makmal tabung darah

PENAKSIRAN HEMOGLOBIN

Penaksiran Hemoglobin Menggunakan Kuprum Sulfat

Peralatan yang diperlukan:

A. Radas : lanset pakai buang, swab alkohol, mikropipet, tips

B. Reagen : larutan kuprum sulfat

Objektif:

Menganggar paras hemoglobin penderma secara semikuantitatif, iaitu melebihi 12.5 g/dl atau

kurang dari 12.5 g/dl.

Prosedur:

1. Jari manis penderma dibersihkan dengan swab alkohol dan jari manis penderma dicucuk

dengan menggunakan lancet pakai buang.

2. Titisan darah pertama yang keluar dari jari yang dicucuk dilap.

3. Dengan menggunakan mikropipet dan tips, 50μL darah kapilari penderma diambil dan

darah tersebut dimasukkan ke dalam bekas berisi larutan kuprum sulfat.

4. Titisan darah yang dimasukkan ke dalam larutan kuprum sulfat diperhatikan.

Keputusan:

Sekiranya titisan darah penderma tenggelam di dasar bekas larutan kuprum sulfat dalam masa

kurang dari 10 saat, paras hemoglobin dianggarkan melebihi 12.5 g/dl. Namun sekiranya titisan

darah timbul atau berada di pertengahan larutan, maka paras hemoglobin dianggarkan kurang

dari 12.5 g/dl.

PENYEDIAAN AMPAIAN SEL A, B DAN O UNTUK PENGUMPULAN ABO SERUM

Penyediaan Ampaian Sel A, B, Dan O Untuk Pengumpulan ABO Serum

Peralatan atau bahan yang diperlukan:

A. Radas : serofuge, tabung uji 10x75mm, pipet pasteur

B. Reagen : sel A, B dan O yang diketahui, salin normal

Objektif:

Memastikan penyediaan ampaian sel A, B dan O boleh dipercayai dan mengurangkan

kesilapan.

Prosedur:

1. Pilih sel A, B dan O yang diketahui di mana tiada hemolisis atau kekeruhan pada

supernatan melalui pemerhatian secara kasar dan negatif bagi semua penyaringan

virologi.

2. Tiga tabung uji dilabel sebagai A, B dan O dan 1 ml sel padat ditambah.

3. Sel dicuci dalam setiap tiub dengan salin normal sebanyak tiga kali. Cara mencuci sel

adalah dengan sebatikan sel padat dengan salin normal dan diempar pada kelajuan 3000

selama 50 saat.

4. Tiga tabung uji baru dilabelkan dan labelkan dengan A, B dan O dan tambahkan setitik sel

darah padat dengan 19 titik salin normal untuk menghasilkan ampaian sel 5%.

MENGUJI ANTISERA ABO & RH (D) DENGAN ‘KNOWN CELLS’

Menguji antisera ABO & Rh (D) dengan ‘Known Cells’

Bahan dan Radas

1. Jubin

2. Kayu aplikator

3. Tiub

4. Pipet

5. pengempar

Reagen

1. Darah ‘Known Cells’

2. Antisera A

3. Antisera B

4. Antisera AB

5. Antigen D

Prinsip ujian

Prosedur ini telah dicadangkan bagi kegunaan reagen tersebut yang bertujuan untuk mengesan

agglutinasi langsung yang terhasil daripada sel darah merah dimana sel ini membawa antigen

yang spesifik dan juga kehadiran antibodi yang spesifik.

Kaedah ujian(Teknik Jubin)

1. Sediakan darah( known cells ) yang telah dikenalpasti kumpulan darahnya.

2. Titiskan 1 titik darah ‘known cells’ keatas jubin mengikut ruangan kumpulan iaitu A, B,

AB dan Anti-D.

