uji antiinflamasi dg karagen
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-
8/20/2019 Uji Antiinflamasi Dg Karagen
1/11
B r . J .
P h a r m a c .
1 9 7 1 ) , 4 2 ,
3 9 2 - 4 0 2 .
M e d i a t o r s
o f
t h e
i n f l a m m a t i o n
i n d u c e d
i n
t h e r a t p a w
b y
c a r r a g e e n i n
PEARL
CRUNKHORN
A N D
S .
C
R . MEACOCK
L i l l y R e s e a r c h
C e n t r e
L i m i t e d , E r l
Wood M a n o r ,
W i n d l e s h a m , S u r r e y
S u m m a r y
1 . T h e t i m e c o u r s e o f
o e d e m a
f o r m a t i o n
i n r a t s c a u s e d
b y i n j e c t i o n
o f c a r -
r a g e e n i n
i n t o
t h e paw
w a s f o l l o w e d f o r
5 - 5 h o u r s . I n t a c t
o r a d r e n a l e c t o m i z e d
r a t s w h i c h h a d
p r e v i o u s l y
b e e n i n j e c t e d w i t h
e l l a g i c a c i d
o r
s a l i v a
t o
r e d u c e
c o n s i d e r a b l y
t h e
c o n c e n t r a t i o n o f
b l o o d k i n i n o g e n s , o r
w i t h
m e t h y s e r g i d e
t o
a n t a g o n i z e
5 - h y d r o x y t r y p t a m i n e
( 5 - H T ) s h o w e d a
r e d u c e d
i n f l a m m a t o r y
r e s p o n s e .
I t
w a s
c o n c l u d e d
t h a t k i n i n s a n d
5 - H T
c o n t r i b u t e d
s i g n i f i c a n t l y
t o
o e d e m a
f o r m a t i o n d u r i n g
t h i s p e r i o d .
2 .
M e p y r a m i n e a l o n e
h a d
n o
e f f e c t
o n o e d e m a f o r m a t i o n , b u t
i n c o m b i n a t i o n
w i t h e l l a g i c a c i d
t r e a t m e n t , w i t h
o r w i t h o u t m e t h y s e r g i d e ,
i t c a u s e d
a r e d u c t i o n
s u g g e s t i n g
t h a t h i s t a m i n e
p l a y e d a m i n o r
r o l e i n o e d e m a f o r m a t i o n
d u r i n g
t h e
f i r s t
3 h o u r s .
3 .
V a s c u l a r p e r m e a b i l i t y s t u d i e s i n d i c a t e d
t h a t i n j e c t i o n o f e l l a g i c a c i d
d i d
n o t i n t e r f e r e w i t h
t h e
n o r m a l r e s p o n s e s
i n s k i n t o i n t r a d e r m a l i n j e c t i o n s
o f
h i s t a m i n e ,
5 - H T ,
b r a d y k i n i n
o r
c o m p o u n d
4 8 / 8 0 .
M e p y r a m i n e a n d
m e t h y -
s e r g i d e ,
a t
t h e
d o s e s u s e d
i n t h e c a r r a g e e n i n
e x p e r i m e n t s ,
c o m p l e t e l y
a n t a g o n i z e d
h i s t a m i n e
a n d
5 - H T , r e s p e c t i v e l y ,
a n d
d i d
n o t a f f e c t
t h e
s k i n
r e s p o n s e s
o f
b r a d y k i n i n .
4 .
T r e a t m e n t i n
v i v o w i t h
e l l a g i c a c i d
o r
r a t s a l i v a
w a s
e q u a l l y
e f f e c t i v e
i n
r e d u c i n g p l a s m a
k i n i n o g e n
c o n c e n t r a t i o n s b y
a n a m o u n t
e q u i v a l e n t
t o m o r e
t h a n
1 0
t i m e s t h e q u a n t i t y
o f
s u b s t r a t e
1
m e a s u r e d b y
G a u t v i k
R u g s t a d
1 9 6 7 ) .
5 .
R a t s a l i v a , b u t n o t
e l l a g i c a c i d ,
l o w e r e d
c o m p l e m e n t
l e v e l s
b y
a p p r o x i -
m a t e l y
2 0 .
I n t r o d u c t i o n
T h e i n f l a m m a t o r y r e s p o n s e
t o
a n
i n j e c t i o n
o f
c a r r a g e e n i n
i n t o t h e
r a t
paw
w a s
i n t r o d u c e d b y
W i n t e r ,
R i s l e y
N u s s
1 9 6 2 )
a n d
d e v e l o p e d b y
t h e s e
w o r k e r s
W i n t e r ,
R i s l e y
N u s s , 1 9 6 3 ;
W i n t e r , 1 9 6 5 )
a s a
m o d e l
o f
i n f l a m m a t i o n
i n
t h e s e a r c h
f o r
a n t i - i n f l a m m a t o r y
d r u g s .
T h e c o m p o u n d s
u s e d
i n t h e s e
s t u d i e s
w e r e c h o s e n
f o r
t h e i r
a b i l i t y
t o
s u p p r e s s
o e d e m a
r a t h e r t h a n
f o r
s p e c i f i c
a n t a g o n i s t a c t i v i t y ,
a n d
t h e r e f o r e
t h e r o l e a n d
i m p o r t a n c e
o f t h e
v a r i o u s
m e d i a t o r s
r e l e a s e d
d u r i n g
t h e
i n f l a m m a t o r y
r e a c t i o n h a v e y e t
t o b e
c l e a r l y
d e f i n e d .
R e c e n t l y ,
D i R o s a
S o r r e n t i n o
1 9 6 8 ,
1 9 7 0 )
h a v e
s h o w n
b o t h
b y
i n h i b i t i o n o f
p l a s m a
k a l l i k r e i n
w i t h
a p r o t i n i n
a n d
b y d e p l e t i o n
o f
, p l a s m a
k i n i n o g e n
w i t h
c e l l u l o s e
s u l p h a t e ,
t h a t
k i n i n s
a r e
r e l e a s e d
i n
t h e
i n f l a m m a t o r y r e s p o n s e
t o
c a r r a g e e n i n
i n t h e
-
8/20/2019 Uji Antiinflamasi Dg Karagen
2/11
I n f l a m m a t o r y
r e s p o n s e
t o
c a r r a g e e n i n
r a t . T h e
k i n i n o g e n c o n c e n t r a t i o n s
o f
f e m a l e
W i s t a r
r a t s
w e r e
g r e a t l y
r e d u c e d
b y
i n t r a v e n o u s
i n j e c t i o n
o f
e l l a g i c
a c i d
G a u t v i k
R u g s t a d , 1 9 6 7 )
o r
r a t s a l i v a
a n d
t h e s e p r o c e d u r e s
h a v e
b e e n u s e d
i n
o u r
i n v e s t i g a t i o n .
T h e
e x t e n t
o f
t h e
c o n t r i b u -
t i o n
t o
t h e
o e d e m a
f o r m a t i o n m a d e
b y
5 - h y d r o x y t r y p t a m i n e
( 5 - H T )
i s
i n d i c a t e d
i n
t h e
s t u d i e s
o f F e k e t e
K u r t i
1 9 7 0 )
i n
w h i c h
m e t h y s e r g i d e ,
a n
a n t a g o n i s t
o f
5 - H T ,
w a s f o u n d
t o
s u p p r e s s
t h e
c a r r a g e e n i n
r e a c t i o n .
I n
t h i s
s t u d y
w e
h a v e
o b s e r v e d
c h a n g e s
i n
t h e t i m e
c o u r s e
o f o e d e m a
f o r m a t i o n ,
i n a n i m a l s
h a v i n g
l o w
c o n c e n t r a -
t i o n s
o f
p l a s m a
k i n i n o g e n
a s
w e l l
a s i n a n i m a l s t r e a t e d w i t h
a n t a g o n i s t s
o f
h i s t a m i n e
a n d
5 - H T i n
a n
a t t e m p t
t o
d e t e r m i n e
t h e r e l a t i v e
i m p o r t a n c e
o f
k i n i n s ,
h i s t a m i n e
a n d
5-HT i n
t h e
p r o d u c t i o n
o f
o e d e m a
b y c a r r a g e e n i n .
M e t h o d s
C a r r a g e e n i n
i n f l a m m a t i o n
F e m a l e W i s t a r r a t s ( 1 4 0 - 1 6 0
g ,
m a i n t a i n e d o n
u n r e s t r i c t e d
s u p p l i e s
o f
f o o d
a n d
w a t e r ,
w e r e
u s e d .
