draf laporan pl minarti

8/17/2019 Draf Laporan PL Minarti

1/24

i

PRAKATA

Segala Puji dan Syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT atas berkah

dan rahmat-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan laporan yang berjudul

“Analisis Fumonisin dalam Bahan Pakan Secara !"SA # Enzyme Linked

Immusorbed Assay$%& !aporan ini merupakan laporan hasil praktik lapangan yang

dilaksanakan pada '( )uni-*+ Agustus ',*' di Balai Besar Penelitian eteriner.

Bogor &

Penulis mengucapkan terima kasih atas dukungan dan doa dari berbagai

pihak dalam pelaksanaan praktik lapang dan penyusunan laporan ini& /capan

terima kasih penulis haturkan terutama pada "bu Sri 0ulijani selaku pembimbing

utama dan "bu 1omsyah 0aryam selaku pembimbing lapangan. atas segala ilmudan bimbingan yang telah diberikan& Penulis juga mengucapkan terima kasih

kepada "bu 1aphaella Widiastuti selaku 2etua 2elti Toksikologi. Bapak 3asim

0una4ar. "bu rmayati. "bu 5uningsih. seluruh sta6 dan teknisi kelti Toksikologi.

2ak Putu. 2ak 1e7a. 0ida. Ahmad. de4i. dan 8andi&

/capan terima kasih juga penulis sampaikan kepada kedua orang tua. adik.

dan keluarga atas dukungan dan doanya. serta teman-teman seperjuangan di

2imia +(. khususnya 0i6thami 1amah. Ajeng 0a4angi. dan Fahrul 2amal atas

keceriaan. semangat. dan kerjasamanya&

Semoga laporan ini dapat berman6aat bagi pembaca&

Bogor. September ',*'

0inarti Sa9diah


2/24

ii

DAFTAR ISI

P1A2ATA&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&i

8AFTA1 "S"&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&ii

8AFTA1 TAB!&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&& iii

8AFTA1 :A0BA1&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&iii

8AFTA1 !A0P"1AN&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&iii

PN8A3/!/AN&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&*

!atar Belakang&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&*

Tujuan&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&;

Waktu dan !okasi&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&;

:A0BA1AN /0/0 BA!A" BSA1 PN!"T"AN T1"N1&&&&&&&&&&&&&&&&&&+

Sejarah&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&+

isi dan 0isi&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&+

Struktur

!okasi dan Fasilitas !aboratorium&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&>

0T


3/24

iii

DAFTAR TABEL

Tabel * 2isaran dan rerata konsentrasi 6umonisin dalam sampel pakan...........12

Tabel ' Pengukuran standar 6umonisin pada pemeriksaan pertama.................17Tabel ; 2andungan 6umonisin dalam sampel pada periksaan pertama.............17

Tabel + Pengukuran standar 6umonisin pada pemeriksaan kedua...................18

Tabel = 2andungan 6umonisin dalam sampel pada pemeriksaan kedua...........18

Tabel ( Pengukuran standar 6umonisin pada pemeriksaan ketiga...................19

Tabel > 2andungan 6umonisin dalam sampel pada pemeriksaan ketiga...........19

DAFTAR GAMBAR

:ambar * Struktur 6umonisin B*. B'. dan B; ...........................................2

:ambar ' Bagan struktur organisasi [email protected]

:ambar ; 2ur@a standar 6umonisin pada pemeriksaan pertama....................10

:ambar + 2ur@a standar 6umonisin pemeriksaan kedua............................. 10

:ambar = 2ur@a standar 6umonisin pada pemeriksaan ketiga......................11

:ambar ( Alat !"SA reader ...............................................................21

:ambar > 1eaksi 4arna setelah penambahan substrat T0B.........................21

:ambar ? 1eaksi 4arna setelah penambahan larutan penghenti....................21

DAFTAR LAMPIRAN

!ampiran * Pemeriksaan pertama sampel pakan asal NTT&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&*(

!ampiran ' Pemeriksaan kedua sampel pakan asal !ampung&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&*>

!ampiran ; Pemeriksaan ketiga sampel pakan )a4a Barat. !ampung. dan NTT *?

!ampiran + ontoh Perhitungan&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&*C

!ampiran = Alat !"SA reader dan pengamatan 4arna&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&',


4/24

1

PENDAHULUAN

Latar Belakang

2elompok peneliti #kelti$ Toksikologi dan 0ikologi memiliki tugas

melaksanakan kegiatan penelitian penyakit he4an yang disebabkan oleh bahan-

bahan toksik #racun$ yang berupa bahan kimia. bahan toksik alami. tanaman

beracun. dan 6ungi patogenik Salah satu bahan toksik alami yang dapat

menyebabkan keracunan adalah mikotoksin yang dihasilkan oleh 6ungi

patogenikDtoksigenik seperti Aspergillus spp&. andida. Fusarium spp&. dan

khamir& Penyakit yang ditimbulkan akibat keracunan mikotoksin disebut

mikotoksikosis&

Salah satu mikotoksin yang dapat menyebabkan penyakit ternak adalah

6umonisin& Fumonisin merupakan mikotoksin yang dihasilkan oleh Fusarium spp&terutama F. moliniforme , F. proliferatum, dan F. nygamai& Fumonisin juga