3. Keluarkan antisera A, B, AB dan Anti-D.

4. Titiskan 1 titik bagi setiap antisera dan antigen D pada ruangan kumpulan tersebut.

5. Calitkan darah tersebut menggunakan kayu aplikator serta goyangkan jubin.

6. Perhatikan agglutinasi yang terhasil.

7. Catatkan pemerhatian.

Kaedah ujian(Teknik Tiub)

1. Sediakan darah(known cells) yang telah dikenalpasti kumpulan darahnya.

2. Sediakan 3 tiub yang berlabel darah A,B,AB dan anti-D.

3. Titiskan 1 titik darah ke dalam tiub yang berlabel dengan menggunakan pipet.

4. Keluarkan antisera A, B AB dan Antigen D.

5. Titiskan 1 titik antisera kedalam tiub tersebut dengan menggunakan pipet.

6. Empar pada 3000rpm dalam masa 15 saat.

7. Perhatikan angglutinasi yang terhasil.

8. Catatkan pemerhatian.

Interpretasi ujian

Antisera

Kump.

Darah

Antisera A Antisera B Antisera AB Antigen D

A + - - +

B - + - +

O - - - +

AB + + + +

PENGUMPULAN ABO PENUH DAN RHESUS-D MENGGUNAKAN KAEDAH JUBIN

Pengumpulan ABO Penuh Dan Rhesus-D Menggunakan Kaedah Jubin


A. Radas : jubin, kayu aplikator, pipet pasteur

B. Reagen : anti-A, anti-B, anti-AB, anti-D, sel A, sel B, sel O

Prinsip:

Bagi pengumpulan ABO dan Rhesus D langsung, kehadiran aglutinasi sel darah merah dengan

antisera yang diketahui menentukan kehadiran antigen yang melekat pada permukaan sel

darah merah. Sekiranya terdapat aglutinasi pada sel darah yang diuji ini menunjukkan

kehadiran antigen tertentu dan menentukan kumpulan ABO dan Rhesus D sel darah tersebut,

sama ada A+, B+, AB+ atau O+. Kehadiran aglutinasi ini dikesan dengan menggunakan kaedah

jubin.

Manakala bagi pengumpulan ABO tidak langsung pula, tindak balas serum pesakit dengan

reagen sel yang diketahui akan menghasilkan aglutinasi yang akan menentukan kehadiran

antibodi di dalam serum. Ini kerana badan manusia menghasilkan antibodi terhadap antigen

yang tidak dimiliki oleh individu. Oleh itu kumpulan darah ABO ditentukan berdasarkan

kehadiran antibodi yang menunjukkan jenis antigen yang tiada dalam badan manusia.

Objektif:

Menentukan kumpulan darah ABO dan Rhesus D bagi sampel darah pesakit.

Prosedur:

1. Bahagian jubin yang telah dilabelkan dengan ANTI-A, ANTI-B, ANTI-AB, CELL A, CELL

B, CELL O dan ANTI- D digunakan.

2. Satu titik antisera (anti-A, anti-B, anti-AB dan anti-D) dititiskan ke atas jubin mengikut

labelnya.

3. Satu titik ampaian sel (sel A, sel B dan sel O) dititiskan ke atas jubin berdasarkan label.

4. Satu titik darah pesakit dititiskan bagi pengumpulan ABO langsung dan Rhesus D, dan

satu titis serum pesakit (pastikan sel darah dan serum adalah dari pesakit yang sama)

dititiskan bagi pengumpulan ABO tidak langsung.

5. Campuran sel dan antisera serta campuran serum dan reagen sel disebatikan dengan

kayu aplikator sehingga membentuk syiling 5 sen.

6. Aglutinasi yang terbentuk diperhatikan dan direkodkan.

Keputusan:

Kehadiran aglutinasi : positif

Tiada aglutinasi : negatif

Keputusan pengumpulan ABO dan Rhesus D (pengumpulan langsung sahaja) adalah

berdasarkan jadual berikut :

Anti A Anti B Anti AB Anti-D Sel A Sel B Sel O Kumpulan

darah

+ 0 + + 0 + 0 A+

0 + + + + 0 0 B+

0 0 0 + + + 0 O+

+ + + + 0 0 0 AB+

PENGUMPULAN ABO DAN RHESUS-D PENUH DENGAN KAEDAH TIUB

Pengumpulan ABO Dan Rhesus-D Kaedah Tiub


A. Radas : serofuge, tiub kaca (10 x 75mm), pipet pasteur, bikar, rak tabung uji.

B. Reagen : anti-A, anti-B, anti-D, sel A, B dan O yang diketahui, salin normal.

Spesimen:

Sampel darah yang telah beku atau darah yang disimpan dalam tiub EDTA.