W h i l e
i n j e c t i o n s
w e r e
b e i n g
g i v e n
t h e
a n i m a l s
w e r e
l i g h t l y
a n a e s -
t h e t i z e d
w i t h
e t h e r
e x c e p t
i n
o n e s e r i e s o f
e x p e r i m e n t s
a s
d e s c r i b e d
i n
R e s u l t s
w h e n t h e y w e r e
a n a e s t h e t i z e d
w i t h
p e n t o b a r b i t o n e s o d i u m
A b b o t ) ,
4 0
m g / k g
i . p .
3 0
m i n
b e f o r e
t r e a t m e n t .
E l l a g i c
a c i d
( K o c h - L i g h t
L a b o r a t o r i e s )
w a s u s e d i n
a s t a n d a r d s o l u t i o n o f
2
x
1 0 - M i n a 0 - 1 5
M
T r i s - H C l b u f f e r ,
p H
7 * 3 5
( G a u t v i k
R u g s t a d ,
1 9 6 7 ) . M e t h y -
s e r g i d e
b i m a l e a t e
S a n d o z )
a n d
m e p y r a m i n e
m a l e a t e
( M a y
a n d
B a k e r )
w e r e
d i s -
s o l v e d
i n 0
9
N a C l .
R a t
s a l i v a
w a s
c o l l e c t e d
d u r i n g p e n t o b a r b i t o n e
a n a e s t h e s i a
a f t e r
s t i m u l a t i o n
o f
s a l i v a t i o n b y
a n
i n t r a p e r i t o n e a l
i n j e c t i o n
o f
p i l o c a r p i n e
2
m g / k g ) .
I t
w a s
t h e n
c e n t r i f u g e d
a n d
s t o r e d a t
- 2 6 °
C
u n t i l u s e d .
I n f l a m m a t i o n
w a s
i n d u c e d
b y
i n j e c t i n g
0 - 1
m l
o f
1
h o m o g e n i z e d
s u s p e n s i o n
o f
c a r r a g e e n i n ( G e l o z o n e
S T 1 ,
W h i f f e n , L o u g h b o r o u g h )
i n 0
9
N a C l i n t o t h e
p l a n t a r
s u r f a c e
o f
t h e
r i g h t
h i n d
paw o f
e a c h r a t .
T h e
v o l u m e o f
t h e i n f l a m e d
paw
w a s
d e t e r m i n e d
u s i n g
a m e r c u r y
p l e t h y s m o g r a p h
U .
B a s i l e , M i l a n ) .
M e a s u r e m e n t s
o f
t h e
r i g h t
h i n d
paw
w e r e
m a d e
a f t e r
1
h ,
2
5
h ,
3
5
h ,
4 - 5 h
a n d
5 5
h
a n d t h e a m o u n t
o f
o e d e m a
w a s d e t e r m i n e d
b y
c o m p a r i s o n
w i t h
t h e v o l u m e o f
t h e l e f t
h i n d
paw
m e a s u r e d a t
1
h o u r .
A t
l e a s t f i v e
r e a d i n g s w e r e
t a k e n f o r e a c h
paw
a t
a n y o n e
t i m e .
E l l a g i c
a c i d
s o l u t i o n
0
5
m l )
o r
r a t s a l i v a
0
5
m l )
w a s
i n j e c t e d
s l o w l y i n t o a
t a i l
v e i n ,
3
t i m e s
a t
5
m i n
i n t e r v a l s ,
3 0
m i n b e f o r e t h e
i n j e c t i o n
o f c a r r a g e e n i n . I n
t h o s e
e x p e r i m e n t s
w h e r e
b o t h
r e a g e n t s
w e r e
i n j e c t e d , a
1 5
m i n
i n t e r v a l
w a s
a l l o w e d
b e t w e e n
t h e
i n j e c t i o n s o f
e l l a g i c
a c i d
a n d
s a l i v a .
M e p y r a m i n e
a n d
m e t h y s e r g i d e ,
b o t h
a t
d o s e s
o f
2
5
mg b a s e / k g ,
w e r e
i n j e c t e d
i n t r a v e n o u s l y 1 5
m i n
b e f o r e
t h e
c a r r a g e e n i n
i n j e c t i o n . F u r t h e r
i n j e c t i o n s o f m e t h y s e r g i d e
w e r e g i v e n
2 h a n d
4
h
a f t e r t h e
c a r r a g e e n i n i n j e c t i o n
t o
m a i n t a i n a n t a g o n i s m t o 5 - H T . I n
s o m e e x p e r i -
m e n t s
m e t h y s e r g i d e
a n d / o r
m e p y r a m i n e w e r e
g i v e n
1 5 m i n a f t e r e l l a g i c
a c i d .
B i l a t e r a l
a d r e n a l e c t o m y
w a s
p e r f o r m e d
t h r o u g h
t w o
d o r s o l a t e r a l i n c i s i o n s w h i l e
u n d e r
p e n t o b a r b i t o n e a n a e s t h e s i a .
E a c h a n i m a l w a s
i n j e c t e d
i n t r a p e r i t o n e a l l y
w i t h
0 5 m l
b e m i g r i d e N i c h o l a s ) t o
h a s t e n
r e c o v e r y f r o m a n a e s t h e s i a , a n d
m a i n t a i n e d
w i t h
045
N a C l
i n
t h e
d r i n k i n g w a t e r . O n l y
t h o s e a n i m a l s i n
a l i v e l y h e a l t h y
c o n d i t i o n
w e r e
u s e d 4
d a y s l a t e r .
I n c r e a s e d
v a s c u l a r
p e r m e a b i l i t y
R a t s
w e r e
a n a e s t h e t i z e d
w i t h m e t h o h e x i t o n e
s o d i u m
L i l l y ,
4 0 m g / k g ) a n d t h e i r
a b d o m e n s
w e r e
s h a v e d .
T h e y w e r e
t h e n i n j e c t e d
i n t r a v e n o u s l y w i t h
s o l u t i o n s o f
3 9 3
-
8/20/2019 Uji Antiinflamasi Dg Karagen
3/11
P e a r l C r u n k h o r n a n d S .
C .
R .
M e a c o c k
5 P o n t a m i n e S k y B l u e
d y e
G u r r , 0 - 2
m l /
1 0 0 g ) a n d m e p y r a m i n e o r
m e t h y s e r g i d e .
F i v e m i n u t e s
l a t e r i n t r a d e r m a l i n j e c t i o n s
w e r e made
i n
t h e a b d o m i n a l
s k i n
u s i n g
s e r i a l d i l u t i o n s
o f e i t h e r h i s t a m i n e B r i t i s h D r u g H o u s e s ) ,
5-HT
S a n d o z ) , o r
s y n -
t h e t i c b r a d y k i n i n
( S a n d o z ) i n
01
m l o f
T y r o d e s o l u t i o n , o r w i t h c o m p o u n d 4 8 / 8 0
i n 0 9 9
N a C l
a d j u s t e d t o
p H 7 - 3 . F o r t y - f i v e m i n u t e s l a t e r
t h e
a n i m a l s
w e r e k i l l e d
b y
c e r v i c a l
d i s l o c a t i o n .
T h e
i n f l a m m a t o r y
r e s p o n s e
w a s
d e t e r m i n e d
b y
m e a s u r i n g
t h e m e a n d i a m e t e r s
o f
t h e
b l u e l e s i o n s o f
t h e
r e f l e c t e d
s k i n a n d b y
a s s e s s i n g t h e
d y e i n t e n s i t y o n a n
a r b i t r a r y 0 - 1 0 p o i n t
s c a l e .
R a t s p r e v i o u s l y
t r e a t e d w i t h
e l l a g i c
a c i d w e r e
n o t s u b j e c t e d
t o
s k i n
r e a c t i o n s u n t i l
3 0
m i n
a f t e r
e l l a g i c
a c i d t r e a t m e n t ,
t o
a l l o w
b l o o d
p r e s s u r e t o r e t u r n t o n o r m a l ( G a u t v i k
R u g s t a d ,
1 9 6 7 ) .
