efek gel ekstrak ikan gabus (channa striata)

EFEK GEL EKSTRAK IKAN GABUS (Channa Striata)

TERHADAP JUMLAH SEL MAKROFAG

PASCAGINGIVEKTOMI PADA TIKUS

WISTAR JANTAN

SKRIPSI

Diajukan untuk memenuhi tugas dan melengkapi

syarat memperoleh gelar sarjana Kedokteran Gigi

Oleh :

AMALIA KHOIRI SILALAHI

NIM. 130600063

FAKULTAS KEDOKTERAN GIGI

UNIVERSITAS SUMATERA UTARA

MEDAN 2018


Fakultas Kedokteran Gigi

Departemen Periodonsia

Tahun 2018

Amalia Khoiri Silalahi

Efek Gel Ekstrak Ikan Gabus (Channa Striata) terhadap Jumlah Sel Makrofag

Pasca Gingivektomi pada Tikus Wistar Jantan

51 Halaman

Ikan gabus jenis Channa Striata sangat kaya akan sumber albumin, salah satu

jenis protein penting yang diperlukan tubuh manusia setiap hari. Albumin merupakan

kandungan protein dengan volume atau jumlah terbanyak dalam darah. Dalam proses

penyembuhan atau pemulihan luka, albumin berperan penting karena dalam proses

metabolisme sel dapat membentuk jaringan sel baru. Keberadaan sel makrofag

berhubungan dalam proses penyembuhan luka. Makrofag adalah sel yang berperan

penting dalam sistem imunitas tubuh melawan patogen. Tingginya jumlah makrofag

menunjukkan adanya fagositosis lebih banyak terhadap bakteri sehingga pembersihan

luka berjalan lebih cepat. Tujuan penelitian ini untuk mengetahui efek gel ekstrak

ikan gabus (Channa Striata) terhadap jumlah sel makrofag pasca gingivektomi pada

tikus wistar jantan. Penelitian ini adalah penelitian eksperimental dengan Post Test

Control Group Design dengan jumlah sampel sebanyak 30 ekor tikus wistar jantan

yang memenuhi kriteria ekslusi dan inklusi. Analisis data menggunakan One Way

Anova dan jika p ≤ 0,05 maka dilanjutkan dengan Post Hoc Test – Tuckey. Hasil

penelitian ini menunjukkan rata- rata jumlah makrofag untuk masing-masing

konsentrasi tidak berbeda secara signifikan. Pada penelitian ini dapat disimpulkan

bahwa gel ekstrak ikan gabus dapat menurunkan jumlah sel makrofag pada pasca

gingivektomi.

Kata Kunci : Gel Ekstrak Ikan Gabus, Sel Makrofag, Pasca Gingivektomi

Daftar Rujukan : 21 (2001 – 2017)


Faculty of Dentistry

Department of Periodontology

2018

Amalia Khoiri Silalahi

The effect of cork fish’s extract gel (Channa Striata) on the sum of macrophage

cells on post gingivectomy in wistar rats

x + 37 pages

Channa Striata is type from cork fish that is very rich in albumin, an important

type of protein needed by human body every day. Albumin is the volume of protein

or the highest amount in the blood. In the process of healing or recovery of wounds,

albumin plays an important role because in the metabolic process cells can form new

cell tissue. The presence of macrophage cells is related to the wound healing process.

Macrophages cells play an important role in the body's immune system against

pathogens. The high number of macrophages cells shows that there is more

phagocytosis against bacteria so that wound cleaning runs faster. The purpose of this

study was to determine the effect of cork fish’s extract gel (Channa Striata) on the

sum of macrophage cells on post gingivectomy in wistar rats. This study is an

experimental study with Post Test Control Group Design with a total sample of 30

wistar rats that include the exclusion and inclusion criteria. Data analysis using One

Way Anova and if p< 0.05 then continued with Post Hoc Test - Tuckey. The results

of this study indicate that the average number of macrophages cells for each

concentration was not significantly different. In this study it can be concluded that

cork fish’s extract gel can reduce the number of macrophage cells in post

gingivectomy.

Keywords: Cork Fish’s Extract Gel, Macrophage Cells, Post Gingivectomy

Reference List: 21 (2001 - 2017)


vi


vii


viii

DAFTAR ISI

Halaman

HALAMAN JUDUL .......................................................................................

PERNYATAAN PERSETUJUAN ................................................................

HALAMAN TIM PENGUJI SKRIPSI ...........................................................

KATA PENGANTAR ..................................................................................... vi

DAFTAR ISI ................................................................................................... viii

DAFTAR TABEL ........................................................................................... x

DAFTAR GAMBAR ...................................................................................... xi

DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................... xii

BAB 1 PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang .............................................................................. 1

1.2 Rumusan Masalah ......................................................................... 3

1.3 Tujuan Penelitian ........................................................................... 3

1.4 Manfaat Penelitian ........................................................................ 3

BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Ikan Gabus .................................................................................... 4

2.1.1 Albumin ...................................................................................... 6

2.2 Gel .................................................................................................. 8

2.3 Tikus Galur Wistar ........................................................................ 8

2.4 Gingivektomi ................................................................................. 10

2.4.1 Tahapan Prosedur ....................................................................... 11

2.5 Makrofag ........................................................................................ 15

2.5.1 Perkembangan Makrofag ........................................................... 15

2.5.2 Bentuk dan Sifat Makrofag ........................................................ 16

2.5.3 Fungsi Makrofag ........................................................................ 18

2.6 Penyembuhan Luka ....................................................................... 19

2.6.1 Tahap Penyembuhan Luka ......................................................... 19

2.7 Kerangka Teori .............................................................................. 22

2.8 Kerangka Konsep .......................................................................... 23

BAB 3 METODOLOGI PENELITIAN


ix

3.1 Rancangan Penelitian .................................................................... 23

3.2 Lokasi dan Waktu Penelitian ........................................................ 23

3.2.1 Lokasi Penelitian ......................................................................... 23

3.2.2 Waktu Peneltian .......................................................................... 24

3.3 Populasi, Sampel dan Besar Sampel .............................................. 24

3.3.1 Populasi Sampel .......................................................................... 24

3.3.2 Sampel Penelitian ........................................................................ 24

3.3.3 Besar Sampel .............................................................................. 24

3.4 Variabel Penelitian ........................................................................ 25

3.4.1 Variabel Bebas ........................................................................... 25

3.4.2 Variabel Terikat ......................................................................... 25

3.4.3 Variabel Terkendali .................................................................... 25

3.4.4 Variabel Tidak Terkendali ......................................................... 25

3.5 Defenisi Operasional ..................................................................... 25

3.6 Alat dan Bahan ............................................................................... 26

3.7 Prosedur Penelitian ....................................................................... 30

3.7.1 Pembuatan Ekstrak Ikan Gabus ................................................. 30

3.7.2 Prosedur Gingivektomi .............................................................. 34

3.7.3 Prosedur Pemeriksaan Histologi ................................................ 36

3.8 Alur Penelitian .............................................................................. 37

3.9 Etika Penelitian ............................................................................ 38

3.10 Pengolahan dan Analisis Data ..................................................... 38

BAB 4 HASIL PENELITIAN ........................................................................ 41

BAB 5 PEMBAHASAN .................................................................................. 44

BAB 6 KESIMPULAN DAN SARAN

6.1 Kesimpulan .................................................................................... 49

6.2 Saran ............................................................................................... 49

DAFTAR PUSTAKA .................................................................................... 50


x

DAFTAR TABEL

Gambar Halaman

1. Kandungan Gizi Ikan Gabus .................................................... 5

2. Perhitungan Jumlah Sel Makrofag Pascagingivektomi Pada Tikus Wistar

Setelah Pemberian Gel Ekstrak Ikan Gabus menggunakan Uji One Way

Anova........................................................................................ 40


xi

DAFTAR GAMBAR

Gambar Halaman

1. Ikan Gabus ..................................................................................... 4

2. Tikus Galur Wistar ......................................................................... 8

3. Penandaan Dasar Saku ................................................................... 10

4. Insisi Gingivektomi ........................................................................ 11

5. Daerah Lapangan Kerja Sesaat Setelah Penyingkiran Dinding Saku

.........................................................................................................

......................................................................................................... 12

6. Alat dan Bahan ................................................................................ 27

7. Alat dan Bahan ............................................................................... 29

8. Pembuatan Ekstrak Ikan Gabus ..................................................... 30

9. Pembuatan Gel ................................................................................ 33

10. Prosedur Gingivektomi ................................................................ 35

11. Pemeriksaan Histologis Sel Makarofag ......................................... 40


xii

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran

1. Lembar Angaran Biaya Penelitian

2. Lembar Jadwal Penelitian

3. Biodata Peneliti

4. Hasil Analisis Statistik

5. Ethical Cle


1

BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Ikan gabus merupakan salah satu jenis ikan air tawar dari genus Channa yang

banyak ditemukan di sungai-sungai maupun perairan umum. Genus Channa terdiri

dari 4 spesies yaitu Channa striata (ikan gabus), Channa gachua (ikan bakak),

Channa micropeltes (ikan toman) dan Channa lucius (ikan bujok). Badannya bulat,

pipih pada bagian posterior, punggungnya kecokelatan hampir hitam, bagian perut

putih kecokelatan. Ikan gabus sendiri mempunyai senyawa yang penting bagi tubuh,

seperti protein dan beberapa mineral. Kadar protein ikan gabus mencapai 25,5%

dibandingkan protein ikan lainnya, albumin ikan gabus cukup tinggi mencapai 6,22%

dan daging ikan gabus mengandung mineral seng dengan kadar 1,74 mg/100 gram.1

Menurut penelitian Suprayitno E. (2003), menyatakan bahwa ikan gabus jenis

canna striata sangat kaya akan sumber albumin, salah satu jenis protein penting yang

diperlukan tubuh manusia setiap hari. Sumber albumin ikan gabus sangat baik

digunakan bagi penderita hipoalbumin (rendah albumin) dan penyembuhan luka

pasca operasi maupun luka bakar.1 Albumin merupakan kandungan protein dengan

volume atau jumlah terbanyak dalam darah. Dalam proses penyembuhan atau pemulihan

luka, albumin sangat berperan penting karena dalam proses metabolisme sel, albumin

berperan dalam pembentukan jaringan sel baru. Oleh karena itu, albumin cocok

digunakan untuk menstimulasi pembentukan sel baru yang rusak akibat pembedahan saat

operasi. Bahkan, di daerah pedesaan, anak laki-laki pasca khitan selalu dianjurkan

mengonsumsi ikan jenis ini agar penyembuhan lebih cepat, wanita habis melahirkan,

dan pasien pasca operasi dianjurkan mengonsumsi untuk mempercepat penyembuhan

luka.1 Salah satunya pada pasien pasca gingivektomi.

Gingivektomi adalah pemotongan jaringan gingiva dengan membuang

dinding lateral poket yang bertujuan untuk menghilangkan poket dan keradangan

gingiva sehingga didapat gingiva yang fisiologis, fungsional dan estetik baik.


2

Keuntungan gingivektomi adalah teknik sederhana, dapat mengeliminasi poket secara

sempurna, lapangan penglihatan baik, morfologi gingiva dapat diramalkan sesuai

keinginan.2

Ekstrak ikan gabus dapat meningkatkan kadar albumin pada hipoalbuminemia

dan mempercepat proses penyembuhan pada pasien pasca operasi. Potensi ekstrak

ikan gabus dalam sintesis jaringan, penyembuhan luka, dan menghambat produksi

radikal bebas yang penting dalam kedokteran regeneratif serta agen anti-penuaan.