Prinsip:

Aglutinasi langsung sel darah merah dengan reagen tertentu menentukan kehadiran antigen

tertentu. secara umumnya, tiada aglutinasi menunjukkan ketidakhadiran antigen tersebut.

Kumpulan ABO dan rhesus D ditentukan dari corak reaksi dengan reagen yang diuji (anti-A,

anti-B dan anti-AB serta anti-D). Serum kebanyakan individu berusia lebih dari enam bulan

menghasilkan antibodi terhadap antigen ABO yang tidak dimiliki oleh individu berkenaan.

Pengumpulan serum, menggunakan sel A1, B dan O digunakan untuk mengesahkan keputusan

pengumpulan ABO sel.

Skop ujian:

Prosedur ini digunakan untuk semua protokol ujian yang memerlukan pengumpulan ABO dan

rhesus D.

Keadaan berjaga-jaga:

1. Tindak balas negatif palsu atau lemah di luar jangkaan mungkin berlaku apabila sampel

darah dengan subkumpulan A atau B ataupun sel kord merah daripada bayi baru lahir.

Tindak balas seperti ini juga boleh berlaku dengan sel yang telah disimpan dalam jangka

masa lama.

2. Pemboleh ubah ujian seperti teknik yang tidak betul, pengemparan atau pengemparan

yang salah, alat radas kaca yang tidak dibersihkan dengan betul dan bahan

terkontaminasi boleh mengakibatkan keputusan negative palsu atau positif palsu.

3. Anomaliti serological boleh berlaku seterusnya menyebabkan tindak balas di luar

jangkaan atau kepincangan pengumpulan ABO langsung dan tidak langsung.

Prosedur:

A. Pengumpulan ABO dan Rhesus D langsung

1. Ampaian sel 3 hingga 5% disediakan dalam salin normal.

2. Satu titik anti-A, anti-B, anti-AB dan anti-D ditambah ke tiub yang telah dilabelkan.

3. Setitik ampaian sel ditambah ke dalam tiub dan disebatikan.

4. Dimparkan pada kelajuan 3000 rpm selama 15 saat. Setiap tiub digoncang untuk

diperiksa aglutinasi. Agglutinasi diredkan dan keputusan dilaporkan.

B. Pengumpulan ABO serum/tidak langsung

1. Setitik serum atau plasma dimasukkan ke dalam tiub yang telah dilabelkan.

2. Setitik ampaian 2% sel A1, B dan O ditambah ke dalam tiub berdasarkan label.

3. Disebatikan dan diempar pada 3400 rpm selama 15 saat. Setiap tiub untuk digoncang

dan diperiksa aglutinasi. Agglutinasi digredkan dan keputusan dilapor.

Keputusan:

Kehadiran aglutinasi : positif

Tiada aglutinasi : negatif

Keputusan pengumpulan ABO dan Rhesus D (pengumpulan langsung sahaja) adalah

berdasarkan jadual berikut :

Anti A Anti B Anti AB Anti-D Sel A Sel B Sel O Kumpulan

darah

+ 0 + + 0 + 0 A+

0 + + + + 0 0 B+

0 0 0 + + + 0 O+

+ + + + 0 0 0 AB+

PENYEDIAAN COOMB’S CONTROL CELL (CCC)

Penyediaan Coomb’s Control Cell (CCC)

Peralatan yang diperlukan :

A. Radas : Tiub, Pipet, Inkubator, Pengempar

B. Reagen : Normal Saline, AHG

Spesimen :

Sel darah merah O yang kuat

Prinsip :

Sel darah merah yang tersensitasi dengan serum globulin adalah digunakan sebagai kontrol

positif untuk menguji fungsi AHG. Ia mengandungi IgG yang mana akan bertindak balas dengan

AHG(mengandungi Anti-IgG). Anti-IgG di dalam AHG akan mengikat molekul IgG seterusnya

membentuk agglutinasi.

