4 2N.

METODOLOGI3. PROSEDUR KERJA3.1 Persiapan Bahan Tumbuhan

± 2 gram

Didiamkan selama1x24 jam

Kloroform : MeOH (9,8 : 0,2)

dioven Disemprot serium sulfat

Disinari dengan lampu UV

sampel ditotolkanpada plat KLT

Ekstrak kayu manggis

N-heksana (1), Diklorometana (2), Aseton (3),Etil Asetat (4), MeOH (5)

METODOLOGI3.2 Isolasi Senyawa3.2.1 Maserasi

3 kg

Dimaserasi dengan n-heksana(2x24 jam)

Diuapkan dengan Rotary evaporator

Ekstrak padat (3,4565 gram)

Kromatogram KLT maserasi 1 dan 2, eluen kloroform : MeOH (9,8 : 0,2)

1 2

METODOLOGI3.2.2 Fraksinasi ekstrak n-heksana

Ekstrak padat (3,4565 gram)

pelarut

silika

ke pompavakum

kaca masir

corong vakum

Ekstrak padat

KCV dengan eluen n-heksan : CHCl 2 yang ditingkatkan kepolarannya

dimonitoring KLT dengan eluen

klorofrom : MeOH(9,9 : 0,1)

Penggabungan fraksi berdasarkankemiripan Rf4 Fraksi (A, B, C, dan D)Fraksi A, dan D

Pemurnian

METODOLOGI3.3 Pemurnian Senyawa Hasil Isolasi3.3.1 Rekristalisasi

Padatan A dan D

-Dipisahkan dari pelarutnya dengan disaring vakum-Direkristalisasi dengan n-heksana : aseton-Didinginkan selama 1x 24jam

Kristal kuning

-Disaring vakum-Dicuci dengan campuran n-heksana : CHCl2 dingin-Dimonitoring KLT

Hasil

METODOLOGI3.3.2 Uji Titik Leleh dan Kelarutan

Kristal kuningmurni

-Diambil sesedikit mungkin-Diletakkan pada apparatus -Diukur titik leleh

Hasil Kristal kuningmurni

-Diambil sesedikit mungkin-Dilarutkan dalam berbagai pelarut (n-heksana , CHCl2, kloroform, etil asetat, aseton dan metanol)-Diamati kelarutannya

Hasil

METODOLOGI3.4 Penentuan Struktur

Spektrofotometri UVSpektrofotometri IR

Spektroskopi NMR

HASIL DAN PEMBAHASAN1. Pembahasan1.1 Uji Pendahuluan

Ekstrak kayu manggis 1. n-heksana2. diklorometana3. aseton4. etil asetat5. metanol

Kromatogram KLT hasil ujipendahuluan dengan eluenkloroform : metanol (9,8 ; 0,2)

HASIL DAN PEMBAHASAN1.2 Isolasi Senyawa

Kromatogram KLT maserasi 1 dan 2, eluen kloroform : MeOH (9,8 : 0,2)

1 2Ekstrak padat (3,4565 gram)

pelarut

silika

ke pompavakum

kacamasir

corong vakum

Ekstrakpadat

KCV dengan eluen n-heksan : CHCl 2 yang ditingkatkan kepolarannya

Kromatogram KLT fraksigabungan hasil KCV menggunakan eluen kloroform : metanol (9,9 : 0,1).

Kromatogram KLT pemilihaneluen yang sesuai (5%, 20%, 30%, 40% dan 50%)

Kromatogram KLT fraksinasi 1 menggunakan eluenkloroform : metanol (9,9 : 0,1)

A B

C D

HASIL DAN PEMBAHASAN1.3 Pemurnian Senyawa1.3.1 Uji 3 eluen yang berbeda kepolarannya

1 32

Senyawa 1

21 3

Senyawa 2Kromatogram KLT berbagai eluen

Keterangan :1a. Eluen diklorometana : etil asetat (9,5 : 0,5)2a. Eluen kloroform : metanol (9,9 : 0,1)3a. Eluen diklorometana : n-heksana (8 : 2)

1b. Eluen diklorometana : etil asetat (9,5 : 0,5)2b. Eluen kloroform : etil asetat (9 : 1)3b. Eluen kloroform : metanol (9,9 : 0,1)

1.3.2 Uji Titik Leleh dan Kelarutan

Senyawa 1 Senyawa 2Titik leleh 170 – 173 °C 172 – 174 °CKelarutan larut baik dalam kloroform, etil asetat dan

aseton, tidak larut dalam metanol, sedikitlarut dalam n-heksana dandiklorometana.

larut dalam etil asetat, aseton, dan metanol, sedikitlarut dalam n-heksana, diklorometana,dan kloroform.