dihasilkan oleh F. anthophilum, F. dlamini. dan F. napiforme& Fumonisin sering

mengontaminasi komoditas pertanian terutama jagung dan serealia seperti

gandum dan sorgum. namun tidak menutup kemungkinan 6umonisin juga dapat

dijumpai pada bahan pakan ternak lainnya& Fumonisin bersi6at neprotoksik pada

babi. tikus. domba. dan kelinci& Pada tikus dan kelinci. toksisitas pada ginjal

terjadi pada dosis yang lebih rendah dari pada toksisitas pada hati& Fumonisin juga

menyebabkan equine leukoenchephalomalacia dan pulmonary oedema syndrome

pada babi #W3< ',,,$&

)enis 6umonisin yang paling sering dilaporkan mencemari bahan pangan

adalah 6umonisin B* #FB*$& Pada kondisi optimum. F. verticillioides dan F.nygamai isolat "ndonesia dapat menghasilkan toksin FB* masing-masing sebesar

*=+;.*= mgDkg dan ?>'.,; mgDkg #0aryam et al. ',,>$& Fumonsin B" #FB"$

merupakan diester dari propana-*.'.;-asam trikarboksilat dan '-amino-*'.*(-

dimetil-;.=.*,.*+.*=-pentahidroksieikosana yang mempunyai rumus empiris

;+3=C N'* gDmol& Selain FB*. jenis

6umonisin yang dapat mengontaminasi pangan dan pakan adalah FB' dan FB;

yang memiliki kandungan oksigen yang lebih sedikit dari FB* dan kelimpahannya

lebih rendah #5u E hu *CCC$& Food and rugs Administration #F8A$ telah

menetapkan ambang batas 6umonisin total yang diperbolehkan ada pada makanan

dan pakan yaitu sebesar '-+ gDg untuk manusia #Park et al & ',,'$ dan =-*,, gDg

untuk he4an #Tangendjaja et al. ',,?$&Analisis yang umum digunakan untuk mengetahui kandungan 6umonisin

adalah metode kromatogra6i seperti thin layer chromatography #T!$. liquid

chromatography #!$ dan liquid chromatography!mass specttrometer #!-0S$.

gas chromatography-mass specttrometer #:-0S$. dan high performance liquid

chromatography #3P!$ #W3< ',,,$& 0etode kromatogra6i memiliki

kekurangan antara lain memerlukan biaya yang mahal dan 4aktu analisis yang

relati6 lama& 0etode ini juga membutuhkan instrumen yang akurat dan personil

yang terlatih& /ntuk itu. dikembangkan metode analisis yang relati6 singkat.

murah. dan lebih mudah pengerjaannya yaitu Enzyme Linked Immunosorbent

Assay #!"SA$&


5/24

2

:ambar * Struktur 6umonisin B*. B'. dan B; #Sa@ard et al. ',,;$

Teknik !"SA melibatkan reaksi spesi6ik antara antigen dan antibodi. yang

tertempel pada 6ase padat #Walsh ',,'$& Antibodi yang telah diimobilisasi akan

berikatan dengan antigen dan konjugat melalui sisi epitop dan paratop& /mumnya

untuk teknik imunoasay. interaksi pengikatan yang terjadi antara antibodi dan

antigen adalah interaksi pengikatan primer& Pada interaksi pengikatan primer ini

antigen hanya memiliki satu sisi pengikatan #0ikkelsen E orton ',,+$& Teknik

!"SA yang digunakan pada analisis 6umonisin dalam laporan ini adalah teknik

!"SA kompetisi& Teknik ini relati6 sederhana dibandingkan dengan teknik !"SA

lainnya karena hanya satu jenis antibodi yang digunakan sehingga kegagalan uji

akibat kemungkinan terjadinya reaksi silang dengan antibodi lain dapat

diminimalisasi& 8alam teknik ini. standar 6umonisin dan sampel pakan bertindak

sebagai antigen. berkompetisi dengan konjugat FB*-31P untuk bereaksi dengan

antibodi yang telah dicoating pada micro"ellplate& Semakin besar konsentrasi

antigen. semakin sedikit konjugat yang akan berikatan dengan antibodi& 2onjugat

akan bereaksi dengan substrat T0B menghasilkan 4arna biru& "ntensitas 4arna

yang dihasilkan semakin tinggi dengan naiknya konsentrasi konjugat dan

turunnya konsentrasi antigen& Penambahan larutan penghenti akan menghasilkan

4arna kuning yang kemudian diukur optical densitynya dengan !"SA reader pada +=, nm&

Tujuan

Praktik lapangan ini bertujuan mengetahui konsentrasi Fumonisin dalam

sampel bahan pakan ternak dengan metode !"SA kompetisi langsung&

Waktu dan Loka!