Prosedur :

1. Tandakan 1 tabung uji (10x75mm) ‘CCC’ dan masukkan 19 titik larutan salin.

2. Masukkan 1 titik Anti-D (cairan 1/20) dan sebatikan.

3. Tambahkan 4 titik SDM padat dari kumpulan O Rh(D) positif ke dalam tabung uji dan

sebatikan dengan sempurna.

4. Eramkan tabung uji pada suhu 37°C selama 15 – 30 minit.

5. Basuh sel-sel 3 – 4 kali dengan larutan salin. Pastikan setiap pembasuhan dilakukan

dengan sempurna.

6. Buangkan semua larutan saline dengan sempurna pada pembasuhan yang terakhir.

7. Sediakan cairan 1/10 ‘CCC’ dengan memasukkan 36 titik larutan salin ke dalam tabung uji.

(Sebanyak 4 titik SDM padat telah dimasukkan ke dalam tabung uji ini semasa permulaan

ujian).

8. Uji ‘CCC’ yang disediakan dengan reagen AHG. Ia seharusnya memberikan reaksi

agglutinasi positif 2+.

9. ‘Coomb’s Control Cell’ ini boleh digunakan untuk beberapa hari jika ia disimpan pada 4°C.

(Jika sel-sel diampaikan di dalam larutan ‘Alserver’s ia boleh disimpan hampir sebulan pada

suhu 4°C.)

Interpretasi ujian

A. 4+ = agglutinasi yang sangat banyak

B. 3+ = agglutinasi yang banyak

C. 2+ = agglutinasi sederhana banyak

D. 1+ = agglutinasi sedekit

E. 0+ = tiada pembentukan agglutinasi

UJIAN KESERASIAN DARAH (CROSSMATCHING)

Ujian Keserasian Darah

Pengenalan:

Ujian keserasian darah terbahagi kepada dua jenis berdasarkan prinsipnya, iaitu :

1. Ujian keserasian darah major : serum pesakit diuji dengan sel darah penderma bagi

menentukan keserasiannya. Ujian keserasian major merupakan jenis ujian keserasian

darah yang dijalankan di Unit Tabung Darah Hospital Queen Elizabeth.

2. Ujian keserasian darah minor : sel darah pesakit diuji dengan serum penderma bagi

menentukan keserasiannya.


1. Radas : tabung uji, pipet pasteur, pengempar, mesin pengeraman 37HC

2. Reagen : LISS, AHG, saline normal, CCC (Coomb’s Control Cell)

Prinsip:

Ujian keserasian darah dilakukan berdasarkan prinsip aglutinasi. Serum pesakit ditambah

kepada sel darah penderma. LISS (low ionic strength solution) ditambah untuk mempercepat

tindak balas antigen-antibodi. Selepas pengeraman antibodi yang tidak terikat akan disingkirkan

melalui proses pencucian sel dan reagen AHG (anti human globulin) ditambah. Kehadiran

hemolisis atau aglutinasi menunjukkan kehadiran antibodi terhadap antigen tertentu pada sel

darah merah penderma.

Prosedur:

1. Data pesakit pada borang permohonan bersama-sama spesimen yang dihantar diperiksa

bagi mengesan sebarang kepincangan maklumat. Serum pesakit dipisahkan ke dalam

tabung uji berlainan dan dilabelkan dengan nama dan nombor kad pengenalan pesakit

beserta tarikh ujian dijalankan.

2. Pek darah dikeluarkan dari kumpulan ABO yang sama dengan pesakit mengikut bilangan

yang diminta dari peti simpanan darah.

3. Tabung uji disediakan mengikut bilangan yang dikehendaki (2 tiub bagi setiap unit darah

untuk kegunaan ampaian sel dan ujian keserasian darah) dan dilabelkan.

4. segmen dari tiub pek darah dipotong dan ampaian sel darah penderma 2 hingga 5%

disediakan.

5. Dua titk serum pesakit ditambah ke dalam setiap tabung uji (satu tabung uji bagi setiap

pek darah yang diminta).

6. Pengumpulan ABO dan Rhesus D (teknik langsung) menggunakan anti-A, anti-B, anti-AB

dan anti-D dijalankan.

