pendahuluan - penutup pemeriksaan air

5/25/2018 Pendahuluan - Penutup Pemeriksaan Air

1/20

BAB I

PENDAHULUAN

A. Tujuan Praktikum

1. Mengetahui cara pemeriksaan air

2. Mengetahui jenis pemeriksaaan air semi kuantitatif dengan metode

MPN (Most Probable Number)

3. Mengetahui langkah-langkah pemeriksaan air dengan metode .1.1

!. Mengetahui cara membaca hasil pemeriksaan air dengan metode .1.1. Mengetahui tingkat pencemaran total koliform

B. Manfaat Praktikum

1. Mengetahui perbedaan cara pemeriksaan air

2. "apat mengaplikasikan cara pemeriksaan air dengan metode MPN

(Most Probable Number)

3. "apat melaksanakan pemeriksaan air dengan metode .1.1

!. "apat membaca hasil pemeriksaan air dengan metode .1.1. "apat mengetahui sampel tercemar koliform atau tidak

1


2/20

BAB II

TINJAUAN PUSTAKA

A. Pemeriksaan Air

Pemeriksaan air secara mikrobiologis sangat penting dan dapat

dilakukan terhadap semua jenis air #ang ada$ terutama dilakukan untuk

menentukan standar kualitas air. Mengingat bah%a air merupakan sumber

kehidupan #ang utama bagi semua makhluk hidup. Pencemar biologis #ang

mungkin terdapat dalam air$ minuman atau makanan$ terutama adalah

mikroorganisme pen#ebab pen#akit (patogen)$ penghasil racun atau #ang

dikenal sebagai pencemar. Pemeriksaan air secara mikrobiologis baik

secara kualitatif maupun secara kuantitatif dapat dipakai sebagai pengukur

derajat pencemaran. &elain adan#a mikroorganisme dalam air$ juga adan#a

bahan organic perlu mendapat perhatian sebab jumlah bahan organik #ang

mencemari air sangat mempengaruhi kesuburan pertumbuhan

mikroorganisme.

'akteri golongan coliform din#atakan sebagai bakteri indikator

pencemaran air. ehadirann#a dalam air terutama air sumber M sangat

tidak diharapkan. "alam pemeriksaan bakteri golongan coliform ada dua

macam$ #aitu bakteri golongan coliform non fekal dan bakteri coliform fekal.

oliform non fekal berasal dari he%an atau tanaman #ang sudah mati$

misaln#a Enterobacter aerogenes. &edangkan coliform fekal berasal dari

kotoran manusia dan he%an$ misaln#a Escherichia coli. *ntuk mengetahui

jumlah coliform dalam suatu sampel dapat digunakan metode +umlah

perkiraan terdekat (+P,) bakteri coliform.

Prinsip dari metode ini adalah fermentasi laktosa selama 2! jam oleh

bakteri coliform #ang akan menghasilkan asam dan gas #ang tertangkap

oleh tabung "urham dalam tabung uji. 'akteri coliform memilki kemampuan

menguraikan laktosa sebagai sumber karbonsedangkan kelompok mikroba

usus #ang lain tidak. &ebagai indikator adan#a proses penguraian laktosa

menjadi asam$ maka ke dalam medium ditambahkan indikator bromcressol

purple ('cp) #ang ber%arna ungu dalam keadaan netral dan ber%arna

2


3/20

kuning dalam suasana asam. *ji kualitatif coliform secara lengkap terdiri

dari tiga tahap$ #aitu uji penduga$ uji penguat$ dan uji lengkap. asil

pengujian uji lengkap$ selain membuktikan uji pertama juga dapat

menentukan jenis bakteri coliform #ang terdapat dalam sampel.1

B. Pemeriksaan Air dengan Metde MPN !Mst Pr"a"#e Num"er$

Most Probable Number dalam bidang kesehatan mas#arakat dari

mikrobiologi pangan$ dipergunakan secara luas untuk menghitung jumlah

bakteri #ang ada dalam bahan pangan. Media ini ban#ak digunakan untuk

menghitung bakteri patogenik dalam jumlah sedikit #ang terdapat dalambahan pangan. Metoda ini berdasarkan atas pengenceran. pabila suatu

larutan #ang mengandung sel-sel mikroorganisme diencerkan terus-

menerus$ akhirn#a akan diperoleh suatu larutan dimana tidak dijumpai sel

lagi #aitu dikatakan steril.2

Metode MPN digunakan medium cair di dalam tabung reaksi$ dimana

perhitungan dilakukan berdasarkan pada jumlah tabung #ang positif #aitu

#ang ditumbuhi oleh jasad renik setelah inkubasi pada suhu dan %aktu

tertentu. Pengamatan tabung #ang positif dapat dilihat dengan mengamatitimbuln#a kekeruhan$ atau timbuln#a gas di dalam tabung kecil (tabung

