fermentasi kinetika_andriani cintya salim_universitas soegijapranata semarang

Upload: james-gomez

Post on 15-Oct-2015

41 views

Category:

Documents


0 download

DESCRIPTION

dilakukan pengamatan kinetika terhadap pertumbuhan yeast pada fermentasi cider apel. Cider merupakan merupakan produk fermentasi jus buah. Produk cider yang sekarang beredar bervariasi, mulai dari white cider (difermentasi dari jus buah misalnya apel yang mengalami perubahan warna atau diproduksi oleh perubahan warna dari fermentasi cider) sampai black cider (campuran antara cider dengan barley malt). Cider apel sendiri adalah minuman hasil fermentasi sari buah apel yang mengandung alkohol 6,5-8%

TRANSCRIPT

PROGRAM STUDI TEKNOLOGI PANGANFAKULTAS TEKNOLOGI PERTANIANUNIVERSITAS KATOLIK SOEGIJAPRANATASEMARANG2013LAPORAN RESMI PRAKTIKUMTEKNOLOGI FERMENTASI

Disusun oleh:Andriani Cintya Salim 10.70.0113Kelompok : D6KINETIKA FERMENTASI

2

HASIL PENGAMATAN

Hasil Pengamatan kinetika fermentasi dalam cider apel dengan apel dengan menggunakan analisis kepadatan biomassa yang diamati dengan metode haemocytometer dan konsentrasi biomassa yang diamati dengan spektrofotometer dapat dilihat pada tabel 1.

Tabel 1. Kepadatan dan Konsentrasi BiomassaKelPerlakuanWaktu MO Tiap PertakRata-rata / tiap petakRata-rata / tiap ccOD

1234

D1Sari apel + Saccharomyces cereviceaeN01929294029,2511,7 x 107-0,3885

N24310360340410355142 x 1070,5410

N48360410450420410164 x 1070,7292

N72490550480410482,5193 x 1071,1998

N9613701380102017901390556 x 1070,2485

D2Sari apel + Saccharomyces cereviceaeN01312111011,54,6 x 107-0,3854

N2415026016023020080 x 1070,3546

N48160230190250207,583 x 1070,7009

N72260180280270247,599 x 1071,0453

N96640620660610632,5253 x 1070,2754

D3Sari apel + Saccharomyces cereviceaeN024211825228,8 x 1070,1088

N24560460590470520208 x 1070,3962

N48490580630580570228 x 1070,7728

N72820550650550642,5257 x 1071,1521

N96650650710625658,75263,5 x 1070,6118

D4Sari apel + Saccharomyces cereviceaeN02616211118,57,4 x 1070,5656

N24100220170160162,565 x 1070,5856

N4824022018022021586 x 1071,287

N7224025020025023594 x 1071,2911

N96610450460460495198 x 1070,6727

D5Sari apel + Saccharomyces cereviceaeN0242033352811,2x 107-0,1842

N24220400290200277,5111 x 1070,3590

N48420440450470445178 x 1070,7478

N72520410480450465186 x 1070,9307

N96510600520410510204 x 1070,5159

D6Sari apel + Saccharomyces cereviceaeN01730182522,59,0 x 1070,7888

N2417019026024021586 x 1070,8367

N48250300340340307,5123 x 1070,9572

N72450490400430442,5177 x 1071,3668

N96430480450420445178 x 1070,5858

Berdasarkan tabel 1 diatas dapat dilihat bahwa sari apel yang ditambah dengan Saccharomyces cerevisiae mengalami kepadatan dan konsentrasi biomassa yang berbeda tiap kelompok. Pada umumnya, semakin padat biomassa, maka konsentrasinya akan semakin besar. Hal tersebut dapat diamati pada nilai rata-rata / tiap cc cider dan absorbansinya. Berdasarkan hasil yang diperoleh dapat diketahui bahwa pada hari ke 0 yeast yang terkandung di dalam sari apel paling sedikit bila dibandingkan dengan yeast pada hari ke 5. Pada hari ke 0, sari apel yang memiliki sel yeast paling banyak yaitu sari apel kelompok D1 dengan rata-rata / tiap cc 11,7 x 107 dan absorbansi sebesar -0,3885 sedangkan sari apel yang memiliki yeast paling sedikit yaitu kelompok D2 dengan rata rata-rata / tiap cc 4,6 x 107 dan absorbansi sebesar -0,3854. Pada hari ke 5, pada semua kelompok konsetrasi rata-rata / tiap cc mengalami peningkatan dan absorbansi mengalami penurunan. Pada hari ke 0 hingga ke 5 pertumbuhan yeast terus meningkat. Namun hal tersebut tidak diikuti dengan peningkatan absorbansi pada cider apel, karena pada hari ke 5 semua kelompok mengalami penurunan absorbansi. PEMBAHASAN

Pada pratikum ini dilakukan pengamatan kinetika terhadap pertumbuhan yeast pada fermentasi cider apel. Cider merupakan merupakan produk fermentasi jus buah. Produk cider yang sekarang beredar bervariasi, mulai dari white cider (difermentasi dari jus buah misalnya apel yang mengalami perubahan warna atau diproduksi oleh perubahan warna dari fermentasi cider) sampai black cider (campuran antara cider dengan barley malt). Cider apel sendiri adalah minuman hasil fermentasi sari buah apel yang mengandung alkohol 6,5-8% (Arthey & Ashurst, 1998).

Pada proses fermentasi cider apel ini menggunakan Saccharomyces cereviseae. Saccharomyces cereviceae telah banyak digunakan untuk produk-produk fermentasi seperti produksi bir, roti, wine, dan sake. Saccharomyces cereviceae memanfaatkan sukrosa, glukosa, fruktosa, maltosa, dan maltotriosa sebagai sumber karbon untuk memproduksi alkohol dalam kondisi anaerobik (Kulkarni et al., 2011). Saccharomyces cerevisiae mampu mengkonversi gula menjadi alkohol tanpa menghasilkan off-flavor (Wang et al., 2004). Menurut Rahman (1992) Saccharomyces cereviseae dapat menfermentasikan glukosa dalam buah. Hasil pemecahan pati/glukosa akan menghasilkan alkohol dan CO2. Pada proses fermentasi alkohol, bahan berkadar pati tinggi akan mengalami perubahan. Perubahan-perubahan ini dapat disebabkan karena adanya proses seperti sakarifikasi pati oleh enzim amilase dalam tauge yang diproduksi oleh kapang, yang kemudian dilanjutkan dengan proses fermentasi alkohol oleh khamir. Menurut Sharma & Caralli (1989) fermentasi alkohol adalah proses anaerobik dari dekomposisi heksosa, menghasilkan etanol dan CO2. Fermentasi yeast pada gula menghasilkan larutan yang mengandung alkohol 10-15 %. Minuman yang mengandung alkohol tinggi akan membunuh yeast itu sendiri. Fermentasi alkohol adalah proses anaerobik dari dekomposisi heksosa, menghasilkan etanol dan CO2. Fermentasi ini disebabkan oleh enzim yang diproduksi oleh yeast.