7. Setitik ampaian sel darah penderma 2 hingga 5% ditambah ke dalam tiub yang

mengandungi serum pesakit.

8. Sel darah penderma diuji dengan anti-A dan anti-B (pengumpulan semula darah

penderma).

9. Campuran serum pesakit-sel darah penderma disebatikan dan diemparkan pada kelajuan

3000 selama 15 saat.

10. Tabung uji diperiksa secara makroskopik untuk mengesan kehadiran aglutinasi dengan

menggoncangkan tabung uji perlahan-lahan. Tindak balas positif boleh digredkan dari 4+

sehingga 1+. Rekodkan “0” untuk tindak balas sekiranya tiada aglutinasi dikesan.

11. Dua titik LISS ditambah. Disebatikan dan dieram pada suhu 37 HC selama 15 hingga 30

minit.

12. Selepas pengeraman, tabung uji diempar pada kelajuan 3000 rpm selama 15 saat.

13. Kehadiran aglutinasi atau hemolisis diperiksa secara makroskopik.

14. Sekiranya keputusan adalah negatif, sel dicuci sebanyak tiga kali dengan saline normal.

Saline normal dibuang selengkapnya selepas cucian ketiga.

15. Dua titik AHG ditambah pada setiap tabung uji.

16. Disebatikan dan diemparkan pada kelajuan 3000 rpm selama 15 saat.

17. Kehadiran aglutinasi diperiksa secara makroskopik dengan menggoncangkan tabung uji

perlahan-lahan. Ketiadaan aglutinasi diinterpretasikan sebagai “serasi” dan kehadiran

aglutinasi sebagai “tidak serasi”.

18. Semua keputusan (suhu bilik, 37 HC dan AHG) direkod pada borang permohonan.

19. Sekiranya ujian keserasian darah menunjukkan ketidakserasian antara darah pesakit

dengan darah penderma sebelum darah dikeluarkan, permohonan darah tersebut

dibatalkan dan dapatkan beg darah lain untuk diuji keserasiannya.

20. Nombor beg darah, tarikh dan masa ditulis pada borang permohonan.

21. Data dimasukkan ke dalam sistem komputer dan label dicetak untuk transfusi darah.

22. Label tersebut dilekat pada beg darah yang diminta.

23. Beg darah yang telah diuji keserasiannya dengan darah pesakit disimpan ke dalam peti

sejuk.

Keputusan:

1. Sekiranya tiada tindak balas (aglutinasi atau hemolisis) antara darah pesakit dan darah

penderma, darah penderma adalah serasi untuk pesakit berkenaan dan boleh digunakan

bagi tujuan pemindahan darah.

2. Namun jika terdapat tindak balas (aglutinasi atau hemolisis) antara darah pesakit dan

darah penderma, ini bermakna darah penderma adalah tidak serasi dan darah penderma

lain hendaklah diuji keserasiannya dengan pesakit berkenaan.

UJIAN KESERASIAN DARAH ( GEL CARD)

Ujian keserasian darah(Gel Card)

Peralatan yan diperlukan:

Pipet, gel card, tiub kaca

Spesimen :

Serum pesakit, ampaian sel darah merah 5% dari penderma

Kaedah ujian

1. Terima sampel daripada kaunter

2. Pastikan nama pada tiub dan borang pesanan adalah sama. Jika tidak sama, hantar

kembali ke kaunter

3. Rekodkan maklumat pesakit ke dalam buku daftar harian ujian keserasian &

pembekalan darah/komponen darah.

4. Emparkan sampel pada kelajuan 3500 rpm selama 5 minit

5. Tentukan kumpulan darah pesakit. (Rujuk proses kerja ujian kumpulan darah ABO dan

Rhesus)

6. Sediakan ampaian sel 5 % sel darah merah penderma yang mempunyai kumpulan

darah ABO dan Rhesus yang sama dengan pesakit.

7. Labelkan mikrotiub (Gel Card) dengan nama pesakit dan no beg darah

8. Masukkan 50 ul ampaian sel darah merah penderma di langkah 5, kepada mikrotiub di

langkah 6.