"urham) #ang diletakkan pada posisi terbalik$ #aitu untuk jasad renik

pembentukan gas. *ntuk setiap pengenceran pada umumn#a digunakan

tiga atau lima seri tabung. /ebih ban#ak tabung #ang digunakan

menunjukkan ketelitian #ang lebih tinggi$ tetapi alat gelas #ang digunakan

juga lebih ban#ak.3

euntungan dari metode MPN ini adalah 2 0

1. "apat dibuat sangat peka dengan penggunaan olume inokulum contoh

#ang lebih besar dari 1$ m/tabung.

2. 'ahan - bahan dapat dipersiapkan untuk tugas lapangan.

3. Media pertumbuhan selektif dapat digunakan untuk menghitung jenis

mikroorganisme #ang diharapkan di antara jenis-jenis lainn#a #ang ada

dalam bahan pangan tersebut.

3


4/20

erugiann#a adalah dibutuhkann#a ban#ak ulangan untuk diperoleh

hasil #ang teliti dan sehubungan dengan hal tersebut ban#ak bia#a dan

%aktu #ang dibutuhkan untuk persiapann#a.2

4ambar 1. Metode MPN (Most Probable Number)

&umber 0 google.com

%. Pemeriksaan Air dengan MPN !Mst Pr"a"#e Num"er$ Metde &.'.'

*ji kualitatif koliform secara lengkap terdiri dari 3 tahap$ #aitu uji dugaan$ uji

penetapan dan uji pelengkap.!Me!tode pengujian #ang digunakan adalah

metode MPN (Most Probable Number) atau +umlah Perkiraan ,erbatas

(+P,).

&alah satu metode MPN (Most Probable Number) #ang ada dalah dengan

metode 1 1$ #aitu metode MPN #ag menggunakan 5 tabung reaksi

dengan ketentuan 0

1. tabung reaksi diisi /' 6 durham dengan 1 cc sampel

2. 1 tabung reaksi diisi /' 6 duham dengan 1 cc sampel

3. 1 tabung reaksi diisi /' 6 duham dengan $1 cc sampel

4


5/20

D. Bakteri K#ifrm

oliform merupakan suatu grup bakteri #ang digunakan sebagai

indikator adan#a polusi kotoran dan kondisi #ang tidak baik terhadap air$

makanan$ susu dan produk susu. oliform sebagai suatu kelompok

dicirikan sebagai bakteri berbentuk batang$ 4ram negatif$ tidak membentuk

spora$ aerobic dan anaerobic fakultatif #ang memfermentasikan laktosa

dengan menghasilkan asam dan gas dalam %aktu !7 jam pada suhu 3.

dan#a bakteri koliform di dalam makanan atau minuman menunjukkan

kemungkinan adan#a mikroba bersifat enteropatogenik dan atau toksigenik#ang berbaha#a bagi kesehatan. 'akteri koliform dapat dibedakan menjadi

2 grup$ #aitu 0

1. oliform fekal$ misaln#a E.coli#ang bila terdapat di dalam air minum

menunjukkan bah%a air minum itu pernah terkontaminasi feses

manusia dan mungkin dapat mengandung patogen usus.

2. oliform non fekal$ misaln#a Enterobacter aerogenes #ang biasan#a

ditemukan pada he%an atau tanaman-tanaman #ang telah mati.

*ntuk mengetahui jumlah koliform dapat digunakan metode MPN (MostProbable Number). Pemeriksaan kehadiran bakteri coli dari air dilakukan

berdasarkan penggunaan medium kaldu laktosa #ang ditempatkan di dalam

tabung reaksi #ang berisi durham. *ji kualitatif koliform secara lengkap

terdiri atas 3 tahap$ #aitu 0

1. *ji Penduga (Presumptive Test)

*ji pendugaan adalah uji khas bakteri coliformdengan menggunakan

media laktosa$ di mana bakteri mampu menggunakan laktosa sebagai

sumber karbon ditandai dengan terbentukn#a asam dan gas #ang dapat

dideteksi dengan indikator tertentu$ sedangkan untuk mendeteksi

adan#a gas digunakan tabung durham terbalik$ hasil positif #ang

ditandai dengan terbentukn#a asam dan gas.