Topik ini baru-baru ini sebagian besar dibahas, termasuk di "The 7th Konferensi Asia

Pasifik Anti-Aging dan Regenerative Medicine", di Bali Oktober 2008. Disamping

ekstrak, dalam bentuk krim memiliki kemampuan untuk meningkatkan kekuatan

menarik kulit. Proses ini terjadi menyerupai fase keempat langkah terakhir dari

penyembuhan luka normal. Kehadiran jaringan granulasi meningkatkan kekuatan

menarik pada luka. Mekanisme detail dari proses penyembuhan luka tersebut, masih

perlu penelitian lebih lanjut.3

Keberadaan sel makrofag berhubungan dalam proses penyembuhan luka.4

Makrofag adalah sel yang berperan penting dalam sistem imunitas tubuh melawan

patogen. Salah satu peran utama makrofag dalam sistem imunitas alami adalah fungsi

fagositosis, yang bertujuan untuk mengeliminasi partikel ekstraseluler, sel yang rusak

atau mati, dan juga bakteri patogen.5 Tingginya jumlah makrofag menunjukkan

adanya fagositosis lebih banyak terhadap bakteri sehingga pembersihan luka berjalan

lebih cepat.4

Makrofag berperan untuk penyembuhan, namun dapat menyebabkan

peradangan yang berlebihan atau fibrosis dalam jumlah yang tidak terkontrol.

Disfungsi makrofag atau jumlah makrofag yang rendah dalam proses perbaikan

jaringan menyebabkan penyembuhan luka tidak optimal, terhambatnya proliferasi

fibroblas dan angiogenesis. Makrofag merupakan unsur sel yang penting pada

pembentukan jaringan granulasi. Selain membersihkan debris ekstraseluler dan fibrin

pada tempat jejas, makrofag juga menginduksi proliferasi fibroblas dan produksi

matriks ekstraseluler pada hari ke-2. Penurunan jumlah makrofag pada hari ke-5

menunjukkan bahwa proses inflamasi telah banyak berkurang, dan luka akan diisi

oleh proliferasi jaringan.6


3

Walaupun ekstrak ikan gabus (Channa Striata) telah banyak digunakan dalam

terapi di bidang kesehatan, namun belum ada penelitian yang menunjukkan pengaruh

ekstrak ikan gabus (Channa Striata) terhadap jumlah sel makrofag pasca

gingivektomi dan efektifitasnya dalam bentuk sediaan gel. Sehingga peneliti ingin

membuat ekstrak albumin dari ikan gabus dan mengembangkan ekstrak albumin

menjadi gel penyembuh luka pasca gingivektomi dengan melihat jumlah sel

makrofag pada tikus wistar jantan.

1.2 Rumusan Masalah

Rumusan masalah pada penelitian ini adalah:

1. Bagaimana potensi gel ekstrak ikan gabus (Channa Striata) terhadap

jumlah sel makrofag pascagingivektomi pada tikus wistar jantan ?

1.3 Tujuan Penelitian

Tujuan dari penelitian ini adalah:

1. Untuk mengetahui potensi gel ekstrak ikan gabus (Channa Striata)

terhadap jumlah sel makrofag pascagingivektomi pada tikus wistar jantan.

1.4 Manfaat Penelitian

1. Hasil penelitian ini bermanfaat memberikan informasi tentang potensi gel

ekstrak ikan gabus (Channa Striata) terhadap jumlah sel makrofag

pascagingivektomi pada tikus wistar jantan yang merupakan awal pemikiran

untuk mengadakan penelitian lebih lanjut.

2. Hasilnya diharapkan dapat berguna sebagai pertimbangan bagi dokter gigi

saat melakukan perawatan pada pasien pascagingivektomi.


4

BAB 2

TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Ikan Gabus

Ikan gabus dikenal dengan banyak nama lokal dan daerah. Ada yang

menyebutnya sebagai aruan (Melayu dan Banjar), bogo, licingan, kutuk (Jawa),

kocolan (Betawi). Ada beberapa jenis ikan gabus yang umum ditemui di Indonesia.

Pertama adalah channa striata yang banyak ditemuin memiliki ukuran tubuh tidak

terlalu besar. Kedua adalah channa micropeltes atau sering disebut gabus toman yang

merupakan jenis gabus berukuran besar dengan panjang mencapai 1m dan berat 5kg.7

Adapun secara taksonomi ikan gabus tergolong dalam:8

Kingdom: Animalia

Filum: Chordata

Subfilum: vertebrata

Superkelas: pisces

Kelas: Actinopterygii

Superordo: Teleostei

Ordo: Perceformes

Famili: Channidae

Genus: Ophiocephalus

Spesies: Ophiocephalus striatus


5

Gambar 1. Ikan gabus (Channa Striata)

Ikan gabus adalah salah satu ikan ekonomis penting di Indonesia.

Belakangan ini ikan gabus diketahui mengandung protein dan albumin yang sangat

penting bagi kesehatan. Penggunaan ikan gabus untuk pengobatan secara tradisional

telah dilakukan di beberapa daerah. Ikan gabus sering dikonsumsi oleh perempuan

yang baru melahirkan terutama di Sulawesi Selatan. Konsumsi ikan gabus di Tana

Toraja dan Enrekang, sudah banyak diberikan sejak dulu oleh anak-anak karena

dipercaya dapat meningkatkan kekebalan tubuh anak-anak. Ikan gabus ini juga

memiliki kandungan protein yang tinggi. Dengan menjadikan ikan gabus dalam menu

diet tiap hari maka dapat memenuhi kebutuhan akan protein dalam tubuh. Kebutuhan

protein menurut FAO/WHO/UNU adalah konsumsi yang diperlukan untuk mencegah

kehilangan protein tubuh dan memungkinkan produksi protein yang diperlukan dalam

masa pertumbuhan, kehamilan, atau menyusui. Kandungan gizi ikan gabus dapat di

uraikan di tabel sebagai berikut:

Tabel 1. Kandungan gizi ikan gabus

Komponen Kimia Jumlah

Kalori (kal) 69

Protein (g) 25,2

Lemak (g) 1,7

Karbohidrat (g) -

Sodium (mg) -


6

Kalium (mg) -

Besi (mg) 0,9

Kalsium (mg) 62

Fosfor (mg) 176

Vit. A (SI) 150

Vit. B I (mg) 0,04

Air (g) 69

Ikan gabus merupakan alternatif lain sebagai sumber protein albumin karena

diketahui mengandung senyawa-senyawa penting bagi tubuh manusia diantaranya

protein yang cukup tinggi, lemak, air dan mineral, terutama mineral Zinc (Zn). Zinc

berfungsi sebagai anti oksidan yang melindungi sel-sel, mempercepat proses

penyembuhan luka, mengatur ekspresi dalam limfosit dan protein, memperbaiki nafsu

makan dan stabilisasi berat badan. Sebagaimana protein ikan pada umumnya, ikan

gabus mengandung tiga jenis protein yaitu protein larut (yang mudah dihilangkan

dengan cara ekstraksi), protein stroma jaringan ikat, dan protein kontraktil.

Sarkoplasma merupakan cairan yang ada di antara myofibril. Protein sarkoplasma

disebut juga miogen termasuk dalam protein ini adalah albumin, mioalbumin,

mioprotein, globulin-X dan miostromin. Albumin, mioalbumin dan mioprotein

mempunyai sifat mudah larut dalam air. Globulin dan miostromin sukar larut dalam

air tetapi mudah larut dalam larutan basa atau asam lemah. Protein ini larut dalam air

dan larutan garam berkekuatan ion rendah (konsentrasi garam 0,5%), dapat

digumpalkan dengan suhu (900 C).

Para peneliti di Asia Tenggara, khususnya Malaysia dan Indonesia, telah

membuktikan bahwa ikan gabus merupakan salah satu ikan penting bagi kesehatan.

Ekstrak ikan gabus dapat dimanfaatkan sebagai pengganti serum albumin yang biasa

digunakan untuk menyembuhkan luka operasi. Untuk memanfaatkan ikan gabus

sebagai obat, ikan diambil ekstraknya dengan cara mengukusnya, lalu menampung

airnya. Air ekstrak langsung diminumkan kepada pasien yang baru operasi.


7

2.1.1 Albumin

Albumin merupakan protein utama dalam plasma manusia dan menyusun

sekitar 60% dari total plasma. Hati menghasilkan 12 g albumin per hari yang

merupakan 25% dari total sintesis protein hepatik dan separuh dari seluruh protein

yang disekresikan organ. Sebagai sumber bahan pangan yang mengandung protein

dan albumin, ikan gabus diperlukan dalam jumlah yang banyak dan kebutuhan akan

filtrat albumin dirumah sakit juga semakin meningkat. Untuk memenuhi kebutuhan

tersebut, diperlukan pasokan ikan gabus yang banyak dengan variasi bobot.

Peran utama albumin didalam tubuh sangat penting, yaitu membantu

pembentukan sel baru. Tanpa albumin, sel-sel di dalam tubuh akan sulit bergenerasi

sehingga cepat mati dan tidak berkembang. Albumin juga berperan penting dalam

penyembuhan luka. Didalam ilmu kedokteran, albumin biasa dimanfaatkan untuk

mempercepat pemulihan jaringan sel tubuh, misalnya karena operasi atau

pembedahan. Itulah sebabnya pasien pasca operasi sangat dianjurkan mengkonsumsi

ikan gabus dengan harapan dapat membantu proses penyembuhan luka didalam

tubuh.

Penelitian yang dilakukan oleh Taslim (2009) menunjukkan kadar albumin

pasien dalam pengobatan meningkat tajam setelah beberapa kali mengonsumsi ikan

gabus sehingga mempercepat proses penyembuhan. Penelitian serupa dilakukan

Asikin (1999) yang memperlihatkan pemberian 2 kg ikan gabus masak setiap hari

kepada pasien pasca operasi dapat meningkatkan albumin dari kadar yang rendah (1,8

gr/dl) menjadi normal. Penelitian lain yang dilakukan melaporkan bahwa pemberian

ekstrak ikan gabus selama 10-14 hari dapat meningkatkan kadar albumin darah 0,6-

0,8 gr/dl. Selain membantu pembentukan jaringan baru, albumin yang berada didalam

darah juga berfungsi untuk mengatur keseimbangan air didalam sel memberikan gizi

didalam sel, dan membantu mengeuarkan produk buangan. Albumin juga berfungsi

mempertahankan pengaturan cairan didalam tubuh.

Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak ikan gabus merupakan sumber

mineral (seng, tembaga, dan besi). Pendukung proses sintesis jaringan sehingga

sangat berperan dalam proses penyembuhan luka. Mineral seng, tembaga, dan besi


8

sangat diperlukan dalam berbagai proses metabolisme tubuh. Ekstrak ikan gabus

mengandung albumin dengan kadar cukup tinggi (2,17± 0,14 g/100ml), lebih tinggi

dibandingkan albumin dalam susu (0,17 g/100ml), tetapi lebih rendah jika

dibandingkan dengan albumin putih telur yaitu 7,74 g/100g. Ekstrak ikan gabus

secara sederhana dapat dilakukan sendiri dirumah tangga. Bagi mereka yang belum

bisa mengkonsumsi makanan berat, dapat merebus ikan gabus hingga sarinya keluar.8

2.2 Gel

Pemberian obat secara lokal pada bidang periodontologi dianggap efisien,

karena obat untuk patogen yang spesifik dapat diberikan secara langsung pada poket

dan menerima konsentrasi yang efektif. Pemberian obat secara lokal lebih

menguntungkan dibanding sistemik karena efek sampingnya lebih kecil, sedikit

kemungkinan untuk resisten terhadap bakteri dan kesesuaian yang tepat.9

Sediaan gel sangat baik digunakan untuk pengobatan karena pemberian obat

dapat dikontrol dan bahan medikamen terlindung dari lingkungan yang tidak baik.