9. Tambahkan 25 ul serum pesakit ke mikrotiub di langkah 7. Sebatikan.

10. Eramkan mikrotiub selama 15 minit pada suhu 37°C dalam incubator 37SI

11. Kemudian, emparkan mikrotiub di langkah 9, selama 10 minit pada 1030 rpm

menggunakan ID Centrifuge 6S

12. Semak keputusan (rujuk pengendalian ujian unit tabung darah & kawalan kualiti). Jika

keputusan meragukan, ulangi ujian.

13. Rekodkan keputusan pada borang ujian keserasian dan buku daftar harian ujian

keserasian & pembekalan darah/komponen darah.

14. Hantarkan borang ujian keserasian ke kaunter

Interpretasi ujian

Interpratasi

4+ to 1+ Reaktif(incompatible)

Neg Tidak reaktif(Compatible)

UJIAN COOMB’S (Ab Screening)

Ujian Coomb’s-Direct


A. Radas : pengempar, tabung uji, pipet

B. Reagen : 0.9 natrium klorida (NaCl), AHG, CCC

Spesimen :

1. Sel darah merah

Prinsip:

Reagen antihuman globulin polispesifik (AHG) digunakan untuk pengesanan aloantibodi rutin,

ujian keserasian dan ujian antiglobulin langsung (Direct Antiglobulin Test, DAT). HAG

polispesifik mengandungi antibody terhadap IgG manusia dan komplemen C3d dan turut

bertindak balas terhadap molekul IgA dan IgM. Keputusan DAT positif menunjukkan bahawa sel

darah merah tersensitasi secara in vivo dengan immunoglobulin atau komplemen.

Kaedah ujian

1. Masukkan o.5ml cell(EDTA) ke dalam tiub dan emparkan pada kelajuan 2000rpm dalam

masa 15saat.

2. Basuhkan 3-4 kali dengan larutan saline.

3. Sediakan 2-3% suspensi sel.

4. Masukkan 1 titik 2-3% sel yang telah dibasuh ke dalam tiub.

5. Masukkan 1 titik AHG dan sebatikan.

6. Empar pada kelajuan 1000rpm dalam masa 60 saat.

7. Baca secara makroskopik dan mikroskopik.

8. Tambahkan reagen CCC

9. Emparkan pada kelajuan 2000rpm dalam masa 60 saat.

10. Baca secara makroskopik dan mikroskopik.

11. Catatkan keputusan samada negative atau positif.

Interpretasi ujian

Negatif – Agglutinasi

Positif – Tidak beragglutinasi

Ujian Coomb’s-Indirect


A. Radas : pengempar, tabung uji,pipet

B. Reagen : 0.9 natrium klorida (NaCl), AHG, CCC, Screening Cell

Spesimen :

Serum pesakit.

Kaedah ujian

1. Terima sampel daripada kaunter

2. Pastikan nama pada tiub dan borang pesanan adalah sama. Jika tidak sama, hantar

kembali ke kaunter

3. Daftarkan maklumat pesakit dan permohonan ujian di buku daftar harian ujian

AHG/GSH/Ab identification.

4. Labelkan 3 tiub dengan SI, SII, SIII ( bergantung bilangan Screening Cell yang

digunakan)

5. Masukkan 2 titik serum yang hendak diuji ke dalam setiap tiub ujian di langkah 4 ( SI,

SII, SIII)

6. Tambahkan 2 titik Screening Cell bagi setiap tiub di langkah 5. Sebatikan.

7. Emparkan tiub di langkah 6, pada kelajuan 1000 rpm selama 15 saat.

8. Periksa sampel daripada langkah 7, secara makroskopik & mikroskopik.



10. Masukan 2 titik LISS ke tiub di langkah 8.

11. Eramkan selama 15 minit pada suhu 37°C

12. Kemudian, emparkan pada kelajuan 1000 rpm selama 15 saat




15. Lakukan cucian berulang ke tiub di langkah 13, sebanyak 3 kali dengan saline.

16. Seterusnya, tambahkan 2 titik AHG . Sebatikan

17. Emparkan pada kelajuan 1000 rpm selama 15 saat




20. Jika keputusan negatif, tambahkan 1 titik Coombs Control Cell (CCC) dan keputusan

mesti positif.