Praktik !apangan dilaksanakan di !aboratorium Toksikologi dan

0ikologi. Balai Besar Penelitian eteriner di )alan 1 0artadinata No&;,. Bogor&

Praktik !apangan terhitung mulai '( )uni G *+ Agustus ',*'&


6/24

3

KEADAAN UMUM BALAI BESAR PENELITIAN "ETERINER

Sejara#

Balai Besar Penelitian eteriner. disingkat Bbalit@et. adalah /nit PelaksanaTeknis yang berada didalam lingkup Badan Penelitian dan Pengembangan

Pertanian #Badan !itbang Pertanian$ 8epartemen Pertanian. dana secara langsung

berkoordinasi dengan Pusat Penelitian dan Pengembangan Peternakan #Puslitbang

Peternakan$& Bbalit@et merupakan lembaga penelitian untuk bidang @eteriner

tertua di "ndonesia& Perjalanan sejarah Balai dikelompokkan menjadi + 6ase utama

yaitu #*$ 0asa 2olonialisme #*C,?-*C+=$H #'$ 0asa 2emerdekaan #*C+=-*C(C$H

#;$ 0asa Pembangunan Nasional #*C>,-*CC>$H dan #+$ 0asa 1e6ormasi #*CC?-

sekarang$&

Balai Besar Penelitian eteriner didirikan pada tahun *C,? pada saat

pemerintahan kolonial Belanda dengan nama #eeartseni$kundig Laboratorium

#!$. pada tahun dan tempat yang sama di )alan imanggu 2ecil. dibuka sebuahsekolah dan pelatihan bagi calon dokter he4an dengan nama #eeartseni$kundig

%chool & Sekolah ini merupakan cikal bakal Fakultas 2edokteran 3e4an "nstitut

Pertanian Bogor& 2edua lembaga ini dipimpin secara rangkap oleh Pro6& 8r& !& de

Blieck antara tahun *C,?-*C*=&

Sampai tahun *C'>. Balai hanya memiliki empat bagian yang dikelola oleh

tiga orang dokter he4an dan seorang ahli ilmu he4an #7oolog$& Pada tahun *C'>

Balai melakukan pemekaran dengan menambah satu bagian baru untuk

penyelidikan penyakit unggas& 2emudian Balai mengalami pergantian nama

menjadi #eeartseni$kundig Instituut #"$& Pada tahun *C'?. Balai dan Sekolah

8okter 3e4an diputuskan untuk dipisah karena tidak sesuai lagi dengan

perkembangan ilmu pengetahuan dan tugas Balai& Akhirnya. pada bulan )uni

*C'?. Sekolah 8okter 3e4an dipindahkan ke gedung baru di )alan Taman

2encana. Bogor sebagai cikal bakal Fakultas 2edokteran 3e4an "nstitut

Pertanian Bogor. yang sekarang berada di 8ramaga. Bogor&

Sejak masa pendudukan )epang hingga saat ini. Balai telah mengalami tujuh

kali pergantian nama& 8imulai dengan Balai Penyidikan Penyakit 3e4an #BPP3$

pada tahun *C+' menjadi !embaga Penyakit 3e4an #!P3$ pada tahun *C=, yang

disusul dengan !embaga Pusat Penyakit 3e4an #!PP3$& Balai berada diba4ah

naungan 8irektorat )enderal Peternakan sampai tahun *C>+ dan mempertahankan

namanya sebagai !PP3& 8engan berdirinya Badan Penelitian dan Pengembangan

Pertanian pada tahun *C>+. Balai dipindah-alihkan kedalam jajaran Badan !itbangPertanian dan telah mengalami tiga kali pergantian nama yaitu Balai Penelitian

Penyakit 3e4an #Bakit4an$ pada tahun *C?,. Balai Penelitian eteriner #Balit@et$

pada tahun *C?+ dan Balai Besar Penelitian eteriner #Bbalit@et$ pada tahun ',,(&

Bbalit@et saat ini beralamat di )!& 1 0artadinata No& ;,. Bogor

&

"!! dan M!!

isi yang ditetapkan oleh Bbalit@et bersi6at 6uturistik sesuai dengan

dinamika perubahan lingkungan strategis dan harus mampu menjadi akselerator

kegiatan penelitian dan pengembangan @eteriner& isi tersebut adalah “0enjadi

institusi penelitian @eteriner bertara6 internasional dalam menghasilkan ilmu


7/24

4

pengetahuan dan teknologi @eteriner dengan meman6aatkan sumber daya lokal

untuk mendukung kesehatan he4an dan kesehatan masyarakat @eteriner dalam

rangka me4ujudkan pertanian industrial berkelanjutan%&

/ntuk me4ujudkan @isi tersebut. maka Bbalit@et menjalankan misi sebagai

berikut*& 0elaksanakan eksplorasi. karakterisasi. konser@asi dan peman6aatan sumber

daya plasma nut6ah @eteriner yang potensial untuk pengembangan "PT2

@eteriner&

'& 0enghasilkan ilmu pengetahuan dan ino@asi teknologi @eteriner #@aksin. obat.