Proses pembuatan cider selain menggunakan inokulasi dapat dilakukan dengan cara fermentasi secara spontan. Fermentasi tersebut dilakukan secara alami di dalam ruangan dengan kondisi tertentu yang mendukung pertumbuhan yeast pada cider. Fermentasi cider secara spontan telah dilakukan oleh Valles et al. (2007) dengan tujuan untuk mengidentifikasi biota non Saccharomyces dan Saccharomyces yang terdapat di dalam sari apel pada fase yang berbeda dari fermentasi yang disimpan dalam satu gudang selama dua tahun berturut-turut. Berdasarkan hasil yang didapatkan setelah fermentasi sari apel, diketahui bahwa jenis Saccharomyces yang ada pada cider tersebut adalah Saccharomyces cerevisiae dan Saccharomyces bayanus. Spesies Saccharomyces bayanus yang ada mendominasi di awal dan di tengah proses fermentasi. Persentase saat dilakukan isolasi ialah mencapai antara 33% dan 41%. Pada tahap akhir fermentasi, yeast yang muncul adalah Saccharomyces cerevisiae. Saccharomyces bayanus bertugas untuk mengubah gula menjadi alkohol, CO2, dan kalori. Saccharomyces cerevisiae yang mulai muncul pada tahap akhir fermentasi bertugas untuk menyempurnakan dan mematangkan rasa dan aroma, menjenuhkan kadar O2, serta menjernihkan warna yang dihasilkan.

Pada pratikum ini, mula-mula buah apel dihancurkan terlebih dahulu hingga diperoleh sari apel. Buah apel yang akan digunakan dihancurkan terlebih dahulu dengan tujuan supaya gula yang terkandung dalam sari buah dapat keluar. Kadar gula dalam sari buah apel ini sangat diperlukan dalam proses fermentasi cider karena gula mempunyai peran penting sebagai sumber karbon dalam metabolisme ragi (Ikhsan, 1997). Sari apel selanjutnya disterilisasi, dengan tujuan untuk menghilangkan mikroorganisme lain yang mungkin dapat mengganggu pertumbuhan yeast (Widodo, 2003). Pada pratikum ini sterilisasi dilakukan dengan menggunakan autoclave. Hal tersebut bertujuan agar tidak adanya mikroorganisme lain yang bersifat kontaminan. Mikroorganisme lain yang kerap kali terdapat dalam proses fermentasi yaitu golongan bakteri asam laktat yang dapat mengubah asam malat buah dan asam quinat menjadi laktat dan asam dihydroshikimic secara bersama-sama akan menurunkan keasaman cider hingga 50%. Asam laktat dan asam asetat dapat dibentuk secara langsung dari sisa gula sehingga dibutuhkan

perhatian untuk mencegah produksi asam volatil berlebihan dalam cider (Arthey & Ashurst, 1998).

Sari apel yang sudah steril selanjutnya dilakukan pembiakan yeast dengan menambah Saccharomyces cereviseae secara aseptis. Metode aseptis ini bertujuan supaya tidak ada bakteri lain yang masuk dan menyebabkan kontaminasi. Pada pembuatan cider apel ini, ditambahkan Saccharomyces cereviseae karena termasuk yeast yang tahan alkohol sebab selama proses fermentasi yang terjadi pada cider dihasilkan alkohol. Selama proses fermentasi tidak dilakukan pengontrolan terhadap suhu, pH, atau parameter lainnya sampai seluruh gula yang dapat difermentasi telah di metabolisasi menjadi alkohol (Arthey & Ashurst, 1998). Sari apel yang telah ditambah dengan yeast selanjutnya diinkubasi hingga hari ke 5, serta selama inkubasi dilakukan pengamatan terhadap kepadatan biomassa dan konsentrasi biomassanya hingga hari ke 5. Inkubasi cider apel dilakukan pada suhu ruang (25-30oC), karena pertumbuhan yeast umumnya optimum pada suhu 25-30 oC dan suhu maksimum 37-47 oC (Fardiaz, 1992).

Inkubasi cider apel dilakukan dengan perlakuan shaker/penggoyangan. Perlakuan shaker dilakukan dengan meletakkan erlenmeyer yang sudah diberi kultur diatas suatu alat yaitu shaker incubator. Alat tersebut akan bergerak secara perlahan dan teratur, sehingga erlenmeyer yang diletakkan diatasnya akan ikut terkocok. Penggoyangan dengan menggunakan shaker bertujuan untuk mensuplai oksigen pada media dan dalam penggunaannya dengan sumber karbon untuk membantu pertumbuhan mikrobia secara aerobik. Shaker inkubator berfungsi sebagai aerasi dan agitasi. Aerasi harus tersedia untuk mikroorganisme pada kultur yang di bawah permukaaan air dengan oksigen yang cukup untuk syarat metabolik, sedangkan agitasi harus menjamin bahwa suspensi yang seragam dari sel mikroba dapat dicapai pada medium nutrien yang homogen (Said, 1987). Penyediaan oksigen yang cukup, yang diberikan kepada media ini merupakan salah satu langkah untuk menjamin beerlangsungnya kebutuhan metabolisme mikroorganisme. Pada saat penggoyangan bila dilakukan dengan terlalu besar intensitasnya, maka proses respirasi juga akan meningkat. Hal tersebut akan berakibat pada meningkatnya produksi gas CO2 dan menurunnya produksi O2 sehingga meskipun

proses shaker terus dilakukan sepanjang waktu, yang pada akhirnya akan menurunkan hasil sel yeast. Oleh karena itu perlakuan inkubasi dalam shaker incubator harus dilakukan seoptimal mungkin, agar efek pertumbuhan yang positif benar-benar dapat terpenuhi. (Stanburry & Whitaker, 1984).