2. *ji Penguat (Confirmed Test)

asil uji dugaan dilanjutkan dengan uji ketetapan. "ari tabung #ang

positif terbentuk asam dan gas terutama pada masa inkubasi 1 8 2!

jam$ suspense ditanamkan pada media 9osin Meth#len 'iru gar

(9M') secara aseptic dengan menggunakan jarum inokulasi. oloni

5


6/20

bakteri 9.coli tumbuh be%arna merah kehijauan dengan kilat metalik

atau koloni be%arna merah muda dengan lender untuk kelompok

koliform lainn#a.

3. *ji Pelengkap (Completed Test)

"ari koloni #ang be%arna pada uji ketetapan diinokulasikan ke dalam

medium kaldu laktosa dan medium agar miring Nutrient gar (N)

dengan jarum inokulasi secara aseptic. "iinkubasi pada suhu 35

selama 1 8 2! jam. 'ila hasiln#a positif terbentuk asam dan gas padakaldu laktosa$ maka sampel positif mengandung E.coli. "ari media N

dibuat pe%arnaan 4ram di mana E.coli menunjukkan 4ram negatif$

berbentuk batang pendek.

!. *ji :dentifikasi

"engan melakukan reaksi :M;: (:ndole$ Meth#l


7/20

dengan kebutuhan jenis-jenis mikroorganisme #ang bersangkutan. *ntuk

menumbuhkan mikroorganisme #ang kita inginkan$ #ang pertama harus

dilakukan adalah memahami kebutuhan dasarn#a kemudian

memformulasikan suatu medium atau bahan #ang akan digunakan.

'erdasarkan konsistensi ataupun kepadatann#a$ medium terbagi tiga

bagian$ #aitu 0

1. Medium cairbrothli=uid #aitu media #ang tidak mengandung agar$

contohn#a adalah N' (NutrientBroth)$ /' (LactoseBroth).

2. Medium setengah padat (semi solid medium) #aitu media #ang

mengandung agar $3-$!> sehingga menjadi sedikit ken#al$ tidak padat$tidak begitu cair. Media semi solid dibuat dengan tujuan supa#a

pertumbuhan mikroba dapat men#ebar ke seluruh media tetapi tidak

mengalami percampuran sempurna jika tergo#ang. Misaln#a bakteri #ang

tumbuh pada media Nf' (NitrogenfreeBromthymolBlue) semisolid akan

membentuk cincin hijau kebiruan di ba%ah permukaan media$ jika media

ini cair maka cincin ini dapat dengan mudah hancur. &emisolid juga

bertujuan untuk mencegahmenekan difusi oksigen$ misaln#a pada media

Nitrate Broth$ kondisi anaerob atau sedikit oksigen meningkatkanmetabolisme nitrat tetapi bakteri ini juga diharuskan tumbuh merata

diseluruh media.

3. Medium padat (solid medium) #aitu media #ang mengandung agar 1>

sehingga setelah dingin media menjadi padat.

ontoh 0 endo agar$ P"$ Nutrient gar ?

Media La(tse Brt)

/actose broth digunakan sebagai media untuk mendeteksi

kehadiran koliform dalam air$ makanan$ dan produk susu$ sebagai kaldu

pemerka#a (pre-enrichment broth) untuk &almonellae dan dalam

mempelajari fermentasi laktosa oleh bakteri pada umumn#a. Pepton dan

ekstrak beef men#ediakan nutrien esensial untuk memetabolisme bakteri.

/aktosa men#ediakan sumber karbohidrat #ang dapat difermentasi untuk

organisme koliform. Pertumbuhan dengan pembentukan gas adalah

presumptie test untuk koliform. /actose broth dibuat dengan komposisi

$3> ekstrak beef@ $> pepton@ dan $> laktosa.5

7


8/20

4ambar 3. Media /actose 'roth

&umber 0 google.com

*. Air K#am +enang

olam renang adalah suatu konstruksi buatan #ang dirancang untuk diisi

dengan air dan digunkan untuk berenang$ men#elam dan aktiitas air

lainn#a. 'erdasarkan eputusan Menteri Pekerjaan *mum Nomor

!5P,&1AA1 kolam renang dapat dibagi menjadi bebrapa tipe$ #aitu

,ipe $ ,ipe '$ ,ipe dan olam


9/20

,abel 1 ."aftar Pers#aratan ualitas ir olam


10/20

BAB III

MET,DE P+AKTIKUM

A. A#at dan Ba)an

A#at -

1. ertas gambar$ berfungsi sebagai media untuk menggambar preparat

#ang telah dididentifikasi.