teknik diagnosa$ yang sesuai dengan dinamika kebutuhan pengguna untuk

me4ujudkan pertanian industrial unggul berkelanjutan&

;& 0endiseminasi ino@asi teknologi di bidang peternakan dan kesehatan he4an&

+& 0elaksanakan layanan diagnostik @eterinet untuk kesehatan he4an. kesehatan

masyarakat @eteriner dan keamanan pangan asal ternak secara prima sesuai

standar nasional dan internasional sebagai laboratorium rujukan&

=& 0eningkatkan jejaring kerjasama penelitian dan pengembangan iptek @eteriner dengan lembaga penelitian. instansi terkait serta pengguna baik nasional

maupun internasional&

(& 0eningkatkan publikasi ilmiah dalam jurnal nasional dan internasional dalam

rangka diseminasi hasil penelitian dan umpan balik teknologi @eteriner dari

pengguna&

>& 0eningkatkan kualitas. kapasitas dan kapabilitas sumber daya penelitian untuk

menghasilkan ilmu pengetahuan dan teknologi mengikuti acuan nasional dan

internasional&

?& 0eningkatkan kemampuan manajerial penelitian secara pro6essional sebagai

lembaga penelitian bertara6 internasional&

Struktur $rgan!a! Bala! Bear Penel!t!an "eter!ner

Bbalit@et memiliki struktur utama sebagai organisasi 6ungsional.

disamping organisasi struktural untuk melaksanakan kegiatan administrasinya&

Struktur organisasi Bbalit@et terdiri atas Bagian Tata /saha. Bidang Program dan

@aluasi. serta Bidang 2erjasama dan Pendayagunaan Penelitian&


8/24

5

:ambar ' Bagan struktur organisasi Bbalit@et

2elti merupakan 4adah peneliti dan teknisi melaksanakan penelitian sesuai

dengan bidang keahlian masing-masing& 2elti memiliki tugas utama yaitu

pembinaan pro6esionalisme yang berkaitan dengan bidang dan latar belakangmasing-masing 2elti& 2elompok jabatan 6ungsional peneliti mempunyai tugas

antara lain

*& 0elakukan penelitian eksplorasi. konser@asi. karakterisasi. dan meman6aatkan

sumber daya plasma nut6ah mikroba @eteriner&

'& 0elakukan penelitian @irologi. bakteriologi. parasitologi. mikologi.

toksikologi. parasitologi. patologi. epidemiologi. 6armakologi. dan teknik

penyehatan he4an&

;& 0elakukan penelitian penyakit 7oonolisis dan penelitian keamanan pangan

produk peternakan&

+& 0elakukan penelitian dan pengembangan komponen teknologi @eteriner&

=& 0elakukan penelitian dan pelayanan diagnostik @eteriner sebagai rujukan penyakit he4an&

(& 0elakukan kegiatan 6ungsional lainnya sesuai dengan peraturan perundang-

undangan yang berlaku&

Peneliti dan teknisi dikelompokkan menjadi lima 2elti. yaitu 2elti irologi. 2elti

Bakteriologi. 2elti Parasitologi. 2elti Patologi. dan 2elti Toksikologi dan

0ikologi&

2elti Toksikologi memiliki '; karya4an yang terdiri atas *' orang peneliti.

? orang teknisi. dan ' orang tenaga penunjang& 2elti Toksikologi melakukan tugas

pokoknya yang berkaitan dengan kegiatan penelitian penyakit he4an yang

disebabkan oleh bahan-bahan toksik. baik berupa bahan kimia maupun bahan

toksik alami. dan tanaman beracun& Sejak unit mikologi bergabung. tugas pokok


9/24

6

2elti bertambah dengan pengujian penyakit yang disebabkan oleh 6ungi patogenik

seperti Aspergillus spp&. andida. Fusarium spp&. dan kamir& 2elti Toksikologi

juga melayani pemeriksaan diagnostik disamping menjalankan tigas pokok

penelitian. antara lain

*& Pengujian emaran dan residu mikotoksin #a6latoksin. okratoksin. 7earalenon.deoksin@anol. T-' toksin. 6umonisin$ 3P!. T!&

'& Pengujian residu antibiotika #tetrasiklin. kloram6enikol. penisilin$ dan residu

hormon pertumbuhan #trenbolon$&

;& Pengujian residu dan cemaran pestisida #organoklorin. organo6os6at$

+& Pengujian residu dan cemaran dan kandungan logam atau mineral #u. Pb.In.

d. 0g dan a$&

=& Pengujian bahan toksik #nitrat. nitrit. ammonia. histamin. sianida.

oksalat. sul6at. klorin$ kualitati6 dan semi kuantitati6&

Su%&er Da'a Manu!a

Pega4ai di Bbalit@et sebagian besar adalah pega4ai negeri sipil #PNS$dengan jenjang pendidikan yang berbeda-beda mulai dari S8 sampai S;& Berbagai

jenis pendidikan 6ormal terutama di bidang teknologi pangan. kimia analisis.

konstruksi. kimia murni. biologi. statistik. 6armasi. ekonomi. peternakan dan

teknologi in6ormasi&

Loka! dan Fa!l!ta La&orator!u%

!okasi Bbalit@et berada di )alan 1 0artadinata No&;, Bogor. seluruh

bagian administrasi. laboratorium penelitian dan pengujian terdapat di lokasi ini&

Fasilitas yang dimiliki oleh Bbalit@et adalah sebagai berikut

*& !aboratorium #C laboratorium$ @irologi. bakteriologi. parasitologi. patologi.

toksikologi. mikologi. bioteknologi. laboratorium 7oonosis #BS!-;$. dan BS!-; moduler&

'& /nit Pelayanan #' unit$ /nit Pelayanan 8iagnostik dan /nit &balitvet 'ulture

'ollection (&'').