Pemberian obat secara lokal dengan bentuk gel merupakan perawatan yang

menguntungkan dan dapat mengeliminasi efek samping. Sediaan gel yang dapat

diberikan dengan syringe mempermudah memasukkan bahan yang ada di dalam gel

tersebut ke daerah luka.10

2.3 Tikus wistar jantan

Tikus (Rattus norvegicus) atau yang dikenal sebagai “tikus putih” adalah

hewan yang paling sering digunakan sebagai model dalam penelitian. Tikus memiliki

karakteristik genetik yang unik, mudah berkembang biak, murah, serta mudah untuk

mendapatkannya, oleh karena itu tikus sering digunakan pada berbagai macam

penelitian medis. Tikus merupakan hewan yang melakukan aktivitasnya pada malam

hari (nocturnal).

Tikus putih (Rattus norvegicus) atau biasa dikenal dengan nama lain Norway

Rat berasal dari wilayah Cina dan menyebar ke Eropa bagian barat.11

Pada wilayah

Asia Tenggara, tikus ini berkembang biak di Filipina, Indonesia, Laos, Malaysia, dan


9

Singapura. Tikus digolongkan ke dalam Ordo Rodentia (hewan pengerat), Famili

Muridae dari kelompok mamalia (hewan menyusui). Tikus putih merupakan strain

albino dari Rattus norvegicus. Tikus memiliki beberapa galur yang merupakan hasil

pembiakkan sesama jenis atau 15 persilangan.

Galur tikus yang sering digunakan untuk penelitian adalah galur Wistar dan

Sprague dawley. Tikus putih (Rattus norvegicus) galur Sprague dawley

dikembangkan dari tikus putih galur Wistar. Ciri-ciri galur Wistar, yaitu bertubuh

panjang dengan kepala lebih sempit, telinga tebal dan pendek dengan rambut halus,

mata berwarna merah, dan ekornya tidak pernah lebih panjang dari tubuhnya. Bobot

badan tikus jantan pada umur dua belas minggu mencapai 240 gram sedangkan

betinanya mencapai 200 gram. Tikus memiliki lama hidup berkisar antara 4 – 5 tahun

dengan berat badan umum tikus jantan berkisar antara 267 – 500 gram dan betina 225

– 325 gram. Galur ini berasal dari peternakan Institut Wistar pada tahun 1906.11

Klasifikasi tikus putih (Rattus norvegicus) galur Wistar menurut Myres & Armitage :

Kingdom : Animalia

Filum : Chordata

Kelas : Mamalia

Ordo : Rodentia

Subordo : Sciurognathi

Famili : Muridae

Sub-Famili : Murinae

Genus : Rattus

Spesies : Rattus norvegicus

Galur/Strain : Wistar


10

Gambar 2. Tikus putih galur Wistar.

2.4 Gingivektomi

Gingivektomi adalah pemotongan jaringan gingiva dengan membuang

dinding poket. Gingivektomi menyediakan aksebilitas dan visiblitas untuk

permbersihan kalkulus dan menghaluskan permukaan akar secara tuntas. Sehingga

akan tercipta lingkungan yang menguntungkan bagi penyembuhan gingiva dan

restorasi kontur gingiva yang fisiologis.13

Teknik gingivektomi diindikasikan untuk kasus sebagai berikut:14

1. Eliminasi dari poket supraboni, tergantung pada kedalamannya dan

poket

2. terdiri dari jaringan fibrous kaku.

3. Eliminasi dari pembesaran gingiva

4. Eliminasi dari abses periodontal supraboni

Gingivektomi tidak dapat diindikasikan apabila:12

1. Terdapat cacat tulang yang memerlukan koreksi atau memerlukan

pemeriksaaan bentuk dan morfologi tulang alveolar.

2. Dasar saku berada dekat, pada atau apikal batas mukosa gingival.

3. Pembesaran gingiva yang terlalu besar, seperti yang bisa terjadi pada

hiperplasia gingiva yang diinduksi obat-obatan.


11

4. Karena pertimbangan estetis, khususnya pada saku di sisi vestibular

gigi anterior rahang atas.

2.4.1 Tahapan prosedur

1. Anastesi. sebelum melalkukan gingivektomi, daerah yang dikerjakan

terlebih dulu diberi anastesi lokal.

2. Penandaan dasar saku. Penandaan dasar saku dilakukan dengan alat

penanda saku ( pocketmarker ). Alat dipegang dengan ujung penanda sejajar dengan

poros panjang gigi. Ujung alat yang lurus di selipkan kedalam saku sampai

menyentuh dasar saku. Penandaan dilakukan secara sistematis, pada sisi mesial,

tengah, dan distal dari gigi di daerah yang akan dilakukan gingivektomi.

Gambar 3. Penandaan dasar saku 10

A. Penanda dasar saku ditempatkan pada

dasar saku.

B. Titik pendarahan dan rencana garis insisi.

3. Mereseksi gingiva. Reseksi gingiva dapat dilakukan dengan beberapa

macam alat: pisau gingva, pisau bedah ( skalpel ), gunting, alat bedah elektro, atau

laser.

Apabila gingivektomi dilakukan dengan pisau gingivektomi atau pisau

bedah, mula-mula dilakukan insisi. Insisi bias berupa insisi kontiniu ( continuous

incision ) atau insisi diskontiniu ( discontinuous incision ).


12

Insisi kontiniu dimulai dari daerah paling distal yang akan di gingivektomi

tanpa terputus-putus mengikuti tanda dasar saku ke arah mesial. Sebaiknya pada

insisi diskontiniu insisinya dimulai dari sudut distal gigi paling distal mengikuti tanda

dasar saku menuju sudut distal dari gigi disebelah mesialnya. Insisi selanjutnya

dimulai pada posisi di mana insisi yang pertama menyilang ruang interdental dan

diarahkan ke sudut distal dari gigi berikutnya. Prosedur yang sama diulangi sampai

insisi pada semua daerah yang akan dibedah diselesaikan.

Gambar 4. Insisi gingivektomi12

A. Insisi kontiniu

B. Insisi diskontiniu

Pisau yang biasa digunakan adalah pisau gingivektomi ( pisau Kirkland )

untuk sisi vestibular dan oral, dan pisau interdental ( pisau orban ) untuk daerah

interdental. Insisi dilakukan dengan mengikuti persyaratan berikut:12

a. Insisi dimulai apikal dari tanda dasar saku dan diarahkan ke koronal

menuju ke satu titik khayal diantara dasar saku dengan krista tulang alveolar. Apabila

syarat ini dipenuhi, tersingkapnya tulang alveolar akan terhindari. Apabila tulang

alveolar sampai tersingkap, maka tulang yang tersingkap harus ditutup secara

sempurna dengan pembalut periodontal.

b. Insisi dibuat dengan membentuk sudut ( dibevel ) 45E terhadap

permukaan gigi.


13

c. Insisi harus mengembalikan bentuk festoon gingiva. Kontur gingiva

yang normal ditandai dengan adanya festoon atau scalloped ( berbentuk seperti busur

). Namun pada beberapa kasus hal ini tidak dapat diikuti sepenuhnya, kaerna lebih

penting adalah penyingkiran sakunya.

d. Insisi harus menembus jaringan lunak sampai menyentuh permukaan

gigi. Insisi tidak sempurna akan menyukarkan pada hendak menyingkirkan jaringan

lunak.

Gambar 5. Daerah lapangan kerja sesaat setelah

12

penyingkiran dinding saku

1. Jaringan granulasi.

2. Kalkulus dan deposit lainnya.

3. Daerah yang tadinya dasar saku.

4. Menyingkirkan gingiva bebas dan gingiva interdental. Gingiva

yang telah direseksi disingkirkan dengan menggunakan kuret. Alatt kuret diselipkan

sedalam mungkin kedaerah yang diinsisi sampai berkontak dengan permukaan gigi,

lalu dengan sapuan kearah koronal jaringan yang telah direseksi disingkirkan.

5. Penyingkiran jaringan granulasi dan kalkulus. Setelah gingiva

bebas dan gingiva interdental disingkirkan akan tersingkap jaringan granulasi yang

terinflamasi dan kalkulus yang belum tersingkirkan pada fase inisial. Jaringan

granulasi lebih dulu disingkirkan dengan jalan pengkuretan sebelum melakukan

penskeleran. Hal ini dimaksudkan untuk menghindari pendarahan dari jaringan

granulasi yang dapat menghadapi pandangan pada waktu penskeleran.


14

6. Pembersihan lapangan kerja. Daerah yang di gingivektomi dibilas

dengan akuades atau larutan garam fsiologis. Luka bedah kemudian dikeringkan

dengan menekankan gulungan kain kasa yang dibentuk seperti huruf U ke daerah

luka.

7. Pemasangan pembalut periodontal. Setelah bekuan darah terbentuk,

luka bedah ditutup dengan pembalut periodontal. Pembalut dibuka seminggu

kemudian.

Gingivektomi yang dilakukan dengan alat gunting prinsip kerjanya adalah

sama, hanya saja tahap reseksi dan penyingkiran gingva bebas dan gingiva interdental

dilakukan sekaligus pada waktu gingiva digunting dengan mengikuti tanda dasar

saku.

Apabila gingivektomi dilakukan dengan alat bedah elektro, reseksi gngiva

dilakukan dengan elektroda berbentuk batang/jarum ( needle electrode ), sedangkan

pengembalian bentuk festoon gingiva dilakukan dengan elektroda berbentuk oval

( ovoid electrode). Beberapa hal yang perlu diperhatikan dalam menggunakan

elektroda adalah: 12

1. Elektroda digerakkan dengan sapuan sepert mencukur.

2. Sapuan sebaiknya dilakukan secara berselang- seling dengan interval

waktu 5-10 detik untuk mencegah timbulnya panas berlebihan.

3. Elektroda harus senatiasa bergerak, tidak dibiarkan berhenti pada waktu

ujungnya menyentuh gingiva.

4. Ujung eletroda jangan sampai menyentuh tulang.

Gingvektomi dapat juga dilakukan dengan alat laser, baik laser CO2 (

karbon dioksida ) yang mempunyai panjang gelombang 10.600nm, atau laser Nd:

YAG ( neodymium : yttrium-aluminum-gamet) dengan panjang gelombang 1064 nm.

Penggunaan laser untuk tujuan ini masih baru, dan kemungkinan adanya efek

sampingan masih harus diteliti.12


15

2.5 Makrofag

Makrofag merupakan sel fagosit yang hampir ditemui pada setiap organ

diseluruh tubuh, terutama pada jaringan ikat longgar. Makrofag termasuk

mononuklear fagosit system, makrofag merupakan suatu sistem yang dulu disebut

dengan Retikulo Endotelial System (RES), ini merupakan istilah bersama untuk sel-

sel yang sangat fagositik yang tersebar luas diseluruh tubuh terutama pada daerah

yang kaya akan pembuluh darah. 14

2.5.1 Perkembangan Makrofag

Makrofag terutama berasal dari sel precursor dari sum-sum tulang, dari

promonosit yang akan membelah menghasilkan monosit yang beredar dalam darah.