HASIL DAN PEMBAHASAN1.4 Penentuan Struktur1.4.1 Penentuan Struktur Senyawa 11.4.1.1 Spektrum UV Senyawa 1 + MeOH + NaOH (a) dan Senyawa 1 + AlCl3/HCl (b)

R

O

OH

NaOH R

O

O-

R

O

O

- Na+

+ OH2R

OO

O

OAl

2+

Al+R

O

OH

OHOH AlCl3

R

OOH

OH

OAl

2+

HCl

O

O OH

OH OH

(a)

Abs

nm

n→π*315244

π→π*

356

(b)nm

Abs

315

480

1.4.1.2 Spektrum IR Senyawa 1 dalam pelet KBr

%T

1/cm

OH

C-H C=O

C=CC-O

R = OCH3 / C5O

O OH

OH OH

R R

1.4.1.2 Spektrum 1H-NMR Senyawa 1 dalam Aseton d6

abundance

ppm

Keterangan : ada minimal 28 atom proton1. Kelompok prenil pada δH (ppm) 5,28 dan 5,22 (1H, m)2. Kelompok metoksi pada δH (ppm) 3,80 dan 3,95 (masing – masing 3H, s)3. Kelompok hidroksil terkhelat dengan karbonil pada δH (ppm) 13,61 (1H, s)4. Kelompok proton aromatik singlet pada δH (ppm) 6,47 dan 6,83 (masing – masing 1H, s) 5. Kelompok metilen pada δH (ppm) 4,12 (2H, d, J = 6,5) dan 3,31 (2H, d, J = 7,15)6. Kelompok metil pada δH (ppm) 1,63; 1,65; 1,77 dan 1,82 (masing – masing 3H,s)

1.4.1.2 Spektrum 13C-NMR dan DEPT 135 Senyawa 1 dalam Aseton d6

Keterangan : ada minimal 24 atom karbon, data DEPT 135 memperlihatkan ada 12 atom karbonyaitu :1. Ada 4 gugus metin (C-H) pada δC (ppm) 124,7; 123,4; 102,8 dan 89,92. Ada 2 gugus metilen (CH2) pada δC (ppm) 26,9 dan 21,9 → diprenilasi3. Ada 6 gugus metil pada δC (ppm) 61,4; 56,5; 25,9; 25,9; 18,4 dan 17,9, dua diantaranya adalah

gugus metoksi (O-CH3) pada δC (ppm) 61,4 dan 56,5 → dimetoksi4. 12 atom karbon yang tidak muncul di spektrum DEPT 135, menunjukkan bahwa atom karbon

tersebut merupakan atom C kuartener

abundance

ppm

C-H

CH3

CH2

Nomorkarbon

Senyawa β-mangostin Senyawa 1

δH (ppm) δC (ppm) δH (ppm) δC (ppm)

1 - 160,2 - 160,52 - 111,9 - 111,83 - 163,9 - 164,64 6,39 (s) 89,2 6,47 (s) 89,94a - 156,1 - 157,55 6,86 (s) 101,8 6,83 (s) 102,76 - 154,8 - 156,37 - 143,0 - 144,68 - 137,5 - 138,28a 112,8 - 112,29 - 182,3 - 182,99a - 104,3 - 104,210 - - - -10a - 155,7 - 156,211 3,37(d,J=6,0Hz) 21,8 3,31(d,

J=7,15Hz)25,9

12 5,29 (m) 122,7 5,28 (t) 123,413 - 132,5 - 131,514 1,69 (s) 26,2 1,65(s) 25,915 1,69 (s) 26,2 1,63(s) 18,316 4,13 (d, J=6,6 Hz) 27,0 4,12 (d, J= 6,5

Hz)21,9

17 5,29 (m) 123,6 5,22 (t) 124,718 - 132,1 - 131,519 1,85 (s) 18,6 1,82(s) 17,920 1,83 (s) 18,2 1,77(s) 26,9