;& /nit Breeding 3e4an !aboratorium

+& 2andang he4an percobaan untuk ruminansia kecil. besar dan unggas

=& 2ebun rumput 2iarala4ang dan imanglid

(& Perpustakaan koleksi buku. jurnal dan 8-1& Bengkel

?& 2antor administrasi

C& "nternet Local Area *et"ork dan +ebsite

!aboratorium Toksikologi dilengkapi dengan instrumen untuk analisis

cemaran kimia antara lain Atomic Absorption %pectrophotometer #AAS$. 3P!.

as 'hromatography #:$. %pectrophotometer -#!#isible, !-0S , dan !"SA

reader &


10/24

7

MET$DE

Alat dan Ba#an

Alat-alat yang digunakan adalah grinder . neraca analitik. tabung sentri6us

plastik. gelas ukur '= m!. shaker . sentri6us. corong. tabung plastik. tabung

e@endor6. pipet tetes. plate pencampur. plate berlabel antibodi. multichannel pipet.

4adah plastik. gelas piala. dan !"SA reader &

Bahan-bahan yang digunakan adalah sampel pakanDbahan pakan dari

pro@insi !ampung. )a4a Barat. dan Nusa Tenggara Timur. metanol air #>,;,$.

Na&? m! 3'S'&' m!

akuades&

Anal!! Fu%on!!n (ada Sa%(el

)* Ektrak! Sa%(el

Sampel pakan yang telah digiling halus ditimbang sebanyak = gram dan

dimasukkan ke dalam tabung sentri6us plastik& Sampel tersebut ditambahkan

metanol air #>, ;,. @D@$ sebanyak ', m! kemudian di shaker selama ; menit&


11/24

8

Setelah itu campuran tersebut disentri6us selama = menit dengan kecepatan

;,,, rpm& Filtrat yang telah terpisah disaring menggunakan kertas saring

berabu& Filtrat ditetapkan p3nya sekitar >-? menggunakan Na


12/24

9

HASIL DAN PEMBAHASAN

Sampel pakan yang dianalisis berasal dari NTT. !ampung. dan )a4a Barat&2eseluruhan sampel yang dianalisis berjumlah ?= sampel. terdiri atas ;? sampel

NTT. ', sampel )a4a Barat. dan '> sampel !ampung& Analisis 6umonisin pada

sampel dibagi dalam ; kali pemeriksaan& )enis sampel yang dianalisis dapat

dilihat pada Tabel '. Tabel +. dan Tabel (& Bobot sampel yang dtimbang untuk

analisis disesuaikan dengan karakteristik sampel& Sampel seperti bonggol jagung

yang dapat menyerap air ditimbang lebih sedikit #* gram$ dibandingkan dengan

sampel yang tidak menyerap air seperti jagung #= gram$& 3al ini dimaksudkan

agar ekstraksi lebih sempurna& Sampel pakan diekstraksi dengan metanol >,J

karena bila dilihat dari struktur dan si6atnya #:ambar *$. 6umonisin memiliki

kepolaran yang tinggi sehingga dapat larut dalam pelarut polar seperti metanol

>,J&

Pemeriksaan kadar 6umonisin dalam sampel pakan menggunakan

AgraLuant Total Fumonisin Test 2it& Plate berlapis antibodi pada dasarnya dapat

dibuat dengan menempelkan antibodi monoklonal maupun poliklonal

menggunakan coating buffer yang berisi natrium karbonatDbikarbonat& Antibodi

tersebut diperoleh melalui penyuntikan antigen pada he4an target& Antigen yang

disuntikan berupa hapten. yaitu senya4a dengan bobot molekul #B0$ rendah

yang dapat memunculkan respon imun bila berikatan dengan senya4a dengan B0

tinggi seperti protein #0ikkelsen E orton ',,+$& Salah satu hapten adalah FB*

yang dapat ber6ungsi sebagai antigen jika dikonjugasikan dengan protein antara

lain o@albumian #


13/24

10

:ambar ; 2ur@a standar 6umonisin pada pemeriksaan pertama

Sampel pakan yang dianalisis pada pemeriksaan kedua adalah sampel pakan

yang berasal dari !ampung& Pengukuran


14/24

11

:ambar = 2ur@a standar 6umonisin pada pemeriksaan ketiga

3asil analisis menunjukan bah4a kandungan 6umonisin dalam semua

sampel berada di ba4ah nilai ambang batas yang diperbolehkan oleh F8A #R*,,

gDg$& 2andungan 6umonisin dalam sampel berkisar mulai dari ,&,((-=;&;C? µgDgsampel& 2andungan 6umonisin tertinggi terdapat pada sampel pakan kulit jagung&