K i n i n o g e n
c o n c e n t r a t i o n s
K i n i n o g e n
c o n c e n t r a t i o n s
w e r e m e a s u r e d
u s i n g
d e n a t u r e d
w h o l e
b l o o d
a s s u b -
s t r a t e a c c o r d i n g t o
t h e
m e t h o d
o f B r o c k l e h u r s t
Z e i t l i n 1 9 6 7 ) ,
w i t h t h e f o l l o w i n g
s l i g h t m o d i f i c a t i o n s . T h e d e n a t u r e d
s u b s t r a t e w a s h o m o g e n i z e d i n 0 - 0 2
M s o d i u m
p h o s p h a t e
b u f f e r ,
p H 7 - 3 5 .
A l i q u o t s 1 m l )
o f
t h i s
s u s p e n s i o n ,
c o n t a i n i n g
s u b s t r a t e
f r o m
0 - 3
m l
o f
f r e s h b l o o d , w e r e i n c u b a t e d
a t
3 7 0
C
f o r 3 0 m i n w i t h e x c e s s
c r y s t a l l i n e t r y p s i n T r y p t a r , A r m o u r ,
1 - 3
m g , a s
p r e v i o u s l y
d e t e r m i n e d
f o r e a c h
b a t c h
o f e n z y m e )
i n
4 m l o f p h o s p h a t e b u f f e r .
T h e
r e l e a s e d k i n i n w a s
m e a s u r e d o n
t h e i s o l a t e d
g u i n e a - p i g
i l e u m
b a t h e d i n o x y g e n a t e d T y r o d e
s o l u t i o n a t
3 7 0 C ,
u s i n g
s y n t h e t i c b r a d y k i n i n
a s a s t a n d a r d .
D i s p o s a b l e p o l y s t y r e n e s y r i n g e s a n d
s i l i c o n i z e d
n e e d l e s a n d
g l a s s w a r e w e r e u s e d
i n
t h e
c o l l e c t i o n
o f
a l l b l o o d s a m p l e s ,
t h e e x t r a c -
t i o n
p r o c e s s ,
a n d
t h e
a s s a y o f
k i n i n .
T o t a l
h a e m o l y t i c
c o m p l e m e n t
d e t e r m i n a t i o n s
S e r u m
c o n c e n t r a t i o n s
o f t o t a l h a e m o l y t i c c o m p l e m e n t
w e r e
m e a s u r e d
b y
t h e
m e t h o d o f R o s e n b e r g
T a c h i b a n a
1 9 6 2 ) e x c e p t
t h a t
d o u b l e
q u a n t i t i e s o f e a c h
r e a g e n t
w e r e
u s e d a n d
t h e
d e g r e e
o f
e r y t h r o c y t e h a e m o l y s i s
w a s
d e t e r m i n e d
f r o m
t h e
o p t i c a l d e n s i t y
r e a d i n g
o f
t h e
e r y t h r o c y t e
s u p e r n a t a n t
a t
5 4 1
m , u
w i t h
a
U n i c a m S P 6 0 0
s p e c t r o p h o t o m e t e r . C o m p l e m e n t
t i t r e s
w e r e
e x p r e s s e d
i n t e r m s
o f
C ' H 5 0
u n i t s / m l , w h e r e
o n e
C ' H 5 0
u n i t i s
d e f i n e d a s
t h e
a m o u n t
o f
c o m p l e m e n t
i n
t h a t d i l u t i o n
o f
s e r u m w h i c h
c a u s e d 50 l y s i s
o f
t h e s e n s i t i z e d
e r y t h r o c y t e s .
B l o o d
s a m p l e s
w e r e
t a k e n
f r o m t h e t a i l
o r b y
c a r d i a c
p u n c t u r e .
T h e
s e r a
w e r e
h a r v e s t e d
w i t h i n
2
h ,
q u i c k - f r o z e n
a n d
s t o r e d
a t - 2 6 °
C
u n t i l
u s e d . S t a t i s t i c a l
a n a l y s i s
w a s
b y
S t u d e n t s
t
t e s t .
R e s u l t s
V a r i a t i o n i n a n i m a l
r e s p o n s e
t o
t h e
i n j e c t i o n
o f c a r r a g e e n i n
T h e
t i m e c o u r s e
o f
o e d e m a
f o r m a t i o n
i n t h e
p a w s
o f t e n f e m a l e
r a t s
i s
s h o w n
i n
F i g .
1
a n d
i s
t y p i c a l
o f t h e v a r i a t i o n
i n a n i m a l
b e h a v i o u r
s e e n
t h r o u g h o u t
t h i s
i n v e s t i g a t i o n . E x p e r i m e n t s
u s i n g
m a l e
a n i m a l s
u n p u b l i s h e d
o b s e r v a t i o n s ) ,
a d r e n a l e c t o m i z e d
f e m a l e a n i m a l s
a n d
a n i m a l s
t r e a t e d
w i t h
a n t a g o n i s t s
o f
p o s s i b l e
m e d i a t o r s p r o v i d e d
d a t a
w i t h
s i m i l a r
v a r i a t i o n s
w i t h i n e a c h
g r o u p ,
a s d i d
e x p e r i -
m e n t s
u s i n g
a n y
o n e
t y p e
o f
a n i m a l
o n
t h e
s a m e
o r
d i f f e r e n t
d a y s .
I n
o r d e r
t o
i n c r e a s e
t h e
s i g n i f i c a n c e
o f
r e s u l t s , t h e r e f o r e ,
l a r g e
g r o u p s
o f
a n i m a l s
o f
t h e same
s e x a n d
s t r a i n
h a d
t o b e u s e d .
3 9 4
-
8/20/2019 Uji Antiinflamasi Dg Karagen
4/11
I n f l a m m a t o r y r e s p o n s e
t o
c a r r a g e e n i n
E f f e c t
o f e l l a g i c
a c i d ,
s a l i v a
a n d m e t h y s e r g i d e
R a t s
w e r e t r e a t e d
w i t h
e l l a g i c
a c i d ,
s a l i v a o r
m e t h y s e r g i d e
a n d
t h e
t i m e
c o u r s e
o f
f o r m a t i o n
o f
t h e o e d e m a c a u s e d
b y c a r r a g e e n i n
w a s
f o l l o w e d .
A l l t h r e e t r e a t -
m e n t s s u p p r e s s e d o e d e m a b y 4 0 - 6 0 d u r i n g t h e
f i r s t 5
5
h ,
i n d i c a t i n g a
s i g n i f i c a n t
c o n t r i b u t i o n
b y
k i n i n s
a n d
5-HT
t o
o e d e m a
f o r m a t i o n
d u r i n g
t h i s
t i m e
p e r i o d .
T h e
r e s u l t s w h i c h
a r e
i l l u s t r a t e d
i n
F i g .
2
a l s o i n d i c a t e
t h a t
m e t h y s e r g i d e
o r
s a l i v a
w e r e
m o r e e f f e c t i v e
t h a n
e l l a g i c a c i d . T r e a t m e n t
w i t h
e l l a g i c a c i d a n d s a l i v a t o g e t h e r
w a s
m o r e e f f e c t i v e i n t h e f i r s t
3
h
t h a n t r e a t m e n t
w i t h
e a c h s e p a r a t e l y ( P < 0
0 1
a t
2 - 5
h ) .
I n F i g .
3
i t c a n b e s e e n t h a t e l l a g i c a c i d a n d m e t h y s e r g i d e
s u p p r e s s e d
c a r r a g e e n i n
o e d e m a
i n a d r e n a l e c t o m i z e d a n i m a l s a n d
t h e r e f o r e d i d n o t a c t
i n d i r e c t l y
b y a d r e n a l
s t i m u l a t i o n .
T h e t i m e
c o u r s e
o f
o e d e m a f o r m a t i o n
i n
a n i m a l s t r e a t e d w i t h e l l a g i c
a c i d ,
m e p y r a m i n e
a n d
m e t h y s e r g i d e
i n
v a r i o u s c o m b i n a t i o n s i s
g i v e n i n
T a b l e
1 . A n i m a l s
p r e v i o u s l y a n a e s t h e t i z e d
w i t h
p e n t o b a r b i t o n e
w e r e u s e d
i n
t h e s e
e x p e r i m e n t s .
T r e a t m e n t
w i t h
e l l a g i c
a c i d
o r
m e t h y s e r g i d e
a l o n e
p r o d u c e d
a
s i g n i f i c a n t
d e p r e s -
s i o n i n o e d e m a
f o r m a t i o n
( 4 5 ; P
-
8/20/2019 Uji Antiinflamasi Dg Karagen
5/11
P e a r l C r u n k h o r n a n d S .
C .
R .