1-OH 13,44(s) 13.61(s)3-OMe 3,93 (s) 62,5 3,95 (s) 61,47-OMe 3,83 (s) 56,2 3,80 (s) 56,5

Tabel 1. Data Perbandingan 1H-NMR, dan 13C-NMR, Senyawa 1 dengan Senyawa β-mangostindalam Aseton d6

O

O OH

OH

MeO

OMe

H H

(β-mangostin)

1.4.1.2 Spektrum 2D-HMBC

OHH

HHH

MeO

OHO

OH

OMe

H H1

2

35

6

7

4

8 911

10a 4a

16

posisi prenil pada C-2 dan C-8

O

O

H

OH

H

MeO

OH OMe

posisi metoksi pada C-3 dan C-7, posisiproton aromatic pada C-4 dan C-5, serta posisi OH khelat pada C-1

O

O

H

OH

H

MeO

OH OMe

(1)

Nomorkarbon

δH (ppm) δC

(ppm)HMBC

1 - 160,62 - 111,83 - 164,64 6,47 (s) 89,9 C-3, C-4a, C-

9a, C-94a - 156,35 6,83 (s) 102,7 C-7,C-8a,C-96 - 157,67 - 144,68 - 138,28a - 112,29 - 182,99a - 104,210 - -10a - 156,211 3,31(d,J=7,15

Hz)21,9 C-1, C-2, C-3,

C-12, C-13, C-15

12 5,22 (t) 123,4 C-1413 - 131,514 1,77 (s) 25,9 C-12,C-13,15 1,82 (s) 25,916 4,12(d, J= 6,5

Hz)26,9 C-8, C-8a, C-7,

C-17, C-1817 5,28 (t) 124,7 C-1918 - 131,519 1,63 (s) 17,9 C-20,C-17,C-

1820 1,65 (s) 18,3

1-OH 13.61 (s) C-1, C-2, C-9a,C-8a

3-OMe 3,95 (s) 61,4 C-37-OMe 3,80 (s) 56,5 C-7

HASIL DAN PEMBAHASAN1.4.2 Penentuan Struktur Senyawa 21.4.2.1 Spektrum UV Senyawa 2 + MeOH + NaOH dan Senyawa 2 + AlCl3/HCl

R

O

OH

NaOH R

O

O-

R

O

O

- Na+

+ OH2 R

OO

O

OAl

2+

Al+R

O

OH

OHOH AlCl3

R

OOH

OH

OAl

2+

HCl

O

O OH

OH OH

Abs

nm(b)

316

480

Abs

nm(a)

316 369 243

n→π*π→π*

%T

1/cm

OH

C-H

C=O C-O

1.4.2.2 Spektrum IR Senyawa 2 dalam pelet KBr

R = OCH3 / C5O

O OH

OH OH

R R

1.4.2.3 Spektrum UV dan IR Senyawa α-mangostin dalam pelet KBr

%T

1/cm

OH

C-H

C=O C-O

(2)O

O OH

OHH H

MeO

OH

Abs

nm(a)

316 369 243

n→π*π→π*

KESIMPULAN DAN SARAN

-Dihasilkan dua senyawa mangostin dari ekstrak n-heksana kayu akar G.mangostana yaituβ-mangostin (1) dan α-mangotin (2).- Senyawa β-mangostin berupa kristal jarum berwarna kuning sebanyak 0,2714 gramdengan titik leleh 170 – 173 °C, sedangkan senyawa α-mangostin berupa padatankuning sebanyak 0.0458 gram dengan titik leleh 172 – 174 °C.- Penentuan struktur kedua senyawa tersebut dilakukan dengan menggunakan dataspektroskopi UV, IR, 1H-NMR, 13C-NMR, DEPT 135, HMBC dan dilakukan perbandingandata senyawa yang sama dengan yang telah dilaporkan oleh peneliti sebelumnya.

1. Kesimpulan

2. Saran

Penelitian ini masih berpotensi untuk dilakukan penelitian lebih lanjut karena masih banyakfraksi – fraksi lain yang belum diperlakukan, sehingga dapat berpeluang untukmendapatkan senyawa mangostin atau senyawa turunan fenolat lainnya dan diuji sebagaibioaktifitasnya.