3asil analisis menunjukan terdapat >= sampel yang mengandung 6umonisin

,&,,*-*;&+CC µgDg. ( sampel yang mengandung 6umonisin *;&=,,-'(&CCC µgDg. 'sampel yang mengandung 6umonisin '>&,,,-+,&+CC µgDg. dan ' sampelmengandung 6umonisin +,&=,,-=;&CCC µgDg& 2isaran dan rerata konsentrasi

6umonisin dalam sampel pakan yang sejenis dapat dilihat pada Tabel *&

Tabel * 2isaran dan rerata konsentrasi 6umonisin dalam sampel pakan

Sampel2isaran konsentrasi

6umonisin #gDg$

1erata konsentrasi

#gDg$

)agung utuh ,&;+* - *(&+,? >&;C'

)agung pecah ,&(C( - =&=*; '&?>(

)agung giling *&=>+ - **&+=> =&C;,

jagung halus *=&,;+ *=&,;+

jagung putih utuh *&C>+ - ;&**; '&=+=

)agung pecah putih ,&C?, - *&*+C *&,(=

)agung giling putih ,&?'+ ,&?'+

)agung pecah K kacang

ijo *&;(* - C&C(* =&((;

2ulit 2opi ,&*?C - ;&'+> *&>*?

Bonggol jagung ?&?(( - ++&;++ '=&((=

)erami ,&;*, - +&,*? *&C*?

Putek *&+;? - ;&+(+ '&',>

8edak ,&*+; - =&;>+ *&=('

:abah ,&,?' - ,&'=* ,&*?;

2onsentrat ,&*;, - +&;=? *&(=C


15/24

12

Pakan Babi ;&C(' - *;&,=, **&+>=

Pakan ayam *&;*' - (&=>+ ;&+;,

Pakan sapi '&,,, - *,&+,* (&',,

&((? >&((?

8aun jagung '&C=, '&C=,

2ulit jagung =;&;C? =;&;C?

2ulit cokelat '&>*? '&>*?

2ulit ari jagung ;(&'*, ;(&'*,

Bungkil kelapa ,&**+ ,&**+

Bungkil kedelai ,&,?, ,&,?,

Bungkil sa4it ,&,(( ,&,((

Butiran pink ,&,>' ,&,>'

Beras merah *'&*(+ *'&*(+

Bila dilihat dari asal sampel. sampel pakan asal NTT dengan kandungan

6umonisin tertinggi adalah bonggol jagung #*>N$ sebesar ++&;++ gDg. sedangkan

sampel dengan kandungan 6umonisin terendah adalah dedak #**N$ sebesar ,&'(>

gDg& Sampel pakan asal !ampung dengan kandungan 6umonisin tertinggi adalah

kulit jagung #=!$ sebesar =;&;C? gDg. sedangkan yang terendah adalah bungkil

kedelai #(,!$ sebesar ,&,?, gDg& 2andungan 6umonisin sampel asal )a4a Barat

yang tertinggi terdapat pada pakan babi #*=B$ sebesar ';&,=, gDg sampel dan

yang terendah adalah gabah #?B$ sebesar ,&,?' gDg sampel&

Berdasarkan hasil analisis. terlihat bah4a 6umonisin terdeteksi pada sampel

dari )a4a Barat. !ampung. dan NTT& Salah satu cara yang dapat dilakukan untuk mengurangi kontaminasi 6umonisin pada pakan terutama jagung adalah

melakukan proses pengeringan setelah pemanenan& Pakan harus dijaga kadar

airnya agar tetap rendah& 2adar air yang aman untuk pakan berbasis jagung yaitu

maksimal *+J #Tangendjaja et al. ',,?$& 2adar air yang tinggi dapat

meningkatkan pertumbuhan kapang Fusarium sp. penghasil 6umonisin&


16/24

13

SIMPULAN DAN SARAN

S!%(ulan

Analisis Fumonisin dalam pakan ternak secara !"SA hanya memerlukan

4aktu analisis yang relati6 singkat dan pengerjaannya yang relati6 mudahdibandingkan dengan teknik 3P!& 3asil analisis menunjukkan bah4a ssemua

sampel mempunyai kandungan 6umonisin di ba4ah ambang batas yang

diperbolehkan F8A #R*,, gDg$& 2andungan 6umonisin yang tertinggi terdapat

pada sampel pakan kulit jagung&

Saran

Pengerjaan harus dilakukan lebih hati-hati khususnya teknik memipet

karena !"SA merupakan teknik yang sensiti6& Perbedaan @olume yang kecil saja

dapat memberikan hasil pengamatan yang sangat berbeda&


17/24

14

DAFTAR PUSTAKA

0aryam 1. erarytha. 8juariah S. Sulastri !& ',,>& Produksi 6umonisin oleh

Fusarium verticillioides dan Fusarium nygamai pada medium jagung& /. 0ikol. 1ed. Indon. 2 (3!4)5 6!7&