Pada tahap kedua monosit berimigrasi kedalam jaringan ikat tempat mereka menjadi

matang dan inilah yang disebut makrofag (makro=besar+phagen=makan). Di dalam

jaringan makrofag dapat berproliferasi secara lokal menghasilkan sel sejenis lebih

banyak. Pada penelitian yang terutama menggunakan sel berlabel radioaktif

mendapatkan bahwa kebanyakan bahkan mungkin semua, sel fagostik ini berasal dari

promonosit sel mononuclear yang berasal dari sum-sum tulang. Jadi nama yang

paling cocok untuk system ini adalah Sistem Fagosit. Pada penelitian yang terutama

menggunakan sel berlabel radio aktif, didapati bahwa kebanyakan bahkan mungkin

semua, sel fagostik ini berasal dari promonosi sel mononuklir yang berasal dari

sumsum tulang. Jadi nama yang paling cocok untuk system ini adalah Sistem Fagosit.

Pada penelitian yang terutama menggunakan sel berlabel ardio aktif,

didapati bahwa kebanyakan bahkan mungkin semua, sel fagositik ini berasal dari

promonosi sel mononuklir yang berasal dari sumsum tulang. Jadi nama yang paling

cocok untuk system ini adalah Sistem Fagosit Mononuklir atau lebih sederhana

system makrofag. Sel-sel system makrofag terdapat pada:

1. Jaringan ikat Inggar berupa macrofag atau histiosit

2. Didalam darah berupa monosit

3. Didalam hati melapisi sinusoid dikenal sebagai sel Kupffer


16

4. Makrofag perivaskuler sinusod limpa, limfonodus, dan sum-sum tulang.

5. Pada susunan syaraf pusat berupa mikroglia yang berasal dari

mesoderm.14

2.5.2 Bentuk dan Sifat Makrofag

Fagosit mononukleus memiliki ciri marfologis dengan spectum luas

berdasarkan keadaan aktifitas gungsional dan jaringan yang dihuni. Makrofag dapat

terfiksasi atu mengembara, makrofag ini mengembara bergerak dengan

mempergunakan gerakan amuboid, gerakan amuboid ini juga terjadi jika ada

rangsangan. Pada saat ini mereka mempunyai bentuk sangat tidak teratur, dengan

kaki palsu yang terjulur kesegala arah. Dengan mikroskop electron terlihat

permukaan makrofag tidak teratur, kaki palsu yang terjulur kesegala arah. Membran

plasma berlipat-lipat dan mengandung tonjolan dan lekukan Nukleus mengandung

kromotin padat, berbentuk bulat, lebih kecil, nucleoli tidak mencolok, sitoplasma

terpulas gelap dan sedikit mengandung vakuol kecil yang secara supra vital dengan

merah netral. Makrofag mempunyai lisozom primer yang mengeluarkan isinya

kedalam vakuol, sitoplasma terpulas terpulas gelap dan sedikit mengandung vakuol

kecil yang terpulas secara supra vital dengan merah netral. Makrofag mempunyai

lisozom primer yang mengeluarkan isinya kedalam vakuol yang mengandung bahan

yang telah difagositose sehingga menghasilkan lisosom sekunder atau disebut juga

fagozomdimana terjadi pencernaan bahan yang ditelan tersebut. 14

Fagositosis dan perluasan dibantu juga dengan permukaan yang

berlipatlipat. Umumnya mempunyai apparatus Golgi yang berkembang baik,

disamping lisosom dan sebuah retikulum endoplasma kasar yang jelas. Pada proses

transformasi monosit kemakrofag terdapat peningkatan sitesis protein dan ukuran sel,

juga terdapat peningkatan komplek Golgi, lisosom mikrotubul dan mikro filamen.

Makrofag terfiksasi pengembara merupakan fase-fase berbeda dari sel yang

sama dan satu fase dapat merubah dirinya sendiri menjadi fase lain. Karena

kesanggupan makrofag untuk bergerak dan memfagositer maka fungsi utama dari

makrofag adalah dalam pertahanan organisme tersebut. Makrofag menelan sisa-sisa


17

sel, zat inter sel berubah, mikro organisme dan partikel yang memasuki tubuh. Jika

makrofag menjumpai benda yang berukuran besar, makrofag-makrofag bersatu untuk

membentuk sel besar dengan 100 nukleus atau lebih yang disebut dengan sel raksasa

benda asing multi nuklir. Dalam keadaan sehat, makrofag merupakan fase akhir

dalam siklus hidup monosit, setelah meninggalkan sum-sum tulang monosit tinggal

selama 8 – 74 dalam dan melintasi dinding venula atau kapiler untuk menembus

jaringan penyambung, yang akhirnya menjadi makrofag.

Makrofag juga berperan pada reaksi imunologis tubuh, dengan menelan

memproses, dan menyimpan antigen dan menyampaikan informasi kepada sel-sel

berdekatan secara imunologis kompeten (limfosit dan sel plasma). Makrofag

mempunyai reseptor yang mengikat antibody dan makrofag bersenjata demikian

sanggup mencari dan menghancurkan antigen yang khas terhadap antibody itu.

Selama proses infeksi limfosit – T yang terangsang menghasilkan sejumlah limfokin

yang menarik makrofag ketempat yang membutuhkannya dan terus mengaktifkannya.

Makrofag berukuran 10 – 30 mm, bentuk tidak teratur, inti lonjong atau bentuk ginjal

letak exentrik, mengandung granula azurofilik, Makro. Makrofog merupakan sel yang

panjang umurnya dapat bertahan berbulan-bulan dalam jaringan.

Bila cukup dirangsang sel-sel ini dapat bertumbuh besar, membentuk sel

epiteloid (yn epi=diatas + thele = putting + eidos = seperti sel) atau beberapa melebur

menjadi sel datia (sel raksasa) multinukleus, jenis-jenis sel yang ditemukan dalam

keadaan patologis. Makrofag kadang-kadang mempunyai bentuk yang sangat tidak

teratur dengan kaki-kaki palsu yang terjulur keseluruh arah, membran plasma yang

melipat-lipat dan bertonjolan kecil-kecil. Keadaan permukaan demikian itu

membantu perluasan fagositosis dan gerakan sel.

Sajian jaringan dari hewan yang telah disuntik secara vital dengan karbon

koloid atau zat warna koloid seperti biru tripan menampakkan makrofag dengan

kumpulan zat warna tadi dalam vakuol-vakuol dalam sitoplasma.14


18

2.5.3 Fungsi makrofag

Fungsi makrofag adalah sebagai mekanisme pertahanan tubuh, reaksi

imunologik untuk menangkap serta menimbun antigen dan dapat memberi informasi

yang spesifik pada sel-sel yang bersangkutan dalam pembuatan antibodi, misalnya

limfosit dan sel plasma.15

Karena sifat fagositik atau gerakan amuboidnya mereka aktif dalam

pertahanan tubuh terhadap mikroorganisme, memiliki reseptor untuk immunoglobihin

pada membran selnya. Makrofag mempunyai fungsi antara lain:

1. Fungsi utama adalah melahap partikel dan mencernakannya oleh lisozom

dan mengalarkan sederetan substansi yang berperan dalam fungsi pertahanan dan

perbaikan.

2. Dalam system imun tubuh sel ini berperan serta dalam mempengaruhi

aktivitas dari respon imun, mereka menelan, memproses dan menyimpan antigen dan

menyampaikan informasi pada sel-sel berdekatan secara imunologis compoten

(limposit dan sel plasma)

3. Makrofag yang aktif juga merupakan sel sektori yang dapat

mengeluarkan beberapa substansi penting, termasuk enzim-enzim, lisozim, elastase,

kolagenase, dua protein dari sistim komplemen dan gen anti virus penting,

interveron.13

2.6 Penyembuhan luka

Luka adalah hilang atau rusaknya sebagian jaringan tubuh. Penyembuhan

luka adalah penggantian sel mati oleh sel hidup atau jaringan fibrosa dan terjadi

melalui regenerasi atau organisasi. Pada tahap ini, terjadi penggantian proliferasi sel

berjenis sama yang bertahan hidup dan hanya dapat terlihat pada jaringan yang

mampu melakukan aktivitas mitosis. Sewaktu penyembuhan berlangsung, fibroblas

mensintesis kolagen dan bahan dasar, dan selularitas dikurangi dengan proses

kehilangan bertahap sel radang, fibroblas, dan kapiler.16


19

2.6.1 Tahap penyembuhan luka

Pada saat sel dan jaringan sedang mengalami cedera, terjadi perusakan

sekaligus penyiapan sel yang bertahan hidup untuk melakukan replikasi.17

Menurut

Gillian dkk proses penyembuhan luka terjadi pada awal inflamasi, selanjutnya akan

bersamaan terjadi pada tahap berikutnya. Dalam proses inflamasi terjadi perusakan,

pelarutan dan penghancuran sel atau agen penyebab kerusakan sel. Pada saat yang

sama terjadi proses reparasi yaitu proses pembentukan kembali jaringan rusak atau

proses penyembuhan jaringan rusak. Selama proses reparasi berlangsung, jaringan

rusak diganti oleh regenerasi sel parenkimal asli dengan cara mengisi bagian yang

rusak dengan jaringan fibroblas (proses scarring) atau kombinasi keduanya.

Tahap penyembuhan luka secara berurutan: a) tahap inflamasi atau

keradangan, b) tahap proliferasi atau pembentukan jaringan granulasi, c) tahap

kontraksi luka, termasuk akumulasi kolagen dan remodeling.17

a. Tahap Inflamasi atau Keradangan

Fase inflamasi terjadi pada hari 0 – 5. Proses penyembuhan terjadi pada saat

terjadi luka. Luka karena pembedahan mengakibatkan kerusakan pada struktur

jaringan dan mengakibatkan perdarahan. Pada awalnya darah akan mengisi jaringan

yang cedera dan terpaparnya darah terhadap kolagen akan mengakibatkan terjadinya

degranulasi trombosit dan pengaktifan faktor Hageman. Hal ini kemudian akan

memicu system biologis lain seperti pengaktifan komplemen kinin, faktor pembekuan

dan pembentukan plasmin. Keadaan ini memperkuat sinyal dari daerah terluka, yang

tidak saja mengaktifkan pembentukan bekuan yang menyatukan tepi luka tetapi juga

akumulasi dari beberapa mitogen dan menarik zat kimia ke daerah luka.

Pembentukan kinin dan prostaglandin menyebabkan vasodilatasi dan peningkatan

permeabilitas dari pembuluh darah di daerah luka. Hal ini menyebabkan edema dan

kemudian menimbulkan pembengkakan dan nyeri pada awal terjadinya luka.

Polimorfonuklear (PMN) adalah sel pertama yang menuju ke tempat terjadinya luka.