M e a c o c k
a p p e a r e d t o
b e
m o r e e f f e c t i v e
t h a n
e i t h e r c o m p o u n d
a l o n e
b u t t h e i n c r e a s e d
s u p -
p r e s s i o n
w a s s t a t i s t i c a l l y s i g n i f i c a n t
o n l y a f t e r 2 5 h
( P < 0
0 5 ) .
M e p y r a m i n e w a s
i n e f f e c t i v e
a l o n e . H o w e v e r , w h e n
c o m b i n e d
w i t h
e l l a g i c a c i d t r e a t m e n t ( b u t
n o t
w i t h m e t h y s e r g i d e )
o r
w i t h b o t h e l l a g i c
a c i d a n d m e t h y s e r g i d e
a s i g n i f i c a n t
c o n t r i -
b u t i o n
t o t h e s u p p r e s s i o n
o f o e d e m a f o r m a t i o n
w a s o b s e r v e d
d u r i n g
t h e
f i r s t
3
5
h o u r s .
S p e c i f i c i t y
o f
t r e a t m e n t w i t h e l l a g i c a c i d ,
m e t h y s e r g i d e a n d m e p y r a m i n e
T h e
r e s u l t s
i n T a b l e
2 i n d i c a t e t h a t e l l a g i c
a c i d d i d n o t
a f f e c t
t h e
s i z e o f t h e
s k i n
l e s i o n s
c a u s e d
b y i n t r a d e r m a l
i n j e c t i o n o f
5 - H T ,
h i s t a m i n e
o r
b r a d y k i n i n n o r
d i d
i t i n h i b i t
t h e r e l e a s e o f
i n f l a m m a t o r y
m e d i a t o r s f r o m
m a s t c e l l s b y c o m p o u n d 4 8 / 8 0 .
I t
f o l l o w e d ,
t h e r e f o r e , t - h a t t h e t r e a t m e n t
w i t h e l l a g i c a c i d h a d n o t i t s e l f
c a u s e d
d e g r a n u l a t i o n o f
m a s t c e l l s .
T h e
r e s u l t s
i n T a b l e
3
s h o w
t h a t
m e t h y s e r g i d e
a t t h e
d o s e a b l e
t o
s u p p r e s s c a r r a g e e n i n
o e d e m a d i d n o t
a n t a g o n i z e t h e
i n c r e a s e i n
v a s c u l a r
p e r m e a b i l i t y
c a u s e d
b y
b r a d y k i n i n
o r h i s t a m i n e
b u t c o m p l e t e l y s u p p r e s s e d
t h a t
d u e t o
5 - H T . F u r t h e r
e x p e r i m e n t s w i t h 5-HT
e s t a b l i s h e d
t h a t
t h e a n t a g o n i s t
a c t i v i t y o f
m e t h y s e r g i d e h a d b e g u n
t o d e c r e a s e a f t e r 3 h a n d
c o n s e q u e n t l y 2
h
m a i n t e n a n c e d o s e s o f
m e t h y s e r g i d e w e r e g i v e n i n a l l e x p e r i m e n t s
r e p o r t e d
i n
t h i s
s t u d y .
I S O
1 3 0
A
V
I
E
0
90
i-70
u
C
5 0
3 0
1 0
T i m e
h )
F I G .
2 . O e d e m a
f o r m a t i o n
i n d u c e d
b y
c a r r a g e e n i n
i n r a t s : A , u n t r e a t e d
t w e n t y ) ;
B , t r e a t e d
w i t h
e l l a g i c
a c i d
n i n e t e e n ) ;
C ,
w i t h
m e t h y s e r g i d e
n i n e t e e n ) ;
D , w i t h
s a l i v a
s i x t e e n ) ;
E ,
w i t h
e l l a g i c
a c i d
a n d
s a l i v a
t w e l v e ) .
V e r t i c a l
b a r s s h o w
+ S . E .
3 9 6
-
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6/11
I n f l a m m a t o r y r e s p o n s e t o
c a r r a g e e n i n 3
B e c k e r ,
M o t a
Wong
1 9 6 8 )
h a v e
r e p o r t e d
t h a t
m e p y r a m i n e g i v e n
i n t r a v e n o u s l y
a t a c o n c e n t r a t i o n o f
e i t h e r
5 o r 05
m g / k g
p a r t i a l l y s u p p r e s s e s
t h e c u t a n e o u s
p e r m e a b i l i t y c h a n g e s
i n d u c e d
b y
b r a d y k i n i n .
T h e r e s u l t s
i n
T a b l e
4
s h o w
t h a t
w e
f o u n d t h i s
e f f e c t
t o
b e
m a r g i n a l
o r
a b s e n t ,
a n d
i t w a s t h u s
u n l i k e l y
t h a t
m e p y r a m i n e
h a d
a n t a g o n i z e d
k i n i n s
r e l e a s e d
i n
t h e
c a r r a g e e n i n
r e a c t i o n .
F u r t h e r
e x p e r i m e n t s
e s t a b l i s h e d t h a t
a
s i n g l e
i n t r a v e n o u s
i n j e c t i o n
o f 2 - 5
m g / k g
m e p y r a m i n e
s u p p r e s s e d
t h e
i n f l a m m a t o r y
a c t i v i t y
o f h i s t a m i n e f o r a t l e a s t
6
h o u r s .
1 6 0
1 4 0
1 2 0
E
2
0
>
1 0 0
6 6
° 6
L .
C
4
U- -
O .
0
4 0
2 0
T i m e
h )
F I G .
3 . Oedema f o r m a t i o n ( ±
S . E . )
i n d u c e d
b y
c a r r a g e e n i n
i n
a d r e n a l e c t o m i z e d
r a t s :
A ,
u n -
t r e a t e d
f o u r t e e n ) ; B ,
t r e a t e d w i t h
e l l a g i c
a c i d
t w e n t y ) ;
C ,
w i t h
m e t h y s e r g i d e
t w e n t y ) .
T A B L E
1 .
E f f e c t
o f
e l l a g i c
a c i d
A ) , m e p y r a m i n e
B )
a n d
m e t h y s e r g i d e
C ) ,
a l o n e a n d
i n
c o m b i n a t i o n ,
o n
t h e
i n f l a m m a t o r y r e s p o n s e
o f
c a r r a g e e n i n
i n
p a w s
o f
a n a e s t h e t i z e d r a t s
N o .
o f
T r e a t m e n t r a t s
A
B
A+B
A+C
B C
A+B+C
2 9
2 6
1 9
1 9
2 0
1 5
2 0
1 6
1 - 0 h
9 3 - 9 ± 5 * 4
5 5
5 ± 5 - 3
9 3 - 8 ± 5
2
5 0
2 ± 3 - 3
4 7 - 3
± 4 - 2
4 4 - 8
± 4 - 3
5 6 - 1 ±
3 - 2
3 3 - 7 ± 3 - 0
A v e r a g e
i n c r e a s e
i n v o l u m e
± S . E . )
a t
2 - 5 h
3
5
h
45
h
1 0 5
6 ± 4 - 9
539±4-2
1 0 7 - 2 ± 5 - 5
6 2 - 5 ± 3 - 6
4 2 - 4 ± 3 - 1
4 9 - 1 ± 5
8
6 2 - 7 ± 2 - 9
4 6 - 0 ± 4 - 2
1 1 2 - 8 ± 5 - 0
6 4 - 9 ± 4 - 3
1 1 0 - 2 ± 5 - 0
7 4
5 ± + 3
5
5 1 - 5 ± 3 - 7
5 2 1
± 6 - 4
7 4 * 2 ± 4 - 0
4 8 9 ± 3
5
1 1 8 - 8 ± 4 * 4
7 6 - 3 ± 4 t 5
1 1 1 - 0 + 4 - 6
6 9 - 6 ± 2 t 9
6 3 - 6 + 4 - 3
6 0 - 0 ± : 6 - 0
7 4 - 7 ± 5 * 7
5 1 - 9 ± 4 - 2
5 . 5
h
1 2 0 - 7 ± 4 - 5
8 0 - 9 ± 3 - 8
1 0 8 - 1
± 5 2
7 0 A 4 ± 3 - 9
7 5 - 1 ± 4
0
5 4 5 ± 5 6
7 3 - 6 ± 4 - 1
5 4 - 2 ± 5
2
3 9 7
wV
-
8/20/2019 Uji Antiinflamasi Dg Karagen
7/11
3 9 8
P e a r l C r u n k h o r n
a n d
S .
C .
R .
M e a o o c k
T A B L E
2 .