Pada pratikum ini cider apel diamati kepadatan biomassanya menggunakan haemocytometer dan diamati dibawah mikroskop. Berdasarkan jurnal yang berjudul Haematological Status Of One Day Old Ostriches (Struthio camelus domesticus) diketahui bahwa haemacytometer sebenarnya merupakan alat yang berfungsi untuk mengukur darah dalam dunia medis. Parameter yang diukur adalah banyaknya kalsium, fosfor, dan magnesium yang terkandung dalam darah.

Alat haemocytometer ini digunakan untuk menghitung sel dengan densitas yang lebih besar dari 104 sel/ml. Haemacytometer memiliki jumlah ruang yang berbedabeda tergantung pada produsen pembuatnya. Biasanya ukuran haemacytometer adalah 1 x 1 mm2 yang kemudian terbagi menjadi sembilan bentuk persegi. Penghitungan yeast menggunakan haemocytometer dilakuan dengan cara mula-mula sampel sari buah apel yang telah ditambah dengan Saccharomyces cereviceae diambil dengan pipet dan dimasukkan diatas cekungan pada haemacytometer. Permukaan cekungan yang telah diberi sampel ditutup dengan penutup kaca tipis, kemudian di amati menggunakan mikroskop. Jumlah sel yang terlihat pada mikroskop kemudian di hitung menggunakan hand counter. Apabila jumlah sel yang terlihat terlalu banyak, maka dapat dilakukan pengenceran menggunakan aquades. Ketepatan dalam perhitungan menggunakan haemacytometer tergantung dari ketepatan dalam mencampur sampel, jumlah ruang yang dihitung, dan jumlah sel (200 500 setiap 0,1 mm3) (Lobban et al.,1988).

Penghitungan sel secara otomatis dapat dilakukan dengan menggunakan Image Processing. Ide penelitian karena penghitungan sel menggunakan haemocytometer masih secara manual dan mengurangi terjadinya bias pada saat penghitungan, maka dilakukan penelitian tersebut. Penelitian yang dilakukan untuk membandingkan antara penghitungan manual dengan menggunakan Image Processing. Hasil pengujian tersebut diperoleh hasilkan hit rate sebesar 100% dan miss rate sebesar 0%. Hasil penelitian tersebut dapat memudahkan dalam penghitungan sel. Namun penghitungan haemocytometer melalui Image Processing tersebut memiliki kelemahan yaitu tidak mempertimbangkan sel yang bertumpukkan (Chen & Pei-Ju , 2011).

Pada praktikum yang dilakukan, diketahui pertumbuhan yeast pada cider setiap kelompok berbeda-beda. Pertumbuhan yeast pada cider ada yang mengalami pertumbuhan yang meningkat hingga hari kelima, namun ada juga yang mengalami penurunan jumlah sel yeast. Pertumbuhan jumlah sel yeast tersebut dapat diamati pada hubungan antara waktu dengan jumlah sel yeast/cc cider kelompok D1, D2, D3, D4, D5, dan D6 yang dapat dilihat pada grafik 1.

Gambar 1. Hubungan Waktu dan Jumlah Sel Yeast/cc

Pada grafik 1 mengenai hubungan antara waktu inkubasi dengan jumlah sel menunjukkan bahwa jumlah sel pada N0, N24, dan N48 seluruh kelompok mengalami peningkatan. Pada N96 untuk kelompok D5 mengalami peningkatan paling tinggi. Pada grafik diatas terlihat bahwa pada hari ke 0 hingga hari ke 1 mikrooganisme berada pada fase lag. Fase lag terjadi dengan cepat setelah inokulasi dan ini adalah masa penyesuaian sel dengan lingkungan. Mikroorganisme mengorganisasi kembali molekul mereka ketika mereka dipindahkan ke medium baru. Selama fase ini, jumlah massa meningkat sedikit tanpa peningkatan densitas sel Shuler (1989). Kemudian pada pengamatan hari ke 2 mikrooganisme mulai memasuki fase log. Pada fase lag, mikroorganisme sudah mampu menyesuaikan diri dengan keadaan lingkungannya dengan sangat baik, sehingga kecepatan pertumbuhannya meningkat dengan pesat dan apabila fase ini semakin panjang maka hasil biomassa yang akan diperoleh akan semakin banyak dan hal ini dalam sekala industri akan semakin menguntungkan. Pada praktikum yang dilakukan tidak terlihat adanya fase stasioner karena pengamatan hari ke 0 hingga hari ke 5 jumlah sel yeast/cc terus mengalami peningkatan. Jumlah sel yang terus meningkat mungkin disebabkan karena nutrien yang dibutuhkan untuk pertumbuhan sel masih mencukupi sehingga belum mengalami fase deccelerasi. (Rahman, 1992). Padahal seharusya pada hari ke 5 jumlah mikrooganismenya mengalami penurunan atau berada pada tahap akhir dari fase mikroorganisme yaitu pada fase kematian dimana mikroorganisme yang ada akan semakin menurun jumlahnya tetapi tidak akan mencapai nol karena mikroorganisme yang masih hidup akan memakan mikroorganisme yang sudah mati dan mikroba yang mati ini yang akan menjadi sumber nutrien bagi mikroba yang masih hidup (Stanburry & Whitaker, 1984)

N0 kel D6 N24 kel D6 N48 kel D6 N72 kel D6 N96 kel D6

Pada praktikum ini, selanjutnya dilakukan pengamatan terhadap konsentrasi yeast yang di ukur nilai ODnya dengan menggunakan spektrofotometer pada panjang gelombang 660 nm. Pengujian absorbansi ini berhubungan dengan perlakuan shaker yang diberikan pada cider selama proses inkubasi. Karena perlakuan shaker dapat menyebabkan endapan yang berasal dari sari buah tercampur sehingga dapat memperkeruh cider yang dihasilkan. Hal tersebut berdampak pada hasil absorbansi dari cider. Absorbansi berhubungan dengan konsentrasi dari substansi yang menyerap cahaya di dalam larutan sampel. Substrat akan menyerap cahaya pada panjang gelombang tertentu dan kemudian reaksinya akan dapat diikuti dengan adanya perubahan absorbansi pada panjang gelombang tersebut. Panjang gelombang antara 400-700 nm merupakan panjang gelombang yang termasuk ke dalam visible light (Palmer, 1991). Hubungan antara waktu dengan absorbansi cider dapat dilihat pada grafik 2.