Jumlahnya meningkat cepat dan mencapai puncaknya pada 24 – 48 jam. Fungsi


20

utamanya adalah memfagositosis bakteri yang masuk. Adanya sel ini menunjukkan

bahwa luka terkontaminasi bakteri. Bila tidak terjadi infeksi sel-sel PMN berumur

pendek dan jumlahnya menurun dengan cepat setelah hari ketiga.18

b. Tahap Proliferasi atau Pembentukan Jaringan Granulasi

Pada setiap kerusakan jaringan ringan, besar maupun kecil, akan diawali

pembentukan jaringan ikat yang kaya pembuluh darah yang mengisi rongga yang

ditinggalkan jaringan yang rusak dan disebut jaringan granulasi. Secara makroskopik

terlihat warna merah muda, lunak dan granuler. Dalam 3 sampai 5 hari dan berlanjut

hingga 2 minggu bergantung ukuran luka, muncul jenis jaringan khusus yang

mencirikan terjadinya penyembuhan,yang disebut jaringan granulasi. Secara

mikroskopis, jaringan ini ditandai dengan adanya proliferasi fibroblas.18

Fibroblas

muncul pertama kali secara bermakna pada hari ke 3 dan mencapai puncak pada hari

ke 7.19

Peningkatan jumlah fibroblas pada daerah luka merupakan kombinasi dari

proliferasi dan migrasi. Fibroblas ini berasal dari sel-sel mesenkimal lokal, terutama

yang berhubungan dengan lapisan adventisia, pertumbuhannya disebabkan oleh

sitokin yang diproduksi oleh makrofag dan limfosit. Fibroblas merupakan elemen

utama pada proses perbaikan untuk pembentukan protein struktural yang berperan

dalam pembentukan jaringan. Fibroblas juga memproduksi kolagen dalam jumlah

besar, kolagen ini berupa glikoprotein berantai tripel, unsur utama matriks luka

ekstraseluler yang berguna membentuk kekuatan pada jaringan parut. Kolagen

pertama kali dideteksi pada hari ke 3 setelah luka, meningkat sampai minggu ke 3.

Kolagen terus menumpuk sampai tiga bulan. Penumpukan kolagen pada saat awal

terjadi berlebihan kemudian fibril kolagen mengalami reorganisasi sehingga

terbentuk jaringan regular sepanjang luka. Proses proliferasi fibroblas dan aktifasi ini

dikenal dengan fibroplasia.19


21

c. Tahap Kontraksi luka (Akumulasi Kolagen dan Remodelling)

Perubahan dari jaringan granulasi menjadi jaringan parut melibatkan

perubahan dalam komposisi extra cellular matrix (ECM). ECM merupakan suatu

kompleks makromolekul yang mengalami remodeling secara dinamis dan konstan

yang disintesis secara lokal dan menyusun bagian penting pada setiap jaringan. ECM

menyediakan suatu sublapisan untuk perlekatan sel dan secara cermat mengatur

pertumbuhan, pergerakan, serta diferensiasi sel yang hidup di dalamnya.17

Setelah matriks ekstrasel terbentuk dimulailah reorganisasi. Pada mulanya

matriks ekstrasel kaya akan fibronektin. Hal ini tidak hanya menghasilkan migrasi sel

subtratum dan pertumbuhan sel ke dalam tetapi juga menyebabkan penumpukan

kolagen oleh fibroblas. Asam hialuronidase dan proteoglikan, keduanya dibentuk

oleh fibroblas dengan berat molekul besar berperan dalam pembentukan matriks

ekstraseluler dengan konsistensi seperti gel dan membantu infiltrasi seluler. Kolagen

berkembang cepat menjadi faktor utama pembentuk matriks. Fibroblas merupakan

penghasil utama kolagen.


22

Gel Jumlah

sel makrofag

Tikus Pasca

gingivektomi

2.6 Kerangka teori


23

2.7 Kerangka konsep

Tikus Wistar

Jantan (30 ekor)

Gingivektomi

Kontrol ( tanpa

perlakuan )

Perlakuan ( diberikan

gel ekstrak ikan

gabus)

Pengamatan

jumlah sel

makrofag

Analisis data


24

BAB 3

METODOLOGI PENELITIAN

3.1 Rancangan penelitian

Jenis penelitian ini adalah eksperimental laboratoris dengan desain Post Test

Control Group Design yaitu dengan melakukan pengukuran atau observasi sesudah

perlakuan diberikan. Penelitian ini menggunakan Rancangan Acak Lengkap (RAL).

Perlakuan yang digunakan mengacu kepada pengujian langsung gel ekstrak ikan

gabus (Channa Striata) pada konsentrasi 10%, 7,5%, 5%, 2,5% terhadap

penyembuhan luka pasca gingivektomi dan jumlah sel makrofag (jumlah tikus yang

di gingivektomi 30 ekor, 20 ekor diberikan gel ekstrak ikan gabus, 5 ekor sebagai

kontrol dan 5 ekor diberi oxyfresh).

3.2 Lokasi dan Waktu Penelitian

3.2.1 Lokasi Penelitian

Penelitian ini dilakukan di empat tempat yaitu :

1. Laboratorium Obat Tradisional Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara

sebagai tempat pembuatan gel ekstrak ikan gabus (Channa striata).

2. Laboratorium Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam

Universitas Sumatera Utara sebagai tempat pemeliharaan hewan coba.

3. Laboratorium Multipurpose Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Sumatera

Utara sebagai tempat melakukan gingivektomi gigi dan aplikasi gel ekstrak ikan

gabus (Channa striata).

4. Departemen Patologi Anatomi Fakultas Kedokteran Universitas Sumatera

Utara sebagai tempat pemeriksaan histologis sel dari hewan coba.


25

(t-1)(r-1)≥15

3.2.2 Waktu penelitian

Penelitian ini dilakukan pada bulan September 2017 sampai Maret 2018.

3.3 Populasi, Sampel dan Besar Sampel

3.3.1 Populasi Sampel

Populasi yang digunakan pada penelitian ini adalah tikus galur Wistar (Rattus

norvegicus). tikus sehat, berumur 6 sampai 7 bulan, Memiliki berat badan 150 – 200

gram,dan tidak mati pada saat penelitian.

3.3.2 Sampel Penelitian

Sampel yang digunakan dalam penelitian ini adalah gingiva regio anterior gigi

rahang bawah tikus galur Wistar.

3.3.3 Besar sampel

Penentuan besar sampel dilakukan berdasarkan rumus Federer :

( t-1) (r-1) ≥15

( 30-1) ( r-1) ≥15

29r - 29 ≥ 15

29r ≥ 44

r: 1,5

Keterangan :

t = jumlah kelompok perlakuan dalam penelitian

r = banyaknya sisi gingiva yang akan diteliti


26

3.4 Variabel Penelitian

3.4.1 Variabel bebas

Variabel bebas pada penelitian ini adalah gel ekstrak ikan gabus (channa

striata).

3.4.2 Variabel terikat

Variabel terikat pada penelitian ini adalah jumlah sel makrofag

3.4.3 Variabel terkendali

a. Berat badan tikus

b. Usia tikus

c. Jenis kelamin tikus

d. Makanan dan minuman tikus

e. Dosis gel ekstrak ikan gabus (Channa Striata )

f. Teknik pewarnaan

g. Cara perhitungan sel makrofag

3.4.4 Variabel tidak terkendali

Variabel tidak terkendali pada penelitian ini adalah kepekaan tikus terhadap

bahan anastesi.

3.5 Defenisi Operasional

No. Variabel

Penelitian

Definisi operasional Skala

Ukur

1. Gel ekstrak ikan

gabus (Channa

Striata )

Gel ekstrak ikan gabus (channa striata) adalah

ekstrak yang didapat dengan melakukan ekstraksi

ikan gabus (Channa striata) yang telah dihaluskan

dan dicampur dengan pelarut etanol 96% kemudian

diuapkan dengan evaporator sehingga diperoleh

ekstrak dan dikentalkan dengan larutan Carboxyl

Nominal


27

No. Variabel

Penelitian

Definisi operasional Skala

Ukur

methyl cellulose (CMC) sehingga didapatkan gel

ekstrak dengan konsentrasi 10%, 7,5%, 5%, 2,5%.

2. Jumlah sel makrofag

pasca gingivektomi

Sel makrofag gingiva adalah jumlah sel makrofag

gingiva tikus wistar jantan setelah perlukaan yang

diamati secara histologi menggunakan mikroskop

binokuler dengan pembesaran 1000x.

Perhitungan jumlah sel makrofag tikus Wistar

jantan menggunakan alat graticulae ocular yang

dipasang di dalam lensa pada mikroskop untuk

menghindari perhitungan sel makrofag tikus Wistar

jantan yang berulang.

Rasio

3.6 Alat dan Bahan

Alat dan bahan yang digunakan dalam penelitrian ini terbagi atas :

1. Alat dan bahan dalam pembuatan gel ekstrak ikan gabus (Channa Striata)

a) Alat:

1. Timbangan neraca analitik

2. Tampah

3. Botol maserasi

4. Botol kaca kecil

5. Blender

6. Vacum rotavapor

7. Waterbath

8. Lemari pengering

9. Gelas ukur

10. Corong

11. Jerigen

12. Sendok centong

13. Spatula

14. Gelas beker

15. Batang pengaduk

16. Lumpang


28

17. Alu

18. Pot plastik

19. Kertas label

20. Kertas perkamen

21. Kertas saring

b) Bahan:

1. Metil paraben

2. Propilen glikol

3. Air suling

4. Carboxyl methyl cellulose (CMC)

5. Ikan gabus

6. Etanol 96%

7. Aluminium foil

Gambar 6. A. Neraca Analitik, B. Lemari Pengering, C. Alat-alat

pembuatan gel ekstrak, D. Bahan-bahan pembuatan gel

ekstrak

A

D

B

C


29

2. Alat dan bahan dalam prosedur gingivektomi

a) Alat:

1. Kaca mulut

2. Pinset

3. Sonde

4. Spuit 3 cc

5. Scalpel

6. Pisau kirkland

7. Pisau orban

8. Gunting jaringan

9. Sarung tangan

10. Peniti

11. Bak bedah

12. Needle

13. Kapas

14. Pot plastik

15. Kuas pengoles

16. Kertas label

b) Bahan:

1. Formalin

2. Ketamin sebagai anastesi

3. Masker

4. Baju bedah

5. Nurse cap


30

Gambar 7. A. Alat- alat Pembedahan Gingivektomi, B. Alat Pembedahan

Gingivektomi, C. Obat bius

3. Alat dan bahan dalam prosedur histologi

a) Alat :

1. Mikrotom

2. Tissue embeding centre compressor cooled spot

3. Mikroskop binokuler

4. Hot plate

5. Waterbath

6. Mounting / penutup jaringan

7. Kaset

b) Bahan :

1. Bahan dekalsifikasi

2. Haematoksilin – Eosin sebagai pewarna jaringan

3. Xylol

4. Parafin

5. Alkohol

6. Larutan formalin buffer 10% sebagai bahan fiksas

A B

C


31

3.7 Prosedur penelitian

3.7.1 Pembuatan ekstrak ikan gabus (Channa Striata)

a. Pembuatan ekstrak

1. Daging ikan gabus diambil dengan cara dipisahkan dari tulangnya , lalu

simplisia ditimbang berat basahnya dan dicincang kasar. (Gambar 8.1 a)

2. Daging ikan gabus dikeringkan dengan menggunakan kertas perkamen.

(Gambar 8.1 b)

a b

Gambar 8.1 Prosedur pembuatan ekstrak, a. Pemisahan daging dari tulangnya,

b. Pengeringan di atas kertas perkamen.