E f f e c t
o f e l l a g i c a c i d
t r e a t m e n t
o n t h e i n c r e a s e i n
v a s c u l a r p e r m e a b i l i t y
c a u s e d b y h i s t a m i n e ,
5 - H T ,
c o m p o u n d 4 8 / 8 0
a n d
b r a d y k i n i n
i n
r a t s k i n
Mean
d i a m e t e r o f l e s i o n s
( m m ± s . E . )
a n d
d y e i n t e n s i t y *
I n f l a m m a t o r y a g e n t
j u g
f r e e
b a s e )
W i t h o u t t r e a t m e n t
A f t e r t r e a t m e n t
5 - H T
0 - 2 1 6 - 0 + 1 * 3 9 ) 1 7 - 6 ± 0 - 7
8 )
0 . 1
1 4
0± 0 5
8 )
1 4 - 8 ± 0 - 2
6 )
0 - 0 5
1 2 - 8 ± 0 - 5
7 )
1 3 - 6 ± 0 - 6
6 )
0 0 2 5 1 1 - 0 ± 0 - 5 6 ) 9 - 8 ± 0 - 7
5 )
H i s t a m i n e
2 - 0 1 3 A 4 ± 0
5 8 )
1 4 - 4 A 0 - 7 8 )
1 - 0
1 1 - 4 ± 0 - 5 7 )
1 1 - 4 ± 0 - 3
7 )
05
9 - 2 + 0 - 3 6 )
9 - 2 ± 0 - 6
6 )
0
2 5
8 - 2 ± 0 - 3
4 )
8 - 0 ± 0 - 3
4 )
C o m p o u n d 4 8 / 8 0
0 . 1
1 6 - 0 ± 0 - 3
8 )
1 6 - 0 ± 0 - 8
8 )
0 - 0 2 5
1 4 - 5 ± 0 - 2
6 ) 1 3 - 0 ± 1 - 0
6 )
0
0 0 6 1 3 - 2 ± 0 - 3
5 )
1 0 - 8 ± 1 0
5 )
B r a d y k i n i n
2 - 0
1 4 - 6 ± 0 - 2
8 )
1 5 - 0 ± 0 - 0
8 )
1 . 0 1 3 - 6 ± 0 - 2 6 )
1 3 - 2 ± 0 . 3 6 )
0 - 5
1 2 - 0 ± 0 - 5
4 ) 1 2 - 8 ± 0 t 5
5 )
0 2 5
1 0 - 8 ± 0 - 3
4 )
1 1 - 2 ± 0 - 3
4 )
*
I n t e n s i t y
i n
p a r e n t h e s e s )
i s e x p r e s s e d
i n
a r b i t r a r y
u n i t s
o n a 0 - 1 0 s c a l e .
T A B L E 3 .
E f f e c t
o f
m e t h y s e r g i d e
b i m a l e a t e
o n
t h e i n c r e a s e
i n
v a s c u l a r p e r m e a b i l i t y
c a u s e d b y
b r a d y -
k i n i n ,
h i s t a m i n e a n d 5 - H T
i n r a t
s k i n
Mean
d i a m e t e r o f
l e s i o n s
( m m ± S . E . )
a n d d y e
i n t e n s i t y *
I n f l a m m a t o r y
a g e n t
W i t h o u t
A f t e r
m e t h y s e r g i d e
A f t e r
m e t h y s e r g i d e
j g )
t r e a t m e n t
2 - 5
m g / k g )
5 - 0
m g / k g )
B r a d y k i n i n
2 - 0
1 5 0± 0
3 8 )
1 3 - 8 + 0 i 3 8 )
1 4 - 2 ± 0 - 5
8 )
1 - 0
1 2 - 6 ± 0 - 3
7 )
1 3 - 3 ± 0 - 5 7 )
1 2
2 ± 0 0 7
7 )
0
5
1 1 - 8 + 0 - 2
6 )
1 2
3 ±0 3 6 ) 1 1 - 4 ± 0 - 5
7 )
0 2 5 1 0 - 8 + 0 - 3
5 )
1 0 5 +0 3
6 )
1 0 - 2 + 0 - 3
5 )
H i s t a m i n e
2 - 0
1 3 - 0 ± 0 3
8 )
1 2
2±0
7
8 )
1 2 - 4 ± 0 - 8
7 )
1 . 0
1 1 - 6 ± 0 - 3
7 )
1 1 - 6 ± 0 - 5
6 )
1 0 - 8 + 0 - 5 7 )
0 - 5
1 0 - 2 ± 0 - 5
6 ) 1 0 - 8 ± 0 - 8
5 )
7 T 4 ± 0 - 2 5 )
0 2 5
6 - 8 ± 0 - 5
4 ) 7 - 8 ± 0 - 2 3
6 - 4 ± 0 - 6 4 )
5 - H T
0 - 2 1 8 - 4 ± 0 - 2 8 )
0 0
0 )
0 . 0
0 )
*
I n t e n s i t y
i n
p a r e n t h e s e s )
i s
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0 - 1 0
s c a l e .
T A B L E 4 .
E f f e c t
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m a l e a t e
2 - 5
m g / k g ;
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i n c r e a s e
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v a s c u l a r p e r m e a b i l i t y
c a u s e d
b y
b r a d y k i n i n
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d i a m e t e r o f l e s i o n s
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i n t e n s i t y *
I n f l a m m a t o r y
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W i t h o u t t r e a t m e n t
A f t e r m e p y r a m i n e
B r a d y k i n i n
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1 3 - 8 + 0 - 3
8 )
1 0
1 3 - 6 ± 0 - 2
6
1 2 - 5 ± 0 - 3
6 )
0 - 5
1 2 - 0 ± 0 - 5
4 )
1 1 - 5 ± 0 - 3
5 )
0 - 2 5
1 0 - 8 ± 0 - 3
4 )
9 - 8 ± 0 - 5
4 )
H i s t a m i n e
2 - 0
1 3 - 0 ± 0 - 3
8 )
00
0 )
*
I n t e n s i t y
i n
p a r e n t h e s e s )
i s e x p r e s s e d
i n
a r b i t r a r y
u n i t s o n
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0 - 1 0
s c a l e .
-
8/20/2019 Uji Antiinflamasi Dg Karagen
8/11
I n f l a m m a t o r y r e s p o n s e t o
c a r r a g e e n i n
K i n i n o g e n
c o n c e n t r a t i o n s
K i n i n o g e n
c o n c e n t r a t i o n s
o f
b l o o d
w e r e
m e a s u r e d e i t h e r
0
5
h
o r 2 5 h a f t e r
t h e
f i n a l
i n j e c t i o n o f e l l a g i c
a c i d
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s a l i v a .
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g i v e n
i n
T a b l e
5
i t w a s c o n c l u d e d
t h a t a ) b o t h e l l a g i c
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3
x
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5
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0 - 2
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3
x
0 5
m l ) c a u s e d a
p a r t i a l
d e p l e t i o n
o f
k i n i n o g e n
c o n c e n t r a t i o n s ,
b ) t h e r e
w a s n o
s i g -
n i f i c a n t
d i f f e r e n c e b e t w e e n
t h e e f f e c t s o f e i t h e r
t r e a t m e n t , c t h e
e f f e c t s
o f e a c h w e r e
n o t a d d i t i v e
a n d d i d n o t l e a d t o a t o t a l
d e p l e t i o n
o f b l o o d
k i n i n o g e n
a n d d )
k i n i n o g e n c o n c e n t r a t i o n s h a d
n o t b e g u n
t o
r e c o v e r
2 - 5 h
l a t e r . I n j e c t i o n
o f
t w i c e
t h e
q u a n t i t y
o f
e l l a g i c
a c i d
i n t o
t w o a n i m a l s
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k i n i n o g e n
c o n c e n t r a t i o n s
3 0
m i n l a t e r .
C o m p l e m e n t
c o n c e n t r a t i o n s
T h e e f f e c t s o n
t o t a l
h a e m o l y t i c c o m p l e m e n t c o n c e n t r a t i o n s
o f
i n t r a v e n o u s
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t i o n s
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e l l a g i c
a c i d
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s a l i v a ,
o r
o f s u b c u t a n e o u s
i n j e c t i o n s
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o f
1
c a r r a g e e n i n
0
1
m l )
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i l l u s t r a t e d
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F i g .
4 .