Grafik 2. Hubungan Waktu dan Absorbansi

Pada grafik 2 dapat dilihat bahwa cider semua kelompok mengalami peningkatan absorbansi pada pengamatan hari pertama hingga hari ke empat dan menurun pada hari kelima. Pada hari pertama untuk kelompok D1 dan D2 memperoleh hasil absorbansi yang nilainya minus. Hal tersebut dapat disebabkan karena warna larutan terlalu jernih bila dibandingkan dengan warna larutan kontrol. Warna sari buah yang dihasilkan pada umumnya bersifat keruh dan mengandung endapan akibat tingginya kadar pektin buah. Semakin tinggi kadar pektin buah, maka sari buah yang dihasilkan juga akan semakin keruh (Astawan & Astawan, 1991). Warna keruh pada cider disebabkan karena adanya kandungan polifenol dalam sari apel. polifenol berperan penting dalam kualitas cider yang dihasilkan karena polifenol berhubungan dengan warna, kepahitan dan astringency. Selain itu, senyawa fenolik memberi kontribusi dalam pembentukan endapan selama penyimpanan sari apel tersebut, karena interaksi koloid senyawa tersebut dengan protein. Komposisi polifenol sari apel tergantung pada campuran varietas apel dan proses pembuatan cider apel (Nogueira et al., 2008).

Kesalahan yang terjadi saat melakukan pengukuran dengan spektrofotometer yaitu Kuvet kotor atau tergores Ukuran kuvet yang tidak seragam Penempatan kuvet yang tidak tepat Adanya gelembung udara dalam larutan Panjang gelombang yang dihasilkan tidak sesuai dengan yang tertera pada alat Kurang sempurna dalam penyiapan larutan sample dan blanko(Ewing, 1976)

Berdasarkan pengujian absorbansi dan penghitungan menggunakan haemacytometer, maka diperoleh data mengenai kepadatan sel yeast dan konsentrasi yeast pada cider. Hasil tersebut kemudian diamati hubungannya dengan membuat grafik. Grafik hubungan antara absorbansi dengan jumlah sel yeast/cc cider dapat dilihat pada grafik 3.

Grafik 3. Hubungan Absorbansi dan Jumlah Sel Sel Yeast/cc

Pada grafik 3 diatas dapat dilihat bahwa hubungan antara absorbansi dengan rata-rata jumlah sel yeast/cc bersifat fluktuatif. Analisa menggunakan spektrofotometri pada prinsipnya yaitu membandingkan energi absorbsi pada panjang gelombang tertentu dari larutan sampel terhadap larutan standart. Pada analisa ini panjang gelombang yang digunakan disesuaikan dengan kemampuan zat tersebut untuk mengabsorbsi energi radiasi pada panjang gelombang tersebut (Harjadi, 1986). KESIMPULAN

Penghancuran buah apel menjadi sari apel bertujuan agar gula yang terkandung dalam sari buah dapat keluar. Kadar gula dalam sari apel mempunyai peran penting sebagai sumber karbon dalam proses fermentasi yang akan dipecah menjadi alkohol dan CO2. Tujuan sterilisasi sari buah apel adalah untuk membunuh organisme kontaminan yang sebelumnya ada di dalam sari buah tersebut. Saccharomyces dapat digunakan dalam proses fermentasi alkohol karena mampu memecah bahan pangan berkarbohidrat tinggi menjadi alkohol dan CO2. Yeast tumbuh optimal pada suhu 28-32C dengan pH 4-5. Proses pemanenan yeast dan penginokulasian harus dilakukan secara aseptis agar tidak terjadi kontaminasi pada cider yang dihasilkan. Fungsi shaker adalah agar kultur tersebar secara merata pada media dan memberi suplai oksigen pada kultur yeast. Semakin meningkat jumlah sel yeast/cc, maka nilai absorbansinya juga akan meningkat karena nilai absorbansi tersebut menentukan konsentrasi biomassa yeast.

Semarang, 8 Juli 2013Praktikan,Asisten Dosen Julius Sheila Andriani

Andriani Cintya Salim 10.70.0113DAFTAR PUSTAKA

Arthey, D and Ashurst. (1998). Friut Processing. Blackie Academic & Professional. London.

Astawan, M & Astawan.W.M. (1991). Teknologi Pengolahan Pangan Nabati Tepat Guna. Akademika Pressindo. Jakarta.

Chen, Yu-Wei & Pei-Ju Chiang. (2011). Automatic Cell Counting for Hemocytometers through Image Processing. World Academy of Science, Engineering and Technology 58 2011.

Ewing, G.W. (1976). Instrumental Methods of Chemical Analysis. Mc Growhill Book Company. USA

Fardiaz, S. (1992). Mikrobiologi Pangan I. PT Gramedia Pustaka Utama. Jakarta.

Harjadi, W. (1986). Ilmu Kimia Analisis Dasar. Gramedia. Jakarta.

Ikhsan, M. B. (1997). Pengaruh Media Starter dan Cara Penambahan Gula Terhadap Kualitas Anggur Pisang Klutuk. Stiper Farming. Semarang.

Kulkarni, Mayuri K. ; Pallavi T. Kininge ; Nitin V. Ghasghase ; Priya R. Mathapati & Sunil S. Joshi. (2011). Effect of Additives On Alcohol Production and Kinetic Studies of S. Cerevisiae for Sugar Cane Wine Production. Kolhapur. India.

Lobban et al. (1988). Cell Counting using a Haemacytometer. http://www.marine.csiro.au/microalgae/methods/haemacytometer%20counting.htm. Diakses tanggal 6 Juli 2013.

Nogueira, Alessandro; Sylvain Guyot; Nathalie Marnet; Jean Michel Lequere; Jean-Francoise Drilleau; & Gilvan Wosiacki. (2008). Effect of Alcoholic Fermentation in the Content of Phenolic Compounds in Cider Processing. Brazilian Archives of Biology and Technology Vol. 51, no. 5: pp.1025-1032, September-October 2008.

Palmer, T. (1991). Understanding Enzymes 3rd Edition. Ellis Horwood Limited. England.

Rahman, A. (1992). Teknologi Fermentasi. Penerbit Arcan. Jakarta.