2. Pensil %arna$ berfungsi untuk memberikan %arna pada gambar

preparat #ang telah diidentifikasi.

3. /ampu spiritus ('unsen)$ berfungsi untuk mensterilkan saat sampel air

dimasukkan ke dalam tabung reaksi dengan pipet

!. Pipet olume 6 karet pompa$ berfungsi untuk memasukkan sampel air

ke dalam tabung reaksi

. ,abung durham$ berfungsi sebagai indikator positif atau negatif dengan

ditunjukkan adan#a gas atau tidak

?.


11/20

!. &ampel air kolam renang$ berfungsi sebagai sampel #ang akan

dperiksa

11


12/20

B. Skema Kerja Berisikan A#ur Kerja Praktikum

4ambar . &kema erja Praktikum

12

Mulai

5 ,abung reaksi diisi dengan media cair lactose broth dan durham

'ahan dan alat diba%a ke meja steril (laminary air flo)

&ampel diisikan ke tabung reaksi dengan cara di dekatkan pada lampu

'unsen agar tetap steril

tabung reaksi diisi sampel air kolam renang dengan pipet olume 6karet pompa seban#ak 1 cc

1 tabung reaksi diisi sampel air kolam renang dengan pipet olume 6

karet pompa seban#ak 1 cc

1 tabung reaksi diisi sampel air kolam renang dengan pipet olume 6

karet pompa seban#ak $1 cc

Masing-masing tabung reaksi diberi label (1 cc$ 1 cc dan $1 cc)

"iratakan dengan digulung pada kedua telapak tangan kemudian diikatjadi satu

"imasukkan ke incubator selama 2! jam

&elesai

"iamati dan digambar perubahan #ang terjadi


13/20

BAB I

HASIL DAN PEMBAHASAN

A. HASIL

,abel 2. asil Pengamatan

No 'an#ak

sampel

Carna 4elembung asil

1 1 cc tetap ada positif

2 tetap ada positif

3 tetap tidak ada negatif ! tetap tidak ada negatif

tetap tidak ada negatif

? 1 cc tetap tidak ada negatif

5 1 cc tetap tidak ada negatif

,abel 3. :ntrepetasi ,abel Mac-rad# ("aftar MPN Metode .1.1)

Nooliform 'acteria per 1 ml

MPN 8 1 cc 1 8 1 cc $1 8 1 cc

1 2

13


14/20

4ambar?. asil Pengamatan

14

'/ (( ' (( /0' ((


15/20

B. PEMBAHASAN

Pada praktikum pemeriksaan air$ sampel #ang digunakan adalah air

dari kolam renang 4D< +ati "iri. 'erdasarkan pengamatan$ setelah

dilakukan pemeriksaan air dengan MPN (Most Probable Number) metode

1 1 dapat diketahui 0

1. 2 dari tabung reaksi dengan sampel air 1 cc menunjukkan hasil

positif$ ditandai dengan adan#a gas pada tabung durham tetapi tidak

terjadi perubahan %arna. &edangkan 3 tabung reaksi lainn#a

menunjukkan hasil negatif$ ditandai dengan tidak adan#a gas serta

tidak berubah %arna.2. 1 tabung reaksi dengan sampel air 1 cc menunjukkan hasil negatif

dengan tidak terjadi perubahan %arna dan tidak adan#a gas

3. 1 tabung reaksi dengan sampel air $1 cc menunjukkan hasil negatif

dengan tidak terjadi perubahan %arna dan tidak adan#a gas

"ari hasil di atas dapat diitrepetasikan pada tabel Mac-rad# "aftar

MPN (Most Probable Number) Metode 1 1$ didapatkan hasil perhitungan

MPN sebesar bakteri koliform per 1 ml.