E l l a g i c
a c i d
t r e a t m e n t
c a u s e d
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t e m p o r a r y
i n c r e a s e
i n
c o m p l e m e n t
c o n c e n t r a t i o n s w h i c h
w a s
s i g n i f i c a n t a t
3 0
m i n u t e s .
O n
t h e
o t h e r
h a n d ,
s a l i v a c a u s e d
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20
d e c r e a s e i n
c o m p l e m e n t c o n -
c e n t r a t i o n s
w h i c h
h a d
o n l y
r e c o v e r e d
b y 5
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2 - 5
h o u r s .
L o c a l
a c t i v a t i o n o f
c o m p l e m e n t
i n
t h e
r a t
p a w
b y
c a r r a g e e n i n ,
i f
i t
o c c u r r e d ,
d i d n o t
l e a d t o
a d e c r e a s e
i n
s e r u m
c o m p l e m e n t
c o n c e n t r a t i o n s .
I n
f a c t
a
t e m p o r a r y
i n c r e a s e
w a s
o b s e r v e d
T A B L E
5 .
R e s i d u a l
k i n i n o g e n
c o n c e n t r a t i o n s
o f
r a t
p l a s m a a f t e r i n j e c t i o n
o f e l l a g i c
a c i d a n d / o r
r a t
s a l i v a
T i m e o f
P l a s m a
k i n i n o g e n
l e v e l s
T r e a t m e n t
s a m p l i n g
h )
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0
1 0
3 - 5 1 ±
0 - 2 3
E l l a g i c
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0
5 5
1 - 0 5 O 0 - 0 5
E l l a g i c
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2
5
5
1 - 2 0 ± + 0 0 8
S a l i v a
0
5
7
1 - 3 5 ± 0 - 1 2
S a l i v a
2 5
7
1 - 3 7 ± 0 - 2 4
E l l a g i c a c i d , s a l i v a
0 5
7
1 - 2 3 ± 0 - 2 7
E l l a g i c
a c i d ,
s a l i v a
2
5 4
1 - 1 3 ± 0 - 3 5
3 4 0 _
l
2 6 0
1 4 0
0
2
3
4
5
6
T i m e
h )
F I G .
4 .
C o n c e n t r a t i o n s
o f serum
c o m p l e m e n t
a f t e r
s u b c u t a n e o u s
i n j e c t i o n
i n t o
t h e
p a w
o f
c a r r a g e e n i n
( - ) ,
i n t r a v e n o u s
i n j e c t i o n
o f
e l l a g i c
a c i d
- - - )
a n d i n t r a v e n o u s
i n j e c t i o n o f
r a t s a l i v a
(
3 9 9
-
8/20/2019 Uji Antiinflamasi Dg Karagen
9/11
P e a r l
C r u n k h o r n a n d S .
C .
R .
M e a c o c k
w h i c h
w a s s i g n i f i c a n t
a t
2
h ; v a l u e s a t
4 h a n d 6 h w e r e
n o t s i g n i f i c a n t l y d i f f e r e n t
f r o m c o n c e n t r a t i o n s
b e f o r e c a r r a g e e n i n
i n j e c t i o n .
D i s c u s s i o n
G a u t v i k
R u g s t a d
1 9 6 7 )
f o u n d
t h a t
i n t r a v e n o u s
i n j e c t i o n
o f
e l l a g i c
a c i d
i n r a t s
l e d t o
t h e e l i m i n a t i o n
o f
k i n i n o g e n
s u b s t r a t e
1 J a c o b s e n ,
1 9 6 6 ) f r o m
t h e
c i r c u l a t i o n
f o r a t
l e a s t 6 h o u r s .
T h e y r e p o r t e d
t h a t b l o o d p r e s s u r e
r e t u r n e d t o
n o r m a l w i t h i n
1 0 m i n
a n d t h a t
e l l a g i c
a c i d
i t s e l f c o u l d
n o l o n g e r b e
d e t e c t e d
i n t h e
c i r c u l a t i o n
a f t e r
1 5
m i n u t e s .
T r e a t m e n t w i t h
e l l a g i c a c i d
w a s
t h e r e f o r e
e x p e c t e d
t o
p r o v i d e a
p e r i o d
o f
a l m o s t 6
h i n
w h i c h t o a s s e s s t h e c o n t r i b u t i o n
o f
k i n i n s
t o t h e
i n f l a m -
m a t o r y
r e a c t i o n c a u s e d
b y a n i n j e c t i o n
o f c a r r a g e e n i n . F u r t h e r m o r e ,
t h i s
p e r i o d
o f
k i n i n o g e n
d e p l e t i o n
c o v e r e d
t h e d u r a t i o n
o f t h e
t e s t s
m o s t w i d e l y
u s e d t o
a s s e s s
t h e
a c t i v i t y o f p o t e n t i a l
a n t i - i n f l a m m a t o r y
d r u g s .
Oedema f o r m a t i o n
i n
r a t s
d e p l e t e d
o f
k i n i n o g e n
b y
e l l a g i c a c i d ,
a n d
a l s o
b y
r a t
s a l i v a ,
w a s c o n s i d e r a b l y
l e s s t h a n
t h a t f o u n d i n
u n t r e a t e d r a t s
F i g .
2 .
T h e s e
r e s u l t s
s u p p o r t
t h e c o n c l u s i o n s
o f D i R o s a
S o r r e n t i n o
( 1 9 6 8 ;
1 9 7 0 ) t h a t k i n i n s
r e l e a s e d d u r i n g
t h e
i n f l a m m a t o r y
r e a c t i o n h a d
a n i m p o r t a n t
r o l e i n o e d e m a f o r m a -
t i o n .
T h e
l a r g e r
e f f e c t
o f
s a l i v a
w a s
a t
f i r s t
a t t r i b u t e d t o g l a n d u l a r
k a l l i k r e i n
w h i c h
w o u l d
a t t a c k
k i n i n o g e n
s u b s t r a t e
2 ,
s i n c e
G a u t v i k
R u g s t a d 1 9 6 7 )
s t a t e t h a t t h i s
s u b s t r a t e i s
n o t a f f e c t e d b y
e l l a g i c
a c i d
t r e a t m e n t . H o w e v e r ,
m e a s u r e m e n t
o f
p l a s m a
k i n i n o g e n c o n c e n t r a t i o n s
a f t e r
t r e a t m e n t i n v i v o
w i t h
e l l a g i c
a c i d
o r s a l i v a ( T a b l e
5 )
s h o w e d
t h a t e i t h e r
o f
t h e s e
r e a g e n t s
d e p l e t e d
t h e
k i n i n o g e n b y
a n
a m o u n t
e q u i v a l e n t
t o m o r e t h a n
1 0
t i m e s
t h e
q u a n t i t y
o f
s u b s t r a t e
1
2 0 0
n g b r a d y k i n i n
e q . / m l
p l a s m a )
m e a s u r e d
b y
G a u t v i k a n d
R u g s t a d .
T h e s e
r e s u l t s
c l e a r l y
i n d i c a t e
t h a t
t r e a t m e n t
i n v i v o
w i t h e l l a g i c
a c i d
c a u s e s
a
l o s s
o f
m o r e
t h a n
s u b s t r a t e
1 .
P r o b a b l y
t h e c o n c e n t r a t i o n s
o f
s u b s t r a t e
2
w e r e
a l s o d i m i n i s h e d
s i n c e
t h e
e f f e c t s
o f
e l l a g i c
a c i d a n d
s a l i v a
w e r e
n o t
a d d i t i v e ,
a c o n c l u s i o n w h i c h
i s
c o n t r a r y
t o
t h a t
o f
G a u t v i k a n d R u g s t a d .
I t i s
i n t e r e s t i n g
t h a t a f t e r
a l l
o f
t h e s e
t r e a t m e n t s
a c o n -
s i d e r a b l e
a m o u n t
o f
k i n i n o g e n r e m a i n e d ,
w h i c h w a s
p r e s u m a b l y
n e i t h e r s u b s t r a t e
1
n o r 2 .
I n
o t h e r
s t u d i e s
( M a r s d e n ,
C r u n k h o r n
M e a c o c k , u n p u b l i s h e d r e s u l t s )
i t h a s
b e e n
s h o w n
t h a t
m a l e o p i m a r i c
a c i d ,
a n
i n h i b i t o r o f
c o m p l e m e n t
a c t i v a t i o n
G l o v s k y ,
B e c k e r
H a l b r o o k ,
1 9 6 8 ) ,
c a n
s u p p r e s s
t h e
c a r r a g e e n i n
r e a c t i o n .