Said, G. (1987). Bioindustri Penerapan Teknologi Fermentasi.Mediyatama Sarana Perkasa.Jakarta.

Shuler, L.M. (1989). Bioprocess Engineering Basic Concepts. Prentice Hall international Incorporation. London.

Stanburry, P.F. & Whitaker. (1984). Principles of Fermentation Technology. Pergamon Press. New York.

Sharma, J.L. & S. Caralli. (1998). A Dictionary of Food & Nutritions. CBS Publishers & Distributors. New Delhi.

Valles, Belen Suarez; Rosa Pando Bedrinana; Norman Fernandez Tascon; Amparo Querol Simon; & Roberto Rodriguez Madrera. (2007). Yeast Species Associated with the Spontaneous Fermentation of Cider. Food Microbiology 24 (2007) 25-31.

Wang, D.; Y. Xu; J. Hu; & G. Zhao. (2004). Fermentation Kinetics of Different Sugars by Apple Wine Yeast Saccharomyces cerevisiae. Journal of The Institute of Brewing 110(4), 340-346, 2004.

Widodo. (2003). Bioteknologi Industri Susu. Lacticia Press. Yogyakarta.

LAMPIRAN

PERHITUNGAN Rumus :

3

Kelompok D1 No Jumlah sel / cc = x 29,25 = 11,7 x 107 N24 Jumlah sel / cc = x 355 = 142 x 107 N48 Jumlah sel / cc = x 410 = 164 x 107 N72 Jumlah sel / cc = x 482,5 = 193 x 107 N96 Jumlah sel / cc = x 1390 = 556 x 107

Kelompok D2 No Jumlah sel / cc = x 11,5 = 4,6 x 107 N24 Jumlah sel / cc = x 200 = 80 x 107 N48 Jumlah sel / cc = x 207,5 = 83 x 107 N72 Jumlah sel / cc = x 247,5 = 99 x 107 N96 Jumlah sel / cc = x 632,5 = 253 x 107

Kelompok D3 No Jumlah sel / cc = x 22 = 8,8 x 107 N24 Jumlah sel / cc = x 520 = 208 x 107 N48 Jumlah sel / cc = x 570 = 228 x 107 N72 Jumlah sel / cc = x 642,5 = 257 x 107 N96 Jumlah sel / cc = x 658,75 = 263,5 x 107

Kelompok D4 No Jumlah sel / cc = x 18,5 = 7,4 x 107 N24 Jumlah sel / cc = x 162,5 = 65 x 107 N48 Jumlah sel / cc = x 215 = 86 x 107 N72 Jumlah sel / cc = x 235 = 94 x 107 N96 Jumlah sel / cc = x 495 = 198 x 107

Kelompok D5 No Jumlah sel / cc = x 28 = 1,12 x 107 N24 Jumlah sel / cc = x 277,5 = 111 x 107 N48 Jumlah sel / cc = x 445 = 178 x 107 N72 Jumlah sel / cc = x 465 = 186 x 107 N96 Jumlah sel / cc = x 510 = 204 x 107Kelompok D6 No Jumlah sel / cc = x 22,5 = 9,0 x 107 N24 Jumlah sel / cc = x 215 = 86 x 107 N48 Jumlah sel / cc = x 307,5 = 123 x 107 N72 Jumlah sel / cc = x 442,5 = 177 x 107 N96 Jumlah sel / cc = x 445 = 178 x 107

Chart2

Sheet1KelPerlakuanWaktu(jam) MO Tiap PertakRata-rata / tiap petakRata-rata / tiap ccOD1234A1A2A3A4A5A6A1N045295200000000.0382N00.03820.7490.42910.3890.39270.4021N241068310410198.53940000001.8489N241.84891.79271.84891.85271.84651.6123N4841043031041039015600000000.9468N480.94680.79740.8950.74490.87270.8751N961451541501431485920000000.0276N960.02760.37940.01380.23990.44620.5751N1206078826771.752870000001.3832N1201.38321.54791.35461.52951.38321.6145A2N013149710.75430000000.749N0N24134137145251166.756670000001.7927N24N0N24N48N96N120N4892069064069073529400000000.7974N48N00.03821.84890.94680.02761.3832N9653096078087078531400000000.3794N960.7491.79270.79740.37941.5479N1206078826771.752870000001.5479N1200.42911.84890.8950.01381.3546A3N03336343233.751350000000.4291N00.3891.85270.74490.23991.5295N24190234221248223.258930000001.8489N240.39271.84650.87270.44621.3832N48340150500380342.513700000000.895N480.40211.61230.87510.57511.6145N9610110898108103.754150000000.0138N96N480.9468N120120160160170152.56100000001.3546N1200.7974A4N02528543435.251410000000.389N00.895N241351671781841666640000001.8527N240.7449N4890058050080069527800000000.7449N480.8727N96462463362630479.2519170000000.2399N960.000250.8751N120330390440450402.516100000001.5295N1200.00000025A5N043233120000000.3927N0N2423227331029327711080000001.8465N24N4837037032034035014000000000.8727N48N966455615959.752390000000.4462N96N1203740393537.751510000001.3832N120A1A2A3A4A5A6A6N01925172421.25850000000.4021N020000000430000001350000001410000001200000085000000N24251212238226231.759270000001.6123N243940000006670000008930000006640000001108000000927000000N4855019037033036014400000000.8751N48156000000029400000001370000000278000000014000000001440000000N9611308308901330104541800000000.5751N96592000000314000000041500000019170000002390000004180000000N12070055052059059023600000001.6145N12028700000028700000061000000016100000001510000002360000000od a1jumlah a1od a2jumlah a2od a3jumlah a3od a4jumlah a4od a5jumlah a5od a6jumlah a6a1N960.02765920000000.379431400000000.01384150000000.239919170000000.3927120000000.402185000000a1N00.0382200000000.749430000000.42911350000000.3891410000000.44622390000000.57514180000000a1N480.946815600000000.797429400000000.89513700000000.744927800000000.872714000000000.87511440000000a1N1201.38322870000001.54792870000001.35466100000001.529516100000001.38321510000001.6123927000000a1N241.84893940000001.79276670000001.84898930000001.85276640000001.846511080000001.61452360000000a2N00.74943000000a2N241.7927667000000a2N480.79742940000000a2N960.37943140000000a2N1201.5479287000000a3N00.4291135000000a3N241.8489893000000a3N480.8951370000000a3N960.0138415000000a3N1201.3546610000000a4N00.389141000000a4N241.8527664000000a4N480.74492780000000a4N960.23991917000000a4N1201.52951610000000a5N00.392712000000a5N241.84651108000000a5N480.87271400000000a5N960.4462239000000a5N1201.3832151000000a6N00.402185000000a6N241.6123927000000a6N480.87511440000000a6N960.57514180000000a6N1201.61452360000000