0ikkelsen S1. orton & ',,+& &ionalytical 'hemistry& Ne4 )ersey #/S$ )ohn

Wiley E Sons&

Park )W. 2im 2. Shon 83. 2im 5B& ',,'& Natural co-occurrence o6 a6atoMin

B*. 6umonisin B* and ochratoMin A in barley and corn 6oods 6rom

2orea& Food Additives and 'ontaminant 38 (33)5 3926!3979&

Sa@ard 0. Sinha 1. !au 1. Seg9uin . Bu66am S& ',,;& 0onoclonal antibodies

6or 6umonisins B*. B' and B;& Food and Agricultural Immunology 3:

(4)5 342!36;.

Tangendjaja B. 1achma4ati S. Wina & ',,?& 0ycotoMin contamination on corn

used by 6eed mills in "ndonesia& Indonesian /ournal of Agricultural

%cience 8 (4)5


18/24

15

LAMPIRAN


19/24

16

La%(!ran ) Pe%er!kaan (erta%a5 a%(el (akan aal NTT

Tabel ' Pengukuran standar 6umonisin pada pemeriksaan pertama

No

2onsentrasi

standar

#gDm!$

+ ,&?C=

+ +N )agung utuh ,&';, *&>;C ;+&>>' (&C=+

= =N jagung putih utuh ,&;+? ,&>>? *=&=(+ ;&**;

( (N

jagung

putih utuh ,&+;C ,&+C+ C&?>, *&C>+

> >N

)agung

pecah putih ,&('C ,&'+= +&C,, ,&C?,

? ?N

)agung

putih utuh ,&;?= ,&(;> *'&>+? '&==,

C CN

)agung

giling putih ,&(?? ,&',( +&*', ,&?'+

*, *,N

)agung

giling ,&';? *&('( ;'&='( (&=,=

** **N 8edak *&''> ,&,(> *&;;+ ,&'(>

*' *'N 8edak ,&((> ,&'*C +&;>, ,&?>+

*; *;N )agung utuh ,&C=, ,&**, '&*C+ ,&+;C

*+ *+N )agung utuh ,&*>' ;&,(' (*&'+, *'&'+?

*= *=N jerami ,&(C> ,&',* +&,*? +&,*?

*( *(N )erami *&*?= ,&,>* *&+'( *&+'(

*> *>N

Bonggol

jagung ,&',; '&'*> ++&;++ ++&;++

*? *?N

Bonggol

jagung ,&'?, *&*?C ';&>?( ';&>?(

*C *CN

Bonggol

jagung ,&+(= ,&++; ?&?(( ?&?((


20/24

17

', ',N 2onsentrat ,&C,, ,&*'' '&++, ,&+??

'* '*N 8edak ,&>,( ,&*C( ;&C*? ,&>?+

'' ''N

Pakan babi

campur ,&;,> ,&CC* *C&?*' ;&C('

'; ';N )erami *&*;( ,&,>? *&==, ,&;*,

2eterangan Bobot sampel yang ditimbang sebesar * gram

La%(!ran 2 Pe%er!kaan kedua5 a%(el (akan aal La%(ung

Tabel + Pengukuran standar 6umonisin pada pemeriksaan kedua

Tabel = 2andungan 6umonisin dalam sampel pada pemeriksaan kedua

No2ode

sampel)enis sampel

, =;&;C? =;&;C?

= >! 8edak *&>'? ,&*>( ;&=', ,&>,+

( ?! 2ulit cokelat '&,*( ,&*;( '&>*? '&>*?

> *>! )agung ,&+;; *&>C; ;=&?=+ >&*>*

? *?! 8edak *&;+; ,&'(C =&;>+ =&;>+

C ;'! jagung halus ,&'>C ;&>=? >=&*(? *=&,;+

*, ;;! jagung giling ,&;'? '&?(+ =>&'?+ **&+=>

** ;=!

2ulit ari

jagung ,&+;* *&?** ;(&'*, ;(&'*,

*' ;(!

Pakan

campur ,&>,> ,&>?? *=&>=( *=&>=(

*; ;?! 8edak *&=+, ,&'*+ +&'>' +&'>'

*+ ;C! 2onsentrat *&='* ,&'*? +&;=? +&;=?