C a r r a g e e n i n
a c t i v a t e s
t h e
c o m p l e m e n t
s y s t e m
D a v i e s ,
1 9 6 5
B o r s o s ,
R a p p
C r i s l e r ,
1 9 6 5 ;
W i l l o u g h b y ,
C o o t e
T u r k , 1 9 6 9 )
a n d
t h e r e f o r e
a
r e d u c t i o n
o f
c o m p l e m e n t
c o n -
c e n t r a t i o n s
b y
e l l a g i c
a c i d o r
s a l i v a ,
i f
i t
o c c u r r e d ,
m i g h t
b e
e x p e c t e d
t o
h a v e
a n
a n t i - i n f l a m m a t o r y
e f f e c t .
M e a s u r e m e n t s
o f
s e r u m
c o n c e n t r a t i o n s
o f
c o m p l e m e n t
F i g .
4 )
d i d
n o t
i n d i c a t e
c o m p l e m e n t
a c t i v a t i o n b y
t h e
s u b c u t a n e o u s
i n j e c t i o n
o f
c a r r a g e e n i n ,
b u t
t h i s
c a n n o t
b e t a k e n
a s
e v i d e n c e
t h a t
c o m p l e m e n t
a c t i v a t i o n
d i d
n o t
o c c u r
l o c a l l y
a t
t h e s i t e
o f
i n f l a m m a t i o n .
E l l a g i c
a c i d
a p p e a r e d
t o c a u s e
a
t e m p o r a r y
i n c r e a s e
i n
c o m p l e m e n t
c o n c e n t r a t i o n s
a n d
t h e r e f o r e
i t s
a n t i - i n f l a m m a t o r y
a c t i v i t y
c o u l d
n o t b e
a t t r i b u t e d
t o t h e s e e f f e c t s .
R a t s a l i v a l o w e r e d
c o m p l e m e n t
c o n c e n t r a t i o n s
b y
a p p r o x i m a t e l y
2 0
a n d
t h i s d i f f e r e n c e
i n b e h a v i o u r
o f
e l l a g i c
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a n d
s a l i v a
may
h a v e
c o n t r i b u t e d
t o
t h e i r
d i f f e r i n g
a n t i - i n f l a m m a t o r y
a c t i v i t y .
I t
s t i l l
r e m a i n s
t o b e
e x p l a i n e d
how t r e a t m e n t
w i t h
b o t h
e l l a g i c
a c i d
a n d
s a l i v a
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m o r e e f f e c t i v e
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t h e
f i r s t
3 h
t h a n
t r e a t m e n t
w i t h s a l i v a a l o n e .
T h e
a n i m a l s
r e m a i n e d
e q u a l l y
a l e r t
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a p p a r e n t l y
n o r m a l
a f t e r
a l l o f t h e
t r e a t m e n t s ,
b u t i t
i s
4 0 0
-
8/20/2019 Uji Antiinflamasi Dg Karagen
10/11
I n f l a m m a t o r y
r e s p o n s e t o
c a r r a g e e n i n
4 0 1
p o s s i b l e t h a t
d u e
t o
e f f e c t s
o t h e r
t h a n t h o s e
o n t h e k i n i n
s y s t e m ,
t h e c o m b i n e d
s u b s t a n c e s
p r o d u c e d a
g r e a t e r
c a r d i o v a s c u l a r
r e s p o n s e
t h a n
e i t h e r
g i v e n
s i n g l y .
M e t h y s e r g i d e h a d m a r k e d
a n t i - i n f l a m m a t o r y
a c t i v i t y
F i g .
2
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T a b l e
1 ,
f r o m
w h i c h
i t w a s c o n c l u d e d
t h a t
5-HT
c o n t r i b u t e d
s u b s t a n t i a l l y
t o o e d e m a
f o r m a t i o n
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t h e
f i r s t
f e w
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T h e s e
f i n d i n g s
a r e
c o n t r a r y
t o
t h o s e
r e p o r t e d
b y
W i n t e r
1 9 6 5 ) who
u s e d
c y p r o h e p t a d i n e
a n d
m e t h d i l a z i n e ,
b o t h
o f w h i c h
a n t a g o n i z e
5 - H T ,
b u t
a r e
i n a g r e e m e n t
w i t h
t h e r e s u l t s
o f
F e k e t e
K u r t i
1 9 7 0 )
who u s e d
m e t h y -
s e r g i d e ,
a n d t h e
r e s u l t s o f
B h a l l a
T a n g r i 1 9 7 0 )
who
u s e d
b r o m o l y s e r g i c
a c i d .
E x p e r i m e n t s
i n
a d r e n a l e c t o m i z e d
a n i m a l s F i g .
3 )
s h o w e d
t h a t
t h e
a n t i - i n f l a m m a t o r y
a c t i v i t y
o f
e l l a g i c
a c i d
a n d
m e t h y s e r g i d e c a n n o t
b e
a t t r i b u t e d t o
a d r e n a l
s t i m u l a t i o n .
M e p y r a m i n e
a l o n e h a d
n o e f f e c t
o n
o e d e m a f o r m a t i o n
T a b l e 1 , b u t i n
c o m -
b i n a t i o n
w i t h
e l l a g i c a c i d
t r e a t m e n t ,
w i t h o r w i t h o u t
m e t h y s e r g i d e ,
i t
r e v e a l e d
t h a t
h i s t a m i n e p l a y e d a
m i n o r
r o l e i n
o e d e m a f o r m a t i o n
d u r i n g
t h e f i r s t
3
h o u r s .
I t
w a s
i m p o r t a n t t o
e s t a b l i s h t h e
d e g r e e
o f
s p e c i f i c
a c t i v i t y
o f t h e
v a r i o u s
t r e a t -
m e n t s
g i v e n
t o
t h e
r a t s
b e f o r e
t h e
i n d u c t i o n
o f
c a r r a g e e n i n
i n f l a m m a t i o n .
V a s c u l a r
p e r m e a b i l i t y
s t u d i e s
i n d i c a t e d t h a t
e l l a g i c
a c i d
t r e a t m e n t d i d
n o t
i n t e r f e r e
w i t h
t h e
n o r m a l
r e s p o n s e s
i n
s k i n
o f
h i s t a m i n e , 5 - H T , b r a d y k i n i n
o r
c o m p o u n d
4 8 / 8 0 T a b l e
2 .
A l s o ,
m e p y r a m i n e a n d
m e t h y s e r g i d e ,
a t
t h e
d o s e s
u s e d i n
t h e
c a r r a g e e n i n
e x p e r i m e n t s ,
c o m p l e t e l y
a n t a g o n i z e d
h i s t a m i n e
a n d
5 - H T ,
r e s p e c t i v e l y ,
a n d
d i d
n o t
a f f e c t
t h e
s k i n
r e s p o n s e s
o f
b r a d y k i n i n
T a b l e s
3
a n d
4 .
A f t e r a l l o w i n g
f o r
t h e
c o n t r i b u t i o n s
o f
k i n i n s ,
5 - H T ,
h i s t a m i n e a n d
a c t i v a t e d
c o m p l e m e n t t h e r e r e m a i n s
a
c o n s i d e r a b l e
i n f l a m m a t o r y
r e a c t i o n
n o t a c c o u n t e d
f o r ,
e s p e c i a l l y
a f t e r t h e
f i r s t
4
h o u r s . T h e
d i r e c t
e f f e c t s
o f
t h e
m e d i a t o r s
s t u d i e d a r e
l i k e l y
t o
b e
l e s s
i m p o r t a n t
a f t e r
t h e
f i r s t 3 - 4
h , w h e n
l e u c o c y t e s
e m i g r a t e i n t o t h e
t i s s u e
D .
A .
W i l l o u g h b y ,
p e r s o n a l
c o m m u n i c a t i o n ) .
I t
i s
p o s s i b l e
t h a t t h e s e
c e l l s
r e l e a s e
p r o t e o l y t i c
e n z y m e s
a n d a l s o
i n i t i a t e t h e
l o c a l
g e n e r a t i o n o f
p r o s t a g l a n d i n s
W i l l i s , 1 9 6 9 ;
A n d e r s o n ,
B r o c k l e h u r s t
W i l l i s , 1 9 7 1 ) .
T h e y
m i g h t
t h u s
m a i n t a i n
t h e
i n c r e a s e d
v a s c u l a r
p e r m e a b i l i t y
a n d
c o u l d
c a u s e
d a m a g e
t o
c o n n e c t i v e
t i s s u e
w i t h
t h e
r e l e a s e o r f o r m a t i o n o f
a d d i t i o n a l
u n k n o w n
m e d i a t o r s .