A1A2A3A4A5A6D1D2D3D4D5D6N0-0.3885-0.38540.10880.5656-0.18420.7888N1-0.4-0.40.10.6-0.20.8N240.5410.35460.39620.58560.3590.8367N20.50.40.40.60.40.8N480.729270090.772810.74780.9572N30.70.70.710.71N9611110.93071N411110.91N1200.24850.27540.61180.67270.51590.5858N50.20.30.60.70.50.6N0N24N48N96N120D1-0.38850.5410.729210.2485N0N24N48N96N120D2-0.38540.35460.700910.2754D1-0.40.50.710.2D30.10880.39620.772810.6118D2-0.40.40.710.3D40.56560.5856110.6727D30.10.40.710.6D5-0.18420.3590.74780.93070.5159D40.60.6110.7D60.78880.83670.957210.5858D5-0.20.40.70.90.5D60.80.8110.6

Sheet2KelPerlakuanWaktu MO tiap petakRata-rata / tiap petakRata-rata / tiap ccODD1D2D3D4D5D61234N0-0.3885-0.38540.10880.5656-0.18420.7888D1Sari apel + Saccharomyces cereviceaeN01929294029.2511.7 x 107-0.3885N240.5410.35460.39620.58560.3590.8367N24310360340410355142 x 1070.541N480.72920.70090.77281.2870.74780.9572N48360410450420410164 x 1070.7292N721.19981.04531.15211.29110.93071.3668N72490550480410482.5193 x 1071.1998N960.24850.27540.61180.67270.51590.5858N9613701380102017901390556 x 1070.2485D2Sari apel + Saccharomyces cereviceaeN01312111011.54.6 x 107-0.3854N2415026016023020080 x 1070.3546N48160230190250207.583 x 1070.7009N72260180280270247.599 x 1071.0453N96640620660610632.5253 x 1070.2754D3Sari apel + Saccharomyces cereviceaeN024211825228.8 x 1070.1088N24560460590470520208 x 1070.3962N48490580630580570228 x 1070.7728N72820550650550642.5257 x 1071.1521N96650650710625658.75263.5 x 1070.6118D4Sari apel + Saccharomyces cereviceaeN02616211118.57.4 x 1070.5656N24100220170160162.565 x 1070.5856N4824022018022021586 x 1071.287N7224025020025023594 x 1071.2911N96610450460460495198 x 1070.6727D5Sari apel + Saccharomyces cereviceaeN0242033352811.2x 107-0.1842N24220400290200277.5111 x 1070.359N48420440450470445178 x 1070.7478N72520410480450465186 x 1070.9307N96510600520410510204 x 1070.5159D6Sari apel + Saccharomyces cereviceaeN01730182522.59.0 x 1070.7888N2417019026024021586 x 1070.8367N48250300340340307.5123 x 1070.9572N72450490400430442.5177 x 1071.3668N96430480450420445178 x 1070.5858D1D2D3D4D5D5N0117000000-0.3885N2414200000000.541N4816400000000.7292N7219300000001.1998N9655600000000.248546000000-0.3854jumlah selod8000000000.3546117000000-0.38858300000000.700955600000000.24859900000001.045314200000000.54125300000000.275416400000000.7292880000000.108819300000001.199820800000000.396246000000-0.385422800000000.772825300000000.275425700000001.15218000000000.354626350000000.61188300000000.7009740000000.56569900000001.04536500000000.5856880000000.10888600000001.28720800000000.39629400000001.291126350000000.611819800000000.672722800000000.7728112000000-0.184225700000001.152111100000000.359740000000.565617800000000.74786500000000.585618600000000.930719800000000.672720400000000.51598600000001.287900000000.78889400000001.29118600000000.8367112000000-0.184212300000000.957211100000000.35917700000001.366820400000000.515917800000000.585817800000000.747818600000000.930717800000000.5858900000000.78888600000000.836712300000000.957217700000001.3668

Chart1

Sheet1KelPerlakuanWaktu(jam) MO Tiap PertakRata-rata / tiap petakRata-rata / tiap ccOD1234A1A2A3A4A5A6A1N045295200000000.0382N00.03820.7490.42910.3890.39270.4021N241068310410198.53940000001.8489N241.84891.79271.84891.85271.84651.6123N4841043031041039015600000000.9468N480.94680.79740.8950.74490.87270.8751N961451541501431485920000000.0276N960.02760.37940.01380.23990.44620.5751N1206078826771.752870000001.3832N1201.38321.54791.35461.52951.38321.6145A2N013149710.75430000000.749N0N24134137145251166.756670000001.7927N24N0N24N48N96N120N4892069064069073529400000000.7974N48N00.03821.84890.94680.02761.3832N9653096078087078531400000000.3794N960.7491.79270.79740.37941.5479N1206078826771.752870000001.5479N1200.42911.84890.8950.01381.3546A3N03336343233.751350000000.4291N00.3891.85270.74490.23991.5295N24190234221248223.258930000001.8489N240.39271.84650.87270.44621.3832N48340150500380342.513700000000.895N480.40211.61230.87510.57511.6145N9610110898108103.754150000000.0138N96N480.9468N120120160160170152.56100000001.3546N1200.7974A4N02528543435.251410000000.389N00.895N241351671781841666640000001.8527N240.7449N4890058050080069527800000000.7449N480.8727N96462463362630479.2519170000000.2399N960.000250.8751N120330390440450402.516100000001.5295N1200.00000025A5N043233120000000.3927N0N2423227331029327711080000001.8465N24N4837037032034035014000000000.8727N48N966455615959.752390000000.4462N96N1203740393537.751510000001.3832N120A1A2A3A4A5A6A6N01925172421.25850000000.4021N020000000430000001350000001410000001200000085000000N24251212238226231.759270000001.6123N243940000006670000008930000006640000001108000000927000000N4855019037033036014400000000.8751N48156000000029400000001370000000278000000014000000001440000000N9611308308901330104541800000000.5751N96592000000314000000041500000019170000002390000004180000000N12070055052059059023600000001.6145N12028700000028700000061000000016100000001510000002360000000od a1jumlah a1od a2jumlah a2od a3jumlah a3od a4jumlah a4od a5jumlah a5od a6jumlah a6a1N960.02765920000000.379431400000000.01384150000000.239919170000000.3927120000000.402185000000a1N00.0382200000000.749430000000.42911350000000.3891410000000.44622390000000.57514180000000a1N480.946815600000000.797429400000000.89513700000000.744927800000000.872714000000000.87511440000000a1N1201.38322870000001.54792870000001.35466100000001.529516100000001.38321510000001.6123927000000a1N241.84893940000001.79276670000001.84898930000001.85276640000001.846511080000001.61452360000000a2N00.74943000000a2N241.7927667000000a2N480.79742940000000a2N960.37943140000000a2N1201.5479287000000a3N00.4291135000000a3N241.8489893000000a3N480.8951370000000a3N960.0138415000000a3N1201.3546610000000a4N00.389141000000a4N241.8527664000000a4N480.74492780000000a4N960.23991917000000a4N1201.52951610000000a5N00.392712000000a5N241.84651108000000a5N480.87271400000000a5N960.4462239000000a5N1201.3832151000000a6N00.402185000000a6N241.6123927000000a6N480.87511440000000a6N960.57514180000000a6N1201.61452360000000