3. Daging ikan gabus yang sudah kering ditimbang kembali dan dihaluskan

dengan blender. (Gambar 8.1 c)

4. Simplisia lalu dimasukkan kedalam botol kaca dan ditambahkan etanol

96% sebanyak 1,5 liter untuk perendaman. (Gambar 8.1 d)


32

c d

Gambar 8.1 Prosedur pembuatan ekstrak, c. Daging ikan gabus dihaluskan,

d. Daging ikan gabus direndam dengan etanol.

5. Simplisia disimpan dalam wadah tertutup dan didiamkan selama 24 jam

sambil sesekali diaduk dengan menggunakan centong. (Gambar 8.1 e)

6. Setelah itu simplisia yang sudah direndam disaring dengan menggunakan

kertas saring sedikit demi sedikit kemudian dimasukkan kedalam jerigen. untuk

memisahkan etanol dengan ekstrak. (Gambar 8.1 f)

e f

Gambar 8.1 Prosedur pembuatan ekstrak e. Simplisia di simpan di wadah. f.

simplisia disaring.


33

7. Hasil saringan tersebut kemudian dipekatkan dengan alat penguap vacum

rotavator pada suhu 54°C, lalu diuapkan dengan menggunakan waterbath hingga

diperoleh ekstrak kental. (Gambar 8.1 g dan h)

8. Kemudian ekstrak dimasukkan kedalam botol kaca dan disimpan di

dalam kulkas. (Gambar 8.1 i)

g h

Gambar 8.1 Prosedur pembuatan ekstrak. g. hasil saringan dipekatkan dengan alat

penguap vacum rotavator. h. diuapkan diatas waterbath.

i

Gambar 8.1 prosedur pembuatan ekstrak. i. ekstrak dimasukkan kedalam botol

kaca.


34

b. Pembuatan gel

1. Timbang bahan yang akan digunakan dengan mengunakan neraca

analitik. (Gambar 8.2 j)

2. Kembangkan CMC Na dengan air suling >80°C. (Gambar 8.2 k)

j k

gambar 8.2 prosedur pembuatan gel. j. timbang bahan menggunakan neraca

analitik. k. kembangkan CMC Na dengan air suling.

3. Larutkan ekstrak dalam propilen glikol, metil paraben, dan propilen

paraben lalu aduk hingga larut dalam pemanas air. (Gambar 8.2 l dan m)

4. Masukkan larutan ekstrak kedalam CMC Na yang sudah dikembangkan,

setelah itu aduk sampai berbentuk seperti gel dengan menggunakan lumpang dan alu.

kemudian masukan kedalam pot plastik. (Gambar 8.2 n)


35

l m

l m

n

gambar 8.2 prosedur pembuatan gel. l dan m. Larutkan bahan dan ektrak diatas

pemanas air. n.Gel dimasukkan kedalam pot plastik.

3.7.2 Prosedur gingivektomi

1. Tikus dianastesi dengan menggunakan ketamin dan didiamkan sampai

efek anastesi bekerja. (Gambar 8.3 o)

2. Dilakukan gingivektomi pada regio anterior mandibula tikus. Dengan

menggunakan pisau kirkland untuk mengambil gingiva daerah marginal, dan pisau

orban untuk mengambil daerah interdental. (Gambar 8.3 p)


36

o p

gambar 8.3 prosedur gingivektomi. o. tikus dianastesi. p. dilakukan gingivektomi pada

anterior mandibula tikus.

3. Pengaplikasian gel ekstrak ikan gabus pada bekas luka gingivektomi

yang dioleskan dengan kuas. (Gambar 8.3 q)

4. Dilakukan pengambilan mandibula tikus yang sudah diaplikasikan gel

ekstrak ikan gabus pada hari ke 1, hari ke 3, hari ke 5, dan hari ke 7. (gambar 8.3 r)

q

q r

Gambar 8.3 prosedur gingivektomi. q. pemberian gel ekstrak ikan gabus. r.

pengambilan jaringan mandibula tikus.


37

Jaringan dimasukkan ke dalam pot plastik yang berisi larutan formalin

buffer 10 %

s

Gambar 8.3 prosedur gingivektomi. s. Perendaman

jaringan dengan formalin

3.7.3 Prosedur pemeriksaan histologi

Jaringan yang sudah diambil pada tikus kemudian dibawa ke laboratorium

Patologi Anatomi. Pemeriksan histologis dilakuan dengan miskroskop untuk melihat

dan menghitung jumlah sel makrofag yang ada di daerah luka.

A B


38

C D

E F

G

Gambar 8.4 prosedur pemeriksaan histologi. A. Pencetakan sampel dengan pemberian

parafin cair pada sampel dalam wadah kaset. B. Sampel setelah parafin mengeras. C. Pemotongan

sampel menggunakan mikrotom. D. Preparata sampel yang sudah dipotong dimasukkan kedalam

waterbath. E. Preparat dipanaskan di dalam hot plate F. Alat perendam preparat ke dalam xylol. G.

Perndaman preparat ke dalam xylol untuk menghilangkan parafin.


39

Pembuatan Ethical Clearance

Pembuatan gel ekstrak ikan gabus (Channa Striata)

Prosedur bedah gingivektomi

Aplikasi dengan menggunakan gel ekstrak ikan gabus

(Channa Striata) dan oxyfresh.

Pemeriksaan klinis hari 1, hari 3,

hari 5, hari 7,hari 14

Pemeriksaan histologis hari 1, hari 3,

hari 5, hari 7,hari 14

Analisis data

3.8 Alur penelitian


40

3.9 Etika penelitian

Etika penelitian dalam penelitian ini mencakup:

1. Ethical Clearence

Akan diajukan surat untuk mendapatkan persetujuan dari komisi etik.

3.10 Pengolahan dan Analisis data

Data yang dikoreksi dianalisis dengan One Way Anova. Jika p ≤ 0,05 maka

dilanjutkan dengan Post Hoc Test – Tuckey.


41

BAB 4

HASIL PENELITIAN

Penelitian ini merupakan penelitian mengenai efektivitas gel ekstrak ikan

gabus terhadap jumlah sel makrofag pascagingivektomi pada tikus wistar jantan yang

telah dilakukan pada agustus 2017 – maret 2018 di Laboratorium Obat Tradisional

Fakultas Farmasi USU, Laboratorium Biologi Fakultas Matematika dan Ilmu

Pengetahuan Alam USU, Laboratorium Multipurpose Fakultas Kedokteran Gigi USU

dan Departemen Patologi Anatomi Fakultas Kedokteran USU.

Penelitian ini adalah penelitian eksperimental untuk menguji efektivitas gel

ekstrak ikan gabus terhadap jumlah sel makrofag pascagingivektomi pada tikus wistar

jantan. Subjek penelitian dibagi menjadi 6 kelompok dimana masing-masing

kelompok terdiri dari 4 sampel yang diberi perlakuan dimana ekstrak gel ikan gabus

di aplikasikan ke gingiva yang telah di gingivektomi masing masing dengan

konsentrasi 2,5 %, 5%, 7,5 % dan 10%. 2 kelompok lainnya adalah kelompok

kontrol dan kelompok yang diberikan pemberian gel anti inflamasi standar pabrik

(Oxyfresh®) pada subjek. Total subjek berjumlah 30 ekor tikus dibagi dan

diaplikasikan masing-masing perlakuan pada 6 ekor tikus. Subjek penelitian

diaplikasikan gel ekstrak ikan gabus sebanyak 2 kali pada pagi dan sore hari di hari 1

hari, 3 hari, 5 hari, 7 hari,dan 14 hari. Sesuai dengan hari yang ditentukan masing-

masing tikus dibunuh dan jaringan gingiva didaerah yang di gingivektomi diambil,

setelah perlakuan selesai dilakukan pemeriksaan histologis dan dihitung jumlah sel

makrofag oleh peneliti.


42

Pemeriksaan histologis yang dilakukan menunjukkan hasil sel makrofag

terlihat sel makrofag memiliki bentuk bulat seperti berbuih dengan warna merah

keunguan. (Gambar 4.1)

Gambar 4.1 Pemeriksaan histologis sel makrofag

(pembesaran mikroskop 100x)

Perhitungan jumlah sel makrofag pascagingivektomi pada tikus wistar setelah

pemberian gel ekstrak ikan gabus dapat dilihat pada Tabel 1.

Tabel 2. Perhitungan jumlah sel makrofag pascagingivektomi pada tikus wistar setelah pemberian gel ekstrak ikan gabus menggunakan Uji One Way Anova.

Perlakuan Hari ( ± SD) Rata-rata Sig

I III V VII XIV ± SD p

Kontrol 0,8 ± 0,45cd

0,8 ± 0,44cd

1 ± 0,71d

0,6 ± 0,55bcd

0,6 ± 0,55bcd

0,76* ± 0,54

0,000*

K 2,5 % 0 ± 0a

0 ± 0a

0 ± 0a

0 ± 0a

0 ± 0a

0 ± 0

K 5 % 0,4 ± 0,55abc

0,2 ± 0,45ab

0 ± 0a

0 ± 0a

0,2 ± 0,8ab

0,16 ± 0,29

K 7,5% 0 ± 0a

0 ± 0a

0,2 ± 0,48ab

0,2 ± 0,45ab

0 ± 0a

0,08 ± 0,18

K 10% 0 ± 0a

0,2 ± 0,45ab

0,2 ± 0,48ab

0 ± 0a

0,2 ± 0,48ab

0,12 ± 0,27

Oxyfresh 0 ± 0a

0,2 ± 0,48ab

0 ± 0a

0,2 ± 0,45ab

0 ± 0a

0,08 ± 0,18

*signifikan p<0,05, abcd uji Post Hocmenggunakan Uji One Way Anova


43

Tabel 1 diatas menunjukkan rata-rata jumlah sel makrofag dari kelompok

yang diberi gel ekstrak ikan gabus berbeda secara signifikan dengan kelompok

kontrol kecuali pada konsentrasi 5% ( kontrol 0,8 ± 0,45 ; k5% 0,4 ± 0,55 ) walaupun

jumlah makrofag lebih tinggi setiap konsentrasi.

Sedangkan pada hari ke 3 jumlah makrofag pada seluruh kelompok

konsentrasi yang diberi gel ekstrak ikan gabus memliki perbedaan signifikan dengan

kelompok kontrol walaupun pada kelompok kontrol rata-rata jumlah makrofag tetap

tinggi. Hal ini juga ditemukan pada hari ke 5 namun pada hari ke 7 tidak terdapat

perbedaan yang signifikan antara jumlah makrofag pada kelompok yang diberi gel

ekstrak ikan gabus dengan konsentrasi 7,5% dengan kelompok (kontrol 0,6 ± 0,55 ;

k7,5% 0,2 ± 0,45).

Sedangkan pada hari ke 14 tidak perbedaan yang signifikan antara jumlah

makrofag pada kelompok yang diberi gel ekstrak ikan gabus dengan konsentrasi 5%

dan 10% ( k5% 0,2 ± 0,8 ; k10% 0,2 ± 0,48 ). Hal ini berarti jumlah makrofag pada

hari ke 3 dan ke 5 di kelompok yang diberi gel ekstrak ikan gabus berbeda secara

signifikan dibanding kelompok kontrol.

Disisi lain rata-rata jumlah makrofag pada kelompok perlakuan dengan 4

konsentrasi tidak berbeda dengan gel standar (oxyfresh). Hal ini menunjukkan bahwa

gel ekstrak ikan gabus sama efektifnya dengan gel standar dalam penyembuhan luka.