*= +,! )agung pecah ,&=,> *&;>? '>&=(+ =&=*;

No2onsentrasistandar

#ppm$

CJ -,&*>=; -,&(,'*

; * ,&=>* '(&,?J -,&=?;( ,&,,,,

+ '&= ,&;+C *=&C+J -,&>C>+ ,&;C>C

= = ,&'+( **&'+J -,&C+C; ,&(CC,


21/24

18

*( +'! 8edak *&C?> ,&*;C '&>?( '&>?(

*> +=! )agung utuh ,&(,' *&,;; ',&((, +&*;'

2eterangan Bobot sampel yang ditimbang sebesar * gram

La%(!ran 3 Pe%er!kaan ket!ga5 a%(el (akan 6a7a Barat8 La%(ung8 dan

NTT

Tabel ( Pengukuran standar 6umonisin pada pemeriksaan ketiga

No2onsentrasi

standar #ppm$

-,&(,'*

; * *&'>> +?&+(J -,&;*+( ,&,,,,

+ '&= *&*,? +'&,=J -,&;>(' ,&;C>C

= = ,&C>C ;>&*=J -,&+;,, ,&(CC,

Tabel > 2andungan 6umonisin dalam sampel pada pemeriksaan ketiga

No

2ode

sampel )enis sampel

+ *&+?( ,&'C>

= =B )agung utuh *&'+' *&;,, '=&CC' =&*C?

( (B Pakan ayam *&=;> ,&;CC >&C>+ *&=C=

> >B

)agung pecah

K kacang ijo *&=?* ,&;+, (&?,( *&;(*

? ?B :abah '&('' ,&,'* ,&+*' ,&,?'

C CB

Pakan

pedaging *&=C' ,&;'? (&=(, *&;*'

*, *,B )agung utuh *&'*+ *&+>= 'C&+C+ =&?CC

** **B

Pakan petelur

starter *&'?? *&,(, '*&',, +&'+,

*' *'B Pakan babi *&*(= *&?=+ ;>&,>, >&+*+

*; *=B Pakan babi ,&C+C =&>(' **=&'+? ';&,=,

*+ *>B Beras merah *&,(= ;&,+* (,&?*? *'&*(+

*= *(B )agung utuh *&(+* ,&'>> =&=;( *&*,>

*( *?B

)agung pecah

K kacang ijo *&;?= ,&>,C *+&*>( '&?;=


22/24

19

*> *CB 8edak '&''C ,&,=* *&,*+ ,&',;

*? ',B :abah '&=;( ,&,'= ,&+C( ,&,CC

*C '+B :abah '&*+= ,&,(; *&'=( ,&'=*

', '(B )agung utuh *&?>' ,&*;+ '&(>' ,&=;+

'* =,! 2onsentrat '&+*> ,&,;' ,&(+? ,&*;,

'' ='! 8edak '&',; ,&,=+ *&,?' ,&'*(

'; =(! )agung *&,,C +&*,' ?'&,+, *(&+,?

'+ =>! 2ulit kopi '&'=> ,&,+> ,&C+( ,&*?C

'= =?! 8edak '&;>+ ,&,;( ,&>*+ ,&*+;

'( =C!

Bungkil

kelapa '&+>= ,&,'? ,&=(? ,&**+

'> (,!

Bungkil

kedelai '&(;+ ,&,', ,&+,' ,&,?,

'? ('! Bungkil sa4it '&>;* ,&,*( ,&;'? ,&,((

'C ((! Butiran pink '&(?> ,&,*? ,&;(, ,&,>';, >,! Pakan campur *&,C( '&(,, ='&,,+ *,&+,*

;* '+N )agung pecah *&+'' ,&(*+ *'&'>' '&+=+

;' '=N )agung utuh *&*C* *&(;( ;'&>'' (&=++

;; '(N )agung giling *&=+, ,&;C+ >&?>' *&=>+

;+ '>N )agung utuh *&(+; ,&'>= =&=,? *&*,'

;= '?N

)agung putih

pecah *&(;, ,&'?> =&>+( *&*+C

;( 'CN )agung utuh *&?(; ,&*;> '&>+, ,&=+?

;> ;*N Pakan ayam *&*C, *&(++ ;'&?>' (&=>+

;? ;'N )agung giling *&+;> ,&=>C **&=>? '&;*(;C ;;N )agung pecah *&'(* *&*C= ';&?C( +&>>C

+, ;+N )agung giling *&*=+ *&C+C ;?&C>? >&>C(

+* ;=N )agung utuh '&,;, ,&,?= *&>,( ,&;+*

+' ;(N )agung pecah *&>?= ,&*>+ ;&+>? ,&(C(

+; ;?N )agung utuh *&,;? ;&=*( >,&;*' *+&,('

++ ;CN Putek cacag *&=*( ,&+'C ?&=?? *&>*?

+= +,N )agung utuh ,&??' ?&(>+ *>;&+>' ;+&(C+

2eterangan

2ode sampel B Q sampel pakan )a4a Barat

! Q sampel pakan !ampung

N Q sampel pakan NTT

La%(!ran 9 :onto# Per#!tungan


23/24

20

Sampel Pakan NTT

'

gDm! M *,,,D=, Q *&+;? gDm!#dalam * gram sampel$

2onsentrasi 6umonisin dalam * gram sampel pakan

Q *&+;? gD * gram sampel

Q *&+;? gDgram sampel

La%(!ran ; Alat ELISA reader dan (enga%atan 7arna


24/24

21

:ambar ( Alat !"SA reader

:ambar > 1eaksi 4arna setelah penambahan substrat T0B

:ambar ? 1eaksi 4arna setelah penambahan larutan penghenti

draf laporan pl minarti

Documents