A1A2A3A4A5A6D1D2D3D4D5D6N0-0.3885-0.38540.10880.5656-0.18420.7888N1-0.4-0.40.10.6-0.20.8N240.5410.35460.39620.58560.3590.8367N20.50.40.40.60.40.8N480.729270090.772810.74780.9572N30.70.70.710.71N9611110.93071N411110.91N1200.24850.27540.61180.67270.51590.5858N50.20.30.60.70.50.6N0N24N48N96N120D1-0.38850.5410.729210.2485N0N24N48N96N120D2-0.38540.35460.700910.2754D1-0.40.50.710.2D30.10880.39620.772810.6118D2-0.40.40.710.3D40.56560.5856110.6727D30.10.40.710.6D5-0.18420.3590.74780.93070.5159D40.60.6110.7D60.78880.83670.957210.5858D5-0.20.40.70.90.5D60.80.8110.6

Sheet2KelPerlakuanWaktu MO tiap petakRata-rata / tiap petakRata-rata / tiap ccODD1D2D3D4D5D61234N0-0.3885-0.38540.10880.5656-0.18420.7888D1Sari apel + Saccharomyces cereviceaeN01929294029.2511.7 x 107-0.3885N240.5410.35460.39620.58560.3590.8367N24310360340410355142 x 1070.541N480.72920.70090.77281.2870.74780.9572N48360410450420410164 x 1070.7292N721.19981.04531.15211.29110.93071.3668N72490550480410482.5193 x 1071.1998N960.24850.27540.61180.67270.51590.5858N9613701380102017901390556 x 1070.2485D2Sari apel + Saccharomyces cereviceaeN01312111011.54.6 x 107-0.3854N2415026016023020080 x 1070.3546N48160230190250207.583 x 1070.7009N72260180280270247.599 x 1071.0453N96640620660610632.5253 x 1070.2754D3Sari apel + Saccharomyces cereviceaeN024211825228.8 x 1070.1088N24560460590470520208 x 1070.3962N48490580630580570228 x 1070.7728N72820550650550642.5257 x 1071.1521N96650650710625658.75263.5 x 1070.6118D4Sari apel + Saccharomyces cereviceaeN02616211118.57.4 x 1070.5656N24100220170160162.565 x 1070.5856N4824022018022021586 x 1071.287N7224025020025023594 x 1071.2911N96610450460460495198 x 1070.6727D5Sari apel + Saccharomyces cereviceaeN0242033352811.2x 107-0.1842N24220400290200277.5111 x 1070.359N48420440450470445178 x 1070.7478N72520410480450465186 x 1070.9307N96510600520410510204 x 1070.5159D6Sari apel + Saccharomyces cereviceaeN01730182522.59.0 x 1070.7888N2417019026024021586 x 1070.8367N48250300340340307.5123 x 1070.9572N72450490400430442.5177 x 1071.3668N96430480450420445178 x 1070.5858D1D2D3D4D5D5N0117000000-0.3885N2414200000000.541N4816400000000.7292N7219300000001.1998N9655600000000.248546000000-0.3854jumlah selod8000000000.3546117000000-0.38858300000000.700955600000000.24859900000001.045314200000000.54125300000000.275416400000000.7292880000000.108819300000001.199820800000000.396246000000-0.385422800000000.772825300000000.275425700000001.15218000000000.354626350000000.61188300000000.7009740000000.56569900000001.04536500000000.5856880000000.10888600000001.28720800000000.39629400000001.291126350000000.611819800000000.672722800000000.7728112000000-0.184225700000001.152111100000000.359740000000.565617800000000.74786500000000.585618600000000.930719800000000.672720400000000.51598600000001.287900000000.78889400000001.29118600000000.8367112000000-0.184212300000000.957211100000000.35917700000001.366820400000000.515917800000000.585817800000000.747818600000000.930717800000000.5858900000000.78888600000000.836712300000000.957217700000001.3668