'erdasarkan Permenkes Nomor !1? ,ahun 1AA$ s#arat air kolamrenang #ang baik adalah dengan jumlah total koliform per 1 ml. +adi

bisa disimpulkan bila MPN menunjukkan bakteri koliform per 1 ml maka

air kolam renang tersebut sudah tercemar koliform dan tidak memenuhi

s#arat #ang ditetapkan sesuai Permenkes Nomor !1? ,ahun 1AA.

:ndikator positif dan negatif dari pemeriksaan air dengan MPN metode

1 1 ini adalah perubahan %arna menjadi kuning dan atau terdapatn#a gas

pada tabung durham. Perubahan %arna disebabkan karena bakteri koliform

dapat memecah laktosa sehingga menjadi asam sehingga %arna berubah

keruh atau kekuningan.

&edangkan gas #ang terbentuk adalah gas D2 #ang berasal dari

fermentasi laktosa oleh bakteri negatif golongan koliform.A atau

kemungkinan lain gas tersebut berasal dari sel-sel ragi atau mikroorganisme

gram positif lainn#a.5 'akteri non koliform dalam metabolismen#a juga

memproduksi gas1$ maka untuk memastikan keberadaan koliform tersebut

perlu dilakukan uji #ang lebih lanjut seperti uji penguat$ uji pelengkap dan uji

identifikasi.

15


16/20

elompok koliform mencakup bakteri #ang bersifat aerobic dan

anaerobic fakultatif$ batang 4ram negatif dan tidak membentuk spora.

"ipilah menjadi koliform asal tinja dan bukan tinja. ontoh koliform asal tinja

adalah 9.coli $ sedangkan koliform non tinja adalah Enterobacter aerogenes

dan!lebsiella.

oliform adalah sebagai indikator kualitas air dan kehadiran bakteri

patogen lain$ semakin sedikit kandungan koliform maka kualitas airn#a

semakin baik begitu juga sebalikn#a.

16


17/20

BAB

PENUTUP

A. Kesim1u#an

1. Pemeriksaan air dapat dilakukan secara kualitatif dan kuantitatif

2. &alah satu jenis pemeriksaan air secara kualitatif (semi kuantitatif)

adalah dengan MPN (Most Probable Number)

3. Pemeriksaaan air #ang digunakan dalam praktikum adalah denganMPN (Most Probable Number) metode 1 1$ #aitu menggunakan

sampel 1 cc$ 1 sampel 1 cc dan 1 sampel $1 cc

!. 'erdasarkan hasil diketahui bah%a 2 sampel 1 cc positif (ditandai

dengan adan#a gas tanpa perubahan %arna)$ 1 sampel 1 cc negatif dan

1 sampel $1 cc negatif maka dapat diintepretasikan pada tabel Mac

rad# sehingga MPN n#a adalah bakteri koliform per 1 ml

. Perubahan %arna disebabkan kemampuan bakteri koliform untuk

memecah lactose sehingga menjadi asam dan be%arna kuning

sedangkan gas berasal dari D2 #ang dihasilkan pada proses

fermentasi

?. 'akteri koliform menjadi indikator adan#a pencemaran bakteri patogen$

semakin sedikit jumlah bakteri koliform menunjukkan kualitas air #ang

semakin baik

B. Saran

"ari praktikum pemeriksaan air #ang telah dilakukan$ penulis

memberikan saran 0

1. "alam melakukan pemeriksaan air harus dilakukan dengan teliti.

2. "alam melakukan langkah-langkahn#a harus dilakukan secara hati-hati

dan berusaha agar sampel tetap steril (dipanaskan pada bunsen).

17


18/20

3. Pemasukan sampel usahakan sama dengan pipet olume sehingga

hasil lebih seragam.

!. "alam mengamati hasil$ hendakn#a dilakukan secara cermat terutama

mengetahui ada atau tidakn#a gelembung gas pada tabung durham.

. endakn#a dilakukan serangkaian uji lebih lanjut sehingga dapat

dipastikan apakah itu kelompok koliform secara pasti.

DA*TA+ PUSTAKA

1. usnadi$ dkk.2.Petun"un# Mi#robiologi.*niersitas Pendidikan:ndonesia +urusan Pendidikan 'iologi. "iunduh dari

http0file.upi.edu"irektoriBPM:P+*


19/20

19


20/20

LAMPI+AN

20

1. &ampel 1 cc positif 2. asil praktikum pemeriksaan air

pendahuluan - penutup pemeriksaan air

Documents