21. Rekodkan keputusan pada borang dan buku daftar harian ujian AHG/GSH/Ab

identification.

22. Hantarkan keputusan bersama borang ke kaunter

Interpretasi ujian

Negatif – Agglutinasi

Positif – Tidak beragglutinasi

UJIAN D 7

Ujian D 7

Pengenalan :

Ujian D M adalah untuk pengesanan antigen D yang lemah pada darah pesakit. Antigen rhesus

utama boleh hadir dalam pelbagai kombinasi dimana ia terdiri daripada 417 asid amino yang

merentasi membrane sel darah merah sebanyak 12x. Lekuk kecil berada atas membran

selebihnya terbenam dalam kript membran sel.

Peralatan yang digunakan :

A. Radas : Tabung uji, pipet, mesin pengempar dan inkubator

B. Reagen : Normal salin, AHG dan CCC

Spesimen :

Sel dara merah

Prosedur :

1. Cuci sel sebanyak 3 kali dengan saline dan sediakan 5% suspensi.

2. Tambah 2 titik Anti-D dan 1 titik suspensi 5% ke dalam tabung uji yang dilabelkan

3. Emparkan tiub tersebut dan perhatikan agglutinasi.

4. Eram pada suhu 37°C selama 15 minit.

5. Keluarkan tabung uji dan cuci sel sebanyak 3 kali.

6. Tambahkan 2 titik AHG.

7. Empar pada 1000rpm selama 1 minit.

8. Periksa sekiranya terdapat agglutinasi secara makroskopik.

9. Sekiranya negatif, tambahkan 1 titis CCC untuk mengesahkan ujian dan reagen AHG

adalah berkeadaan baik.

Interpretasi keputusan :

Terdapat agglutinasi – Darah adalah rhesus positif, terdapat kehadiran antigen D yang kuat.

Tiada agglutinasi – Darah adalah rhesus negatif, tidak terdapat kehadiran antigen D yang

lemah.

PENYEDIAAN KOMPONEN-KOMPONEN DARAH

Penyediaan Komponen-komponen Darah

Peralatan yang digunakan:

A. Radas : Beg darah, mesin pengempar beg darah

B. Reagen : CPD, CPDA

Spesimen :

Darah penuh.

Packed cell

1. Biarkan darah penuh mendap pada 4°C atau emparkan pada 4100 rpm/5°C selama 5 minit.

2. Plasma dipindahkan pada beg kedua (packed cell dan plasma diasingkan)

3. Packed cell boleh disimpan pada 2-6°C selama 21 hari.

Platelete concentrate & Freeze Frozen Plasma

1. Blood pack digunakan (triple bag/satellite bag)

2. Biarkan darah penuh mendap pada 4°C atau emparkan pada 4100 rpm/5°C selama 5 minit.

3. Plasma dipindahkan pada beg kedua (packed cell dan plasma diasingkan).

4. Plasma diempar pada 4100 rpm selama 5 minit.

5. Supernatan plasma akan dibekukan dan dijadikan sebagai freeze frozen plasma.

6. Mendapan (kira-kira 50ml plasma) akan dibiarkan pada suhu bilik di atas ‘slow rotater’ bagi

mengelakkan platelet berkelompok.

7. Tempoh penyimpanan adalah selama 5-7 hari.

Cryoprecipitate

1. Whole blood diempar pada 4000 rpm selama10 minit dengan suhu 8°C.

2. Pindahkan 2/3 plasma ke beg kedua.

3. Tutup tiub dan asingkan Packed Cell (simpan pada 2.- 6°C)

4. Dalam 2 jam selepas SDM dipisahkan, plasma dibekukan pada -30°C

5. Biarkan kandungan cair pada 2 – 6°C selama 16 – 18 jam.

6. Emparkan dengan suhu 2 - 4°C pada 4100rpm selama 5 minit.

7. Terbalikkan beg dan biarkan supernatant mengalir masuk ke beg ketiga (Cryoprecipitate)

dalam 10 – 15 ml plasma.

8. Simpan pada -18°C selama 12 bulan atau pada -30°C untuk mengekalkan faktor VIII.

makmal tabung darah

Documents