Sedangkan rata-rata jumlah makrofag pada hari ke 1, 3, 5, 7, dan 14 tidak

berbeda secara signifikan dengan kelompok kontrol dan gel standar (oxyfresh). Hal

ini menunjukkan bahwa gel ekstrak ikan gabus efektif di setiap hari. Sedangkan rata-

rata jumlah makrofag untuk masing-masing konsentrasi tidak berbeda secara

signifikan (konsentrasi 2,5%, 5%,7,5% dan 10%). Hal ini menunjukkan bahwa gel

ekstrak sudah efektif pada konsentrasi terkecil yaitu 2,5%.


44

BAB 5

PEMBAHASAN

Penelitian ini merupakan penelitian mengenai efektivitas gel ekstrak ikan

gabus terhadap jumlah sel makrofag pascagingivektomi pada tikus wistar jantan.

Penelitian ini adalah penelitian eksperimental untuk menguji efektivitas gel ekstrak

ikan gabus terhadap jumlah sel makrofag pascagingivektomi pada tikus wistar jantan.

Ikan gabus dipilih karena ikan gabus merupakan salah satu ikan ekonomis

yang terdapat di indonesia yang mengandung protein dan albumin yang dapat

mempercepat penyembuhan luka operasi. Peran utama albumin adalah membantu

pembentukan sel baru. Penelitian yang dilakukan oleh Taslim (2009) menunjukkan

kadar albumin pasien dalam pengobatan meningkat tajam setelah beberapa kali

mengonsumsi ikan gabus sehingga mempercepat proses penyembuhan. Penelitian

serupa dilakukan Asikin (1999) yang memperlihatkan pemberian 2 kg ikan gabus

masak setiap hari kepada pasien pasca operasi dapat meningkatkan albumin dari

kadar yang rendah (1,8 gr/dl) menjadi normal. Ekstrak ikan gabus mengandung

albumin dengan kadar 2,17±0,14 g/100ml, lebih tinggi dibandingkan albumin dalam

susu (0,17 g/100ml), tetapi lebih rendah jika dibandingkan dengan albumin dalam

putih telur (7,74 g/100ml).8

Pemberian obat secara lokal lebih menguntungkan dibandingkan sistemik

karena efek sampingnya lebih kecil, sedikit kemungkinan untuk resisten terhadap

bakteri dan kesesuaian yang tepat. Sedian gel sangat baik digunakan karena

pemberian obat dapat dikontrol dan bahan medikamen terlindung dari lingkungan

yang tidak baik.9,10

Keberadaan sel makrofag berhubungan dalam proses penyembuhan luka.4

Makrofag adalah sel yang berperan penting dalam sistem imunitas tubuh melawan

patogen. Salah satu peran utama makrofag dalam sistem imunitas alami adalah fungsi

fagositosis, yang bertujuan untuk mengeliminasi partikel ekstraseluler, sel yang rusak

atau mati, dan juga bakteri patogen.5 Tingginya jumlah makrofag menunjukkan


45

adanya fagositosis lebih banyak terhadap bakteri sehingga pembersihan luka berjalan

lebih cepat.4

Penelitian ini dilakukan eksperimental laboratoris dengan beberapa tahap,

tahap pertama adalah pembuatan gel ektrak ikan gabus, kemudian dilakukan

pembedahan pada satu rahang tikus wistar jantan. Lalu dilakukan pengolesan gel

ekstrak ikan gabus pada bekas luka pada hari 1, 3, 5, 7 dan 14. Pemeriksan histologis

dilakukan dengan miskroskop untuk melihat dan menghitung jumlah sel makrofag

yang ada di daerah luka.

Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa tidak terdapat sel makrofag pada

konsentrasi 2,5% pada setiap hari pengolesan. Pada konsentrasi 5% tidak terdapat sel

makrofag pada pengolesan hari ke-5 dan 7. Pada konsentrasi 7,5% tidak terdapat sel

makrofag pada pengolesan hari 3 dan 14. Pada konsentrasi 10% tidak terdapat sel

makrofag pada pengolesan hari ke 1 dan 7. Pada oxyfresh tidak terdapat sel makrofag

pada pengolesan hari ke 14.

Kelompok kontrol menunjukkan makrofag yang lebih banyak dibandingkan

dengan kelompok perlakuan dalam proses penyembuhan luka operasi bedah

gingivektomi, hal ini diyakini karena kandungan albumin dan mineral yang tinggi

pada ekstrak ikan gabus. Peran keduanya sangat penting dalam regenerasi sel yang

sangat erat kaitannya dengan proses penyembuhan luka.

Pada uji One Way Anova didapatkan perbedaan yang signifikan dengan nilai

p=0,000 (p<0,05), sehingga dilanjutkan dengan uji Post Hoc untuk melihat perbedaan

antara tiap konsentrasi. Tabel 1 menunjukkan perbedaan yang nyata pada kelompok

kontrol dan kelompok yang diuji pada setiap konsentrasi. Hasil uji Post Hoc

menunjukkan bahwa semua konsentrasi, yaitu 2,5%, 5%, 7,5%, 10% memiliki

perbedaan yang signifikan terhadap kelompok kontrol.

Pada penelitian ini didapatkan konsentrasi gel ikan gabus terbaik adalah

konsentrasi 2,5%, dengan nilai 0 sel makrofag pada hari pertama dan berlanjut ke hari

3, 5, 7 dan 14. Hal tersebut dikarenakan kandungan ekstrak ikan gabus yang berperan

penting dalam penyembuhan luka yakni albumin dan mineral yang terkandung

didalamnya. Adapun fungsi dari albumin telah dipaparkan pada pembahasan


46

sebelumnya dimana albumin berperan dalam mempercepat proses inflamasi.

Sehingga proses perbaikan jaringan akan berlangsung lebih cepat. Menurut

pernyataan Aryulina bahwa “Inflamasi mempunyai tiga peran penting dalam

perlawanan terhadap infeksi: memungkinkan penambahan molekul dan sel efektor ke

lokasi infeksi untuk meningkatkan performa makrofag, menyediakan rintangan untuk

mencegah penyebaran infeksi, mencetuskan proses perbaikan untuk jaringan yang

rusak. Sehingga jika proses inflamasi berlangsung dengan cepat dan baik maka

kesembuhan luka juga akan berlangsung secara cepat. Fungsi lain dari albumin yakni

mengusung hormon tiroid yang berguna untuk menstimulasi pertumbuhan sel baru

guna perbaikan jaringan. Penjelasan serupa dikemukakan oleh Tjan dan Kirana yang

menjelaskan bahwa fungsi hormon tiroid yakni memacu proses metabolisme seluler

dan penting untuk pertumbuhan serta pematangan sel.

Adapun fungsi dari beberapa mineral yang terkandung dalam ekstrak ikan

gabus yang berperan dalam penyembuhan luka diantaranya Seng atau Zinc (Zn), dan

Magnesium (Mg). Zinc penting untuk pertumbuhan dan replikasi sel, kematangan

organ seks, fertilitas dan reproduksi, mencegah buta senja, imunitas, daya kecap dan

selera makan. Akibat paling hebat dari defisiensi Zinc adalah gangguan pertumbuhan.

Sedangkan fungsi magnesium di sel sekitar cairan mempengaruhi migrasi beberapa

jenis sel yang berbeda. Efek tersebut pada migrasi sel penting dalam penyembuhan

luka. Inilah alasan kenapa kesembuhan luka pada kelompok perlakuan memiliki

waktu yang relatif lebih cepat dibandingkan kelompok kontrol.

Fungsi pertama albumin adalah menjaga tekanan osmotik antara cairan di

dalam sel dengan cairan di luar sel pada fase inflamasi. Albumin menjaga keberadaan

air dalam plasma darah sehingga dapat mempertahankan volume darah dan menjaga

agar cairan dari luar sel tidak masuk ke dalam sel dan menyebabkan sel mengalami

pembengkakan. Fungsi kedua adalah albumin bermanfaat sebagai bahan dasar

dalam pembentukan jaringan tubuh yang baru melalui proses katabolik tubuh

yang memecah albumin menjadi asam amino untuk kemudian digunakan dalam

pembentukan jaringan baru. Albumin pada fase air ekstrak ikan gabus mengandung

asam-asam amino penyusun serat kolagen dalam jumlah yang banyak yaitu glisindan


47

prolin. Hal ini sangat mempengaruhi fibroblas untuk mensintesis kolagen sehingga

mempercepat proses pembentukan jaringan baru pada proliferasi dan maturasi.

Fungsi ketiga dari albumin adalah sebagai sarana pengangkut atau transportasi

nutrisi serta oksigen yang dibutuhkan tubuh untuk pembentukan jaringan baru

pada tahap proliferasi. Nutrisi lain yang terkandung pada fase air ekstrak ikan gabus

adalah vitamin larut air seperti vitamin C serta mineral-mineral. Mineral seng

berperan dalam memperkuat jaringan baru sementara vitamin C berperan dalam

pembentukan kolagen.20

Penyembuhan luka secara normal tampak sangat komplek, dengan melibatkan

sel radang dan faktor- faktor pertumbuhan yang saling mempengaruhi pada setiap

fase penyembuhan. Pembekuan darah yang terdiri dari fibronektin dan fibrin,

merupakan tahap awal yang sangat menentukan dalam proses penyembuhan luka

yang terjadi dalam hitungan menit hingga beberapa jam fase inflamasi akan

didominasi oleh neutrofil dalam waktu beberapa jam hingga beberapa hari untuk

mengeliminasi etiologi infeksi. Neutrofil kemudian digantikan oleh makrofag sebagai

bagian dari fase inflamasi akhir pada 48 – 72 jam setelah terjadi luka untuk

melanjutkan proses fagositosis. Proses diikuti fase proliferasi sel dan pembentukan

pembuluh darah baru yang dikenal dengan jaringan granulasi. Tahap selanjutnya

jaringan granulasi akan diremodeling dengan cara diganti oleh jaringan ikat yang

didominasi oleh fibroblas. Jaringan sekitar luka yang didominasi oleh sel-sel radang

seperti neutrofil dan makrofag dalam jangka waktu cukup lama penyebabkan

pembentukan jaringan ikat akan terhambat.21

Fase proliferasi dimulai pada hari ke-3 sesudah terjadinya jejas, ditandai

dengan terbentuk jaringan granulasi terdiri dari pembuluh darah baru (neovaskular),

fibroblas, dan makrofag. Selanjutnya pada fase pembentukan jaringan, epitelisasi dan

jaringan granulasi akan mengisi dan menutupi daerah luka guna memperbaiki

kepadatan dan kerapatan jaringan. Proses sintesis, remodelling, dan infiltrasi

struktural dari molekul matriks ekstraselular sangat ditentukan pada tahap awal dan

lanjut dari penyembuhan luka. Studi terbaru menunjukkan bahwa makrofag dapat

dijumpai pada beberapa tahap penyembuhan luka yang berbeda dan berpengaruh


48

secara bervariasi terhadap setiap tahap perbaikan. Makrofag berperan untuk

penyembuhan, namun dapat menyebabkan peradangan yang berlebihan atau fibrosis

dalam jumlah yang tidak terkontrol. Disfungsi makrofag atau jumlah makrofag yang

rendah dalam proses perbaikan jaringan menyebabkan penyembuhan luka tidak

optimal, terhambatnya proliferasi fibroblas dan angiogenesis.6

Makrofag merupakan unsur sel yang penting pada pembentukan jaringan

granulasi. Selain membersihkan debris ekstraseluler dan fibrin pada tempat jejas,

makrofag juga menginduksi proliferasi fibroblas dan produksi matriks ekstraseluler

pada hari ke-2. Penurunan jumlah makrofag pada hari ke-5 menunjukkan bahwa

proses inflamasi telah banyak berkurang, dan luka akan diisi oleh proliferasi

jaringan.6

Tindakan gingivektomi akan menyebabkan keradangan dan perdarahan di

sekitar daerah luka. Tubuh mempunyai kemampuan untuk merespon injuri dengan

membentuk sumbat platelet di daerah luka. Apabila terjadi gangguan pembekuan

darah, maka akan menyebabkan terlambatnya penyembuhan luka dan memungkinkan

terjadinya infeksi.6

Pada akhir tahap inflamasi menuju awal tahap proliferasi, makrofag aktif

melakukan proses fagositosis serta menghasilkan faktor pertumbuhan yaitu Platelet-

derived growth factor (PDGF) dan Transforming growth factor-beta (TGF-β).