We
w i s h t o
a c k n o w l e d g e
t h e
h e l p f u l
a d v i c e a n d
c r i t i c i s m
o f
D r .
W. E .
B r o c k l e h u r s t . Com-
p o u n d
4 8 / 8 0
w a s
g e n e r o u s l y s u p p l i e d b y
t h e
W e l l c o m e
R e s e a r c h
L a b o r a t o r i e s ,
B e c k e n h a m .
REFERENCES
A N D E R S O N ,
A .
J . ,
B R O C K L E H U R S T ,
W. E .
W I L L I S ,
A . L .
1 9 7 1 ) . E v i d e n c e f o r
t h e
r o l e
o f
l y s o s o m e s
i n
t h e
f o r m a t i o n o f
p r o s t a g l a n d i n s
d u r i n g c a r r a g e e n i n - i n d u c e d
i n f l a m m a t i o n
i n
t h e
r a t .
P h a r m a c .R e s .
C o m m . ,
i n
t h e
P r e s s .
B E C K E R , E .
L . , M O T A ,
I .
WONG,
D .
1 9 6 8 ) .
I n h i b i t i o n
b y
a n t i h i s t a m i n e s
o f
t h e
v a s c u l a r
p e r m e -
a b i l i t y
i n c r e a s e i n d u c e d
b y
b r a d y k i n i n .
B r .
J .
P h a r m a c . ,
3 4 ,
3 3 0 - 3 3 6 .
B H A L L A ,
T . N .
T A N G R i ,
K .
K.
1 9 7 0 ) .
T h e t i m e
c o u r s e o f
t h e
c a r r a g e e n a n - i n d u c e d
o e d e m a
o f
t h e
paw o f
t h e
r a t .
J .
P h a r m .
P h a r m a c . ,
2 2 ,
7 2 1 .
B O R S O S ,
T . ,
R A P P ,
H . J .
C R I S L E R ,
C .
1 9 6 5 ) .
T h e
i n t e r a c t i o n
b e t w e e n
c a r r a g e e n a n
a n d t h e
f i r s t
c o m p o n e n t
o f
c o m p l e m e n t .
J .
I m m u n o l . ,
9 4 ,
6 6 2 - 6 6 6 .
B R O C K L E H U R S T , W.
E .
Z E r r u N ,
I .
J .
1 9 6 7 ) .
D e t e r m i n a t i o n o f
p l a s m a
k i n i n
a n d
k i n i n o g e n l e v e l s
i n
m a n .
J .
P h y s i o l . ,
L o n d . , 1 9 1 ,
4 1 7 - 4 2 6 .
D A V I E S ,
G . E .
1 9 6 5 ) .
I n h i b i t i o n o f
c o m p l e m e n t
b y
c a r r a g e e n i n .
Mode
o f
a c t i o n ,
e f f e c t o n
a l l e r g i c
r e a c t i o n s
a n d o n
c o m p l e m e n t
o f
v a r i o u s
s p e c i e s .
I m m u n o l o g y ,
8 ,
2 9 1 - 3 0 3 .
D i
R O S A ,
M.
S O R R E N T I N O ,
L .
1 9 6 8 ) .
T h e
m e c h a n i s m o f
t h e
i n f l a m m a t o r y e f f e c t
o f
c a r r a g e e n i n .
E u r .
J .
P h a r m a c . ,
4 ,
3 4 0 - 3 4 2 .
D i
R o S A ,
M.
S O R R E N T I N O ,
L .
1 9 7 0 ) .
Some
p h a r m a c o d y n a m i c
p r o p e r t i e s
o f
c a r r a g e e n i n
i n
t h e
r a t .
B r . J .
P h a r m a c . , 3 8 ,
2 1 4 - 2 2 0 .
F E K E T E ,
M .
K U R T I ,
A .
M.
1 9 7 0 ) .
E f f e c t o f
m o n o a m i n e
o x i d a s e
i n h i b i t o r s o n
r a t paw
o e d e m a
i n d u c e d
b y
v a r i o u s
p h l o g i s t i c
a g e n t s .
E u r . J .
P h a r m a c . ,
1 0 ,
2 6 8 - 2 7 6 .
G L O V S K Y ,
M.
M . ,
B E C K E R ,
E .
L .
H A L B R O O K ,
N .
J .
1 9 6 8 ) . I n h i b i t i o n
o f
g u i n e a
p i g
c o m p l e m e n t
b y
m a l e o p i m a r i c
a c i d a n d
o t h e r
d e r i v a t i v e s
o f
l e v o p i m a r i c
a c i d .
J .
I m m u n o l . ,
1 0 0 ,
9 7 9 - 9 9 0 .
-
8/20/2019 Uji Antiinflamasi Dg Karagen
11/11
4 0 2
P e a r l C r u n k h o r n
a n d
S . C . R .
M e a c o c k
G A U T V I K ,
K .
M.
R U G S T A D ,
H .
E .
1 9 6 7 ) .
K i n i n f o r m a t i o n a n d
k i n i n o g e n d e p l e t i o n
i n
r a t s
a f t e r
i n t r a v e n o u s i n j e c t i o n
o f
e l l a g i c
a c i d .
B r . J . P h a r m a c . C h e m o t h e r . , 3 1 ,
3 9 0 - 4 0 0 .
J A C O B S E N ,
S .
1 9 6 6 ) .
S u b s t r a t e s
f o r p l a s m a
k i n i n - f o r m i n g e n z y m e s
i n r a t
a n d
g u i n e a
p i g
p l a s m a .
B r . J .
P h a r m a c .
C h e m o t h e r . ,
2 8 ,
6 4 - 7 2 .
R O S E N B E R G ,
L .
T .
T A C H I B A N A ,
D . K .
1 9 6 2 ) .
A c t i v i t y
o f
m o u s e c o m p l e m e n t . J .
I m m u n o l . ,
8 9 ,
8 6 1 - 8 6 7 .
W I L L I S ,
A .
L . 1 9 6 9 ) .
P a r a l l e l
a s s a y o f
p r o s t a g l a n d i n - l i k e
a c t i v i t y i n
r a t
i n f l a m m a t o r y
e x u d a t e
b y
means o f
c a s c a d e
s u p e r f u s i o n .
J . P h a r m .
P h a r m a c . ,
2 1 ,
1 2 6 - 1 2 8 .
W I L L O U G H B Y ,
D .
A . , C O O T E ,
E . T U R K ,
J . L .
1 9 6 9 ) .
C o m p l e m e n t i n
a c u t e
i n f l a m m a t i o n .
J .
P a t h .
9 7 ,
2 9 5 - 3 0 5 .
W I N T E R ,
C .
A . ,
R I S L E Y ,
E . A .
N u s s ,
G . W.
1 9 6 2 ) .
C a r r a g e e n i n - i n d u c e d
o e d e m a i n h i n d paw o f
t h e
r a t a s
a n
a s s a y
f o r
a n t i - i n f l a m m a t o r y
d r u g s .
P r o c .
S o c .
e x p .
B i o l .
M e d . ,
1 1 1 , 5 4 4 - 5 4 7 .
W I N T E R ,
C . A . ,
R I S L E Y ,
E . A . N u s s , G .
W.
1 9 6 3 ) . A n t i - i n f l a m m a t o r y
a n d a n t i p y r e t i c a c t i v i t i e s
o f
i n d o m e t h a c i n , l p - c h l o r o b e n z o y l ) - 5 - m e t h o x y - 2 - m e t h y l - i n d o l e - 3 - a c e t i c
a c i d .
J . P h a r m a c . ,
1 4 1 ,
3 6 9 - 3 7 6 .
W I N T E R ,
C . A .
1 9 6 5 ) . A n t i - i n f l a m m a t o r y
t e s t i n g
m e t h o d s :
c o m p a r a t i v e
e v a l u a t i o n o f
i n d o m e t h a c i n
a n d o t h e r
a g e n t s .
I n :
N o n - s t e r o i d a l
A n t i - i n f l a m m a t o r y
D r u g s ,
e d .
G a r a t t i n i , S .
D u k e s ,
M . N . G . ,
p p . 1 9 0 - 2 0 2 .
A m s t e r d a m : E x c e p t a
M e d i c a
F o u n d a t i o n .
R e c e i v e d
M a r c h 1 0 , 1 9 7 1 )