Chart3

Sheet1KelPerlakuanWaktu(jam) MO Tiap PertakRata-rata / tiap petakRata-rata / tiap ccOD1234A1A2A3A4A5A6A1N045295200000000.0382N00.03820.7490.42910.3890.39270.4021N241068310410198.53940000001.8489N241.84891.79271.84891.85271.84651.6123N4841043031041039015600000000.9468N480.94680.79740.8950.74490.87270.8751N961451541501431485920000000.0276N960.02760.37940.01380.23990.44620.5751N1206078826771.752870000001.3832N1201.38321.54791.35461.52951.38321.6145A2N013149710.75430000000.749N0N24134137145251166.756670000001.7927N24N0N24N48N96N120N4892069064069073529400000000.7974N48N00.03821.84890.94680.02761.3832N9653096078087078531400000000.3794N960.7491.79270.79740.37941.5479N1206078826771.752870000001.5479N1200.42911.84890.8950.01381.3546A3N03336343233.751350000000.4291N00.3891.85270.74490.23991.5295N24190234221248223.258930000001.8489N240.39271.84650.87270.44621.3832N48340150500380342.513700000000.895N480.40211.61230.87510.57511.6145N9610110898108103.754150000000.0138N96N480.9468N120120160160170152.56100000001.3546N1200.7974A4N02528543435.251410000000.389N00.895N241351671781841666640000001.8527N240.7449N4890058050080069527800000000.7449N480.8727N96462463362630479.2519170000000.2399N960.000250.8751N120330390440450402.516100000001.5295N1200.00000025A5N043233120000000.3927N0N2423227331029327711080000001.8465N24N4837037032034035014000000000.8727N48N966455615959.752390000000.4462N96N1203740393537.751510000001.3832N120A1A2A3A4A5A6A6N01925172421.25850000000.4021N020000000430000001350000001410000001200000085000000N24251212238226231.759270000001.6123N243940000006670000008930000006640000001108000000927000000N4855019037033036014400000000.8751N48156000000029400000001370000000278000000014000000001440000000N9611308308901330104541800000000.5751N96592000000314000000041500000019170000002390000004180000000N12070055052059059023600000001.6145N12028700000028700000061000000016100000001510000002360000000od a1jumlah a1od a2jumlah a2od a3jumlah a3od a4jumlah a4od a5jumlah a5od a6jumlah a6a1N960.02765920000000.379431400000000.01384150000000.239919170000000.3927120000000.402185000000a1N00.0382200000000.749430000000.42911350000000.3891410000000.44622390000000.57514180000000a1N480.946815600000000.797429400000000.89513700000000.744927800000000.872714000000000.87511440000000a1N1201.38322870000001.54792870000001.35466100000001.529516100000001.38321510000001.6123927000000a1N241.84893940000001.79276670000001.84898930000001.85276640000001.846511080000001.61452360000000a2N00.74943000000a2N241.7927667000000a2N480.79742940000000a2N960.37943140000000a2N1201.5479287000000a3N00.4291135000000a3N241.8489893000000a3N480.8951370000000a3N960.0138415000000a3N1201.3546610000000a4N00.389141000000a4N241.8527664000000a4N480.74492780000000a4N960.23991917000000a4N1201.52951610000000a5N00.392712000000a5N241.84651108000000a5N480.87271400000000a5N960.4462239000000a5N1201.3832151000000a6N00.402185000000a6N241.6123927000000a6N480.87511440000000a6N960.57514180000000a6N1201.61452360000000

A1A2A3A4A5A6D1D2D3D4D5D6N0-0.3885-0.38540.10880.5656-0.18420.7888N1-0.4-0.40.10.6-0.20.8N240.5410.35460.39620.58560.3590.8367N20.50.40.40.60.40.8N480.729270090.772810.74780.9572N30.70.70.710.71N9611110.93071N411110.91N1200.24850.27540.61180.67270.51590.5858N50.20.30.60.70.50.6N0N24N48N96N120D1-0.38850.5410.729210.2485N0N24N48N96N120D2-0.38540.35460.700910.2754D1-0.40.50.710.2D30.10880.39620.772810.6118D2-0.40.40.710.3D40.56560.5856110.6727D30.10.40.710.6D5-0.18420.3590.74780.93070.5159D40.60.6110.7D60.78880.83670.957210.5858D5-0.20.40.70.90.5D60.80.8110.6

Sheet2KelPerlakuanWaktu MO tiap petakRata-rata / tiap petakRata-rata / tiap ccODD1D2D3D4D5D61234N0-0.3885-0.38540.10880.5656-0.18420.7888D1Sari apel + Saccharomyces cereviceaeN01929294029.2511.7 x 107-0.3885N240.5410.35460.39620.58560.3590.8367N24310360340410355142 x 1070.541N480.72920.70090.77281.2870.74780.9572N48360410450420410164 x 1070.7292N721.19981.04531.15211.29110.93071.3668N72490550480410482.5193 x 1071.1998N960.24850.27540.61180.67270.51590.5858N9613701380102017901390556 x 1070.2485D2Sari apel + Saccharomyces cereviceaeN01312111011.54.6 x 107-0.3854N2415026016023020080 x 1070.3546N48160230190250207.583 x 1070.7009N72260180280270247.599 x 1071.0453N96640620660610632.5253 x 1070.2754D3Sari apel + Saccharomyces cereviceaeN024211825228.8 x 1070.1088N24560460590470520208 x 1070.3962N48490580630580570228 x 1070.7728N72820550650550642.5257 x 1071.1521N96650650710625658.75263.5 x 1070.6118D4Sari apel + Saccharomyces cereviceaeN02616211118.57.4 x 1070.5656N24100220170160162.565 x 1070.5856N4824022018022021586 x 1071.287N7224025020025023594 x 1071.2911N96610450460460495198 x 1070.6727D5Sari apel + Saccharomyces cereviceaeN0242033352811.2x 107-0.1842N24220400290200277.5111 x 1070.359N48420440450470445178 x 1070.7478N72520410480450465186 x 1070.9307N96510600520410510204 x 1070.5159D6Sari apel + Saccharomyces cereviceaeN01730182522.59.0 x 1070.7888N2417019026024021586 x 1070.8367N48250300340340307.5123 x 1070.9572N72450490400430442.5177 x 1071.3668N96430480450420445178 x 1070.5858D1D2D3D4D5D5N0117000000-0.3885N2414200000000.541N4816400000000.7292N7219300000001.1998N9655600000000.248546000000-0.3854jumlah selod8000000000.3546117000000-0.38858300000000.700955600000000.24859900000001.045314200000000.54125300000000.275416400000000.7292880000000.108819300000001.199820800000000.396246000000-0.385422800000000.772825300000000.275425700000001.15218000000000.354626350000000.61188300000000.7009740000000.56569900000001.04536500000000.5856880000000.10888600000001.28720800000000.39629400000001.291126350000000.611819800000000.672722800000000.7728112000000-0.184225700000001.152111100000000.359740000000.565617800000000.74786500000000.585618600000000.930719800000000.672720400000000.51598600000001.287900000000.78889400000001.29118600000000.8367112000000-0.184212300000000.957211100000000.35917700000001.366820400000000.515917800000000.585817800000000.747818600000000.930717800000000.5858900000000.78888600000000.836712300000000.957217700000001.3668