Aktivitas Glykoprotein-Ib (GP-Ib) endotel berperan dalam perlekatan platelet ke

daerah luka, sehingga mengaktivasi platelet untuk segera melepaskan isi granula

berupa faktor pertumbuhan seperti Platelet-derived growth factor(PDGF-BB) dan

Transforming growth factor (TGF-β1). Platelet yang telah teraktivasi akan

menyebabkan platelet lain untuk beragregrasi dan segera memenuhi daerah luka

membentuk sumbat platelet primer dan bekuan darah yangstabil pada daerah luka.

Pembentukan bekuan darah pada daerah luka, akan segera diisi oleh sel mesenkim,

fibroblas, osteoblas dan kondroblas yang bermigrasi, kemudian berproliferasi dan

berdiferensiasi akibat pengaruh PDGF-BB. Sebagai kemotaktik kuat,PDGF-BB akan

menarik makrofag untuk fagositosis bahan asing atau mikroba pada saat terjadinya

luka.6


49

BAB 6

KESIMPULAN

6.1 Kesimpulan

1. Dari hasil penelitian ini, dapat disimpulkan bahwa gel ekstrak ikan gabus

dapat menurunkan jumlah sel makrofag.

2. Konsentrasi gel ikan gabus terbaik adalah konsentrasi 2,5%, dengan nilai

0 sel makrofag pada hari pertama dan berlanjut ke hari 3, 5, 7 dan 14.

6.2 Saran

1. Perlu dilakukan penelitian lanjutan terhadap ekstrak gel ikan gabus

terhadap konsentrasi < 2,5 untuk mengevaluasi keefektifan gel ekstrak ikan gabus

terhadap penyembuhan luka di rongga mulut.

2. Bau pada gel ekstrak gabus masih seperti bau khas ikan, untuk itu perlu

penelitian lanjutan mengenai bau atau aroma pada gel ekstrak ikan gabus.


50

DAFTAR PUSTAKA

1. Fitriyani E, Deviarni IM. Pemanfaatan ekstrak albumin kan gabus (channa

striata) sebagai bahan dasar cream penyembuhan luka. 2013; 9(3): 166-74.

2. Adriani I. Perawatan pembesaran gingiva dengan gingivektomi. Mutiara

Medika 2009; 9(1): 69-73.

3. Mustafa A, Widodo MA, Kristianto Y. Albumin and zinc content of

snakehead fish (channa striata) extract and its role in health. IJSTE 2012; 1(2):

1-8.

4. Sura GM, Carabelly AN, Apriasari ML. Aplikasi ekstrak haruan (Channa

striata) 100% pada luka punggung mencit (Mus musculus) terhadap jumlah

neutrofil dan makrofag. PDGI J 2013; 62 (2): 41-4.

5. Haniastuti T. Penurunan aktivitas fagositosis sel makrofag mencit setelah

distimulasi minyak atrisi kencur terhadap actinobacillus

actinomycetemcomitans. Dentika Dent J 2009; 14(1): 11-4.

6. Budi HS, Soesilowati P, Imanina Z. Gambaran histopatologi penyembuhkan

luka pencabutan gigi pada makrofag dan neovaskular dengan pemberian getah

batang pisang ambon. Maj KedokGi Ind 2017: 3(3). 124-126.

7. Kusmini II, Gustiano R, Prakoso VA, Ath-thar MHF. Budidaya ikan gabus.

Jakarta: Swadaya 2016: 7-16.

8. Ardianto D. Buku pintar budi daya ikan gabus. Cet 1. Yogyakarta:

FlashBooks 2015: 16.

9. Fracon RN, Teofilo JM, Satin RB, Lamano T. Prostaglandins and bone:

potential risks and benefits related to the use of nonsteroidal antiinflammatory

drugs in clinical dentistry. Journal of Oral Science 2008; 50(3): 247-52.

10. Kunche HB, Ahmed MG, Rompicharla NC. Development and evaluation of

in situ gels of moxifloxacin for the treatment of periodontitis. Indonesian J

Pharm 2012; 23(3): 141-6.


51

11. Sirois, M. Laboratory Animal Medicine : Principles and Procedures. United

States of America 2005: Mosby, Inc.

12. Daliemunthe SH. Terapi periodontal. Medan: FKG USU 2006: 216-21.

13. Carranza FA, Hogan EL. Clinical periodontology. 11th ed. Philadelphia: WB

Saunders Co. 2012; 84-96,547.

14. Newman, et al. Caranza: clinical periodontology 9th edition. Philadelpia:

W.B. Saundres 2002.

15. Efendi Z. Daya fagositosis makrofag pada jaringan longgar tubuh. USU

digital library 2003: 1-4.

16. Herniyati, Sutjiat, Harmono, Arina, dan Hikmah. Diktat histologi. (Tidak

dipublikasikan). Jember: Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Jember 2008.

17. Lawler, et al. Buku pintar patologi untuk kedokteran gigi. Alih bahasa drg.

Agus Djaja. EGC: Jakarta 2002.

18. Robbins, et al. Buku ajar patologi Robbins Ed.7, Vol.1. Alih bahasa oleh

Awal Prasetyo dkk. EGC: Jakarta 2007.

19. Putri SS. Potensi perasan daun pepaya (carica papaya L.) terhadap jumlah sel

fibroblas pasca gigi pada tikus wistar jantan. FKG: Universitas Jember 2002.

20. Ike SM Redjeki. Pengelolaan nyeri pascabedah. 1st National Congress

Indonesian Pain Society, 2001. 58 – 62.

21. Andrie M, Sihombing D. Efektivitas Sediaan Salep yang Mengandung

Ekstrak Ikan Gabus (Channa striata) pada Proses Penyembuhan Luka Akut

Stadium II Terbuka pada Tikus Jantan Galur Wistar. Pharm Sci Res 2017:

4(2). 97.


LAMPIRAN 1

ANGGARAN BIAYA PENELITIAN

1. Peralatan Penelitian

No Peralatan Kuantitas Harga Satuan (Rp) Jumlah Harga (Rp)

1 Kaca Mulut 1 unit Rp 20.000,- Rp 20.000,-

2 Sonde 1 unit Rp 20.000,- Rp 300.000,-

3 Pinset 1 unit Rp 20.000,- Rp 20.000,-

4 Pisau Kirkland 1 unit Rp 300.000,- Rp 300.000,-

5 Pisau Orban 1 unit Rp 300.000,- Rp 300.000,-

6 Scalpel 1 unit Rp 35.000,- Rp 35.000,-

7 Bahan anastetikum 1 kotak Rp 100.000,- Rp 100.000,-

Sub Total Rp 1.075.000,-

2. Bahan Penelitian

No Peralatan Kuantitas Harga Satuan (Rp) Jumlah Harga (Rp)

1 Sarung tangan

disposable

1 kotak Rp 56.000,- Rp 56.000,-

2 Masker 1 kotak Rp 24.000,- Rp 24.000,-

3 Kapas (Swallow

Brand)

1 gulung Rp 30.000,- Rp 30.000,-

4 Povidon Iodine 1 botol Rp 20.000,- Rp 20.000,-

5 Ikan Gabus 5 kg Rp 50.000,- Rp 250.000,-

6 Etanol 96% 2 liter Rp 25.000,- Rp 25. 000,-

7 Akuades 1 liter Rp 20.000,- Rp 20.000,-

8 Carboxyl methyl

cellulose (CMC)

1 botol Rp 100.000,- Rp 100.000,-

9 Larutan pospat

buffer salin

1 botol Rp 100.000,- Rp 100.000,-

10 Kassa steril 4 kotak Rp 20.000,- Rp 80.000

11 Biaya penelitian

pembuatan gel

ekstrak ikan gabus

Rp 500.000,-

12 Biaya penelitian

tikus di

Laboratorium

Farmasi

Rp 1.000.000,-

13 Biaya pemeriksaan

histologis jaringan

di Laboratorium

Patologi Anatomi

7 Rp 700.000,-

Sub Total Rp 2.905.000,-

3. Administrasi dan lain-lain


No Peralatan Kuantitas Harga Satuan

(Rp)

Jumlah Harga (Rp)

1 Administrasi

Ethical

Clearance

- - Rp 100.000,-

2 Penjilidan

proposal

8 set Rp 20.000 Rp 160.000,-

3 Penjilidan

skripsi

8 set Rp 50.000 Rp 400.000,-

4 Alat tulis 1 kotak Rp 12.000,- Rp 12.000,-

Sub Total Rp 672.000,-

4. Total Dana yang Dibutuhkan

No Keterangan Jumlah (Rp)

1 Peralatan Penelitian Rp 1.075.000,-

2 Bahan Penelitian Rp 2.905.000,-

3 Administrasi dan lain-lain Rp 672.000,-

4 Biaya Tak Terduga (10%) Rp 465.200,-

Total Rp 5.117.200,-

Total biaya penelitian : Rp 5.117.200,-

Terbilang : Lima Juta Seratus Tujuh Belas Ribu Dua Ratus Rupiah


LAMPIRAN 2

BIODATA PENELITI

A. Identitas Diri

Nama Amalia khoiri silalahi

NIM 130600063

Pekerjaan Mahasiswa

Tempat/tanggal lahir Bandar pulau 21 Agustus 1995

Alamat Jl. Perjuangan komp cellini no b8 Setia budi

No. Hp 081262072885

B. Riwayat Pendidikan

Tingkat

Pendidikan

SD SMP SMA Universitas

Nama Sekolah SD Miss Bazzis SMP Negeri 1

Bandar Pulau

SMA Shafiyyatul

Amaliyyah Medan

Universitas Sumatera

Utara

Tahun Masuk 2001 2007 2010 2013

Tahun Lulus 2007 2010 2013 -


Lampiran 3

JADWAL KEGIATAN SKRIPSI

No

Kegiatan

WAKTU PENELITIAN

JANUARI –JUNI 2017

SEPTEMBER 2017-MARET

2018

APRIL -NOVEMBER

2018

DESEMBER 2018

1 Pembuatan

Proposal

2 Pelaksanaan

Penelitian

3 Pembuatan

laporanhasil

penelitian

4 Penggandaan

Laporan


efek gel ekstrak ikan gabus (channa striata)

Documents